CN110996937A - 包含dgla的药物组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本公开提供了包含DGLA的可口服递送的药物组合物，以及使用所述药物组合物治疗多种病状和病症的方法。

Description

包含DGLA的药物组合物及其用途

优先权要求

本申请要求于2017年5月19日提交的美国临时专利申请序列号62/508,818的优先权，其全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本申请总体上涉及包含DGLA的药物组合物及其使用方法。

背景技术

二均γ亚麻酸(DGLA)是人体中作为γ亚麻酸(GLA)的延伸产物天然存在的必需脂肪酸。GLA又是亚油酸的去饱和产物。DGLA的软明胶封装具有挑战性，因为它易于氧化成醛，醛可与胶囊壳中明胶聚合物中的氨基相互作用。由于明胶聚合物的交联，这可以导致药物释放减慢。

发明内容

本公开提供了包含DGLA的可口服递送的药物组合物，以及使用所述药物组合物治疗多种病状和病症的方法。

一方面，本公开提供了在患有中度至重度特应性皮炎且具有正常嗜酸性粒细胞计数的受试者中治疗特应性皮炎的方法，该方法包括向受试者口服施用包含DGLA或其衍生物的药物组合物。

另一方面，本公开提供了在有需要且嗜酸性粒细胞计数小于0.3x10⁹个/L的受试者中降低以下的至少一项的方法：研究者总体评估(IGA)水平，湿疹面积与严重程度指数(EASI)，受特应性皮炎影响的解剖部位的面积百分比，特应性皮炎评分(SCORAD)，受特应性皮炎影响的体表面积，皮肤病生活质量指数(DLQI)，面向患者的湿疹测量(POEM)或视觉模拟量表(VAS)瘙痒评分，该方法包括向受试者口服施用包含DGLA或其衍生物的药物组合物。

另一方面，本公开提供了用于治疗病状的包含DGLA或其衍生物的药物组合物，其中患有该病状的部分患者具有如实验室参考范围所定义的正常嗜酸性粒细胞计数。

另一方面，本公开提供了一种包含DGLA或其衍生物的药物组合物用于治疗嗜酸性粒细胞计数小于约0.3x10⁹个/L的受试者的一种或多种病状的用途。

在一个实施方案中，每天按足以提供约2g DGLA或其衍生物的量施用药物组合物，持续至少约8周的时间。在另一个实施方案中，按足以提供高达4g DGLA或其衍生物的量施用药物组合物，持续至少约8周的时间。在另一个实施方案中，每天按足以提供约0.2至约3gDGLA或其衍生物的量向受试者施用药物组合物。在另一个实施方案中，每天按足以提供约0.5、约1个或约2g DGLA或其衍生物的量向受试者施用药物组合物。在另一个实施方案中，每天按足以提供约2g DGLA或其衍生物的量向受试者施用药物组合物。

在一个实施方案中，向受试者施用DGLA或其衍生物，持续至少约2周，至少约4周或至少约8周的时间。

在一个实施方案中，受试者的EASI评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

在一个实施方案中，受试者的VAS评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％或超过约60％。

在一个实施方案中，受试者的SCORAD评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

在一个实施方案中，受试者的IGA评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％或超过约60％。

在一个实施方案中，在患者的样品中，IGA反应者的比例介于20％至70％之间。如果患者的IGA评分比基线降低2分或更多，并且在治疗期结束时评分为0或1，则将该患者视为IGA反应者。

在一个实施方案中，为受试者的受特应性皮炎影响的体表面积分配体表面积(BSA)评分。在另一个实施方案中，受试者的BSA评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％或超过约60％。

在一个实施方案中，受试者的DLQI评分与基线相比降低约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

在一个实施方案中，受试者的POEM评分与基线相比降低约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

在一个实施方案中，由所述VAS计算瘙痒水平和/或瘙痒Δ。在另一个实施方案中，受试者的瘙痒水平与基线相比降低约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或超过约90％。在另一个实施方案中，受试者的瘙痒Δ为约30％、约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

在一个实施方案中，所述受试者是儿科受试者。

在一个实施方案中，所述受试者是成年受试者。

在一个实施方案中，受试者的嗜酸性粒细胞计数是基于和实验室参考水平的比较而确定的。

在一个实施方案中，正常嗜酸性粒细胞计数小于约0.2x10⁹个/L，小于约0.25x10⁹个/L，小于约0.3x 10⁹个/L，小于约0.4x 10⁹个/L，小于约0.5x 10⁹个/L，小于0.6x 10⁹个/L，小于0.7x 10⁹个/L或小于约0.8x 10⁹个/L。

在一个实施方案中，所述病状是哮喘、特应性皮炎、慢性鼻腔鼻窦炎或其组合。在一个实施方案中，所述病状是慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、特应性皮炎、慢性鼻腔鼻窦炎或其组合。

在一个实施方案中，慢性鼻窦炎包括具有鼻息肉(CRSwNP)的慢性鼻窦炎。

在一个实施方案中，具有鼻息肉(CRSwNP)的慢性鼻窦炎包括非嗜酸性亚型。

在一个实施方案中，特应性皮炎包括具有任何EASI、VAS、SCORAD、IGA、BSA、DLQI和/或POEM评分的特应性皮炎。

在一个实施方案中，所述一种或多种病状是特应性病状。

在一个实施方案中，特应性病状包括特应性皮炎。

在一个实施方案中，所述一种或多种病状包括慢性阻塞性肺疾病(COPD)。

在一个实施方案中，所述一种或多种病状包括血管炎。

在一个实施方案中，所述血管炎包括大血管炎(LVV)、中血管炎(MVV)、小血管炎(SVV)、可变血管炎(VVV)、单器官血管炎(SOV)和全身性疾病相关的血管炎。

在一个实施方案中，受试者的嗜酸性粒细胞水平高于正常嗜酸性粒细胞水平，低于正常嗜酸性粒细胞水平或其组合。

在一个实施方案中，药物组合物包含呈液体或半液体形式的DGLA或其衍生物。在一个实施方案中，本公开提供了一种包含DGLA的药物组合物。在一个实施方案中，将该组合物封装在胶囊壳中。在一个实施方案中，本公开提供了一种包含封装在胶囊壳中的DGLA的药物组合物，所述胶囊壳包含明胶、d-山梨糖醇和1，4-脱水山梨糖醇。在一个实施方案中，将约500mg至约1g的DGLA或其衍生物封装在胶囊壳中。在另一个实施方案中，将约200mg至约1g的DGLA或其衍生物封装在胶囊壳中。

下面进一步详细描述本发明的这些和其他实施方案。

附图说明

参考以下附图可以更好地理解本公开的许多方面。附图中的组件不一定按比例绘制。相反，重点放在清楚地说明本公开的原理上。

图1显示了对于DGLA和安慰剂而言，湿疹面积与严重程度指数相对于基线的变化。

图2显示了对于DGLA和安慰剂而言，瘙痒视觉模拟量表相对于基线的变化。

图3显示了对于DGLA和安慰剂而言，特应性皮炎评分(SCORAD)相对于基线的变化。

图4显示了对于DGLA和安慰剂而言，受特应性皮炎影响的体表面积的变化。

图5显示了第8周研究者总体评估(IGA)评分的总群体变化。

图6显示了第8周IGA评分的中等群体变化。

图7显示以10mg/kg/天连续7天管饲阿司匹林(aspirin)后，静脉注射去氧肾上腺素后平均动脉压(mmHg)的变化。

图8显示连续7天管饲50mg/kg的DGLA+10mg/kg的阿司匹林后，静脉注射去氧肾上腺素后平均动脉压(mmHg)的变化。

图9显示连续7天管饲500mg/kg的DGLA并共同施用10mg/kg的阿司匹林后，静脉注射去氧肾上腺素后平均动脉压(mmHg)的变化。

图10显示了六个不同的管饲组，连续七天后的基线平均动脉压。

图11显示了六个不同的管饲组，连续七天后静脉注射20μk/kg的去氧肾上腺素的平均动脉压。

图12按剂量群组(单剂量，PK群体)显示了平均血浆游离DGLA浓度(ng/mL，线性图)。

图13按剂量群组(单剂量，PK群体)显示了平均血浆游离DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

图14按剂量群组(单剂量，PK群体)显示了平均血浆总DGLA浓度(ng/mL，线性图)。

图15按剂量群组(单剂量，PK群体)显示了平均血浆总DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

图16按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均血浆游离DGLA浓度(ng/mL，线性图)。

图17按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均血浆游离DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

图18按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均血浆总DGLA浓度(ng/mL，线性图)。

图19按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均血浆总DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

图20按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均皮肤疱液游离DGLA浓度(ng/mL，线性图)。

图21按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均皮肤疱液游离DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

图22按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均皮肤疱液总DGLA浓度(ng/mL，线性图)。

图23按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均皮肤疱液总DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

图24按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了血浆和皮肤疱液中的平均游离DGLA浓度(ng/mL，线性图)。

图25按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了血浆和皮肤疱液中的平均游离DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

图26按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了血浆和皮肤疱液中的平均总DGLA浓度(ng/mL，线性图)。

图27按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了血浆和皮肤疱液中的平均总DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

图28按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均血浆二氢睾酮浓度(ng/mL，线性图)。

图29按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均血浆二氢睾酮浓度(ng/mL，对数线性图)。

图30汇总了按种族划分的嗜酸性粒细胞浓度。图30A显示了8周口服DGLA治疗过程中嗜酸性粒细胞浓度的变化(x10³μg/ml)。图30B和30C分别描绘了非裔美国人和高加索人患者在DGLA治疗期间的特定时间点的统计结果。

图31显示了对于口服DGLA治疗的患者(图31A)和安慰剂治疗的患者(图31B)而言，按种族划分的反应者与非反应者。

图32汇总了对于基于治疗(口服DGLA治疗的患者(图32B)和安慰剂治疗的患者(图32C))区分开的非裔美国人和高加索人反应者(图32A)的所有反应者数据。

图33汇总了反应者和非反应者(总群体)中的嗜酸性粒细胞浓度。图30B和30C分别描绘了反应者和非反应者在DGLA治疗期间的特定时间点的统计结果。

图34汇总了口服DGLA治疗的反应者和非反应者中的嗜酸性粒细胞浓度。

图35汇总了安慰剂治疗的反应者和非反应者中的嗜酸性粒细胞浓度。

图36显示了按主要研究终点分层的IGA反应者，即中度群体、重度群体和正常嗜酸性粒细胞群体的百分比。

图37显示了按总研究群体(ITT，图37A)和具有正常嗜酸性粒细胞水平(正常嗜酸性粒细胞，图37B)并且根据治疗类型区分开的参与者(口服DGLA治疗的患者和安慰剂治疗的患者)分层的IGA相对于基线的百分比变化。

图38显示了按总研究群体(ITT，图38)和具有正常嗜酸性粒细胞水平(正常嗜酸性粒细胞，图38B)并且根据治疗类型区分开的参与者(口服DGLA治疗的患者和安慰剂治疗的患者)分层的EASI相对于基线的百分比变化。

图39显示了按总研究群体(ITT，图39A)和具有正常嗜酸性粒细胞水平(正常嗜酸性粒细胞，图39B)并且根据治疗类型区分开的参与者(口服DGLA治疗的患者和安慰剂治疗的患者)分层的瘙痒VAS相对于基线的百分比变化。

图40显示了按总研究群体(ITT，图40A)和具有正常嗜酸性粒细胞水平(正常嗜酸性粒细胞，图40B)并且根据治疗类型区分开的参与者(口服DGLA治疗的患者和安慰剂治疗的患者)分层的SCORAD相对于基线的百分比变化。

图41显示了按总研究群体(ITT，图41A)和具有正常嗜酸性粒细胞水平(正常嗜酸性粒细胞，图41B)并且根据治疗类型区分开的参与者(口服DGLA治疗的患者和安慰剂治疗的患者)分层的BSA相对于基线的百分比变化。

图42显示了按总研究群体(ITT，图42A)和具有正常嗜酸性粒细胞水平(正常嗜酸性粒细胞，图42B)并且根据治疗类型区分开的参与者(口服DGLA治疗的患者和安慰剂治疗的患者)分层的DLQI相对于基线的百分比变化。

图43显示了按总研究群体(ITT，图43A)和具有正常嗜酸性粒细胞水平(正常嗜酸性粒细胞，图43B)并且根据治疗类型区分开的参与者(口服DGLA治疗的患者和安慰剂治疗的患者)分层的POEM相对于基线的百分比变化。

具体实施方式

虽然本发明能够以各种形式实施，但是以下对几个实施方案的描述是在理解将本公开认为是本发明的示例的前提下进行的，并非旨在将本发明限制于说明的特定实施方案。提供标题仅仅是为了方便起见，而不应解释为以任何方式限制本发明。在任何标题下示出的实施方案均可与在任何其他标题下示出的实施方案组合。

除非另外明确指出，否则本申请中指定的各种定量值中对数值的使用表示为近似值，好像在规定范围内的最小值和最大值前面均有单词“约”一样。这样，与规定值的细微偏差可用于获得与规定值基本上相同的结果。同样，范围的公开旨在作为连续范围，包括所列举的最小值和最大值之间的每个值，以及可以由这些值形成的任何范围。本文还公开了可以通过将列举的数值划分为任何其他列举的数值而形成的任何和所有比率(以及任何此类比率的范围)。因此，本领域技术人员将认识到，许多此类比率、范围和比率的范围可以由本文呈现的数值明确地推导出来；并且，在所有情况下，此类比率、范围和比率的范围代表本发明的各个实施方案。

组合物

在各个实施方案中，本公开提供了包含DGLA或其衍生物的可口服递送的药物组合物。本文中的术语DGLA是指游离酸形式的DGLA。除了或代替DGLA，本发明的组合物还可包含DGLA衍生物。此类衍生物包括烷基酯；低级烷基酯，例如DGLA甲酯或乙酯；或甘油三酯形式的DGLA。在一个实施方案中，本公开提供了一种药物组合物，其包含封装在胶囊壳中的DGLA或其衍生物。在一个实施方案中，将约500mg至约1g的DGLA或其衍生物封装在胶囊壳中。

在一个实施方案中，胶囊壳包含明胶(例如，具有较低分子量的明胶RXL或石灰骨明胶)。在另一个实施方案中，胶囊壳包含已通过蛋白水解酶处理以切割明胶图案并有效降低其分子量的明胶RXL。在另一个实施方案中，药物组合物包含D-山梨糖醇和1，4-脱水山梨糖醇的DGLA酯。在一个实施方案中，胶囊壳包含(a)明胶和(b)选自d-山梨糖醇和1，4-脱水山梨糖醇中的一种或多种的增塑剂。在一个实施方案中，明胶如US 7,485,323中所述，并且特此通过引用整体并入本文。

在一个实施方案中，增塑剂包含量为20％-30％，例如约24％至28％(以干基计)的1，4-脱水山梨糖醇，和约30％-50％，例如，约35％至45％(以干基计)的D-山梨糖醇含量。

在一些实施方案中，胶囊壳还包含甘油、纯净水、二氧化钛、中链甘油三酯和卵磷脂。

在各个实施方案中，DGLA或衍生物存在于本发明的组合物中，其量为约50mg至约5000mg，约75mg至约2500mg，或约100mg至约1000mg，例如约75mg，约100mg，约125mg，约150mg，约175mg，约200mg，约225mg，约250mg，约275mg，约300mg，约325mg，约350mg，约375mg，约400mg，约425mg，约450mg，约475mg，约500mg，约525mg，约550mg，约575mg，约600mg，约625mg，约650mg，约675mg，约700mg，约725mg，约750mg，约775mg，约800mg，约825mg，约850mg，约875mg，约900mg，约925mg，约950mg，约975mg，约1000mg，约1025mg，约1050mg，约1075mg，约1100mg，约1025mg，约1050mg，约1075mg，约1200mg，约1225mg，约1250mg，约1275mg，约1300mg，约1325mg，约1350mg，约1375mg，约1400mg，约1425mg，约1450mg，约1475mg，约1500mg，约1525mg，约1550mg，约1575mg，约1600mg，约1625mg，约1650mg，约1675mg，约1700mg，约1725mg，约1750mg，约1775mg，约1800mg，约1825mg，约1850mg，约1875mg，约1900mg，约1925mg，约1950mg，约1975mg，约2000mg，约2025mg，约2050mg，约2075mg，约2100mg，约2125mg，约2150mg，约2175mg，约2200mg，约2225mg，约2250mg，约2275mg，约2300mg，约2325mg，约2350mg，约2375mg，约2400mg，约2425mg，约2450mg，约2475mg或约2500mg。在任何此类实施方案中，该组合物还可包含D-山梨糖醇和1，4-脱水山梨糖醇的DGLA酯。

在一个实施方案中，本发明的组合物含有按重量计不超过约10％，不超过约9％，不超过约8％，不超过约7％，不超过约6％，不超过约5％，不超过约4％，不超过约3％，不超过约2％，不超过约1％，或不超过约0.5％的脂肪酸，除DGLA以外的脂肪酸。

在一个实施方案中，本发明的组合物独立地包含不超过15％，不超过10％，不超过5％，不超过4％，不超过3％，不超过2％或不超过1％的以下一种或多种脂肪酸：C16∶0、16∶3n-3、C18∶0、C18∶1n-7、C18∶1n-9、C18∶2n-6、C18∶3n-6、19∶3、20∶1n-9、20∶2n-6、20∶2n-3+DGLA异构体、C20∶3n-3、20∶4n-3、7，11，14-二十碳三烯酸甲酯、C20∶4n-6、C20∶5n-3、C22∶0、22∶5n-3和/或C24∶0。

在另一个实施方案中，DGLA或其衍生物按重量计占本发明组合物中存在的全部脂肪酸的至少约30％，约40％，约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约90％，至少约95％，至少约97％，至少约98％，至少约99％或100％。

在一个实施方案中，在40℃/75％RH下储存约1个月，约2个月或约3个月后，本发明的组合物当置于用水作为介质的标准崩解试验中时，例如，如USP2040(膳食补充剂的崩解和溶解)中所述，DGLA释放速率小于约60分钟，小于约50分钟，小于约40分钟，小于约30分钟或小于20分钟。

在一个实施方案中，在40℃/75％RH下储存约1个月、约2个月、约3个月或约6个月后，本发明的组合物包含按所有脂肪酸的重量计少于约5％的DGLA酯，按所有脂肪酸的重量计少于约4％的DGLA酯，按所有脂肪酸的重量计少于约3％的DGLA酯，按所有脂肪酸的重量计少于约2％的DGLA酯，或按所有脂肪酸的重量计少于约1％的DGLA酯。

方法

本发明的任何组合物，包括上文所述的组合物或可以通过组合本公开的各个实施方案配制的组合物，可以用于治疗或预防：皮肤病症和疾病，包括寻常痤疮、痤疮酒渣鼻、特应性皮炎(例如具有任何EASI、VAS、SCORAD、IGA、BSA、DLQI和/或POEM评分的特应性皮炎)、牛皮癣、瘙痒/发痒、辐射防护、干燥皮肤、光滑皮肤、健康皮肤、抗衰老、光保护和特应性病状；泌尿系统病症和疾病，包括膀胱癌、膀胱膨出、血尿、间质性膀胱炎、神经源性膀胱、佩罗尼氏病(Peyronie’s disease)、前列腺疾病、失禁、尿路感染和输尿管反流；肾脏病症和疾病，包括肾衰竭、急性肾损伤、慢性肾脏疾病和多囊性肾脏疾病；风湿病，包括强直性脊柱炎、纤维肌痛、痛风、感染性关节炎、狼疮、骨关节炎、风湿性多肌痛、银屑病关节炎、反应性关节炎、类风湿性关节炎、硬皮病；呼吸系统病症，包括炎症性肺病、呼吸道感染、胸膜腔疾病、肺血管疾病、肺炎、肺栓塞，哮喘、慢性鼻腔鼻窦炎(包括鼻息肉，如CRSwNP和非嗜酸性亚型)、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和肺癌；和心血管疾病，包括急性心肌缺血事件、急性心肌梗死、心绞痛、心律失常、心房颤动、动脉粥样硬化、心房纤维性颤动、心功能不全、心脑血管疾病、慢性心力衰竭、慢性稳定型心绞痛、充血性心力衰竭、冠心病、冠心病、深静脉血栓形成、多尿症、糖尿病、糖尿病性神经病、糖尿病受试者的舒张期功能障碍、水肿、原发性高血压、最终肺栓塞、脂肪肝、心脏病、心力衰竭、纯合子家族性高胆固醇血症(HoFH)、纯合子家族性谷固醇血症、高胆固醇血症、高脂血症、高血压、高甘油三酯血症、代谢综合征、混合血脂异常、中度至轻度心力衰竭、心肌梗塞、肥胖管理、阵发性心房/动脉纤维性颤动/颤动/扑动、阵发性室上性心动过速(PSVT)、特别严重或快速发作的水肿、血小板凝集、原发性高胆固醇血症、原发性高脂血症、肺动脉高压，肺动脉高压、复发性血流动力学不稳定的室性心动过速(VT)、复发性室性心律不齐、复发性心室纤维性颤动(VF)、破裂动脉瘤、谷固醇血症、中风、室上性心动过速、心房纤维性颤动/扑动、心动过速、II型糖尿病、血管疾病、血管炎(包括大血管炎(LVV)、中血管炎(MVV)、小血管炎(SVV)、可变血管炎(VVV)、单器官血管炎(SOV)和与全身性疾病相关的血管炎)、静脉血栓栓塞、室性心律不齐和其他心血管事件。

与给定疾病或病症有关的术语“治疗”包括但不限于抑制疾病或病症，例如，阻止疾病或病症的发展；减轻疾病或病症，例如引起疾病或病症的消退；或缓解由疾病或病症引起或由疾病或病症产生的病状，例如缓解、预防或治疗疾病或病症的症状。与给定疾病或病症有关的术语“预防”意指：如果没有发生疾病，则预防疾病的发作；预防疾病或病症在可能易患该病症或疾病但尚未诊断为患有该病症或疾病的受试者中发生，和/或如果已经存在，则预防进一步的疾病/疾病发展。

在一个实施方案中，确定受试者具有与参考水平相比较低的基线嗜酸性粒细胞计数。在一个实施方案中，在施用DGLA之前确定受试者具有较低的基线嗜酸性粒细胞计数。

在一个实施方案中，确定受试者具有与参考水平(诸如实验室参考水平)相比正常(例如，健康)的基线嗜酸性粒细胞计数。例如，正常基线嗜酸性粒细胞计数可以小于约0.2x10⁹个/L，小于约0.25x 10⁹个/L，小于约0.3x 10⁹个/L，小于约0.4x 10⁹个/L，小于约0.5x 10⁹个/L，小于0.6x 10⁹个/L，小于0.7x 10⁹个/L或小于约0.8x 10⁹个/L。在一个实施方案中，在施用DGLA或其衍生物之前，确定受试者具有正常的基线嗜酸性粒细胞计数。

术语“参考水平”和“实验室参考水平”可以互换使用，包括但不限于来自于从健康患者收集的样品的水平。参考水平和/或实验室参考水平也可以由从健康患者群体中收集的多个样品确定。作为一个实例，可以基于由健康患者群体或健康患者子集，例如特定种族的健康患者确定的嗜酸性粒细胞计数来确定正常的嗜酸性粒细胞计数。在其他实施方案中，参考水平和/或实验室参考水平是从较早时间点(例如1天、3天、1周、1个月、3个月、6个月、12个月，或更多)从接受治疗的相同患者收集的样品确定的值。在一些实施方案中，参考水平和/或实验室参考水平可以基于本领域技术人员已知的或由医疗机构开发的值。

在各个实施方案中，本发明的组合物施用的量足以提供约50mg至约10000mg，约100mg至约7500mg，或约100mg至约5000mg的DGLA日剂量，例如每天约200mg、约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约700mg、约800mg、约900mg、约1000mg、约1100mg、约1200mg、约1300mg、约1400mg、约1500mg、约1600mg、约1700mg、约1800mg、约1900mg、约2000mg、约2100mg、约2200mg、约2300mg、约2400mg、约2500mg about2600mg、约2700mg、约2800mg、约2900mg、约3000mg、约3100mg、约3200mg、约3300mg、约3400mg、约3500mg，3600mg、约3700mg、约3800mg、约3900mg、约4000mg、约4100mg、约4200mg、约4300mg、约4400mg、约4500mg，4600mg、约4700mg、约4800mg、约4900mg、约5000mg、约5100mg、约5200mg、约5300mg、约5400mg、约5500mg的DGLA在一个实施方案中，本发明提供了一种治疗特应性皮炎，例如轻度至中度特应性皮炎的方法。在一个实施方案中，该方法包括以每天约500mg至约3g，每天约1g至约2.5g，每天约1g或每天约2g的量向需要此类治疗的受试者施用DGLA。在一个实施方案中，每天向受试者施用DGLA，持续至少约2周，至少约4周或至少约8周。在一个相关实施方案中，在根据本发明进行治疗时，例如，在约1至约12周，约1至约8周或约1至约4周的时期内，受试者或受试者组表现出以下的一个或多个结果：

(a)相对于基线或安慰剂对照，湿疹面积与严重程度指数(EASI)评分降低；

(b)相对于基线或对照，受特应性皮炎影响的解剖部位的面积百分比减小；

(c)相对于基线或安慰剂对照，研究者整体评估(IGA)评分水平降低；

(d)相对于基线或安慰剂对照，红斑、水肿/群体、渗出物/痂、表皮脱落、苔藓化和/或干燥的强度降低；

(e)相对于基线或安慰剂对照，红斑、水肿/群体、渗出物/痂、表皮脱落、苔藓化和/或干燥减轻；

(f)相对于基线或安慰剂对照，受特应性皮炎影响的体表面积(BSA)减小；

(g)相对于基线或安慰剂对照，睡眠不足减轻；

(h)相对于基线或安慰剂对照，瘙痒(发痒)发生率降低；

(i)以视觉模拟量表(VAS)表示，前三天和/或晚上平均的瘙痒严重程度降低；

(j)相对于基线或安慰剂对照，特应性皮炎(SCORAD)评分降低；

(k)与基线或安慰剂对照相比，面向患者的湿疹测量(POEM)改善；

(l)在前一周中受试者报告由于湿疹引起皮肤发痒的天数减少；

(m)在前一周中受试者报告由于湿疹引起睡眠受到干扰的天数减少；

(n)在前一周中受试者经历皮肤出血的天数减少；

(o)在前一周中受试者经历皮肤渗液或渗出透明液体的天数减少；

(p)在前一周中受试者皮肤破裂的天数减少；

(q)在前一周中受试者皮肤成片剥落的天数减少；

(r)在前一周中受试者经历皮肤干燥的天数减少；

(s)与基线或安慰剂对照相比，经皮水分流失增加；

(t)与基线相比，血浆总DGLA和游离DGLA增加；

(u)与基线或安慰剂对照相比，DGLA∶AA比增加；

(v)与基线或安慰剂对照相比，动脉血压降低；和/或

(w)相对于基线或安慰剂对照，皮肤病生活质量指数(DLQI)降低。

在一个实施方案中，本发明的方法包括在受试者或受试者组给药之前测量上述(a)-(w)中列出的一种或多种标志物或参数的基线水平。在另一个实施方案中，所述方法包括在确定(a)-(w)中列出的一种或多种标志物或参数的基线水平之后，向受试者施用如本文所公开的组合物，随后对所述一种或多种标志物进行再次测量。

在另一个实施方案中，在用本发明的组合物治疗时，例如，在约1至约12周，约1至约8周或约1至约4周的时期内，受试者或受试者组表现出上面刚描述的结果(a)-(w)中的任2项或更多项，任3项或更多项，任4项或更多项，任5项或更多项，任6项或更多项，任7项或更多项，任8项或更多项，任9项或更多项，任10项或更多项，任11项或更多项，任12项或更多项，任13项或更多项，任14项或更多项，任15项或更多项，任16项或更多项，任17项或更多项，任18项或更多项，任19项或更多项，任20项或更多项，任21项或更多项，或全部22项。

在另一个实施方案中，在用本发明的组合物治疗时，所述受试者或受试者组表现出以下的一个或多个结果：

(a)相对于基线或安慰剂对照，湿疹面积与严重程度指数(EASI)评分降低至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(b)与基线或对照相比，受特应性皮炎影响的解剖部位的面积百分比减小至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(c)相对于基线或安慰剂对照，研究者整体评估(IGA)评分降低至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(d)相对于基线或安慰剂对照相比，红斑、水肿/群体、渗出物/痂、表皮脱落、苔藓化和/或干燥的强度降低至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(e)相对于基线或安慰剂对照相比，红斑、水肿/群体、渗出物/痂、表皮脱落、苔藓化和/或干燥减轻至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(f)与基线或安慰剂对照相比，受特应性皮炎影响的体表面积(BSA)减小至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(g)相对于基线或安慰剂对照，睡眠不足减轻至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(h)相对于基线或安慰剂对照，瘙痒(发痒)发生率降低至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％。至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(i)以视觉模拟量表(VAS)表示，前三天和/或晚上平均的瘙痒严重程度降低至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(j)相对于基线或安慰剂对照，特应性皮炎(SCORAD)评分降低至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(k)与基线或安慰剂对照相比，面向患者的湿疹测量(POEM)改善至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(l)在前一周中受试者报告由于湿疹引起皮肤发痒的天数减少至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(m)在前一周中受试者报告由于湿疹引起睡眠受到干扰的天数减少至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(n)在前一周中受试者经历皮肤出血的天数减少至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(o)在前一周中受试者经历皮肤渗液或渗出透明液体的天数减少至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(p)在前一周中受试者皮肤开裂的天数减少至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(q)在前一周中受试者皮肤成片剥落的天数减少至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(r)在前一周中受试者经历皮肤干燥的天数减少至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(s)与基线或安慰剂对照相比，经皮水分流失增加至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(t)与基线相比，血浆总DGLA和游离DGLA增加至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(u)与基线或安慰剂对照相比，DGLA∶AA比率增加至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；

(v)平均动脉血压降低至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％。至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％；和/或

(j)相对于基线或安慰剂对照，皮肤病生活质量指数(DLQI)降低至少约5％，至少约10％，至少约15％，至少约20％，至少约25％，至少约30％，至少约35％，至少约40％，至少约45％，至少约50％，至少约55％，至少约60％，至少约65％，至少约70％，至少约75％，至少约80％，至少约85％，至少约90％或至少约95％。

在另一个实施方案中，用本发明的组合物治疗时，在施用单个剂量或施用多个剂量之后，例如，在约1至约12周，约1至约8周或约1至约4周的时期内，受试者或受试者组表现出上面刚描述的结果(a)-(w)中的任2项或更多项，任3项或更多项，任4项或更多项，任5项或更多项，任6项或更多项，任7项或更多项，任8项或更多项，任9项或更多项，任10项或更多项，任11项或更多项，任12项或更多项，任13项或更多项，任14项或更多项，任15项或更多项，任16项或更多项，任17项或更多项，任18项或更多项，任19项或更多项，任20项或更多项，任21项或更多项，或全部22项。

在另一个实施方案中，在用包含约200mg DGLA至约8000mg DGLA的组合物(作为一个或多个剂量单位，例如作为500mg或1g剂量单位施用，等于每日总DGLA剂量为约500mg，约1000mg，约2000mg，约3000mg，约4000mg，约5000mg，约6000mg，约7000mg或约8000mg)治疗受试者或受试者组(进食或空腹)时并且在施用单个剂量或在施用多个剂量后，受试者或受试者组表现出以下的一个或多个结果：

(a)游离DGLA C_max(或平均或中值C_max)为约400ng/ml至约4500ng/ml，约500ng/ml至约3400ng/ml，约600ng/ml至约3300ng/ml，约700ng/ml至约3200ng/ml，例如约900ng/ml，约1000ng/ml，约1100ng/ml，约1200ng/ml，约1300ng/ml，约1400ng/ml，约1500ng/ml，约1600ng/ml，约1700ng/ml，约1800ng/ml，约1900ng/ml，约2000ng/ml，约2100ng/ml，约2200ng/ml，约2300ng/ml，约2400ng/ml，约2500ng/ml，约2600ng/ml，约2700ng/ml，约2800ng/ml，约2900ng/ml，约3000ng/ml，约3100ng/ml，约3200ng/ml，约3300ng/ml，约3400ng/ml，约3500ng/ml，约3600ng/ml，约3700ng/ml，约3800ng/ml，约3900ng/ml，约4000ng/ml，约4100ng/ml，约4200ng/ml，约4300ng/ml about 4400ng/ml或约4500ng/ml；

(b)游离DGLA C_max/剂量(或平均或中值C_max/剂量)为约0.5(1/kL)至约3(1/kL)，约0.6(1/kL)至约2.5(1/kL)或约0.7(1/kL)至约2(1/kL)，例如约0.7(1/kL)，约0.8(1/kL)，约0.9(1/kL)，约1(1/kL)，约1.5(1/kL)，约1.6(1/kL)，约1.7(1/kL)或约1.8(1/kL)；

(c)游离DGLA AUC_0-24(或平均或中值AUC_0-24)为约1500ng·小时/ml至约12000ng·小时/ml，约2000ng·小时/ml至约11000ng·小时/ml或约2500ng·小时/ml至约10000ng·小时/ml，例如约1000ng·小时/ml，约1500ng·小时/ml，约2000ng·小时/ml，约2500ng·小时/ml，约3000ng·小时/ml，约3500ng·小时/ml，约4000ng·小时/ml，约4500ng·小时/ml，约5000ng·小时/ml，约5500ng·小时/ml，约6000ng·小时/ml，约6500ng·小时/ml，约7000ng·小时/ml，约7500ng·小时/ml，约8000ng·小时/ml，约8500ng·小时/ml，约9000ng·小时/ml，约9500ng·小时/ml，约10000ng·小时/ml，约10500ng·小时/ml，约11000ng·小时/ml，约11500ng·小时/ml或约12000ng·小时/ml。

(d)游离DGLAAUC_0-24/剂量(或平均或中值AUC_0-24/剂量)为约1.5至约10h/kL，约1.7至约8h/kL或约2至约6h/kL，例如约2h/kL，约2.5h/kL，约3h/kL，约3.5h/kL，约4h/kL，约4.5h/kL，约5h/kL或约5.5h/kL；

(e)游离DGLA t_mmax(h)为约2至10小时，约3至约8小时，例如约3小时，约4小时，约5小时，约6小时，约7小时或约8小时；

(f)总DGLA C_max(或平均或中值总DGLA C_max)为约4000ng/ml至约45000ng/ml，约5000ng/ml至约34000ng/ml，约6000ng/ml至约33000ng/ml，或约7000ng/ml至约32000ng/ml，例如约7000ng/ml，约7200ng/ml，约7500ng/ml，约8000ng/ml，约8500ng/ml，约9000ng/ml，约9500ng/ml，约10000ng/ml，约11000ng/ml，约12000ng/ml，约13000ng/ml，约14000ng/ml，约15000ng/ml，约16000ng/ml，约17000ng/ml，约18000ng/ml，约19000ng/ml，约20000ng/ml，约21000ng/ml，约22000ng/ml，约23000ng/ml，约24000ng/ml，约25000ng/ml，约26000ng/ml，约27000ng/ml，约28000ng/ml，约29000ng/ml，约30000ng/ml，约31000ng/ml，约32000ng/ml，约33000ng/ml，约34000ng/ml或约35000ng/ml；

(g)总DGLA C_max/剂量(或平均或中值总DGLA C_max/剂量)为约2(1/kL)至约25(1/kl)，约4(1/kl)至约20(1/kl)或约5(1/kl)至约17(1/kl)，例如约6(1/kl)、约9(1/kl)、约14(1/kl)或约16(1/kl)；

(h)总DGLA AUC_0-24(或平均或中值总DGLA AUC_0-24)为约15000ng·小时/ml至约900,000ng·小时/ml，约20,000ng·小时/ml至约250,000ng·小时/ml或约25,000ng·小时/ml至约225,000ng·小时/ml，例如约40,000ng·小时/ml，约210,000ng·小时/mi，约215,000ng·小时/ml或约435,000ng·小时/ml；

(i)总DGLA AUC_0-24/剂量(或平均或中值总DGLA AUC_0-24/剂量)为约50至约400h/kL，约60至约250h/kL或约70至约225h/kL，例如约80h/kL，约100h/kL，约110h/kL或约215h/kL；

(j)总DGLA t_max(h)为约2至约25小时或约3至约20小时，例如约8小时，约10小时或约18小时；

(k)总DGLA C_max与游离DGLA C_max的比率为约5∶1至约12∶1，约6∶1至约10∶1或约7∶1至约9∶1，例如，约7.7∶1，约8.6∶1，约8.8∶1或大约9.8∶1；

(l)连续每天施用1至约30天，1至约28天，1至约14天或1至约10天后，稳态游离DGLA血浆水平(C_avg)或平均或中值稳态游离DGLA血浆水平(C_avg)高达约2000ng/ml，高达约750ng/ml或高达约700ng/ml，例如，约385ng/ml或约675ng/ml；

(m)连续每天施用1至约30天，1至约28天，1至约14天或1至约10天后，稳态总DGLA血浆水平(C_avg)或平均或中值总DGLA血浆水平(C_avg)高达250,000ng/ml，高达180,000ng/ml，高达150,000ng/ml，高达125,000ng/ml或高达100,000ng/ml；和/或(n)血浆游离DGLA与皮肤DGLA的比率(例如，在皮肤疱液中测得)为约0.2∶1至约5∶1，约0.5∶1至约2.5∶1或约0.6∶1至约1.5∶1。在另一个实施方案中，在用本发明的组合物治疗时，例如，在约1至约12周，约1至约8周或约1至约4周的时期内，受试者或受试者组表现出上面刚描述的结果(a)-(n)中的任2项或更多项，任3项或更多项，任4项或更多项，任5项或更多项，任6项或更多项，任7项或更多项，任8项或更多项，任9项或更多项，任10项或更多项，任11项或更多项，任12项或更多项，任13项或更多项，任14项或更多项，任15项或更多项，任16项或更多项，任17项或更多项，任18项或更多项，任19项或更多项，任20项或更多项，任21项或更多项，或全部22项。

在另一个实施方案中，在用包含约200mg DGLA至约8000mg DGLA的组合物(作为一个或多个剂量单位，例如作为500mg或1g剂量单位施用，等于每日总DGLA剂量为约500mg，约1000mg，约2000mg，约3000mg，约4000mg，约5000mg，约6000mg，约7000mg或约8000mg)治疗空腹和进食受试者或空腹和进食受试者组时并且在施用单个剂量或在施用多个剂量后，受试者或受试者组表现出以下的一个或多个结果：

(a)空腹：进食的游离DGLA C_maxx的比率为约1∶1至约5∶1之间，例如约2.5∶1，约3∶1或约3.5∶1；

(b)空腹：进食的游离DGLA AUC_0-24的比率为约1∶1至约5∶1之间，例如约1.5∶1，约2∶1或约2.5∶1；

(c)空腹：进食的总DGLA C_maxx的比率为约1∶1至约5∶1之间，例如约1∶1，约1.5∶1或约2∶1；和/或

(d)空腹：进食的总DGLA AUC_0-24的比率为约1∶1至约5∶1之间，例如约1.5∶1，约2∶1或约2.5∶1。

在一个实施方案中，本发明的含DGLA的组合物包含以下脂肪酸指纹：

C18：1n-9	＜LOD-＜5％
		C18：2n-6	＜LOD-＜5％
20：3ω6-DGLA	NLT 95
		异构体A	＜LOD-＜5％
C20：4n-6+异构体B	＜LOD-＜5％
		未确认总相关物质	NMT 2

在一个实施方案中，本发明的含DGLA的组合物包含以下脂肪酸指纹：

本发明说明性的含DGLA的组合物包含以下脂肪酸指纹：

C16：0	＜LOD-＜5％
		C18：1n-7	＜LOD-＜5％
C18：1n-9	＜LOD-＜5％
		C18：2n-6	＜LOD-＜5％
C18：3n-6	＜LOD-＜5％
		C20：3n-3	＜LOD-＜5％
20：3n-6-DGLA	NLT 95
		C20：4n-6	＜LOD-＜5％
未确认总相关物质	NMT 2

在一个实施方案中，本发明的含DGLA的组合物包含以下脂肪酸指纹：

在一个实施方案中，本发明的含DGLA的组合物包含以下脂肪酸指纹：

实施例

实施例1

如表1所示，制备了三批包含填充到明胶胶囊中的DGLA(2000pmdl-α-生育酚)的药物组合物。

表1.

批号	DGLA(mg/胶囊)	明胶说明
			E09726/1	250	标准酸性牛明胶
E09726/2	250	分子量(Mw)较低的石灰骨明胶
			E09727	500	标准酸性牛明胶

胶囊壳包含以下赋形剂：明胶、纯净水、甘油、二氧化钛以及加工助剂卵磷脂和中链甘油三酯。

还制备了其他批次的DGLA胶囊，包括DGLA FFA(用标称的2000ppmdl-α生育酚稳定)，胶囊中包含如表2所示的明胶、聚山梨醇或甘油/聚山梨醇的混合物、纯净水、二氧化钛，以及加工助剂卵磷脂和中链甘油三酯。

表2.

每个批次的胶囊壳组成示于表3和4中。

表3.

¹RXL明胶含较少量的高分子量聚合物(～5％＞200,000Da)

表4.

对上述胶囊进行稳定性测试。将每个批次的胶囊保存长达6个月，并使用定性或定量USP 2040崩解和溶解测试方案进行评估。结果示于表5-7。

表5.DGLA软凝胶胶囊的稳定性数据：定性破裂测试结果

表6.DGLA甘油酯百分比

表7.

如上所见，用甘油和标准酸性牛明胶配制的胶囊在水中的溶解速度会随着时间的推移而降低(E09726/01和E09727)。在40℃/75％RH下在模拟胃液(pH 1.2，胃蛋白酶)中6个月后，DGLA释放速率大于30分钟。

仅用含有较低分子量(Mw)的石灰骨明胶的胶囊，在模拟胃液(pH 1.2，胃蛋白酶)中，在40℃/75％RH下6个月后DGLA释放速率小于30分钟(E09777/02)。

随着时间推移，含甘油的DGLA胶囊壳中DGLA甘油酯的形成显著增加(表4)。这与温度有关，在40℃75％RH下形成的DGLA浓度最高。

聚山梨醇通常用作亲水性增塑剂，以限制胶囊填充介质和外壳之间的交换。D-山梨糖醇和1，4-脱水山梨糖醇的分子量比甘油高，这限制了它在明胶壳中的移动性。尽管如此，在批次E09777 1/2和3中，D-山梨糖醇和1，4-脱水山梨糖醇仍然相互作用形成DGLA FFA酯。

用D-山梨糖醇和1，4-脱水山梨糖醇配制的批次(E09777 1/02/3)的DGLA酸值没有降低，而用甘油配制的E09778的酸值降低。

用D-山梨糖醇和1，4-脱水山梨糖醇配制的胶囊(E09777/03)在水中的溶解速率不会随时间推移而减慢。在40℃/75％RH下3个月后，水中的DGLA释放速率小于30分钟。

实施例2

进行随机、双盲、安慰剂对照的II期研究，以评估口服施用的DS107G(DGLA)对中度至重度特应性皮炎患者的功效和安全性。这项研究的主要目的是比较口服施用的DS107G胶囊与安慰剂在治疗中度至重度特应性皮炎成年患者中的功效。次要目的是评估在中度至重度特应性皮炎成年患者中，口服施用的DS107G胶囊与安慰剂相比的安全性。主要研究终点是在第8周时IGA(研究者总体评估)达到0(清晰)或1(几乎清晰)和IGA降低至少2分的患者比例。次要研究终点包括：

第2、4和8周时IGA相比于基线的变化；

第2、4和8周时EASI(湿疹面积与严重程度指数)相对于基线的变化；

第8周时IGA至少降低1分的患者比例；

第2、4和8周时面向患者的湿疹测量(POEM)相对于基线的变化；

第2、4和8周时皮肤病生活质量指数(DLQI)评分相对于基线的变化；

第2、4和8周时SCORAD相对于基线的变化；

第2、4和8周时患者视觉模拟量表瘙痒评分相对于基线的变化；

第2、4和8周时体表面积(BSA)相对于基线的变化；和/或

每个治疗组中治疗诱发的不良事件(TEAE)的数量。

探索性终点包括：

第2、4和8周时经皮水分流失(TEWL)相对应基线的变化(仅选定部位)；

基线、第4周和第8周时的血浆总DGLA和游离DGLA浓度；

基线、第4周和第8周时的血浆总脂肪酸特性(待保存并在以后进行分析的样品)；和/或

基线、第4周和第8周时的白细胞介素特性(待保存并在以后进行分析的样品)。

这项多中心、双盲、安慰剂对照的IIa期研究中包括大约100名中度至重度特应性皮炎患者。所有受试者均签署知情同意书，并接受研究资格筛查。在基线就诊时将受试者随机(1∶1)分组为在空腹状态下接受口服DS107G 2g或安慰剂，每天一次，持续8周。

受试者到诊所就诊6次：筛查、基线、第2周、第4周、第8周(治疗结束/早期终止)和第10周(随访)。在第10周就诊时，所有受试者均退出研究。主要功效变量是第8周时IGA为0(清晰)或1(几乎清晰)与IGA至少降低2分的患者的比例。次要功效变量包括：其他就诊时间的IGA、瘙痒(从SCORAD视觉模拟量表获得)、EASI、BSA、POEM、DLQI、SCORAD和TEWL(仅对于选定部位而言)。通过不良事件、身体检查、生命体征和安全性实验室试验(包括对妇女生育能力的妊娠试验)来评估安全性。在基线(第0天)、第4周和第8周就诊时获得药代动力学样品，以测量总和游离DGLA血浆谷水平。保留单独的血浆样品，以供稍后分析总脂肪酸特性和白细胞介素特性。

EASI是范围为0-72的综合评分，其中考虑了四个身体区域中每个区域的红斑、硬结/成膜、剥落和苔藓化程度(分别评分为0到3)，并调整了涉及每个身体区域的BSA以及身体区域与整个身体的比例。下面提供了EASI评分计算的详细程序。

如检查当天所见，对四个解剖部位-头部、上肢、躯干和下肢-进行了红斑、硬结(丘疹)、表皮脱落和苔藓化的评估。每个体征的严重程度使用4分制量表来评估：

·0＝无症状

·1＝轻微

·2＝中度

·3＝明显

估计给定解剖部位内受特应性皮炎影响的面积作为该解剖部位总面积的百分比，并根据特应性皮炎的累及程度分配数值，如下所示：

·0＝未累及

·1＝＜10％

·2＝10至＜30％

·3＝30至＜50％

·4＝50至＜70％

·5＝70至＜90％

·6＝90至100％

EASI评分是通过使用以下公式获得的

EASI＝0.1(E_h+I_h+Ex_h+L_h)A_h+0.2(E_u+I_u+Ex_u+Ex_u)A_u+0.3(E_t+I_t+Ex_t+Ex_t)At+0.4(E_l+I_l+Ex_l+Ex_l)A_l

其中E、I、Ex、L和A分别表示红斑、硬结、表皮脱落、苔藓化和面积，h、u、t和1分别表示头部、上肢、躯干和下肢。

SCORAD的计算如下：选择六项(红斑、水肿/丘疹、渗出/痂、表皮脱落、苔藓化和干燥)以评价AD严重程度。每一项的强度均使用4分制量表来分级：

·0＝无症状

·1＝轻度

·2＝中度

·3＝重度

对于每一项而言，选择用于分级的区域必须具有代表性(平均强度)。然后，计算每一项的单独强度等级(范围为0-18)的总和，然后乘以3.5，得出最高评分为63。

评估受AD影响的整体BSA(从0到100％)并除以5。患者的手掌占其总BSA的1％。最大值为20。

主观项目包括睡眠不足和瘙痒发生率。通过要求患者在评估表上的10-cm刻度(0-10)上表示与最近三天/晚的平均值相对应的点来进行评估。这两者的最高总分是20。

以上度量的总和表示SCORAD，可以在0到103之间变化。如果排除瘙痒和睡眠不足的主观评分，则SCORAD变为客观SCORAD(评分范围0-83)。

研究者总体评估测定如下：

体表面积(BSA)。每次就诊都会评估受AD影响的总体BSA(0至100％)。患者的手掌占其总BSA的1％。对于所有的研究就诊，除了进行筛查时，将使用SCORAD测量值测量累及皮肤的BSA，并将其作为单独的终点进行评估。

使用以下调查表确定面向患者的湿疹测量(POEM)：

使用以下调查表确定皮肤病生活质量指数(DLQI)：

纳入标准如下：

1.在签署知情同意书(ICF)当天，年龄为18岁及以上的男性或女性受试者。

2.根据Hanifin和Rajka标准(附录G)临床确诊活性特应性皮炎。

3.基线就诊时，IGA至少为3，定义为中度至重度特应性皮炎。

4.基线时，特应性皮炎至少覆盖体表面积的10％。

5.体重指数(BMI)介于18和35kg/m²(含端点)。

6.有生育能力的女性患者在研究期间必须使用适当的避孕药具或其伴侣绝育：全身性激素避孕药，宫内节育器或避孕方法与杀精剂结合使用，或同意进行性禁欲。激素避孕药必须在基线前至少一个月稳定剂量服用。

注意：无生育能力的妇女是：

-进行过手术绝育(子宫切除术或双侧卵巢切除术或输卵管结扎术)的妇女

-大于60岁的妇女

-年龄大于40岁而小于60岁，月经停止至少12个月，且卵泡刺激素(FSH)测试证实无生育能力(FSH≥40mIU/mL)或月经停止至少24个月未确认FSH水平的妇女。

7.在整个研究过程中能够且愿意停止特应性皮炎治疗(除允许的润肤剂外)的患者。

8.能够且愿意给出签署的知情同意书，并且必须在进行任何研究相关的程序之前获得同意书。

排除标准如下：

1.筛查或第0天就诊(基线)时妊娠试验为阳性的女性患者或哺乳期妇女。

2.研究者认为会使患者处于不必要的风险中或干扰研究结果的解释的任何临床上显著的受控或不受控的医学状况或实验室异常。

3.临床上肾或肝功能明显受损。

4.其他可能干扰特应性皮炎诊断和/或评估的皮肤状况(例如牛皮癣或当前的病毒、细菌和真菌皮肤感染)。

5.对DS107G或安慰剂胶囊中的任何物质有过敏史。

6.在开始治疗/第0天就诊(基线)，或5个半衰期(为更长的为准)前3个月使用了生物制剂。

7.在基线就诊(第0天)前少于4周之内，使用可能会影响特应性皮炎的全身性治疗(除生物制剂外)，例如类维生素A、钙调神经磷酸酶抑制剂、甲氨蝶呤、环孢素、羟基脲(羟脲)、硫唑嘌呤和口服/注射皮质类固醇。允许鼻内皮质类固醇和吸入性皮质类固醇用于稳定的医学状况。

8.在第0天就诊(基线)，或5个半衰期(为更长的为准)前30天内用任何实验药物进行治疗。

9.过量太阳曝光，在第0天就诊(基线)前4周使用日光浴或其它紫外(UV)光源和/或正计划在筛查和随访间期进行阳光之旅或使用日光浴或其它UV源。

10.开始治疗/第0天就诊(基线)前2周使用任何局部用药治疗特应性皮炎，包括但不限于局部用皮质类固醇、钙调神经磷酸酶抑制剂、焦油、漂白剂、抗菌剂和漂白浴。

11.在第0天前2周使用含有尿素、神经酰胺或透明质酸的局部产品。

12.在基线2周内使用用于特应性皮炎的抗组胺药。

13.显著的不受控制的心血管疾病(在研究者看来临床上显著的ECG异常史)、神经系统疾病、恶性肿瘤、精神病、呼吸道疾病或高血压疾病，以及糖尿病和关节炎。

14.慢性感染性疾病病史(例如，乙型肝炎，丙型肝炎或感染人免疫缺陷病毒)。

15.在第0天(基线)之前的最后一年中，有临床上显著的药物滥用或酗酒。

表格中汇总了连续变量，包括受试者数量、平均值、标准偏差、中值、最小值、最大值和四分位间距。分类变量在表格中以频率和百分比呈现。除非另有说明，否则所有统计检验均为双侧检验，且显著性水平为0.05。

在施用药物之前，对每个受试者进行以下列出的具体问题的询问。如果受试者承认不符合这些限制，则首席研究者(或指定人员)和/或申办者决定是否允许受试者继续研究。记录了不符合这些限制的情况。

要求受试者放弃在筛查和随访间期计划阳光之旅或使用晒黑设备。

在整个研究过程中，要求受试者放弃使用可能影响特应性皮炎的任何药物/疗法(请参阅排除标准和禁止的疗法或程序部分)。

需要受试者在醒来后在药物施用之前至少空腹8小时。药物施用后继续空腹至少60分钟，之后受试者才可以吃早餐。空腹期间始终允许喝水，但不允许喝其他液体。研究中允许的用于其他病状的药物可以照常服用。

对于基线(第0天)、第4周和第8周的就诊，进行抽血以进行PK分析。给药前采集PK样品；因此，研究药物的施用是在第0天和第4周就诊期间进行的。因为在第0天和第4周在诊所进行给药，所以受试者需要在施用研究药物之前空腹至少8小时，允许在施用研究药物之后60分钟进餐。

受试者有权随时以任何理由退出研究，而不会受到处罚。研究者也有权出于受试者的最大利益或在受试者不合作或不合规时使受试者退出研究。研究者或其一位工作人员通过电话或亲自拜访与受试者联系，以尽可能全面地确定退出原因，并将原因记录在受试者的原始文件和CRF中。在受试者退出时进行了完整的最终提前终止(第8周)评估，并解释了受试者退出研究的原因。如果去除受试者的原因是不良事件或实验室测试结果异常，则记录主要的具体事件或测试。

要求在第8周就诊之前中断研究的受试者应尽快进行早期终止就诊，并进行所列的第8周评估。还要求他们两周后返回以进行所列的第10周安全评估。

满足所有纳入条件且没有排除标准的受试者均接受进入研究。在执行任何筛查程序之前，每个受试者都阅读并签署知情同意书。这项研究包括将DS107G(DGLA)与安慰剂进行比较，每天醒来口服施用一次，总持续时间为8周。将受试者以1∶1的比率随机分配到两个治疗组中的一个组中：

治疗组A：2克DS107G(4粒)

治疗组B：2克安慰剂胶囊(4粒)

需要受试者在醒来后在药物施用之前至少空腹8小时。药物施用后继续空腹至少60分钟，之后允许受试者吃早餐。空腹期间始终允许喝水，但不允许喝其他液体。研究中允许的用于其他病状的药物可以照常服用。

DS107G胶囊由Dignity Sciences提供，为不透明的椭圆形软明胶胶囊，其中含有500mg DGLA游离脂肪酸(FFA)。Dignity Sciences还提供了安慰剂胶囊，其为不透明的椭圆形软明胶胶囊，其中包含500mg液体石蜡。DS107G胶囊以制造形式(盲注)提供，并包装在28个单位的铝箔泡罩中。安慰剂以与DS107G胶囊相同的泡罩和包装呈现，并以相同的方式储存/包装。研究药物已根据美国和加拿大的法规加有标签。

研究药物由申办者提供给研究者，并现场保存在限制接近的房间或柜子中。DS107G和安慰剂胶囊保存在15-30℃之间的受控室温下，仅在研究者的监督下提供给试验受试者。在每次研究就诊时，在研究地点将研究药物分配给受试者。受试者将所有研究药物泡罩包装(用过的和未使用的)返还研究地点。在分配之前和返还时对泡罩包装中的胶囊进行计数，并将计数记录在原始文档和eCRF中。告知每个受试者在下一次研究就诊时返还研究药物的重要性。如果受试者未返还研究药物，则要求他/她尽快返还研究药物。

筛查前≤4周和整个研究中服用的所有药物(包括非处方药、维生素和抗酸药)都应记录下来。记录筛查前2个月内所有用于特应性皮炎的药物。允许受试者在皮肤(包括AD病变)上使用他们选择的温和润肤剂，条件是在第0天之前至少2周开始使用润肤剂，并且在整个研究中以相同频率在相同的皮肤区域继续使用。要求受试者避免使用含有任何会影响或可能影响特应性皮炎的活性成分的润肤剂，包括以下成分：尿素、神经酰胺或透明质酸。

非镇静性抗组胺药(例如氯雷他定(loratadine)、非索非那定(fexofenadine))仅在用于治疗除特应性皮炎以外的医学病状时才允许使用。仅在受试者在第0天之前至少2周以稳定剂量服用并且在整个研究期间每天继续使用相同药剂时，才允许在研究期间使用此类药物。允许吸入性和鼻内皮质类固醇用于稳定的医学病状。

在研究期间，所有受试者均禁止使用以下局部疗法或程序：

可能会影响特应性皮炎的局部药物治疗，包括但不限于：局部皮质类固醇，钙调神经磷酸酶抑制剂、焦油、漂白剂、抗菌剂、漂白浴；

任何含有尿素、神经酰胺或透明质酸的局部用产品；

可能影响特应性皮炎的全身性疗法，例如类维生素A、钙调神经磷酸酶抑制剂、甲氨蝶呤、环孢霉素、羟基脲(羟脲)、硫唑嘌呤和口服/注射皮质类固醇；

抗组胺药(非镇静抗组胺药除外)；

任何生物制剂；

UVA或UVB光疗；

补骨脂素+紫外线A(PUVA)疗法；

过度日晒或使用日光浴；和/或

任何研究药剂。

每次就诊时通过直接询问，审查受试者的依从性日志和胶囊计数来评估治疗依从性，并且治疗依从性是基于后者的。每次就诊时给予受试者纸质日记以及研究药物。受试者在日记中指出了任何遗漏的剂量，以及研究药物施用前末次摄取食物的时间和研究药物施用后摄取食物的时间。指示受试者下一次研究就诊时带来所有胶囊和泡罩包装(使用过的和未使用的)以及依从性日志。在原始文件和eCRF中记录了任何与规定剂量方案的偏差。对明显不依从的受试者进行劝告。

特应性皮炎的临床评估由经验丰富的合格皮肤科医生(经董事会认证或同等学历)进行。为确保一致性并减少变异性，同一评估者应尽可能对给定受试者执行所有评估。

每次就诊时都要评估研究者疾病严重程度总体评估(IGA)。IGA是对该疾病当前状态的总体评估。它是对总体疾病严重程度的6分制形态评估，并且将根据以下定义确定：0(清晰)，1(几乎清晰)，2(轻度)，3(中度)，4(重度)和5(极重度)。为了符合资格，受试者必须在基线就诊(第0天)时的IGA评分>/＝3。

除筛查就诊外，每次就诊均评估湿疹面积与严重程度指数(EASI)。基于病变的严重程度和受影响的BSA的百分比来量化受试者特应性皮炎的严重程度。EASI是范围为0-72的综合评分，考虑到了4个身体区域中的每一个的红斑、硬结/丘疹、表皮脱落和苔藓样硬化的程度(各自评分分别为0至3)，调整了每个身体区域涉及的BSA百分比以及身体区域在整个身体中所占的比例。

每次就诊都评估了受AD影响的总体BSA(从0到100％)。患者的手掌占其总BSA的1％。对于所有的研究就诊(筛查除外)，将使用SCORAD测量法(说明见下文)测量累及皮肤的BSA，并作为单独的终点进行评估。为了符合资格，受试者必须在基线就诊(第0天)时的BSA为至少10％。

除筛查就诊外，每次就诊均测量SCORAD。SCORAD分级系统由欧洲特应性皮炎工作组(1993)开发，已成为欧洲临床研究中评估AD严重程度的标准工具。选择六项(红斑、水肿/丘疹、渗出/痂、表皮脱落、苔藓化和干燥)以评价AD严重程度。评估受AD影响的总体BSA(从0到100％)，并将其包括在SCORAD评分中。患者根据视觉模拟量表(0-10)评估睡眠不足和瘙痒。这些度量的总和表示SCORAD，其范围可以从0到103。

对于除筛查以外的所有研究就诊，均采用SCORAD测量值记录瘙痒严重程度评分，并将其作为单独的终点进行评估。通过要求受试者在评估表上的10-cm刻度(0-10)上表示与最近三天/晚的平均值相对应的点来进行评估。

TEWL。除筛查就诊外，每次就诊都会评估AD的临床严重程度以及对皮肤屏障功能的相关影响。评估将在已证明使用该设备的过往经验的选定地点进行。

在基线(第0天)时，研究者将为每个受试者选择三个有代表性的活动性AD区域；将会记录这些部位的位置。在随后的就诊中，将在标准室内环境条件(22-25℃，相对湿度40-60％)下获取每个AD区域的TEWL读数；TEWL测量的平均值将用于分析。

除筛查就诊外，每次就诊都要评估面向患者的湿疹测量值(POEM)。POEM是患者对疾病严重程度的自我评估。基于根据以下量表对患者对七个问题的回答，POEM的最大值为28：

·没有一天＝0

·1-2天＝1

·3-4天＝2

·5-6天＝3

·每天＝4

DLQI是一个简单的10个问题验证的问卷，除筛查外，每次就诊均完成。

除筛查就诊外，每次就诊均评估AD的临床严重程度以及对皮肤屏障功能的相关影响。评估在已证明使用该设备的过往经验的选定地点进行。

在基线(第0天)时，研究者为每个受试者选择三个有代表性的活动性AD区域；记录这些部位的位置。在随后的就诊中，在标准室内环境条件(22-25℃，相对湿度40-60％)下获取每个AD区域的TEWL读数；TEWL测量的平均值用于分析。

在筛查时、第0天、第4周和第8周进行实验室测试。如果第8周的结果表明与基线相比有临床上的显著变化，则还应在第10周进行实验室测试。测试包括尿液分析、血液鉴别和凝血测试、标准化学检测小组(化学检测包括肝功能检测和胆固醇检测)、凝血、有生育能力的妇女(WOCBP)的血清妊娠测试(筛查和第8周提前终止就诊)。在基线(第0天)、第2周、第4周和第10周就诊时，对有生育能力的妇女进行了尿液妊娠测试(在研究者所在地进行)。在筛查时，对年龄大于40岁而小于60岁，月经停止至少12个月但小于24个月的妇女测试FSH水平。

在基线、第4周和第8周就诊时，在施用研究药物之前进行了抽血(在第8周就诊时未施用研究药物)。如果受试者在服用每日剂量的研究药物后去诊所，则该受试者需要在第二天回来进行PK抽血。测量总DGLA和游离DGLA谷的血浆水平。进行第二次抽血，用于以后评估血浆中的总脂肪酸谱。将抽取的用于血清化学分析的血液分成两等份，进行化学分析和随后的白介素评估。

主要终点可以解释为反应者分析，其中，如果受试者在第8周的IGA评分为0(清晰)或1(几乎清晰)考虑到与基线相比降低了2分，则将其归类为反应者。45名受试者的样本量将具有80％的功效，根据卡方检验和α值为0.05，检测到治疗组和安慰剂组的反应者之间有25％的统计学显著性差异。根据文献综述，预期安慰剂可达到7％，因此治疗组中预期的最小比例至少为32％。考虑到10％的退出率，计划研究总共招募100名受试者。

根据ITT群体评估功效，并基于随机治疗而非接受的治疗进行分析。符合方案(PP)的群体包括无明显方案偏差随机分组的所有受试者。安全群体定义为接受至少一个剂量的药物的所有受试者。将根据他们所接受的实际治疗进行分析。

主要终点可以解释为反应者分析，其中，如果受试者在第8周的IGA评分为0(清晰)或1(几乎清晰)考虑到与基线相比降低了2分，则将其归类为反应者。使用Cochran-Mantel-Haenszel检验对两组之间的主要终点进行比较，并将部位作为分层因素包括在内。使用Fisher精确检验进行了支持性分析。使用观测值进行主要功效分析，并使用末次观察推进(LOCF)方法进行支持性分析。使用ITT群体进行分析并用作主要分析，而使用PP群体对主要终点的分析用作敏感性分析。

使用协方差分析(ANCOVA)来分析涉及基线变化的次要终点，其中包括为依存因素的基线变化，部位和治疗组及为固定效应的部位，以及为协变量的基线值。通过治疗比较，得出了Ls平均值和95％CI以及相应的p值。使用按部位分层的Cochran-Mantel-Haenszel检验分析涉及比例的次要终点，并给出p值。对次要终点的分析是使用观测到的数据进行的，不会因缺失观察而使用推算。

研究结果示于表8-11和图1-6中。基于特应性皮炎临床试验的FDA标准主要功效终点(研究者总体评估(IGA)下降了2分，并且治疗IGA的终点为0(清晰)或1(几乎清晰))，意向治疗(ITT)分析的总体结果显示，与安慰剂相比，DS107具有临床上的显著趋势(p＝0.057)。具体而言，该分析显示，中度患者亚组(n＝67)中较安慰剂有统计学上的显著改善(p＝0.036)。

在已评估的次要终点中，瘙痒评分[视觉模拟量表]显示在用DS107治疗的组中，给药4周内瘙痒在统计学上显著减轻(p＝0.015)。

安全性数据表明，口服DS107耐受性非常好，具有广泛的安全性。两组患者均无药物相关的严重不良事件。经历的大多数不良事件都是轻微的，无需任何干预即可消退，并且两组之间似乎没有差异。

表8显示了对于DGLA和安慰剂而言，湿疹面积与严重程度指数相对于基线的变化。

表8.

所有数据表示为平均值±SEM(平均标准误差)。治疗在第8周停止(第10周随访)

1基于与基线相比的变化获得LSMEAN和ANCOvA的p值。该模型包括治疗组，为固定效应的部位和为协变量的基线值

2基于与第8周/ET相比的变化获得LSMEAN和ANCOvA的p值。该模型包括治疗组，作为固定效应的部位以及作为协变量的基线和(第8周/ET-基线)值

注意：基线是在基线就诊时测得的结果。

表9A/B显示了对于DGLA和安慰剂而言，瘙痒视觉模拟量表相对于基线的变化。

表9A(第4周).

表10显示了对于DGLA和安慰剂而言，特应性皮炎评分相对于基线的变化。

表10.

表11显示了对于DGLA和安慰剂而言，受特应性皮炎影响的体表面积的变化。

表11.

表12.调查人员总体评估汇总-第8周的反应者分析(意向治疗群体)-总人口

1如果受试者第8周的IGA评分降低至少2分，则将其分类为反应者。

2来自Cochran-Mantel-Haenszel检验的p值，其中包括部位作为分层因子。

3来自Fisher精确检验的p值(来自所有部位的数据组合)。

4基线就诊时的IGA评分。

表13.调查人员总体评估汇总-第8周的反应者分析(意向治疗群体)-按组

当进一步查询数据时，观察到一个令人惊讶的发现。具体而言，发现具有较低的基线嗜酸性粒细胞计数的受试者表现出对DS107治疗更高的反应率。

嗜酸性粒细胞是一种白细胞，在机体对变态反应、哮喘和寄生虫感染的反应中起重要作用。嗜酸性粒细胞通常占循环白细胞的不足7％(每微升血液有100至500个嗜酸性粒细胞)。这些细胞在针对某些寄生虫的保护性免疫中起作用，但也会促成过敏性病症中发生的炎症。

分析结果如图30-35所示。数据显示，与高加索人患者相比，在测量的每个时间点用DS107治疗的非裔美国人患者中，嗜酸性粒细胞浓度有统计学上显著的降低。图30A-B。具体而言，在DS107治疗的非裔美国人患者中，有56％被归类为反应者，而高加索人患者中只有7％。图31A-B。如以上详细讨论的，如果受试者在第8周的IGA评分为0(清晰)或1(几乎清晰)考虑到与基线相比降低了2分，则将其归类为反应者。图32描绘了总群体中所有反应者中嗜酸性粒细胞浓度(图32A)以及DS107治疗的患者(图32B)和安慰剂治疗的患者(图32C)的相同数据。另外，数据显示，在总群体(总反应者和无反应者)中，在测量的所有时间点的嗜酸性粒细胞浓度在统计学上均显著下降。图33A-C。最后，数据还揭示，相比于无反应者与安慰剂对照，DS107治疗的反应者在所有时间点的嗜酸性粒细胞浓度均有统计学显著下降。图34A-C和图35A-C。

这些数据加在一起表明，预先确定嗜酸性粒细胞水平较低的患者可能代表接受DGLA治疗，尤其是口服DGLA，例如DS107的候选人。这些发现可用于预测DGLA疗法对患者的功效。

实施例3

在自发性高血压大鼠中共同施用DGLA和阿司匹林后，进行了抗高血压功效的体内研究。该实验研究了当与阿司匹林长期共同施用时DGLA在自发性高血压大鼠中减轻去氧肾上腺素急性诱发的高血压反应的功效。该测定使用由查尔斯河实验室(Charles RiverLaboratories)饲养的自发性高血压成年雄性大鼠(250-300g)。根据CCPA指南在抵达时对动物进行标识。在手术前经口管饲法将动物按组配对饲养(低剂量+阿司匹林，高剂量+阿司匹林或单独使用阿司匹林)。记录所有动物护理和饲养室维护，并将文件保存在测试机构处。

大鼠是明确表征的高度敏感的模型，用于评估长期暴露于测试物品后的血管张力效应和评估功效。该研究设计基于当前的国际协调会议(ICH)协调的三方指南[ICH S7A]和测试药物化合物的公认程序。这项非临床的实验室研究设计为不符合GLP的研究，不需要进行质量检查。

申办者根据设计本研究时可获得的信息，选择要测试的DGLA浓度(50和500mg/kg)以及阿司匹林浓度(10mg/kg)。将其选择为覆盖可用于鉴定测试物品的作用机理的浓度范围。

根据文献参考选择阳性对照(卡维地洛0.1mg/kg)和增压剂(去氧肾上腺素3、10和20μg/kg)的浓度。所有溶液制剂均记录在溶液内容物表中，定义标签信息和试剂的所有相关信息：批号、储存条件、内容物及制备/有效期。

使用橄榄油作为媒介物配制测试物品。然后连续七天，每天一次通过经口管饲施用该原液。测试了低剂量和高剂量(50mg/kg和500mg/kg)。

通过将适量的阿司匹林溶解在100％DMSO中来制备5mg/ml的阿司匹林原液，然后将其在水中稀释。DMSO的浓度小于1％。连续七天，每天一次通过经口管饲向每只动物施用适当体积。原液在室温下储存，在管饲期间被认为是稳定的。

在PBS中制备0.4mg/ml卡维地洛原液(pH＝4.00±0.05)。在手术当天的实验结束时，通过静脉内注射向每只动物施用适当体积。将原液在4℃下储存，并且被认为在整个实验过程中是稳定的。

在PBS中制备1mg/ml的去氧肾上腺素原液(pH＝7.4±0.05)。将原液在4℃下储存。有效期定为制备后14天。

研究完成后，将销毁所有剩余的测试物品。

重约300g的雄性自发性高血压大鼠在开始进行经口管饲之前至少两天到达该机构。将动物分配到三组之一(低剂量+阿司匹林，高剂量+阿司匹林和阿司匹林)，并在适应期间成对饲养。每组(n＝4)使用16G喂食针通过经口管饲法接受适当的化合物。原液连续七天每天施用一次。在施用的第七天，对动物进行手术和高血压监测。

在诱导箱中用2.5-3.0[[]]％的异氟烷-O2混合物麻醉大鼠。当将动物从诱导箱中取出时，将它们连接到鼻锥上以在气管切开术期间维持麻醉。用气管插管对动物进行气管切开术(从连接器到用来自BD的PE205管和16G针制成的尖端的长度为7cm)，以促进自发呼吸，稳定血流动力学，并用异氟烷-O2混合物使大鼠处于麻醉状态。插入了两个导管：一个在右股动脉中用于系统动脉压(SAP)测量，另一个在右股静脉中用于输送增压剂和阳性对照。通过在麻醉的动物上呈Lead-1构型放置ECG触点来获取ECG信号，并将脉搏血氧仪连接到动物的后爪上，以便在手术过程中连续监测大鼠的总体状况。进行基线测量后，通过静脉推注递送三个剂量的去氧肾上腺素(3、10和20μg/kg)，每剂间隔5分钟。在最高浓度的去氧肾上腺素后，施用一个剂量的阳性对照卡维地洛(0.1mg/kg)。阳性对照后，再次施用10μg/kg的去氧肾上腺素。总共半小时持续监测血压、全身动脉压(SAP)和心率。按舒张压、收缩压或平均血压的升高来检测高血压。在实验结束时，通过放血使动物安乐死。

使用的分析软件是Axon Instruments的Clampfit 10.2.0.14，安装在运行Microsoft Windows的联网个人计算机上。Clampfit 10.2.0.14已在使用它的关联背景下得到充分验证。用于说明的图形软件是在运行Microsoft Windows的联网个人计算机上安装的Microsoft Office Excel 2007。连续记录的全身动脉压(SAP)用于计算每种情况的平均全身动脉压(mSAP)。从诱导麻醉开始就连续监测心率。分析了单因素ANOVA，比较了实验组之间曝光前后的参数。p≤0.05时确认统计学意义。

表14.管饲七日后，静脉注射去氧肾上腺素之前的动脉压和平均全身动脉压(mmHg)。

表14.

表15显示以10mg/kg/天连续7天管饲阿司匹林后，静脉给药去氧肾上腺素后平均全身动脉压的变化。

表15.

图7显示了施用去氧肾上腺素后平均全身动脉压的变化，单位mm Hg。五只大鼠以10mg/kg/天连续7天管饲阿司匹林后接受了静脉注射的去氧肾上腺素。将三剂去氧肾上腺素的每剂的平均全身动脉压与第一基线进行统计学比较，而将卡维地洛的情况与施用前即刻的基线进行统计学比较，并将去氧肾上腺素的最终剂量(10μg/kg)与直接在之前的阳性对照情况进行比较。

这些结果表明，随着去氧肾上腺素剂量的增加，平均全身动脉压增加。获得的所有数据与基线具有统计学差异，这证实了去氧肾上腺素在饲喂了阿司匹林的自发高血压大鼠模型中的增压剂作用。去氧肾上腺素的作用是完全可逆的；第二基线期间(20μg/kg之后)的平均动脉压实际上与原始基线非常相似。

卡维地洛在去氧肾上腺素后立即添加时引起显著降低，证实了其众所周知的降低高血压的能力(卡维地洛是一种非特异性的β受体阻滞剂/α-1受体阻滞剂，可阻断去氧肾上腺素与α-1肾上腺素受体的结合)。卡维地洛后末次添加去氧肾上腺素导致有限的平均全身动脉压升高。

图8显示连续7天管饲50mg/kg的DGLA+10mg/kg的阿司匹林后，静脉注射去氧肾上腺素后平均动脉压(mmHg)的变化。

表16显示连续7天管饲50mg/kg的DGLA+10mg/kg的阿司匹林后，静脉给药去氧肾上腺素后平均动脉压相对于基线的变化。

表16.

图8中呈现的结果表明，在口服饲喂50mg/kg DGLA+10mg/kg的阿司匹林七天后，在五只自发性高血压大鼠中静脉给药去氧肾上腺素后，平均动脉压(mmHg)的变化。将测试物品的结果与仅使用阿司匹林的组(10mg/kg)获得的数据进行比较。将卡维地洛与第二基线进行比较，并将最后一个剂量的去氧肾上腺素与卡维地洛进行统计学比较。

随着去氧肾上腺素浓度的增加，动物的血压呈剂量依赖性增加。对于给定剂量的去氧肾上腺素，已施用DGLA 50mg/kg和阿司匹林的大鼠表现出动脉压升高，这与在10天内接受阿司匹林的大鼠中测得的动脉压基本上相同。用50mg/kg DGLA加上10mg/kg阿司匹林饲喂的大鼠，在任何去氧肾上腺素浓度下，与阿司匹林组相比，平均动脉压无显著差异。因此，每天服用阿司匹林似乎阻止了每天服用50mg/kg DGLA所带来的益处。

卡维地洛使DGLA+阿司匹林饲喂的动物的血压显著降低。由于麻醉问题，未给予3号大鼠最后一个剂量的去氧肾上腺素(在这种情况下，n＝4)。

表17显示以500mg/kg的DGLA与10mg/kg/天的阿司匹林联合施用，连续7天管饲后，静脉给药去氧肾上腺素后平均动脉压的变化。

表17.

图9示出了在四只自发性高血压大鼠中，以500mg/kg的DGLA与10mg/kg的阿司匹林共同施用连续七天管饲后，静脉给药去氧肾上腺素后平均动脉压的变化。与较低剂量的DGLA+阿司匹林一样，将去氧肾上腺素的情况与仅用阿司匹林的组的情况进行比较。将卡维地洛与给药前的基线进行统计学比较，同时将最后一个剂量的去氧肾上腺素(10μg/kg)与阳性对照进行比较。

尽管观察到较低的平均动脉压，但同时饲喂DGLA和阿司匹林的大鼠以及仅饲喂阿司匹林的大鼠的平均全身动脉压之间无显著统计学差异。因此，似乎阿司匹林同样阻止了每天施用500mg/kg DGLA的益处。如在其他组中观察到的，阳性对照成功地在统计学上降低了动物的动脉血压。认为最后一个剂量的去氧肾上腺素引起的增加不是显著的。

表18显示了六个不同的管饲组，连续七天后的基线平均动脉压。

表18.

图10显示了在本研究的两个部分期间饲喂的六个组在基线时的平均动脉压。气管切开术稳定了血流动力学，但也引起了大鼠动脉压的变化。在该研究(研究编号20131022-1)的第一阶段，获得了未接受阿司匹林(媒介物、DGLA 50mg/kg和DGLA 500mg/kg)的大鼠的动脉压，并在本研究期间记录了其他组的动脉压(来自查尔斯河的不同批次的动物，但大鼠的品系和大小相同)。在施用50或500mg/kg的DGLA及其等效物加上10mg/kg的阿司匹林的组间进行统计t检验。在单独的50mg/kg DGLA和与10mg/kg的阿司匹林共同施用的50mg/kgDGLA之间以及在500mg/kg DGLA组相比于具有10mg/kg阿司匹林的500mg/kg DGLA之间，基线时平均动脉压有统计学上的显著增加(显著增加标记*)。因此，似乎DGLA成功地降低了自发性高血压大鼠的动脉压，阿司匹林消除了这种作用。

表19显示了六个不同的管饲组，连续七天后静脉注射20μk/kg的去氧肾上腺素的平均动脉压。

表19.

图11呈现了在研究DGLA的两项研究中分析的所有组的平均动脉压。这些动脉压是在静脉给药去氧肾上腺素20μg/kg后获得的。与在基线中获得的结果一样，将每个剂量的DGLA与仅用阿司匹林的组中的等效条件进行统计学比较。在两个相应的组之间均注意到平均动脉压显著增加(标有*)。

设计这项研究是为了研究DGLA单独和与阿司匹林长期共同施用时以降低高血压大鼠中测得的动脉压的功效，以及在同一品系的自发性高血压大鼠中由去氧肾上腺素急性诱发的高血压反应的降低。

自发性高血压大鼠(SHR)是高血压研究中常用的模型，因为它会在每个集落内对心血管系统的直接和间接效应物产生均匀的变化。选择了大鼠并进行了近交繁殖，收缩压超过150mmHg，持续一个月以上，定义为高血压。

这项研究揭示，长期共同施用DGLA和阿司匹林阻止了DGLA降低平均全身动脉血压(最多降低25％)，正如先前在用DGLA治疗的自发性高血压大鼠中所观察到的那样。

与仅单独饲喂阿司匹林的动物相比，所测试的DGLA剂量(50和500mg/kg)与10mg/kg的阿司匹林组合并未显著降低去氧肾上腺素注射后平均动脉血压的剂量依赖性升高。两种剂量的DGLA产生相似的效果，这表明如果共同施用阿司匹林，则更大剂量的DGLA的益处可能很小。将两种剂量的DGLA与仅用阿司匹林的等效条件进行比较时，在基线条件中以及当静脉给药20μg/kg的去氧肾上腺素对大鼠进行攻击时，阿司匹林会导致平均动脉压明显增加。

在这项研究中，将卡维地洛用作阳性对照。它是一种β受体阻滞剂，用于治疗心力衰竭和高血压。它通过舒张血管和减缓心律来发挥作用，从而改善心室充盈，血液流动并降低血压。在自发性高血压大鼠中静脉注射卡维地洛的效果，证实了在三种剂量的去氧肾上腺素中的每一种之后，卡维地洛具有降低血压的能力，并证明了测试系统的敏感性。

实施例4

在年龄为18至45岁(包括18岁和45岁)的健康男性和女性受试者中进行了一项单中心、双盲、随机、安慰剂对照、分为两部分的第一阶段研究。这项研究的主要目的是评估健康受试者中口服施用的单剂量和口服施用的多剂量DS107G胶囊(每天一次，持续28天)的安全性和血浆药代动力学(PK)。

这项研究的次要目标是评估以下内容：

在健康受试者中食物对口服施用的单剂量DS107G胶囊的PK的影响；和每天一次持续28天向健康受试者给予多个剂量的DS107G胶囊后，人皮肤中DGLA的PK。

总共招募了48位受试者(其中32位用于单剂量研究，16位用于多剂量研究)。单剂量和多剂量研究每个群组由8名受试者组成(理想情况下为4名男性和4名女性，但每种性别不少于3名)。

通过区组随机化将受试者以DG107G与安慰剂3∶1的比率随机分配。该研究的单剂量部分1包括三个群组，每个群组八个受试者，并基于安全监测委员会(SMC)对群组3的安全性数据的评估，增加了群组4。向群组1-3(分别为500、1000和2000mg)的空腹受试者并行施用单个口服剂量的DS107G或匹配的安慰剂；在群组3完成后，对群组4的受试者施用4000mg的剂量。在第一个剂量后≥14天，群组2的受试者在进食状态下接受1000mg或匹配的安慰剂。

该研究的多剂量部分2包括两个群组(群组5和6)，每个群组八个受试者，受试者在空腹状态下施用多个剂量的研究药物，持续28天。群组5和6中的受试者分别接受2000或4000mg DS107G或匹配的安慰剂，每天一次，持续28天。SMC对群组5的安全性数据进行评估之后，开始群组6。未计划进行中期分析。

在研究的部分1中，在研究第1至5、8、14天以及后续随访时给药后长达312小时，对于群组1-4而言仅在空腹的受试者中进行二均-γ-亚麻酸(DGLA)和15-羟基二十二碳三烯酸(15-HETrE)的血浆PK分析。在部分2中，在研究第1、2、3、5和8天给药后长达168小时，对群组5和6进行了DGLA的血浆PK分析。在整个研究过程中对安全性评估进行监测。

在安全性和耐受性评估期间，采用了随机、安慰剂对照、双盲设计，以最大程度地减小偏差。

研究的部分1遵循单次递增剂量设计，剂量递增至4000mg。除4000-mg剂量外，该研究部分1中的所有剂量先前均已在人体中进行了测试。在先前测试的多剂量方案中未观察到与治疗相关的不良事件(TEAE)，例如150mg/天持续28天，450mg/天持续28天，1000mg/天持续14天和2000mg/天持续10天。剂量选择是基于先前临床研究中测试的口服DGLA剂量，并且观察PK的表征以及先前测试的更高剂量的安全性作为主要目的。

还评估了食物对DGLA口服生物利用度的影响。

由于DGLA参与类固醇代谢，将健康女性受试者纳入这项研究以评估生物标志物二氢睾丸激素上的潜在性别组分。

该研究的部分1中每个受试者的总参与时间为约14天，不包括筛查期。在研究的部分2中，持续时间为约42天。

在研究开始之前的第-1天(基线)，通过评估安全性评估对部分1和部分2进行了筛查程序。安全性评估包括不良事件(AE)、临床实验室测试(血液学、生物化学、病毒学[乙型肝炎表面抗原、人免疫缺陷病毒(HIV)抗体、丙型肝炎抗体]和尿液分析)、滥用药物(DOA)测试结果、女性受试者的妊娠试验(尿液β人绒毛膜促性腺激素[βHCG])、生命体征(血压[BP]、脉搏、体温)、12导心电图(ECG)、体格检查以及相关药物评估(仅研究的部分2)。

所有受试者都需要符合下述纳入和排除标准。然而，研究者和申办者认为临床上不显著且没有引起安全问题的微小偏差是可接受的，与方案一致。

所有考虑参加研究的受试者都需要符合以下纳入标准：

1.受试者是男性或女性。

2.女性受试者和男性受试者的女性伴侣：

一定没有怀孕(女性受试者在进入研究之前尿妊娠试验必须为阴性)。

一定没有进行母乳喂养。

在研究期间或在研究后3个月内不得计划妊娠。

在进入研究之前以及随访就诊之后的另外3个月内，必须一直坚持适当形式的避孕。

3.受试者年龄在18至45岁之间(含18和45岁)。

4.受试者已经签署了知情同意书(ICF)。

5.受试者的体重指数(BMI)为18.0至30.0kg/m²(含18.0和30.0kg/m²)。

6.研究者通过评估安全性评估，认为受试者身体健康。

7.受试者必须能够与研究者良好地沟通，能够理解并遵守研究要求，并且能够理解并签署书面ICF。如果有以下任何标准的证据，则将受试者从研究中排除：

受试者在筛查前的4周内有临床上显著的疾病。

具有生育能力的女性和男性受试者的女性伴侣，在研究之前的三个月未使用安全避孕措施，并且不愿意在研究持续期间使用安全避孕措施；安全避孕措施的实例包括子宫内避孕器或口服避孕药，隔膜或与杀精子剂组合使用的避孕套。

受试者在给药前2周使用了处方药，或在服药前1周使用非处方制剂(包括维生素和补充剂)(对乙酰氨基酚除外，在给药前48小时允许服用)和激素避孕药。

受试者使用富含ω-3或ω-6脂肪酸的膳食补充剂。

受试者有明显的药物/溶剂滥用史，或在筛查DOA时检测结果呈阳性。

研究者认为，受试者有酗酒史，或在筛查时每周饮酒超过28个单位(男性)或每周饮酒超过21个单位(女性)。

研究者认为，受试者不适合参加该研究。

受试者在施用研究药物的第一天前3个月内参加了另一项用研究药物/装置的临床研究。

在筛查时，受试者的HIV抗体、乙型肝炎表面抗原或丙型肝炎抗体检测结果均为阳性。

受试者对任何药物都有严重的不良反应或明显的过敏反应。

受试者在筛查前3个月内捐赠了血液或血液制品。

受试者已知对研究药物的任何成分有过敏。

受试者可以随时出于任何原因自由地撤回研究的同意。另外，如果研究者认为符合受试者的最大利益，研究者可以使受试者从研究参与中退出。由于以下任何原因，受试者将从研究中退出：

随时撤回同意

与方案有偏差

偶发疾病

AE(不良反应)。

尽管受试者没有义务给出提前退出的理由，但调查人员应在充分尊重受试者权利的同时做出合理的努力以获取原因。如果有医学原因撤回同意，则该受试者应仍然处于研究者的监督下，直到该受试者的健康状况令人满意为止；研究者将进行随访评估。

如果研究者认为将其视为符合受试者福利的最佳利益，则研究者应将受试者退出研究的医学原因告知受试者的全科医生。将尽一切努力联系未能返回现场进行随访邀请的受试者，以确保该受试者的健康状况令人满意。

在研究的部分1中，根据表20，在研究第1天空腹至少8小时后，向群组1-3的受试者并行施用单剂量的研究药物(500-、1000-或2000-mg作为500-mg DS107G胶囊或匹配的安慰剂胶囊)。SMC审查群组3的安全性数据后，开始群组4。

在第一个剂量后至少14天，此时施用第二个单剂量，在群组2中评估食物影响。在空腹10小时后和开始进餐后30分钟，向受试者施用1000-mg剂量的研究药物和240mL水。然后在给药后至少4小时内避免受试者进食。使用标准的高脂膳食(800至1000kcal，其中500至600kcal来自脂肪，250kcal来自碳水化合物)，在给药后至少12小时将食物消耗标准化。典型的标准测试餐包括两个用黄油煎蛋，两片培根，两片加黄油的吐司，120mL土豆泥和240mL全脂牛奶。

在研究的部分2(群组5和6)中，受试者在空腹状态下施用研究药物(500mg DS107G胶囊或匹配的安慰剂胶囊)，每天一次，持续28天。群组5的受试者首先接受研究药物，如果他们在前14天耐受2000mg的日剂量，群组6的受试者则以4000-mg的日剂量开始，持续28天。

表20.治疗群组

注意：每个DS107G胶囊均含500mg DGLA。

剂量水平的任何升高或后续群组的开始由首席研究者决定。在开始群组4(4000mg剂量)之前，至少需要5名来自群组3(2000mg剂量)的具有可评估安全性数据的受试者。在部分2中，在开始群组6(4000mg/天)之前，至少需要5名来自群组5(2000mg/天)的具有14天可评估安全性数据的受试者。

开发了含有500mg DGLA游离脂肪酸(FFA)的DS107G DGLA胶囊的一种优势。胶囊包括以下赋形剂：DGLA FFA(用标称2000ppm dl-α生育酚稳定)。胶囊壳中的所有赋形剂通常用于软明胶产品中，并且包括可传播性海绵状脑病(TSE)认证的明胶壳，其中含有以下成分：纯净水、增塑剂甘油、着色剂二氧化钛以及加工助剂卵磷脂和中链甘油三酯。用于临床研究的安慰剂胶囊(DS107G安慰剂胶囊)由封装在软明胶壳中的液体石蜡组成，并且外观与DGLA胶囊相同。

使用随机分组计划将符合资格标准的受试者随机分配为接受DGLA(500、1000、2000、4000mg剂量)或匹配的安慰剂胶囊。随机分组是积极治疗与安慰剂的比率为3∶1的随机分组。随机分组计划是由Planimeter使用

9.1.3SP4生成的。

不允许受试者在给药前2周内使用处方药，或在给药前1周内使用非处方制剂(包括维生素和补充剂)和激素避孕药，对乙酰氨基酚除外，允许在给药前48小时使用对乙酰氨基酚。另外，不允许受试者使用富含ω-3或ω-6脂肪酸的膳食补充剂。不允许受试者每周饮酒超过28个单位(男性)或每周饮酒超过21个单位(女性)。

建议受试者在筛查之前和研究期间避免食用富含ω-3或ω-6脂肪酸的食物补充剂(例如，鱼肝油胶囊)4周。

建议受试者在采集尿样以进行DOA测试之前至少24小时避免食用罂粟籽和含有罂粟籽的食物，因为罂粟籽有时会产生阳性测试结果。

在给药后至少4小时限制群组2的受试者进行食物消耗，该群组2正在进行食物对口服1000mg DGLA胶囊的影响的评估。使用标准的高脂膳食，在给药后至少12小时将食物消耗标准化。

除激素避孕药外，研究期间受试者应避免服用任何全身性或非处方药(包括维生素和补充剂)。允许在给药前最多48小时使用扑热息痛(剂量最多为4g/天)。从第一次施用研究药物(第1天)之前48小时到随访就诊，受试者还应避免饮酒。

在研究之前或研究期间，咖啡因摄入量或吸烟量没有限制。要求受试者在采集血液进行临床实验室测试之前至少3至4小时避免运动和剧烈的体育活动。

在从受试者获得的血样中进行了DGLA(游离的和总的)及游离15-HETrE血浆浓度的分析。另外，在第1、7、14和28天获得了皮肤疱液，用于分析游离和总DGLA。

在部分2中将二氢睾酮(DHT)血浆浓度作为生物标志物或探索性功效终点进行了评估。

使用经过验证的方法对所有血浆和皮肤疱液样品进行分析。通过液相色谱与串联质谱法(LC/MS/MS)测量血浆和皮肤疱液中游离和总DGLA的浓度；游离DGLA的定量范围为100至10,000ng/mL，总DGLA的定量范围为5000至500,000ng/mL。通过LC/MS/MS测量游离15-HETrE的血浆浓度，其定量范围为100至10,000ng/mL。通过LC/MS测量DHT的血浆浓度，其定量范围为0.02至1.5ng/mL。

在1期单元的整个限制期间对受试者进行监测，以了解对研究药物和/或程序的不良反应。

本研究中使用的药代动力学评估是评价潜在治疗剂的标准方法。安全性评估包括被认为是1期临床研究的标准方法的方法。

该研究具有探索性，没有进行正式的功效计算。认为每个群组计划的受试者人数(8名受试者)足以评估DS107G胶囊的安全性和全身暴露。

群体分析包括以下内容：

·意向治疗(ITT)群体由已施用至少1剂研究药物的所有随机受试者组成。

·符合方案(PP)的群体包括ITT群体中没有严重违反方案(如SAP所定义)的所有受试者。

·PK群体包含PP群体中所有具有源自血浆的可评估PK数据的受试者。如果可获得以下数据，则认为血浆浓度观测值是有效、可评估的测量值：研究识别号、随机化编号、采样日期和时间、剂量和浓度。如果可以评估每种方案规定的浓度，则认为来自同一样品的一系列此类测量已完成。如果血浆PK数据包含一系列完整的观测结果，则可以通过定义进行评估该数据。任何缺失的血浆PK观测结果都会导致PK数据不完整，因此，任何血浆PK观测结果缺失的受试者将从PK群体中排除。随机分配安慰剂的受试者也从PK群体中排除。

为研究部分1和部分2数据分别生成了上面定义的群体。对ITT群体进行了安全性分析。

对按治疗组、群组和就诊制成表的安全性群体进行安全性分析。所有安全性数据均采用描述性统计工具进行了表征。在研究方案中未设定任何假设来进行研究。对安全性评估的评价以描述性方式进行。连续变量的特征在于其均值、标准偏差(SD)、中值、最小值和最大值；离散变量的特征在于其绝对(频率)和相对(百分比)分布。

主要终点(源自单个和多个口服剂量的DS107G胶囊的PK特性)是借助于非区室PK建模得出的。次要终点由表征食物对单个口服剂量的DS107G胶囊的PK的影响以及表征多个口服剂量的DS107G胶囊后人皮肤中DGLA的PK组成。

使用以下描述性分析工具报告次要终点：对于按治疗组、就诊和群组分组的连续参数得出的有效观测结果的数量、平均值、标准偏差(SD)、中值、最小值和最大值。

评估研究数据期间未进行正式的假设检验。在部分1(单次提升剂量)中，根据定义，暴露程度为1天(在成功施用研究药物的情况下)。在部分2(多次提升剂量)中，暴露程度按末次研究药物摄入的天数减去首次研究药物摄入的天数+1来计算(当没有记录到研究药物施用中断时)。在发生中断的情况下，上述公式的结果随中断次数而减小。

使用SAS软件(版本9.1.3)对PK数据进行统计分析。没有进行药效学分析。

DGLA和15-HETrE的血浆PK参数使用模型无关技术(非区室分析)估算，包括：部分1和2的C_max、t_max、C末次、T末次、AUC_0-24、AUC_0-inf、AUC_末次、λz、CL、V和t¹/₂，以及仅部分2(稳态)数据的t_min、cmin、CLss、Vss、C_avg和％PTF。

描述性地汇总了所有PK参数，由于研究的探索性，未进行正式的统计学检验。

在单剂量情况下(部分1)，在群组1、3和4中，研究药物的停用不是潜在的结果；因此，这些群组不需要报告活性。对于群组2，入组受试者两次接受研究药物：在空腹状态下施用单剂量和在进食状态下施用第二单剂量。

还对该方案进行了以下修改。

·增加了《临床研究表》，以阐明先前口服DGLA的临床研究及其安全性结论。

·增加了风险/益处评估，以阐明为使研究者和道德委员会受益的拟议试验的评估风险和益处。

·更改了入选标准，使得可以带回参加该研究的部分1(单剂量群组)的受试者并重新加入部分2(多剂量群组)，只要他们没有与研究药物相关的不良事件，在开始多剂量方案之前，他们的清除期至少为14天。进行此更改的理由是在不影响志愿者安全的前提下协助招募。

·在研究的部分2(多剂量群组5和6)中，在所有临床实验室评估时间点增加了临床实验室凝血测试(凝血酶原时间和活化部分凝血酶原时间[APTT])作为评估。增加这些评估是为了监测作为未来研究的探索性生物标志物的凝血因子的任何潜在变化。

·替换了模棱两可的措词，以阐明将获得单个ECG记录。

·由于部分1群组的初步PK数据揭示15-HETrE的所有样品均低于定量限值(BLQ)，因此将15-HETrE作为部分2(多剂量群组)中的测试分析物去除。

·除了游离(非酯化)DGLA外，所有分析中都添加了“总”DGLA的定量，因为“总的”血浆PK曲线可能与“游离的”不同。

·此外，还包括对计划分析的更改，以提供其他分析和统计输出。

筛查了40名受试者；在这40名受试者中，有4名受试者由于不满足纳入/排除要求而被排除在外，还有4名受试者撤回同意。表21中呈现了随机分配研究药物的32名受试者的安排。

表21.受试者安排概况-ITT群体(单剂量)。

ITT＝意向治疗

1在接受安慰剂的8名受试者中，有2名受试者随机分配至每个DS107G给药组。

表22中汇总了DS107G施用前基线时游离和总DGLA的血浆浓度。这些浓度通常变化很大。

表22.DGLA(单剂量、药代动力学群体)的基线血浆浓度

DGLA＝二均-γ-亚麻酸；Max＝最大值；平均值＝算术平均值；min＝最小值；N＝提供数据的受试者数；SD＝标准偏差

对于图12(线性图)和图13(对数-线性图)中的游离DGLA以及图14(线性图)和图15(对数-线性图)中的总DGLA，按剂量群组以图形显示了单剂量DS107G后的平均血浆浓度。

单个剂量的DS107G胶囊(500、1000、2000和4000mg)后，对于血浆浓度和基线校正的PK参数而言，游离和总DGLA的受试者间变异性(通过SD测量)较高。在空腹条件下，游离和总DGLA的平均基线校正的C_max和AUC0-24呈线性增加(表23、表24)。游离DGLA达到最大浓度的中值时间(T_max)为4小时(表23)，并且在整个剂量范围内不一致，在2个较低剂量下的值为8小时，在2个较高剂量下的值为18小时(表24)。尽管在某些群组中可以确定少于一半受试者的基线校正的消除PK参数，但没有证据表明游离或总DGLA的消除半衰期或清除率具有非线性药代动力学特性(表24和表25)。尽管未进行统计学评估，但基于基线校正的平均C_max和AUC_0-24(表22)，在空腹条件下施用单个1000mg剂量的DS107G引起总DGLA吸收速率和程度提高约50％。

表23.空腹施用后游离DGLA的基线校正的血浆药代动力学参数(单剂量、药代动力学群体)

Max＝最大值；平均值＝算术平均值；Min＝最小值；N＝提供数据的受试者数；SD＝标准偏差注意：在计算参数之前，先从后续浓度中减去给药前的DGLA浓度；负值替换为零。

表24.空腹施用后总DGLA的基线校正的血浆药代动力学参数(单剂量、药代动力学群体)

Max＝最大值；平均值＝算术平均值；Min＝最小值；N＝提供数据的受试者数；SD＝标准偏差注意：在计算参数之前，先从后续浓度中减去给药前的DGLA浓度；负值替换为零。

评估了食物对使用1000-mg剂量(群组2)的游离和总DGLA的单剂量基线校正的PK的影响，并在表26中进行了报告。简而言之，在空腹条件下，平均基线校正的游离DGLA C_max比进食条件下高约3倍，且出现时间早1小时(中值)(表26)。空腹条件下的平均游离DGLA基线校正的AUC0-24比进食条件下的值高约2倍。因此，观察到空腹条件下DGLA吸收的速率和程度增加。空腹和进食条件在游离DGLA消除方面无明显差异(表25)。

对于总DGLA，在空腹条件下，平均基线校正的C_max比进食条件下高约1.5倍，t_max出现时间早约50％(中位值：8与15小时)(表25)。空腹条件下的平均基线校正的AUC_0-24比进食条件下高约1.8倍。不足一半的受试者(2/6空腹，3/6进食)有足够的数据来估算总DGLA λz、t1/2、清除率和分布量。这些数据表明在空腹条件下总DGLA吸收速率和程度增加。由于数据量少，没有关于总DGLA消除或体积分布的可靠结论。

根据表25中所示的PK参数，总DGLA的平均基线校正的C_max比游离DGLA高～10倍(空腹)和高～20倍(进食)。总DGLA的平均基线校正AUC_0-24比游离DGLA高～54倍(空腹)和高～56倍(进食)。

表25.空腹与进食施用后DGLA的基线校正的血浆药代动力学参数(单剂量、药代动力学群体)

Max＝最大值；平均值＝算术平均值；Min＝最小值；N＝提供数据的受试者数；SD＝标准偏差注意：在计算参数之前，先从后续浓度中减去给药前的DGLA浓度；负值替换为零。

对于健康志愿者，量为500、1000、2000或4000mg的作为单剂量的DSI07G耐受性良好。报道的最常见的TEAE是轻度至中度腹泻(报告的术语：便溏)，在积极治疗和安慰剂对照受试者之间受试者的百分比相似(发生率：积极治疗的受试者为5/24[20.8％]，而安慰剂对照受试者为2/8)。腹泻事件的持续时间相对较短，研究者认为所有腹泻事件(包括安慰剂对照受试者中发生的腹泻事件)可能都与研究药物有关。值得注意的是，接受第二单剂量DS107G且空腹状态下有腹泻TEAE的受试者没有复发腹泻。所有其他TEAE均仅各在1名受试者中发生，并且仅在积极治疗组中发生，包括：轻度感染、口咽痛和咽炎；在进食状态下给药后出现中度严重的发热和尿路感染。

多剂量结果-研究部分2

对于图16(线性图)和图17(对数-线性图)中的游离DGLA以及图18(线性图)和图19(对数-线性图)中的总DGLA，按剂量群组以图形显示了部分2的平均血浆浓度和稳态平均浓度。在第1天和第28天，游离DGLA的平均浓度在给药后约4小时达到峰值，而没有明显的总DGLA的平均峰值浓度。随着重复给药，游离和总DGLA的平均浓度均随时间而增加，但总DGLA的增加更为明显。根据对平均浓度图的目测，剂量(每天2000和4000mg)和分析物(游离和总DGLA)的血浆浓度似乎都在第14天左右达到稳态。当剂量从每天2000mg增加一倍至4000mg时，游离DGLA的稳态平均浓度增加1.6倍，而总DGLA仅增加1.2倍，表明在较高剂量下有一个或多个饱和过程。

用基线DGLA浓度校正DGLA给药浓度后，计算PK参数。

表26中报告了游离DGLA的血浆基线校正的药代动力学。简而言之，在较高的DS107G剂量群组中，在评估的两天中，平均游离DGLA基线校正的C_max和AUC更高。第1天4000mg剂量的平均经基线校正的C_max是2000mg剂量的～3倍，但在第28天仅为～1.4倍。在第1天4000mg剂量的平均基线校正的AUC0-24是2000mg剂量的～2.5倍，在第28天仅为～1.7倍。第1天，基线校正的C_max和AUC0-24随剂量的变化是线性的，但第28天只有基线校正的AUC0-24随剂量的变化是线性的。高的受试者间差异性可能导致了这种不一致。第1天和第28天这两个剂量群组的中值t_max相似，值为4或5小时。第28天的中值消除t_1/2比第1天更长，第28天的值取决于评估的时间间隔。随着多个剂量，平均清除率降低，平均分布体积增大。

表26.游离DGLA的血浆基线校正的药代动力学参数(多剂量、药代动力学群体)

Max＝最大值；平均值＝算术平均值；Min＝最小值；N＝提供数据的受试者数；SD＝标准偏差注意：在计算参数之前，先从后续浓度中减去给药前的DGLA浓度；负值替换为零。

表27中报告了游离DGLA的稳态血浆基线校正的药代动力学。简而言之，游离和总DGLA的血浆浓度随着重复给药而增加，并在大约第14天达到稳态。当处于稳态时，在第28天(0-24小时)进行评估，两个剂量组的峰谷波动(PTF)都非常大(平均值，～430％和～490％)。对于C_max和AUC，2000mg剂量群组的平均累积率(AR)大于4000mg剂量群组(2000mg的AR为～2.8和～3.3，而4000mg的AR为～1.4和～1.6。数据显示了游离DGLA重复给药的可饱和动力学和/或分布体积变化的存在。

表27.游离DGLA的稳态血浆基线校正的药代动力学参数(多剂量、药代动力学群体)

AR＝累积率；Max＝最大值；平均值＝算术平均值；Min＝最小值；N＝提供数据的受试者数；PTF＝峰谷波动；SD＝标准偏差

注意：在计算参数之前，先从后续浓度中减去给药前的DGLA浓度；负值替换为零。

表28中报告了总DGLA的血浆基线校正的药代动力学。简而言之，正如预期的，在较高的DS107G剂量群组中，在评估的两天中，平均总DGLA基线校正的C_max和AUC_0-24更高。在第1天4000mg剂量的平均基线校正的C_max和AUC_0-24分别是2000mg剂量的～1.5倍和～1.5倍，但在第28天仅是2000mg剂量的～1.2倍和～1.4倍。

在评估的任一天中，对于总DGLA而言，基线校正的C_max和AUC4随剂量的变化都不是线性的。高的受试者间差异性可能导致了这种不一致。在两个剂量群组中，多个剂量的中值T_max发生时间(8-10小时)比单个剂量(10-18h)更早。当在24小时内评估时(分别为第1天和28天)，2000mg剂量群组的总DGLA消除中值t_1/2为34.4至44.0小时，而在0至168小时内评估时，第28天的总DGLA消除中值t_1/2为为62.6小时。平均清除率和分布体积随着多个剂量而降低。

表28.总DGLA的血浆基线校正的药代动力学参数(多剂量、药代动力学群体)

Max＝最大值；平均值＝算术平均值；Min＝最小值；N＝提供数据的受试者数；SD＝标准偏差注意：在计算参数之前，先从后续浓度中减去给药前的DGLA浓度；负值替换为零。

表29中报告了游离DGLA的稳态血浆基线校正的药代动力学。简言之，在稳态下，在第28天(0-24小时)进行评估，两个剂量组的峰谷波动(PTF)都非常大(平均值，62.5％和44.9％)。对于C_max和AUC，2000mg剂量群组的平均AR大于4000mg剂量群组。数据显示了总DGLA重复给药的饱和动力学和/或分布体积变化的存在。

表29.总DGLA的稳态血浆基线校正的药代动力学参数(多剂量、药代动力学群体)

在图20(线性图)和图21(对数线性图)中按剂量群组显示了皮肤疱液中的平均游离DGLA浓度。平均浓度随剂量加倍而大致翻倍(基于第1、8、14和28天的浓度)，并且在两种方案中随重复给药而累积。对于每天2000和4000mg，第28天的平均游离DGLA浓度是第1天的约3倍。

图22中按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均皮肤疱液总DGLA浓度(ng/mL，线性图)。图23中按剂量群组(多剂量，PK群体)显示了平均皮肤疱液总DGLA浓度(ng/mL，对数线性图)。

在图24(线性图)和图25(对数线性图)中按剂量群组显示了皮肤疱液中的平均总DGLA浓度。总DGLA平均浓度随剂量加倍而增加约1.4倍(基于第1、8、14和28天的浓度)。分别对于每天2000和4000mg，第28天的平均总DGLA浓度是第1天的约2.5倍和3倍。

在第8天和第14天(而不是第28天)，对于相同的DS107G剂量，血浆和皮肤疱液中的浓度分布重叠，并且血浆和皮肤疱液中游离DGLA的平均浓度有些相似。图26[线性图]和图27[对数线性图])表明DGLA在血浆和皮肤中分布类似。对于总DGLA，对于相同的DS107G剂量在第1天后，血浆中的平均浓度比皮肤疱液中高得多(图26[线性图]和图27[对数线性图])，这表明在血浆中比在皮肤中更容易发现总DGLA。总DGLA有限分布到皮肤中的机制很可能与血浆相比脂质含量较低有关。

将血浆二氢睾酮(DHT)浓度量化为探索性功效终点或生物标志物。基于SD，在大多数时间点，受试者间的浓度数据差异性很大。在图28(线性)和图29(对数线性)中按剂量群组显示了DHT的平均血浆浓度。

没有样品具有可测量的游离15-HETrE浓度；所有浓度均低于LLOQ(100ng/mL)。

多剂量研究没有死亡。当作为2000或4000mg剂量每天一次连续28天向健康志愿者施用时，DSI07G耐受性良好，最糟的TEAE是持续时间相对较短的轻度至中度腹泻(报告术语：便溏)。研究者认为大多数腹泻事件(积极治疗的受试者为发生率为7/12[43.8％]，安慰剂对照受试者为0/4[0.0％])可能与研究药物有关。4000-mg组中报告腹泻的受试者比例(4/6[66.7％])高于2000-mg组(3/6[50％])。在积极治疗的受试者中，TEAE的发生率比安慰剂对照受试者高得多(分别是11/12[91.73％]受试者总共报告了52个TEAE，1/4[25.0％]受试者总共报告了1个TEAE)。除了腹泻TEAE以外，没有严重的TEAE，所有事件均被认为与研究药物无关或不太可能有关。恶心是第二种最常报告的TEAE(在4000-mg治疗组中4/6[66.7％]受试者中发生了10个事件)；在严重程度上，9/10的恶心事件为轻度，其他为中度。除腹泻外，其余所有TEAE均各在2名受试者(支气管炎和鼻咽炎)或1名受试者(腹痛、乏力、发热、血液CPK升高、CRP升高、WBC计数减少、头晕、头痛、咳嗽和血肿)中报告，研究者认为其中大多数与研究药物不太可能有关或无关。认为可能与研究药物有关的其他TEAE是腹痛和无力(报告术语“虚弱”)，这两者与便溏事件有时间关联。

在多剂量研究中，在任何患者中均未观察到生命体征或ECG的临床显著异常。

实施例5

除了上述实施例2的随机、双盲、安慰剂对照的II期研究之外，还使用该研究结果进行了事后分层分析，以评估口服施用的DS107G(DGLA)对中度至重度特应性皮炎患者的疗效，所述患者与接受安慰剂的相同群体和/或总研究群体相比，具有低于约0.3x10⁹/L的正常嗜酸性粒细胞水平。事后分层研究的主要目的是比较口服施用的DS107G胶囊与安慰剂在治疗中度至重度特应性皮炎成年患者中的功效，所述患者具有低于约0.3x10⁹/L的正常嗜酸性粒细胞水平。次要目的是比较口服施用的DS107G胶囊在治疗中度至重度特应性皮炎成年患者中相比于总研究群体的功效，所述患者具有低于约0.3x10⁹/L的正常嗜酸性粒细胞水平。除非另有说明，否则事后分层分析的所有要素与以上实施例2中所述的II期研究的要素相同。

事后分层分析的结果示于表30-39和图36-43B中。基于特应性皮炎临床试验的FDA标准主要功效终点(研究者总体评估(IGA)下降了2分，并且治疗IGA的终点为0(清晰)或1(几乎清晰))，上述实施例2的随机、双盲、安慰剂对照的II期研究的事后分层分析的总体结果显示，与安慰剂或总研究群体相比，DS107在具有正常嗜酸性粒细胞水平的患者中的作用更强。关于这项研究，具有正常嗜酸性粒细胞水平的患者没有活动性感染或任何伴随的过敏性疾病。更具体地说，对于具有正常嗜酸性粒细胞水平的研究患者亚组，接受DS107的IGA反应者数量从接受安慰剂的相同组的22％增加到42％。类似地，对于具有正常嗜酸性粒细胞水平的研究患者亚组，接受DS107的患者的瘙痒减轻率从接受安慰剂的相同组的41％增加至53％。具体而言，该事后分层分析显示，在102名患者的总研究群体中有60％具有正常嗜酸性粒细胞水平(例如，低于约0.3x10⁹/L)。相反，具有高嗜酸性粒细胞水平(例如，高于约0.3x10⁹/L)的患者具有0％的IGA反应率。

对于DGLA和安慰剂而言，下面表30中列出了事后分层分析之前总研究群体的概况。

表30：事后分层之前接受DS107(“活性”)或安慰剂的总研究群体。

从总研究群体中统计分离出具有低于0.3x10⁹/L的正常嗜酸性粒胞水平的受试者群体。表31显示了接受DGLA和安慰剂的患者在事后分层分析后具有正常嗜酸性粒细胞水平的研究群体的数据。

表31：事后分层后，具有正常嗜酸性粒细胞水平的接受DS107(“活性”)或安慰剂的研究群体。

下表32显示了总研究群体(见“DS107 2a期I.T.T.”一栏)，具有正常嗜酸性粒细胞水平的患者和具有高嗜酸性粒细胞水平的患者(按接受DS107或安慰剂治疗的患者区分开)的比较。

表32：事后分层分析概要

＊末次观察推进法(LOCF)

如图36-37B所示，与接受安慰剂的相同组或总研究群体相比，具有正常嗜酸性粒细胞水平的接受DS107的研究患者在研究的第2、4、6、8和10周相对于基线的IGA评分变化更大。相应的数据示于表32和表33中。

如图38A和38B所示，与接受安慰剂的相同组或总研究群体相比，具有正常嗜酸性粒细胞水平的接受DS107的研究患者在研究的第2、4、6、8和10周相对于基线的EASI评分变化更大。相应的数据示于表34中。

如图39A和39B所示，与接受安慰剂的相同组或总研究群体相比，具有正常嗜酸性粒细胞水平的接受DS107的研究患者在研究的第2、4、6、8和10周相对于基线的VAS评分变化更大。相应的数据示于表35中。

如图40A和40B所示，与接受安慰剂的相同组或总研究群体相比，具有正常嗜酸性粒细胞水平的接受DS107的研究患者在研究的第2、4、6、8和10周相对于基线的SCORAD水平变化更大。相应的数据示于表36中。

如图41A和41B所示，与接受安慰剂的相同组或总研究群体相比，具有正常嗜酸性粒细胞水平的接受DS107的研究患者在研究的第2、4、6、8和10周相对于基线的BSA水平变化更大。相应的数据示于表37中。

如图42A和42B所示，与接受安慰剂的相同组或总研究群体相比，具有正常嗜酸性粒细胞水平的接受DS107的研究患者在研究的第2、4、6、8和10周相对于基线的DLQI水平变化更大。相应的数据示于表38中。

如图43A和43B所示，与接受安慰剂的相同组或总研究群体相比，具有正常嗜酸性粒细胞水平的接受DS107的研究患者在研究的第2、4、6、8和10周相对于基线的POEM评分变化更大。相应的数据示于表39中。

如实施例2中所提到的，当进一步查询数据时，观察到一个令人惊讶的发现。在此，在事后分析中对数据进行分层时，观察到另一个令人惊讶的发现。具体而言，发现具有低于0.3x10⁹/L的正常嗜酸性粒细胞计数的受试者表现出对DS107治疗更高的反应率。

如以上所讨论的，分析结果如图36-43B和表30-39所示。数据显示，具有正常嗜酸性粒细胞计数的受试者与总研究群体相比，通过IGA、瘙痒(VAS)、EASI、SCORAD、BSA、DLQI和POEM评分测得的反应率增加。具体而言，使用IGA评分将42％具有正常嗜酸性粒细胞水平的经DS107治疗的患者分类为反应者，而接受安慰剂的相同群体中只有22％。图36-37B和表30、31、32和33。如以上详细讨论的，如果受试者在第8周的IGA评分为0(清晰)或1(几乎清晰)考虑到与基线相比降低了2分，则将其归类为反应者。图38A-38B描绘了使用EASI评分的相似结果，其中51％具有正常嗜酸性粒细胞水平的经DS107治疗的患者分类为反应者，而接受安慰剂的相同群体中只有30％。表30、31、32和34。瘙痒评分(通过VAS测量)显示出相似的模式，53％具有正常嗜酸性粒细胞水平的经DS107治疗的患者分类为反应者，而接受安慰剂的相同群体中只有27％。图39A-39B和表30、31、32和35。SCORAD水平、BSA评分、DLQI评分和POEM评分反映出相似的结果。图40A-43B和表30、31、32和35-39。

这些数据共同表明，预先确定具有正常嗜酸性粒细胞水平的患者可能代表用DGLA，尤其是口服DGLA(例如DS107)治疗的候选人。与报道了在具有高嗜酸性粒细胞水平(例如，高于约0.3x10⁹/L)的患者中基于药物的疗法更有效的当前实践不同，本文所述的发现可用于预测DGLA疗法对患者的功效。

Claims (32)

1.一种包含DGLA或其衍生物的药物组合物用于治疗具有正常嗜酸性粒细胞计数的受试者的一种或多种病状的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述受试者是成年受试者。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述受试者是儿科受试者。

4.根据权利要求1所述的用途，其中所述嗜酸性粒细胞计数基于和实验室参考水平的比较确定。

5.根据权利要求1所述的用途，其中所述正常嗜酸性粒细胞计数小于约0.2x10⁹个/L，小于约0.25x 10⁹个/L，小于约0.3x 10⁹个/L，小于约0.4x 10⁹个/L，小于约0.5x 10⁹个/L，小于0.6x 10⁹个/L，小于0.7x 10⁹个/L或小于约0.8x 10⁹个/L。

6.根据权利要求1所述的用途，其中所述一种或多种病状是特应性病状。

7.根据权利要求1所述的用途，其中所述一种或多种病状包括慢性阻塞性肺病(COPD)。

8.根据权利要求1所述的用途，其中所述一种或多种病状包括血管炎。

9.根据权利要求8所述的用途，其中所述血管炎包括大血管炎(LVV)、中血管炎(MVV)、小血管炎(SVV)、可变血管炎(VVV)、单器官血管炎(SOV)和全身性疾病相关的血管炎。

10.根据权利要求1所述的用途，其中所述一种或多种病状包括哮喘、慢性鼻腔鼻窦炎或其组合。

11.根据权利要求10所述的用途，其中所述慢性鼻腔鼻窦炎包括具有鼻息肉(CRSwNP)的慢性鼻腔鼻窦炎。

12.根据权利要求11所述的用途，其中鼻息肉(CRSwNP)包括非嗜酸性亚型。

13.根据权利要求6所述的用途，其中所述特应性病状包括特应性皮炎。

14.根据权利要求13所述的用途，其中所述DGLA或其衍生物降低了以下的至少一项：研究者总体评估(IGA)水平，湿疹面积与严重程度指数(EASI)，受特应性皮炎影响的解剖部位的面积百分比，特应性皮炎评分(SCORAD)，受特应性皮炎影响的体表面积，皮肤病生活质量指数(DLQI)，面向患者的湿疹测量(POEM)或视觉模拟量表(VAS)瘙痒评分。

15.根据权利要求14所述的用途，其中所述EASI评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

16.根据权利要求14所述的用途，其中所述VAS评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％或超过约60％。

17.根据权利要求14所述的用途，其中所述SCORAD评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

18.根据权利要求14所述的用途，其中所述IGA评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％或超过约60％。

19.根据权利要求14所述的用途，其中为所述受特应性皮炎影响的体表面积分配体表面积(BSA)评分。

20.根据权利要求19所述的用途，其中所述BSA评分与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％或超过约60％。

21.根据权利要求14所述的用途，其中所述DLQI评分与基线相比降低约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

22.根据权利要求14所述的用途，其中所述POEM评分与基线相比降低约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

23.根据权利要求14所述的用途，其中由所述VAS计算瘙痒水平和/或瘙痒Δ。

24.根据权利要求23所述的用途，其中瘙痒水平与基线相比降低约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或超过约90％。

25.根据权利要求23所述的用途，其中瘙痒Δ为约30％、约40％、约50％、约60％、约70％或超过约70％。

26.根据权利要求6所述的用途，其中特应性皮炎包括具有任何EASI、VAS、SCORAD、IGA、BSA、DLQI和/或POEM评分的特应性皮炎。

27.根据权利要求1所述的用途，其中所述一种或多种病状包括慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、特应性皮炎、慢性鼻腔鼻窦炎或其组合。

28.根据权利要求1所述的用途，其中所述受试者是具有的嗜酸性粒细胞水平高于正常嗜酸性粒细胞水平、低于正常嗜酸性粒细胞水平或其组合的组的成员。

29.根据权利要求1所述的用途，其中所述DGLA或其衍生物呈液体或半液体形式。

30.根据权利要求1所述的用途，其中所述DGLA或其衍生物在胶囊中。

31.根据权利要求13所述的用途，其中所述DGLA或其衍生物呈液体或半液体形式。

32.根据权利要求13所述的用途，其中所述DGLA或其衍生物在胶囊中。

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