CN110964034B

CN110964034B - 嘧啶并噻吩类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

Info

Publication number: CN110964034B
Application number: CN201910921502.0A
Authority: CN
Inventors: 张国宝; 胡伟民; 贺峰; 陶维康
Original assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2018-09-29
Filing date: 2019-09-27
Publication date: 2022-04-12
Anticipated expiration: 2039-09-27
Also published as: CN110964034A

Abstract

本发明涉及嘧啶并噻吩类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。具体而言，本发明涉及一种通式(I)所示的嘧啶并噻吩类衍生物、其制备方法及含有该衍生物的药物组合物以及其作为治疗剂，特别是作为MCL‑1抑制剂的用途，其中通式(I)的各取代基与说明书中的定义相同。

Description

嘧啶并噻吩类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种通式(I)所示的嘧啶并噻吩类衍生物、其制备方法及含有该衍生物的药物组合物以及其作为治疗剂，特别是作为MCL-1抑制剂的用途。

背景技术

肿瘤细胞区别于正常细胞的一个重要特点就是细胞凋亡受到抑制，从而赋予了他们更大的生存优势。细胞凋亡也称为程序性死亡，可分为外源性凋亡和内源性凋亡。其中内源性凋亡是癌症发生发展的重要屏障。BCL-2家族蛋白是内源性凋亡的重要调节因子

BCL-2家族蛋白主要存在于线粒体膜上，根据功能可分为抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白两大类。抗凋亡蛋白包括BCL-2,BCL-XL,BCL-w和MCL-1。促凋亡蛋白包括Bax，Bak以及BH3-only蛋白。Bax和Bak被激活的时候，会形成多聚体空洞，使细胞线粒体膜的通透性增加，促进细胞色素C等释放到细胞质中，导致细胞死亡。BH3-only蛋白只包含BH3结构域。在细胞存活的状态下，BH3-only蛋白(如Bim)与抗凋亡蛋白结合。当细胞受到外界压力时，结合的平衡被打破，BH3-only蛋白被释放出来与线粒体上BAX结合，促进BAX/BAK形成多聚体，促进细胞色素C和SMAC释放到细胞质中，激活下游凋亡通路。

现有的临床数据表明MCL-1在多种肿瘤内出现过表达，例如在55％的乳腺癌以及84％的肺癌样品中检测到MCL-1过表达。在多发性骨髓瘤样品中中，随着癌症恶化程度的增加，MCL-1表达明显提高，但是BCL-2的表达没有变化。此外MCL-1表达量与病人的存活率负相关。在乳腺癌和多发性骨髓瘤病人中都观察到了MCL-1高表达伴随着更低存活率。由此可见MCL-1是一个重要的肿瘤治疗的靶标。

Novartis,Amgen以及AstraZeneca都有开发针对MCL-1的小分子抑制剂，但现在还处于临床阶段，因此需要进一步开发MCL-1抑制剂药物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的化合物：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐，

其中：

环A为杂芳基或芳基；

R¹为烷基或氘代烷基；

R²相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、氘代烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基或硝基；

R³为NR⁷R⁸、环烷基或杂环基；其中所述的环烷基和杂环基各自独立地任选被选自卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

R⁴选自卤素、烷基、氘代烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自卤素、烷基、氘代烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

R⁵相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、氘代烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基或硝基；

R⁶相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、氘代烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基或硝基；

R⁷和R⁸相同或不同，且各自独立地选自氢原子、烷基、氘代烷基、卤代烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；其中所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基各自独立地任选被选自烷基、烷氧基、卤素、氨基、氰基、硝基、羟基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

或者，所述R⁷和R⁸与相连接的氮原子一起形成杂环基，其中所述的杂环基除含有1个氮原子之外，还任选含有0～2个相同或不同的选自N、O和S的杂原子，并且所述的杂环基任选被选自卤素、烷基、氘代烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基中的一个或多个取代基所取代；

n为1至6的整数；优选为1；

p为1至6的整数；优选为2；

m为0、1、2或3；

s为0、1、2、3或4；

t为0、1、2、3或4。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物为通式(II)所示的化合物：

其中

G¹和G²相同或不同，且各自独立地为CH或N；

R¹、R²、R⁴、R⁷和R⁸如通式(I)中所定义。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其中所述的R²为卤素；优选为氯。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物为通式(III)所示的化合物：

其中

G³选自NR⁹、CR¹⁰R¹¹或O；

R⁹选自烷基、氘代烷基、卤代烷基或环烷基；

R¹⁰和R¹¹相同或不同，且各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、氘代烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基或硝基；

R¹和R⁴如通式(I)中所定义。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其中所述的R¹为C_1-6烷基；优选为甲基。

在本发明一个优选的实施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其中所述的R⁴为苯基，其中所述的苯基任选被选自卤素、烷基、氘代烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基和硝基中的一个或多个取代基所取代。

本发明的典型化合物包括但不限于：

或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式或其可药用的盐。

本发明的另一方面涉及一种通式(IA)所示的化合物：

其中：

X为卤素；

R^a为烷基；

环A、R⁴～R⁶、s、t和n如通式(I)中所定义。

本发明通式(IA)的典型化合物包括但不限于：

本发明的另一方面涉及一种制备通式(I)所示的化合物的方法，该方法包括：

通式(IA)的化合物和通式(IB)的化合物发生偶联反应，得到通式(I)的化合物，其中：

X为卤素；优选为溴；

M为

R^a为烷基；优选为乙基；

环A、R¹～R⁶、s、t、m、p和n如通式(I)中所定义。

本发明的另一方面涉及一种制备通式(II)所示的化合物的方法，该方法包括：

通式(IIA)的化合物和通式(IIB)的化合物发生偶联反应，得到通式(II)的化合物，

其中：

X为卤素；优选为溴；

M为

R^a为烷基；优选为乙基；

G¹、G²、R¹、R²、R⁴、R⁷和R⁸如通式(II)中所定义。

本发明的另一方面涉及一种制备通式(III)所示的化合物的方法，该方法包括：

通式(IIIA)的化合物和通式(IIIB)的化合物发生偶联反应，得到通式(III)的化合物，

其中：

X为卤素；优选为溴；

M为

R^a为烷基；优选为乙基；

R¹、R⁴和G³如通式(III)中所定义。

本发明的另一方面涉及一种制备化合物1的方法，该方法包括：

化合物1g和化合物1h发生偶联反应，得到化合物1。

本发明的另一方面涉及一种药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效量的本发明通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物在制备用于治疗或预防MCL-1介导的疾病的药物中的用途。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物在制备用于抑制MCL-1的药物中的用途。

本发明进一步涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物在制备用于治疗肿瘤、自身免疫性疾病和免疫系统疾病的药物中的用途；其中所述的肿瘤优选选自膀胱癌、脑瘤、乳腺癌、子宫癌、宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、白血病(如慢性粒细胞白血病、慢性淋巴性白血病、成淋巴细胞白血病或急性髓性白血病)、肾癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、食道癌、肝癌、胃癌、头颈癌、皮肤癌、淋巴瘤、胰腺癌、黑色素瘤、骨髓瘤(如多发性骨髓瘤)、骨癌、神经母细胞瘤、神经胶质瘤、肉瘤、肺癌肺癌(如非小细胞肺癌或小细胞肺癌)、甲状腺癌和前列腺癌。

本发明还涉及一种抑制MCL-1的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物。

本发明还涉及一种治疗或预防MCL-1介导的疾病的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物。

本发明还涉及一种治疗肿瘤、自身免疫性疾病和免疫系统疾病的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物；其中所述的肿瘤优选选自膀胱癌、脑瘤、乳腺癌、子宫癌、宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、白血病(如慢性粒细胞白血病、慢性淋巴性白血病、成淋巴细胞白血病或急性髓性白血病)、肾癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、食道癌、肝癌、胃癌、头颈癌、皮肤癌、淋巴瘤、胰腺癌、黑色素瘤、骨髓瘤(如多发性骨髓瘤)、骨癌、神经母细胞瘤、神经胶质瘤、肉瘤、肺癌肺癌(如非小细胞肺癌或小细胞肺癌)、甲状腺癌和前列腺癌。

本发明进一步涉及一种通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用盐或包含其的药物组合物，其用作药物。

本发明还涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物，其用作MCL-1抑制剂。

本发明还涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物，其治疗或预防MCL-1介导的疾病。

本发明还涉及通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体或其混合物形式，或其可药用盐，或包含其的药物组合物，其用于治疗肿瘤、自身免疫性疾病和免疫系统疾病；其中所述的肿瘤优选选自膀胱癌、脑瘤、乳腺癌、子宫癌、宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、白血病(如慢性粒细胞白血病、慢性淋巴性白血病、成淋巴细胞白血病或急性髓性白血病)、肾癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、食道癌、肝癌、胃癌、头颈癌、皮肤癌、淋巴瘤、胰腺癌、黑色素瘤、骨髓瘤(如多发性骨髓瘤)、骨癌、神经母细胞瘤、神经胶质瘤、肉瘤、肺癌肺癌(如非小细胞肺癌或小细胞肺癌)、甲状腺癌和前列腺癌。

可将活性化合物制成适合于通过任何适当途径给药的形式，活性化合物优选是以单位剂量的方式，或者是以患者可以以单剂自我给药的方式。本发明化合物或组合物的单位剂量的表达方式可以是片剂、胶囊、扁囊剂、瓶装药水、药粉、颗粒剂、锭剂、栓剂、再生药粉或液体制剂。

本发明治疗方法中所用化合物或组合物的剂量通常将随疾病的严重性、患者的体重和化合物的相对功效而改变。不过，作为一般性指导，合适的单位剂量可以是0.1～1000mg。

本发明的药物组合物除活性化合物外，可含有一种或多种辅料，所述辅料选自以下成分：填充剂(稀释剂)、粘合剂、润湿剂、崩解剂或赋形剂等。根据给药方法的不同，组合物可含有0.1至99重量％的活性化合物。

含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。

水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂例如尼泊金乙酯或尼泊金正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。

油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油中配制而成。油悬浮液可含有增稠剂。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。

通过加入水可使适用于制备水混悬液的可分散粉末和颗粒提供活性成分和用于混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂可说明上述的例子。也可加入其他赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸保存这些组合物。

本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。

药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳。例如将活性成分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后将油溶液加入水和甘油的混合物中处理形成微乳。可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本发明化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。这种装置的实例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型静脉注射泵。

药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。

可按用于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。此类物质包括可可脂、甘油明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。

如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物(I)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。

发明的详细说明

除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至12个碳原子的烷基，更优选为含有1至6个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自H原子、D原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基所取代。

术语“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自H原子、D原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基所取代。

术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，优选包含3至10个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。环烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基所取代。

术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O)_m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；更优选包含3至10个环原子，其中1-4是杂原子；更优选包含5至6个环原子；其中1-3个是杂原子。单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、四氢吡喃基、1,2.3.6-四氢吡啶基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。

所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：

杂环基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基所取代。

术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至10元，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：

芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基所取代。

术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至10元，更优选为5元或6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：

杂芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选独立地任选选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、卤代烷基、羟基、羟烷基、氰基、氨基、硝基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基中的一个或多个取代基所取代。

术语“卤代烷基”指烷基被一个或多个卤素取代，其中烷基如上所定义。

术语“氘代烷基”指烷基被一个或多个氘原子取代，其中烷基如上所定义。

术语“羟基”指-OH基团。

术语“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。

术语“卤素”指氟、氯、溴或碘。

术语“羟基”指-OH基团。

术语“氨基”指-NH₂。

术语“氰基”指-CN。

术语“硝基”指-NO₂。

术语“羰基”指C＝O。

术语“羧基”指-C(O)OH。

术语“羧酸酯基”指-C(O)O(烷基)或-C(O)O(环烷基)，其中烷基、环烷基如上所定义。

本发明还包括各种氘化形式的式(I)化合物。与碳原子连接的各个可用的氢原子可独立地被氘原子替换。本领域技术人员能够参考相关文献合成氘化形式的式(I)化合物。在制备氘代形式的式(I)化合物时可使用市售的氘代起始物质，或它们可使用常规技术采用氘代试剂合成，氘代试剂包括但不限于氘代硼烷、三氘代硼烷四氢呋喃溶液、氘代氢化锂铝、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。

“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。

“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。

本发明化合物的合成方法

为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

方案一

本发明通式(I)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

通式(IA)的化合物和通式(IB)的化合物在催化剂存在下在碱性条件下，发生偶联反应得到通式(I)的化合物；

其中：

X为卤素；优选为溴；

M为

R^a为烷基；优选为乙基；

环A、R¹～R⁶、s、t、m、p和n如通式(I)中所定义。

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱类，所述的有机碱类包括但不限于三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、双三甲基硅基胺基锂、醋酸钾、乙酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾和正丁醇钠，所述的无机碱类包括但不限于碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢化钠、磷酸钾、碳酸钠、碳酸钾、醋酸钾、碳酸铯、氢氧化钠和氢氧化锂；优选碳酸铯；

所述的催化剂包括但不限于钯/碳、四-三苯基膦钯、二氯化钯、醋酸钯、二氯双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)、双(二亚芐基丙酮)钯、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯或三(二亚苄基丙酮)二钯，优选为二氯双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯；

上述反应优选在溶剂中进行，所用溶剂包括但不限于：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、叔丁醇、甲苯、四氢呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亚砜、1,4-二氧六环、乙二醇二甲醚、水或N,N-二甲基甲酰胺及其混合物。

方案二

本发明通式(II)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

通式(IIA)的化合物和通式(IIB)的化合物在催化剂存在下，在碱性条件下，反应得到通式(II)的化合物；

其中：

X为卤素；优选为溴；

M为

R^a为烷基；优选为乙基；

G¹、G²、R¹、R²、R⁴、R⁷和R⁸如通式(II)中所定义。

方案三

本发明通式(III)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

通式(IIIA)的化合物和通式(IIIB)的化合物在催化剂存在下，在碱性条件下，反应得到通式(III)的化合物，

其中：

X为卤素；优选为溴；

M为

R^a为烷基；优选为乙基；

R¹、R⁴和G³如通式(III)中所定义。

方案四

本发明化合物1化合物，或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

化合物1g和化合物1h在催化剂(优选二氯双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II))存在下，在碱性条件(碳酸铯)下，反应得到化合物1。

具体实施方式

以下结合实施例用于进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。

实施例

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或质谱(MS)来确定的。NMR的测定是用BrukerAVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)，化学位移是以10^-6(ppm)作为单位给出。

MS的测定用FINNIGAN LCQAd(ESI)质谱仪(生产商：Thermo,型号：Finnigan LCQadvantage MAX)。

HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。

高效液相制备使用Waters 2767、Waters 2767-SQ Detecor2、Shimadzu LC-20AP和Gilson-281制备型色谱仪。

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm硅胶板。

柱层析一般使用烟台黄海200～300目硅胶为载体。

本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCR GmbH&Co.KG，Acros Organnics，Aldrich Chemical Company，韶远化学科技(AccelaChemBio Inc)、达瑞化学品等公司。

实施例中如无特殊说明，反应均在氩气氛或氮气氛下进行。

氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。

加压氢化反应使用Parr 3916EKX型氢化仪和清蓝QL-500型氢气发生器或HC2-SS型氢化仪。

氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。

微波反应使用CEM Discover-S 908860型微波反应器。

实施例中如无特殊说明，反应中的溶液是指水溶液。

实施例中如无特殊说明，反应的温度为室温。

室温为最适宜的反应温度，温度范围是20℃～30℃。

实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法(TLC)，反应所使用的展开剂的体系有：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。

纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂的体系包括：A：二氯甲烷和甲醇体系，B：正己烷和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和酸性或碱性试剂等进行调节。

实施例1

(R)-2-(((S)-6-(二环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)-5-(3-氯-2-甲基-4-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙氧基)苯基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)氧基)-3-(2-((2-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)甲氧基)苯基)丙酸1

第一步

2-(二环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷1c

将4-4-溴-1,2-二氢环丁苯1a(1.00g，5.46mmol，购于毕得)，联硼酸频那醇酯1b(1.67g，6.58mmol)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(400mg，0.55mmol)，1,1'-双(二苯基膦)二茂铁(400mg，0.55mmol)和乙酸钾(1.61g，16.41mmol)溶于20mL二氧六环中，氩气置换三次，反应液在氩气氛围下加热到90℃搅拌反应16小时。反应液冷却至室温，减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物1c(1.10g)，产率：87％。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃):δ7.71(d,1H),7.53(s,1H),7.10(d,1H),3.22(s,4H),1.38(s,12H).

第二步

6-(二环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)-5-溴-4-氯噻吩并[2,3-d]嘧啶1e

将1c(730mg,3.17mmol)，5-溴-4-氯-6碘噻吩并[2,3-d]嘧啶1d(1.00g,2.66mmol，采用专利申请“WO201715224”公开的方法制备而得)，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(200mg，0.27mmol)和碳酸铯(2.60g，7.98mmol)溶于12mL二氧六环和水(V:V＝5:1)混合溶液中，氩气置换三次，反应液在氩气氛围下加热到90℃搅拌反应3.0小时。反应液冷却至室温，减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物1e(420mg)，产率：44％。

MS m/z(ESI):352.9[M+1]

第三步

(R)-2-((6-(二环[4.2.0]辛-1(6),2,4-三烯-3-基)-5-溴噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)氧

基)-3-(2-((2-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)甲氧基)苯基)丙酸乙酯1g

将1e(360mg，1.02mmol)，(R)-2-羟基-3-(2-((2-(2-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)甲氧基)苯基)丙酸乙酯1f(390mg，1.02mmol，采用专利申请“WO2016207225”公开的方法制备而得)和碳酸铯(500mg，1.50mmol)置于溶于25mL圆底烧瓶中，加入5.0mL叔丁醇，反应液加热到36℃搅拌16个小时。反应液冷却至室温，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤，滤液减压浓缩除去溶剂，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系B纯化所得残余物，得到标题产物1g(130mg)，产率：18％。

MS m/z(ESI):723.2[M+1]

第四步

将1g(100mg，0.14mmol)，1-(2-(2-氯-3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)苯氧基)乙基)-4-甲基哌嗪1h(80mg，0.20mmol，采用专利申请“WO201715224”公开的方法制备而得)，碳酸铯(130mg,0.40mmol)和二氯双[二叔丁基-(4-二甲基氨基苯基)膦]钯(II)(10mg,0.01mmol)溶于3.0mL二氧六环和0.6mL水中，氩气置换三次，反应液在氩气氛围下加热到60℃搅拌反应3.0小时。反应液冷却至室温，氢氧化锂一水合物(100mg,2.38mmol)加入反应液，搅拌反应30分钟，减压浓缩除去溶剂，所得残余物用高效液相色谱法纯化(waters2767，洗脱体系：洗脱体系：10mmol/L乙酸铵，水，乙腈)，得到标题产物1(30mg)，产率：24％。

MS m/z(ESI):883.1[M+1]

¹H NMR(400MHz,CD₃OD):δ8.87(d,1H),8.46(s,1H),7.94(d,1H),7.62-7.58(m,2H),7.49(dd,1H),7.16(d,1H),7.14-7.06(m,4H),6.94-6.87(m,3H),7.73(dd,1H),6.27(d,1H),5.62-5.60(m,1H),5.29-5.20(m,2H),4.26(s,2H),3.84(s,3H),3.48(d,1H),3.36(d,1H),3.13-3.10(m,4H),2.93-2.86(m,9H),2.60(s,4H),1.79(s,3H).

测试例：

生物学评价

测试例1、本发明化合物与MCL-1蛋白结合实验。

以下方法用来测定本发明化合物与MCL-1蛋白的结合能力。实验方法简述如下：

一、实验材料及仪器

1.His-MCL-1蛋白(上海恒瑞医药有限公司，NA)

2.生物素标记Bim蛋白(R&D，3526/1)

3.标记铕穴状化合物抗6His抗体(cisbio，61HI2KLA)

4.亲和链霉素链接XL665(cisbio，611SAXLA)

5.结合缓冲液(cisbio，62DLBDDF)

6.检测缓冲液(cisbio，62DB1FDG)

7.酶标仪(BMG，PHERAsta)

二、实验步骤

MCL-1抑制剂可与MCL-1蛋白结合来阻止MCL-1与Bim蛋白的结合。本实验通过HTRF的方法检测MCL-1和Bim蛋白的结合来评价MCL-1抑制剂与MCL-1蛋白的结合能力，并根据Ki大小评价化合物的活性。

人重组蛋白MCL-1(序列171-327)和Bim(序列51-76)肽段分别标记了His和生物素。0.1nM的His-MCL-1，2.5nM的bio-Bim以及不同浓度的小分子化合物(首浓度10uM，3倍梯度稀释11个浓度,稀释在结合缓冲液中)混合室温孵育2小时，然后加入0.5nM标记铕穴状化合物抗6His抗体和1.25nM亲和链霉素链接XL665(稀释在检测缓冲液中)。室温孵育2小时后用PHERAstar检测620nm和665nm荧光信号。数据使用GraphPad软件处理。

三、实验数据

本发明化合物与MCL-1蛋白的结合能力可通过以上的试验进行测定，测得的Ki值见表1。

表1本发明化合物与MCL-1蛋白的结合的Ki。

实施例编号	Ki/nM	Max Inhibition(％)
			1	1.1	94

结论：本发明化合物与MCL-1蛋白具有较强的结合能力，能很好的抑制MCL-1与Bim蛋白的结合。

测试例2、细胞增殖实验

以下方法通过检测细胞内ATP含量，根据IC₅₀大小评价本申请化合物对AMO-1，NCI-H929，MOLP-8和MV-4-11细胞增殖的抑制效果。实验方法简述如下：

一、实验材料及仪器

1.AMO-1，人骨髓浆细胞瘤(南京科佰，CBP60242)

2.NCI-H929，人骨髓瘤细胞(ATCC，CRL-9068)

3.MV-4-11，人急性单核细胞白血病细胞(ATCC，CRL-9591)

4.MOLP-8，人多发性骨髓瘤细胞(南京科佰，CBP60562)

5.胎牛血清(GIBCO,10099)

6.RPMI1640(GE，SH30809.01)

7.IMDM(Gibco，12440053)

8. 2-巯基乙醇(sigma，60-24-2)

9.CellTite(Promega，G7573)

10. 96孔细胞培养板(corning，3903)

11.台盼蓝溶液(Sigma,T8154-100ML)

12.酶标仪(BMG，PHERAsta)

13.细胞计数仪(上海睿钰生物科技有限公司，IC1000)

二、实验步骤

AMO-1和molp-8细胞培养在含20％FBS的RPMI1640培养基中，NCI-H929细胞培养在含10％FBS和2-巯基乙醇的RPMI1640培养基中，MV-4-11细胞培养在含10％FBS的IMDM培养基中一周传代2～3次，传代比列1:4或1:6。传代时，将细胞转至离心管中，1200rpm离心3分钟，弃去上清培养基残液，加入新鲜培养基重悬细胞。在96孔细胞培养板中加入90μL的细胞悬液，密度为1.33×10⁵细胞/ml，96孔板外围只加入100μL的完全培养基。将培养板在培养箱培养24小时(37℃，5％CO₂)。

将待测样品用DMSO稀释成20mM，并以4倍依次稀释成9个浓度，并设置空白和对照孔。取配制成梯度浓度的待测化合物溶液5μL加入到95μL新鲜培养基中。再向培养板中加入10μL上述含药物的培养基溶液。将培养板在培养箱孵育3天(37℃，5％CO₂)。在96孔细胞培养板中，每孔加入50μL CellTiter-Glo试剂，室温避光放置5-10min，在PHERAstar中读取化学发光信号值，数据使用GraphPad软件处理。

三、实验数据

本发明化合物对AMO-1，NCI-H929，MOLP-8和MV-4-11细胞增殖抑制可通过以上的试验进行测定，测得的IC₅₀值见表2。

表2本发明化合物对AMO-1，NCI-H929，MOLP-8和MV-4-11细胞增殖抑制的IC₅₀值。

结论：本发明化合物对AMO-1，NCI-H929，MOLP-8和MV-4-11均具有很好的细胞增殖抑制效果。