CN110152053A - 抗炎止血复合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了抗炎止血复合物的制备方法，包括壳聚糖溶液的制备、铸膜液的制备以及成膜。有益效果为：本发明所公开的小蓟提取物与壳聚糖反应生成的复合膜的亲水性能更好，使复合膜能够更加快速地吸取血液中的水分，减少血细胞之间的距离，加速了血凝块的形成，从而实现了快速止血，且小蓟提取物‑壳聚糖复合膜材料表面的孔道均匀分布，为血小板和凝血因子提供了均匀的粘附位点，从而使膜材料与创面之间的粘附力沿着创面均匀分布，使膜材料牢固地结合于创面，不易脱落，避免了创面的二次出血。

Description

抗炎止血复合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及医疗技术领域，尤其是涉及抗炎止血复合物及其制备方法。

背景技术

日常生活中不可避免的会发生各种突发性的死亡，由失血引发的死亡占据相当大的比例。在进行急救治疗以及手术过程的创伤止血时，也存在因大出血导致医疗事故甚至死亡的案例。总之，病患者受伤后的局部有效的快速止血是抢救生命成败的关键因素之一，能否在短时间内让流血的创面快速止血至关重要。因此，有效的止血剂能避免失血过多，很大程度地减少发病率和死亡率，有效控制出血量并降低出血时间成为降低死亡率的重要选择。

发明内容

本发明的目的是提供抗炎止血复合物及其制备方法，所制备的小蓟提取物-壳聚糖复合膜止血速度快，止血时间短，对创面组织的炎症反应小，且与创面的粘附力均匀分布，避免了创面的二次出血。

具体而言，本发明提供了抗炎止血复合物的制备方法，首先是壳聚糖溶液的制备：将4-7份壳聚糖溶于80-100份1%-2%乙酸溶液，加热至60℃，搅拌溶解得壳聚糖溶液；接着是铸膜液的制备：向壳聚糖溶液中加入0.4-1.1份甘油和0.8-1.7份小蓟提取物，超声混合，所得溶液经脱气处理得铸膜液；最后是成膜：将铸膜液在53-58℃下干燥3.2-4h成膜。该止血膜对创面组织的炎症反应小，与壳聚糖相比，所加入的小蓟提取物与壳聚糖反应生成的复合膜的亲水性能更好，使复合膜能够更加快速地吸取血液中的水分，减少血细胞之间的距离，加速了血凝块的形成，从而实现了快速止血，且小蓟提取物-壳聚糖复合膜材料表面的孔道均匀分布，为血小板和凝血因子提供了均匀的粘附位点，从而使膜材料与创面之间的粘附力沿着创面均匀分布，使膜材料牢固地结合于创面，不易脱落，避免了创面的二次出血。

作为优选，铸膜液的制备中超声频率为25-30kHz，超声时间为42-48min。相对于搅拌分散，超声分散减少了空气向铸膜液的混入，还能够有效避免铸膜液中组分的团聚，使制备的复合膜连续性好，缺陷少，提高了最终制备的复合膜的止血效果。

作为优选，铸膜液的制备脱气是将溶液在真空度0.09-0.1MPa下抽气1-1.5h。通过脱气处理，进一步减少了铸膜液中的气泡，使复合膜表面难以形成针孔构造，提高了所制备的复合膜的品质。

作为优选，小蓟提取物的制备包括以下步骤：将干燥小蓟粉碎，加入95％乙醇提取，将提取液过滤、浓缩，加入石油醚脱脂，再按顺序萃取小蓟乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇部位，收集正丁醇部位，浓缩得小蓟提取物。该条件下，所获得的小蓟提取物中止血活性成分含量高，结构保存好，且所用溶剂可以循环利用，大大降低了生产成本，具有良好的经济效益。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明所公开的方法制备的小蓟提取物与壳聚糖反应生成的复合膜的亲水性能好，使复合膜能够更加快速地吸取血液中的水分，减少血细胞之间的距离，加速了血凝块的形成，从而实现了快速止血，且小蓟提取物-壳聚糖复合膜材料表面的孔道均匀分布，为血小板和凝血因子提供了均匀的粘附位点，从而使膜材料与创面之间的粘附力沿着创面均匀分布，使膜材料牢固地结合于创面，不易脱落，避免了创面的二次出血。

具体实施方式

以下通过实施例进一步详细描述：

实施例1：抗炎止血复合物的制备方法，包括以下步骤：

1)小蓟提取物的制备：取干燥小蓟，用中药粉碎机粉碎，过40目筛，收集小蓟粉末，按料液比1g/16mL加入质量分数为95％的乙醇，回流提取3次，将提取液过滤，合并乙醇提取液，所得乙醇提取液经减压浓缩得乙醇提取物，向乙醇提取物中加入石油醚脱脂，再按顺序萃取小蓟乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇部位，收集正丁醇部位，浓缩得小蓟提取物。该条件下，所获得的小蓟提取物中止血活性成分含量高，结构保存好，且所用溶剂可以循环利用，大大降低了生产成本，具有良好的经济效益；

2)壳聚糖溶液的制备：将4份壳聚糖溶于80份1%乙酸溶液，加热至60℃，搅拌使壳聚糖完全溶解得壳聚糖溶液；

3)铸膜液的制备：向壳聚糖溶液中加入0.4份甘油作为增塑剂，过滤，加入0.8份小蓟提取物，在频率25kHz下超声42min，所得溶液在真空度0.09MPa下抽气1h，得铸膜液；

4)成膜：将铸膜液倒入有机玻璃皿，在53℃下干燥3.2h，得小蓟提取物-壳聚糖复合膜。

实施例2：抗炎止血复合物的制备方法，包括以下步骤：

1)小蓟提取物的制备：取小蓟，用中药粉碎机粉碎，过40目筛，收集小蓟粉末，按料液比1g/16mL加入质量分数为95％的乙醇，在转速380r/min下搅拌提取2h，将提取液过滤、浓缩、真空干燥，再加水分散，加入石油醚萃取，再按顺序萃取小蓟乙醇提取物水溶液的乙酸乙酯、正丁醇部位，收集正丁醇部位，浓缩得小蓟提取物。该条件下，所获得的小蓟提取物中止血活性成分含量高，结构保存好，且所用溶剂可以循环利用，大大降低了生产成本，具有良好的经济效益；

2)壳聚糖溶液的制备：将7份壳聚糖溶于100份2%乙酸溶液，加热至60℃，搅拌使壳聚糖完全溶解得壳聚糖溶液；

3)铸膜液的制备：向壳聚糖溶液中加入1.1份甘油作为增塑剂，过滤，加入1.7份小蓟提取物，在频率30kHz下超声48min，所得溶液在真空度0.1MPa下抽气1.5h，得铸膜液；

4)成膜：将铸膜液倒入有机玻璃皿，在58℃下干燥4h成膜，得小蓟提取物-壳聚糖复合膜。

实施例3：抗炎止血复合物的制备方法，包括以下步骤：

1)小蓟提取物的制备：取干燥小蓟，用中药粉碎机粉碎，过40目筛，收集小蓟粉末，按料液比1g/16mL加入质量分数为95％的乙醇，回流提取3次，将提取液过滤，合并乙醇提取液，所得乙醇提取液经减压浓缩得乙醇提取物，向乙醇提取物中加入石油醚脱脂，再按顺序萃取小蓟乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇部位，收集正丁醇部位，浓缩得小蓟提取物。该条件下，所获得的小蓟提取物中止血活性成分含量高，结构保存好，且所用溶剂可以循环利用，大大降低了生产成本，具有良好的经济效益；

2)壳聚糖溶液的制备：将5份壳聚糖溶于86份2%乙酸溶液，加热至60℃，搅拌使壳聚糖完全溶解得壳聚糖溶液；

3)铸膜液的制备：向壳聚糖溶液中加入0.8份甘油作为增塑剂，过滤，加入0.9份小蓟提取物，在频率30kHz下超声44min，所得溶液在真空度0.09MPa下抽气1.5h，得铸膜液；

4)成膜：将铸膜液倒入有机玻璃皿，在55℃下干燥3.4h，得小蓟提取物-壳聚糖复合膜。

实施例4：壳聚糖止血膜的制备：将6份壳聚糖溶于89份1%乙酸溶液，加热至60℃，搅拌使壳聚糖完全溶解，加入0.7份甘油作为增塑剂，搅拌均匀，所得溶液在真空度0.09MPa下抽气1h，得铸膜液，将铸膜液倒入有机玻璃皿，在56℃下干燥3.2h，得壳聚糖止血膜。

出血时间及出血量测定：取体重介于180-220g的SD大鼠制备肝创面出血模型，腹腔注射戊巴比妥钠麻醉大鼠，剪开皮肤，腹肌，进入腹腔，将肝脏中叶显露，用无菌纱布将肝中叶周围的腹腔液吸干，在暴露的肝中叶远端，切一切口，模型制备后立即擦去血液，将相同大小（2.0cm×1.0cm×0.5cm）的实施例1、实施例2、实施例3以及实施例4制备的止血膜覆盖到肝脏切口上，然后每隔30s观察肝创面切口血液的渗出情况，直至血液不渗出为止，以去除纱布3min不再有新鲜血液渗出为止血标准，记录肝创面的止血时间和出血量，结果如表1所示，由表可知，相比于实施例4制备的壳聚糖止血膜，实施例1、实施例2以及实施例3制备的小蓟提取物-壳聚糖复合膜止血速度快，止血时间短。

表1

实验组	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4
					出血时间(min)	1.34	1.27	1.4	3.2
出血量(g)	0.49	0.44	0.52	1.87

实施例5：抗炎止血复合物的制备方法，包括以下步骤：首先是小蓟提取物的制备：取小蓟，用中药粉碎机粉碎，过40目筛，收集小蓟粉末，按料液比1g/16mL加入质量分数为95％的乙醇，在转速380r/min下搅拌提取2h，将提取液过滤、浓缩、真空干燥，再加水分散，加入石油醚萃取，再按顺序萃取小蓟乙醇提取物水溶液的乙酸乙酯、正丁醇部位，收集正丁醇部位，浓缩得小蓟提取物。该条件下，所获得的小蓟提取物中止血活性成分含量高，结构保存好，且所用溶剂可以循环利用，大大降低了生产成本，具有良好的经济效益；接着是壳聚糖溶液的制备：将6份壳聚糖溶于92份1%乙酸溶液，加热至60℃，搅拌使壳聚糖完全溶解得壳聚糖溶液；接着是铸膜液的制备：向壳聚糖溶液中加入0.65份甘油作为增塑剂，过滤，加入1.3份小蓟提取物、0.1‰份4-羟基偶氮苯以及0.14‰份乙烯亚胺，在频率25kHz下超声42min，所得溶液在真空度0.09MPa下抽气1.4h，得铸膜液；最后是成膜：将铸膜液倒入有机玻璃皿，在58℃下干燥3.7h，得小蓟提取物-壳聚糖复合膜。超声处理过程中所加入的1,2-二甲氧基苯、3-氯苯甲醛以及小蓟提取物破坏了壳聚糖分子间的氢键，改变了其晶态结构，显著提高了壳聚糖的亲水性能和粘附性能，进一步促进了壳聚糖对凝血因子的聚集作用，使血凝块的生成速度大大提高，同时增强了凝血因子的生物活性，加速血管凝固，从而提高了复合膜的止血速度，缩短了止血时间。

实施例6：抗炎止血复合物的制备方法，包括以下步骤：首先是小蓟提取物的制备：取小蓟，用中药粉碎机粉碎，过40目筛，收集小蓟粉末，按料液比1g/16mL加入质量分数为95％的乙醇，在转速380r/min下搅拌提取2.5h，将提取液过滤、浓缩、真空干燥，再加水分散，加入石油醚萃取，再按顺序萃取小蓟乙醇提取物水溶液的乙酸乙酯、正丁醇部位，收集正丁醇部位，浓缩得小蓟提取物。该条件下，所获得的小蓟提取物中止血活性成分含量高，结构保存好，且所用溶剂可以循环利用，大大降低了生产成本，具有良好的经济效益；接着是壳聚糖溶液的制备：将7份壳聚糖溶于93份1.4%乙酸溶液，加热至60℃，搅拌使壳聚糖完全溶解得壳聚糖溶液；接着是铸膜液的制备：向壳聚糖溶液中加入0.65份甘油作为增塑剂，过滤，加入1.3份小蓟提取物、0.12‰份频哪醇以及0.11‰份富马酸，在频率26kHz下超声43min，所得溶液在真空度0.09MPa下抽气1.4h，得铸膜液；最后是成膜：将铸膜液倒入有机玻璃皿，在58℃下干燥3.7h，得小蓟提取物-壳聚糖复合膜。所加入的频哪醇、富马酸与小蓟提取物具有协同作用，提高了复合膜中壳聚糖对红细胞阴离子的吸引力，促进了红细胞在复合膜与创面结合处的聚集，从而通过凝血作用实现快速止血。

以上实施方式仅用于说明本发明，而并非对本发明的限制，本领域的普通技术人员，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，还可以做出各种变化和变型。因此，所有等同的技术方案也属于本发明的范畴，本发明的专利保护范围应由权利要求限定。

Claims (7)

1.抗炎止血复合物的制备方法，包括壳聚糖溶液的制备、铸膜液的制备以及成膜，其特征在于：所述铸膜液的制备过程为：向壳聚糖溶液中加入0.4-1.1份甘油和0.8-1.7份小蓟提取物，超声混合，所得溶液经脱气处理得铸膜液。

2.根据权利要求1所述的抗炎止血复合物的制备方法，其特征在于：所述超声频率为25-30kHz，超声时间为42-48min。

3.根据权利要求1所述的抗炎止血复合物的制备方法，其特征在于：所述脱气是将溶液在真空度0.09-0.1MPa下抽气1-1.5h。

4.根据权利要求1所述的抗炎止血复合物的制备方法，其特征在于：所述小蓟提取物的制备过程为：将干燥小蓟粉碎，加入95％乙醇提取，将提取液过滤、浓缩，加入石油醚脱脂，再按顺序萃取小蓟乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇部位，收集正丁醇部位，浓缩得小蓟提取物。

5.根据权利要求1所述的抗炎止血复合物的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖溶液的制备过程为：将4-7份壳聚糖溶于80-100份1%-2%乙酸溶液，得壳聚糖溶液。

6.根据权利要求1所述的抗炎止血复合物的制备方法，其特征在于：所述成膜过程为：将铸膜液在53-58℃下干燥3.2-4h成膜，得小蓟提取物-壳聚糖复合膜。

7.权利要求1-6任一项所述方法制备的抗炎止血复合物。