CN110954491B - 用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其包括使醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与释放介质接触的步骤，其中，释放介质包含缓冲液和溶解于缓冲液中的促释剂和柠檬酸。本发明的方法可以大大缩短醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的释药评价时间，进而可以缩短药品研发及生产质量放行的周期，降低人员方面的成本投入。另外，本发明的方法还有助于制剂工作者更加快速、高效和准确地进行释药特性的质量评价。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析领域，具体地涉及用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法。
背景技术
戈舍瑞林(goserelin)是人工合成的十肽，是促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone，GnRH)的类似物，也是一种高效、毒副作用小的内分泌治疗药物。
戈舍瑞林缓释植入剂(例如诺雷得)的给药周期为28天，其活性成份为醋酸戈舍瑞林，辅料包括乙交酯-丙交酯共聚物、醋酸。临床用于激素依赖的前列腺癌、绝经前及围绝经期妇女的乳腺癌及子宫内膜异位症。该药物由英国阿斯利康公司研发及生产，是一种可在体内逐渐进行生物降解的缓释植入剂。1990年在全球首次上市，1996年在中国上市，目前该药在世界100多个国家包括中国的市场上均有销售。
目前文献及质量标准中公开的醋酸戈舍瑞林缓释制剂的释放度评价方法包括常速体外实验及动物体内实验(大鼠、兔、犬)。其中，常速体外释放度方法的评估周期为28天，而动物体内实验周期不会缩短，并且动物体内实验需要前期准备工作。例如，委托机构考察评估、签订合同、购买有资质的实验动物、饲养，并且给药与取血操作也有一定的难度。
综上所述，目前没有醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的释放度加速相关文献报道。因此，非常有必要建立与体外长期释放度实验方法具有良好相关性的体外加速释放度实验方法，从而用于快速的筛选处方和获取相关的工艺参数。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明进行了深入研究，建立了一种用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的体外释放的加速实验方法。具体地，本发明包括以下内容。
本发明提供一种用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其包括使醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与释放介质接触的步骤，其中，所述释放介质包含缓冲液和溶解于所述缓冲液的促释剂和柠檬酸。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，且所述释放介质的pH在6.8至7.4之间。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，所述促释剂包含氯烃基二甲基苯甲胺和聚山梨酯，且所述氯烃基二甲基苯甲胺和所述聚山梨酯的重量比为0.15-0.3:1。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，所述促释剂在所述释放介质中的浓度为1.0-2.5g/L。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，所述醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与所述释放介质接触时保持于40℃-55℃恒温。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，在接触过程中保持振荡。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，所述醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与所述释放介质的接触时间为5-7。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，进一步包括在多个时间点取样，并检测各样本中醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的溶出度的步骤。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，所述多个时间点至少包括接触开始后0.5-2小时的第一时间点、接触开始后80-90小时的第二时间点和接触开始后144-168小时的第三时间点。
根据本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，优选地，所述检测包括在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度，得到六个波长处的吸光度，计算其平均值，基于所述平均值计算各时间点的释放量。
本发明的方法是一种体外加速实验方法，可以大大缩短醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的释药评价时间，进而可以缩短药品研发及生产质量放行的周期，降低人员方面的成本投入。快速地评价醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的释药性质还有助于制剂工作者更加快速、高效和准确的进行释药特性的质量评价。本发明的加速试验预测缓释植入剂的释放速度，对缓释植入剂具有现实的意义。
附图说明
图1依据进口药品注册标准项下释放方法检测植入剂释放度的曲线图。
图2在50℃水浴振荡器中，释放介质中加吐温80、氯烃基二甲基苯甲胺，调节释放介质pH值7.0时的释放曲线图。
图3在50℃水浴振荡器中，释放介质中加吐温80、氯烃基二甲基苯甲胺，调节释放介质pH值7.4时的释放曲线图。
图4本发明一种示例性实施方案与进口质量标准的释放度进行曲线拟合的图。
图5本发明另一种示例性实施方案与进口质量标准的释放度进行曲线拟合的图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为具体公开了该范围的上限和下限以及它们之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
本发明中，“醋酸戈舍瑞林缓释植入剂”是指通过注射(例如，皮下注射)等而植入体内的药物，其包含作为活性成分的醋酸戈舍瑞林和作为辅料的高分子聚合物，例如乙交酯-丙交酯聚合物。进入体内后，醋酸戈舍瑞林从高分子聚合物材料中逐渐释放至外部。
本发明提供用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，本文中有时也简写为“本发明的方法”，其为一种加速释放模型，与现有的长达28天的体外常速释放周期完全不同，本发明的方法只需较短时间，例如7天即可有效地对醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的释放性质进行有效评价。
本发明的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法包括使醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与释放介质接触的步骤，其中，本发明的释放介质包含缓冲液和溶解于缓冲液的促释剂和柠檬酸。下面详细说明。
[缓冲液]
本发明中，缓冲液可使用本领域已知的任何缓冲液，对此不作特别限定，其实例包括但不限于枸橼酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液和醋酸盐缓冲液。本发明可以使用上述缓冲液中的一种，也可使用两种以上的混合物。
本发明中，缓冲液需具有特定的pH范围，一般而言，pH应在6.8至7.5之间，优选6.9至7.4之间，更优选7.0至7.4之间。为了使缓冲液的pH值能够在上述范围内，可选地，可对缓冲液的pH值进行调节。例如，通过向缓冲液中添加调节剂(例如，磷酸氢二钠或柠檬酸)来调节得到所需的pH值范围。
在某些实施方案中，本发明的缓冲液为磷酸盐缓冲液。此处磷酸盐是任何类型的盐，其实例包括但不限于磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾等。本发明可使用上述物质中的一种或两种以上的组合。只要能够实现所需的pH值范围，则对磷酸盐的浓度不特别限定。一般而言，磷酸盐的浓度为20-30g/L，优选22-28g/L，更优选24-26g/L。
[促释剂]
本发明使用促释剂来促进醋酸戈舍瑞林从例如辅料中缓释出来。与一般促进药物释放的物质不同，本发明的促释剂不仅具有更高的促进药物释放的速度，更为重要的是，其释放曲线与常规释放曲线基本一致。
本发明的促释剂包含氯烃基二甲基苯甲胺和聚山梨酯。可选地，本发明的促释剂由氯烃基二甲基苯甲胺和聚山梨酯两者组成。本发明发现在缓冲液中氯烃基二甲基苯甲胺有利于醋酸戈舍瑞林从辅料中的释放，基于此进一步发现氯烃基二甲基苯甲胺和聚山梨酯的组合对于药物的释放具有协同促进作用。本发明中，氯烃基二甲基苯甲胺和聚山梨酯的重量比不特别限定，一般为0.15-0.3:1，优选0.16-0.28:1，更优选0.18-0.25:1。
本发明中，有利地，氯烃基二甲基苯甲胺在释放介质中的浓度一般应控制为0.1g/L以上，优选0.2g/L以上。另一方面，氯烃基二甲基苯甲胺的浓度一般应控制为在0.3g/L以下，优选0.25g/L以下。如果氯烃基二甲基苯甲胺的浓度过高，则容易使释放介质倾向于产生泡沫，从而不利于实验操作。如果浓度过低，则达不到所需的释放速率。
本发明的聚山梨酯为一类物质，而非一种具体物质。聚山梨酯的类型不特别限定，可以使用任何类型的聚山梨酯，其实施包括但不限于吐温20、吐温40、吐温60和吐温80，优选为吐温80。本发明可使用上述物质中的一种，也可使用两种以上的组合。聚山梨酯在释放介质中的浓度一般为0.5g/L-5g/L，优选1g/L-3g/L，更优选1g/L-2g/L。
[柠檬酸]
本发明的释放介质中还包含柠檬酸。柠檬酸有利于维持释放介质至所需的pH值范围。本发明中，柠檬酸的浓度一般为1.5-2.5g/L，优选1.6-2.4g/L，更优选1.7-2.0g/L。
[温度]
本发明中，为了促进释放，需要提高醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与释放介质接触时的温度。本领域技术人员容易理解温度对于药物释放的影响是复杂的，一般而言越高越有利于药物的释放，但是高温同样也会影响释放曲线。例如，在某个或某些时间点释放速率过快，引发突释现象，从而改变曲线。本发明通过深入研究后发现当温度恒温保持于40℃-55℃之间，优选42-54℃之间，更优选45-50℃之间时能够很好地实现药物的加速释放，而不会实质上影响释放曲线的变化。当温度过高，例如高于55℃时释放曲线发生变化。其原因可能在于植入剂本身的稳定性受到影响所致。另一方面，如果温度过低，则不利于药物的释放速率提高，从而不能很好地以加快的方式实现模拟体内药物释放曲线的目的。
[振荡]
本发明中，为了促进释放，可通过例如搅拌等手段来促进振荡，从而保持释放介质的流动性，进而进一步促进释放。本发明发现通过控制释放介质的振荡能够加速释放，而不会实质上改变释放曲线。振荡的条件不特别限定，只要在醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与释放介质接触的过程中保持均匀地或稳定地流动性即可。
[检测点]
本发明中，为了得到醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的释放性质，特别是释放曲线，需要在醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与释放介质接触期间，检测多个时间点的释放率或溶出度。本发明的检测点至少包括用于考察药物是否突释的时间点；用于确定释药特性的时间点；和用于考察释药是否完全的时间点。本领域技术人员容易理解，设置的时间点越多，越有利于了解或监测药物的释放特性。优选地，时间点的数量为3-30个，更优选3-15个，进一步优选3-10个。在某些实施方案中，本发明的时间点至少包括接触开始后0.5-2小时的第一时间点、接触开始后80-90小时的第二时间点和接触开始后144-168小时的第三时间点。
[溶出度测量]
本发明的方法中，包括测量多个时间点取样的溶出度。溶出度的测量可采用本领域已知的任何方式。为了统一或标准化的目的，可采用已知相关标准进行测量。例如，中国药典2015年版四部通则0401记载的测量方法。具体地，其包括在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；以六个波长处吸光度的平均值计算F值，每个取样时间点对照品溶液测定的F值波动范围应在初始F值的±2％之内，计算各时间点的释放量。
参考例
本实验依据进口药品注册标准项下释放方法检测植入剂释放度。
取无水磷酸氢二钠25.8g，柠檬酸1.92g与叠氮化钠0.2g，加水溶解至1000ml，必要时用无水磷酸氢二钠或者柠檬酸调节pH值7.4±0.05，用0.22μm微孔滤膜过滤得到磷酸盐缓冲液。
取醋酸戈舍瑞林缓释植入剂5支，置专用溶出杯中，一式三份，以磷酸盐缓冲液50ml为释放介质，加盖，置39℃±0.5℃恒温箱中保温，于168小时(7天)、336小时(14天)、408小时(17天)、504小时(21天)与672小时(28天)时分别取样，精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液(pH7.4)稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取样后，分别即时于各溶出杯中补充磷酸盐缓冲液(pH7.4)5ml，轻微涡旋混匀，加盖，立即置39℃±0.5℃恒温箱中继续保温。
另取醋酸戈舍瑞林对照品适量，精密称定，加磷酸盐缓冲液(pH7.4)溶解并定量稀释制成每1ml中约含戈舍瑞林0.1mg的溶液，作为对照品溶液。分别取供试品溶液与对照品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部通则0401)，在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；计算各时间点的释放量。释放度实验结果如表1所示。释放曲线见附图1。
表1
| 释放条件(释放度％) | 7d | 14d | 17d | 21d | 28d |
| 39℃ | 9 | 45 | 58 | 80 | 105 |
实施例
一、氯烃基二甲基苯甲胺对释放度的影响
本实验用于考察作为促释剂第一成分的氯烃基二甲基苯甲胺对于释放度的影响。
1.放样：
取醋酸戈舍瑞林缓释植入剂5支(约相当于戈舍瑞林18mg)，置120ml专用溶出杯中，一式三份，以磷酸盐缓冲液(pH7.4)50ml为释放介质，加盖，置39℃±0.5℃恒温箱中保温。磷酸盐缓冲液配制如下：
2.取样及供试品溶液配制：
于168小时(7天)、336小时(14天)、408小时(17天)、504小时(21天)与672小时(28天)时分别取样；从恒温箱中取出溶出杯，放冷，轻微涡旋混匀，精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，用磷酸盐缓冲液(pH7.4)稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取样后，分别即时于各溶出杯中补充磷酸盐缓冲液(pH7.4)5ml，轻微涡旋混匀，加盖，立即置39℃±0.5℃恒温箱中继续保温。
3.对照品溶液配制：
取醋酸戈舍瑞林对照品适量，精密称定，加各个编号磷酸盐缓冲液(pH7.4)溶解并定量稀释制成每1ml中约含戈舍瑞林0.1mg的溶液，作为对照品溶液。每个介质平行两份。
4.样品释放度检测：
分别取供试品溶液与对照品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部通则0401)，在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；以六个波长处吸光度的平均值计算F值，每个取样时间点对照品溶液测定的F值波动范围应在初始F值的±2％之内，计算各时间点的释放量。结果如表2所示。
表2释放度实验结果
| 释放介质编号 | 7天 | 14天 | 17天 | 21天 | 28天 | 35天 |
| 1号 | 34 | 98 | 103 | 105 | - | - |
| 2号 | 14 | 64 | 87 | 104 | - | - |
| 3号 | 10 | 53 | 74 | 100 | 104 | - |
| 4号 | 8 | 36 | 49 | 82 | 102 | 106 |
由表2可知：随着释放介质中氯烃基二甲基苯甲胺的浓度增加，释放速度加快，当释放介质中氯烃基二甲基苯甲胺的浓度为0.001％时，所得释放度数据与参考例的结果基本一致；其浓度为0.02％时，释放度加速至14d。另外，在实验过程中还发现，随着氯烃基二甲基苯甲胺的浓度增加，释放介质中经过振摇后会产生大量的泡沫，不利于分析实验操作。故最高浓度应控制在0.03％以下。
二、释放介质中促释剂第二成分对释放度的影响
本实验考察在60℃释放介质中作为促释剂第二成分的类型对植入剂释放度的影响
1.放样：
取醋酸戈舍瑞林缓释植入剂5支(约相当于戈舍瑞林18mg)，置120ml专用溶出杯中，一式三份，以磷酸盐缓冲液(pH7.40)50ml为释放介质，加盖，置60℃±0.5℃水浴锅中保温。磷酸盐缓冲液配制如下：
2.取样及供试品溶液配制：
于1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时(1天)、36小时、48小时(2天)、72小时(3天)、144小时(7天)分别取样；从水浴锅中取出溶出杯，放冷，轻微涡旋混匀，精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，用各自磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取样后，分别即时于各溶出杯中补充磷酸盐缓冲液5ml，轻微涡旋混匀，加盖，立即置60℃±0.5℃水浴锅中继续保温。
3.对照品溶液配制：
取醋酸戈舍瑞林对照品适量，精密称定，加各个编号磷酸盐缓冲液，溶解并定量稀释制成每1ml中约含戈舍瑞林0.1mg的溶液，作为对照品溶液。每个介质平行两份。
4.样品释放度检测：
分别取供试品溶液与对照品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部通则0401)，在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；以六个波长处吸光度的平均值计算F值，每个取样时间点对照品溶液测定的F值波动范围应在初始F值的±2％之内，计算各时间点的释放量。结果如表3所示。
表3释放度实验结果
由表3可知，释放介质中加入聚山梨酯类物质在60℃释放条件下，加速植入剂释放，SDS抑制植入剂的释放。另外，实验中还发现该条件下由于温度过高而使植入剂形态变化明显，可能导致植入剂缓释机制的破坏。
三、聚山梨酯类对释放度的影响
本实验考察在50℃释放介质中加作为聚山梨酯类物质的吐温80对植入剂释放度影响。
1.放样：
取醋酸戈舍瑞林缓释植入剂5支(约相当于戈舍瑞林18mg)，置120ml专用溶出杯中，一式三份，以磷酸盐缓冲液(pH7.40)50ml为释放介质，加盖，置50℃±0.5℃水浴锅中释放。磷酸盐缓冲液配制如下：
2.取样及供试品溶液配制：
于1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、24小时(1天)与3天、5天、7天、10天与14天分别取样；从水浴锅中取出溶出杯，放冷，轻微涡旋混匀，精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，用各自磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取样后，分别即时于各溶出杯中补充磷酸盐缓冲液5ml，轻微涡旋混匀，加盖，立即置50℃±0.5℃水浴锅中继续释放。
3.对照品溶液配制：
取醋酸戈舍瑞林对照品适量，精密称定，加各个编号磷酸盐缓冲液，溶解并定量稀释制成每1ml中约含戈舍瑞林0.1mg的溶液，作为对照品溶液。每个介质平行两份。
4.样品释放度检测：
分别取供试品溶液与对照品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部通则0401)，在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；以六个波长处吸光度的平均值计算F值，每个取样时间点对照品溶液测定的F值波动范围应在初始F值的±2％之内，计算各时间点的释放量。结果如表4所示。
表4释放度实验结果
如表4所示，在50℃释放条件下，释放介质中加入吐温80，其释放度有所增加但并不明显。
四、释放介质pH值对释放度的影响
本实验考察pH值对植入剂释放度影响。
1.放样：取醋酸戈舍瑞林缓释植入剂5支(约相当于戈舍瑞林18mg)，置120ml专用溶出杯中，一式三份，以磷酸盐缓冲液(pH1.2/4.0/6.8)50ml为释放介质，加盖，置39℃±0.5℃恒温箱中保温。磷酸盐缓冲液配制如下：
| 释放介质编号 | pH值 | 成分(1000ml介质中) |
| 1号 | 1.2 | 盐酸7.65ml |
| 2号 | 4.0 | 2mol/L醋酸溶液20.5ml；醋酸钠1.22g |
| 3号 | 6.8 | 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml；0.2mol/L氢氧化钠溶液112ml |
2.取样及供试品溶液配制：
于1小时、2小时、4小时、7小时、24小时、72小时(3天)与168小时(7天)分别取样；从恒温箱中取出溶出杯，放冷，轻微涡旋混匀，精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，用各自磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取样后，分别即时于各溶出杯中补充磷酸盐缓冲液5ml，轻微涡旋混匀，加盖，立即置39℃±0.5℃恒温箱中继续保温。
3.对照品溶液配制：
取醋酸戈舍瑞林对照品适量，精密称定，加各个编号磷酸盐缓冲液，溶解并定量稀释制成每1ml中约含戈舍瑞林0.1mg的溶液，作为对照品溶液。每个介质平行两份。
4.样品释放度检测：
分别取供试品溶液与对照品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部通则0401)，在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；以六个波长处吸光度的平均值计算F值，每个取样时间点对照品溶液测定的F值波动范围应在初始F值的±2％之内，计算各时间点的释放量。结果如表5所示。
表5释放度实验结果
如表5所示，在39℃的释放条件下，随着释放介质的pH值的减小，释放受到抑制，释放前期几乎不释放；在pH 7左右的释放介质中，释放速度较快。
实施例1
本实施例的释放条件为在50℃水浴振荡器中，释放介质中加吐温80、氯烃基二甲基苯甲胺，调节释放介质pH值7.0。
取醋酸戈舍瑞林缓释植入剂5支，置120ml专用溶出杯中，一式六份，以磷酸盐缓冲液50ml为释放介质，加盖，置50℃水浴振荡器(振幅：4cm；振荡速度：125rpm/min)中释放。磷酸盐缓冲液配制如下：
于9小时、48小时(2天)、3天、4天、5天、6天分别取样；从水浴振荡器中取出溶出杯，放冷，轻微涡旋混匀，精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，用各自磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取样后，分别即时于各溶出杯中补充磷酸盐缓冲液5ml，轻微涡旋混匀，加盖，立即置各自水浴振荡器中继续释放。
取醋酸戈舍瑞林对照品适量，精密称定，加各个编号磷酸盐缓冲液，溶解并定量稀释制成每1ml中约含戈舍瑞林0.1mg的溶液，作为对照品溶液。每个介质平行两份。分别取供试品溶液与对照品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部通则0401)，在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；以六个波长处吸光度的平均值计算F值，每个取样时间点对照品溶液测定的F值波动范围应在初始F值的±2％之内，计算各时间点的释放量。释放度实验结果如表6所示。释放曲线见图2。
表6
实验结果表明，在50℃释放条件下，释放介质中植入剂释放加速后的释放曲线与常速曲线基本一致，可作为醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的释放加速实验条件。
实施例2
本实施例的释放条件为在50℃水浴振荡器中，释放介质中加吐温80、氯烃基二甲基苯甲胺，调节释放介质pH值7.4。
取醋酸戈舍瑞林缓释植入剂5支，置120ml专用溶出杯中，一式六份，以磷酸盐缓冲液50ml为释放介质，加盖，置50℃水浴振荡器(振幅：4cm；振荡速度：125rpm/min)中释放。磷酸盐缓冲液配制如下：
于9小时、48小时(2天)、3天、4天、5天分别取样；从水浴振荡器中取出溶出杯，放冷，轻微涡旋混匀，精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，用各自磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取样后，分别即时于各溶出杯中补充磷酸盐缓冲液5ml，轻微涡旋混匀，加盖，立即置各自水浴振荡器中继续释放。取醋酸戈舍瑞林对照品适量，精密称定，加各个编号磷酸盐缓冲液，溶解并定量稀释制成每1ml中约含戈舍瑞林0.1mg的溶液，作为对照品溶液。每个介质平行两份。分别取供试品溶液与对照品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部通则0401)，在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度；以六个波长处吸光度的平均值计算F值，每个取样时间点对照品溶液测定的F值波动范围应在初始F值的±2％之内，计算各时间点的释放量。释放度实验结果如表7所示。释放曲线见图3。
表7
| 释放时间点/h | 9 | 48 | 72 | 96 | 120 |
| 累计释放度/％ | 5 | 30 | 60 | 78 | 105 |
实验结果表明，在50℃释放条件下，释放介质中植入剂释放加速后的释放曲线与常速曲线基本一致，可作为醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的释放加速实验条件。
根据实施例1和2的释放度实验结果，与参考例的释放度结果进行线性拟合分析，其中origin软件线性拟合方程如下：
由此得到拟合曲线，见图4和图5。两条拟合曲线的线性方程的R值分别为0.98964与0.99395，线性关系均良好。拟合度较高。
尽管本发明已经参考示例性实施方案进行了描述，但应理解本发明不限于公开的示例性实施方案。在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的示例性实施方案做多种调整或变化。权利要求的范围应基于最宽的解释以涵盖所有修改和等同结构与功能。
Claims (7)
1.一种用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其特征在于，包括使醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与释放介质接触的步骤，其中，所述释放介质包含缓冲液和溶解于所述缓冲液的促释剂和柠檬酸，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，且所述释放介质的pH在6.8至7.5之间；所述促释剂包含氯烃基二甲基苯甲胺和聚山梨酯，且所述氯烃基二甲基苯甲胺和所述聚山梨酯的重量比为0.15-0.3:1，氯烃基二甲基苯甲胺在释放介质中的浓度控制为0.1g/L以上，0.3g/L以下，其中聚山梨酯为吐温80，且所述聚山梨酯在释放介质中的浓度为1-2g/L。
2.根据权利要求1所述的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其特征在于，所述醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与所述释放介质接触时保持于40℃-55℃恒温。
3.根据权利要求1所述的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其特征在于，在接触过程中保持振荡。
4.根据权利要求1所述的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其特征在于，所述醋酸戈舍瑞林缓释植入剂与所述释放介质的接触时间为5-7天。
5.根据权利要求4所述的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其特征在于，进一步包括在多个时间点取样，并检测各样本中醋酸戈舍瑞林缓释植入剂的溶出度的步骤。
6.根据权利要求5所述的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其特征在于，所述多个时间点至少包括接触开始后0.5-2小时的第一时间点、接触开始后80-90小时的第二时间点和接触开始后144-168小时的第三时间点。
7.根据权利要求5所述的用于测量醋酸戈舍瑞林缓释植入剂体外溶出度的方法，其特征在于，所述检测包括在275nm至285nm区间内以间隔2nm分别测定吸光度，得到六个波长处的吸光度，计算其平均值，基于所述平均值计算各时间点的释放量。
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