CN110833554B - 吡唑并嘧啶衍生物在治疗自身免疫性甲状腺疾病的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物技术领域，特别是吡唑并嘧啶衍生物在治疗自身免疫性甲状腺疾病的用途。本发明吡唑并嘧啶衍生物对自身免疫性甲状腺疾病有较好的治疗作用，能显著降低血清中T3、T4、FT3、FT4等甲状腺激素的水平，显著降低血清中抗体TMAb、TGAb的水平，有效改善甲状腺组织中淋巴细胞浸润情况。本发明吡唑并嘧啶衍生物对自身免疫性甲状腺疾病的治疗作用与甲状腺素或强的松相当。

Description

吡唑并嘧啶衍生物在治疗自身免疫性甲状腺疾病的用途

技术领域

本发明涉及药物技术领域，特别是吡唑并嘧啶衍生物在治疗自身免疫性甲状腺疾病的用途。

背景技术

自身免疫性甲状腺疾病(AITD)占所有自身攻击性疾病的30％，此类疾病是一种器官特异性的自身免疫性疾病。其中，慢性淋巴性甲状腺炎(chroniclymphocyticthyroiditis,CLT)和格雷夫斯病(Graves Disease，GD)是最常见的。前者又称桥本氏甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis，HT)，其特征是血清中存在高滴度的甲状腺自身抗体，同时伴有甲状腺淋巴细胞的浸润，逐渐破坏腺体，最终导致临床甲状腺功能减退和甲状腺组织的纤维化。目前普遍认为其发病机制可能是具有遗传易感性的人或动物，由于环境、饮食及感染等致病因素的作用下，由于免疫监视的缺陷，自我耐受性的发生而致免疫功能出现紊乱，产生了针对甲状腺自身的免疫反应，引起了甲状腺腺体的破坏而致病。

目前，针对HT尚无确切有效的治疗方法。只是当桥本氏甲状腺炎疾病过程中出现了甲状腺功能减退时，采用替代疗法即补充甲状腺激素的治疗方法，但此法没有从病因上解决问题，并且没有免疫调节作用，并不能降低较高水平的甲状腺自身抗体。而近来虽然开始转向运用糖皮质激素来进行免疫调节，如在桥本甲状腺炎病程早期，运用泼尼松片可以显著下降sTSH水平及TGAb、TPOAb滴度，并且能够使甲状腺体积显著缩小。然而，糖皮质激素的运用有很大的缺点，研究发现短期(6个月)使用糖皮质激素效好，但是糖皮质激素一旦停药后反弹率明显升高，并且长期或大剂量的使用副作用较大，同时患者的耐受性也较差。因此，糖皮质激素在治疗HT的临床运用上亦很受限。实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis，EAT)模型是自身免疫性甲状腺疾病的主要动物模型。

吡唑并嘧啶衍生物(式Ⅰ)是一种靶向作用于FLT3激酶的小分子抑制剂，是申请人自主研发的新型化合物，目前化合物专利已经在中国、美国、日本等地区获得了授权。

目前仅有关于吡唑并嘧啶衍生物在治疗急性髓性白血病及银屑病方面的报道，而未见有在治疗自身免疫性甲状腺疾病方面的用途。

式Ⅰ吡唑并嘧啶衍生物化学结构式

发明内容

为了克服现有技术存在的不足，本发明提供吡唑并嘧啶衍生物在治疗自身免疫性甲状腺疾病的用途。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

一种如式Ⅰ所示的吡唑并嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐、水合物在制备治疗自身免疫性甲状腺疾病药物方面的用途

优选地，所述自身免疫性甲状腺疾病表现为血清中甲状腺激素水平升高。

优选地，所述甲状腺激素包括T3、T4、FT3、FT4。

优选地，所述自身免疫性甲状腺疾病表现为血清中甲状腺抗体水平升高。

优选地，所述甲状腺抗体包括TGAb、TMAb。

优选地，所述自身免疫性甲状腺疾病表现为甲状腺组织中有淋巴细胞浸润。

优选地，所述自身免疫性甲状腺疾病包括桥本甲状腺炎、亚急性甲状腺炎、无痛性甲状腺炎、产后甲状腺炎、慢性淋巴性甲状腺炎、格雷夫斯病。

优选地，所述药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐。

本发明还提供一种药物组合物在制备治疗自身免疫性甲状腺疾病药物方面的用途，其特征在于，所述药物组合物包含如式Ⅰ所示吡唑并嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐、水合物作为有效成分，和药学上可接受的赋形剂。

优选地，所述所述药物组合物为注射制剂、口服制剂、外用制剂、缓释制剂、控释制剂。

优选地，所述所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、胶囊剂。

优选地，所述药物组合物为控释制剂、缓释制剂、速释制剂。

正常人甲状腺球蛋白(TG)、甲状腺微粒体(TM)存在于甲状腺细胞内并不分泌或滥漏到血液，即使有少量溢出到外周血循环，也不诱发产生抗体，当发生慢性炎症时，甲状腺细胞损伤，TG和TM释放到血液，刺激免疫系统产生相应抗体，TGAb和TMAb是HT临床诊断、治疗及预后的重要依据。

自身免疫性甲状腺炎病程长，病情复杂，早期可表现为甲亢症状，随着病程发展甲状腺功能会缓慢减退，表现在甲状腺激素分泌紊乱，即血清中甲状腺激素三碘甲状腺原氨酸(T3)、总甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)等均会显著升高。

本发明吡唑并嘧啶衍生物原为FLT3抑制剂，通过研究发现，本发明吡唑并嘧啶衍生物对自身免疫性甲状腺疾病有较好的治疗作用，能显著降低血清中T3、T4、FT3、FT4等甲状腺激素的水平，显著降低血清中抗体TMAb、TGAb的水平，有效改善甲状腺组织中淋巴细胞浸润情况。本发明吡唑并嘧啶衍生物对自身免疫性甲状腺疾病的治疗作用与甲状腺素或强的松相当。

与现有技术比较，本发明的方法具有以下优点：

本发明提供的吡唑并嘧啶衍生物，是一种新的治疗自身免疫性甲状腺疾病的药物，不但扩展了现有治疗自身免疫性甲状腺疾病的药物选择性，为该病的有效治疗提供了更多的药物选择，也进一步扩展了本发明吡唑并嘧啶衍生物作为FLT3抑制剂的应用范围。

附图说明

图1为空白对照组小鼠甲状腺组织HE染色图(100倍)。

图2为模型组小鼠甲状腺组织HE染色图(100倍)。

图3为甲状腺素组小鼠甲状腺组织HE染色图(100倍)。

图4为强的松小鼠甲状腺组织HE染色图(100倍)。

图5吡唑并嘧啶衍生物高剂量组小鼠甲状腺组织HE染色图(100倍)。

图6吡唑并嘧啶衍生物中剂量组小鼠甲状腺组织HE染色图(100倍)。

图7吡唑并嘧啶衍生物低剂量组小鼠甲状腺组织HE染色图(100倍)。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1对EAT小鼠甲状腺病理结构及激素、抗体水平的影响

1.实验动物：ICR小鼠，雌性，体质量18～22g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司。

2.实验材料：吡唑并嘧啶衍生物由发明人合成。将蓖麻油与乙醇1：1混合后经过0.22μm的无菌滤膜，得到ELE溶液，称取一定质量的本发明吡唑并嘧啶衍生物粉末，用ELE溶液溶解粉末，待粉末完全溶解后，加入一定体积的灭菌水，混匀待用。ELE溶液与无菌水的体积比为1：3。猪甲状腺球蛋白(PTg，sigma公司)。高碘水溶液(0.64g碘化钾溶于1L蒸馏水中)。含完全弗氏佐剂的配制：将液体石蜡与乳化剂羊毛脂按比例5:3混合，为不完全弗氏佐剂；在配制好不完全佐剂中加入已灭活的卡介苗，使之完全分散后，即为弗氏完全佐剂；将制备好的抗原与佐剂按1:1混合，充分研磨制成乳剂抗原，终浓度为每毫升含佐剂抗原0.25mg。

3.动物分组、造模、给药：所有小鼠随机分为7组即空白对照组、模型组、甲状腺素组(10mg/kg/d)、强的松组(25μg/kg/d)、吡唑并嘧啶衍生物高剂量组(以下简称高剂量组，16mg/kg/d，1.6mg/mL药液)、吡唑并嘧啶衍生物中剂量组(以下简称中剂量组，8mg/kg/d，0.8mg/mL药液)、吡唑并嘧啶衍生物低剂量组(以下简称低剂量组，4mg/kg/d，0.4mg/mL药液)，每组15只。除空白对照组外，各组小鼠于皮下多点注射含PTg(0.25mg/ml)完全弗氏佐剂抗原共0.2ml，连续2周，每周一次。第3周起每只小鼠皮下注射PTg(0.25mg/ml)不完全弗氏佐剂抗原0.2ml，连续3周，每周一次。除空白对照组外，每组每天均给予饮用高碘水。同时，各给药组按10ml/kg体重灌胃给药，空白对照组与模型对照组灌胃给予ELE溶液和蒸馏水1:3体积比的混合液，末次给药后禁食。

4.检测指标：(1)激素、抗体水平的测定：实验结束后小鼠眼眶取血，室温放置20min，2500r/min离心10min，取血清。采用放射免疫法测定血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、总甲状腺素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺微粒体抗体(TMAb)。

(2)病理结构结构观察：取甲状腺组织，用福尔马林液固定，常规取材，脱水，石蜡包埋，制片4μm，HE染色，由病理专业人员在光学显微镜下阅片，观察小鼠甲状腺病理组织学变化情况。

5.统计学方法：采用SPSS17.0处理数据，计量数据采用(均数±标准差)表示，组间比较用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。

6.实验结果

(1)病理组织学检测结果

如图1所示，空白对照组甲状腺腺泡大小一致，排列紧密，腺腔内充满胶质，腺泡内及腺泡周围间质均无淋巴细胞浸润。

如图2所示，模型组大部分甲状腺呈现不同程度的腺泡扩张，腺泡腔内胶质稀薄，部分腺泡破坏，腺泡及间质可见明显淋巴细胞浸润，严重者形成淋巴滤泡，少数可见较多嗜酸性粒细胞浸润。

如图3所示，甲状腺素组病变较模型组明显减轻，大部分基本恢复正常，偶见间质淋巴细胞浸润，小部分甲状腺灶性腺体扩张腺腔内胶质稀薄，伴有淋巴细胞浸润。

如图4所示，强的松组病变较模型组明显减轻，与甲状腺素组相似，大部分基本恢复正常，偶见间质淋巴细胞浸润，小部分甲状腺灶性腺体扩张腺腔内胶质稀薄，伴有淋巴细胞浸润。

如图5～7所示，高、中、低剂量组较模型组减轻，有一例甲状腺内有淋巴滤泡形成，一例甲状腺灶性腺体扩张腺腔内胶质稀薄，腺泡有破坏，伴有较多淋巴细胞浸润。其余基本恢复正常,偶见间质淋巴细胞浸润。

(2)对小鼠血清甲状腺激素水平的影响

表1对小鼠血清甲状腺激素水平的影响

与空白对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。

由表1可知，与模型组比较，高、中、低剂量组均能显著降低小鼠血清中T3、T4的水平(P<0.05)；高、中剂量组能显著降低血清中FT3、FT4的水平(P<0.05)，低剂量组仅表现出降低趋势，没有统计学意义。与甲状腺素比较，本发明吡唑并嘧啶衍生物对FT3和T3的降低作用优于甲状腺素。与强的松比较，本发明吡唑并嘧啶衍生物对T3的降低作用优于强的松。

(3)对EAT小鼠甲状腺抗体的影响

表2对EAT小鼠甲状腺抗体的影响

组别	TMAb(ng/mL)	TGAb(ng/mL)
			空白对照组	15.62±5.6	14.75±6.09
模型组	92.87±17.2*	95.83±22.3*
			甲状腺素组	65.73±15.4△	58.62±17.8△
强的松组	64.21±14.3△	61.78±16.4△
			高剂量组	61.30±12.6△	62.95±12.8△
中剂量组	70.14±13.8△	74.28±10.5△
			低剂量组	82.96±10.6	86.91±19.6

与空白对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05。

如表2所示，与模型组比较，高、中剂量组均能显著降低小鼠血清中抗体TMAb、TGAb的水平(P<0.05)，低剂量组仅表现出降低趋势，并无统计学意义。与甲状腺素或强的松比较，本发明吡唑并嘧啶衍生物对抗体TMAb、TGAb的降低作用等同于甲状腺素或强的松。

结论

本发明吡唑并嘧啶衍生物对自身免疫性甲状腺疾病有较好的治疗作用，能显著降低血清中T3、T4、FT3、FT4等甲状腺素激素的水平，显著降低血清中抗体TMAb、TGAb的水平，有效改善甲状腺组织中淋巴细胞浸润情况。本发明吡唑并嘧啶衍生物对自身免疫性甲状腺疾病的治疗作用与甲状腺素或强的松相当。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (12)

1.一种如式Ⅰ所示的吡唑并嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐在制备治疗自身免疫性甲状腺疾病药物方面的用途

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述自身免疫性甲状腺疾病表现为血清中甲状腺激素水平升高。

3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于，所述甲状腺激素包括T3、T4、FT3、FT4。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述自身免疫性甲状腺疾病表现为血清中甲状腺抗体水平升高。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述甲状腺抗体包括TGAb、TMAb。

6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述自身免疫性甲状腺疾病表现为甲状腺组织中有淋巴细胞浸润。

7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述自身免疫性甲状腺疾病包括亚急性甲状腺炎、无痛性甲状腺炎、产后甲状腺炎、慢性淋巴性甲状腺炎、格雷夫斯病。

8.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药学上可接受的盐包括盐酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、磷酸盐。

9.一种药物组合物在制备治疗自身免疫性甲状腺疾病药物方面的用途，其特征在于，所述药物组合物包含如权利要求1所述的如式Ⅰ所示吡唑并嘧啶衍生物或其药学上可接受的盐作为有效成分，和药学上可接受的赋形剂。

10.根据权利要求9所述的用途，所述药物组合物为注射制剂、口服制剂、外用制剂。

11.根据权利要求10所述的用途，所述口服制剂包括片剂、颗粒剂、胶囊剂。

12.根据权利要求9所述的用途，所述药物组合物为速释制剂、缓释制剂、控释制剂。

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