CN110922413A - 一种光甘草定的提取分离方法 - Google Patents
一种光甘草定的提取分离方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110922413A CN110922413A CN201911256445.5A CN201911256445A CN110922413A CN 110922413 A CN110922413 A CN 110922413A CN 201911256445 A CN201911256445 A CN 201911256445A CN 110922413 A CN110922413 A CN 110922413A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ethanol
- column
- extraction
- glabridin
- flow rate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 58
- LBQIJVLKGVZRIW-ZDUSSCGKSA-N glabridin Chemical compound C1([C@H]2CC3=CC=C4OC(C=CC4=C3OC2)(C)C)=CC=C(O)C=C1O LBQIJVLKGVZRIW-ZDUSSCGKSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- 229940093767 glabridin Drugs 0.000 title claims abstract description 36
- PMPYOYXFIHXBJI-ZDUSSCGKSA-N glabridin Natural products C1([C@H]2CC=3C=CC4=C(C=3OC2)CCC(O4)(C)C)=CC=C(O)C=C1O PMPYOYXFIHXBJI-ZDUSSCGKSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- LBQIJVLKGVZRIW-UHFFFAOYSA-N glabridine Natural products C1OC2=C3C=CC(C)(C)OC3=CC=C2CC1C1=CC=C(O)C=C1O LBQIJVLKGVZRIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 36
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title abstract description 25
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 216
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims abstract description 33
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims abstract description 32
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims abstract description 32
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 26
- 244000303040 Glycyrrhiza glabra Species 0.000 claims description 25
- 235000006200 Glycyrrhiza glabra Nutrition 0.000 claims description 25
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 20
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 15
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 11
- LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N glycyrrhizinic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H]1C([C@H]2[C@]([C@@H]3[C@@]([C@@]4(CC[C@@]5(C)CC[C@@](C)(C[C@H]5C4=CC3=O)C(O)=O)C)(C)CC2)(C)CC1)(C)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LPLVUJXQOOQHMX-QWBHMCJMSA-N 0.000 claims description 11
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 11
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 10
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 8
- 235000011477 liquorice Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 6
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 3
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract description 23
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 abstract description 7
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 abstract description 7
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 abstract description 7
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 abstract description 7
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 4
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 abstract description 3
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 63
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 239000000047 product Substances 0.000 description 28
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 15
- 235000001453 Glycyrrhiza echinata Nutrition 0.000 description 13
- 235000017382 Glycyrrhiza lepidota Nutrition 0.000 description 13
- 229940010454 licorice Drugs 0.000 description 13
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- 238000010009 beating Methods 0.000 description 8
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 8
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 7
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 7
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 6
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 5
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 5
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 5
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 5
- HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 240000008917 Glycyrrhiza uralensis Species 0.000 description 4
- 235000000554 Glycyrrhiza uralensis Nutrition 0.000 description 4
- 235000017443 Hedysarum boreale Nutrition 0.000 description 4
- 235000007858 Hedysarum occidentale Nutrition 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000001947 glycyrrhiza glabra rhizome/root Substances 0.000 description 4
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 4
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 4
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 2
- MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 18beta-glycyrrhetic acid Chemical compound C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C(O)=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](O)C1(C)C MPDGHEJMBKOTSU-YKLVYJNSSA-N 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 229960003720 enoxolone Drugs 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008235 industrial water Substances 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 229920006122 polyamide resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000011112 process operation Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/04—Ortho-condensed systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
本发明关于一种光甘草定的提取分离方法，所述提取方法采用常温套提，所述分离方法采用了大孔树脂预处理得到粗总黄酮，采用聚合物色谱填料精细分离，可以有效除去大多数其他黄酮，得到的光甘草定粗品含量高，再经过乙醇重结晶，即可得到90％以上的光甘草定产品。本发明的提取分离方法始终只使用乙醇一种有机溶剂，工艺路线简单，制备过程不使用环境不友好溶剂，成本低，且适合工业化生产。
Description
技术领域
该发明涉及一种分离纯化技术领域，具体涉及一种从光果甘草药材或光甘草定药材经水提后的药渣中提取纯化高纯度的光甘草定的方法。
背景技术
光甘草定是从光果甘草中提取的一种黄酮类物质，分子式为C20H20O4，分子量为324.36。它是目前化妆品行业最有效最安全的天然美白添加剂，被称为美白黄金。同时，光甘草定还有抗氧化、抗炎，抗动脉粥样硬化，能量代谢调节，神经保护，抗骨质疏松等功能。2011年，欧盟法规授权可将含有光甘草定的甘草黄酮产品作为新型食品成分投放市场。但目前由于光甘草定极高的生产成本，导致市场上光甘草定的价格非常昂贵。光甘草定成本高的原因是，一是原料含量低，甘草或甘草渣中的光甘草定含量在千分之二左右，二是提取时会把包括光甘草定在内的一类黄酮物质提取出来，普通的分离方法很难有效分离。据文献报道，光甘草定占光果甘草总黄酮的11％左右，要得到高纯度的光甘草定，必须把其他黄酮类物质设法除去。
在现有技术中，光甘草定的提取、纯化多采用溶剂(二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇)提取、大孔树脂，酸碱处理，聚酰胺分离、硅胶分离、混合溶剂结晶等方法。硅胶分离，需要使用如乙酸乙酯、石油醚等一类易挥发的溶剂，安全性差，同时硅胶再生困难。大孔树脂、聚酰胺只能进行粗分离，无法做到精细分离，因此含量低，需要多步过柱。由于市场要求90％以上的光甘草定产品，现有工艺需多步过柱，多步纯化，繁琐的操作导致成本的提高及工业化难以实现。
专利CN1295230C采用原料为甘草，用有机溶剂无水乙醇或乙酸乙酯提取，经超滤膜过滤，吸附大孔树脂或聚酰胺吸附、丙酮或丙酮混合溶剂结晶得到90％以上光甘草定，收率0.2％左右。该方法提到用无水乙醇或乙酸乙酯进行原料的提取，实际上在工业上，每次都用无水乙醇抽提植物原料是不可能实现的，原料中的水分存在会影响回收乙醇的浓度，而用乙酸乙酯抽提则安全性较低，环境不友好，粗提黄酮中会有乙酸乙酯残留，不利于作为食品原料使用。甘草黄酮在提取阶段会全部被提取出来，分离纯化必须想办法除去其他黄酮才能得到高含量的光甘草定，而大孔吸附树脂或聚酰胺一般只适合粗分离，其选择性不强，层析分离效果一般，因此得到高含量光甘草定实际上会比较困难。
专利CN103848841B利用甘草废渣，采用甲醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯等溶剂两两混合为溶剂，常温提取，浓缩后加水分离杂质，过滤得到的固体物用酸碱溶解分离除杂两次，然后用大孔树脂纯化可得到60％含量的浅黄色固体粉末，产品收率0.6％。该法也是用到了非酒精的有机溶剂，安全性较低，环境不友好，然后酸碱处理两次，产生的酸碱废水会比较多。
专利CN109081843A甘草渣经80-95％乙醇醇提，然后利用大孔吸附树脂和聚酰胺两次柱层析，乙醇水重结晶得到较高含量的光甘草定。但工艺操作采用与大孔吸附树脂与聚酰胺树脂以拌样的形式上样，实际工业化生产中难以实现，因为目前工业水上柱都是以溶液吸附的方式上样，拌样的形式上样不适于工业化。
专利CN105777771A甘草渣用乙醇、甲醇或乙酸乙酯溶剂提取2次，硅胶层析，乙酸乙酯和石油醚为洗脱剂，然后用溶剂洗去硅胶层析得到的产品中的油，可得到较高含量的产品，收率0.3％以上。该专利采用硅胶层析，乙酸乙酯、石油醚等溶剂，安全性较低，环境不友好，同时硅胶层析所需的溶剂量很大，硅胶的重复利用是很大难题，成本较难控制。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种从甘草或甘草渣中提取分离高纯度光甘草定的方法，该方法始终只使用乙醇一种有机溶剂，工艺路线简单，制备过程不使用环境不友好溶剂，成本低，适合工业化生产。此外，本发明所述提取方法采用常温套提，套提所用的溶剂少，常温提取生产过程中易操作，提出来的杂质少，光甘草定含量高，还能减少溶剂的挥发，提高了生产中的安全性，并降低了成本。本发明所述分离方法采用了大孔树脂预处理得到粗总黄酮，采用聚合物色谱填料精细分离，可以有效除去大多数其他黄酮，得到的光甘草定粗品含量高，再经过乙醇重结晶，即可得到90％以上的产品。
本发明采用的技术方案为：一种光甘草定的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1)：甘草或甘草渣用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇常温浸泡提取，浸泡提取次数为1～3次，每次1～3小时，收集提取液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓度为10-80％；
步骤2)：步骤1)所得浓缩液上大孔吸附树脂柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓为10-80％；
步骤3)：步骤2)所得浓缩液上聚合物色谱填料柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得到浅黄色粗品；
步骤4)：所述浅黄色产品用5～10倍(V/m)的50-90％乙醇重结晶，得到含量≥90％的光甘草定。
本发明提供了一些优选实施方式。
在一些实施方式中，在步骤1)中，所采用的提取方法为常温套提，所谓套提是指用第一批原料提取、分离所得的第二次提取液、第三次提取液分别作为下一批新原料提取的一次提取溶剂、二次提取液溶剂，然后只补充新溶剂进行最后一次提取，例如，甘草或甘草渣用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇常温浸泡3小时，每隔30min打循环5min，第一次提取完，分离出第一次提取液，渣子再用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇进行第二次提取，常温浸泡3小时，每隔30min打循环5min。分离出第二次提取液，用于下一批次原料的套提，即把第二次提取液加入到新的甘草渣中进行第一次提取，提取方法同上。套提所用的溶剂少，常温提取生产过程中易操作，提出来的杂质少，光甘草定含量高，还能减少溶剂的挥发，提高了生产中的安全性并降低了成本。
在一些实施方式中，步骤2)中所述大孔吸附树脂柱为AB-8、HP-20、D101、ADS-21、ADS-7或ADS-17柱，树脂高径比为5∶1，上柱流速为2BV/h(BV，柱体积)，上柱后，先用40-60％乙醇淋洗3～8倍柱体积，淋洗流速1～2BV/h，再用3～8倍柱体积的70-90％乙醇洗脱产品，洗脱流速0.5～1.5BV/h，洗脱液在60～80℃真空浓缩调整乙醇浓度为10-80％。
在一些实施方式中，所述聚合物色谱填料是指采用高交联度的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)作为基质，利用基质骨架本身就具有的强疏水性能，直接作为反相分离填料，相比常规硅胶反相填料，具有粒径分布均一、粒径可控、耐受pH范围宽，载样量大，填料用料少，溶剂消耗小等优点，此外，聚合物色谱填料具有丰富的网状孔结构和较高的比表面积，非常适合于从甘草或甘草渣，特别是经水提的甘草渣中分离甘草光定。
聚合物色谱填料UniPS 40、UniPS-30、LX-MS15、LX-MS30、LX-20SS、LX-316、或LX-261装柱，柱高度至少30cm，装完后，用1.5倍柱体积的60-80％乙醇平衡好，用泵把上述浓缩液泵入到聚合物色谱填料柱上，流速0.1BV/min，先用2～4倍柱体积的40-60％乙醇淋洗色谱柱，淋洗流速1～2BV/h，再用3～6倍柱体积的60-90％乙醇洗脱，流速0.5～1.5BV/h，按0.25倍柱体积每瓶收集洗脱液，洗脱液在60～80℃真空浓缩得到浅黄色的粗品，光甘草定含量为70-80％。
在一些实施方式中，所述得到的浅黄色的产品，加入5～10倍(V/m)的50-90％乙醇，加热到60-78℃，加入固含量比例5-20％的活性碳进行脱色，在此条件下加热回流0.5hr-1.5hr，过滤，滤液在常温下静置4-12hr，结晶，离心分离，得到结晶产品，光甘草定含量90％以上，优选95％以上。
本发明所述甘草是指甘草原药材、甘草饮片；本发明所述甘草渣是指甘草经水和/或有机溶剂提取分离后所得药渣，优选甘草仅经过水提取分离之后所得的药渣。
本发明的有益效果在于：
(1)只使用乙醇作为唯一溶剂进行提取和纯化，环境友好，保证了生产的安全性，保证了最后产品中不残留有害溶剂，产品除了作为化妆品使用，也保证了可作为保健食品使用的可能。
(2)本发明采用套提的方式在常温下对甘草渣进行提取，套提可以节省溶剂，液体的浓缩能耗能大大降低。
(3)本发明使用了聚合物色谱填料层析的手段进行纯化，具有分离效率高，载样量大，溶剂消耗小等优点，与硅胶层析相比，具有填料可重复利用，不需使用乙酸乙酯、石油醚等挥发性强的溶剂的优点，成本能大大降低，生产操作安全性能提高，而与C18填料相比，具有载样量大，填料使用少，填料机械强度高的优点。
附图说明
图1：光甘草定提取分离工艺流程图。
具体实施方式
以下配合附图及本发明的优选实施例，进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段。除非特殊说明，本发明中“％”是指质量百分比。
实施例1
一种采用单一溶剂从甘草渣中提取分离高纯度光甘草定的方法，以甘草渣为原料，采用乙醇常温套提，经过大孔吸附树脂粗分离，聚合物层析填料精细分离，乙醇结晶的工艺流程，最后得到95％以上光甘草定产品。
(1)提取
取干的甘草渣原料30kg投入500L不锈钢提取罐，进行第一次提取，加入210L 90％乙醇，浸泡3hr，每隔30min打循环5min，第一次提取完，分离出第一次提取液，渣子再用210L的90％乙醇进行第二次提取，常温浸泡3小时，每隔30min打循环5min。分离出第二次提取液，用于下一次的套提，把第二次提取液加入到新的甘草渣30kg中进行第一次提取，提取方法同上。分离得到的套提液185L进入浓缩工序。浓缩到原来体积的1/7，约26L，调整浓缩液的乙醇浓度到50％，得到30L液体，待上大孔吸附树脂AB-8柱。
(2)大孔吸附树脂吸附
30L浓缩液上柱大孔吸附树脂AB-8柱10L，树脂高径比为5∶1，上柱流速2BV/h，上柱后，用50％乙醇淋洗3L，淋洗流速2BV/h，最后用30L 90％乙醇洗脱产品，洗脱流速1.5BV/h。洗脱液30L在60℃，真空浓缩到约4L，调整乙醇浓度到70％左右，共计液体5L。
(3)聚合物色谱填料层析
取聚合物色谱填料UniPS 40装柱10L，高度60cm，装完后，用70％乙醇15L平衡好，泵入上述5L液体到聚合物色谱填料柱上，流速0.5L/min，先用20L的50％乙醇淋洗色谱柱，淋洗流速1.5BV/h，再用30L 80％乙醇洗脱，流速1BV/h，按2L每瓶收集洗脱液，按照收集的时间顺序对各瓶进行编号，并检测其中的光甘草定含量，合并杂质少，含量高的6-10瓶，真空浓缩得到浅黄色粗品95.0g，含量70.8％。
(4)结晶
得到的浅黄色产品95.0g，加入5倍量475ml的90％的乙醇，加热到78℃，加入固含量10％活性碳9.5g，在此条件下加热回流0.5hr，过滤，滤液在常温下静置8hr，结晶。离心分离，得到白色结晶产品60.4g，含量95.5％。产品收率0.201％。
实施例2
(1)提取
取干燥的甘草原料30kg投入500L不锈钢提取罐，进行第一次提取，加入210L 80％乙醇，浸泡3hr，每隔30min打循环5min，第一次提取完，分离出第一次提取液，渣子再用210L的80％乙醇进行第二次提取，常温浸泡3小时，每隔30min打循环5min。分离出第二次提取液，用于下一次的套提，把第二次提取液加入到新的甘草渣30kg中进行第一次提取，提取方法同上。分离得到的套提液186L进入浓缩工序。浓缩到原来体积的1/7，约26L，调整浓缩液的乙醇浓度到50％，得到30L液体，待上大孔吸附树脂ADS-17柱。
(2)大孔吸附树脂吸附
30L浓缩液上柱大孔吸附树脂ADS-17柱10L，树脂高径比为5∶1，上柱流速2BV/h，上柱后，用50％乙醇淋洗3L，淋洗流速2BV/h，最后用30L 80％乙醇洗脱产品，洗脱流速1.5BV/h。洗脱液30L在60℃，真空浓缩到约4L，调整乙醇浓度到70％左右，共计液体5L。
(3)聚合物色谱填料层析
取聚合物填料LX-MS30装柱10L，高度60cm，装完后，用70％乙醇15L平衡好，泵入上述5L液体到聚合物色谱填料柱上，流速0.5L/min，先用20L的50％乙醇淋洗色谱柱，淋洗流速1.5BV/h，再用30L 70％乙醇洗脱，流速1BV/h，按2L每瓶收集洗脱液，按照收集的时间顺序对各瓶进行编号，并检测其中的光甘草定含量，合并杂质少，含量高的5-9瓶，真空浓缩得到浅黄色的粗品94.5g，含量79.5％。
(4)结晶
得到的浅黄色的产品94.5g，加入5倍量470ml的90％的乙醇，加热到78℃，加入固含量20％活性碳18.9g，在此条件下加热回流1hr，过滤，滤液在常温下静置8hr，结晶。离心分离，得到白色结晶产品62.2g，含量98.5％。产品收率0.207％。
实施例3
(1)提取
取干燥的甘草渣原料30kg投入500L不锈钢提取罐，进行第一次提取，加入210L70％乙醇，浸泡3hr，每隔30min打循环5min，第一次提取完，分离出第一次提取液，渣子再用210L的70％乙醇进行第二次提取，常温浸泡3小时，每隔30min打循环5min。分离出第二次提取液，用于下一次的套提，把第二次提取液加入到新的甘草渣30kg中进行第一次提取，提取方法同上。分离得到的套提液185L进入浓缩工序。浓缩到原来体积的1/7，约26L，调整浓缩液的乙醇浓度到50％，得到30L液体，待上大孔吸附树脂D101柱。
(2)大孔吸附树脂吸附
30L浓缩液上柱大孔吸附树脂D101柱10L，树脂高径比为5∶1，上柱流速2BV/h，上柱后，用50％乙醇淋洗3L，淋洗流速2BV/h，最后用30L 70％乙醇洗脱产品，洗脱流速1.5BV/h。洗脱液30L在60℃，真空浓缩到约4L，调整乙醇浓度到70％左右，共计液体5L。
(3)聚合物色谱填料层析
取聚合物色谱填料LX-316装柱10L，高度60cm，装完后，用70％乙醇15L平衡好，泵入上述5L液体到聚合物色谱填料柱上，流速0.5L/min，先用20L的50％乙醇淋洗色谱柱，淋洗流速1.5BV/h，再用30L 80％乙醇洗脱，流速1BV/h，按2L每瓶收集洗脱液，按照收集的时间顺序对各瓶进行编号，并检测其中的光甘草定含量，合并杂质少，含量高的5-10瓶，真空浓缩得到浅黄色的粗品92.3g，含量72.1％。
(4)结晶
得到的浅黄色的产品92.3g，加入5倍量460ml的90％的乙醇，加热到78℃，加入固含量10％活性碳9.2g，在此条件下加热回流1hr，过滤，滤液在常温下静置8hr，结晶。离心分离，得到白色结晶产品63.1g，含量96.4％。产品收率0.210％。
实施例4
(1)提取
取干的甘草饮片原料30kg投入500L不锈钢提取罐，进行第一次提取，加入210L80％乙醇，浸泡3hr，每隔30min打循环5min，第一次提取完，分离出第一次提取液，渣子再用210L的80％乙醇进行第二次提取，常温浸泡3小时，每隔30min打循环5min。分离出第二次提取液，用于下一次的套提，把第二次提取液加入到新的甘草渣30kg中进行第一次提取，提取方法同上。分离得到的套提液189L进入浓缩工序。浓缩至约26L，调整浓缩液的乙醇浓度到50％，得到30L液体，待上大孔吸附树脂ADS-7柱。
(2)大孔吸附树脂吸附
30L浓缩液上柱大孔吸附树脂ADS-7柱10L，树脂高径比为5∶1，上柱流速2BV/h，上柱后，用50％乙醇淋洗3L，淋洗流速2BV/h，最后用30L 80％乙醇洗脱产品，洗脱流速1.5BV/h。洗脱液30L在60℃，真空浓缩到约4L，调整乙醇浓度到70％左右，共计液体5L。
(3)聚合物色谱填料层析
取聚合物色谱填料LX-MS30装柱10L，高度60cm，装完后，用70％乙醇15L平衡好，泵入上述5L液体到聚合物色谱填料柱上，流速0.5L/min，先用20L的50％乙醇淋洗色谱柱，淋洗流速1.5BV/h，再用30L 70％乙醇洗脱，流速1BV/h，按2L每瓶收集洗脱液，按照收集的时间顺序对各瓶进行编号，并检测其中的光甘草定含量，合并杂质少，含量高的5-10瓶，真空浓缩得到浅黄色的粗品95.2g，含量78.5％。
(4)结晶
得到的浅黄色的产品99.5g，加入5倍量470ml的90％的乙醇，加热到78℃，加入固含量20％活性碳18.9g，在此条件下加热回流1hr，过滤，滤液在常温下静置8hr，结晶。离心分离，得到白色结晶产品62.7g，含量98.3％，收率0.209％。
以上所述仅是本发明的优选实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制，虽然本发明已以优选实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案的范围内，当可利用上述揭示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (10)
1.一种光甘草定的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1)：甘草或甘草渣用5～10倍量(V/m)的50％-90％乙醇常温浸泡提取，浸泡提取次数为1～3次，每次1～3小时，收集提取液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓度为10-80％；
步骤2)：步骤1)所得浓缩液上大孔吸附树脂柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得浓缩液，所述浓缩液中乙醇浓度为10-80％；
步骤3)：步骤2)所得浓缩液上聚合物色谱填料柱，用40-90％乙醇梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩得到浅黄色产品；
步骤4)：所述浅黄色产品用5～10倍(V/m)的50-90％乙醇重结晶，得到含量≥90％的光甘草定。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)的提取方法为套提。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤1)的浸泡提取次数为2次，每次3小时。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱为AB-8、HP-20、D101、ADS-21、ADS-7或ADS-17柱。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其特征在于，树脂高径比为5∶1，上柱流速为2BV/h。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤2)的梯度洗脱是指，先用40-60％乙醇淋洗3～8倍柱体积，淋洗流速1～2BV/h，再用3～8倍柱体积的70-90％乙醇洗脱产品，洗脱流速0.5～1.5BV/h。
7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其特征在于，所述聚合物色谱填料柱采用高交联度的聚苯乙烯/二乙烯基苯作为基质。
8.根据权利要求1～7中任一项所述的方法，其特征在于，所述聚合物色谱填料是UniPS40、UniPS-30、LX-MS15、LX-MS30、LX-20SS、LX-316、或LX-261。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中的梯度洗脱是指先用2～4倍柱体积的40-60％乙醇淋洗色谱柱，淋洗流速1～2BV/h，再用3～6倍柱体积的60-90％乙醇洗脱，流速0.5～1.5BV/h。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4)的浅黄色产品中加入固含量比例5-20％的活性碳。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911256445.5A CN110922413A (zh) | 2019-12-10 | 2019-12-10 | 一种光甘草定的提取分离方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911256445.5A CN110922413A (zh) | 2019-12-10 | 2019-12-10 | 一种光甘草定的提取分离方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110922413A true CN110922413A (zh) | 2020-03-27 |
Family
ID=69859351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911256445.5A Pending CN110922413A (zh) | 2019-12-10 | 2019-12-10 | 一种光甘草定的提取分离方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110922413A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112724155A (zh) * | 2020-12-16 | 2021-04-30 | 洛阳蓝斯利科技有限公司 | 一种采用亚临界技术制备白色光甘草定的方法 |
| CN113637022A (zh) * | 2021-09-03 | 2021-11-12 | 河北工业大学 | 一种合成光甘草定的方法 |
| JP7598133B1 (ja) | 2023-08-22 | 2024-12-11 | 広州梵之容化粧品有限公司 | 溶融結晶化を用いた高純度グラブリジンの製造方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1680386A (zh) * | 2005-02-05 | 2005-10-12 | 上海奥利实业有限公司 | 高纯度光甘草定的生产方法 |
| CN108101923A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-06-01 | 中山大学 | 一种光甘草定单体的分离提纯方法 |
| CN109081843A (zh) * | 2018-08-30 | 2018-12-25 | 抚顺天润生物技术有限公司 | 光甘草定的制备方法及由该制备方法得到的光甘草定、化妆品 |
-
2019
- 2019-12-10 CN CN201911256445.5A patent/CN110922413A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1680386A (zh) * | 2005-02-05 | 2005-10-12 | 上海奥利实业有限公司 | 高纯度光甘草定的生产方法 |
| CN108101923A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-06-01 | 中山大学 | 一种光甘草定单体的分离提纯方法 |
| CN109081843A (zh) * | 2018-08-30 | 2018-12-25 | 抚顺天润生物技术有限公司 | 光甘草定的制备方法及由该制备方法得到的光甘草定、化妆品 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| DU YOUNG CHOI ET AL.: "Extraction and separation of glabridin from licorice by reversed phase high performance liquid chromatography", 《ANALYTICAL SCIENCE & TECHNOLOGY》 * |
| 李瑞萍等: "高效制备液相色谱柱技术的研究进展", 《化学进展》 * |
| 樊金玲等: "响应面法优化提取光甘草定工艺的研究", 《中国食品学报》 * |
| 郭孟萍: "《制药工程与药学专业实验》", 31 January 2011, 北京理工大学出版社 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112724155A (zh) * | 2020-12-16 | 2021-04-30 | 洛阳蓝斯利科技有限公司 | 一种采用亚临界技术制备白色光甘草定的方法 |
| CN113637022A (zh) * | 2021-09-03 | 2021-11-12 | 河北工业大学 | 一种合成光甘草定的方法 |
| JP7598133B1 (ja) | 2023-08-22 | 2024-12-11 | 広州梵之容化粧品有限公司 | 溶融結晶化を用いた高純度グラブリジンの製造方法 |
| US20250066317A1 (en) * | 2023-08-22 | 2025-02-27 | Guangzhou Fanzhirong Cosmetics Co., Ltd. | Method melt crystallization for preparing high-purity glabridin |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103923152B (zh) | 一种罗汉果甙v的提取方法 | |
| CN101336949B (zh) | 从白子菜中提取多糖和黄酮的方法 | |
| CN102746362B (zh) | 从黄芪中提取精制黄芪甲苷的方法 | |
| CN102432582A (zh) | 一种原花青素的制备方法 | |
| CN110845328A (zh) | 一种以迷迭香油膏副产品制备高纯度鼠尾草酸的方法 | |
| CN110922413A (zh) | 一种光甘草定的提取分离方法 | |
| CN103951718A (zh) | 一种用栀子制备高纯度栀子苷和藏红花素的方法 | |
| CN101463027B (zh) | 一种接骨木果实中黄酮与花青素的提取和分离方法 | |
| CN103204800B (zh) | 一种1‑脱氧野尻霉素的提取方法 | |
| WO2015168962A1 (zh) | 一种从杜仲叶中提取绿原酸的方法 | |
| CN101948501A (zh) | 一种羟基积雪草甙的制备方法 | |
| CN110655453A (zh) | 一种次大麻二酚的提取分离方法 | |
| CN112266399B (zh) | 一种淫羊藿提取物的高纯度分离提取方法 | |
| CN103012544A (zh) | 一种从油茶籽饼粕中提取皂素和多糖的方法 | |
| CN102924537B (zh) | 从罗布麻叶中同时制备金丝桃苷和异槲皮苷的方法 | |
| CN104892717B (zh) | 一种罗汉果甜苷v的工业级制备液相色谱分离方法 | |
| CN110669096B (zh) | 一种从黄芪中制备黄芪甲苷的方法 | |
| CN106832045A (zh) | 一种银杏外种皮同时提取果胶和酚酸类化合物的方法 | |
| CN104987952B (zh) | 从红景天全草中提取挥发油及红景天甙的方法 | |
| CN101973983A (zh) | 一种从金莲花中提取荭草苷的方法 | |
| CN100418543C (zh) | 双树脂法制备高质量的银杏叶活性成分提取物 | |
| CN86104409A (zh) | 绞股蓝总皂甙的制取方法 | |
| CN107595908A (zh) | 一种从鲜三七中提取三七皂苷的提取方法 | |
| CN106148449B (zh) | 一种淫羊藿次苷i的制备方法 | |
| CN112094184B (zh) | 一种从银杏叶提取物层析废水中提取莽草酸的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20200327 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |