CN111053782B

CN111053782B - 包含人参皂苷的组合物

Info

Publication number: CN111053782B
Application number: CN201910989131.XA
Authority: CN
Inventors: 洪勇德; 郑炫禹
Original assignee: Amorepacific Corp
Current assignee: Amorepacific Corp
Priority date: 2018-10-17
Filing date: 2019-10-17
Publication date: 2024-07-05
Anticipated expiration: 2039-10-17
Also published as: US20200123194A1; US11000537B2; CN111053782A

Abstract

本说明书涉及一种包含作为有效物质的新型人参皂苷的组合物，所述新型人参皂苷为(20S，24R)‑6‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖基(1‑>2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷‑达玛‑3‑酮‑20，24‑环氧‑6a，12b，25‑三醇((20S,24R)‑6‑O‑β‑D‑glucopyranosyl(1‑>2)‑β‑D‑glucopyranoside‑dammar‑3‑one‑20,24‑epoxy‑6a,12b,25‑triol)、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。所述组合物表现出优异的调节血糖、调节脂质代谢、调节胆固醇、抗肥胖及改善血液循环的效果。

Description

包含人参皂苷的组合物

技术领域

本说明书涉及新型人参皂苷及包含其的组合物。

背景技术

人参(Panax ginseng C.A.Meyer)是属于五加科人参属的一种植物，是在韩国、中国、日本等地从2000多年前开始使用的生草药。已知人参的代表性生理有效成分是皂苷、多糖、多肽、谷甾醇、聚乙炔及脂肪酸，其中人参的皂苷被称为人参皂苷。已知人参的功效和效果包括对中枢神经系统的作用、抗致癌作用和抗癌活性、免疫功能调节作用、抗糖尿病作用、改善肝功能亢进、改善心血管疾病及抗动脉硬化作用、血压调节作用、改善更年期疾病及对骨质疏松症的功效、抗压力及抗疲劳作用、抗氧化活性及抗衰老功效等。根据人参的根、叶、果实、花、种子等部位，所述人参皂甙的含量和成分具有较大差异，但如上所述的已知功效主要是针对人参根，即人参的根部，而缺乏对除人参根以外的人参的其他部位的研究。

[现有技术文献]

[专利文献]专利文献1：韩国专利公开号第10-2016-0086149号

发明内容

技术问题

在一个方面，本发明要解决的问题在于提供一种含有调节代谢功效优异的新型人参皂苷的组合物。

在一个方面，本发明要解决的问题在于提供一种含有调节血糖功效优异的新型人参皂苷的组合物。

在一个方面，本发明要解决的问题在于提供一种含有调节脂质代谢功效优异的新型人参皂苷的组合物。

在一个方面，本发明要解决的问题在于提供一种含有调节胆固醇功效优异的新型人参皂苷的的组合物。

在一个方面，本发明要解决的问题在于提供一种抗肥胖功效优异的新型人参皂苷的组合物。

在一个方面，本发明要解决的问题在于提供一种含有改善血液循环功效优异的新型人参皂苷的组合物。

技术方案

在一个方面，本发明提供一种用于调节代谢的组合物，其含有作为有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇((20S,24R)-6-O-β-D-glucopyranosyl(1->2)-β-D-glucopyranoside-dammar-3-one-20,24-epoxy-6a,12b,25-triol)、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个方面，本发明提供一种用于调节血糖的组合物，其含有作为有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个方面，本发明提供一种用于调节或抑制脂质代谢的组合物，其含有作为有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个方面，本发明提供一种用于调节胆固醇的组合物，其含有作为有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个方面，本发明提供一种用于抗肥胖的组合物，其含有作为有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个方面，本发明提供一种用于改善血液循环的组合物，其含有作为有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

有益效果

在一个方面，本发明可以提供一种具有优异的调节血糖效果的组合物，其包含新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。所述新型人参皂苷显示出优异的调节血糖、调节或抑制脂质代谢、调节胆固醇、抗肥胖及改善血液循环的功效。

附图说明

图1示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中本发明的新型人参皂苷(Cpd.10)的分离过程的图。

图2示出了从人参种子提取物分馏出的16种化合物的化学结构的图。

图3示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，与已知人参皂苷相对应的化合物1至6的光谱证据及结构的图。

图4示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，与本发明的新型人参皂苷相对应的化合物10的¹H-NMR光谱图。

图5示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，与本发明的新型人参皂苷相对应的化合物10的¹³C-NMR光谱图。

图6示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，与本发明的新型人参皂苷相对应的化合物10的COZY光谱图。

图7示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，与本发明的新型人参皂苷相对应的化合物10的HSQC光谱图。

图8示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，与本发明的新型人参皂苷相对应的化合物10的HMBC光谱图。

图9示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，与本发明的新型人参皂苷相对应的化合物10的MS光谱图。

图10示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，与本发明的新型人参皂苷相对应的化合物10的核心HMBC相关性的图。

图11示出了对应于从人参种子提取物中分离出的本发明的新型人参皂苷的GS#10和作为本发明的比较例的人参皂苷GS#01-GS#06对α-淀粉酶活性的抑制程度的比较图。(***P<0.001vs.(-)，**P<0.01vs.(-)，*P<0.05vs.(-))

图12示出了对应于从人参种子提取物中分离出的本发明的新型人参皂苷的GS#10和作为本发明比较例的人参皂苷GS#01-GS#06对α-葡萄糖苷酶活性的抑制程度的比较图。(***P<0.001vs.(-)，*P<0.05vs.(-))

图13示出了对应于从人参种子提取物中分离出的本发明的新型人参皂苷的GS#10和作为本发明比较例的人参皂苷GS#01-GS#06对葡萄糖吸收的促进程度的比较图。(***P<0.001vs.–胰岛素(-)，**P<0.01vs.–胰岛素(-)，*P<0.05vs.–胰岛素(-)，###P<0.001vs.+胰岛素(-)，##P<0.01vs.+胰岛素(-))

图14示出了作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的GS#10对α-淀粉酶活性的抑制程度的比较图。(***P＜0.001vs.(-)，**P<0.01vs.(-)，*P<0.05vs.(-))

图15示出了作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的GS#10对α-葡萄糖苷酶活性的抑制程度的比较图。(***P<0.001vs.(-)，**P<0.01vs.(-)，*P<0.05vs.(-))

图16示出了作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的GS#10对葡萄糖吸收的促进程度的比较图。(***P<0.001vs.–胰岛素(-)，**P<0.01vs.–胰岛素(-)，*P<0.05vs.–胰岛素(-)，##P<0.001vs.+胰岛素(-)，#P<0.51vs.+胰岛素(-))

图17示出了与本发明的新型人参皂苷相对应的化合物10(GS#10)的细胞存活率(％Viable cells)的图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图18示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对SREBP1c(sterol-regulatory element binding protein 1c，固醇调节元件结合蛋白1c)表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图19示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对ACC(acetyl-CoA carboxylase，乙酰辅酶A羧化酶)表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图20示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对FAS(Fattyacid synthase，脂肪酸合酶)表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图21示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对肝细胞内脂质蓄积的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图22示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对胰腺脂肪酶活性的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图23示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对SREBP1c(sterol-regulatoryelement binding protein 1c，固醇调节元件结合蛋白1c)表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图24示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对ACC(acetyl-CoA carboxylase，乙酰辅酶A羧化酶)表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图25示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对FAS(Fatty acid synthase，脂肪酸合成酶)表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图26示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对肝细胞内脂质蓄积的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图27示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对胰腺脂肪酶活性的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图28示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于已知人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)的作为胆固醇合成关键基因的HMG-CoA(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-coenzyme A reductase，3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A还原酶)表达量的比较图。(***P<0.001vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图29示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)的用于降低血液中胆固醇数值的LDL受体的表达量的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图30示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)的与胆固醇代谢有关的SREBP1a表达量的比较图。(*P<0.05vs.(-))

图31示出了作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)的作为胆固醇合成关键基因的HMG-CoA(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-coenzyme A reductase，3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A还原酶)表达量的比较图。(***P<0.001vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图32示出了作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)的用于降低血液中胆固醇数值的LDL受体的表达量的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图33示出了作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)的与胆固醇代谢有关的SREBP1a的表达量的比较图。(*P<0.05vs.(-))

图34示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对肝细胞内脂质蓄积的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图35示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对PPARγ基因表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图36示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对aP2基因表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图37示出了在从人参种子提取物分馏出的化合物中，对应于现有的人参皂苷的化合物1至6(GS#01-06)和对应于本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对CD36基因表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图38示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，的作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对肝细胞内脂质蓄积的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图39示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对PPARγ基因表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图40示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对aP2基因表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图41示出了在不同浓度(1μM,10μM)下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对CD36基因表达的抑制功效的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs(-),*P<0.05vs.(-))

图42示出了根据从人参种子提取物中分离出的对应于本发明新型人参皂苷的GS#10的不同浓度，测量出的一氧化氮(NO)产量的图。(-),**P<0.01vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图43示出了在相同浓度下，在从人参种子提取物中分离出的对应于本发明新型人参皂苷的GS#10和作为本发明的比较例的GS#01-GS#06中的下一氧化氮(NO)生成量的比较图。(-),**P<0.01vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图44示出了根据从人参种子提取物中分离出的对应于本发明新型人参皂苷的GS#10的不同浓度，所测的血管内皮细胞(HUVEC)存活率的图。(***P<0.001vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图45示出了在相同浓度下，在从人参种子提取物中分离出的对应于本发明新型人参皂苷的GS#10和作为本发明的比较例的GS#01-GS#06中的血管内皮细胞(HUVEC)存活率的比较图。(***P<0.001vs.(-),**P<0.01vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图46示出了在相同浓度下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的GS#10中的一氧化氮(NO)生成量的比较图。(***P<0.001vs.(-),*P<0.05vs.(-))

图47示出了在相同浓度下，作为红参的指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3及Rb1和对应于本发明新型人参皂苷的GS#10中的血管内皮细胞(HUVEC)存活率的比较图。(***P<0.001vs.(-),*P<0.05vs.(-))

具体实施方式

以下，将结合附图更详细地描述本申请的实施例。然而，本申请中公开的技术不限于本说明书所描述的实施例，并且可以以其他形式实施。应理解的是，本说明书描述的实施例是为了使本公开的内容更加透彻和完整，并且将本申请的构思充分传达给本领域技术人员。为了在附图中清楚地表示每个组成要素，放大示出了组成要素的宽度或厚度等尺寸。此外，尽管为了便于描述仅示出了组成要素的一部分，但是本领域技术人员将能够容易地理解其余的部分。此外，在不超出本申请的技术构思前提下，本领域技术人员可以通过各种其他形式实现本申请的构思。

在一个实施例中，本发明可提供一种用于调节代谢的组合物，其包含作为有效成分的新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个实施例中，本发明可以提供一种用于调节血糖的组合物，其包含作为有效成分的新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个实施例中，本发明可以提供一种用于调节或抑制脂质代谢的组合物，其包含作为有效成分的新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个实施例中，本发明可以提供一种用于调节胆固醇的组合物，其包含作为有效成分的新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个实施例中，本发明可以提供一种用于抗肥胖的组合物，其包含作为有效成分的新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个实施例中，本发明可以提供一种用于改善血液循环的组合物，其包含作为有效成分的新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。

在一个实施例中，所述人参皂苷为新型三萜皂苷(triterpene saponin)，即(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇((20S,24R)-6-O-β-D-glucopyranosyl(1->2)-β-D-glucopyranoside-dammar-3-one-20,24-epoxy-6a,12b,25-triol)。

一个实施例可提供(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物在制备用于调节代谢的组合物中的用途。

一个实施例可提供调节代谢的方法，其包括将有效剂量的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物给药于所需受试者。在一个实施例中，所述方法可以包括向代谢调节能力下降的受试者给药。

一个实施例可提供作为用于调节或抑制代谢的组合物的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。此外，可提供作为用于调节或抑制代谢的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物的非治疗性用途。

一个实施例可提供(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物在制备用于调节血糖的组合物中的用途。

一个实施例可提供调节血糖的方法，其包括将有效剂量的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物给药于需要其的受试者。在一个实施例中，所述方法可以包括向血糖调节能力下降的受试者给药。

一个实施例可提供作为用于调节血糖的组合物中的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。此外，可以提供作为用于调节血糖的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物的非治疗性用途。

一个实施例可提供(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物在制备用于调节或抑制脂质代谢的组合物中的用途。

一个实施例可提供调节或抑制脂质代谢的方法，其包括将有效剂量的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物给药于需要其的受试者。在一个实施例中，所述方法可包括向脂质代谢调节能力下降的受试者给药。

一个实施例可提供作为用于调节或抑制脂质代谢的组合物中的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。此外，可以提供作为用于调节或抑制脂质代谢的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物的非治疗性用途。

一个实施例可以提供(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物在制备用于调节胆固醇的组合物中的用途。

一个实施例可提供调节胆固醇的方法，其包括将有效剂量的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物给药于需要其的受试者。在一个实施例中，所述方法可以包括向胆固醇代谢调节能力下降的受试者给药。

一个实施例可提供作为用于调节胆固醇的组合物中的有效成的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。此外，可以提供作为用于调节胆固醇的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物的非治疗性用途。

一个实施例可提供(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物在制备用于抗肥胖的组合物中的用途。

一个实施例可提供抗肥胖的方法，其包括将有效剂量的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物给药于需要其的受试者。在一个实施例中，所述方法可以包括向肥胖的受试者给药。

一个实施例可提供作为用于抗肥胖的组合物中的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。此外，可以提供作为用于抗肥胖的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物的非治疗性用途。

一个实施例可提供(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物在制备用于改善血液循环的组合物中的用途。

一个实施例可提供改善血液循环的方法，其包括将有效剂量的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物给药于需要其的受试者。在一实施方案中，所述方法可包括向血液循环不良的受试者给药。

一个实施例可提供作为用于改善血液循环的组合物中的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物。此外，可以提供作为用于改善血液循环的有效成分的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物的非治疗性用途。

本说明书中的“药学上可接受的”，是指在使用常规或医药学服用量(medicinaldosage)时，通过避免显着的毒性作用，从而可以获得或获得政府或同等级监管机构的可用于动物，更具体地，可用于人类的批准，或被认定为在药典中被公开，或被记载与其他的一般药典中。

本说明书中的“药学上可接受的盐”，是指是指根据本发明的一个方面的盐，其是药学上可接受的，并且具有母体化合物(parent compound)所需的药理活性的盐。所述盐可以包括，由例如(1)盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸形成的；或由乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2,2,2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸盐、葡萄糖酸、谷氨酸、羟萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等的有机酸形成的酸加成盐(acidaddition salt)；或(2)母体化合物中存在的酸性质子被取代而形成的盐。

本说明书中的“水合物(hydrate)”是指，与水结合的化合物，其以广义使用，包括在水和化合物之间缺少化学键的包合化合物。

本说明书中的“溶剂合物”是指溶质的分子或离子与溶剂的分子或离子之间形成的高阶化合物。

在一个实施例中，所述人参皂苷的分子式为C₄₂H₇₀O₁₅，并具有以下所示的化学结构：

[化学式1]

在本说明书中，所述新型人参皂苷被命名为“假人参皂苷RT₈(pseudoginsenosideRT₈)”或“PG-RT₈”。

在一实施例中，所述人参皂苷可从人参种子提取物中分离，但不限于此。在一个实施例中，所述人参种子的人参为人参(Panax ginseng C.A.Meyer)。

在本说明书中，“分离”是指包括从人参种子提取物中提取或分馏，并且可以利用水、有机溶剂等，也可以应用本领域技术人员已知的任何方法。所述分馏可在所述提取之后进行。

在本说明书中，“提取物”包括从天然产物中提取其中的成分而获得的任何物质，而与提取方法或成分的类型无关。它被用在广泛的概念中，例如，利用水或有机溶剂从天然产物中提取溶解于溶剂中的成分而获得的物质、仅提取天然产物的特定成分而获得的物质。

在本说明书中，“馏分物”包括利用任何溶剂分馏特定物质或提取物，或分馏剩下的物质、以及之后用特定溶剂对这些物质再次进行提取后的物质。分馏方法和提取方法可以是本领域技术人员已知的任何方法。

在本说明书中，术语“预防”是指通过施用根据本发明的一个实施例的组合物来抑制或延迟目标症状的所有行为。在本说明书中，术语“治疗”是指通过施用根据本发明的一个实施例的组合物，从而使目标症状或疾病得到好转或消除的所有行为。在本说明书中，术语“改善”是指在通过施用根据本发明的一个实施例的组合物，使目标症状相对于施用前得到好转或向有利方向变化的所有行为。

在一个实施例中，所述人参皂苷可以从人参种子的甲醇及丁醇可溶性提取物中分离得到。具体地，可通过使用HPLC-ESI-Q-TOF-MS分析人参种子的甲醇及丁醇可溶性提取物来检测、分离所述人参皂苷。因为人参种子提取物的主要成分是脂质，因此无法通过HPLC-UV或HPLC-ELSD从人参种子粗提物中观察到所有三萜和甾体皂苷。

在一个实施例中，本发明可以提供一种通过包含所述新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物来降低血糖的组合物。在一个实施例中，所述有效成分可以抑制血液中糖的分解或促进血液中葡萄糖的细胞吸收。因此，在一个实施例中，根据本发明的组合物可以预防或治疗糖尿病或糖尿病并发症或葡萄糖代谢疾病。所述“糖尿病”是指由于体内胰岛素敏感性和胰岛素分泌之间的平衡被破坏，即，缺乏胰岛素或胰岛素敏感性降低，导致无法利用血液中的糖分，从而无法调节血糖，以致葡萄糖随尿液排出的病症。所述糖尿病并发症可分为急性并发症和慢性并发症。所述急性并发症的可包括如酮症酸中毒、高渗性高血糖综合征、低血糖等，慢性并发症可包括如冠状动脉疾病、脑血管疾病、外周血管疾病等的大血管并发症，如糖尿病性视网膜病、糖尿病性肾病、糖尿病性神经病等的微血管并发症，糖尿病足病变等，但不限于此。

在一个实施例中，与现有的具有调节血糖功效的人参皂苷相比，本发明可以提供具有更为显著且优异的调节血糖功效的组合物。

在一个实施例中，本发明可提供一种通过含有新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物来抑制脂质合成基因的表达，从而调节或抑制脂质代谢的组合物。在一个实施例中，本发明可提供一种通过过含有新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物来抑制胆固醇合成基因的表达或增加，降低血液胆固醇数值的基因的表达，从而调节代谢的组合物。所述脂质合成基因可包括SREBP1c(sterol-regulatoryelement bindi ng protein 1c，固醇调节元件结合蛋白1c)、ACC(acetyl-CoAcarboxylase，乙酰辅酶A羧化酶)及FAS(Fatty acid synthase，脂肪酸合酶)等，但不限于此。如上所述，本发明可以通过抑制脂质合成相关基因的表达来抑制脂质在体内的合成或积蓄，具体地，可以抑制脂肪在肝细胞等中的积蓄。此时，所述脂质可例如为甘油三酸酯。此外，所述基因可包括HMG-CoA(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-coenzyme A reductase，3-羟基-3-甲基-戊二酰辅酶A还原酶)，LDL受体(low-density lipoprotein receptor，低密度脂蛋白受体)及SREBP1a(sterol-regulatory element binding protein 1a，固醇调节元件结合蛋白1a)，但不限于此。如上所述，本发明可以通过抑制或促进胆固醇合成相关基因的表达，从而有效地降低血液胆固醇数值。在一个实施例中，本发明可以提供一种通过含有新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物来抑制脂肪酶活性的组合物，其中，所述脂肪酶可为胰腺脂肪酶。本发明可以通过抑制胰腺脂肪酶的活性来抑制小肠内的脂解，从而降低血液中的脂质浓度。在一个实施例中，本发明可以提供一种通过含有新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物来抑制体内脂质降解的组合物，。

在一个实施例中，本发明可以提供一种通过含有新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物来预防或改善代谢综合征或血脂异常症的组合物。在本说明书中，所述“血脂异常症(dyslipidemia)”是指相比于正常水平，血液中总胆固醇、LDL胆固醇、甘油三酸酯升高的状态，或者HDL胆固醇降低的状态，并包括遗传因素，以及饮食或饮酒等外在因素。例如，所述血脂异常症可包括选自高血压、糖尿病、高脂血症、高甘油三酸酯血症、心肌梗塞、心绞痛、动脉硬化和高胆固醇血症的一种或多种。

在一个实施例中，与现有的具有调节脂质代谢功效的人参皂苷相比，本发明可以提供具有更为显著且优异的调节或抑制脂质代谢功效的组合物。

在一个实施例中，与现有的具有胆固醇代谢功效的人参皂苷相比，本发明可以提供具有更为显著且优异的调节胆固醇功效的组合物。

在一个实施例中，本发明可以提供一种通过含有新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物来抑制脂肪细胞分化的组合物。在一个实施例中，本发明可以提供一种通过含有新型人参皂苷、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物来抑制体内脂肪蓄积的组合物。作为本发明的一个实施例，可以通过抑制脂肪细胞的分化或脂肪的蓄积来预防或治疗肥胖症以及其相关疾病。

在一个实施例中，与现有的具有抗肥胖功效的人参皂苷相比，本发明可以提供具有更为显著且优异的抗肥胖功效的组合物。

在一个实施例中，所述有效成分可以通过扩张血管来增加血流量并促进血液循环。此外，在为一个实施例中，所述有效成分可以通过促进血管内皮细胞的生长和再生来预防或延迟血管的衰老。通过预防血管弹性的降低、使受抑制的血流恢复到正常状态，从而可以改善血液循环。由此，根据本发明的一个实施例的组合物可以预防或改善如脖子和肩膀僵硬、手脚发麻、手脚冰凉、下半身浮肿等与血液循环有关的疾病。此外，当将根据本发明的一个实施例的组合物施用于皮肤时，可通过扩张毛细血管和促进血液循环，从而提供改善皮肤气色或肤色的效果。

在一个实施例中，与现有的具有改善血液循环功效的人参皂苷相比，本发明可以提供具有更为显著且优异的改善血液循环功效的组合物。

在一个实施例中，基于组合物总重量，本发明可以包含0.0001至99.9重量％的所述有效成分。具体地，在一个实施例中，所述有效成分的含量可以占所述组合物总重量的0.0001重量％或以上、0.0005重量％或以上、0.001重量％或以上、0.01重量％或以上、0.1重量％或以上、1重量％或以上、2重量％或以上、3重量％或以上、4重量％或以上、5重量％或以上、6重量％或以上、7重量％或以上、8重量％或以上、9重量％或以上、10重量％或以上、15重量％或以上、20重量％或以上、25重量％或以上、30重量％或以上、35重量％或以上、40重量％或以上、45重量％或以上、50重量％或以上、55重量％或以上、60重量％或以上、65重量％或以上、70重量％或以上、75重量％或以上、80重量％或以上、85重量％或以上、90重量％或以上、95重量％或以上、或者99.9重量％或以上，但不限于此。又或者，在一个实施例中，所述有效成分的含量可以占所述组合物总重量的100重量％或以下、99重量％或以下、95重量％或以下、90重量％或以下、85重量％或以下、80重量％或以下、75重量％或以下、70重量％或以下、65重量％或以下、60重量％或以下、55重量％或以下、50重量％或以下、45重量％或以下、40重量％或以下、35重量％或以下、30重量％或以下、25重量％或以下、20重量％或以下、15重量％或以下、10重量％或以下、9重量％或以下、8重量％或以下、7重量％或以下、6重量％或以下、5重量％或以下、4重量％或以下、3重量％或以下、2重量％或以下、1重量％或以下、0.5重量％或以下、0.1重量％或以下、0.01重量％或以下、0.001重量％或以下、或者0.0005重量％或以下，但不限于此。

根据本发明的实施例的组合物可为含有所述有效成分的皮肤外用组合物。

在本说明书中，“皮肤”是指覆盖于动物的体表的组织，其以广义使用，不仅包括覆盖在诸如面部或身体等的体表的组织，而且还包括头皮和头发。

根据本发明的实施例的组合物可以是包含所述有效成分的药物组合物。所述药物组合物可以进一步包含如防腐剂、稳定剂、可湿性粉剂或乳化剂、如盐和/或缓冲剂等的用于调节渗透压的涉外药物佐剂，以及其他对治疗有用的物质。

在一个实施例中，所述药物组合物可为口服剂型，所述口服剂型例如可包括例如片剂、丸剂、硬胶囊和软胶囊、液体、悬浮液、乳剂、糖浆、粉剂、散剂、细粒剂，颗粒剂、微丸剂等。除有效成分外，这些剂型除了包含有效成分以外，还可以包含表面活性剂、稀释剂(例：乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、纤维素和甘氨酸)、润滑剂(例：二氧化硅、滑石粉、硬脂酸及其镁或钙盐、聚乙二醇)。此外，片剂还可包含如硅酸铝镁、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚乙烯吡咯烷的粘合剂，并根据具体情况还可包含，如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐等的崩解剂，如吸收剂，着色剂，调味剂和甜味剂等的药物添加剂。所述片剂可以通过常规的混合、制粒或包衣方法进行制备。

在一个实施例中，所述药物组合物可以为肠胃外给药剂型，所述肠胃外给药剂型可以为直肠、局部、皮下、经皮给药剂型。例如，可为注射剂、滴剂、软膏剂、洗剂、凝胶剂、喷雾剂、混悬剂、乳剂、栓剂、贴剂等剂型，但不限于此。

在一个实施例中，所述药物组合物的施用量将根据需要治疗的受试者的年龄、性别和体重、需要治疗的特定疾病或病理、疾病或病理的严重程度、给药途径和处方者的判断而变化。基于这些因素确定基础的施用量属于本领域技术人员的知识范围内。例如，所述剂量可为0.05mg/kg/日或以下、或1mg/kg/日或以上、且10g/kg/日或以下、100mg/kg/日或以下、或10mg/kg/日或以下，但所述剂量不以任何方式限制本说明书的范围。

根据本发明的实施例的组合物可以为含有所述有效成分的化妆品组合物。

在一个实施例中，所述组合物被制备为包含化妆品学或皮肤病学可接受的介质或基质的剂型。其可以为适用于局部施用的的所有剂型，例如，可以制备为溶液、凝胶、固体、糊状无水生成物、通过将油相分散在水相中获得的乳液、悬浮液、微乳液、微胶囊、微小颗粒球或离子(脂质体)和非离子型囊泡分散剂的形式，或霜、爽肤水、乳液、粉末、软膏、喷雾剂或遮瑕棒的形式。还以泡沫的形式、或以进一步包含压缩推进剂的气溶胶组组合物的形式使用。这些组合物可以通过本领域的常规方法制备。

以下，将结合实施例、比较例和实验实施例详细描述本发明。应理解，这些仅作为示例提出，以便更具体地描述本发明，对于本领域技术人员而言，本发明的范围不受这些实施例、比较例和实验实施例的限制。

以下所有实验值均代表进行了三次以上反复实验的平均值，误差线表示标准偏差(SD)，通过单向方差分析(one-way ANOVA)和Dunnett检验计算出p值，并且将p值小于0.05视为具有统计显著性。

[实施例1]人参皂苷的分离

分馏

将5.5kg的人参种子(Seeds of Panax ginseng)通过用搅拌机进行细磨制备成粉末形态，用甲醇进行提取后，用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇等进行阶段性分馏。通过正己烷除去大部分脂质，再用甲醇：水＝1：1(v/v)的溶液对乙酸乙酯分馏物中残留的脂质进行悬浮处理后，在冰箱中放置一晚，然后除去上层液，之后使用离心机以再次除去脂质。使用色谱柱和HPCCC(High Performance Counter-Current Chromatography，高效逆流色谱)对如此预处理后的2.61g的乙酸乙酯分馏物和114.64g的正丁醇分馏物进行如下分馏。

通过利用色谱柱和HPCCC对正丁醇分馏物的分馏将通过MPLC对114.64g的正丁醇分馏物进行分割，此时所使用的溶剂为正己烷/乙酸乙酯＝10：1->5：1->1：1->CHCl3/MeOH＝10：1->5：1(v/v)，流速为50mL/min。在上述条件下，将其分成共12个子馏分，然后对各个馏分再次使用HPCCC、HPLC(High-performance liquid chromatography，高效液相色谱)、色谱柱(Sephadex LH-20色谱柱)等，以分离出各个馏分中所含有的成分，然后使用NMR(Nuclear magnetic resonance，核磁共振)、UV(Ultraviolet rays，紫外线)和MS(Massspectrometry，质谱)对结构进行鉴定，从而鉴定出16种化合物。

所述分离出的16种化合物包括作为原人参三醇皂苷(protopanaxatriolsaponin)的人参皂苷Rg1(化合物1)、人参皂苷Rg2(化合物2)和人参皂苷Re(化合物3)；作为原人参二醇皂苷(protopanaxadiol saponin)的人参皂苷Rd(化合物4)、人参皂苷Rb1(化合物5)和人参皂苷Rb2(化合物6)；作为甾醇糖苷(sterol glycosides)的豆甾-5-烯-3-O-B-d-D-吡喃葡萄糖苷(Stigma-5-en-3-O-β-D-glucopyranoside)(化合物7)、豆甾-5,24(28)-二烯-3-O-B-d-D-吡喃葡萄糖苷(Stigma-5,24(28)-dien-3-O-β-D-glucopyranoside)(化合物8)和豆甾-5,22-二烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Stigma-5,22-dien-3-O-β-D-glucopyranoside)(化合物9)；作为首次从自然产物中分离出的新型化合物，即，根据本发明的一个实施例的新型人参皂苷的(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇((20S,24R)-6-O-β-D-glucopyranosyl(1->2)-β-D-glucopyranoside-dammar-3-one-20,24-epoxy-6a,12b,25-triol)(化合物10)；作为酚类糖苷(phenolic glycosides)的苯乙醇β-D-吡喃吡喃糖基(1->6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(phenethyl alcoholβ-D-xylopyranosyl(1->6)-β-D-glucopy ranoside)(化合物12)和丁香酚β-龙胆二糖苷(Eugenylβ-gentiobioside)(化合物13)；作为类黄酮的异鼠李素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin 3-O-β-D-glucopyranoside)(化合物15)；作为初次代谢物的腺苷(Adenosine)(化合物11)、尿嘧啶(Uraci l)(化合物14)和色氨酸(Tryptophan)(化合物16)。

图1中示出了根据本发明的一个实施例的对应于化合物10的新型人参皂苷的分离过程。图2示出了所述16种化合物的化学结构，图3分别示出了所述化合物中作为现有的人参皂苷的化合物1-6的光谱证据和化学结构。

化合物10被分离为，在阳离子ESI-Q-TOF-MS(Electrospray Ionization-Quadrupole-Time-of-flight mass spectrometry，电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱)光谱中，基于m/z 837.4617[(M+Na)+837.612]中的钠化准分子离子峰(sodiatedpseudomolecular ion peak)，所呈现的分子式为C₄₂H₇₀O₁₅的白色无定形粉末。所述化合物10的¹H NMR光谱包括[δ_H 1.86(3H,s,H-28),1.69(3H,s,H-29),1.47(3H,s,H-27),1.25(6H,s,H-21,26),1.10(3H,s,H-18),0.81(3H,s,H-30),0.75(3H,s,H-19)]中的8个甲基共振。此外，从δ_H 6.02(1H,d,J＝7.8,H-2")/δ_C 104.08(C-1')及_H4.91(1H,d,J＝7.7,H-1')/δ_C104.32(C-1")中，检测出在两个糖残基中的对应于异头质子和碳原子的两对信号。¹³C NMR和异核单量子相关关系(HSQC)光谱揭示了42个碳信号。除了所述两个糖残基外，化合物10的糖苷配基(aglycone)的具有8个亚甲基、4个次甲基、3个含氧次甲基[δ_C 79.79(C-6),71.40(C-12)和86.09(C-24)]、5个季碳原子、2个氧化的季碳原子[δ_C 87.15(C-20)和70.78(C-25)]、8个甲基和羰基碳[δ_C 218.85(C-3)]。通过对¹H和¹³C NMR数据的彻底解释，其结果显示出，化合物10的糖苷配基重叠在假人参皂苷元(pseudoginsengenin)R1[(20S,24R)-达玛-3-o酮-20,24-环氧-6α,12β,25-三醇([(20S,24R)-dammar-3-one-20,24-epoxy-6α,12β,25-triol])]上。在化合物10中，由C-21的化学位移(δC27.67)推导出C-20的绝对构型为S，并且如以上所公开的，24R的构型由C-24的化学位移(δ_C 86.09)决定。根据同酸水解数据和气相色谱(GC)分析结果，以及¹H NMR光谱和12个碳共振中的异构体质子的耦合常数可知，两个糖单元均为β-D-吡喃葡萄糖基(β-D-glucopyranosyl)残基。糖苷结合由在δ_H 6.02(H-1")/δ_C 79.49(C-2')及δ_H 4.91(H-1')/δ_C 79.79(C-6)显示出交叉峰位的异核多重结合相关性(HMBC)决定，并证明了2-O-(β-D-吡喃葡萄糖基)-β-D-吡喃葡萄糖基(2-O-(β-D-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranosyl)残基与假人参皂苷(pseudoginsengenin)R1中糖苷配基的C-6相连接。所述化合物10的各分析光谱图和核心HBMC相关性如图4-10所示。

综合上述分析的结果为，化合物10的化学结构为(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇((20S,24R)-6-O-β-D-glucopyranosyl(1->2)-β-D-glucopyranoside-dammar-3-one-20,24-epoxy-6a,12b,25-triol)，并命名为假人参皂苷RT8(pseudoginsenoside RT8，PG-RT₈)。

所述从人参种子提取物中分离出的人参皂苷中，作为PPT(ProtoPanax Triol，原人参三醇)系的人参皂苷Rg1(化合物1)、人参皂苷Rg2(化合物2)和人参皂苷Re(化合物3)在人参皂苷主链中包含三个羟基。作为PPD(ProtoPanax Diol，原人参二醇)系的人参皂苷Rd(化合物4)、人参皂苷Rb1(化合物5)和人参皂苷Rb2(化合物6)在人参皂苷主链中包含两个羟基。相反，作为在本发明中首次被分离、鉴定出的人参皂苷的化合物10，虽然具有基于PPT系的主链，但是所述主链的末端羟基为酮，人参皂苷的线性链是由呋喃环(furan ring)环化(cycl izat ion)而成的结构，从而存在结构性差异。

所述在本发明中首次被鉴定出的化合物10的分子式为C₄₂H₇₀O₁₅，ESI-Q-TOF-MS在m/z处为837.4617[M+Na]⁺，¹H、¹³C-NMR光谱如下表所示。

【表1】

位置	13C-NMR	1H-NMR
			1	40.63	1.67(1H，H-1a)^a，1.49(1H，H-1b)^a
2	33.61	2.23(1H，H-2a)^a，1.78(1H，H-2b)^a
			3	218.85	-
4	48.58	-
			5	58.35	2.06(1H，d，J＝10.6Hz，H-5)
6	79.79	4.15(1H，H-6)^a
			7	43.47	2.57(1H，H-7a)^a，1.82(1H，H-7b)^a
8	40.47	-
			9	49.47	1.60(1H，H-9)^a
10	38.82	-
			11	33.47	2.22(1H，H-11a)^a，1.32(1H，H-11b)^a
12	71.40	3.68(1H，td，J＝10.6，4.5Hz，H-12)
			13	49.97	1.81(1H，H-13)^a
14	52.76	-
			15	33.19	1.64(1H，H-15a)^a，1.26(1H，H-15b)^a
16	25.94	2.17(1H，H-16a)^a，1.87(1H，H-16b)^a
			17	48.75	2.21(1H，H-17)^a
18	16.13	1.10(3H，s，H-18)
			19	18.48	0.75(3H，s，H-19)
20	87.15	-
			21	27.67	1.25(3H，s，H-21)
22	32.09	1.60(1H，H-22a)^a，1.37(1H，H-22b)^a
			23	29.25	1.82(1H，H-23a)^a，1.25(1H，H-23b)^a
24	86.09	3.94(1H，t，J＝7.5Hz，H-24)
			25	70.78	-
26	27.43	1.25(3H，s，H-26)
			27	28.18	1.45(3H，s，H-27)
28	32.95	1.86(3H，s，H-28)
			29	20.42	1.69(3H，s，H-29)
30	18.52	0.81(3H，s，H-30)

^a峰重叠

【表2】

位置	13C-NMR	1H-NMR
			6-O-Glc
1′	104.08	4.91(1H，d，J＝7.7Hz，H-1′)
			2′	79.49	4.48(1H，m，H-2′)
3′	80.55	4.38(1H，m，H-3′)
			4′	73.05	4.16(1H，m，H-4′)
5′	79.94	4.15(1H，m，H-5′)
			6′	63.53	4.54(1H，m，H-6′a)，4.32(1H，m，H-6′b)
2′-O-Glc
			1″	104.32	6.02(1H，d，J＝7.8Hz，H-1″)
2″	76.34	4.18(1H，m，H-2″)
			3″	78.64	3.99(1H，m，H-3″)
4″	72.34	4.12(1H，m，H-4″)
			5″	79.11	4.27(1H，m，H-5″)
6″	63.93	4.54(1H，m，H-6″a)，4.32(1H，m，H-6″b)

[实验实施例1]糖酵解酶活性抑制功效的比较

通过进行以下的对多糖酵解酶活性的抑制的评估，以比较从人参种子提取物中分离出的人参皂苷的抑制血糖的功效。

利用从Sigma公司购入的胰腺中的α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶作为多糖酵解酶，测量从人参种子提取物中分离出的本发明一实例的新型人参皂苷GS#10和作为本发明的比较例的人参皂苷GS#01-GS#06的酶活性。为了测量α-淀粉酶活性，将0.1g的BSA、0.01g/L的NaN3、0.2857g的α-淀粉酶溶解于50mL的PBS(phosphate buffered saline，磷酸盐缓冲盐水)中以制备酶溶液，将5mM的对硝基苯基-α-D-麦芽糖苷(p-nitrophenyl-α-D-maltopentoglycoside)溶解于另外PBS中以制备底物溶液。将0.1mL的测试物质添加至0.5mL的酶溶液中，并在405nm下测量初始吸光度，向其中添加0.5mL的底物溶液并反应5分钟后，再次测量吸光度。通过两次反应的吸光度差异来测量酶活性的变化。除了消化酶(α-葡萄糖苷酶)与底物(对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷)不同以外，α-葡萄糖苷酶活性的测量方法与α-淀粉酶活性的测量方法相同。用于观察抑制酶活性的阳性对照组使用了Sigma公司出售的源自小麦种子的α-淀粉酶抑剂型和α-葡萄糖苷酶抑剂型的阿卡波糖(acarbose)。

α-淀粉酶活性示于图11，α-葡萄糖苷酶活性示于图12。在α-淀粉酶活性的情况下，除GS#06以外，均显示出显着的活性抑制功效，其中，特别是作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10对α-淀粉酶活性抑制功效最为突出。在α-葡萄糖苷酶的情况下，GS#05和GS#06没有显示出活性抑制功效，且与α-淀粉酶的情况相比，GS#01-GS#04也显示出较弱的活性抑制功效。但是，作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10，仍然显示出较高的对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果，因此可以确认GS#10对糖酵解的抑制效果最佳。这是由化学结构上的差异所引起的，这意味着在源自人参种子的人参皂苷中，所述本发明的新型人参皂苷PG-RT₈的降血糖功效最为优异，且优于现有的已知甾体皂苷(steroidal saponin)。

[实验实施例2]葡萄糖转运能力的比较

通过对血液中葡萄糖的细胞吸收的促进作用进行评估，以确认所述从人参种子提取物中分离的各人参皂苷对与血糖抑制功效相关的体内糖代谢所起的影响。

葡萄糖转运通过葡萄糖转运蛋白(glucose transporters，GLUT)实现，并且为了增加葡萄糖转运，必须增加葡萄糖转运蛋白的表达和向上述转运蛋白细胞膜的位置移动，即需要增加葡萄糖的细胞吸收。

将购买的3T1-L1脂肪细胞(ATCC)培养在添加了10％小牛血清(bovine calfserum,Hyclone公司)及1％青霉素/链霉素(Sigma公司)的DMEM培养基(Dulbecco'sModified Eagle's Medium,Sigma公司)中，在5％ CO2条件下进行培养。为了使脂肪祖细胞分化成脂肪细胞，将细胞大量填充于培养基中并培养48小时后，转移至添加了10％胎牛血清(fetal bovine serum(FBS)，Hyclone公司)和0.5mM的3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,Sigma公司)、1μM的地塞米松(dexamethasone,Sigma公司)、5μg/ml的胰岛素(Sigma公司)和1％青霉素/链霉素的DMEM培养基中再培养48小时。此后，将细胞进一步培养14天，同时以每隔两天用含有10％FBS和5μg/ml胰岛素、1％青霉素/链霉素的培养基进行替换，以获得完全分化的脂肪细胞。使用低葡萄糖DMEM(Sigma公司)培养基对分化后的脂肪细胞进行断食诱导，然后使用葡萄糖吸收测定试剂盒(glucose uptakeassay kit,abcam公司)观察葡萄糖吸收能力。使用被用作糖尿病治疗剂的二甲双胍(Sigma公司；10μM)作为用于测量血液中葡萄糖吸收的阳性对照，并且分别用10μM的从人参种子提取物中分离的作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10和作为本发明的比较例的人参皂苷GS#01-GS#06进行处理。此外，通过同时处理可以促进葡萄糖摄取胰岛素(10nM，Sigma公司)来测量胰岛素依赖性/非依赖性的葡萄糖转运能力。

其结果如图13所示，在材料单独处理组(-胰岛素)中，从人参种子提取物分离出的人参皂苷中仅有GS#01、GS#02、GS#03和GS#10显示出统计学上显著的葡萄糖转运促进作用，并且通过胰岛素处理(+胰岛素)可以进一步增强该效果。在作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10的情况下，相比于胰岛素单独处理组(-)，与二甲双胍相似，在与胰岛素组合处方时，葡萄糖转运也明显有增加，由此判断GS#10是可以促进胰岛素依赖性/非依赖性葡萄糖转运的良好材料。

[实验实施例3]糖代谢调节功效的比较

将本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10与作为本发明的比较例的红参指标成分人参皂苷Rg1、Rg3和Rb1(购自Sigma公司)的糖代谢调节功效进行了比较。此时，所述作为本发明的比较例的人参皂苷Rg3的化学结构如下所示。

[化学式2]

通过与实验实施例1和实验实施2相同的方法进行实验，将每种所述人参皂苷分别按1、10μM进行处理。

其结果如图14至图16所示，相比于作为红参指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3和Rb1，本发明的新型人参皂苷GS#10的多糖消化酶活性抑制功效和葡萄糖转运能力更为优异。

[实验实施例4]细胞毒性

使用细胞计数试剂盒(CCK，Cell Counting Kit)-8对存在本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10时的细胞生长进行评价，以排除人参皂苷通过细胞毒活性影响而对人体有益的功效的可能性。实验方法如下所述。

基于96孔板，将10μl的CCK-8试剂添加至培养中的SH-SY5Y细胞(Dojindo，MD，USA)中，并在37℃下放置2小时后，在450nm下测量吸光度。用每个样品相对于未处理样品的绝对光密度的百分比(％)来表示所述细胞生存力。此时，培养所述细胞的培养基中所含的作为本发明的实施例的新型人参皂苷GS#10的浓度分别为0.1、1、5、10、20、50μM。

其结果如图17所示，当作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10的浓度高达50μM的浓度时，也没有显示出细胞毒性。该结果表明，作为本发明一个实施例的新型人参皂苷可以对人体显示出有益的作用，同时对细胞的生存能力不存在不利影响。

[实验实施例5]脂质代谢抑制功效的比较1

通过进行脂质合成相关基因的表达的抑制功效的实验，以比较从所述人参种子提取物中分离出的各人参皂苷对脂质代谢的抑制功效，实验按如下所示进行。

将从国际生物资源中心(ATCC)购买的HepG2肝细胞置于含有10％胎牛血清(Hyclone公司)和1％青霉素/链霉素(Sigma公司)的改良型DMEM培养基(Dulbecco'sModified Eagle's Medium,Sigma公司)中，在5％ CO2的条件下进行培养。使用被用作降血脂药的非诺贝特(Fenofibrate；FF，Sigma公司)作为阳性对照组，对于该实验，对从人参种子中提取的7种人参皂苷(GS#01-GS#06，GS#10；全部为10μM)进行24小时处理后，收集细胞，使用Trizol^TM试剂(赛默飞世尔科技公司)提取RNA，并使用RevertAid^TM第一链cDNA合成试剂盒(赛默飞世尔科技公司)合成cDNA。使用Bio-Rad公司的CFX96实时定量PCR(qPCR)仪器可观察到，作为诱导脂质合成或积蓄的基因的SREBP1c(sterol-regulatory elementbinding protein 1c，固醇调节元件结合蛋白1c)、ACC(acetyl-CoA carboxylase，乙酰辅酶A羧化酶)和FAS(Fatty acid synthase，脂肪酸合成酶)的表达，如图18-20所示。

如图18至图20所示，在相同浓度下，与作为本发明的比较例的现有的人参皂苷的化合物1-6(GS#01-GS#06)相比，本发明的新型人参皂苷化合物10(GS#10)对脂质合成相关基因的表达抑制作用明显更高，因此，可以证实其在体内具有优异的抑制脂质合成或积蓄的作用。这是由化学结构上的差异所导致的，这意味着在源自人参种子的人参皂苷中，所述本发明的新型人参皂苷PG-RT₈调解或改善脂质代谢的功效最为优异，且优于现有的已知甾体皂苷。

另外，通过使用HepG2细胞，并按照如上所述的方法对7种人参皂苷(GS#01～GS#06，GS#10；全部为10μM)和对照组(非诺贝特，FF)进行处理后，用甘油三酸酯测定试剂盒(Triglyceride Assay Kit,Abcam公司)测定肝细胞中甘油三酸酯(TG)的含量，以研究源自人参种子的人参皂苷对脂肪合成相关基因表达的抑制是否参与实际的脂肪合成和积累，其测量结果如图21所示。其结果，证实了作为本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对肝细胞中脂质蓄积的抑制功效最为优异。

[实验实施例6]脂质代谢抑制功效的比较2

通过食物摄入的脂肪会被肠道中的胰脂肪酶分解并吸收。因此，为了降低血脂浓度，不仅需要抑制肝脏中的脂质代谢，还需要抑制小肠中的脂肪分解，因此，通过进行以下实验，以确定源自人参种子中的人参皂苷是否会影响脂肪的消化。

将从国际生物资源中心(ATCC)购买的HepG2肝细胞置于含有10％胎牛血清(Hyclone公司)和1％青霉素/链霉素(Sigma公司)的改良型DMEM培养基(Dulbecco'sModified Eagle'sMedium,Sigma公司)中，在5％ CO2的条件下进行培养。对作为所述细胞的阳性对照组的被用作胰脂肪酶抑剂型和抗肥胖剂的罗氏鲜(Xenical，Sigma公司)，及从人参种子中提取的7种人参皂苷(GS#01-GS#06，GS#10；均为10μM)进行1小时处理。然后使用胰脂肪酶活性测定试剂盒(Pancreatic Lipase Activity Assay Kit，Abcam公司)观察每种人参皂苷的脂肪酶活性抑制作用。

其结如图22所示，除了一部分现有的已知人参皂苷(GS#05，GS#06)之外，其他均显示出显著的对胰脂肪酶活性的抑制作用，尤其，其中作为本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)对脂肪酶活性的抑制作用是现有的人参皂苷的约2倍以上，因此效果最为优异。

[实验实施例7]脂质代谢抑制功效的比较3

按照与实验实施例5和实验实施例6相同的方法进行实验，以比较作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10(从人参种子提取物中分离)与作为本发明的比较例的红参指标成分的3种人参皂苷(Rg1，Rg3，Rb1；Sigma公司)的脂质代谢抑制功效。

在该情况下，分别用1μM，10μM的红参指标成分(人参皂苷Rg1、Rg3、Rb1；Sigma公司)对HepG2细胞进行处理，以观察脂质合成相关基因的表达和对脂质蓄积的抑制作用，同样地，也分别使用浓度为1、10μMde作为本发明人参皂苷的化合物10(GS#10)处理24小时。

脂质合成相关基因的表达如图23至25所示，肝细胞中甘油三酸酯的蓄积量如图26所示。最后，测量胰腺脂肪酶的活性，并示于图27中。如图23至图27所示，可以确认作为本发明的实施例的新型人参皂苷GS#10的脂质代谢抑制功效远远优于构成红参指标成分的3种人参皂苷。

[实验实施例8]胆固醇合成相关基因活性调节功效的比较1

通过进行以下实验，以比较所述从人参种子提取物中分离的各人参皂苷的对胆固醇合成相关基因活性的调节功效。

将从国际生物资源中心(ATCC)购买的HepG2肝细胞置于含有10％胎牛血清(Hyclone公司)和1％青霉素/链霉素(Sigma公司)的改良型DMEM培养基(Dulbecco'sModified Eagle's Medium,Sigma公司)中，并在5％ CO2的条件下进行培养。使用被用作降低HMG-CoA还原酶抑剂型家族的降脂剂、并可降低血液中胆固醇生成的辛伐他汀(Simvastatin；Sigma Aldrich；St.Louis,MO)作为阳性对照组。为了进行实验，将从人参种子中提取的7种人参皂苷(GS#01至GS#06，GS#10；全部为10μM)处理24小时，然后收集细胞并使用Trizol^TM试剂(赛默飞世尔科技公司)提取RNA后，使用RevertAid^TM第一链cDNA合成试剂盒(赛默飞世尔科技公司)合成cDNA。使用Bio-Rad公司的CFX96实时定量PCR(qPCR)仪器观察胆固醇合成的关键基因HMG-CoA(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-coenzyme A)还原酶的表达，如图28所示。按照同样的方法，通过细胞吸收LDL(low-density lipoprotein，低密度脂蛋白)，并观察起到降低血液中胆固醇数值作用的LDL受体(LDLR)的表达，如图29所示。

结果，源自人参种子的7种人参皂苷均显示出使HMG-CoA还原酶的表达降低的效果，其中，作为本发明的实施例的新型人参皂苷GS#10在表达抑制效果最为优异(图28)。在LDL受体(LDLR)的情况下，源自人参种子的7种人参皂苷中，现有的已知人参皂苷GS#1-6在表达量上没有显示出明显的变化，而与对照组(-)相比，作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10的表达量增加了约2倍以上(图29)。

LDLR由SREBP1a基因调节，而所述实验实施例1的SREBP1c参与葡萄糖代谢和脂肪酸合成，相反，与SREBP1c同族的转录因子SREBP1a则参与胆固醇代谢。在该实验中，观察到在源自人参种子的7种人参皂苷中的与胆固醇代谢有关的SREBP1a的表达。其结果，源自人参种子的7种人参皂苷中，现有的已知人参皂苷GS#1-6与SREBP1c的情况相同，也抑制了SREBP1a的表达，而本发明的新型人参皂苷GS#10对SREBP1a的表达不仅没有抑制作用，反而有促进的趋势(图30)。该结果也不同于阳性对照组。上述结果表明，只有作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10可以通过抑制胆固醇合成以及促进胆固醇细胞内吸收的双重作用机制，从而有效降低血液胆固醇数值。

[实验实施例9]胆固醇合成相关基因活性调节功效的比较2

按照与实验实施例8相同的方法进行实验，以比较作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10和作为本发明的比较例的红参指标成分的3种人参皂苷(Rg1，Rg3，Rb1；Sigma公司)对胆固醇合成相关基因活性的调节功效分别用1μM，10μM浓度的红参指标成分(人参皂苷Rg1、Rg3、Rb1；Sigma公司)及新型人参皂苷GS#10对HepG2细胞进行24小时处理。

其结果，如图31至33所示，作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10的抑制胆固醇合成和促进细胞内转运效果最为优异。这意味着，与3种红参指标人参皂苷相比，作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10具有更优异的胆固醇代谢调节功效。

[实验实施例10]脂肪细胞分化抑制功效的比较1

通过进行如下的脂肪细胞分化的抑制功效实验，以比较从所述人参种子提取物中分离出的各人参皂苷的抗肥胖功效。

将从国际生物资源中心(ATCC)购买的3T3-L1脂肪细胞置于含有10％胎牛血清(Hyclone公司)和1％青霉素/链霉素(Sigma公司)的改良型DMEM培养基(Dulbecco'sModified Eagle's Medium,Sigma公司)中，在5％ CO2的条件下进行培养。为了使脂肪祖细胞分化成脂肪细胞，将细胞大量填充于培养基中并培养48小时后，转移至添加了10％胎牛血清(fetal bovine serum，Hyclone公司)和0.5mM的3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,Sigma公司)、1μM的地塞米松(dexamethasone,Sigma公司)、5μg/ml的胰岛素(Sigma公司)和1％青霉素/链霉素的改良型DMEM培养基中再培养48小时。在培养的48小时内，将从人参种子中提取的7种人参皂苷(GS#01-GS#06，GS#10)试剂分别以10μM进行处理，以影响脂肪细胞的分化。将20μM的作为PPARγ拮抗剂的双酚A二缩水甘油醚(Bisphenol ADiglycidyl Ether(BADGE),Sigma公司)作为用于确认抑制脂肪细胞分化的效果的对照组。此后，将细胞进一步培养10天，同时每隔两天用含有10％FBS和5μg/ml胰岛素、1％青霉素/链霉素的培养基进行替换，以诱导脂肪细胞的分化。

用甲醛溶液(Sigma公司)对分别用所述7种人参皂苷处理的分化后的脂肪细胞进行固定，并用油红O染色溶液(Sigma公司)进行染色后，用异丙醇(Sigma公司)使其溶解，并通过在490nm下测量吸光度来定量被染色的脂肪的量。定量结果示于图34。如图34所示，在人参种子中提取的7种人参皂苷(GS#01～GS#06，GS#10；全部为10μM)中，除一部分(GS#05,GS#06)以外，其他全部显示出体内的脂肪量有所减少，其中，作为本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)的具有最优异的脂肪抑制功效。

通过与上述相同的方法分化脂肪细胞后，观察作为脂肪细胞标记基因的PPARγ(Peroxisome proliferator-activated receptor gamma，过氧化物酶体增殖物激活受体γ)和CD36的表达。使用Trizol^TM试剂(赛默飞世尔科技公司)提取RNA，并使用RevertAid^TM第一链cDNA合成试剂盒(赛默飞世尔科技公司)合成cDNA。使用Bio-Rad公司的CFX96实时定量PCR(qPCR)仪器对每个基因的表达量进行定量，其结果如图35至37所示。可观察到与图34中所示的结果相同的现有的人参皂苷GS#01-GS#04和作为本发明的新型人参皂苷的化合物10(GS#10)的对脂肪细胞分化的抑制效果，其中，也可确定，与源自人参种子的现有的人参皂苷相比，本发明的新型人参皂苷化合物10(GS#10)的脂肪细胞分化抑制效果更为优异。

[实验实施例11]抑制脂肪细胞分化功效的比较2

通过与实验实施例10相同的方法，对脂肪细胞分化的抑制功效进行比较，并将作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10(从人参种子提取物中分离)和作为本发明的比较例的红参指标成分的3种人参皂苷(Rg1，Rg3，Rb1；Sigma公司)进行比较。此时，所述各人参皂苷的浓度为1、10μM。

脂肪细胞中积累的甘油三酸酯的量如图38所示，脂肪细胞标记基因的表达如图39至41所示。可以看出，与作为红参指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3、Rb1相比，作为本发明实施例的新型人参皂苷GS#10的抑制脂肪细胞分化和抑制脂肪积累的功效更为显著且优异。

[实验实施例12]增加血流量功效的比较

血管内皮细胞中生成的一氧化氮(nitric oxide；NO)起到通过使血管扩张从而增加血流量的作用，因此，如果可以增加血管内皮细胞中一氧化氮的生成量，则意味着可以通过增加血流量来改善血液循环。

因为一氧化氮是通过eNOS(epithelial nitric oxide synthase，上皮型一氧化氮合酶)生成的，因此在本实验中，确认了作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10是否可以通过调节血管内皮细胞中的eNOS活性来促进一氧化氮的产生。具体地，从国际生物资源中心(ATCC)购买人体血管内皮内皮细胞(HUVEC，human unbilical veinendothelial cell)并进行培养，然后用浓度为1至10μg/ml的新型人参皂苷GS#10对其进行处理，测量一氧化氮(NO)的生成量。其结果如图42所示，作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10显示以浓度依赖性方式来增加NO的生成。

接下来，对所述新型人参皂苷GS#10与作为本发明的比较例的从人参种子提取物中分离的现有的人参皂苷GS#01-GS#06的增加NO的生成的功效进行比较。

通过与上述相同的方法，在人体血管内皮细胞中将作为比较例的人参皂苷GS#01-GS#06以10μg/ml的浓度进行处理，其结果如图43所示，作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10比使NO生成量增加的效果明显高于现有的人参皂苷GS#01-GS#06。尤其，新型人参皂苷GS#10比通常与具有出色的NO生成能力的人参皂苷Re(GS#03)相比，新型人参皂苷GS#10表现出约2倍以上的更为优异的增加NO生成量功效。这是由于化学结构的差异产生的，这意味着在源自人参种子的人参皂苷中，本发明的新型人参皂苷PG-RT8的血液循环改善能力尤为优异。

[实验实施例13]血管抗衰老能的比较

在通过增加血管内皮细胞的存活率来防止或延缓血管衰老时，由于可以维持血管的功能并且可以防止或改善血管的弹性降低，因此可以改善血液循环。

由此，在本实验中，确认了作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10是否可以提高血管内皮细胞的存活率。具体地，从国际生物资源中心(ATCC)购买人体血管内皮细胞(HUVEC，human unbilical vein endothelial cell)并进行培养，然后用浓度为1-10μg/ml的新型人参皂苷GS#10对其进行处理，通过MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑，3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide)进行分析以观察细胞死亡。其结果如图44所示，作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10显示出无论浓度如何，都会提高HUVEC的存活率。

然后，对所述新型人参皂苷GS#10与作为本发明的比较例的从人参种子提取物中分离的现有的人参皂苷GS#01-GS#06的增加血管内皮细胞存活率的功效进行了比较。

通过与上述相同的方法，在人体血管内皮细胞中将作为比较例的人参皂苷GS#01-GS#0610μg/ml的浓度进行处理，并通过MTT分析，其结果如图45所示，作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10的增加血管内皮细胞存活率的功效最优异。

[实验实施例14]血液循环改善功效的比较

对作为本发明的一个实施例的新型人参皂苷GS#10，与作为本发明的比较例的红参指标成分的3种人参皂苷Rg1，Rg3，Rb1(购自Sigma公司)的增加血流量及血管抗衰老的功效进行了比较。

以与实验实施例12和实验实施例13相同的方法进行实验，其中，将各人参皂苷的浓度分别处理为10μg/ml。

其结果，如图46和47所示，与作为红参指标成分的人参皂苷Rg1、Rg3、Rb1相比，作为本发明实施例的新型人参皂苷GS#10的通过提高一氧化氮(NO)生成增加血流量的能力，以及通过提高血管内皮细胞(HUVEC)存活率来预防血管衰老的功效更为显著且优异。

以下将描述根据本说明书的一个实施例的组合物的剂型实施例，但是也可以将其应用于各种其他剂型，其仅旨在详细地说明本说明书，而并非限制本说明书。

[剂型实施例1]柔肤化妆水(柔肤乳液)

根据常规方法，按照下表中所示的组分制备柔肤化妆水。

【表3】

配制成分	含量(重量％)
		PG-RT₈	0.1
甘油	3.0
		丁二醇	2.0
丙二醇	2.0
		羧基乙烯基聚合物	0.1
PEG 12壬基苯基醚	0.2
		聚山梨酯80	0.4
乙醇	10.0
		三乙醇胺	0.1
防腐剂、着色剂、香料	适量
		纯净水	余量

[剂型实施例2]润肤化妆水(润肤乳液)

根据常规方法，按照下表所示的组分制备润肤化妆水。

【表4】

配制成分	含量(重量％)
		PG-RT₈	0.1
甘油	3.0
		丁二醇	3.0
丙二醇	3.0
		羧基乙烯基聚合物	0.1
蜂蜡	4.0
		聚山梨酯60	1.5
辛酸/癸酸甘油三酯	5.0
		角鲨烷	5.0
花生四烯酸	1.5
		液体石蜡	0.5
鲸蜡硬脂醇	1.0
		三乙醇胺	0.2
防腐剂、着色剂、香料	适量
		纯净水	余量

[剂型实施例3]按摩霜

根据常规方法，按照下表所示的组分制备按摩霜。

【表5】

[剂型实施例4]片剂

将100mg人参皂苷PG-RT₈、400mg乳糖、400mg玉米淀粉和2mg硬脂酸镁进行混合，然后按照常规方法进行压片以制备片剂。

[剂型实施例5]胶囊

将100mg人参皂苷PG-RT₈、400mg乳糖、400mg玉米淀粉和2mg硬脂酸镁进行混合，然后按照常规方法填充至明胶胶囊中以制备胶囊。

[剂型实施例6]颗粒

将50mg人参皂苷PG-RT₈、250mg无水葡萄糖和550mg淀粉进行混合，使用流化床制粒机模制成颗粒，然后填充到包物中。

[剂型实施例7]饮剂

将50mg人参皂苷PG-RT8，10g葡萄糖，0.6g柠檬酸和25g液体低聚糖进行混合，并向其中加入300ml纯净水，每瓶注入200ml。装瓶后，在130℃下进行4-5秒灭菌来制备饮剂。

[剂型实施例11]注射剂

根据常规方法，按照下表中的组分制备注射剂。

【表8】

配制成分	含量
		PG-RT₈	10-50mg
注射用无菌蒸馏水	适量
		pH调节剂	适量

本发明可以提供以下实施方式作为实施例。

第1实施方式可以提供(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇((20S,24R)-6-O-β-D-glucopyranosyl(1->2)-β-D-glucopyranoside-dammar-3-one-20,24-epoxy-6a,12b,25-triol)、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物，在制备用于调节代谢和改善血液循环中的一种或多种的组合物中的用途。

第2实施方式可提供根据第1实施方式所述的用途，所述(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇具有以下化学式1的结构：

[化学式1]

第3实施方式可提供根据第1实施方式所述的用途，所述(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇提取自人参种子。

第4实施方式可提供根据第1至3中任一个实施方式所述的用途，所述(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物具有降低血糖的作用。

第5实施方式可提供根据第1至4中任一个实施方式所述的用途，所述(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物抑制血液中糖的分解。

第6实施方式可提供根据第1至5中任一个实施方式所述的用途，所述(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物促进细胞对血液中葡萄糖的吸收。

第7实施方式可提供根据第1至6中任一个实施方式所述的用途，所述组合物用于预防或治疗糖尿病或糖尿病并发症。

第8实施方式可提供根据第1至7中任一个实施方式所述的用途，所述调节代谢包括调节血糖、调节或抑制脂质代谢、调节胆固醇、抗肥胖中的一种或多种。

第9实施方式可提供根据第1至8中任一个实施方式所述的用途，所述组合物用于预防或改善选自高血压、糖尿病、高脂血症、心肌梗塞、心绞痛、高甘油三酯血症、动脉硬化及高胆固醇血症中的一种或多种。

第10实施方式可提供根据第1至9中任一个实施方式所述的用途，所述组合物用于抑制脂肪细胞的分化。

第11实施方式可提供根据第1至10中任一个实施方式所述的用途，所述组合物用于抑制体内脂质合成或蓄积。

第12实施方式可提供根据第1至11中任一个实施方式所述的用途，所述组合物用于增加血流量。

第13实施方式可提供根据第1至12中任一个实施方式所述的用途，所述组合物用于改善皮肤气色。

第14实施方式可提供根据第1至13中任一个实施方式所述的用途，所述(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物的含量占所述组合物总重量的0.0001至99.9重量％。

第15实施方式可提供根据第1至14中任一个实施方式所述的用途，所述(20S，24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20，24-环氧-6a，12b，25-三醇、其药学上可接受的盐、其水合物、或其溶剂合物的剂量为0.05mg/kg/日至10g/kg/日。

第16实施方式可提供根据第1至15中任一个实施方式所述的用途，其中，所述组合物为皮肤外用剂组合物。

第18实施方式可提供根据第1至17中任一个实施方式所述的用途，其中，所述组合物为药物组合物。

第19实施方式可提供根据第1至18中任一个实施方式所述的用途，其中，所述组合物为化妆品组合物。

以上公开的实施方式仅为了描述本发明，以上描述并不限制本发明的范围。因此，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，本领域技术人员可以进行各种修改、变化和替代。

Claims

1.(20S,24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a,12b,25-三醇或其药学上可接受的盐在制备用于调节代谢及改善血液循环中的一种或多种的组合物中的用途，其中，所述调节代谢包括调节血糖、调节或抑制脂质代谢、抗肥胖中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述(20S,24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a,12b,25-三醇提取自人参种子。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述(20S,24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a,12b,25-三醇或其药学上可接受的盐能降低血糖。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述(20S,24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a,12b,25-三醇或其药学上可接受的盐能抑制血液中糖的分解。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述(20S,24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a,12b,25-三醇或其药学上可接受的盐能促进细胞对血液中葡萄糖的吸收。

6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物用于预防或治疗糖尿病或糖尿病并发症。

7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物用于预防或改善选自高血压、糖尿病、高脂血症、心肌梗塞、心绞痛及动脉硬化中的一种或多种疾病。

8.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物用于抑制脂肪细胞的分化。

9.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物用于抑制体内脂质合成或蓄积。

10.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物用于增加血流量。

11.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物用于改善皮肤气色。

12.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述(20S,24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a,12b,25-三醇或其药学上可接受的盐的含量占所述组合物总重量的0.0001至99.9重量％。

13.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述(20S,24R)-6-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1->2)-β-D-吡喃葡萄糖苷-达玛-3-酮-20,24-环氧-6a,12b,25-三醇或其药学上可接受的盐的剂量为0.05mg/kg/日至10g/kg/日。

14.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物为药物组合物。