CN111233733A - 一种胆红素的制备方法及其产品 - Google Patents
一种胆红素的制备方法及其产品 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111233733A CN111233733A CN202010190833.4A CN202010190833A CN111233733A CN 111233733 A CN111233733 A CN 111233733A CN 202010190833 A CN202010190833 A CN 202010190833A CN 111233733 A CN111233733 A CN 111233733A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- acid
- bilirubin
- value
- bile
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 title claims abstract description 164
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 86
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 claims abstract description 47
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 37
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 29
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 23
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims abstract description 21
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 20
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 16
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000012716 precipitator Substances 0.000 claims abstract description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 30
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 claims description 20
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 244000144972 livestock Species 0.000 claims description 10
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 10
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 9
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 claims description 9
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims description 9
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 9
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 claims description 8
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 159000000009 barium salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 claims description 7
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 6
- UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N thiourea Chemical compound NC(N)=S UMGDCJDMYOKAJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 5
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 claims description 5
- WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L barium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ba+2] WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 229910001626 barium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 4
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 claims description 4
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Natural products NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 3
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 claims description 3
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 2
- 229940001607 sodium bisulfite Drugs 0.000 claims description 2
- 229940001482 sodium sulfite Drugs 0.000 claims description 2
- 229940001474 sodium thiosulfate Drugs 0.000 claims description 2
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 7
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 abstract description 7
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 4
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 32
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 25
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 16
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 9
- 229960001701 chloroform Drugs 0.000 description 9
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 9
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 8
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 6
- 206010004542 Bezoar Diseases 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 5
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- GWZYPXHJIZCRAJ-UHFFFAOYSA-N Biliverdin Natural products CC1=C(C=C)C(=C/C2=NC(=Cc3[nH]c(C=C/4NC(=O)C(=C4C)C=C)c(C)c3CCC(=O)O)C(=C2C)CCC(=O)O)NC1=O GWZYPXHJIZCRAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RCNSAJSGRJSBKK-NSQVQWHSSA-N Biliverdin IX Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(\C=C/2C(=C(C)C(=C/C=3C(=C(C=C)C(=O)N=3)C)/N\2)CCC(O)=O)N1 RCNSAJSGRJSBKK-NSQVQWHSSA-N 0.000 description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QBUVFDKTZJNUPP-UHFFFAOYSA-N biliverdin-IXalpha Natural products N1C(=O)C(C)=C(C=C)C1=CC1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(C=C2C(=C(C)C(C=C3C(=C(C=C)C(=O)N3)C)=N2)CCC(O)=O)N1 QBUVFDKTZJNUPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 4
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 description 4
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 3
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 2
- 238000007670 refining Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000272522 Anas Species 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- -1 bilirubin calcium salt Chemical class 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D207/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及一种胆红素的制备方法及其产品，所述制备方法包括如下步骤：(1)以畜禽动物胆汁为原料，将其与抗氧化剂混合；(2)用碱性溶液调节溶液的pH值，进行水解反应；(3)将所得溶液与沉淀剂混合，进行反应；(4)用酸性溶液调节所得溶液的pH值，静置沉淀，得到所述胆红素。该制备方法整个加工过程简单，操作方便，产品质量稳定，生产周期短，出品率高，产品含量高，使制备所用的原料得以扩充，本发明避开了有毒有害有机溶剂的使用，有利于保护环境和人体健康，为胆红素的规模化生产提供了一种新的制备方法。
Description
技术领域
本发明属于生化制药技术领域，具体涉及一种胆红素的制备方法及其产品。
背景技术
胆红素是血红蛋白分解代谢后的还原产物，是一个直链的四吡咯化合物，属于二烯胆素类。胆红素是天然牛黄的主要成分，而许多中成药都含有牛黄，这充分说明了胆红素具有极高的药用价值。胆红素作为重要的医药原料用于制备人工牛黄，而人工牛黄是中国独创的生化药物，是天然牛黄的代用品。因此，胆红素作为一种重天然药物原料，其应用价值充分得到体现，其投资价值日益凸显，未来市场前景广阔。
CN110437121A公开了一种提高胆红素收得率的方法，包括以下几个步骤：(1)胆色素钙盐的提取：取新鲜猪胆汁，加石灰乳充分搅拌均匀加热得胆色素钙盐；(2)一次酸化：将胆色素钙盐加半倍水搅成糊状，酸化、沉淀过滤；(3)二次酸化：取沉淀物加乙醇及亚硫酸氢钠，再加稀盐酸静置沉淀，取沉淀物用绸布滤干，所得为胆红素粗品；(4)精制：加入氯仿，分三次回流提取；蒸馏回流氯仿至胆红素结晶析出，除尽溶液内的氯仿；将胆红素抽滤，滤去乙醇，用少量微热的95％乙醇和蒸馏水各洗一次，再以少量无水乙醇、丙酮、乙醚分次洗涤，真空干燥，得胆红素精品。
CN101429152B公开了一种从牛胆汁中提取胆红素的方法，它包括牛胆汁中胆绿素的还原、胆钙盐的形成、胆红素的提取和精制三个步骤。该发明的改进点是增加了一个胆绿素的还原步骤，它可以将牛胆汁中本身含有的胆绿素和在收集或保存过程中氧化的胆绿素还原成胆红素，从而增加胆汁中胆红素的含量，这是提高收率的重要步骤。同时，该发明在胆钙盐形成步骤中加入呈中性的氯化钙或硫酸钙作为胆钙盐形成剂，它在分解而形成钙离子时，不会改变料液的pH值，从而使料液中的胆钙盐形成完全，提高了收率。
现有技术中，胆红素的制备工艺所涉及的原料种类比较受限，主要利用牛胆汁或猪胆汁；制备方法主要包括氯仿直接提取法和胆红素钙盐间接提取法两种。其中氯仿直接提取法，具有生产周期短，产品含量高的优点，但存在生产成本高，出品率低，因为使用有毒有害有机溶剂，因此具有污染环境、危害人体健康的缺点。其中胆红素钙盐间接提取法，具有生产中不使用有毒有害有机溶剂，无环境污染的优点，但存在生产周期长，人员劳动强度大，出品率较低，产品含量低的缺点。
因此，开发出一种适用范围广、无需使用有毒有害有机溶剂，安全环保，生产周期短，且制得的产品出品率高，含量高的胆红素的制备方法是非常有意义的。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种胆红素的制备方法及其产品，该制备方法不使用有毒有害有机溶剂，安全环保，生产周期短，且制得的产品出品率高，含量高。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，本发明提供一种胆红素的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：
(1)以畜禽动物胆汁为原料，将其与抗氧化剂混合；
(2)用碱性溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值，进行水解反应；
(3)将步骤(2)所得溶液与沉淀剂混合，进行反应；
(4)用酸性溶液调节步骤(3)所得溶液的pH值，静置沉淀，得到所述胆红素。
本发明所涉及的胆红素的制备方法整个加工过程简单，操作方便，产品质量稳定，生产周期短，出品率高，产品含量高，使制备所用的原料得以扩充，不仅适用于常见的猪胆汁、牛胆汁，而且还适用于羊胆汁、鸡胆汁或鸭胆汁，解决了资源受限问题；本发明利用沉淀法，避开了有毒有害有机溶剂的使用，有利于保护环境和人体健康，为胆红素的规模化生产提供了一种新的制备方法。
优选地，步骤(1)所述畜禽动物包括猪、牛、羊、鸡或鸭，优选猪。
优选地，所述抗氧化剂包括亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸或硫脲中的任意一种或至少两种的组合；所述至少两种的组合例如亚硫酸氢钠和焦亚硫酸钠的组合、亚硫酸钠和硫代硫酸钠的组合、抗坏血酸和硫脲的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述抗氧化剂的添加质量为畜禽动物胆汁质量的0.1％-0.8％，例如0.1％、0.2％、0.25％、0.3％、0.4％、0.45％、0.5％、0.6％、0.65％、0.7％或0.8％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述，优选0.2％-0.5％，更优选0.25％。
在本发明中，抗氧化剂的添加量是影响制备工艺的重要因素，添加量过高或过低都会使产品出品率或含量显著降低，其中0.1％-0.8％的质量占比是一个较合适的范围，0.2％-0.5％是更优选的范围。
优选地，步骤(2)所述碱性溶液包括氢氧化钠溶液。
优选地，步骤(2)所述pH值调节至9.0-11.0，例如pH＝9.0、pH＝9.5、pH＝10.0、pH＝10.5或pH＝11.0等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述，优选9.5。
所述pH值的调节终点特定选择为9.0-11.0，因为pH更低会使水解反应过慢，拉长生产周期，pH更高则会影响胆红素的稳定性，使最终的产品出品率或含量降低。
优选地，步骤(2)所述调节溶液pH值时的温度为40-45℃，例如40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
所述调节溶液pH值时的温度特定选择为40-45℃，若温度更低，碱性溶液的溶质易析出，若温度更高，会影响胆红素的稳定性，使最终的产品出品率或含量降低。
优选地，步骤(2)所述水解反应的温度为90-100℃，例如90℃、92℃、95℃、96℃、98℃、99℃或100℃等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述，优选95-98℃，更优选95℃。
为了更好地平衡好生产周期和操作安全的关系，所述水解反应的温度特定选择为90-100℃，95-98℃是更优选的温度范围。
优选地，步骤(2)所述水解反应的时间为5-30min，例如5min、10min、15min、20min、25min或30min等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述，优选10-20min，更优选15min。
优选地，步骤(3)所述沉淀剂包括钙盐、钡盐或镁盐中的任意一种或至少两种的组合；所述至少两种的组合例如钙盐和钡盐的组合、钡盐和镁盐的组合、钙盐和镁盐的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，所述钙盐包括氯化钙。
优选地，所述钡盐包括氯化钡。
优选地，所述镁盐包括氯化镁。
优选地，步骤(3)所述沉淀剂的添加质量为畜禽动物胆汁质量的0.8％-1.8％，例如0.8％、1.0％、1.1％、1.2％、1.4％、1.5％、1.6％或1.8％等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述，优选1.0％-1.5％，更优选1.2％。
在本发明中，沉淀剂的添加量也是影响制备工艺的关键因素，添加量过多会造成浪费，增加成本，过低则无法使胆红素充分沉淀，影响最终出品率，其中0.8％-1.8％的质量占比是一个较合适的范围，1.0％-1.5％是更优选的范围。
优选地，步骤(3)所述反应的温度为90-100℃，例如90℃、92℃、95℃、96℃、98℃、99℃或100℃等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
优选地，步骤(3)所述反应的时间为5-20min，例如5min、10min、12min、15min或20min等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述，优选10-15min，更优选12min。
优选地，步骤(4)所述酸性溶液为强酸与弱酸的混合酸溶液，所述强酸包括盐酸、硫酸或硝酸中的任意一种或至少两种的组合，所述至少两种的组合例如盐酸、硫酸和硝酸的组合、盐酸和硝酸的组合等；所述弱酸包括醋酸和/或乳酸。
本发明所涉及的制备方法在步骤(4)的操作中采用混合酸进行处理，避免了单一种类酸调节pH值操作难、出品率低和成本高的问题，若酸性太强，则沉淀速度过快，使胆红素的出品率降低，若酸性太弱，则需耗费大量酸性溶液，成本提高。
优选地，步骤(4)所述酸性溶液为盐酸与醋酸的组合。
优选地，步骤(4)所述强酸与弱酸的质量比为(1-3):1，例如1:1、1.5:1、2:1、2.5:1或3:1等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述，优选2:1。当强酸与弱酸的质量比处于(1-3):1的范围时，能最好地平衡产品出品率和制造成本。
优选地，步骤(4)所述pH值调节至5.0-7.0，例如pH＝5.0、pH＝5.5、pH＝6.0、pH＝6.5或pH＝7.0等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述，优选6.0。
所述pH值的调节终点特定选择为5.0-7.0，若pH值更低，则会使部分酸性物质也沉淀下来，影响产品最终的含量，若pH更高，胆红素难以稳定存在，影响产品最终的出品率或含量。
优选地，步骤(4)所述调节溶液pH值时的温度为30-40℃，例如30℃、32℃、35℃、38℃或40℃等，范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
本发明所涉及的制备方法中，步骤(3)结束后需要迅速降温至30-40℃，用酸性溶液调节pH值，避免了胆红素在过高温度下的分解。
作为本发明的优选技术方案，所述制备方法包括如下步骤：
(1)以畜禽动物胆汁为原料，将其与抗氧化剂混合；所述抗氧化剂质量为畜禽动物胆汁质量的0.1％-0.8％；
(2)在40-45℃下用碱性溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值至9.0-11.0，在90-100℃下进行水解反应5-30min；
(3)将步骤(2)所得溶液与沉淀剂混合，在90-100℃下进行反应5-20min；所述沉淀剂质量为畜禽动物胆汁质量的0.8％-1.8％；
(4)在30-40℃下用酸性溶液调节步骤(3)所得溶液的pH值至5.0-7.0，静置沉淀，得到所述胆红素。
得到所述胆红素后还可对其进行纯化处理，具体操作可以为：将沉淀物进行过滤，收集沉淀物，用90-98％乙醇溶液浸泡1-3h，过滤，重复2-4次，将沉淀物放入烘箱中，60-65℃真空干燥，得到纯化产物。
另一方面，本发明提供一种如上所述的制备方法制备得到的胆红素。
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
本发明所涉及的胆红素的制备方法整个加工过程简单，操作方便，产品质量稳定，生产周期短，出品率高，产品含量高，使制备所用的原料得以扩充，该制备方法不仅适用于普遍的猪胆汁、牛胆汁，而且还适用于羊胆汁、鸡胆汁或鸭胆汁，解决了资源受限问题；本发明利用沉淀法，避开了有毒有害有机溶剂的使用，有利于保护环境和人体健康；本发明采用混合酸进行处理，避免了单一种类酸调节pH值操作难、出品率低和成本高的问题，为胆红素的规模化生产提供了一种新的制备方法。
附图说明
图1是实施例1制得的胆红素的产品图；
图2是实施例2制得的胆红素的产品图；
图3是实施例3制得的胆红素的产品图；
图4是实施例4制得的胆红素的产品图；
图5是实施例5制得的胆红素的产品图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
下述实施例所涉及的猪胆汁、牛胆汁、羊胆汁、鸡胆汁和鸭胆汁分别由猪苦胆、牛苦胆、羊苦胆、鸡苦胆和鸭苦胆(分别购自于双汇屠宰厂、平顶山东恒实业有限公司、平顶山东恒实业有限公司、双汇宰鸡厂和沈丘东润生化有限公司)通过破胆机制备得到。
实施例1
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作如下：
(1)以猪胆汁为原料，将其与亚硫酸氢钠混合；所述抗氧化剂质量为猪胆汁质量的0.2％；
(2)在45℃下用氢氧化钠溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值至9.5，在95℃下进行水解反应12min；
(3)将步骤(2)所得溶液与氯化钙混合，在95℃下进行反应15min；所述氯化钙质量为猪胆汁质量的1.0％；
(4)在35℃下用盐酸和醋酸的混合酸溶液(2:1)调节步骤(3)所得溶液的pH值至6.5，静置沉淀4h，虹吸抽去大部分上清液；
(5)对步骤(4)所得的沉淀物进行过滤，收集沉淀物，用95％乙醇溶液浸泡1h，过滤，重复2次，将沉淀物放入烘箱中，65℃真空干燥，得到所述胆红素。
实施例2
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作如下：
(1)以牛胆汁为原料，将其与硫代硫酸钠混合；所述抗氧化剂质量为牛胆汁质量的0.25％；
(2)在40℃下用氢氧化钠溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值至9.5，在97℃下进行水解反应13min；
(3)将步骤(2)所得溶液与氯化钙混合，在95℃下进行反应15min；所述氯化钙质量为牛胆汁质量的1.1％；
(4)在30℃下用盐酸和乳酸的混合酸溶液(2:1)调节步骤(3)所得溶液的pH值至6.0，静置沉淀4h，虹吸抽去大部分上清液；
(5)对步骤(4)所得的沉淀物进行过滤，收集沉淀物，用95％乙醇溶液浸泡2h，过滤，重复3次，将沉淀物放入烘箱中，60℃真空干燥，得到所述胆红素。
实施例3
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作如下：
(1)以羊胆汁为原料，将其与亚硫酸钠混合；所述抗氧化剂质量为羊胆汁质量的0.5％；
(2)在40℃下用氢氧化钠溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值至11.0，在98℃下进行水解反应5min；
(3)将步骤(2)所得溶液与氯化钡混合，在95℃下进行反应20min；所述氯化钡质量为羊胆汁质量的1.5％；
(4)在40℃下用盐酸和乳酸的混合酸溶液(1:1)调节步骤(3)所得溶液的pH值至7.0，静置沉淀4h，虹吸抽去大部分上清液；
(5)对步骤(4)所得的沉淀物进行过滤，收集沉淀物，用95％乙醇溶液浸泡2h，过滤，重复3次，将沉淀物放入烘箱中，60℃真空干燥，得到所述胆红素。
实施例4
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作如下：
(1)以鸡胆汁为原料，将其与亚硫酸氢钠混合；所述抗氧化剂质量为鸡胆汁质量的0.6％；
(2)在45℃下用氢氧化钠溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值至10.0，在93℃下进行水解反应25min；
(3)将步骤(2)所得溶液与氯化镁混合，在95℃下进行反应10min；所述氯化镁质量为鸡胆汁质量的1.7％；
(4)在40℃下用盐酸和醋酸的混合酸溶液(3:1)调节步骤(3)所得溶液的pH值至6.0，静置沉淀4h，虹吸抽去大部分上清液；
(5)对步骤(4)所得的沉淀物进行过滤，收集沉淀物，用95％乙醇溶液浸泡2h，过滤，重复3次，将沉淀物放入烘箱中，60℃真空干燥，得到所述胆红素。
实施例5
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作如下：
(1)以鸭胆汁为原料，将其与亚硫酸氢钠混合；所述抗氧化剂质量为鸭胆汁质量的0.2％；
(2)在45℃下用氢氧化钠溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值至10.5，在95℃下进行水解反应15min；
(3)将步骤(2)所得溶液与氯化钙混合，在95℃下进行反应15min；所述氯化钙质量为鸭胆汁质量的1.5％；
(4)在40℃下用盐酸和乳酸的混合酸溶液(2:1)调节步骤(3)所得溶液的pH值至6.0，静置沉淀4h，虹吸抽去大部分上清液；
(5)对步骤(4)所得的沉淀物进行过滤，收集沉淀物，用95％乙醇溶液浸泡1h，过滤，重复3次，将沉淀物放入烘箱中，65℃真空干燥，得到所述胆红素。
实施例6
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中抗氧化剂质量为猪胆汁质量的0.05％，其他条件均保持不变。
实施例7
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中抗氧化剂质量为猪胆汁质量的0.9％，其他条件均保持不变。
实施例8
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(2)中用氢氧化钠溶液调节溶液的pH值至8，其他条件均保持不变。
实施例9
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(2)中用氢氧化钠溶液调节溶液的pH值至12，其他条件均保持不变。
实施例10
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(2)中在55℃下用氢氧化钠溶液调节溶液的pH值，其他条件均保持不变。
实施例11
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(4)中用盐酸溶液调节溶液的pH值，其他条件均保持不变。
实施例12
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(4)中用盐酸和醋酸的混合酸溶液(4:1)调节溶液的pH值，其他条件均保持不变。
实施例13
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(4)中用盐酸和醋酸的混合酸溶液(2:1)调节溶液的pH值至4.0，其他条件均保持不变。
实施例14
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(4)中用盐酸和醋酸的混合酸溶液(2:1)调节溶液的pH值至8.0，其他条件均保持不变。
实施例15
本实施例提供一种胆红素的制备方法，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(4)中在50℃下用盐酸和醋酸的混合酸溶液(2:1)调节溶液的pH值，其他条件均保持不变。
评价试验：
(1)对实施例1-15制得的胆红素，参照《中国药典》2015年版规定的方法进行检验，具体内容包括：
【性状】本品为橙色至红棕色结晶性粉末。
【鉴别】
(1)取【含量测定】项下溶液，照紫外-可见分光光度法(通则0401)，在400-500nm波长处，测定吸收曲线，并与胆红素对照品图谱比较，应一致。其最大吸收为453nm。
(2)取本品，加三氯甲烷制成每1mL含0.1mg的溶液，作为供试品溶液。另取胆红素对照品，同法制成对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(10：1：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】取本品约0.5g，在五氧化二磷60℃减压干燥4h，减失重量不得过2.0％(通则0831)。
【含量测定】取本品约10mg，精密称定，用少量三氯甲烷研磨后转移至100mL棕色量瓶中，超声处理使溶解，取出，迅速放冷，再加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀。精密量取5mL，置100mL棕色量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，摇匀。照紫外-可见分光光度法(通则0401)，在453nm的波长处测定吸光度，按照胆红素的吸收系数
1038计算，即得。本品按干燥品计算，含胆红素
(C33H36N4O6)不得少于90.0％。
经过检验，实施例1-15制得的胆红素均符合上述各项质量标准要求。
(2)出品率检测，具体方法为：计算产出的胆红素重量占耗用投入的胆汁重量的百分率。结果如表1所示。
(3)含量检测，具体方法如上述【含量测定】。结果如表1所示。
表1
由表1数据可知：本发明所涉及的制备方法制得的胆红素出品率及产品纯度都较高，当使用猪胆汁作为原料时，出品率可高达0.038％，纯度可高达98.8％，使用其他类型的胆汁原料也能获得较高的出品率和纯度；对比实施例1和实施例6-15的数据可知，抗氧化剂的添加量、碱性溶液调节pH值的终点和温度、酸性溶液的类型、调节pH值的终点和温度等因素均会显著影响制得胆红素的出品率或纯度。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种胆红素的制备方法及其产品，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (10)
1.一种胆红素的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)以畜禽动物胆汁为原料，将其与抗氧化剂混合；
(2)用碱性溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值，进行水解反应；
(3)将步骤(2)所得溶液与沉淀剂混合，进行反应；
(4)用酸性溶液调节步骤(3)所得溶液的pH值，静置沉淀，得到所述胆红素。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述畜禽动物包括猪、牛、羊、鸡或鸭；
优选地，所述抗氧化剂包括亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸或硫脲中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述抗氧化剂的添加质量为畜禽动物胆汁质量的0.1％-0.8％，优选0.2％-0.5％，更优选0.25％。
3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述碱性溶液包括氢氧化钠溶液；
优选地，步骤(2)所述pH值调节至9.0-11.0，优选9.5；
优选地，步骤(2)所述调节溶液pH值时的温度为40-45℃。
4.如权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述水解反应的温度为90-100℃，优选95-98℃，更优选95℃；
优选地，步骤(2)所述水解反应的时间为5-30min，优选10-20min，更优选15min。
5.如权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述沉淀剂包括钙盐、钡盐或镁盐中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述钙盐包括氯化钙；
优选地，所述钡盐包括氯化钡；
优选地，所述镁盐包括氯化镁；
优选地，步骤(3)所述沉淀剂的添加质量为畜禽动物胆汁质量的0.8％-1.8％，优选1.0％-1.5％，更优选1.2％。
6.如权利要求1-5中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述反应的温度为90-100℃；
优选地，步骤(3)所述反应的时间为5-20min，优选10-15min，更优选12min。
7.如权利要求1-6中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述酸性溶液为强酸与弱酸的混合酸溶液，所述强酸包括盐酸、硫酸或硝酸中的任意一种或至少两种的组合，所述弱酸包括醋酸和/或乳酸；
优选地，步骤(4)所述酸性溶液为盐酸与醋酸的混合酸溶液；
优选地，步骤(4)所述强酸与弱酸的质量比为(1-3):1，优选2:1。
8.如权利要求1-7中任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述pH值调节至5.0-7.0，优选6.0；
优选地，步骤(4)所述调节溶液pH值时的温度为30-40℃。
9.如权利要求1-8中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
(1)以畜禽动物胆汁为原料，将其与抗氧化剂混合；所述抗氧化剂质量为畜禽动物胆汁质量的0.1％-0.8％；
(2)在40-45℃下用碱性溶液调节步骤(1)所得溶液的pH值至9.0-11.0，在90-100℃下进行水解反应5-30min；
(3)将步骤(2)所得溶液与沉淀剂混合，在90-100℃下进行反应5-20min；所述沉淀剂质量为畜禽动物胆汁质量的0.8％-1.8％；
(4)在30-40℃下用酸性溶液调节步骤(3)所得溶液的pH值至5.0-7.0，静置沉淀，得到所述胆红素。
10.如权利要求1-9中任一项所述的制备方法制备得到的胆红素。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010190833.4A CN111233733B (zh) | 2020-03-18 | 2020-03-18 | 一种胆红素的制备方法及其产品 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010190833.4A CN111233733B (zh) | 2020-03-18 | 2020-03-18 | 一种胆红素的制备方法及其产品 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111233733A true CN111233733A (zh) | 2020-06-05 |
| CN111233733B CN111233733B (zh) | 2023-05-09 |
Family
ID=70869988
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010190833.4A Active CN111233733B (zh) | 2020-03-18 | 2020-03-18 | 一种胆红素的制备方法及其产品 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111233733B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113372253A (zh) * | 2021-06-11 | 2021-09-10 | 吉林基蛋生物科技有限公司 | 一种胆红素的提取方法及其应用 |
| CN114315682A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-04-12 | 福建省南仹生物科技有限公司 | 胆红素的制备方法 |
| CN117105841A (zh) * | 2023-07-12 | 2023-11-24 | 盐城凯利药业有限公司 | 一种胆红素的制备方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101429152A (zh) * | 2008-11-04 | 2009-05-13 | 陕西秦宝牧业发展有限公司 | 从牛胆汁中提取胆红素的方法 |
| CN102229556A (zh) * | 2011-05-13 | 2011-11-02 | 四川泓乾生物科技有限公司 | 生产胆红素的方法 |
| CN104447488A (zh) * | 2013-09-13 | 2015-03-25 | 四川省观音生化有限公司 | 一种从胆汁中直接萃取胆红素的方法 |
-
2020
- 2020-03-18 CN CN202010190833.4A patent/CN111233733B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101429152A (zh) * | 2008-11-04 | 2009-05-13 | 陕西秦宝牧业发展有限公司 | 从牛胆汁中提取胆红素的方法 |
| CN102229556A (zh) * | 2011-05-13 | 2011-11-02 | 四川泓乾生物科技有限公司 | 生产胆红素的方法 |
| CN104447488A (zh) * | 2013-09-13 | 2015-03-25 | 四川省观音生化有限公司 | 一种从胆汁中直接萃取胆红素的方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113372253A (zh) * | 2021-06-11 | 2021-09-10 | 吉林基蛋生物科技有限公司 | 一种胆红素的提取方法及其应用 |
| CN114315682A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-04-12 | 福建省南仹生物科技有限公司 | 胆红素的制备方法 |
| CN117105841A (zh) * | 2023-07-12 | 2023-11-24 | 盐城凯利药业有限公司 | 一种胆红素的制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111233733B (zh) | 2023-05-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111233733A (zh) | 一种胆红素的制备方法及其产品 | |
| CN104351465B (zh) | 一种苏氨酸菌体蛋白利用方法 | |
| DE2436946A1 (de) | Zink/methionin-komplex-salze, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung in nahrungsmitteln | |
| CN103387599B (zh) | 一种桑叶蛋白的提取工艺 | |
| CN103694107A (zh) | 饲料添加剂β-羟基-β-甲基丁酸钙的制备方法 | |
| NO134239B (zh) | ||
| Miftahutdinova et al. | DEVELOPMENT OF LITHIUM–CONTAINING FEED ADDITIVE AND ITS USE FOR FORTIFICATION OF CHICKEN BROILERS MEAT AND BY-PRODUCTS | |
| CN103772528B (zh) | 一种硒化壳聚糖硫酸酯的制备方法和在畜禽饲料中的应用 | |
| CN102688497A (zh) | 一种多肽锌铁补剂的制备方法 | |
| CN107373144A (zh) | 一种富马酸锌络合物及其制备方法和应用 | |
| DE69011856T2 (de) | Herstellung von hefeextrakt. | |
| de SOUZA et al. | Studies on the bioavailability of zinc in rats supplementated with two different zinc-methionine compounds | |
| CN112617040A (zh) | 犬用营养钙片及其制备方法 | |
| CN112708611A (zh) | 一种胰酶制备方法 | |
| CN114436920A (zh) | 一种饲料级羟基蛋氨酸铜制备方法 | |
| CN105461822A (zh) | 一种提取蚕沙中有效成分的方法 | |
| CN111454373B (zh) | 一种裙带菜孢子叶粘液的分离方法 | |
| CN111175417A (zh) | 一种鸡骨素、鸡骨白汤中硝基呋喃代谢物残留的检测方法 | |
| RU2796855C1 (ru) | Способ профилактики вторичных иммунодефицитных состояний у птиц | |
| CN104381591A (zh) | 含纳米晶体纤维素的饲料 | |
| CN110002489A (zh) | 一种超细粉态碱式氯化铜的制备方法 | |
| CN110697858A (zh) | 一种用于处理生活污水的净化剂及其制备方法 | |
| KR102712611B1 (ko) | 광물성 유황의 법제 방법 | |
| Islamiati et al. | Antioxidant Activity Of Ethanol Extract Of Papaya Leaves (Carica Papaya L.) On Reducing Blood Glucose Levels Of Streptozotocin-Induced Male Rats | |
| CN110041213A (zh) | 一种谷氨酸螯合铁的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |