CN110387058A - 一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明具体涉及一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，包括如下步骤：(1)三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)溶液的制备；(2)多巴胺溶液的制备；(3)聚丙烯酰胺水凝胶的改性：将聚丙烯酰胺水凝胶浸泡在步骤(2)制备的多巴胺溶液中孵育；(4)纯水清洗；(5)用VEGF溶液处理。本发明对聚丙烯酰胺水凝胶进行的改性，细胞生物相容性好，与直接在聚丙烯酰胺水凝胶上面种植细胞相比，细胞生长状态明显发生变化，改性前的水凝胶上细胞基本不铺展，而改性后的水凝胶上细胞正常铺展和生长。此改性方法简单易操作，而且性能稳定，对于体外研究聚丙烯酰胺水凝胶有着非常重要的作用。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域，涉及一种能够促进生物材料上细胞生长的方法，具体涉及一种促进水凝胶上细胞生长的方法。
背景技术
交通事故，自然灾害，战争和临床手术事故引起的周围神经损伤是一种常见的临床症状，目前临床周围神经缺损仍然采用传统的自体神经作为神经桥接物。虽然人们已经研制的人工神经移植物在修复周围神经缺损中取得了一定的修复效果，但人工神经移植物修复周围神经缺损的效果与自体神经移植相比还有较大的差距。研究发现材料表面弹性对于组织再生具有重要影响作用，但弹性对于周围神经再生的具体影响作用还缺乏系统的研究。
聚丙烯酰胺水凝胶因其良好的力学性能及可加工性在组织工程与再生医学中具有广泛的研究和应用，可以作为力学模型用于研究弹性跟组织再生之间的关系。而表面的弹性是构成组织再生过程中微环境的一个重要因素。聚丙烯酰胺水凝胶常用于体外培养细胞模型，但是从培养的效果来看，存在一些问题，例如细胞粘附性差，而且不容易铺展，这对于建立体外培养细胞模型来说是非常受影响的。因此，对于上述存在的问题，我们提出了一种促进聚丙烯酰胺水凝胶表面细胞粘附和铺展的方法。
本方法提供了一种能够促进细胞在聚丙烯酰胺水凝胶上生长的方法。具体是以多巴胺和VEGF为介质，对水凝胶进行改性。将水凝胶浸泡在多巴胺溶液中，用纯水冲洗多次过后，再用VEGF溶液处理。与直接在水凝胶上面种植细胞相比，细胞生长状态明显发生变化，改性前的水凝胶上细胞基本不铺展，而改性后的水凝胶上细胞正常铺展和生长。
发明内容
发明目的：本发明的目的在于研究出一种能够促进生物材料上细胞生长的方法，本发明提供的这种方法，具有良好的稳定性。
技术方案：本发明的技术方案如下：
本发明提供了一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，方法中涉及了三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)粉末，多巴胺粉末还有VEGF溶液。
本发明提供了一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，具体步骤如下：
步骤1三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)溶液的制备：称取三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)粉末，制备成为Tris溶液；
步骤2多巴胺溶液的制备：在步骤1中得到的Tris溶液中加入多巴胺粉末，将其配制成多巴胺溶液；
步骤3聚丙烯酰胺水凝胶的改性：将步骤2中获得的多巴胺溶液去浸泡水凝胶，避光孵育；
步骤4纯水清洗：将步骤3中浸泡过的水凝胶用水多次冲洗表面；
步骤5用VEGF溶液处理：将步骤4中冲洗过的水凝胶表面加入VEGF，静置于超净台下等待吹干，得到改性以后的水凝胶。
在本发明的一种实施方式中，所述水为去离子水。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤1为在去离子水中加入三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)粉末，搅拌溶解，制成Tris溶液
在本发明的一种实施方式中，所述步骤2中多巴胺溶液的浓度为2mg/mL。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤3中多巴胺避光孵育24h。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤4中所用水为去离子水。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤5中加入VEGF的浓度为50ng/mL。
在本发明的一种实施方式中，所述步骤5中加入的VEGF的量为20-30μL。
有益效果：本发明对聚丙烯酰胺水凝胶进行的改性，细胞生物相容性好，与直接在聚丙烯酰胺水凝胶上面种植细胞相比，细胞生长状态明显发生变化，改性前的水凝胶上细胞基本不铺展，而改性后的水凝胶上细胞正常铺展和生长。此改性方法简单易操作，而且性能稳定，对于体外研究聚丙烯酰胺水凝胶有着非常重要的作用。
附图说明
图1是本发明的聚丙烯酰胺水凝胶制备以及改性示意图；
图2是改性前聚丙烯酰胺水凝胶上背根神经节细胞形态示意图；
图3是改性后聚丙烯酰胺水凝胶上背根神经节细胞形态示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。在本发明中所使用的术语，除非另有说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。下面结合具体实施例并参照数据进一步详细描述本发明。应理解，这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。
实施例1
(1)聚丙烯酰胺水凝胶培养施万细胞
量筒量取50mL纯水加入烧杯中，再称取5g过硫酸铵加入搅拌均匀制成10％的溶液，用量筒量取100mL纯水倒入烧杯中，再称取29g丙烯酰胺和1g N,N-亚甲基双丙烯酰胺加入烧杯中搅拌均匀制备成聚丙烯酰胺溶液，在24孔板中加入1mL聚丙烯酰胺溶液，再加入20-30μL过硫酸铵后将溶液充分混匀，将孔板放入55℃烘箱中加热形成凝胶，将水凝胶从24孔板中取出，置于纯水中浸泡7d以上，每隔一段时间更换一次纯水以除去多余未反应的单体。接着将水凝胶用多巴胺进行避光处理24h，处理之后用纯水将水凝胶进行清洗多次，然后在水凝胶表面加入VEGF进行处理，然后将其置于超净台下吹干。取新生一天SD大鼠，处死后酒精消毒，取双侧坐骨神经，胶原酶/胰酶混合消化完全后离心弃上清液重悬细胞，接种到PLL事先包被好的培养皿中培养，24h后更换成含有阿糖胞苷的完全培养基，培养48h以后更换为含有HRG和Forsklin的完全培养基继续培养，直到细胞长到90％左右以后将细胞进行纯化，纯化结束以后待其生长到可以使用时，消化离心然后计数种于水凝胶上，来观察细胞在水凝胶上的生长情况，经过培养可以明显发现改性过的水凝胶上细胞生长状态良好，具有明显的骨架状态。
(2)聚丙烯酰胺水凝胶培养背根神经节细胞
量筒量取100mL纯水加入烧杯中，再称取10g过硫酸铵加入搅拌均匀制成10％的溶液，用量筒量取100mL纯水倒入烧杯中，再称取29g丙烯酰胺和1g N,N-亚甲基双丙烯酰胺加入烧杯中搅拌均匀制备成聚丙烯酰胺溶液，在24孔板中加入1mL聚丙烯酰胺溶液，再加入20-30μL过硫酸铵后将溶液充分混匀，将孔板放入55℃烘箱中加热形成凝胶。待水凝胶冷却以后，用纯水浸泡以除去多余的单体。接着将水凝胶用多巴胺进行处理，处理之后用纯水将水凝胶进行清洗多次，接着我们在水凝胶表面加入VEGF进行处理，然后将其置于超净台下吹干。怀孕14天的SD孕鼠，将其用麻药过量处死，打开腹部取出胎鼠，体视显微镜下取出背根神经节置于事先准备好的培养皿中，冰上操作。取完以后将背根神经节转移至离心管中，胶原酶/胰酶混合消化完全后离心弃上清液重悬细胞，细胞计数板计数随后种于改性过的水凝胶上面。在4-6小时以后更换为含有NGF，B27，Glu和PS的神经元培养基。第二天早上更换为含有NGF，B27，Glu，5-Fdu，u，Ara-C，和PS的神经元培养基以去除杂细胞，然后隔一天更换为含有NGF，B27，Glu和PS的神经元培养基，隔一天更换为含有NGF，B27，Glu，5-Fdu，u，Ara-C，和PS的神经元培养基以去除杂细胞。以此类推。经过培养可以明显发现细胞在改性过的水凝胶上面正常生长和铺展，不同于未改性的水凝胶。
如图1-3所示，本发明对聚丙烯酰胺水凝胶进行的改性，细胞生物相容性好，与直接在聚丙烯酰胺水凝胶上面种植细胞相比，细胞生长状态明显发生变化，改性前的水凝胶上细胞基本不铺展，而改性后的水凝胶上细胞正常铺展和生长。此改性方法简单易操作，而且性能稳定，对于体外研究聚丙烯酰胺水凝胶有着非常重要的作用。
本发明实施例中的技术方案进行了清楚、完整地描述，以使本领域的技术人员能够更好的理解本发明的优点和特征，从而对本发明的保护范围做出更为清楚的界定。本发明所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
Claims (8)
1.一种促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，所述的方法能够促进细胞铺展和正常生长：包括如下步骤：
步骤1三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)溶液的制备：称取三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)粉末，制备成为Tris溶液；
步骤2多巴胺溶液的制备：在步骤1中得到的Tris溶液中加入多巴胺粉末，将其配制成多巴胺溶液；
步骤3聚丙烯酰胺水凝胶的改性：将步骤2中获得的多巴胺溶液去浸泡水凝胶，避光孵育；
步骤4纯水清洗：将步骤3中浸泡过的水凝胶用水多次冲洗表面；
步骤5用VEGF溶液处理：将步骤4中冲洗过的水凝胶表面加入VEGF，静置于超净台下等待吹干，得到改性以后的水凝胶。
2.如权利要求1所述的促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，其特征在于：所述步骤1中Tris的含量是0.2423g。
3.如权利要求1所述的促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，其特征在于：所述步骤1中水的用量为200mL。
4.如权利要求1所述的促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，其特征在于：所述步骤2中多巴胺溶液是由Tris溶液配制而成的浓度为2mg/mL。
5.如权利要求1所述的促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，其特征在于：所述步骤3中将水凝胶用多巴胺溶液避光孵育24h。
6.如权利要求1所述的促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，其特征在于：所述步骤1和4中所用的水为去离子水。
7.如权利要求1所述的促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，其特征在于：所述步骤5中VEGF的用量为20-30μL。
8.如权利要求1所述的促进细胞在水凝胶上面正常生长的方法，其特征在于：所述步骤5中VEGF的浓度为50ng/mL。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113621028A (zh) * | 2021-07-27 | 2021-11-09 | 南通大学 | 一种多肽自组装水凝胶支架及其应用 |
| CN115845124A (zh) * | 2022-11-30 | 2023-03-28 | 四川大学 | 一种水凝胶敷料及其制备方法与应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1419597A (zh) * | 2000-02-24 | 2003-05-21 | 埃克斯西特治疗公司 | 细胞的同步刺激和富集 |
| CN101855337A (zh) * | 2007-06-29 | 2010-10-06 | 船木真理 | 用于进行干细胞调节的软凝胶系统 |
| CN105126163A (zh) * | 2015-09-21 | 2015-12-09 | 西南交通大学 | 用于软骨修复的具有组织诱导性的水凝胶的制备方法 |
| CN108653807A (zh) * | 2018-06-15 | 2018-10-16 | 天津工业大学 | 一种表层包埋干细胞可持续诱导软骨分化的高强度水凝胶的制备方法 |
-
2019
- 2019-07-24 CN CN201910670145.5A patent/CN110387058A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1419597A (zh) * | 2000-02-24 | 2003-05-21 | 埃克斯西特治疗公司 | 细胞的同步刺激和富集 |
| CN101855337A (zh) * | 2007-06-29 | 2010-10-06 | 船木真理 | 用于进行干细胞调节的软凝胶系统 |
| CN105126163A (zh) * | 2015-09-21 | 2015-12-09 | 西南交通大学 | 用于软骨修复的具有组织诱导性的水凝胶的制备方法 |
| CN108653807A (zh) * | 2018-06-15 | 2018-10-16 | 天津工业大学 | 一种表层包埋干细胞可持续诱导软骨分化的高强度水凝胶的制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| CHYE KHOON POH ET AL.: ""The effect of VEGF functionalization of titanium on endothelial cells in vitro"", 《BIOMATERIALS》 * |
| YINXIN ZHAO ET AL.: ""Construction of polyacrylamide/graphene oxide/gelatin/sodium alginate composite hydrogel with bioactivity for promoting Schwann cells growth"", 《SOCIETY FOR BIOMATERIALS》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113621028A (zh) * | 2021-07-27 | 2021-11-09 | 南通大学 | 一种多肽自组装水凝胶支架及其应用 |
| CN115845124A (zh) * | 2022-11-30 | 2023-03-28 | 四川大学 | 一种水凝胶敷料及其制备方法与应用 |
| CN115845124B (zh) * | 2022-11-30 | 2024-01-23 | 四川大学 | 一种水凝胶敷料及其制备方法与应用 |
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