CN110157010B

CN110157010B - 一种基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶止血剂

Info

Publication number: CN110157010B
Application number: CN201910367576.4A
Authority: CN
Inventors: 朱新远; 冯汉林; 许冠哲; 朱丹; 金鑫; 吴筱昆; 童刚生; 冯贻东
Original assignee: Shenzhen Neptunus Pharmaceutical Research Institute Co Ltd; Shanghai Jiao Tong University
Current assignee: Shenzhen Neptunus Pharmaceutical Research Institute Co Ltd; Shanghai Jiao Tong University
Priority date: 2019-05-05
Filing date: 2019-05-05
Publication date: 2021-04-02
Anticipated expiration: 2039-05-05
Also published as: CN110157010A

Abstract

本发明提供了一种基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶止血剂，所述聚电解质复合物水凝胶是由多糖溶液与聚肽溶液混合后发生物理交联而生成；所述多糖溶液中含有黄原胶；所述聚肽溶液中含有聚赖氨酸。本发明不同配比的多糖溶液和聚肽溶液在相互混合后，能够通过分子间静电相互作用、分子间氢键相互而发生物理交联，从而快速的生成水凝胶。由于该类水凝胶具有快速凝胶化、良好的生物相容性等优势，故可作为凝胶型止血剂使用，应用于外伤止血与手术止血中。

Description

一种基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶止血剂

技术领域

本发明涉及聚电解质复合物技术领域，具体地，涉及一种基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶止血剂。

背景技术

聚电解质复合物又称聚离子复合物，是指带有相反电荷的两种聚电解质在水溶液中通过分子间静电相互作用而形成的物质。当聚电解质复合物体系中分子间静电相互作用力大小适中时(体系pH值与聚合物pKa值接近)，聚电解质复合物能够形成水凝胶，此类水凝胶亦被称为聚电解质复合物水凝胶。在聚电解质复合物水凝胶的制备过程中，若体系内存在分子间氢键、亲疏水相互作用力、主客体相互作用力等其他分子间作用力，则聚电解质复合物水凝胶的强度会得到较大幅度的提升。制备聚电解质复合物水凝胶的方法分为非原位法和原位法。非原位法指的是两种聚电解质溶液混合后不能自发形成水凝胶，而是要通过其他物理/化学条件才能触发它们的凝胶化过程，例如冷冻解冻、加热、引入PH调节剂等等。原位法指的是两种聚电解质溶液混合后即可发生凝胶化，无需额外条件来触发凝胶过程。如果一种能够原位凝胶化的聚电解质复合物水凝胶同时还具备凝胶时间短(＜1min)，生物相容性好(符合GB/T16886.5-2017中的要求)的特点，那么此类聚电解质复合物水凝胶具有应用为凝胶型止血剂的潜力。

黄原胶又称汉生胶，是一种由假黄单胞菌属发酵产生的细胞外酸性多糖。黄原胶分子通过分子间氢键、静电相互作用能够形成螺旋状二级结构，且螺旋状二级结构之间还能通过非共价键形成三级结构，这使得黄原胶的水溶液具有较弱的凝胶特性、低浓度下表现出高粘度的特性以及假塑性流体的特性。此外，黄原胶无显著毒性，生物相容性好，作为增稠剂被广泛的应用于食品领域、日化领域及医药领域之中。涉及启动动物体自身凝血机制的止血剂属于医疗器械范畴，包括通过封堵伤口从而起到止血作用的各类凝胶型止血剂，因此止血剂需要具备一定的凝胶强度。由于黄原胶溶液自身的凝胶强度较弱，无法将其溶液直接作为止血剂来使用。

在公开号CN 107333758A的发明专利申请中，利用了含有黄原胶或海藻酸钠的溶液与含有聚赖氨酸等带正电的高分子与氯化钙组成的交联相，通过复凝聚法制备了载药凝胶微球。涉及的是复凝聚法制备载药微凝胶，其主体是水相中的海藻酸钠与交联相中的氯化钙在乳液中发生离子交联反应从而制备得到海藻酸钙水凝胶。形成海藻酸钙微凝胶后，其能够继续与交联相中壳聚糖等带正电的大分子进行组装形成微胶囊，所以其核心是通过离子键交联形成的海藻酸钙水凝胶；因而在该发明中的油相不可缺少，如没有油相，则无法进行复凝聚法制备凝胶微球。该发明涉及的是微米尺度载药凝胶微球的制备，而非宏观尺度的创面敷料水凝胶的制备，即该发明的核心内容就是制备颗粒剂而非宏观凝胶，应用领域受限。

发明内容

针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶止血剂。本发明通过将黄原胶与具有正电的大分子复合，显著的提高了黄原胶的凝胶强度，从而开拓了黄原胶在止血剂领域中的应用。

本发明提供的一类具有原位交联特性的聚电解质复合物水凝胶止血剂，具有良好的生物相容性和快速原位凝胶化特性。其止血原理为：聚电解质复合物水凝胶在凝胶化的过程中封堵伤口，从而达到止血的目的，可应用于外伤止血和手术止血之中。

本发明利用带负电的黄原胶与带正电的聚赖氨酸混合后能够原位快速凝胶化的性质，并以此为基础在配方中添加其他聚电解质，强化了凝胶的性能，制备出一系列新型多糖/聚肽聚电解质复合物水凝胶止血剂，拓展了黄原胶在医疗器械领域中的应用。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明提供一种基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶，所述聚电解质复合物水凝胶是由多糖溶液与聚肽溶液混合后通过物理交联而生成；

所述多糖溶液中含有黄原胶；所述聚肽溶液中含有聚赖氨酸。

优选地，所述多糖溶液中还含有海藻酸钠、透明质酸、硫酸软骨素中的一种或几种。

优选地，所述多糖溶液中，黄原胶的质量百分浓度为1％-3％，海藻酸钠的质量百分浓度为0％-3％，透明质酸的质量百分浓度为0％-3％，硫酸软骨素的质量百分浓度为0％-3％。

更优选地，所述多糖溶液中，包含黄原胶和海藻酸钠，所述黄原胶的质量百分浓度为1％-3％，所述海藻酸钠的质量百分浓度为0.5％-3％。

更优选地，所述透明质酸的质量百分浓度为0.1％-3％；

更优选地，所述硫酸软骨素的质量百分浓度为0.1％-3％。

优选地，所述聚肽溶液中还含有聚精氨酸、聚组氨酸、氯化钙中的一种或几种。

优选地，所述聚肽溶液中，聚赖氨酸的质量百分浓度为1％-10％，聚精氨酸的质量百分浓度为0-5％，聚组氨酸的质量百分浓度为0-5％，氯化钙的质量百分浓度为0-2％。由于高浓度的带正电荷的大分子溶液会产生一定的细胞毒性，故本发明中聚肽的最高浓度选择为10％。

更优选地，所述聚肽溶液中，包含聚赖氨酸和氯化钙，所述聚赖氨酸的质量百分浓度为1％-10％，所述氯化钙的质量百分浓度为0.5％-1.5％。

更优选地，所述聚精氨酸的质量百分浓度为0.5％-2％。

更优选地，所述聚组氨酸的质量百分浓度为0.5％-2％。

本发明中，除了必须组分黄原胶和聚赖氨酸之外，多糖组分中含有海藻酸钠、聚肽配方中含有氯化钙时，两种交联后所获得的水凝胶中除了有黄原胶与聚肽发生静电相互作用而产生的聚电解质复合物水凝胶外，还含有通过离子键交联的海藻酸钙水凝胶，在这种情况下，所获得水凝胶的强度较大。换言之，当多糖组分中同时含有黄原胶、海藻酸钠，聚肽组分中同时含有聚赖氨酸、氯化钙时，原位交联的效果最佳。

优选地，所述混合的步骤具体为：多糖溶液与聚肽溶液在室温下按体积比1:1混合。

当多糖溶液和聚肽溶液的浓度为优选浓度时，两种溶液的最优混合比为1:1，如多糖溶液和聚肽溶液的体积比小于或大于1:1，则聚电解质复合物水凝胶不能达到最佳的交联度。

优选地，所述多糖溶液与聚肽溶液混合后，在10s-1min发生原位快速凝胶化。

优选地，所述物理交联是通过分子间静电相互作用、分子间氢键相互作用而发生的。

优选地，所述聚电解质复合物水凝胶在室温下具有10Pa/s到10000Pa/s范围内的粘度。

优选地，所述聚电解质复合物水凝胶在1Hz的频率及1Pa的震荡压力下，具有1000Pa到5000Pa范围内的储能模量。

本发明还提供一种所述的聚电解质复合物水凝胶在制备止血剂中的应用。

本发明中，黄原胶与带有正电荷的聚肽——聚赖氨酸复合后，能够快速的原位形成聚电解质复合物水凝胶。新生成的聚电解质复合物水凝胶与黄原胶溶液相比，强度得到了大幅的提升，且同时具有了一定的粘附性，可作为凝胶型止血剂使用。本发明利用了此特性，并在黄原胶-聚赖氨酸水凝胶的配方中添加了其他聚电解质，提升了黄原胶-聚赖氨酸水凝胶的力学强度。

与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

1、本发明中使用的黄原胶、海藻酸钠、透明质酸、硫酸软骨素、聚赖氨酸、聚精氨酸、聚组氨酸等生物大分子均广泛应用于生物材料领域，它们均无明显细胞毒性，生物相容性好。

2、本发明中所述的水凝胶止血剂凝胶时间短，凝胶机理为静电相互作用力、氢键相互作用力诱导的物理交联过程，因此交联过程中无需添加小分子交联剂，提高了水凝胶止血剂的安全性。

3、本发明涉及的凝胶的主体是带有负电的多糖黄原胶与带有正电的聚肽聚赖氨酸之间通过分子间静电相互作用交联的聚电解质复合物水凝胶，相应的，本发明中多糖配方中的海藻酸钠比例可降为0％。此外，本发明中涉及的是宏观尺度的创面敷料水凝胶的制备，且水凝胶的凝胶强度高。

4、本发明制备水凝胶的步骤非常简单，无需制备水相、油相，直接将多糖溶液与聚肽溶液混合后即可在非常短的时间内形成水凝胶。

附图说明

通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：

图1为实施例1和实施例2中制备的聚电解质复合物水凝胶的储能模量和损耗模量值图；其中，图(a)为实施例1中制备的聚电解质复合物水凝胶的储能模量和损耗模量值，图(b)为是实施例2中制备的聚电解质复合物水凝胶的储能模量和损耗模量值；

图2为实施例1和实施例2中制备的聚电解质复合物水凝胶的复数粘度值图；其中，图(a)为实施例1中制备的聚电解质复合物水凝胶的复数粘度值；图(b)为实施例2中制备的聚电解质复合物水凝胶的复数粘度值；

图3为实施例1和实施例2中制备得到的聚电解质复合物水凝胶对L929小鼠成纤维细胞的毒性实验结果图；

图4为实施例8中小鼠割尾止血实验的对照图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变化和改进。这些都属于本发明的保护范围。

在本发明涉及的多糖/聚肽聚电解质复合物水凝胶止血剂中，多糖溶液和聚肽溶液能够在混合后1min内发生物理交联作用从而形成水凝胶。通过溶液混合法制备的多糖/聚肽聚电解质水凝胶，其储能模量范围为600Pa-6000Pa，其粘度范围为10Pa-10000Pa。本发明中提及的水凝胶具有原位快速交联的特性，且具有一定的凝胶强度，能够作为止血剂来使用。

实施例1

使用机械搅拌器配制混合多糖溶液，500mL水溶液中加入10g黄原胶和10g海藻酸钠，获得黄原胶含量2％、海藻酸钠含量2％的粘稠状混合多糖溶液，该溶液标记为1号溶液。使用磁力搅拌配制聚肽溶液，100mL水中加入5g聚赖氨酸盐酸盐，0.5g氯化钙，获得聚赖氨酸含量5％，氯化钙含量0.5％的混合溶液，标记为溶液a。100mL水中加入5g聚赖氨酸盐酸盐，1g氯化钙，获得聚赖氨酸含量5％，氯化钙含量1％的混合溶液，标记为溶液b。100mL水中加入10g聚赖氨酸盐酸盐，1g氯化钙，获得聚赖氨酸含量10％，氯化钙含量1％的混合溶液，标记为溶液c。取1号溶液1mL，共取3次，置于三个培养皿中，分别与1mL的溶液a/b/c进行混合，混合溶液分别在30s/20s/10s内形成了水凝胶。

实施例2

使用机械搅拌器配制混合多糖溶液，500mL水溶液中加入10g黄原胶、10g海藻酸钠和10g透明质酸，获得黄原胶含量2％、海藻酸钠含量2％、透明质酸含量2％的粘稠状混合多糖溶液，该溶液标记为2号溶液。取2号溶液1mL，共取3次，置于三个培养皿中，分别与1mL实施例1中的溶液a/b/c进行混合，混合溶液分别在50s/30s/20s内形成了水凝胶。

图1中，图1(a)是实施例1中制备的聚电解质复合物水凝胶的储能模量和损耗模量值，图1(b)是实施例2中制备的聚电解质复合物水凝胶的储能模量和损耗模量值其中G’为储能模量，单位Pa；G”为损耗模量，单位Pa，测试条件为温度25℃，震荡压力1Pa，震荡频率0.1-100Hz；图1中，数字与字母的组合代表不同的多糖溶液和聚肽溶液混合后制备的水凝胶，其中数字1代表2％黄原胶与2％海藻酸钠的混合溶液，数字2代表2％黄原胶、2％海藻酸钠与2％透明质酸的混合溶液，字母a代表5％聚赖氨酸与0.5％氯化钙的混合溶液，字母b代表5％聚赖氨酸与1.0％氯化钙的混合溶液，字母c代表10％聚赖氨酸与1.0％氯化钙的混合溶液。从图1中可看出，三种组合的储能模量值均高于损耗模量，这说明三种组合均成功凝胶化，呈现出凝胶的特性。此外，这三种水凝胶的储能模量在所有频率区间下均超过1000Pa，具有最大储能模量的凝胶为1+c的组合，其在100Hz下的最大储能模量为5746Pa。

图2(a)是实施例1中制备的聚电解质复合物水凝胶的复数粘度值，单位Pa/s，图2(b)是实施例2中制备的聚电解质复合物水凝胶的复数粘度值，单位Pa/s。图2中，数字和字母的组合代表不同的多糖溶液和聚肽溶液混合后制备的水凝胶，其中数字1代表2％黄原胶与2％海藻酸钠的混合溶液，数字2代表2％黄原胶、2％海藻酸钠与2％透明质酸的混合溶液，字母a代表5％聚赖氨酸与0.5％氯化钙的混合溶液，字母b代表5％聚赖氨酸与1.0％氯化钙的混合溶液，字母c代表10％聚赖氨酸与1.0％氯化钙的混合溶液。从图2中可看出种组合的储能模量值均高于损耗模量，这说明三种组合均成功凝胶化，呈现出凝胶的特性。此外，这三组水凝胶的储能模量值在同频率下均低于图1中使用1号多糖溶液的凝胶组。这三组中具有最大储能模量的凝胶是2+c的组合，其在100Hz下的最大储能模量为2817Pa。

实施例3

使用机械搅拌器配制混合多糖溶液，500mL水溶液中加入5g黄原胶、15g海藻酸钠和5g硫酸软骨素，获得黄原胶含量1％、海藻酸钠含量3％、硫酸软骨素含量1％的粘稠状混合多糖溶液，该溶液标记为3号溶液。取3号溶液1mL，共取3次，置于三个培养皿中，分别与1mL实施例1中的溶液a/b/c进行混合，混合溶液分别在50s/40s/30s内形成了水凝胶。

实施例4

使用机械搅拌器配制混合多糖溶液，500mL水溶液中加入5g黄原胶、5g海藻酸钠、15g透明质酸和15g硫酸软骨素，获得黄原胶含量1％、海藻酸钠含量1％、透明质酸含量3％、硫酸软骨素含量3％的粘稠状混合多糖溶液，该溶液标记为4号溶液。使用磁力搅拌器配制聚肽溶液，100mL水中加入5g聚赖氨酸盐酸盐，1g聚精氨酸盐酸盐，0.5g氯化钙，获得聚赖氨酸含量5％，聚精氨酸含量1％，氯化钙含量0.5％的混合溶液，标记为溶液d。100mL水中加入5g聚赖氨酸盐酸盐，1g聚组氨酸盐酸盐，1g氯化钙，获得聚赖氨酸含量5％，聚组氨酸含量1％，氯化钙含量1％的混合溶液，标记为溶液e。100mL水中加入5g聚赖氨酸盐酸盐，0.5g聚精氨酸盐酸盐、0.5g聚组氨酸盐酸盐、1g氯化钙，获得聚赖氨酸含量5％，聚精氨酸含量0.5％、聚组氨酸含量0.5％，氯化钙含量1％的混合溶液，标记为溶液f。取4号溶液1mL，共取3次，置于三个培养皿中，分别与1mL d/e/f溶液进行混合，混合溶液分别在60s/50s/40s内形成了水凝胶。

实施例5

使用机械搅拌器配制混合多糖溶液，500mL水溶液中加入15g黄原胶、15g海藻酸钠、5g透明质酸和5g硫酸软骨素，获得黄原胶含量3％、海藻酸钠含量3％、透明质酸含量1％、硫酸软骨素含量1％的粘稠状混合多糖溶液，该溶液标记为5号溶液。取5号溶液1mL，共取3次，置于三个培养皿中，分别与1mL实施例4中的溶液d/e/f进行混合，混合溶液分别在50s/30s/20s内形成了水凝胶。

实施例6

使用机械搅拌器配制混合多糖溶液，500mL水溶液中加入10g黄原胶和10g透明质酸，获得黄原胶含量2％、透明质酸含量2％的粘稠状混合多糖溶液，该溶液标记为6号溶液。取6号溶液1mL，共取3次，置于三个培养皿中，分别与1mL实施例1中的溶液a/b/c进行混合，混合溶液分别在60s/50s/40s内形成了水凝胶。

实施例7

使用磁力搅拌配制聚肽溶液，100mL水中加入5g聚赖氨酸盐酸盐，1g聚精氨酸，获得聚赖氨酸含量5％，聚精氨酸1％的混合溶液，标记为溶液g。取实施例1中1号溶液、实施例2中2号溶液、实施例3中3号溶液各1mL，置于三个培养皿中，分别与1mL的溶液g进行混合，混合溶液分别在30s/40s/50s内形成了水凝胶。

实施例8

水凝胶的细胞毒性实验选取的研究对象为小鼠成纤维细胞L929，实验步骤参考GB/T16886.5-2017中的浸提液噻唑蓝MTT细胞毒性测试法。取不同配比的聚电解质复合物水凝胶各2mL，置于不同的离心管中，在离心管中各加入25mL DMEM培养基。再将各个离心管置于培养箱内37度无菌条件下浸提24小时。丢弃凝胶，剩下的溶液即为100％的浸提液。

对100％的浸提液进行逐级稀释，制备得到12.5％，25％，50％的浸提液，使用不同浓度的水凝胶浸提液替换常规培养基，从而研究浸提液对L929细胞的细胞毒性。在培养48h后取样并使用噻唑蓝(MTT)处理，使用酶标仪检测溶液在492nm下的吸光度A_sample，并测试空白组溶液的吸光度A_control，利用公式

得到相对于空白组的L929细胞活力数值。

图3为实施例1和实施例2中制备得到的聚电解质复合物水凝胶对L929小鼠成纤维细胞的毒性实验，采用的方法是参考GB/T16886.5-2017中的浸提液MTT细胞毒性测试法。其中，横坐标值代表不同的水凝胶浸提液浓度，坐标范围12.5％％-100％；纵坐标值代表相对细胞活力，坐标范围从0-100％。数字和字母组合代表不同的多糖溶液和聚肽溶液混合后制备的水凝胶，其中数字1代表2％黄原胶与2％海藻酸钠的混合溶液，数字2代表2％黄原胶、2％海藻酸钠与2％透明质酸的混合溶液，字母a代表5％聚赖氨酸与0.5％氯化钙的混合溶液，字母b代表5％聚赖氨酸与1.0％氯化钙的混合溶液，字母c代表10％聚赖氨酸与1.0％氯化钙的混合溶液。

从图3中可以看出，在不同浓度的聚电解质复合物水凝胶浸提液的作用下，L929细胞的细胞活力均维持在75％以上，部分实验组的细胞活力数值达到了90％以上，这说明本发明中涉及的多糖/聚肽聚电解质复合物水凝胶对L929细胞无显著的细胞毒性。

实施例9

选取年龄3周体重200g左右的SD大鼠若干只，麻醉后剪去其三分之一的尾部，并使用实施例1中组合为多糖溶液1与聚肽溶液c的聚电解质复合物水凝胶止血剂对其尾部创面进行止血，结果表明，两种不同组分的聚电解质溶液在大鼠尾部创面处15s内形成了水凝胶并覆盖住了伤口，大鼠的尾部创面在90s内完成了止血过程。由于在止血过程中渗出的血液对止血剂两种组分造成了一定的稀释作用，所以实际的凝血时间较实施例1中溶液混合时的测得凝胶时间相比用时略久一些。

实施例10

选取年龄3周体重200g左右的SD大鼠若干只，麻醉后使用手术刀在其尾部二分之一处割出深度为2mm的伤口，并使用实施例2中的组合为多糖溶液2与聚肽溶液c的聚电解质复合物水凝胶止血剂对其尾部创面进行止血，结果表明，两种不同组分的聚电解质溶液在大鼠尾部创面处25s内形成了水凝胶并覆盖住了伤口，大鼠的尾部创面在90s内完成了止血过程。本实施例中大鼠凝血时间与实施实例2中溶液混合时测得的凝胶时间不一致的原因与实施实例9中的相同。

图4是实施例8中小鼠割尾止血实验的对照组和实验组照片，图中对照组的伤口不做任何处理，可以从图中看出大鼠尾部出血情况严重；图中实验组的使用实施例2中的止血剂对伤口进行处理，多糖/聚肽聚电解质水凝胶封堵了伤口并成功止血。

实施例11

选取年龄3周体重200g左右的SD大鼠若干只，麻醉后剪去在其背部制造50mm×50mm大小的创面，并使用实施例2中组合为多糖溶液2与聚肽溶液c的聚电解质复合物水凝胶止血剂对其背部创面进行止血，结果表明，两种不同组分的聚电解质溶液在大鼠背部创面处30s内形成了水凝胶并覆盖住了伤口，大鼠的尾部创面在100s内完成了止血过程。本实施例中大鼠凝血时间与实施实例2中溶液混合时测得的凝胶时间不一致的原因与实施实例9中的相同。

本发明中提供了一类基于多糖/聚肽聚电解质复合物的原位交联水凝胶止血剂，使用的多糖包括海藻酸钠、黄原胶、透明质酸、硫酸软骨素，使用的聚肽为聚赖氨酸。不同配比的多糖溶液和聚肽溶液在相互混合后，能够通过分子间静电相互作用、分子间氢键相互而发生物理交联，从而快速的生成水凝胶。由于该类水凝胶具有快速凝胶化、良好的生物相容性等优势，故可作为凝胶型止血剂使用，应用于外伤止血与手术止血中。

以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改，这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下，本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。

Claims

1.一种基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶，其特征在于，所述聚电解质复合物水凝胶是由多糖溶液与聚肽溶液混合后经物理交联而生成；

所述多糖溶液中含有黄原胶，所述多糖溶液中还含有海藻酸钠、透明质酸、硫酸软骨素；所述多糖溶液中，黄原胶的质量百分浓度为1％-3％，海藻酸钠的质量百分浓度为0.5％-3％，透明质酸的质量百分浓度为0.1％-3％，硫酸软骨素的质量百分浓度为0.1％-3％；

所述聚肽溶液中含有聚赖氨酸，所述聚肽溶液中还含有聚精氨酸、聚组氨酸、氯化钙；所述聚肽溶液中，聚赖氨酸的质量百分浓度为1％-10％，聚精氨酸的质量百分浓度为0.5％-2％，聚组氨酸的质量百分浓度为0.5％-2％，氯化钙的质量百分浓度为0.5％-1.5％；

所述混合的步骤具体为：多糖溶液与聚肽溶液在室温下按体积比1:1混合；

所述多糖溶液与聚肽溶液混合后，在10s-1min发生原位快速凝胶化；

所述物理交联是由分子间静电相互作用、分子间氢键相互作用而产生。

2.根据权利要求1所述的基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶，其特征在于，所述聚电解质复合物水凝胶在室温下具有10 Pa·s 到10000 Pa·s范围内的粘度。

3.根据权利要求1所述的基于多糖/聚肽的聚电解质复合物水凝胶，其特征在于，所述聚电解质复合物水凝胶在1Hz的频率及1Pa的震荡压力下，具有1000Pa到5000Pa范围内的储能模量。

4.一种根据权利要求1-3中任一项所述的聚电解质复合物水凝胶在制备止血剂中的应用。