CN109952100A - 普利多匹定用于治疗焦虑和抑郁的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种减少受试者的焦虑和/或抑郁的方法，所述方法包括将药物组合物周期性地施用至受试者，该药物组合物包含有效减少受试者的焦虑和/或抑郁的量的普利多匹定。

Description

普利多匹定用于治疗焦虑和抑郁的用途

本申请要求2017年7月14日提交的美国临时申请第62/532,728号和2016年9月15日提交的美国临时申请第62/395,259号的权益，这些申请中的每一个的内容特此通过引用以其整体并入。

贯穿本申请，各种出版物最典型地通过第一作者的姓氏和出版年份而被引用。这些出版物的完整引用信息在紧接权利要求书之前的标题为参考文献的部分中被列出。所有参考的出版物的公开内容通过引用以其整体特此并入本申请，以便更充分地描述本发明所涉及的技术领域状态。

背景

普利多匹定(pridopidine)

普利多匹定(4-[3-(甲基磺酰基)苯基]-1-丙基哌啶)(以前被称为ACR16)是正在开发的用于治疗亨廷顿氏病的药物。普利多匹定的化学名称为4-(3-(甲基磺酰基)苯基)-1-丙基哌啶，并且其化学登记号为CAS 346688-38-8(CSID:7971505,2016)。普利多匹定盐酸盐的化学登记号为882737-42-0(CSID:25948790 2016)。

已经示出普利多匹定通过抑制活动过度或增强活动减退来调节运动活动度。普利多匹定的神经保护特性被认为归因于其对σ-1受体(S1R，IC50～100nM结合)的高亲和力，而普利多匹定的运动活动度可以主要通过其对多巴胺D2受体(D2R)(IC50～10μM结合)的低亲和力、拮抗活性来介导(Ponten 2010)。普利多匹定示出在微摩尔范围内与另外的受体的低亲和力结合。

S1R是一种内质网(ER)伴侣蛋白，其牵涉脑中的细胞分化、神经可塑性、神经保护和认知功能。最近，大鼠纹状体的转录组分析示出，普利多匹定治疗激活已知促进神经元可塑性和存活并且在HD中被削弱的BDNF、多巴胺受体1(D1R)、糖皮质激素受体(GR)和丝氨酸-苏氨酸激酶蛋白激酶B(Akt)/磷酸肌醇3-激酶(PI3K)途径的表达。此外，普利多匹定的基因表达谱在Q175敲入(Q175 KI)HD小鼠模型中示出反向模式的HD疾病基因表达谱(Geva2016)。普利多匹定还以S1R依赖性方式增强成神经细胞瘤细胞系中神经保护性脑源性神经营养因子(BDNF)的分泌(Geva 2016)。

发明概述

在一个方面中，本文提供了减少有相应需要的受试者的焦虑和/或抑郁的方法，所述方法包括将药物组合物周期性地施用至受试者，该药物组合物包含有效减少受试者的焦虑和/或抑郁的量的普利多匹定。

在一些实施方案中，该方法减少了受试者的焦虑。在一些实施方案中，该方法减少了受试者的抑郁。

还提供了普利多匹定，用于在减少受试者的焦虑和/或抑郁中使用。还提供了普利多匹定，用于制备用于在减少受试者的焦虑和/或抑郁中使用的药物。

还提供了药物组合物，所述药物组合物包含有效量的用于减少受试者的焦虑和/或抑郁的普利多匹定。还提供了用于在减少受试者的焦虑和/或抑郁中使用的药物组合物，所述药物组合物包含普利多匹定。

本发明还提供了包装，其包括：

a)药物组合物，所述药物组合物包含一定量的普利多匹定；和

b)用于使用药物组合物减少受试者的焦虑和/或抑郁的说明书。

在另一个方面中，本发明提供了治疗包装，用于向受试者分配或用于在向受试者分配时使用，所述治疗包装包括：

a)一个或更多个单位剂量，每个这样的单位剂量包括其普利多匹定的量，其中所述单位剂量中的所述普利多匹定的量在施用至所述受试者后有效减少受试者的焦虑和/或抑郁，和

b)用于此的成品药物容器，所述容器包含一个或更多个所述单位剂量，所述容器还包含或包括指导使用所述包装减少所述受试者的焦虑和/或抑郁的标签。

附图简述

图1.普利多匹定施用。时间线示出了在亨廷顿氏病的啮齿动物模型YAC128小鼠中，普利多匹定的早期和晚期施用时间与分子、神经解剖和行为表型相关。分子和神经解剖表型沿着上方水平线列出。行为表型沿着下方水平线列出。小鼠的年龄以月计，在上方线和下方线之间呈现。

图2A和图2B.早期和晚期治疗研究设计。(2A)普利多匹定晚期治疗研究设计。WT小鼠仅被施用媒介物(ddH2O)，而YAC128 HD小鼠被施用媒介物(ddH2O)或递增剂量的普利多匹定(第1周10mg/kg，第2周20mg/kg，且第3-8周30mg/kg)。治疗在8月龄时开始(症状显现(manifest))并且持续2个月。(2B)普利多匹定早期治疗研究设计。WT小鼠仅被施用媒介物(ddH2O)，而YAC128 HD小鼠被施用媒介物(ddH2O)或普利多匹定(10mg/kg或30mg/kg)。治疗在1.5月龄时开始(症状预先显现(pre-manifest))并且继续持续10.5个月。对于(2A)和(2B)两者，一组行为测试如下所示进行：T＝运动学习，RR＝加速旋转杆，C＝攀爬测试，OF＝旷场(open filed)，EPM＝高架十字迷宫，SA＝自发活动测试，FST＝强迫游泳测试；对于(2B)，还进行了磁共振成像(MRI)。

图3A(跌落等待时间(latency to fall))和图3B(跌落次数)。认知功能：运动学习。与WT相比，YAC128 HD小鼠在2个月时表现出运动学习缺陷，如通过缩短的跌落等待时间(3A)和增加的跌落次数(3B)表示的。媒介物治疗的YAC128 HD小鼠在2月龄时在旋转杆训练任务中表现出运动学习缺陷。高剂量的普利多匹定通过增加YAC128 HD小鼠中的跌落等待时间来改善运动学习(3A)。普利多匹定治疗通过减少跌落次数导致WT小鼠和YAC128 HD小鼠两者的运动学习改善(3B)。示出的值为平均值。误差棒表示SEM。学生t检验(*p<0.05，**p<0.01)；(N＝20/基因型/组)。

图4A-图4D：普利多匹定早期治疗改善了YAC128 HD小鼠的运动功能。媒介物治疗的YAC128 HD小鼠在加速旋转杆中呈现出运动缺陷。高剂量的普利多匹定早在2月龄时改善了运动表现，保持直至10个月。低剂量的普利多匹定对旋转杆表现没有影响(4A)。媒介物治疗的YAC128 HD小鼠的运动缺陷在攀爬测试中也被观察到。高剂量的普利多匹定通过增加2月龄时的攀爬时间(4B)和减少2月龄和4月龄时的攀爬等待时间(latency to climb)(4C)来改善攀爬测试的表现。媒介物治疗的YAC128 HD小鼠在自发活动测试中行进了较短的距离。普利多匹定治疗(10mg/kg和30mg/kg)未改善被治疗的YAC128 HD小鼠的运动缺陷(4D)。在所有图(4A-4D)中，示出的值为平均值±SEM；n＝11-21 WT-媒介物，n＝14-19 YAC128-媒介物，n＝18-20 YAC128-普利多匹定(10mg/kg)，n＝16-20 YAC128-普利多匹定(30mg/kg)；*p<0.05，**p<0.01，**p<0.001，通过单向ANOVA与Fisher LSD事后分析。

图5A-图5C.普利多匹定治疗改善了情感功能。图5A(旷场)、图5B(高架十字迷宫)和图5C(强迫游泳测试)。与WT小鼠相比，YAC128 HD小鼠在6月龄时在旷场中表现出增加的焦虑样行为(A)，并且在8月龄时在高架十字迷宫表现出增加的焦虑样行为(B)。普利多匹定早期治疗改善了YAC128 HD小鼠中的焦虑样表型和抑郁样表型。媒介物治疗的YAC128 HD小鼠在旷场(5A)和高架十字迷宫(5B)中表现出焦虑样表型。高剂量的普利多匹定增加了花费在场地(arena)中心(5A)和开放臂(open arm)(5B)中的时间，但是在接受低剂量普利多匹定的小鼠中没有观察到效果。在强迫游泳测试中，与媒介物治疗的WT小鼠相比，媒介物治疗的YAC128 HD小鼠示出了增加的无运动时间花费的趋势。两个剂量的普利多匹定都减少了抑郁样行为(5C)。Veh＝媒介物；Pri＝普利多匹定；低＝10mg/kg；高＝30mg/kg；M＝雄性。

(5A、5B)示出的值为平均值±SEM；n＝16-17 WT-媒介物，n＝14-16 YAC128-媒介物，n＝19-20 YAC128-普利多匹定(10mg/kg)，n＝16-17 YAC128-普利多匹定(30mg/kg)；*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，通过单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；##p<0.01，通过配对学生t-检验。(5C)示出的值为平均值±SEM；n＝4(M)WT-媒介物，n＝8(M)YAC128-媒介物，n＝9(M)YAC128-普利多匹定(10mg/kg)，n＝8 YAC128-普利多匹定(30mg/kg)；*p<0.05，通过单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；##p<0.01，通过配对学生t-检验。

图6A(跌落等待时间)和图6B(跌落次数)。认知功能：普利多匹定治疗的晚期小鼠的运动学习。与WT相比，YAC128 HD小鼠在9.5月龄时表现出运动学习缺陷，如通过缩短的跌落等待时间(6A)和增加的跌落次数(6B)表示的。普利多匹定治疗对该年龄的运动学习表现没有影响(6A、6B)。示出的值为平均值。误差棒表示SEM。学生t检验(*p<0.05，**p<0.01)；(N＝8-12/基因型/组)。

图7普利多匹定治疗的晚期小鼠的运动功能，加速旋转杆。与WT小鼠相比，YAC128HD小鼠在10月龄时表现出降低的运动表现，如通过较短的跌落等待时间示出的。用普利多匹定治疗未改善该年龄的YAC128 HD小鼠的运动表现。示出的值为平均值。误差棒表示SEM。学生t检验(**p<0.01，****p<0.0001)；(N＝8-12/基因型/组)。

图8A(旷场)、图8B(高架十字迷宫)和图8C。普利多匹定晚期治疗的小鼠的情感功能，强迫游泳测试。在强迫游泳测试中，用普利多匹定治疗改善了YAC128 HD小鼠的抑郁样表型(8C)。示出的值为平均值。误差棒表示SEM。学生t检验(*p<0.05，n.s.＝不显著)；(N＝8-12/基因型/组)。浅灰色棒表示媒介物治疗的；深灰色棒表示高剂量(30mg/kg)。

图9A.普利多匹定治疗逆转了YAC128 HD小鼠的纹状体中的转录缺陷。对在媒介物治疗的YAC128 HD小鼠中与媒介物治疗的WT小鼠相比被下调的纹状体基因和在普利多匹定治疗的YAC128 HD小鼠的纹状体中被上调的纹状体基因的重叠分析。图9B-图9E：YAC128 HD小鼠的纹状体中DEG的功能注释和细胞类型特异性分析。(9B)10mg/kg和30mg/kg普利多匹定组之间的DEG的重叠(相对于YAC128-媒介物)。(9C、9D)10mg/kg和30mg/kg两者共有的(9C)或30mg/kg(9D)特有的富集在区室细胞组分类别和基因本体(GO)细胞组分类别中的DEG的功能注释。(9E)30mg/kg普利多匹定组特有的富集于胆碱能神经元中的基因转录物的热图。AGPAT9、NPTX2、SV2C和ST8SIA2被上调。

发明详述

本发明提供了减少有相应需要的受试者的焦虑和/或抑郁的方法，所述方法包括将药物组合物周期性地施用至受试者，该药物组合物包含有效减少受试者的焦虑和/或抑郁的量的普利多匹定。

在一个实施方案中，该方法减少了受试者的焦虑。在一个实施方案中，焦虑通过状态-特质焦虑量表(State-Trait Anxiety Inventory，STAI)、恐惧调查时间表、Beck焦虑量表(BAI)、简单消极评价恐惧量表-BFNE、临床医师管理的PTSD量表(CAPS)、症状-焦虑的日常评估、广泛性焦虑障碍7(GAD-7)、汉密尔顿(Hamilton)焦虑量表(HAM-A)、医院焦虑和抑郁量表(HADS-A)、Leibowitz社交焦虑量表(LSAS)、总焦虑严重度和损伤量表(OASIS)、惊恐和广场恐怖症量表(PAS)、惊恐障碍严重度量表(PDSS)、PTSD症状量表-自我报告版本、社交恐惧症量表(SPIN)、创伤筛查问卷、Yale–Brown强迫症量表(Y-BOCS)或Zung自我评定焦虑量表来测量。

在一个实施方案中，焦虑减少了至少一个增量。

在另一个实施方案中，该方法减少了受试者的抑郁。在一个实施方案中，抑郁通过用于抑郁的汉密尔顿评定量表(HAM-D)、Beck抑郁量表(BDI)、Beck绝望量表、流行病学研究中心-抑郁量表(CES-D)、患者健康问卷、流行病学研究中心-儿童抑郁量表(CES-DC)、临床有用的抑郁结果量表、用于抑郁的诊断量表、爱丁堡(Edinburgh)产后抑郁量表(EPDS)、抑郁症状学量表、老年抑郁量表(GDS)、医院焦虑和抑郁量表、Kutcher青少年抑郁量表(KADS)、重度抑郁量表(MDI)、抑郁评定量表(MADRS)、情绪和感觉问卷(MFQ)、Zung自我评定抑郁量表或用于痴呆中的抑郁的康奈尔量表(CSDD)来测量。

在一个实施方案中，抑郁减少了至少一个增量。

在另一个实施方案中，受试者罹患焦虑障碍。在一个实施方案中，焦虑障碍是广泛性焦虑障碍(GAD)、惊恐障碍、恐惧障碍、社交恐惧症、广场恐怖症或创伤-相关障碍和应激源-相关障碍。在另外的实施方案中，创伤-相关障碍和应激源-相关障碍是急性应激障碍(ASD)或创伤后应激障碍(PTSD)。

在另一个实施方案中，受试者罹患抑郁障碍。在一个实施方案中，抑郁障碍是重度抑郁障碍、持续性抑郁障碍、经前焦虑障碍、其他抑郁障碍、由另一种医学状况引起的抑郁障碍、物质/药物诱导的抑郁障碍、围产期抑郁、围产期发作抑郁、季节性情感障碍或精神病性抑郁。

在一个实施方案中，受试者罹患神经退行性疾病。在另一个实施方案中，受试者罹患亨廷顿氏病。在另外的实施方案中，受试者罹患阶段1或阶段2亨廷顿氏病。在一个实施方案中，受试者罹患阶段1亨廷顿氏病。在另一个实施方案中，受试者罹患阶段2亨廷顿氏病。

在另一个实施方案中，受试者罹患早期亨廷顿氏病。

在一个实施方案中，受试者在亨廷顿蛋白基因中具有大于或等于36个CAG重复。在另一个实施方案中，受试者在亨廷顿蛋白基因中具有大于44个CAG重复。

在一些实施方案中，受试者是症状发生前的。在其他实施方案中，受试者是有症状的。

在一个实施方案中，方法包括减少罹患早期亨廷顿氏病的受试者的焦虑。

在另一个实施方案中，方法包括减少罹患以下中的任一种的受试者的抑郁：阶段1亨廷顿氏病、阶段2亨廷顿氏病、阶段3亨廷顿氏病、阶段4亨廷顿氏病和阶段5亨廷顿氏病。

在一个实施方案中，受试者是人类受试者。

在一个实施方案中，周期性施用是口服的。

在一个实施方案中，22.5mg-315mg之间的普利多匹定每天被施用至受试者。在另一个实施方案中，22.5mg、45mg、67.5mg、90mg、100mg、112.5mg、125mg、135mg、150mg、180mg、200mg、225mg、250mg或315mg普利多匹定每天被施用至受试者。

在一个实施方案中，普利多匹定的量以单位剂量为22.5mg、45mg、67.5mg、90mg、100mg、112.5mg、125mg、135mg、150mg、180mg、200mg、225mg、250mg或315mg普利多匹定被施用。

在一个实施方案中，单位剂量每天一次被施用。

在另一个实施方案中，药物组合物被施用多于26周、至少52周、至少54周、至少78周、至少104周或更长。

在一个实施方案中，单位剂量每天多于一次被施用。在另一个实施方案中，单位剂量每天两次被施用。

在一个实施方案中，普利多匹定呈普利多匹定盐酸盐的形式。

在一个实施方案中，焦虑和/或抑郁持续至少12个月被减少。

本发明还提供了普利多匹定，用于在减少受试者的焦虑和/或抑郁中使用。

在一个实施方案中，受试者已经被诊断为仅患有焦虑。在另一个实施方案中，受试者经历焦虑的至少一种症状，其中至少一种症状包括不安、心悸、换气过度、大量出汗、肌肉抽搐、虚弱、嗜睡、失眠、恶心、重复性行为或其任何组合。

在一个实施方案中，受试者已经被诊断为仅患有抑郁。在另一个实施方案中，受试者经历至少一种抑郁症状，并且其中至少一种抑郁症状包括抑郁情绪、快感缺乏、低能量水平、愧疚感、精神运动性阻滞、激动、自杀意念、注意力差和犹豫不定、或其任何组合。

在一个实施方案中，在周期性施用开始时，不同于预期剂量的量的滴定剂量被施用一段时间。在一些实施方案中，滴定剂量是预期剂量的量的一半。在另一个实施方案中，滴定剂量以每天一次施用被施用，而预期剂量以每天两次施用被施用。在一个实施方案中，在施用预期剂量之前，滴定剂量被施用持续7天-21天或7天-14天。在另一个实施方案中，在施用预期剂量之前，滴定剂量被施用持续7天、14天或21天。在施用预期剂量之前，滴定剂量优选地被施用持续14天。

本发明还提供了普利多匹定，用于制备用于在减少受试者的焦虑和/或抑郁中使用的药物。

本发明还提供了药物组合物，所述药物组合物包含有效量的用于减少受试者的焦虑和/或抑郁的普利多匹定。

本发明还提供了药物组合物，所述药物组合物包含用于减少受试者的焦虑和/或抑郁的普利多匹定。

本发明还提供了包装，包括：

a)药物组合物，所述药物组合物包含一定量的普利多匹定；和

b)用于使用药物组合物减少受试者的焦虑和/或抑郁的说明书。

本发明还提供了治疗包装，用于向受试者分配或用于在向受试者分配中使用，所述治疗包装包括：

a)一个或更多个单位剂量，每个这样的单位剂量包括其普利多匹定的量，其中所述单位剂量中的所述普利多匹定的量在施用至所述受试者后有效减少受试者的焦虑和/或抑郁，和

b)用于此的成品药物容器，所述容器包含一个或更多个所述单位剂量，所述容器还包含或包括指导使用所述包装减少所述受试者的焦虑和/或抑郁的标签。

本发明还提供了调节罹患亨廷顿氏病的受试者中的基因表达的方法，所述方法包括施用有效调节基因表达的量的普利多匹定，如本申请中描述的。

本发明还提供了预测罹患亨廷顿氏病的受试者对普利多匹定疗法的临床响应性的方法，所述方法包括评价受试者中的生物标志物的表达，以便从而预测对普利多匹定的临床响应性，其中生物标志物是如本申请中描述的基因。

在一个实施方案中，方法还包括，预测对普利多匹定的阳性临床响应性，如果生物标志物在受试者中被上调的话。

在另一个实施方案中，方法还包括预测对普利多匹定的阳性临床响应性，如果生物标志物在受试者中被抑制的话。

在一个实施方案中，如果生物标志物的表达高于参考值，则将受试者鉴定为普利多匹定响应者。在另一个实施方案中，如果生物标志物的表达水平低于参考值，则将受试者鉴定为普利多匹定响应者。

在另一个实施方案中，如果受试者被鉴定为普利多匹定响应者，则随后将包含普利多匹定的药物组合物施用至受试者。

上文描述的实施方案的组合也在本发明的范围内。

对于前述实施方案，本文公开的每个实施方案被设想为可适用于所公开的其他实施方案中的每一个。例如，方法实施方案中述及的要素可以用于本文描述的药物组合物、包装和用途实施方案，并且反之亦然。

术语

如本文使用的，并且除非另有说明，否则以下术语中的每一个都应具有下文阐述的定义。

如本文使用的，“施用至受试者”意指向受试者提供、分配或施加药物(medicines)、药物(drugs)或补救措施，以减轻、治愈或减少与疾病、障碍或状况例如病理学状况相关的症状。口服施用是将本发明化合物施用至受试者的一种方式。

如本文使用的，以毫克测量的普利多匹定的“量”或“剂量”指的是制品中存在的普利多匹定(4-[3-(甲基磺酰基)苯基]-1-丙基-哌啶)的毫克数，与制品的形式无关。例如，包含“90mg普利多匹定”的单位剂量意指制品中普利多匹定碱的量为90mg，与制品的形式无关。因此，当呈盐的形式例如普利多匹定盐酸盐时，由于盐的存在，提供90mg剂量的普利多匹定所需要的盐形式的重量将大于90mg。

如本文使用的，“单位剂量(unit dose)”、“单位剂量(unit doses)”和“单位剂型”意指单一药物施用实体(entity)/实体(entities)。

如本文使用的，在数值或范围的上下文中的“约”意指所述及或要求保护的数值或范围的±10％。

如本文使用的，作为达到终点有效的量的“有效的”意指，组分当以本公开内容的方式被使用时与合理的益处/风险比相称的足以产生指示的治疗响应而无过度不良副作用(诸如毒性、刺激或过敏响应)的量。例如，有效治疗认知缺陷的量。具体的有效量随诸如所治疗的特定状况、患者的身体状况、所治疗的哺乳动物的类型、治疗的持续时间、联合疗法(如果有的话)的性质、和所使用的具体制剂以及化合物或其衍生物的结构等因素而变化。

如本文使用的，“治疗(treat)”或“治疗(treating)”涵盖例如诱导障碍和/或疾病例如抑郁的抑制、消退或停滞，或缓解、减轻、遏制、抑制、降低疾病或障碍的严重程度，消除或基本上消除或改善疾病或障碍的症状。

如本文使用的，对受试者中的疾病进展或疾病并发症的“抑制”意指阻止、延迟或减少受试者中的疾病进展和/或疾病并发症。这包括，例如，延迟受试者中的一种或更多种症状的进展，包括但不限于延迟以下的进展：认知障碍、智力障碍、学习障碍(例如，学习新技能有困难)、发育延迟(例如，不与相同年龄的其他儿童同时地坐下、行走或谈话)、社交和行为问题(例如，进行目光接触、焦虑、注意力不集中、拍手、不经思考地行动和讲话且非常活跃)、焦虑和过度活跃的行为、对感官刺激超敏感、改变的胃肠功能、自闭症症状(例如，害羞、差的目光接触、和轻度情况的社交焦虑到影响严重的拍手、咬手和保护性言语)、注意力缺陷和活动过度、行为障碍(例如易怒、攻击性和自我伤害行为)、癫痫、强迫症行为和改变的胃肠功能。

在一些实施方案中，焦虑症状包括但不限于不安、心悸、换气过度、大量出汗、肌肉抽搐、虚弱、嗜睡、失眠、恶心、重复性行为或其任何组合。

在一些实施方案中，抑郁症状包括但不限于抑郁情绪、快感缺乏、低能量水平、愧疚感、精神运动性阻滞、激动、自杀意念、注意力差、犹豫不定、或其任何组合。

“药学上可接受的载体”指的是适合用于人类和/或动物、而没有过度不良副作用(诸如毒性、刺激和过敏响应)、与合理的益处/风险比相称的载体或赋形剂。它可以是药学上可接受的溶剂、悬浮剂或媒介物，用于将本发明化合物递送至受试者。

如本文使用的，“普利多匹定”意指普利多匹定碱或其药学上可接受的盐，以及衍生物，例如富含氘的形式的普利多匹定和盐。富含氘的普利多匹定和盐及其制备方法的实例可以在美国申请公布第2013-0197031号、第2016-0166559号和第2016-0095847号中找到，以上申请中的每一个的全部内容通过引用特此并入。在某些实施方案中，普利多匹定是药学上可接受的盐，例如HCl盐或酒石酸盐。优选地，在如本文描述的本发明的任何实施方案中，普利多匹定呈其盐酸盐的形式。

“富含氘”意指，在化合物的任何相关位置处的氘的丰度大于一定量的化合物中该位置处天然存在的氘的丰度。氘的天然存在的分布为约0.0156％。因此，在“富含氘”的化合物中，在其任何相关位置处的氘的丰度大于0.0156％，并且可以在从大于0.0156％至100％的范围内。富含氘的化合物可以通过用氘交换氢或用富含氘的起始材料合成该化合物来获得。

可以制备用于口服剂型的剂量单位，口服剂型诸如片剂、胶囊、丸剂、粉剂和颗粒剂。可以制备用于静脉内剂型的剂量单位。

药学上可接受的盐

根据本发明的用于使用的活性化合物可以以任何适合于预期施用的形式提供。合适的形式包括药学上(即生理学上)可接受的盐，以及本发明的化合物的前体或前药形式。

“其盐”是通过制备化合物的酸盐或碱盐而被改变的本发明化合物的盐。在该方面的术语“药学上可接受的盐”指的是适合于药学用途的本发明的化合物的相对无毒的无机的和有机的酸加成盐或碱加成盐。药学上可接受的盐可以通过本领域熟知和描述的程序形成。制备这样的盐的一种方法是通过用无机碱处理本发明的化合物。

药学上可接受的盐的实例包括但不限于无毒无机酸加成盐和无毒有机酸加成盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、硝酸盐、高氯酸盐、磷酸盐、硫酸盐、甲酸盐、乙酸盐、阿康酸盐(aconate)、抗坏血酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐、柠檬酸盐、双羟萘酸盐、庚酸盐、富马酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、萘-2-磺酸盐、邻苯二甲酸盐、水杨酸盐、山梨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐等。这样的盐可以通过本领域熟知和描述的程序形成。

药物组合物

虽然根据本发明的用于使用的化合物可以以原始化合物的形式被施用，但优选将活性成分，任选地以生理上可接受的盐的形式，与一种或更多种辅助剂、赋形剂、载体、缓冲剂、稀释剂和/或其他常规药物助剂一起引入药物组合物中。

在一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，所述药物组合物包含活性化合物或其药学上可接受的盐或衍生物，以及其一种或更多种药学上可接受的载体，以及任选地本领域已知和使用的其他治疗性成分和/或预防性成分。载体必须在与制剂的其他成分相容并且对其接受者不是有害的意义上是“可接受的”。

本发明的药物组合物可以通过任何适合期望的疗法的方便的途径施用。优选的施用途径包括口服施用，特别是片剂、胶囊、糖衣丸、粉末或液体形式，以及肠胃外施用，特别是经皮、皮下、肌肉内或静脉内注射。本发明的药物组合物可以由技术人员通过使用适合于期望的制剂的标准方法和常规技术来制造。当需要时，可以使用被调整以提供活性成分的持续释放的组合物。

关于制剂和施用的技术的另外的细节可以在最新版本的Remington’sPharmaceutical Sciences(Maack Publishing Co.,Easton,PA)中找到。

应理解，在提供参数范围的情况下，本发明也提供了该范围内的所有整数及其小数点后一位的数(tenth)。例如，“22mg-300.0mg”包括22.0mg、22.1mg、22.2mg、22.3mg、22.4mg等等直到300.0mg。

焦虑评定量表

本文中列出的焦虑评定量表是本领域技术人员已知的。例如，Beck焦虑量表(BAI)是一种焦虑的量度，其具有21项，这些项目相加得到从0-63的总评分，其中0-9的评分通常被认为意指正常或者无焦虑；10-18的评分通常被认为意指轻度至中度焦虑；19-29的评分通常被认为意指中度至重度焦虑；并且30-63的评分通常被认为意指重度焦虑(Julian2011)。另一个焦虑评定量表是医院焦虑和抑郁量表-焦虑(HADS-A)，其具有7项(Julian2011)。该量表评价焦虑的常规方面(common dimensions)，并且可以用于检测和定量焦虑症状的量级(Julian 2011)。HADS-A的总评分可以在从0至21的范围内，并且推荐以下指导方针以用于解释评分：正常或无焦虑为0-7，轻度焦虑为8-10，中度焦虑为11-14，并且重度焦虑为12-21(Julian 2011)。其他焦虑评定量表在Spitzer 2006、Hamilton 1959、Leary1983、Heimberg 1999、Norman 2006、Zigmond 1983和Connor 2000中被描述。

如本文使用的，“焦虑减少至少一个增量”意指如通过至少一个具体的焦虑评定量表测量的，患者的焦虑被减轻。例如，STAI是具有两个子测试，状态焦虑量表(S-焦虑)和特质焦虑量表(T-焦虑)的焦虑评定量表(Julian 2011)。每个子测试的评分的范围是20-80，较高的评分指示较大的焦虑(Julian 2011)。因此，受试者在完成STAI后获得40和160之间的评分。如果受试者的STAI评分减少了1个点或更多个点，则受试者的焦虑减少至少一个增量。

患者的焦虑也可以通过以下焦虑评定量表中的一种来测量：状态-特质焦虑量表(STAI)、恐惧调查时间表、Beck焦虑量表(BAI)、简单消极评价恐惧量表-BFNE、临床医师管理的PTSD量表(CAPS)、症状-焦虑的日常评估、广泛性焦虑障碍7(GAD-7)、汉密尔顿焦虑量表(HAM-A)、医院焦虑和抑郁量表(HADS-A)、Leibowitz社交焦虑量表(LSAS)、总焦虑严重度和损伤量表(OASIS)、惊恐和广场恐怖症量表(PAS)、惊恐障碍严重度量表(PDSS)、PTSD症状量表-自我报告版本、社交恐惧症量表(SPIN)、创伤筛查问卷、Yale–Brown强迫症量表(Y-BOCS)和Zung自我评定焦虑量表。

抑郁评定量表

本文中列出的抑郁评定量表是本领域技术人员已知的。例如，汉密尔顿抑郁评定量表(HAM-D)可以用于确定患者的抑郁水平。HAM-D列出了21项，但是评分是基于前17项，其中0-6被认为是正常的，7-17被认为是轻度抑郁，18-24被认为是中度抑郁，并且25及以上被认为是重度抑郁(Cusin 2009)。其他抑郁评定量表在Bech 2001、Bech 2006、Strik 2001和Cusin 2009中被描述。

如此处使用的，“抑郁减少至少一个增量”意指如通过至少一个具体的抑郁评定量表测量的，患者的抑郁被减轻。例如，在上文讨论的HAM-D量表中，如果受试者的HAM-D评分减少了1个点或更多个点，则受试者的抑郁减少至少一个增量。

患者的抑郁也可以通过以下抑郁评定量表中的一种来测量：用于抑郁的汉密尔顿评定量表(HAM-D)、Beck抑郁量表(BDI)、Beck绝望量表、流行病学研究中心-抑郁量表(CES-D)、患者健康问卷、流行病学研究中心-儿童抑郁量表(CES-DC)、临床有用的抑郁结果量表、用于抑郁的诊断量表、爱丁堡(Edinburgh)产后抑郁量表(EPDS)、抑郁症状学量表、老年抑郁量表(GDS)、医院焦虑和抑郁量表、Kutcher青少年抑郁量表(KADS)、重度抑郁量表(MDI)、抑郁评定量表(MADRS)、情绪和感觉问卷(MFQ)、Zung自我评定抑郁量表或用于痴呆中的抑郁的康奈尔量表(CSDD)。

亨廷顿氏病的阶段

许多临床医师和诊断医生采用基于总功能能力(TFC)评分的Shoulson和Fahn评定量表来跟踪HD的进展。该评定量表将总TFC评分分为疾病的五个阶段，较低级的阶段指示更完整的功能行使。下表1提供了疾病的每个阶段的TFC评分、从诊断起的平均年数以及典型护理水平的大致指导方针(Johnson 2014)。

表1与TFC评分和护理水平相对应的HD阶段

通过参考下面的实验细节将更好地理解本发明，但是本领域技术人员将容易理解，详细的具体实验仅仅是对本发明的例示，如在其后的权利要求中本发明被更全面地描述。

实验细节

实施例1：在亨廷顿氏病的转基因YAC128小鼠模型中评价普利多匹定。

普利多匹定目前处于用于亨廷顿氏病(HD)的临床开发中，并且正在进行增加对其治疗益处和作用模式的理解的研究。

本研究使用HD的转基因YAC128小鼠模型(Garcia-Miralles 2016)研究了普利多匹定的功效和作用机制。在疾病的早期(1.5月龄)或晚期(8月龄)开始将普利多匹定施用至动物。在早期治疗群组中，将动物分成接受0mg/kg、10mg/kg或30mg/kg的普利多匹定的三个组，持续10.5个月的时间段。在晚期群组中，将动物分成接受0mg/kg或递增剂量的普利多匹定(第1周10mg/kg，第2周20mg/kg和第3周-第8周30mg/kg)的两个组。普利多匹定治疗的动物使用一系列行为测试来评价。分析揭示，用普利多匹定的长期治疗改善了YAC128 HD小鼠的运动协调、焦虑样表型和抑郁样表型。

材料和方法：

动物。使用表达具有128个CAG重复的全长人类HTT(亨廷顿蛋白)转基因的在FVB/N品系上保持的雄性和雌性YAC128 HD小鼠(品系53)。将小鼠在生物资源中心(科学、技术和研究机构(Agency for Science,Technology and Research)，ASTAR)饲养，并且与具有混合基因型的同窝小鼠分组圈养。将动物保持在12-h光周期(09:00照亮)下的清洁设施中，并且使其自由获得食物和水。实验在生物医学科学研究所(ASTAR)的动物护理机构和使用委员会的批准下并且根据他们批准的指导方针进行。

普利多匹定的施用。将普利多匹定溶解在无菌水中。对于早期治疗群组，普利多匹定和媒介物每天通过口服灌胃施用5天/周，持续10.5个月，并且对于晚期治疗群组，持续8周。小鼠以4mL/kg的体积接受媒介物(无菌水)、10mg/kg的普利多匹定或30mg/kg的普利多匹定。对动物每两周称重，以确保保持正确的剂量。

研究设计.

晚期治疗群组：将普利多匹定施用至处于疾病晚期阶段的动物(8月龄)。在该年龄，小鼠呈现纹状体萎缩和重度的行为缺陷。将动物分成接受0mg/kg或递增剂量的普利多匹定(第1周10mg/kg，第2周20mg/kg和第3周-第8周30mg/kg)的两个组。一系列行为测试在9.5月龄和10月龄之间进行。对小鼠进行运动学习(旋转杆训练)、运动功能(旋转杆测试)和精神功能(旷场、高架十字迷宫和强迫游泳测试)测试，并且在完成行为测试后在10月龄时处死。

早期治疗群组：将普利多匹定施用至处于疾病早期阶段的动物(两个群组)(1.5月龄)。将小鼠分成四组。两组YAC128 HD小鼠接受10mg/kg或30mg/kg剂量的普利多匹定，而其余组，WT小鼠和YAC128 HD小鼠接受等体积的媒介物。在2月龄时开始，每两个月对一个群组进行行为测试。对小鼠进行运动学习(旋转杆训练)、运动功能(旋转杆测试和攀爬测试)和精神功能(旷场、高架十字迷宫和强迫游泳测试)测试。在药物施用前，测试在一天期间的固定时间进行。随后，这些小鼠通过磁共振成像(MRI)扫描，并且在12.5月龄时被处死。另一个群组在7月龄和10月龄时通过MRI扫描，并且在11月龄时被用于药代动力学(PK)测量和RNA-Seq分析。

在疾病的早期(1.5月龄)或晚期(8月龄)阶段开始通过口服灌胃对动物施用普利多匹定，一周五天。表2示出了早期疾病群组(1.5月龄的YAC128 HD小鼠)的治疗方案。表3示出了晚期疾病群组(8月龄的YAC128 HD小鼠)的治疗方案。

表2.普利多匹定早期治疗

表3.普利多匹定晚期治疗

认知功能测试

运动学习的旋转杆测试。旋转杆训练被用作评估啮齿动物的认知功能的一种量度。为了训练，小鼠每天被给予三次间隔1h的在18rpm固定速度的试验(每次120秒)，持续连续的三天或四天。

运动功能测试

加速旋转杆测试。设计旋转杆测试以评价啮齿动物的运动协调和平衡。测试由三个间隔2小时的试验组成，其中旋转杆在5min内从5rpm加速到40rpm。旋转杆评分是三次试验的平均值。最高评分是300秒。

攀爬测试。攀爬测试用于评估啮齿动物的运动功能。将小鼠置于顶部封闭(closed-top)的金属丝网圆筒的底端，并监测它们的行为5min。5min试验的攀爬时间的总和是每只小鼠攀爬花费的总时间。

情感功能测试

焦虑样行为测试。旷场(OF)和高架十字迷宫(EPM)测试用于评估啮齿动物的焦虑样行为。花费在OF的场地中心的时间和花费在EPM的迷宫的开放臂中的时间被认为是对焦虑样行为的量度。

抑郁样行为测试。Porsolt强迫游泳测试用于评估啮齿动物的抑郁样行为。无运动的时间花费被认为是对抑郁样行为的量度。每只小鼠的无运动评分由手动评分确定。

结果

详细的结果在图中示出并且在对这些图的说明中被描述。早期治疗的结果在图3-图5中示出。晚期治疗的结果在图7-图9中示出。这些结果证明，用普利多匹定的早期治疗改善了YAC128 HD小鼠的运动功能。然而，用普利多匹定的晚期治疗对改善YAC128 HD小鼠的运动功能不是那么有效。此外，在早期治疗群组中，YAC128 HD小鼠的焦虑样行为被改善，而在早期治疗群组和晚期治疗群组中，抑郁样行为都被改善。总而言之，这些结果示出，普利多匹定改善了YAC128 HD动物模型的运动症状和情感症状。

这些结果还示出，在HD的YAC128小鼠模型中，用普利多匹定的早期治疗导致运动学习和协调以及精神样特征的改善。治疗的效果示出了剂量依赖性，与10mg/kg剂量相比，30mg/kg导致更大的总体益处。在整个疾病过程中观察到改善，改善的运动表现从2月龄持续至10月龄，在6月龄和8月龄时焦虑样表型减少，且在12月龄时抑郁样行为改善。

考虑到普利多匹定的短的半衰期以及该事实，即在测试日，普利多匹定在完成行为测定后被施用，行为结果的改善不太可能代表急性效果。此外，这些效果表现为是HD特异性的，因为在被治疗的WT小鼠中没有观察到任何效果(数据未示出)。与之相比，当普利多匹定在疾病明显显现时的稍后时间点被施用至小鼠时，功能益处是有限的，尽管注意到抑郁样行为的改善。

这些发现示出，在YAC128 HD小鼠中，早期施用普利多匹定表现出抗焦虑(30mg/kg)和抗抑郁(10mg/kg和30mg/kg)的特性，并且因此可以用于治疗HD相关的精神症状。该数据还示出，在症状显现的YAC128 HD小鼠中，晚期施用普利多匹定对治疗HD晚期的抑郁样表型是有效的。

实施例2：普利多匹定早期治疗对YAC128 HD小鼠的HD相关的神经病理的影响。

鉴于行为结果的改善主要在接受普利多匹定早期治疗的动物中观察到，因此在该特定群组中评价了普利多匹定对HD相关的神经病理的功效。纹状体萎缩和白质异常是在患有HD的患者中观察到的神经病理学特征，其也已经在YAC128 HD小鼠中被描述(Teo 2016、Garcia-Miralles 2016、Carroll 2011)。为了评估普利多匹定是否能够对HD相关的神经病理学也具有治疗作用，通过结构磁共振成像测量纹状体和胼胝体(CC)体积。在12月龄时，媒介物治疗的YAC128 HD小鼠表现出与媒介物治疗的WT小鼠相比降低的纹状体和CC体积(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；对于纹状体和CC，p<0.001)。然而，在被治疗的YAC128 HD小鼠中，在这两项量度中没有观察到普利多匹定治疗的效果(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；对于两种剂量p>0.05)。

在结构MRI分析后，灌注小鼠，并且通过组织学和体视学方法检查脑。与早期报告(Slow 2003)一致，媒介物治疗的YAC128 HD小鼠呈现出与媒介物治疗的WT小鼠相比降低的前脑重量(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；p<0.001)。普利多匹定治疗对被治疗的YAC128 HD小鼠的前脑重量没有影响(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；对于两种剂量的普利多匹定，与媒介物治疗的YAC129 HD小鼠相比，p>0.05)。随后，对脑进行冠状切片，并且用神经元核标志物NeuN染色以通过体视学评估确定纹状体体积和纹状体神经元丢失。与我们通过结构MRI获得的结果一致，媒介物治疗的YAC128 HD小鼠表现出与媒介物治疗的WT小鼠相比降低的纹状体体积(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；p<0.001)；然而，普利多匹定治疗不能挽救该表型(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；对于两种剂量的普利多匹定，与媒介物治疗的YAC128 HD小鼠相比，p>0.05)。因为纹状体萎缩可能伴随着纹状体神经元丢失(Slow 2003)，因此纹状体萎缩通过纹状体神经元的总数来评估。纹状体中NeuN-阳性神经元的体视学计数揭示，在媒介物治疗的YAC128 HD小鼠和WT小鼠之间没有显著的差异(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；p>0.05)，并且普利多匹定治疗的YAC128 HD小鼠和媒介物治疗的YAC128 HD小鼠之间没有显著的差异(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；对于两种剂量的普利多匹定，p>0.05)。通过定量DARPP32免疫反应性，进一步评估12月龄时中型棘神经元中DARPP32的表达。尽管减少的DARPP32表达已经在YAC128 HD小鼠中描述(Southwell2015)，但在媒介物治疗的YAC128 HD小鼠中仅检测到光密度(OD)与媒介物治疗的WT小鼠相比略微降低，这没有达到统计学显著性(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；p＝0.113)。用高剂量的普利多匹定治疗导致被治疗的YAC128 HD小鼠的OD略微增加，尽管该差异没有达到统计学显著性(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；与媒介物治疗的YAC128 HD小鼠相比，p＝0.079)。未观察到低剂量的普利多匹定的效果(单向ANOVA与Fisher LSD事后分析；与媒介物治疗的YAC128 HD小鼠相比，p＝0.147)。这些结果指示，在YAC128 HD小鼠中在疾病表型显现之前开始以本研究中使用的剂量(10mg/kg和30mg/kg)早期施用普利多匹定不足以拯救YAC128 HD小鼠中的HD相关的神经病理学。

实施例3：普利多匹定早期治疗逆转YAC128 HD小鼠中的转录缺陷。

为了更好地理解普利多匹定早期治疗的作用机制，进行RNA测序(RNA-seq)分析以研究11月龄时小鼠纹状体的转录谱。

由于转录失调是HD的充分表征的特征(Kuhn 2007)，因此首先比较了媒介物治疗的WT小鼠和YAC128 HD小鼠之间的RNA-seq数据，并且发现了1346个差异表达的基因(DEG)其在纹状体中的表达在两种基因型之间被显著改变(热图；p<0.05)。在这些DEG中，在疾病状况下788个基因下调，而558个基因上调。

鉴于普利多匹定治疗改善了HD症状，但未能拯救纹状体或胼胝体萎缩，考虑了普利多匹定早期治疗是否能够影响纹状体神经元的健康。研究了普利多匹定治疗对已知随着HD的疾病进展而特异性下调的五种纹状体富集的基因的影响。这些基因是蛋白磷酸酶1调节抑制剂亚基1B(Ppp1r1b或Darpp32)、大麻素衍生物受体1(Cnr1)、多巴胺受体D1和D2(分别为Drd1和Drd2)以及脑啡肽原(Penk)(Pouladi 2012)。如预期的，在媒介物治疗的YAC128HD小鼠中所有5种基因示出了读段数目与媒介物治疗的WT小鼠相比降低(limma；对于所有五种基因p<0.001)。有趣的是，在纹状体富集的基因的转录谱上观察到普利多匹定治疗的剂量特异性和基因特异性效应。两种剂量的普利多匹定逆转了被治疗的YAC128 HD小鼠中的Drd1和Drd2缺陷(limma；D1R中对于低剂量的普利多匹定p<0.01并且对于高剂量的普利多匹定p<0.001；D2R中对于两种剂量的普利多匹定p<0.05)。在分别用较低剂量(10mg/kg)和较高剂量(30mg/kg)的普利多匹定治疗之后，被治疗的YAC128 HD小鼠的纹状体中Ppp1r1b(Darpp32)和Penk读段也增加(limma；与媒介物治疗的YAC128 HD小鼠相比，对于Ppp1r1b，p<0.05并且对于Penk，p<0.05)。然而，普利多匹定在本研究中使用的剂量不能逆转被治疗的YAC128 HD小鼠中的Cnr1缺陷(limma；对于两种剂量的普利多匹定，与媒介物治疗的YAC128 HD小鼠相比，p>0.05)。

为了获得对普利多匹定的作用机制的另外的见解，对在YAC128 HD小鼠中被上调或下调且被普利多匹定治疗可逆调节的基因进行无偏倚的全基因组转录分析。重叠分析揭示了74个显著的DEG，其读段的数目在媒介物治疗的YAC128 HD小鼠中下调，并且在普利多匹定治疗(10mg/kg和/或30mg/kg)后上调。其中，31个基因是所有三个组共有的。当对在媒介物治疗的YAC128 HD小鼠中上调且在普利多匹定治疗后下调的基因进行研究时，重叠分析鉴定了被普利多匹定下调的10个基因，这10个基因在两种剂量的普利多匹定之间不共享。

仔细检查在转录上被普利多匹定治疗逆转的74个基因的列表鉴定了许多先前牵涉HD的基因，包括Gpx6、Kdm3a、Rheb和Dusp1。这些基因在媒介物治疗的YAC128 HD小鼠中被下调(limma；对于Gpx6、Kdm3a和Rheb p<0.001，对于Dusp1p<0.01)，并且该减少被两种剂量的普利多匹定逆转，如通过普利多匹定治疗的YAC128 HD小鼠中的更大数目的读段预示的(limma；对于低剂量，对于Gpx6、Kdm3a、Rheb p<0.01并且对于Dusp1 p<0.001；对于高剂量，对于Gpx6、Kdm3a、Rheb和Dusp1 p<0.001)。总而言之，来自RNA-seq分析的这些结果揭示了，普利多匹定治疗逆转了牵涉HD的基因的纹状体转录缺陷，示出普利多匹定在分子水平的有益效果。

通过比较在每一个普利多匹定组中观察到的相对于媒介物治疗的YAC128 HD对照组的DEG，探索了高剂量(30mg/kg)组相对于低剂量(10mg/kg)组中观察到的更多行为改善的生物学基础。使用Enrichr(Kuleshov 2016)对10mg/kg组和30mg/kg组两者共有的DEG的功能注释揭示了9种被显著富集的区室(COMPARTMENTS)(Desplats 2007)细胞组分类别，包括Bcl-2(调整的p＝0.003)和NF-kB(调整的p＝0.036)复合物成员，并且没有被富集的基因本体(GO)细胞组分类别。与之相比，对30mg/kg组特有的DEG是针对7种区室细胞组分类别，诸如突触(调整的p＝0.003)、突触囊泡膜(调整的p＝0.025)和神经元投射(调整的p＝0.037)，以及GO细胞组分突触类别(调整的p＝0.001)被富集的。

为了进一步研究普利多匹定剂量效应，使用细胞类型特异性表达分析检查了DEG(Fenster 2011)。尽管10mg/kg组和30mg/kg组两者共有的DEG在纹状体中型棘和皮质投射神经元中表达的基因中被富集，但30mg/kg组特有的DEG还在胆碱能神经元中表达的转录物中被富集。对注释为在胆碱能神经元中被富集的19种DEG的检查揭示了，尽管它们的表达模式在10mg/kg组和30mg/kg组之间相似，但在30mg/kg组中它们的表达水平(相对于YAC128媒介物组)的变化幅度与10mg/kg组相比更大。此外，这些基因中的许多先前已牵涉HD，诸如Cib2(Czeredys 2013)、Npas1(van Roon-Mom 2008)、St8sia2(Desplats 2007)和Gng4(Fenster 2011)。这些结果示出，在行为测定中观察到的剂量效应与差异转录模式相关，并且突触变化和胆碱能系统还牵涉30mg/kg普利多匹定剂量观察到更大的功能改善。

讨论

普利多匹定治疗的YAC128 HD小鼠中纹状体转录缺陷的大部分逆转为普利多匹定的保护性分子效应提供了支持。转录失调是HD的证据充分的病理特征(Kuhn 2007)。本文中呈现的分析揭示了，普利多匹定治疗拯救了先前牵涉HD的关键途径中的转录缺陷。例如，先前在HD的R6/2小鼠模型中的无偏倚合成致死筛选中，Gpx6和Kdm3a与HD相关联(Shema2014)。Gpx6(谷胱甘肽过氧化物酶6)属于谷胱甘肽过氧化物酶家族，并且在过氧化氢酶的解毒中起作用。表明Gpx6的敲低导致表达mHTT的纹状体神经元丢失，而Gpx6的过表达导致如通过DARPP-32表达测量的神经元拯救，以及改善的运动功能(Shema 2014)。类似地，YAC128 HD小鼠中mTORC1调节物Rheb水平的缺陷被普利多匹定治疗逆转。最近示出了Rheb活性的增加改善了HD小鼠的许多细胞缺陷和分子缺陷，包括线粒体缺陷和胆固醇稳态失衡(dyshomeostasis)。最后，普利多匹定治疗拯救了DUSP1的缺陷，DUSP1是有丝分裂原活化的蛋白激酶家族的磷酸酶的成员，最近被示出在HD的动物模型中是保护性的。总体来说，这些发现示出，被普利多匹定治疗逆转的转录缺陷有助于其在YAC128 HD小鼠中的有益作用。

通过分析在行为测定中示出更大的改善的30mg/kg普利多匹定组特有的DEG也为普利多匹定的突触保护活性提供了支持。DEG的功能注释揭示了对突触和突触囊泡相关基因的富集。此外，细胞类型特异性表达分析示出，30mg/kg普利多匹定剂量特有的DEG富集在胆碱能神经元中表达的基因中，示出这些神经元在介导普利多匹定的有益作用中可能的作用。已经报道，胆碱能系统的功能异常在几种运动障碍包括帕金森病(PD)和HD的病理生理学中发挥作用(van Waarde 2011、Benarroch 2012、Pisani 2007)。重要的是，S1R(σ1受体)激动剂先前已经示出调节乙酰胆碱释放和胆碱能神经传递，并且在认知障碍和健忘症的动物模型中逆转由胆碱能功能异常导致的认知缺陷(van Waarde 2011)。此外，已经报道胆碱能系统的异常对情绪障碍的病因学至关重要，并且可能代表抑郁的一种内表型(Mineur2013)。

在细胞类型特异性表达分析中鉴定的三种DEG，即Cib2、Npas1和St8sia2，先前已与HD相关联(Czeredys 2013)。Cib2，钙和整合素结合家族成员，在YAC128 HD小鼠的纹状体以及HD的PC12模型中被上调(Czeredys 2013)。被认为参与染色质重塑和转录的一种神经元PAS结构域蛋白1，即Npas1的水平在HD的PC12模型中升高。已经报道，与神经节苷脂生物合成相关的ST8α-N-乙酰基-神经氨酸苷α-2,8-唾液酸转移酶2，St8sia2，在HD的R6/1小鼠模型中减少。本文中提供的分析不仅验证了这些先前的发现，而且还示出了普利多匹定治疗(30mg/kg)逆转了这些基因水平的HD相关的改变。

总之，实施例1-实施例3证明了，普利多匹定对于治疗HD患者的行为症状是有前景的治疗剂。此外，本文提供的实验示出，这样的有益效果取决于治疗的时机，早期治疗导致更大的益处。本文提供的转录分析支持普利多匹定的突触保护作用，并且对其作用机制提供了新的见解。

实施例4：普利多匹定对焦虑的非HD啮齿动物模型有效

将普利多匹定周期性地(例如，每天一次或每天两次)施用至呈现出焦虑症状的啮齿动物。啮齿动物模型的实例包括HAB大鼠，基于它们在高架十字迷宫(EPM)中的行为来选择；Syracuse高回避和低回避(Syracuse High and Low Avoidance)大鼠；Maudsley反应性/非反应性品系；Tsukuba高情绪和低情绪大鼠，以及Floripa H和L品系，焦虑和抑郁的大鼠模型。Roman低回避(RLA)大鼠被认为是高特质焦虑情绪(high trait anxiety-emotionality)的一个模型，它是基于穿梭箱中双向回避响应的差的习得来选择的。大鼠和小鼠的选择性繁育提高了发现焦虑相关的神经生物学相关因素的可能性，包括遗传决定因素，并且允许研究基因-环境相互作用。(Steimer 2011)。

施用普利多匹定对治疗焦虑是有效的。施用普利多匹定对减少焦虑的症状是有效的。

实施例5：普利多匹定治疗患有焦虑或抑郁的患者的功效的评估。

将普利多匹定周期性地(例如，每天一次或每天两次)施用至被诊断为患有焦虑或抑郁的患者。患者正在呈现焦虑或抑郁的症状。普利多匹定被静脉内或口服施用。施用普利多匹定对治疗患者是有效的。施用普利多匹定对减少焦虑或抑郁的一种或更多种症状也是有效的。施用普利多匹定对促进患者的康复是有效的。

施用普利多匹定对促进患者的情感功能的康复是有效的。施用普利多匹定对促进患者的行为功能的康复也是有效的。施用普利多匹定对促进患者的情绪功能的康复也是有效的。施用普利多匹定对促进患者的精神功能的康复也是有效的。施用普利多匹定对促进患者的感觉功能的康复也是有效的。

实施例6：III期、双盲、安慰剂对照研究，评价45mg普利多匹定相对于安慰剂在患 有亨廷顿氏病的患者的症状治疗中的安全性和功效

所提议的3期研究是一项78周、多中心、随机化、双盲、安慰剂对照的、平行组研究，以评价在患有早期阶段HD的成人患者中以每天两次45mg的剂量施用普利多匹定的功效和安全性。

研究由以下组成：筛查期(多达8周)；两周的滴定期；76周、双盲、全剂量治疗期；和随访期(由在治疗就诊结束后3周至4周的研究探访的终末期(end)组成)。

在筛查期期间，患者提供知情同意，并且随后经历评估以确定参与研究的资格。HD的阶段由UHDRS TFC量表确定。对PBA-s进行评估。

邀请有资格的患者返回基线就诊和基线评估。对于参与研究仍然有资格的那些患者将被随机分配(1:1比率)到2个治疗组中的1个：每天两次45mg普利多匹定或每天两次安慰剂。对于被分配接受普利多匹定的患者，剂量从前2周期间的每天一次45mg滴定至每天两次45mg普利多匹定的最终剂量。

在滴定期间(第0天至第14天)，患者在第二周期间接受1个预定的电话通话(TC)。患者在第26周、第52周和第78周参加现场临床就诊以便于安全性和功效测量，并被血液取样用于药代动力学评估。在第3周、第6周、第12周、第39周和第65周，由一名上门服务护士在家或在诊所进行安全就诊以用于安全性评估。患者在每次在家或现场临床就诊后约6周至7周接受1次预定的TC。在这些TC期间，患者被问及以下问题：不良事件、并行药物、酒精/药物的使用、研究药物的耐受性、苯二氮卓类和抗抑郁药的使用以及依从性。评估了C-SSRS(自上次就诊的版本)和简略的PBA-s(PBA-s问题的子集，关于抑郁情绪、自杀意念、焦虑、易怒、动机丧失和强迫行为)。

完成所有预定就诊的患者在治疗就诊结束时(第78周)进行最终程序和评估。在评价期结束之前退出研究的患者将在其最后就诊时进行第78周程序和评估，这被视为其提前终止就诊。

在研究药物最后给药后约3周至4周，存在现场研究就诊的终点，以评价功效、安全性(包括单一ECG)、药代动力学、反弹和依赖性。

问题行为评估-简化形式(PBA-s)

由于HD中精神症状的显著性，建议在任何需要行为评估的所有HD研究中使用PBA-s表格作为用于HD中最常见的精神症状的全面筛选。(Craufurd 2001、Kingma 2008)

参考文献

Bech P，et al.″The sensitivity and speciificity of the MajorDepression Inventory，using the Present State Examination as the index ofdiagnostic validity.″.J Affect Disord.2001.66：159-64.

Bech P，“Rating scales in depression：limitations and pitfalls”Dialogues Clin Neurosci.2006.8(2)：207-215.

Bechtel，N.et al.，Tapping linked to function and structure inpremanifest and symptomatic Huntington disease.Neurology.2010.75(24)：2150-60.

Benarroch EE.Effects of acetylcholine in the striatum.Recent insightsand therapeutic implications.Neurology 2012：79(3)：274-281.

Carroll JB et al.Natural history of disease in the YAC128 mousereveals a discrete signature of pathology in Huntingtondisease.Neurobiol.Dis.2011.43(1)：257-265.

Connor，KM，et al.Psychometric properties of the Social PhobiaInventory(SPIN)New self-rating scale.The British Journal of Psychiatry，2000.176(4)，379-386.

Craufurd D，et al.Behavioral changes in HuntingtonDisease.Neuropsychiatry Neuropsychol Behav Neurol.2001.Oct-Dec；14(4)：219-26.

Cusin，C，et al.Chapter 2：Rating Scales for Depression，L.Baer，M.A.Blais(eds.)，Handbook of Clinical Rating Scales and Assessment in Psychiatry andMental Health，Current Clinical Psychiatry.

Czeredys M，et al.Expression of genes encoding the calcium signalosomein cellular and transgenic models of Huntington′s disease.Front Mol Neurosci2013.6：42.

Desplars PA et al.Glycolipid and ganglioside metabolism imbalances inHuntington′s disease.Neurobiol.Dis.2007.27(3)：265-277.

Fenster RJ.Cell-Type Specific Translational Profiling in Huntington′sDisease Mouse Models.Student Theses and Dissertations.Paper 148.2011.

Garcia-Miralles M，et al.L6 Evaluation of pridopidine in thetransgenic YAC128mouse model of Huntington’s disease.J Neurol NeurosurgPsychiatry 2016.87：A92.

Geva，M.et al.Pridopidine activates neuroprotective pathways impairedin Huntington Disease.

Human Molecular Genetics，2016.25(18)：3975-3987

Hamilton M.″The assessment of anxiety states by rating.″.Br J MedPsychol.1959 32(1)：50-55.

Heimberg，RG，et al.Psychometric properties of the Liebowitz SocialAnxiety Scale.Psychologieal medicine 1999.29(1)，199.

Huntington Study Group.Unified Huntington’s Disease Rating Scale：Reliablility and Consistency.，Movement Disorders，1996.11(2)：136-142.

Johnson AC and Paulsen JS.2014.Huntington′s Disease：A Guide forProfessionals.D.Lovecky and K.Tarapata eds.Huntington′s Disease Socieety ofAmericas(HDSA).

Julian，LJ.Measures of anxiety：State-Trait Anxiety Inventory(STAI)，Beck Anxiety Inventory(BAI)，and Hospital Anxiety and Depression Scale-Anxiety(HADS-A)，Arthritis Care&Research November 2011.63：S11，S467-S472.

Kingma EM，et al.Behavioural problems in Huntington′s disease usingthe Problem Behaviours Assessment.Gen Hosp Psychiatry.2008.Mar-Apr；30(2)：155-6

Kuhn A，et al.Mutant huntingtin’s effects on striatal gene expressionin miee recapitulate changes observed in human Huntington’s disease brain anddo not differ with mutant huntingtin length or wild-type huntingtindosage.Hum Mol Genet 2007.16(15)：1845-1861.

Kuleshov MV et al.Enrichr：a comprehensive gene set enrichmentanalysis web server 2016update.Nucleic Acids Research 2016.44(W1)：W90-7.

Leary，MR.A brief version of the Fear of Negative EvaluationScale.Personality and Social Psychology Bulletin，1983.9(3)，371-375.

Mineur，YS.et al.“Cholinergic Signaling in the Hippocampus RegulatesSocial Stress Resilience and Anxiety-and Depression-like Behavior.”PNAS USA2013.110(9)：3573-3578.

Norman，SB，et al.Development and validation of an overall anxietyseventy and impairment scale(OASIS).Depression and anxiety，2006.23(4)，245-249.

Pisani A，et al.Re-emergence of striatal cholinergic interneurons inmovement disorders.Trends Neurosci 2007.30(10)：545-553.

Ponten H，et al.In vivo pharmacology of the dopaminergic stabilizerpridopidine.Eur J Pharmacol.

2010.644(1-3)：88-95.

Pouladi MA et al.Marked differences in neurochemistry and aggregatesdespite similar behavioural and neuropathological features of Huntingtondisease in the full-length BACHD and YAC128 mice.Hum Mol Genet 2012.21(10)：2219-2232.

Shema R et al.Synthetic lethal screening in the mammalian centralnervous system identifies Gpx6 as a modulator of Huntington′s disease.PNAS2014.112(1)：268-272.

Slow EJ et al.Selective striatal neuronal loss in a YAC128mouse modelof Huntington disease.Hum Mol Genet 2003.12(13)：1555-1567.

Southwell AL et al.Anti-semaphorin 4D immunotherapy amelioratesneuropathology and some cognitive impairment in the YAC128mouse model ofHuntington disease.Neurobiol.Dis.2015.76：46-56.

Spitzer，RL，et al.A brief measure for assessing generalized anxietydisorder：the GAD-7.Archives of internal medicine，2006.166(10)，1092.

Steimer T.Animal models of anxiety disorders in rats and mice：someconceptual issues.Dialogues in Clinical Neuroscience.2011.13(4)：495-506.

Strik J，et al.Sensitiviry and specificity of observer and self-reportquestionnaires in major and minor depression following myocardial infarction.Psychosomatics.2001.42：423-428.

Teo RTY et al.Structural and molecular myelination deficits occurprior to neuronal loss in the YAC128 and BACHD models of Huntingtondisease.Hum Mol Genet 2016.25(13)：2621-2632.

van Roon-Mom WMC et al.Mutant huntingtin activates Nrf2-responsivegenes and impairs dopamine synthesis in a PC12 model of Huntington′sdisease.BMC Mol Biol 2008.9：84.

van Waarde A et al.The cholinergic system，sigma-l receptors andcognition.Behav Brain Res 2011.221(2)：543-554.

Xie，Y，et al.BDNF Overexpression in the Forebrain Rescues Huntington’sDisease Phenotypes in YAC128 Mice.J Neurosci.2010.30(44)：14708-14718.

Zigmond，AS，and Snaith，RP..The hospital anxiety and depressionscale.Aeta psychiatrica scandinavica，1983.67(6)，361-370.

CSID：25948790，www.chemspider.com/Chemical-Structure.25948790.html(aceessed 23：27，Jul 15，2016).

CSID：7971505，www.chemspider.com/Chemical-Structure.7971505.html(accessed 23：33，Jul 15，2016).

U.S.Patent No.6,903,120，issued June 7，2005(Sonesson et al.).

U.S.Patent No.7,923,459，issued April 12，2011(Gauthier et al.).

US Patent Publication No.US2016/243098published Aug.25，2016(Geva etal).

Claims (56)

1.一种减少有相应需要的受试者的焦虑和/或抑郁的方法，所述方法包括将药物组合物周期性地施用至所述受试者，所述药物组合物包含有效减少所述受试者的焦虑和/或抑郁的量的普利多匹定。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述方法减少所述受试者的焦虑。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中焦虑通过状态-特质焦虑量表(STAI)、恐惧调查时间表、Beck焦虑量表(BAI)、简单消极评价恐惧量表-BFNE、临床医师管理的PTSD量表(CAPS)、症状-焦虑的日常评估、广泛性焦虑障碍7(GAD-7)、汉密尔顿焦虑量表(HAM-A)、医院焦虑和抑郁量表(HADS-A)、Leibowitz社交焦虑量表(LSAS)、总焦虑严重度和损伤量表(OASIS)、惊恐和广场恐怖症量表(PAS)、惊恐障碍严重度量表(PDSS)、PTSD症状量表-自我报告版本、社交恐惧症量表(SPIN)、创伤筛查问卷、Yale–Brown强迫症量表(Y-BOCS)或Zung自我评定焦虑量表来测量。

4.如权利要求3所述的方法，其中焦虑减少了至少一个增量。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述方法减少了所述受试者的抑郁。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中抑郁通过用于抑郁的汉密尔顿评定量表(HAM-D)、Beck抑郁量表(BDI)、Beck绝望量表、流行病学研究中心-抑郁量表(CES-D)、患者健康问卷、流行病学研究中心-儿童抑郁量表(CES-DC)、临床有用的抑郁结果量表、用于抑郁的诊断量表、爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)、抑郁症状学量表、老年抑郁量表(GDS)、医院焦虑和抑郁量表、Kutcher青少年抑郁量表(KADS)、重度抑郁量表(MDI)、Montgomery-抑郁评定量表(MADRS)、情绪和感觉问卷(MFQ)、Zung自我评定抑郁量表或用于痴呆中的抑郁的康奈尔量表(CSDD)来测量。

7.如权利要求6所述的方法，其中抑郁减少了至少一个增量。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述受试者罹患焦虑障碍。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述焦虑障碍是广泛性焦虑障碍(GAD)、惊恐障碍、恐惧障碍、社交恐惧症、广场恐怖症或创伤-相关障碍和应激源-相关障碍。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述创伤-相关障碍和应激源-相关障碍是急性应激障碍(ASD)或创伤后应激障碍(PTSD)。

11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述受试者罹患抑郁障碍。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述抑郁障碍是重度抑郁障碍、持续性抑郁障碍、经前焦虑障碍、其他抑郁障碍、由另一种医学状况引起的抑郁障碍、物质/药物诱导的抑郁障碍、围产期抑郁、围产期发作抑郁、季节性情感障碍或精神病性抑郁。

13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述受试者罹患神经退行性疾病。

14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述受试者罹患亨廷顿氏病。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述受试者罹患早期亨廷顿氏病。

16.如权利要求14所述的方法，其中所述受试者罹患阶段1或阶段2亨廷顿氏病。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述受试者罹患阶段1亨廷顿氏病。

18.如权利要求16所述的方法，其中所述受试者罹患阶段2亨廷顿氏病。

19.如权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述受试者在亨廷顿蛋白基因中具有大于或等于36个CAG重复。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述受试者在亨廷顿蛋白基因中具有大于44个CAG重复。

21.如权利要求14、19和20中任一项所述的方法，其中所述受试者是症状发生前的。

22.如权利要求14-20中任一项所述的方法，其中所述受试者是有症状的。

23.如权利要求14所述的方法，其中所述方法包括减少罹患早期亨廷顿氏病的受试者的焦虑。

24.如权利要求14所述的方法，其中所述方法包括减少罹患以下中的任一种的受试者的抑郁：阶段1亨廷顿氏病、阶段2亨廷顿氏病、阶段3亨廷顿氏病、阶段4亨廷顿氏病和阶段5亨廷顿氏病。

25.如权利要求1所述的方法，其中所述受试者已经被诊断为仅患有焦虑。

26.如权利要求1、8、9、23或25中任一项所述的方法，其中所述受试者经历焦虑的至少一种症状，其中所述至少一种症状包括不安、心悸、换气过度、大量出汗、肌肉抽搐、虚弱、嗜睡、失眠、恶心、重复性行为或其任何组合。

27.如权利要求1所述的方法，其中所述受试者已经被诊断为仅患有抑郁。

28.如权利要求1、11、12、24或27中任一项所述的方法，其中所述受试者经历至少一种抑郁症状，并且其中所述至少一种抑郁症状包括抑郁情绪、快感缺乏、低能量水平、愧疚感、精神运动性阻滞、激动、自杀意念、注意力差和犹豫不定、或其任何组合。

29.如权利要求1-28中任一项所述的方法，其中22.5mg–315mg之间的普利多匹定每天被施用至所述受试者。

30.如权利要求1-29中任一项所述的方法，其中大于90mg普利多匹定且小于或等于180mg普利多匹定每天被施用至所述受试者。

31.如权利要求29所述的方法，其中22.5mg、45mg、67.5mg、90mg、100mg、112.5mg、125mg、135mg、150mg或180mg普利多匹定每天被施用至所述受试者。

32.如权利要求31所述的方法，其中100mg、112.5mg、125mg、135mg、150mg或180mg普利多匹定每天被施用至所述受试者。

33.如权利要求29-32中任一项所述的方法，其中普利多匹定的量以单位剂量为22.5mg、45mg、67.5mg、90mg、100mg、112.5mg、125mg、135mg、150mg或180mg普利多匹定被施用。

34.如权利要求1-33中任一项所述的方法，其中所述单位剂量每天一次被施用。

35.如权利要求1-33中任一项所述的方法，其中所述单位剂量每天多于一次被施用。

36.如权利要求1-33和35中任一项所述的方法，其中所述单位剂量每天两次施用。

37.如权利要求1-36中任一项所述的方法，其中所述药物组合物被施用多于26周、至少52周或至少78周。

38.如权利要求1-37中任一项所述的方法，其中所述周期性施用是口服。

39.如权利要求1-38中任一项所述的方法，其中所述受试者是人类受试者。

40.如权利要求1-39中任一项所述的方法，其中所述普利多匹定呈普利多匹定盐酸盐的形式。

41.如权利要求1-40中任一项所述的方法，其中所述焦虑和/或所述抑郁持续至少12个月被减少。

42.如权利要求1-41中任一项所述的方法，其中在周期性施用开始时，不同于预期剂量的量的滴定剂量被施用一段时间，优选地其中所述滴定剂量是所述预期剂量的量的一半，更优选地其中在施用所述预期剂量之前，所述滴定剂量被施用14天。

43.普利多匹定，用于在减少受试者的焦虑和/或抑郁中使用。

44.普利多匹定，用于制备用于在减少受试者的焦虑和/或抑郁中使用的药物。

45.一种药物组合物，所述药物组合物包含有效量的普利多匹定，用于减少受试者的焦虑和/或抑郁。

46.一种药物组合物，所述药物组合物包含普利多匹定，所述药物组合物用于在减少受试者的焦虑和/或抑郁中使用。

47.一种包装，所述包装包括：

a)药物组合物，所述药物组合物包含一定量的普利多匹定；和

b)便于使用所述药物组合物减少受试者的焦虑和/或抑郁的说明书。

48.一种治疗包装，用于向受试者分配或用于在向受试者分配时使用，所述治疗包装包括：

一个或更多个单位剂量，每个这样的单位剂量包括其普利多匹定的量，其中所述单位剂量中的所述普利多匹定的量在施用至所述受试者后有效减少所述受试者的焦虑和/或抑郁，和

用于此的成品药物容器，所述容器包含一个或更多个所述单位剂量，所述容器还包含或包括指导使用所述包装减少所述受试者的焦虑和/或抑郁的标签。

49.一种调节罹患亨廷顿氏病的受试者中的基因表达的方法，所述方法包括将有效调节基因表达的量的普利多匹定施用至所述受试者。

50.一种预测罹患亨廷顿氏病的受试者对普利多匹定疗法的临床响应性的方法，所述方法包括评价所述受试者中生物标志物的表达，以便从而预测对普利多匹定的临床响应性，其中所述生物标志物是基因。

51.如权利要求49或50所述的方法，其中所述基因是以下中的一种或更多种：蛋白磷酸酶1调节抑制物亚基1B(Ppp1r1b或Darpp32)、大麻素衍生物受体1(Cnr1)、多巴胺受体D1(Drd1)和多巴胺受体D2(Drd2)、以及脑啡肽原(Penk)、AGPAT9、NPTX2、SV2C、ST8SIA2、Gpx6、Kdm3a、Rheb、Dusp1、Bcl-2、NF-kB、Cib2、Npas1、St8sia2、Gng4和DUSP1。

52.如权利要求50或51所述的方法，还包括预测对普利多匹定的阳性临床响应性，如果所述生物标志物在所述受试者中被上调的话。

53.如权利要求50或51所述的方法，还包括预测对普利多匹定的阳性临床响应性，如果所述生物标志物在所述受试者中被抑制的话。

54.如权利要求51-53中任一项所述的方法，其中如果所述生物标志物的表达高于参考值，则将所述受试者鉴定为普利多匹定响应者。

55.如权利要求51-53中任一项所述的方法，其中如果所述生物标志物的表达水平低于参考值，则将所述受试者鉴定为普利多匹定响应者。

56.如权利要求54-55中任一项所述的方法，其中如果所述受试者被鉴定为普利多匹定响应者，则随后将包含普利多匹定的药物组合物施用至所述受试者。