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CN110567984A - 一种评价火把花根药材质量的检测方法 - Google Patents

一种评价火把花根药材质量的检测方法 Download PDF

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CN110567984A
CN110567984A CN201910943952.XA CN201910943952A CN110567984A CN 110567984 A CN110567984 A CN 110567984A CN 201910943952 A CN201910943952 A CN 201910943952A CN 110567984 A CN110567984 A CN 110567984A
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CN201910943952.XA
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左仁军
甘奇超
张毅
曾军
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Chongqing Pharmaceutical Research Institute Co Ltd
Original Assignee
Chongqing Pharmaceutical Research Institute Co Ltd
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Abstract

本发明公开了一种评价火把花根药材质量的检测方法，包括如下步骤：1)取去皮的干燥的火把花根备用；2)粉末显微鉴别；3)用薄层色谱试验法定性表儿茶素；4)检查其水分，总灰分和酸不溶性灰分；并测定水溶性浸出物；5)测定火把花根的表儿茶素含量和雷公藤甲素含量；本发明先通过性状观察初步筛选出原材料，然后通过粉末显微鉴别，观察其火把花根的显微特征，然后再检查其水分、总灰分和酸不溶性灰分，初步判定杂质含有情况，然后再测定浸出物，初步确定药材有效成分的可提取度，最后再通过高效液相色谱法对其主要成分表儿茶素和雷公藤甲素的情况进行准确定量，即可全方面的判定火把花根的质量，有利于预判临床用药风险，保证临床用药安全、有效。

Description

一种评价火把花根药材质量的检测方法
技术领域
本发明涉及中药技术领域，特别涉及一种评价火把花根药材质量的检测方法。
背景技术
火把花根，来源于卫矛科植物昆明山海棠(Tripterygium hypoglaucum(Lev.)Hutch)，干燥去皮根，味苦、温，有毒。其有效成分为生物碱、萜类、内酯、酚酸类等，有祛风除湿、舒筋活络、清热解毒等功效，具有明显抑制病理性免疫反应和抗炎镇痛作用。
众所周知，药效与药材密切相关，“火把花根片”是我司的一种产品，该药品的主要功效是祛风除湿，舒筋活络，清热解毒。具有抗炎和免疫抑制作用。用于类风湿性关节炎、红斑狼疮。该药品的主要的药材是火把花根，因此火把花根药材的质量将直接影响产品的质量和药效。但是火把花根化学成分复杂，目前尚无火把花根的质量评价方法或者体系，尤其是采取现代检验技术，如液相色谱、质谱、指纹图谱技术等，这对于主要以火把花根为主要药材的药品生产以及产品开发是一个非常大的难题。
因此本领域技术人员致力于提供一种评价火把花根药材质量的检测方法。
发明内容
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明提供了一种评价火把花根药材质量的检测方法。
为实现上述目的，本发明提供了一种评价火把花根药材质量的检测方法，包括如下步骤：
1)取去皮的干燥的火把花根备用；
2)粉末显微鉴别：取步骤1)中的火把花根，磨粉，取少量至于显微镜下观察；观察是否具有淀粉粒及脐点、木纤维、纹孔、导管、草酸钙晶体；若无，则判定质量不合格；
3)取步骤1)中的火把花根，用薄层色谱法试验法定性是否含有表儿茶素，若无，则判定质量不合格；
4)取步骤1)中的火把花根分为4组，分别用于检查其水分，总灰分，酸不溶性灰分和测定浸出物；要求水分不超过13.0％，总灰分不超过6.0％，酸不溶性灰分不超过2.0％；浸出物不少于3.0％；若其中任何一项不符合要求，则判定质量不合格；
5)取步骤1)中的火把花根分为2组，分别测定火把花根的表儿茶素含量和雷公藤甲素含量；要求按照干燥品计算，表儿茶素含量不少于0.30mg/g，雷公藤甲素含量不少于10μg/g；若其中任何一项不符合要求，则判定质量不合格；
优选的，在步骤1)之前还包括产品外形观察步骤，具体包括观察外形形状，整体外形颜色，质地的软硬，横切面颜色，气味和味道；可以初步判定原材料的质量。
较佳的，步骤2)在显微镜下观察要点包括：
a)淀粉粒的形状和数量，要求淀粉粒数量多，且淀粉粒呈圆形或类圆形；
b)脐点的形状，要求脐点呈现点状或者裂缝状或者少数呈十字状或者三叉状或者人字状，脐点是淀粉在积累时，形成的淀粉核心，因此脐点越多说明淀粉粒形成的越好，那么药材内含有物质的质量越好；
c)木纤维的数量和形状，要求数量多，外形呈长条形或梭形，直径为10～40μm，木纤维越多证明药材的木质部较好；
d)纹孔要求明显，纹孔就是植物细胞的细胞壁上，未经次生加厚而留下的凹陷，因此纹孔越明显，说明药材生长的越好。
e)导管要求具缘纹孔；
f)草酸钙晶体的形状和直径，要求外形呈双锥形或者方形，直径为13～50μm；草酸钙晶体是植物代谢过程中的一种产物，因此不同的植物会形成不同的草酸钙晶体，可以通过草酸钙晶体的形状，初步鉴别药材。
通过对药材的进行显微观察，可以初步鉴别药材和判定药材质量的好坏。
优选的，步骤3)中，按照薄层色谱法试验法测定是否含有表儿茶素的具体步骤如下：
a)制备供试液：取步骤5)表儿茶素含量测定渗滤液25ml，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解；
b)制备对照品溶液：取纯净的表儿茶素溶解于甲醇中，制得每1ml甲醇含有1mg表儿茶素溶液；
c)吸取供试品溶液10～20μl和对照品溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上；然后以三氯甲烷—丙酮—甲醇—冰醋酸按照7：2：1.5：0.5的配比展开剂，展开，取出，晾干，喷以浓度为2％的三氯化铁溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；
d)对比对照品在薄层板上显示的斑点位置和颜色，然后观察供试品在薄层板对应的位置是否有同样颜色的斑点，若有，则证明火把花根含有表儿茶素；若无，则证明火把花根质量不合格。
更为优选的，步骤5)中表儿茶素含量通过高效液相色谱法进行测量，具体测定步骤如下：
a)制备检测表儿茶素的供试品溶液，备用：
①取步骤(1)的火把花根磨粉，经过四号筛子筛取，称定1.0-3.0g备用，加入50-100ml浓度为70％的甲醇，称取重量；
②对步骤①的溶液加热回流，提取0.5-1.5小时，放冷，再称定重量；若与步骤①的重量不同，则加入浓度为70％的甲醇补足，摇匀，滤过，滤液即为检测表儿茶素的供试品溶液；分成两份，其中一份用于步骤3)薄层鉴别定性表儿茶素；
b)制备表儿茶素的对照品溶液，备用：
①称取纯净的表儿茶素，加入浓度为70％甲醇溶液制成每1ml含有50μg的表儿茶素溶液，即得表儿茶素的对照品溶液；
c)高效液相色谱法的色谱测定条件：
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；
流动相：乙腈-0.1％磷酸水溶液；
洗脱条件：0～15min，15-18％乙腈；
检测波长：280nm；
d)分别吸取步骤a)中表儿茶素的供试品溶液20μl和步骤b)中表儿茶素的对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，记录测定数据；
e)计算表儿茶素的含量。
优选的，步骤5)中雷公藤甲素含量通过高效液相色谱法进行测量，具体测定步骤如下：
a)制备检测雷公藤甲素含量的供试品溶液，备用：
①取步骤(1)的火把花根磨粉，经过四号筛子筛取，称定3.0-10.0g备用，加入甲醇80-150ml，超声提取1小时，过滤，滤渣再用5-15ml甲醇洗涤2次，收集所有滤液和洗涤液，蒸干；
②收集残渣，用丙酮-甲醇溶液按照2:1的配比，按每次5-8ml转移量分次全部转移至中性氧化铝层析柱，干法装柱，用丙酮80-150ml洗脱，收集洗脱液，蒸干；
③残渣加甲醇适量溶解转移至5ml的容量瓶中，超声处理使其完全溶解，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
滤液即为检测雷公藤甲素的供试品溶液；
b)制备雷公藤甲素的对照品溶液，备用：
①称取纯净的雷公藤甲素，加入甲醇溶液制成每1ml含有10μg的雷公藤甲素，即得雷公藤甲素的对照品溶液；
c)高效液相色谱法的色谱测定条件：
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；
流动相：乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钠溶液(0.5％磷酸)；
洗脱条件：0～60min，10-20％乙腈；
检测波长：220nm；
d)分别吸取步骤a)中雷公藤甲素的供试品溶液10～20μl和步骤b)中雷公藤甲素的对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，记录测定数据；
e)计算雷公藤甲素的含量。
7.如权利要求6的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：氧化铝层析柱规格为内径1.5cm，100～200目，10g。
8.如权利要求5或6的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：计算表儿茶素的含量和计算的雷公藤甲素计算公式是：
其中，S样表示供试品平均峰面积；
C对表示对照品的浓度；
稀释倍数为步骤5)中第a)的稀释倍速；
S对表示对照品平均峰面积；
W样表示供试品重量；
V对表示对照品的进样体积；
V样表示试样品的进样体积；
较佳的，步骤5)中通过高效液相色谱法检测雷公藤甲素或者表儿茶素之前还包括系统适用性试验；其中，理论塔板数按雷公藤甲素峰计算不低于5000，理论塔板数按表儿茶素峰计算不低于5000。
本发明的有益效果：本发明先通过性状观察初步筛选出原材料，然后再结合现代仪器，对火把花根的细胞进行粉末显微鉴别，初步判定火把花根的显微特征，然后再鉴别其水分、总灰分和酸不溶性灰分；初步判定杂质含有情况；接着再测定浸出物，初步确定药材有效成分的可提取度，然后再通过高效液相色谱法对其主要成分表儿茶素和雷公藤甲素的情况进行准确定量，即可全方面的判定火把花根的质量，若采购的火把花根药材能够符合这些标准，则该批药材提取的有效成分，即用于制药的成分，以及最后制成药物的药效都会有所提高，即降低了制药厂的成本，又提高了最后出产药品的药效；有利于预判临床用药风险，保证临床用药安全、有效。
附图说明
图1是本发明中表儿茶素对照品色谱峰图一；
图2是本发明中表儿茶素对照品色谱峰图二；
图3是本发明中表儿茶素对照品色谱峰图三；
图4是本发明中表儿茶素对照品色谱峰图四；
图5是本发明中表儿茶素对照品色谱峰图五；
图6是本发明中火把花根表儿茶素色谱峰图一；
图7是本发明中火把花根表儿茶素色谱峰图二；
图8是本发明中雷公藤甲素对照品色谱峰图一；
图9是本发明中雷公藤甲素对照品色谱峰图二；
图10是本发明中雷公藤甲素对照品色谱峰图三；
图11是本发明中雷公藤甲素对照品色谱峰图四；
图12是本发明中雷公藤甲素对照品色谱峰图五；
图13是本发明中火把花根雷公藤甲素色谱峰图一；
图14是本发明中火把花根雷公藤甲素色谱峰图二。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步说明。
一种评价火把花根药材质量的检测方法，包括如下步骤：
第一步：观察产品性状：主要观察外形形状，要求外形呈不规则块状、片状或段状；整体外形颜色，要求表面棕黄色至棕色；质地的软硬，要求质硬，不易折断；横切面淡棕色或淡黄色，气味和味道；通过上述方法可以初步判定药材是否为火把花根，若全部满足，则进入下一步骤。
第二步：经过步骤一筛选后，取去皮的干燥的火把花根备用；
第三步：粉末显微鉴别：取步骤二的火把花根，磨粉，取少量置于显微镜下观察，观察是否具有淀粉粒及脐点、木纤维、纹孔、导管、草酸钙晶体；若无，则判定质量不合格；优选的，观察要点包括如下5个方面：
a)淀粉粒的形状和数量，要求淀粉粒数量多，且淀粉粒呈圆形或类圆形；
b)脐点的形状，要求脐点呈现点状或者裂缝状或者少数呈十字状或者三叉状或者人字状；
c)木纤维的数量和形状，要求数量多，外形呈长条形或梭形，直径为10～40μm；
d)纹孔要求明显；
e)导管要求具缘纹孔；
f)草酸钙晶体的形状和直径，要求外形呈双锥形或者方形，直径为13～50μm。
通过淀粉粒和脐点的观察，可以初步判定药材质量；若淀粉粒多且脐点呈上述形状，则证明药材质量较好；通过观察木纤维和纹孔，可以看到药材细胞壁的情况，若满足上述要求，这证明药材质量很好；由于不同植物形成的草酸钙晶体的形状不同，因此在通过观察草酸钙晶体的形状可以再次鉴别确定该药材是否为火把花根，若满足上述要求则是火把花根，反之，则不是。优选的方式，一般先看草酸钙晶体，确定为火把花根后，再观察其细胞的情况。
第四步：取步骤1)中的火把花根，用薄层色谱法试验法判定是否含有表儿茶素，若无，则判定质量不合格。测定是否含有表儿茶素的具体步骤如下：
a)制备供试液：取步骤(1)的火把花根磨粉，经过四号筛子筛取，称定1.0备用，加入100ml浓度为70％的甲醇，称取重量；
②对步骤①的溶液加热回流，提取1小时，放冷，再称定重量；若与步骤①的重量不同，则加入浓度为70％的甲醇补足，摇匀，滤过，取渗滤液25ml，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解；
b)制备对照品溶液：取纯净的表儿茶素溶解于甲醇中，制得每1ml甲醇含有1mg表儿茶素溶液；
c)吸取供试品溶液10～20μl和对照品溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上；然后以三氯甲烷—丙酮—甲醇—冰醋酸按照7：2：1.5：0.5的配比展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％的三氯化铁溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；
d)对比对照品在薄层板上显示的斑点位置和颜色，然后观察供试品在薄层板对应的位置是否有同样颜色的斑点，若有，则证明火把花根含有表儿茶素；若无，则证明火把花根质量不合格。
由于火把花根中主要用于制作药物的物质为表儿茶素，因此我们需要先确定该火把花根药材中是否含有表儿茶素，若有，在进行后面的步骤，反之，则直接淘汰。
第五步：取步骤二中的火把花根分为4组，分别用于测定其水分，总灰分，酸不溶性灰分和浸出物；要求水分含量不超过13.0％，总灰分含量不超过6.0％，酸不溶性灰分含量不超过2.0％；浸出物不少于3.0％；若其中任何一项不符合要求，则判定质量不合格；
由于药材的采购通常都是论斤计两的进行购买，如果水分过多，直接影响该批药材的采购费用，因此要求水分含量不得超过13.0％，若超过了，则不符合要求。
通过总灰分和酸不溶性灰分的测量可以初步断定，药材中不可利用的物质含量，也就可以看出这批药材的可利用度，因此当总灰分高于6.0％或者酸不溶性灰分高于2.0％时，则说明该批药材的不可利用物质过高，不符合制药采购标准。
在上述判断的技术之上，再对浸出物进行测定，浸出物越多则表明最后可利用的物质越多，因此要求浸出物不得低于3.0％。如果低于3.0％，则直接淘汰。
第六步，取步骤1)中的火把花根分为2组，分别测定火把花根的表儿茶素含量和雷公藤甲素含量；要求按照干燥品计算，表儿茶素含量不少于0.30mg/g，雷公藤甲素含量不少于10μg/g；若其中任何一项不符合要求，则判定质量不合格；其中，表儿茶素和雷公藤甲素的含量均通过高效液相色谱法进行测量。优选的，在通过高效液相色谱法检测雷公藤甲素或者表儿茶素之前还包括系统适用性试验；要求按照理论塔板数按雷公藤甲素峰计算不低于5000，理论塔板数按表儿茶素峰计算不低于5000；这样可以减小高效液相色谱仪对实验数据的误差影响，提高实验数据的可靠性。
通过高效液相色谱法测定具体测量表儿茶素和雷公藤甲素的步骤如下：
测定表儿茶素的含量的步骤：
a)制备检测表儿茶素的供试品溶液，备用：
①取步骤二中的火把花根磨粉，该火把花根磨粉的含水量为7.0％；经过四号筛子筛取，称定约为2.0g备用，加入50ml浓度为70％的甲醇，称取重量；按照上述方法准备两份，精密称取重量：两组火把花根磨粉的重量分别为2.0075g和2.0090g。
②对步骤①的溶液加热回流，提取0.5小时，放冷，再称定重量；通过加热回流步骤，可以充分提取火把花根的有效成分，减小实验误差；若与步骤①的重量不同，则加入浓度为70％的甲醇补足(因此该供试品溶液被稀释倍数为50倍)，摇匀，滤过，滤液即为检测表儿茶素的供试品溶液；
b)制备表儿茶素的对照品溶液，备用：
①称取纯净的表儿茶素，加入浓度为甲醇溶液制成每1ml含有50μg的表儿茶素溶液，即得表儿茶素的对照品溶液；对照品表儿茶素含量为99.7％，实际浓度为0.05024mg/ml；
c)高效液相色谱法的色谱测定条件：
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；
流动相：乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钠溶液(0.5％磷酸)；
洗脱条件：0～15min，10-15％乙腈；
检测波长：280nm；
d)分别吸取步骤a)中表儿茶素的供试品溶液20μl和步骤b)中表儿茶素的对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，记录测定数据；
按照上述方法共计进行多组实验，其中，对照品进行了5次实验，试供品进行了2组实验，实验数据如图1至图7所示。
实验数据统计表如下：
e)根据前述实验数据，计算表儿茶素的含量，计算公式如下：
其中，S样表示供试品的峰面积；
C对表示对照品的浓度；
稀释倍数为步骤5)中第a)的稀释倍数；
S对表示对照品平均峰面积；
W样表示供试品重量，单位为g；
w％表示火把花根磨粉的含水量为7.0％；
V对表示对照品的进样体积；
V样表示试样品的进样体积；
本次试验中：
C对-对照品配制浓度：0.05024mg/ml 对照品中表儿茶素含量：99.7％
V对-对照品进样体积：10ul V样-样品进样体积：20ul
W样-样品①称样量：2.0075g W样-样品②称样量：2.0090g
W％-表示供试品中火把花粉根的含水量7.0％
样品①和②的表儿茶素的平均含量＝2.18mg/g
测定雷公藤甲素的含量的步骤：
a)制备检测雷公藤甲素含量的供试品溶液，备用：
①取步骤二的火把花根磨粉，该批样品中火把花根磨粉的含水量为7.0％，经过四号筛子筛取，称定5.0g备用，加入100ml浓度为甲醇，超声提取1小时，过滤，滤渣再用10ml甲醇洗涤2次，收集所有滤液和洗涤液，蒸干；通过超声提取，可使火把花根粉末充分的与甲醇接触，提高甲醇中物质的溶入度；按照上述方法准备两份，精密称取重量：两组火把花根磨粉的重量分别为5.0060g和5.0031g；
②收集残渣，用丙酮-甲醇溶液按照2:1的配比，按每次5ml转移量分次全部转移至中性氧化铝层析柱，干法装柱，用丙酮100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，去剩余残渣；优选的，氧化铝层析柱规格为内径1.5cm，100～200目，10g；
③取步骤②中的残渣加甲醇适量溶解转移至5ml的容量瓶中，超声处理使其完全溶解，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得检测雷公藤甲素的供试品溶液，该滤液最终被稀释了5倍；
通过超声提取和中性氧化铝层析柱法可以使火把花根中可溶于甲醇的物质尽量全部溶如甲醇中，提高检测雷公藤甲素的供试品溶液中有效物质的含有量，减小实验误差对实验结果的影响。
b)制备雷公藤甲素的对照品溶液，备用：
①称取纯净的雷公藤甲素，加入甲醇溶液制成每1ml含有10μg的雷公藤甲素，即得雷公藤甲素的对照品溶液，对照品的配制浓度为10.08g/ml，对照品的含量为99.8％；
c)高效液相色谱法的色谱测定条件：
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；
流动相：乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钠溶液(0.5％磷酸)；
洗脱条件：0～60min，10-20％乙腈；
检测波长：220nm；
d)分别吸取步骤a)中雷公藤甲素的供试品溶液20μl和步骤b)中雷公藤甲素的对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，记录测定数据；
按照上述方法共计进行多组实验，其中，对照品进行了5次实验，试供品进行了2组实验，实验数据如图8至图14所示。
实验数据统计表如下：
e)根据前述实验数据，计算表儿茶素的含量，计算公式如下：
其中，S样表示供试品的峰面积；
C对表示对照品的浓度；
稀释倍数为步骤5)中第a)的稀释倍数；
S对对表示对照品平均峰面积；
W样表示供试品的重量，单位为g；
w％表示火把花根磨粉的含水量为7.0％；
V对表示对照品的进样体积；
V样表示试样品的进样体积；
本实验中：
C对-对照品配制浓度：10.08g/ml 对照品中雷公藤甲素含量：99.8％
V对-对照品的进样体积：20μl V样-试样品进样体积：20μl
W样-样品①称样量：5.0060g W样-样品②称样量：5.0031g
W％-表示供试品中火把花粉根的含水量7.0％；
样品①和②的雷公藤甲素的平均含量＝38.7μg/g。
按照上述测定方法，我们对不同产地的火把花根原药材质量进行了对比检测，统计结果如下：
从以上数据可以看出，通过本发明中的方法是可以全面评价火把花根药材质量的优劣，对于制药厂选材来讲，非常有利；通过精确评估火把花根内表儿茶素和雷公藤甲素的含量，可以预判临床用药风险，确保临床用药的安全和有效。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术人员无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。

Claims (9)

1.一种评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：包括如下步骤：
1)取去皮的干燥的火把花根备用；
2)粉末显微鉴别：取步骤1)中的火把花根，磨粉，取少量置于显微镜下观察；观察是否具有淀粉粒及脐点、木纤维、纹孔、导管、草酸钙晶体；若无，则判定质量不合格；
3)取步骤1)中的火把花根，用薄层色谱试验法定性是否含有表儿茶素，若无，则判定质量不合格；
4)取步骤1)中的火把花根分为4组，分别用于检查其水分，总灰分，酸不溶性灰分和测定浸出物；要求水分含量不超过13.0％，总灰分含量不超过6.0％，酸不溶性灰分含量不超过2.0％；浸出物不少于3.0％；若其中任何一项不符合要求，则判定质量不合格；
5)取步骤1)中的火把花根分为2组，分别测定火把花根的表儿茶素含量和雷公藤甲素含量；要求按照干燥品计算，表儿茶素含量不少于0.30mg/g，雷公藤甲素含量不少于10μg/g；若其中任何一项不符合要求，则判定质量不合格。
2.如权利要求1所述的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：所述步骤1)之前还包括产品外形观察步骤，具体包括观察外形形状，整体外形颜色，质地的软硬，横切面颜色，气味和味道。
3.如权利要求1所述的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：所述步骤2)在显微镜下观察要点包括：
a)淀粉粒的形状和数量，要求淀粉粒数量多，且淀粉粒呈圆形或类圆形；
b)脐点的形状，要求脐点呈现点状或者裂缝状或者少数呈十字状或者三叉状或者人字状；
c)木纤维的数量和形状，要求数量多，外形呈长条形或梭形，直径为10～40μm；
d)纹孔要求明显；
e)导管要求具缘纹孔；
f)草酸钙晶体的形状和直径，要求外形呈双锥形或者方形，直径为13～50μm。
4.如权利要求1所述的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：所述步骤3)中，按照薄层色谱试验法测定是否含有表儿茶素的具体步骤如下：
a)制备供试液：取步骤5)表儿茶素含量测定的渗滤液25ml，蒸干，残渣加1ml甲醇使溶解；
b)制备对照品溶液：取纯净的表儿茶素溶解于甲醇中，制得每1ml甲醇含有1mg表儿茶素溶液；
c)吸取供试品溶液10～20μl和对照品溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上；然后以三氯甲烷—丙酮—甲醇—冰醋酸按照7：2：1.5：0.5的配比作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％的三氯化铁溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；
d)对比对照品在薄层板上显示的斑点位置和颜色，然后观察供试品在薄层板对应的位置是否有同样颜色的斑点，若有，则证明火把花根含有表儿茶素；若无，则证明火把花根质量不合格。
5.如权利要求1所述的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：所述步骤5)中表儿茶素含量通过高效液相色谱法进行测量，具体测定步骤如下：
a)制备检测表儿茶素的供试品溶液，备用：
①取步骤(1)的火把花根磨粉，经过四号筛子筛取，称定1.0-3.0g备用，加入50-100ml浓度为70％的甲醇，称取重量；
②对步骤①的溶液加热回流，提取0.5-1.5小时，放冷，再称定重量；若与步骤①的重量不同，则加入浓度为70％的甲醇补足，摇匀，滤过，滤液即为检测表儿茶素的供试品溶液；分成两份，其中一份用于步骤3)薄层鉴别定性表儿茶素；
b)制备表儿茶素的对照品溶液，备用：
①称取纯净的表儿茶素，加入浓度为70％甲醇溶液制成每1ml含有50μg的表儿茶素溶液，即得表儿茶素的对照品溶液；
c)高效液相色谱法的色谱测定条件：
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；
流动相：乙腈-0.1％磷酸水溶液；
洗脱条件：0～15min，15-18％乙腈；
检测波长：280nm；
d)分别吸取步骤a)中表儿茶素的供试品溶液20μl和步骤b)中表儿茶素的对照品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，记录测定数据；
e)计算表儿茶素的含量。
6.如权利要求1所述的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：所述步骤5)中雷公藤甲素含量通过高效液相色谱法进行测量，具体测定步骤如下：
a)制备检测雷公藤甲素含量的供试品溶液，备用：
①取步骤(1)的火把花根磨粉，经过四号筛子筛取，称定3.0-10.0g备用，加入甲醇80-150ml，超声提取1小时，过滤，滤渣再用5-15ml甲醇洗涤2次，收集所有滤液和洗涤液，蒸干；
②收集残渣，用丙酮-甲醇溶液按照2:1的配比，按每次5-8ml转移量分次全部转移至中性氧化铝层析柱，干法装柱，用丙酮80-150ml洗脱，收集洗脱液，蒸干；
③残渣加甲醇适量溶解转移至5ml的容量瓶中，超声处理使其完全溶解，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
滤液即为检测雷公藤甲素的供试品溶液；
b)制备雷公藤甲素的对照品溶液，备用：
①称取纯净的雷公藤甲素，加入甲醇制成每1ml含有10μg的雷公藤甲素，即得雷公藤甲素的对照品溶液；
c)高效液相色谱法的色谱测定条件：
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；
流动相：乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钠溶液(0.5％磷酸)；
洗脱条件：0～60min，10-20％乙腈；
检测波长：220nm；
d)分别吸取步骤a)中雷公藤甲素的供试品溶液10～20μl和步骤b)中雷公藤甲素的对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，记录测定数据；
e)计算雷公藤甲素的含量。
7.如权利要求6所述的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：所述氧化铝层析柱规格为内径1.5cm，100～200目，10g。
8.如权利要求5或6所述的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：计算表儿茶素的含量和计算的雷公藤甲素计算公式是：
其中，S样表示供试品平均峰面积；
C对表示对照品的浓度；
稀释倍数为步骤5)中第a)的稀释倍数；
S对表示对照品平均峰面积；
W样表示供试品重量；
V对表示对照品的进样体积；
V样表示样品的进样体积。
9.如权利要求5或6所述的评价火把花根药材质量的检测方法，其特征是：所述步骤5)中通过高效液相色谱法检测雷公藤甲素或者表儿茶素之前还包括系统适用性试验；其中，要求理论塔板数按雷公藤甲素峰计算不低于5000，理论塔板数按表儿茶素峰计算不低于5000。
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