CN109705124B - 一种放射性氟标记Larotrectinib化合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种放射性氟标记Larotrectinib化合物及其制备方法，特别涉及一种Larotrectinib及其类似物放射性氟‑18标记化合物¹⁸F‑Larotrectinib及其¹⁸F‑Larotrectinib类似物的制备方法。与现有技术相比，本发明具有反应速度快，条件相对温和，操作简单，反应时间短，后处理简单，可制备得到无载体放射性标记化合物，放化纯度高，具有发射正电子的特性，借助PET‑CT正电子发射断层显像技术，直观显示Larotrectinib化合物及其类似物在活体内，以及肿瘤中的分布状况，并为肿瘤早期诊断提供一种新的显像剂。

Description

一种放射性氟标记Larotrectinib化合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及化学药物合成领域，特别是难治性实体瘤中，Trk受体亚型的体内显像剂，具体涉及基于新型的针对酪氨酸受体激酶(TRK)的抑制剂Larotrectinib的放射性氟化合物¹⁸F-Larotrectinib及其¹⁸F-Larotrectinib类似物,更特别涉及一种Larotrectinib及其类似物放射性氟-18标记化合物¹⁸F-Larotrectinib及其¹⁸F-Larotrectinib类似物的制备方法。

背景技术

Larotrectinib是由Loxo Oncology公司研发，作为一款广谱肿瘤药，用于所有表达有原肌球蛋白受体激酶(tropomyosin receptor kinase，TRK)的肿瘤患者，这种TRK小分子抑制剂对TRK有很强的选择性，通过抑制TRK信号通路，larotrectinib可以抑制肿瘤的生长。larotrectinib是一种口服的强力TRK抑制剂，在TRK融合肿瘤中具有一致和持久的抗肿瘤活性，适用的患者年龄和肿瘤类型范围广，其适应症分布于13种不同肿瘤类型，并且具有良好的耐受性，对多种成人和儿童实体瘤有效，包括唾液腺癌(salivary)、婴儿纤维肉瘤癌(infantile fibrosarcoma)、肺癌(lung)、甲状腺癌(thyroid)、结肠癌(colon)、黑色素瘤(melanoma)、胆管癌(cholangio)、肠胃癌(GIST)、乳腺癌、以及各种肉瘤癌(sarcoma)。美国FDA(http://www.chemdrug.com/article/11/)已经授予larotrectinib孤儿药资格和突破性药物资格认定。Larotrectinib有望成为第一个在成人和儿童中同时开发和批准的治疗药物，并且是第一种跨越所有传统定义的肿瘤类型、分子意义上的肿瘤靶向治疗药。Larotrectinib的结构如下所示：

然而，目前对于药物分子在体内的分布及疗效评价，通常采用发射正电子的放射性药物18F-脱氧葡萄糖(18F-FDG)，间接评价药物对肿瘤及相关疾病的疗效，而且，发射正电子的放射性药物18F-脱氧葡萄糖(18F-FDG)在非肿瘤组织和炎症细胞成分中也有较高的FDG吸收，致使FDG用于肿瘤显像时可能因为存在炎症而造成肿瘤诊断的假阳性结果。因此，如何在活体内在线示踪Larotrectinib在人体内或动物体内分布以及实体瘤中的状况，直观判断Larotrectinib在肿瘤中的生理功能，评判其疗效及其愈后效果，这是一个棘手的难题。

PET(Positron emission tomography)是一种非浸入性显像技术，具有在活体内分子水平上实现药物分子生理生化功能、药理学过程的可视化和定量化评估。Larotrectinib分子作为一种原肌球蛋白受体激酶(tropomyosin receptor kinase，TRK)的小分子抑制剂，对TRK有很强的选择性，可用作PET显像分子，精准定位Larotrectinib分子在活体内评价肿瘤状况，实现在线示踪Larotrectinib分子在动物或人体内分布以及实体瘤中的状况，直观判断Larotrectinib在动物体、人体内以及肿瘤中的生理功能和药理学过程，评判其疗效及其愈后效果，目前尚未见有更为有效的技术手段。

发明内容

本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种[¹⁸F]-标记Larotrectinib化合物及其制备方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：一种[¹⁸F]-标记Larotrectinib化合物，其特征在于，包括具有以下结构式¹⁸F-Larotrectinib化合物及其类似物：

上述所述[¹⁸F]-标记Larotrectinib化合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤一：羟基保护：碘代Larotrectinib类似物前体(I-Larotrectinib)的活性羟基官能团的保护；

步骤二：标记前体制备：碘代Larotrectinib类似物前体(I-Larotrectinib)碘的活化制备三氟醋酸碘代Larotrectinib类似物，随后与金刚烷取代的辅助酸反应制备标记前体：螺环高价碘(III)代羟基保护的Larotrectinib类似物；

步骤三：氟-18标记产物的制备：标记前体与氟-18放射性源取代反应，制备羟基保护的18F-Larotrectinib的合成及18F-Larotrectinib类似物的合成，随后脱保护得到18F-Larotrectinib及18F-Larotrectinib类似物。

¹⁸F-2-Larotrectinib的合成路线如下：

¹⁸F-5-Larotrectinib的合成路线与上述¹⁸F-2-Larotrectinib相同：只是原料中碘代Larotrectinib类似物前体(I-Larotrectinib)中I的取代位置为5位取代，具体合成路线如下：

步骤一所述的碘代Larotrectinib类似物前体包括如下结构式：

上式中，R1、R2分别独立代表苯基取代基，R1、R2各自独立地选自H、卤素、羟基、硝基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烷基、C6-10芳基、C4-10杂环烷基、C6-10杂芳基组成的组；R1、R2各自独立地与R3组成组；

上式中，R3具体代表为H；所述的活性羟基官能团的保护是指通过酯化反应或醚化反应，将R3通过以下官能团取代，从而保护活性羟基，取代的官能团包括三甲基硅氧醚(TMS)、叔丁基二甲基硅氧烷醚(TBDMS)、三乙基硅氧醚(TES)、叔丁基二苯基硅氧烷醚(TBDPS)、甲醚(Me)、苄醚(Bn)、三苯甲基醚(Tr)、对甲氧基三苯甲基醚(MMT)、二甲氧基三苯甲基醚(DMT)、叔丁基醚(tBu)、甲氧基甲醚(MOM)、2-甲氧基乙氧基甲基醚(MEM)、甲硫基甲醚(MTM)、苄氧基甲基醚(BOM)、对甲氧基苄基醚(PMB)、对甲氧基苄氧基甲基醚(PMBOM)、3,4-二甲氧基苄基醚(DMB)、四氢吡喃醚(THP)、甲氧羰基(Moc)、乙氧羰基(Eoc)、叔丁氧羰基(Boc)、苄氧羰基(Cbz)、9-芴甲氧基羰酰基(Fmoc)、乙酰基(Ac)、三氟乙酰基(TfAc)、氯乙酰基(CAc)、二氯乙酰基(DCAc)、苯甲酰基(Bz)、特戊酰基(Pv)、甲磺酰基(Ms)、苄基磺酸酰基(Bs)、烯丙基磺酸酰基(Bs)、烯丙基氧羰基(Als)、烯丙氧羰基、C1-16烷酰基、C2-16烯酰基、C3-6炔酰基、C4-10环烷基、C7-16芳酰基、C4-10杂环烷酰基；且可任选被1、2、3或4个独立的R3基团取代，所述的烷酰基优选乙酰基；所述的芳酰基优先苯甲酰基；可任选被1、2、3或4个独立的R3基团取代，所述的取代烷酰基，特戊酰基或苯乙酰基。

步骤二所述的三氟醋酸碘代Larotrectinib类似物的制备是将步骤一制得的活性羟基被保护的碘代Larotrectinib类似物前体(I-Larotrectinib)，与三氟乙酸或三氟乙酸酐、有机溶剂、氧化剂进行反应，使I被三氟醋酸根活化；

所述的有机溶剂包括氯仿、二氯甲烷、乙腈、丙酮、过氧化叔丁醇中的一种或几种；

所述的氧化剂包括脲-过氧化氢复合物、Oxone、2,2,6,6-四甲基哌啶-氧化物或mCPBA。

步骤二所述的金刚烷取代的辅助酸为SPIAd，SPIAd与三氟醋酸碘代Larotrectinib类似物反应的条件为：SPIAd与碳酸钠溶液、MeCN、NaHCO3和丙酮中的一种或几种在0℃混合，并控制混合液pH值为8～10，与三氟醋酸碘代Larotrectinib类似物在0℃连续搅拌反应1～10h得到标记前体。

步骤三所述的氟-18放射性源通过以下方法获得：

(1)制备[¹⁸F]氟化物靶水：[¹⁸F]氟化物靶水通过1⁸O(p,n)¹⁸F核反应生产，使用GEPETTrace回旋加速器，通过氮气压力将[¹⁸F]氟化物靶水递送到¹⁸O-富集水的无菌铅保护热室；用这种方法生产的[¹⁸F]氟化物靶水在用于研究之前,通常用Milli-Q(密理博公司超纯水仪器)超纯化水进一步稀释成1-3mCi/毫升[¹⁸F]氟化物靶水液体；

(2)QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)富集[¹⁸F]氟化物：将含有适量的[¹⁸F]氟化物的目标水的等分试样,在氮气流冲洗下，缓慢通过阴离子交换固相萃取盒(QMA)，该阴离子交换固相萃取盒(QMA)事先使用NaHCO_3(aq)(8.4％，1mL)和水(20mL，直到pH指示剂为中性)冲洗而预活化，将[¹⁸F]氟化物富集在QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)上，将¹⁸O和其它不纯物分离洗脱除去，得到[¹⁸F]氟化物QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)的[¹⁸F]氟源；

(3)洗脱QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)上富集的[¹⁸F]氟化物，得到[¹⁸F]氟化物季铵盐或无机盐溶液：使用冲洗液有机或无机碱(例如，一定数量的四乙基碳酸氢铵，例如8mg)溶解在乙腈和水(1mL，v/v 7:3)或乙腈(1mL)或甲醇(1mL)或乙醇(1mL)中所得的溶液，冲洗富集在QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)上的[¹⁸F]氟化物，将[¹⁸F]氟化物洗脱到用特氟隆衬垫隔膜密封的V形小瓶中，得到[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的乙腈水溶液或乙腈或甲醇溶液；

(4)制备干燥的[¹⁸F]氟化物季铵盐或无机盐：将装有[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的乙腈水溶液或乙腈或甲醇或乙醇溶液的特氟隆衬垫隔膜密封的V形小瓶加热至95-110℃，同时使氮气通过P₂O₅-Drierite^TM柱干燥后吹扫V形小瓶，随后通过通气的小瓶排出尾气；当在小瓶中没有液体可见时，将其从热浴中取出，添加无水乙腈(1mL)，并恢复加热直至干燥，将该步骤重复另外三次；然后将小瓶在氮气流下，在室温下冷却，得到干燥的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐，包括[¹⁸F]KF/K₂CO₃/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/K₂C₂O₄/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/KOTf、[¹⁸F]Et₄NF、[¹⁸F]Et₄NHCO₃、[¹⁸F]Et₄NOMs、[¹⁸F]Et₄NOTf，其放射性[¹⁸F]氟化物回收率，根据采用的洗脱工艺不同而有差异。

步骤三所述的标记前体与氟-18放射性源取代反应：取装有干燥的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的V形小瓶，添加溶剂重新溶解，再添加标记前体，进行反应，得到[¹⁸F]-Larotrectinib未脱保护的标记物的粗品反应液。

步骤三所述的脱保护通过以下方法实现：采用不添加或添加一定量的有机碱或无机碱或有机酸或无机酸至[¹⁸F]-Larotrectinib未脱保护的标记物的粗品反应液中，在加热条件下脱除羟基保护基，得到[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的粗品反应液。

所述的[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的粗品反应液还需要通过以下方法进行分离纯化：将[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的粗品反应液通过采用半制备HPLC或Waters Sep-PakC-18小柱纯化，并用溶剂淋洗进无菌真空瓶，60℃下氮气吹干20分钟，用盐水重新复配，其中含有100ul，25％的维生素C的水溶液，100ul，20％吐温80的乙醇溶液，即得[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液，该[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液通过以下方法进行分析鉴定：

通过放射性HPLC(60:40CH ₃CN:H ₂O+0.1N甲酸铵，Phenomenex Luna C₁₈,250×4.6mm,5μm,UV at 254nm；CH₃CN/0.1M NH4·HCO₂(aq)(v/v,7/3)，流速1.0mL/min)和放射性TLC(EtOAc+0～5％EtOH)测定产物标识和纯度(放射化学纯度和化学纯度)。产物的放射化学纯度>90-99％。产物的化学纯度>90-99％。将放射化学产率确定为从在将标记前体加入DMF稀释的[¹⁸F]Et ₄NHCO₃溶液的V型小瓶中的活度量作为最终产物分离的放射性的百分比，并且没有衰变校正。放射化学得率20～45.3(未经衰减校正)，放射化学纯度大于99％，比活度2.56～18Ci/μmol)。

与现有技术相比，本发明具有以下有益技术效果：

(1)本发明提供一种氟-18标记的¹⁸F-Larotrectinib化合物及其类似物，并且提供一种氟-18标记的Larotrectinib化合物及其类似物的制备方法，即采用三价碘取代法制备氟-18标记的¹⁸F-Larotrcetinib，反应速度快，条件相对温和，操作简单，反应时间短，后处理简单，可制备得到无载体放射性标记化合物，放化纯度高。

(2)本发明提供一种氟-18标记的¹⁸F-Larotrectinib化合物及其类似物，具有发射正电子的特性，借助PET-CT正电子发射断层显像技术，直观显示Larotrectinib化合物及其类似物在活体内，以及肿瘤中的分布状况，并为肿瘤早期诊断提供一种新的显像剂。

具体实施方式

下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。下述实例中所用的材料、试剂、装置、仪器、设备等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

其中步骤一所述的碘代Larotrectinib类似物前体

上式中，R3具体代表为H。

可以通过以下方法制得：

步骤一：关键中间体4及其合成

步骤二：关键中间体8及其合成

步骤三：卤代Larotrectinib类似物9的制备

以(R)-2-F-5-I-Larotrectinib的制备为例进行说明，其制备方法如下：

步骤一：关键中间体4及其合成

1a、(E)-4-(5-fluoro-2-iodophenyl)-4-oxobut-2-enoic acid的合成

在500mL反应器中，加入5-氟-2-碘苯乙酮(39.6g,150mmol),乙醛酸单水合物(13.9g,151mmol),加热反应并减压蒸出水(95度，0.1Mpa),反应3小时，反应混合物冷却至室温，加入5％碳酸钾水溶液(300mL),用乙酸乙酯萃取2次，每次200mL,水层酸化(10％盐酸，300mL)后,乙酸乙酯萃取2次，每次200mL,合并有机相，盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压去溶剂，得到橘黄色固体。固体溶于冰醋酸(50mL),浓盐酸(36％,5mL)，混合物加热回流4小时，减压去醋酸，剩余物用乙酸乙酯萃取(300mL)，盐水洗涤3次，每次100mL,有机相无水硫酸钠干燥，减压去溶剂，得到目标产物(26.89g,56％)黄色固体,M.P.146度。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.96(brs,1H),8.00-7.74(m,3H),7.30(t,1H,J＝8.5Hz),6.64(d,1H,J＝15.4Hz)。

MS(EI)m/z 320(M+)

1b、4-(5-fluoro-2-iodophenyl)-4-oxobutanoic acid的合成

在500mL反应瓶中，加入醋酸210mL，水75mL，起始物料(47.1g,147mmol),搅拌下，向反应混合物中分批次添加锌粉(10.9g，166mmol)，约1小时加完，混合物继续搅拌3小时，反应物过滤，滤饼用乙酸乙酯(300mL)漂洗,有机相用盐水洗涤3次，每次100mL,无水硫酸钠干燥，减压去溶剂，得到目标产物(29.8g,63％)。M.P.152度。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)12.00(1H,brs),7.91-7.71(3H,m),3.23(2H,t,J＝6.26),2.57(2H,t,J＝6.24).

MS(EI)m/z 322(M+).。

1c、methyl 4-(5-fluoro-2-iodophenyl)-4,4-dimethoxybutanoate的合成

在250mL反应瓶中，加入起始物料(32.2g,0.1mol)，原甲酸三甲酯(C4H10O3＝106.12,31.84g，0.3mol),甲醇(90mL),滴加10滴硫酸，升温至65度反应4小时，TLC跟踪反应过程，至起始原料转化完全，减压蒸馏去溶剂，剩余物用异丙醚稀释(190mL),饱和碳酸氢钠淬灭反应(100mL)，有机相分层，盐水洗涤2次，每次(120mL),无水硫酸镁干燥，蒸去溶剂，得到产物32.48g，收率85％，直接用于下一步。

¹H NMR(400MHz,CDCl₃)1.29-1.38(2H,m),2.25(2H,t,J＝7.2Hz),3.11(3H,s),3.17(6H,s),7.24-7.28(1H,m),7.31-7.38(2H,m),7.46(1H,dt,J＝8.6,1.4Hz)；

MS(ESI)m/z 383[M+H]⁺。

1d、4-(5-fluoro-2-iodophenyl)-4-oxobutanamide的合成

在250mL反应瓶中，加入甲醇100mL，降温至0度以下，通入氨气至饱和(大约10-12g)，将1c步骤酯化产物(19.1g，0.05mol)，溶解在50mL甲醇中得到的液体，滴加到甲醇-氨的饱和溶液中，保持内温0度左右。滴加完毕，反应液在零度下继续反应16小时。TLC检测反应液至1c步骤酯化产物基本消失时，停止反应，减压去溶剂，得到油状物直接用于下步反应。

MS(ESI)m/z:368.1(M+H)+.。

1e、5-(5-fluoro-2-iodophenyl)-3,4-dihydro-2H-pyrrole的合成

在500mL反应器中，加入干燥的四氢呋喃(300mL)、1d步骤所得酰胺(18.36g,0.05mol)、硼氢化钠(29.26g，0.77mol)，搅拌均匀，并用冰浴冷却至零度，氮气保护下，滴加三氟化硼乙醚溶液(36.75mL，0.3mol),大约2小时左右滴加完毕，撤去冰浴，混合物升温至回流16小时，TLC检测原料转化完全，反应液冷却至5度，缓慢滴加6N盐酸(35mL),混合物升温至回流1小时，反应液冷却至40度，减压去溶剂，剩余物加水稀释，10％NaOH中和至中性，氯仿萃取，无水硫酸钠干燥，过滤减压浓缩得到油状的5-(5-氟-2-碘苯)-3，4-二氢-2H-吡咯(11.27g，收率78％)。

所得产品核磁数据如下：

¹H NMR,400MHz,CD₃ODδ:7.78(m,1H),7.43-7.34(m,2H),3.54(m,2H),2.12(dt,J＝10.3,2.0Hz,2H),1.97(dt,J＝15.8,7.9Hz,2H).

¹³C NMR,100MHz,CD₃ODδ:176.2,158.2(d,J＝260.3),155.0(d,J＝10.3),124.0(d,J＝3.1),119.4(d,J＝23.5),118.4(d,J＝23.5),62.3,36.5,21.0.。

1f、2-(5-fluoro-2-iodophenyl)pyrrolidine的合成

将油状5-(5-氟-2-碘苯)-3，4-二氢-2H-吡咯(7.23g，0.025mol)溶解在100mL甲醇和水(4:1)的溶液中，降温至0度，分批添加硼氢化钠(0.95g，0.025mol),有氢气放出，反应液成黄色浊液，3小时后升至室温，蒸馏去溶剂，剩余物用NaOH处理后，异丙醚萃取，醚层经过无水硫酸钠干燥过夜，过滤去溶剂，得到淡黄色油状物(6.23g，收率88.3％)，直接投下步反应。

¹H NMR,400MHz,CDCl₃δ:7.29(m,1H),7.02(m,1H)，6.96(m,1H),4.09(t,J＝7.8Hz，1H),3.16(m，1H)，3.04(m，1H)，2.21-2.30(m，1H)，1.77-1.95(m，3H)，1.57-1.67(m，1H)。

LC-ESI-MS(m/z)292[M+H]⁺。

第二步：关键中间体8的合成:

2a、5-chloropyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-amine的合成

在1000mL反应瓶中，加入5-chloro-3-nitropyrazolo[1,5-a]pyrimidine化合物(25g,0.125mol)、乙醇(250mL)、和铁粉(75g，1.25mol)加入到反应瓶中，氮气保护下，加热至回流，同时滴加氯化铵(66.5g,1.25mol)水溶液(250mL)，大约1小时滴加完毕，继续回流反应6小时,TLC跟踪至反应完毕后，减压浓缩至糊状，加入水(100mL)稀释剩余物，添加二氯甲烷分层，萃取4-6次，每次200mL，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩得到5-chloropyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-amine化合物419.7g，收率为93.5％。

¹H NMR,400MHz,CD₃ODδ:9.29(d,J＝7.2Hz,1H),8.71(s,1H),8.16(d,J＝7.2Hz,1H),5.92(s,2H)；

MS(ESI)m/z:169.8[M+H]+。

2b、5-chloro-3-isocyanatopyrazolo[1,5-a]pyrimidine的合成

将三光气(9.91g,33.38mmol)溶解于50ml四氢呋喃中，加入5-chloropyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-amine(16.86g,0.1mol)和三乙胺(0.47g,4.64mmol),反应体系于25度搅拌反应1小时。得到5-chloro-3-isocyanatopyrazolo[1,5-a]pyrimidine的悬浮液，产物不经过纯化直接进行下一步反应。

2c、

(S)-N-(5-chloropyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-yl)-3-hydroxypyrrolidine-1-carboxamide的合成

在250mL反应器中,加入碳酸氢钠溶液(80ml,0.5M，40mmol)，加入(S)-吡咯-3-醇(79g,55mmol),滴加步骤9b制备的异氰酸酯溶液(62mL,100mmol以5-chloropyrazolo[1,5-a]pyrimidin-3-amine计),维持温度在0度左右，滴加完毕，混合物在0度下继续搅拌3小时后，加热至50度，继续反应5小时，冷却至室温，加入乙酸乙酯萃取3次，每次100mL。合并有机相，有机相用2N盐酸洗涤，盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析，以乙酸乙酯/石油醚(5：5，v/v)洗脱，得产物22g，收率78％。

¹H NMR(300MHz,d₆DMSO)δ：9.26(d,J＝7.2Hz 1H),8.73(s,1H),8.78(s,1H),8.07(d,J＝7.2Hz,1H),4.02(m,1H),3.62(m,2H),3.48(m,2H),2.36(m,2H)；

MS(ESI)m/z:282[M+H]+。

第三步：卤代Larotrectinib类似物9的制备

卤代Larotrectinib化合物(R)-5-F-2-I-Larotrectinib的合成

将吡唑并(1，5a)嘧啶化合物(30g，106mmol)、5-F-2-I-吡咯化合物(30.9g，106mmol)和1，4-二氧六环(150mL)加入反应烧瓶中，滴加N，N-二甲基吡啶(C7H10N2＝122.17，25.9g，212mmol)，保持反应温度在30℃以内，滴加完毕后，继续反应6小时，TLC中控至反应完毕，后处理同实施例六，得到外消旋混合物5-F-2-I-Larotrectinib类白色固体53.8g，收率94.6％。然后通过手性LC分离纯化，得到(R)-5-F-2-I-Larotrectinib为手性纯白色固体、以及(S)-5-F-2-I-Larotrectinib为手性纯白色固体。

1H NMR(300MHz,d ₆DMSO)δ＝9.12(d,J＝7.2Hz 1H),8.73(s,1H),8.78(s,1H),8.07(d,J＝7.2Hz,1H),6.8-7.3(m,3H),4.17(m,1H),4.02(m,1H),3.62(m,2H),3.48(m,2H),1.75-2.86(m,8H)；

MS(ESI)m/z:536.3(M+H)+。

下面分别通过实施例对本发明化合物的制备过程进行详细说明，其中

实施例1～42为第一步羟基保护，制备I羟基保护Larotrectinib化合物

实施例1

苯甲酰氯酯化，制备I-Bz-2-Larotrectinib或I-Bz-5-Larotrectinib

在2000毫升反应瓶中，加入氯仿400mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.9g)，室温搅拌至溶解后，加入吡啶(240mmol,18.98g)，同时添加苯甲酰氯(80mmol，11.4g)，混合物室温搅拌反应3小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，依次用稀HCl(除去吡啶；同时让未反应的酰氯变成酸)、再用稀的NaOH(最好饱和碳酸氢钠,100mL)洗除酸、饱和氯化钠洗涤至中性，并除去有机层大部分水。有机层经过无水硫酸钠干燥，减压浓缩去溶剂，剩余物用乙醇-甲基叔丁基醚(4：1，180mL)结晶，得到产物白色固体I-Bz-2-Larotrectinib，收率88％(70.4mmol，45.1g)。合成路线如下所示：

实施例2

苯甲酰氯酯化，制备I-Bz-5-Larotrectinib

制备方法同实施例1，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Bz-5-Larotrectinib，收率88％(70.4mmol，45.1g)。路线如下：

实施例3

特戊酰氯酯化，制备I-Piv-2-Larotrectinib

在2000毫升反应瓶中，加入氯仿400mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.9g)，室温搅拌至溶解后，同时添加饱和碳酸氢钠溶液(23g)和特戊酰氯(80mmol，9.64g)，混合物室温搅拌反应24小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，1N氢氧化钠(100mL)洗涤,饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸镁干燥，减压浓缩去溶剂，剩余物用甲醇-异丙醚(7：3，150mL)结晶，得到产物白色固体I-Piv-2-Larotrectinib，收率85％(68mmol，42.2g)。路线如下：

实施例4

特戊酰氯酯化，制备I-Piv-5-Larotrectinib

制备方法同实施例3，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Piv-5-Larotrectinib，收率85％(70.4mmol，42.2g)。路线如下：

实施例5

乙酰氯酯化，制备I-Ac-2-Larotrectinib

在2000毫升反应瓶中，加入氯仿400mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.9g)，室温搅拌至溶解后，同时添加三乙胺(240mmol,24.2g)，和乙酰氯(80mmol，6.28g)，混合物室温搅拌反应3小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，饱和氯化铵溶液(100mL)洗涤，饱和碳酸氢钠洗涤，水洗涤，无水硫酸镁干燥，减压浓缩去溶剂，剩余物用丙酮-石油醚(5：2，110mL)结晶，得到产物白色固体I-Ac-2-Larotrectinib，收率96.9％(77.52mmol，44.83g)。

实施例6

乙酰氯酯化，制备I-Ac-5-Larotrectinib

制备方法同实施例5，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Ac-5-Larotrectinib，收率96.5％(77.2mmol，44.7g)。路线如下：

实施例7

三氟乙酸酐酯化，制备I-Tf-2-Larotrectinib

在2000毫升反应瓶中，加入氯仿400mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.9g)，室温搅拌至溶解后，同时添加2，4，6-三甲基吡啶(240mmol，29.1g)做碱、三氟乙酸酐(80mmol，16.8g)，混合物室温搅拌反应8小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，5％稀盐酸溶液(100mL)洗涤，饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸镁干燥，减压浓缩去溶剂，剩余物用醋酸异丙酯-石油醚(6：1，120mL)结晶，得到产物白色固体I-Tf-2-Larotrectinib，收率94％(75.2mmol，59.44g)。路线如下：

实施例8

三氟乙酸酐酯化，制备I-Tf-5-Larotrectinib

制备方法同实施例7，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Tf-5-Larotrectinib，收率94％(75.2mmol，59.4g)。路线如下：

实施例9

二氯乙酰氯酯化，制备I-DCAc-2-Larotrectinib

在2000毫升反应瓶中，加入氯仿400mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.9g)，室温搅拌至溶解后，同时添加吡啶(240mmol,19.0g)，和二氯乙酰氯(80mmol，11.79g)，混合物室温搅拌反应2小时小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，饱和氯化铵溶液(100mL)洗涤，饱和碳酸氢钠洗涤，水洗涤，无水硫酸镁干燥，减压浓缩去溶剂，剩余物用丙酮-石油醚(5：2，110mL)结晶，得到产物白色固体I-DCAc-2-Larotrectinib，收率91.6％(73.28mmol，47.43g)。路线如下：

实施例10

二氯乙酰氯酯化，制备I-DCAc-5-Larotrectinib

制备方法同实施例9，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-DCAc-5-Larotrectinib，收率91％(73mmol，47g)。路线如下：

实施例11

氯甲酸甲酯酯化，制备I-Moc-2-Larotrectinib

在2000毫升反应瓶中，加入氯仿400mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.9g)，室温搅拌至溶解后，同时添加吡啶(240mmol,19.0g)，和氯甲酸甲酯(80mmol,47.2g)，混合物室温搅拌反应8小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，水洗2次，每次100mL，无水硫酸镁干燥，减压浓缩去溶剂，剩余物用乙酸乙酯-石油醚(6：1，140mL)结晶，得到产物白色固体I-Moc-2-Larotrectinib，收率96.5％(77.2mmol，45.88g)。

实施例12

氯甲酸甲酯酯化，制备I-Moc-5-Larotrectinib

制备方法同实施例11，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Moc-5-Larotrectinib，收率91％(73mmol，47g)。路线如下：

实施例13

氯甲酸乙酯酯化，制备I-Eoc-2-Larotrectinib

在2000毫升反应瓶中，加入氯仿400mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.9g)，室温搅拌至溶解后，同时添加N,N-二异丙基乙胺(240mmol,30.48g)和氯甲酸乙酯(80mmol,8.68g)，混合物室温搅拌反应6小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，5％稀盐酸溶液(100mL)洗涤，饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸镁干燥，减压浓缩去溶剂，剩余物用醋酸异丙酯-石油醚(6：1，120mL)结晶，得到产物白色固体I-Eoc-2-Larotrectinib，收率94.3％(75.44mmol，45.89g)。路线如下：

实施例14

氯甲酸乙酯酯化，制备I-Eoc-5-Larotrectinib

制备方法同实施例13，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Eoc-5-Larotrectinib，收率94％(75mmol，75g)。路线如下：

实施例15

Boc酸酐酯化，制备I-Boc-2-Larotrectinib

在2000毫升反应瓶中，加入氯仿400mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.9g)，室温搅拌至溶解后，同时添加DMAP(4mmol,0.5g)，KOH(240mmol,13.44g),Boc酸酐(80mmol,17.46g)，混合物室温搅拌反应16小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，5％稀盐酸溶液(100mL)洗涤，饱和食盐水(100mL)洗涤，无水硫酸镁干燥，减压浓缩去溶剂，剩余物用醋酸异丙酯-石油醚(6：1，120mL)结晶，得到产物白色固体I-Boc-2-Larotrectinib，收率94％(75.2mmol，47.86g)。路线如下：

实施例16

Boc酸酐酯化，制备I-Boc-5-Larotrectinib

制备方法同实施例15，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Boc-5-Larotrectinib，收率94％(75mmol，47g)。

实施例17

氯甲酸-2,2,2-三氯乙酯(Troc)酯化，制备I-Troc-2-Larotrectinib，路线如下：

在500毫升反应瓶中，加入DCM 150mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)和吡啶＝79(2.5eq,200mmol,15.80g,)，室温搅拌5分钟，滴加氯甲酸-2,2,2-三氯乙酯(C3H2Cl4O2＝211.85,1.2eq,96mmol,13.66g,20.34mmol)溶解于DCM(30ml)的溶液，室温搅拌3小时，TLC中控，反应完毕后，混合物倒入水中，分出有机层，3％HCl洗涤，饱和碳酸氢钠洗涤，食盐水(80gx3)洗涤三次，有机相干燥经过无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩至粘稠状，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物白色固体I-Troc-2-Larotrectinib(收率91.2％,51.93g)。

实施例18

氯甲酸-2,2,2-三氯乙酯(Troc)酯化，制备I-Troc-5-Larotrectinib

制备方法同实施例17，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Boc-5-Larotrectinib，收率91％(72.8mmol，51g)。

实施例19

三甲基硅乙氧羰基氯(Teoc)酯化，制备I-Teoc-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入二氯甲烷150mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)和吡啶＝79(2.5eq,200mmol,15.80g,)，降低温度至0-5度，缓慢滴加三甲基硅乙氧羰基氯(Teoc)(C₆H₁₃ClO₂Si＝180.70,2.0eq,28.91g,160mmol)溶解于DCM(30ml)的溶液，滴加完毕，室温下继续搅拌3小时，TLC中控，反应完毕后，加入甲醇5mL,室温下搅拌反应半小时，混合物倒入水中，分出有机层，3％HCl洗涤，饱和碳酸氢钠洗涤，食盐水(80gx3)洗涤三次，有机相干燥经过无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩至粘稠状，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物白色固体I-Teoc-2-Larotrectinib(收率83.6％,45.52g)。

实施例20

三甲基硅乙氧羰基氯(Teoc)酯化，制备I-Teoc-5-Larotrectinib

制备方法同实施例19，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Teoc-5-Larotrectinib，收率83％(66.4mmol，45g)。

实施例21

叔丁基二甲基氯硅烷醚化，制备I-TBS-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入DMF 150mL，冷却至零度，依次加入化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)，叔丁基二甲基氯硅烷(TBS-Cl，C₆H₁₅ClSi＝150.72)(1.3eq，104mml,15.67g),和咪唑(C₃H₄N₂＝68.08，1.5eq，120mmol,8.17g)，混合物室温下搅拌反应至转化完全(TLC跟踪)通常过夜，混合物以等体积氯仿稀释，水洗涤三次，盐水洗涤1次。有机层干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-TBS-2-Larotrectinib(86.8％,45.17g)

实施例22

叔丁基二甲基氯硅烷醚化，制备I-TBS-5-Larotrectinib

制备方法同实施例21，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-TBS-5-Larotrectinib，收率86％(68.8mmol，45g)。

实施例23

三异丙基氯甲硅烷醚化，制备I-TIPS-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入DMF 150mL，冷却至零度，依次加入化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)，三异丙基氯甲硅烷(TIPSCl，C9H21ClSi＝192.8,1.3eq,104mmol,20.05g)，和咪唑(C3H4N2＝68.08，1.3eq，104mmol,7.07g)，混合物室温下搅拌反应至转化完全(TLC跟踪)通常过夜，混合物以等体积氯仿稀释，水洗涤三次，盐水洗涤1次。有机层干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-TIPS-2-Larotrectinib(88.8％,49.21g)。

实施例24

三异丙基氯甲硅烷醚化，制备I-TIPS-5-Larotrectinib

制备方法同实施例23，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-TIPS-5-Larotrectinib，收率88％(70.4mmol，49g)。

实施例25

叔丁基二苯基氯硅烷醚化，制备I-TBDPS-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入THF 100mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)，加入咪唑(2eq，160mmol,10.89g)，搅拌反应半小时后，加入叔丁基二苯基氯硅烷(TBDPSCl，1.5eq，120mmol,32.98g),混合物在25度下，搅拌反应至完全(TLC跟踪)，混合物以300mL氯仿稀释，加入氯化铵溶液(100mL，含有37.2g氯化铵)洗涤1次，饱和碳酸氢钠洗涤2次,每次100ml，盐水(100ml)洗涤1次，有机相干燥(无水硫酸镁)，过滤，混合物减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-TBDPS-2-Larotrectinib(85.7％,53.12g)。

实施例26

叔丁基二苯基氯硅烷醚化，制备I-TBDPS-5-Larotrectinib

制备方法同实施例25，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-TBDPS-5-Larotrectinib，收率86％(68.8mmol，53g)。

实施例27

对甲氧苄基醚化PMB-(p-Methoxybenzyl)ether，制备I-PMB-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入DMF 100mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)溶解后的溶液，在氮气保护下，滴加到冷却至零度的钠氢(1.3eq,104mmol,2.5g)溶解在DMF(20mL)的溶液中，混合物在零度下搅拌30分钟，对甲氧苄基溴(1.3eq,104mmol,201.0g)滴加到上述溶液中，添加催化量量冠醚，反应液在室温下继续搅拌16小时，TLC跟踪至反应完成，缓慢添加甲醇淬灭反应，溶液用氯仿和水稀释，水洗3次，盐水洗涤2次，有机层用无水硫酸钠干燥，混合物减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-PMB-2-Larotrectinib(82.8％,44.15g)。

实施例28

对甲氧苄基醚化PMB-(p-Methoxybenzyl)ether，制备I-PMB-5-Larotrectinib

制备方法同实施例27，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-PMB-5-Larotrectinib，收率83％(66.4mmol，43.6g)。

实施例29

氯甲基甲醚醚化，制备I-MOM-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，氮气保护下，加入无水DCM 180mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)，无水N,N-二异丙基乙胺(2.0eq，160mmol,20.68g),反应混合物冷却至零度，加入氯甲基甲醚(MOM-Cl，1.5eq,120mmol,9.66g)，混合物升至室温，搅拌反应完全(TLC跟踪)，大约需要8小时以上，加入氯化铵溶液(100mL，含有37.2g氯化铵)洗涤1次，饱和碳酸氢钠洗涤2次,每次100ml，盐水(100ml)洗涤1次，盐水洗涤1次，有机相无水硫酸镁干燥，过滤，混合物减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)，得到产物I-MOM-2-Larotrectinib(74.4％,34.54g)。

实施例30

氯甲基甲醚醚化，制备I-MOM-5-Larotrectinib

制备方法同实施例29，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-MOM-5-Larotrectinib，收率74％(59mmol，34g)。

实施例31

甲氧基乙氧基甲基氯醚化，制备I-MEM-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入干燥的DCM 180mL，化合物I-2-Larotrectinib(0.8mmol)，甲氧基乙氧基甲基氯(MEM-Cl，1.5eq,120mmol,14.95g)，加入N,N-二异丙基乙胺(1.5eq，120mmol,15.51g),反应混合物室温搅拌反应完全(TLC跟踪)，大约需要5小时，反应混合物加入DCM(180mL)稀释，混合物水洗涤2次,每次100mL，盐水(100mL)洗涤1次，有机相干燥(无水硫酸钠)，过滤，混合物减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-MEM-2-Larotrectinib(76.8％,38.37g)。

实施例32

甲氧基乙氧基甲基氯醚化，制备I-MEM-5-Larotrectinib

制备方法同实施例30，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-MEM-5-Larotrectinib，收率76％(60.8mmol，38g)。

实施例33

2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯醚化，制备I-SEM-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入DCM180mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)，N,N-二异丙基乙胺(320mmol,41.36g),反应混合物在25度下，加入2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯(SEM-Cl，240mmol,40.01g)，混合物在25度下，搅拌反应至完全(TLC跟踪)，加入氯化铵溶液(100mL，含有37.2g氯化铵)洗涤1次，饱和碳酸氢钠洗涤2次,每次100ml，盐水(100ml)洗涤1次，有机相无水硫酸镁干燥，过滤，混合物减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)，得到产物I-SEM-2-Larotrectinib(86.8％,46.28g)。

实施例34

2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯醚化，制备I-SEM-5-Larotrectinib，

制备方法同实施例33，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-SEM-5-Larotrectinib，收率86％(68.8mmol，46g)。

实施例35

四氢吡喃醚化，制备I-THP-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入DCM 150mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)和对甲苯磺酸吡啶盐(0.40g,1.56mmol)，搅拌5分钟，滴加3,4-二氢-2H-吡喃(13.66g,168.46mmol)溶解于DCM(50ml)的溶液，室温搅拌过夜，食盐水(80gx3)洗涤三次，有机相干燥经过无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩至粘稠状，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-THP-2-Larotrectinib(98.6％,48.94g)。

实施例36

四氢吡喃醚化，制备I-THP-5-Larotrectinib，

制备方法同实施例35，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-THP-5-Larotrectinib，收率98％(78.4mmol，48g)。

实施例37

1-乙氧基乙醇乙酸酯(EE)醚化，制备I-EE-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入DCM 150mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g),对甲苯磺酸吡啶盐(0.40g,1.56mmol)，和1-乙氧基乙醇乙酸酯(C6H12O3＝132.16，1.5eq，120mmol，15.86g)，室温搅拌1.5h，食盐水(80gx3)洗涤三次，有机相经过无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-EE-2-Larotrectinib(85.7％,41.72g)。

实施例38

1-乙氧基乙醇乙酸酯(EE)醚化，制备I-EE-5-Larotrectinib，

制备方法同实施例37，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-EE-5-Larotrectinib，收率85％(68mmol，41g)。

实施例39

烯丙基磺酰氯醚化，制备I-Als-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入DCM 180mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)，冷却至-30度，加入烯丙基磺酰氯Als(C3H5ClO2S＝140.58,2.5eq，200mmol,28.12g),在此温度下反应2小时后，反应混合物升至室温搅拌反应完全(TLC跟踪)，大约需要6小时，反应混合物减压浓缩，剩余物溶解在乙酸乙酯(120mL)中，混合物饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次，每次(80mL)，盐水(80mL)洗涤1次，有机相干燥(无水硫酸钠)，过滤，混合物减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-Als-2-Larotrectinib(86％,44.06g)。

实施例40

烯丙基磺酰氯醚化，制备I-Als-5-Larotrectinib，

制备方法同实施例39，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-Als-5-Larotrectinib，收率86％(68.8mmol，44g)。

实施例41

对甲氧基苯酚醚化PMP-(p-Methoxyphenyl)ether，制备I-PMP-2-Larotrectinib

在500毫升反应瓶中，加入THF 100mL，化合物I-2-Larotrectinib(80mmol，42.91g)，三苯基磷(1.3eq,104mmol,31.65g),偶氮二甲酸二乙酯(1.3eq,104mmol,18.11g)，对甲氧基苯酚(3eq,240mmol,29.79g)，反应混合物加热至80度，搅拌反应至完全(TLC跟踪)，大约需要2小时，混合物减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得到产物I-PMP-2-Larotrectinib(81.3％,41.6g)。

实施例42

对甲氧基苯酚醚化PMP-(p-Methoxyphenyl)ether，制备I-PMP-5-Larotrectinib

制备方法同实施例41，原料采用化合物I-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I-PMP-5-Larotrectinib，收率81％(64.8mmol，43.6g)。

步骤二：标记前体的制备

实施例43

制备标记前体I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib

在10mL反应瓶中加入三氟乙酸0.39mL，氯仿0.13mL，搅拌下，向混合溶液中加入脲-过氧化氢复合物(CO(NH₂)₂·H₂O₂＝94.07,1.36g,14.5mmol),I-Bz-2-Larotrectinib(70.45mg，0.11mmol)，混合物室温搅拌60min，真空浓缩去溶剂，向剩余物中加入乙醇0.8mL，然后加入含有SPIAd(25.3mg，0.11mmol)的10％碳酸钠溶液(0.5mL)，并再用10％碳酸钠溶液(0.3mL)调节pH值至9，混合物室温搅拌反应70min，然后加入5mL水稀释，以DCM萃取三次，每次5mL，合并有机层，无水硫酸镁干燥，真空浓缩，剩余物硅胶柱层析(含有0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗涤)得到标记前体I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib白色固体(18.32mg，19％得率)。

实施例44

类似实施例43的方法制备I(III)-SPIAd-Bz-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Bz-5-Larotrectinib，收率19％(18mmol，18mg)。

实施例45

制备标记前体I(III)-SPIAd-Piv-2-Larotrectinib

在10mL圆底烧瓶中，添加三氟乙酸酐(C₄F₆O₃＝210.04，1.511C g/mL,0.068mL,0.489mmol，102.75mg),三氟乙酸(CF₃COOH＝114.02，1.5351g/cm³,0.18mL,0.276g,2.43mmol),搅拌下，慢慢添加脲-过氧化氢(1.125mmol,106mg)反应放热，控制体系温度低于30℃，加完后，再加入I-Piv-2-Larotrectinib(155.12mg，0.25mmol)，反应混合物冰水浴冷却至零度左右，随后缓慢添加无水硫酸钠(41mg,0.5mmol)，加完后,反应混合物升温至40℃反应1-6小时，TLC检测原料I-Piv-2-Larotrectinib反应完毕，然后加水2.5mL稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，无水硫酸镁干燥，过滤减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱)，得到中间体I-Piv-TfAc-2-Larotrectinib白色固体(143.91mg，68％得率)。

在10mL圆底烧瓶中，添加Na₂CO₃(98.58mg,0.93mmol),MeCN(0.52ml),SPIAd(39.1mg,0.17mmol)，非均相混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌5分钟，混合物成乳白色悬浮液。中间体I-Piv-TfAc-2-Larotrectinib(143.91mg，0.17mmol)一次性加入到上述激烈搅拌的混合物中，并在零度下连续搅拌反应2小时，反应混合物逐渐变成浓稠的奶油混合物。添加水10mL,混合物再搅拌1分钟，过滤除去米黄色双相溶液中蓬松的白色悬浮物，滤饼水洗涤2次，每次5mL,每次洗涤时均需要将水抽干，滤饼再用乙醚(10mL)洗涤1次，高真空干燥得到标记前体物I(III)-SPIAd-Piv-2-Larotrectinib类白色固体(113.33mg,78％,2步总收率53％),m.p.100度(分解)。

实施例46

类似实施例45的方法制备I(III)-SPIAd-Piv-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Piv-5-Larotrectinib，收率78％(113mg，2步总收率53％)。

实施例47

制备标记前体I(III)-SPIAd-Ac-2-Larotrectinib

在2mL圆底烧瓶中，添加三氟乙酸酐(0.068mL,0.489mmol，102.75mg),三氟乙酸(0.18mL,0.276g,2.43mmol),氯仿0.18mL,搅拌下，慢慢添加Oxone(136.36mg,0.225mmol)，加完后，再加入I-Ac-2-Larotrectinib(127.25mg，0.22mmol)，反应混合物冰水浴冷却至零度左右，随后缓慢添加无水硫酸镁(60mg,0.5mmol)，加完后,反应混合物室温25℃下反应6小时，TLC检测原料I-Ac-2-Larotrectinib反应完毕，将反应物转入3mL冰水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，食盐水洗涤3次，每次2mL，有机相无水硫酸镁干燥，过滤减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱)，得到中间体I-Ac-TfAc-2-Larotrectinib浅黄色固体(114.68mg，0.143mmol,64.8％得率)。

在2mL圆底烧瓶中，添加NaHCO₃(78.12mg,0.93mmol),丙酮(0.52ml),SPIAd(39.1mg,0.17mmol),非均相混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌5分钟，混合物成乳白色悬浮液。中间体I-Ac-TfAc-2-Larotrectinib(143.91mg，0.17mmol)一次性加入到上述激烈搅拌的混合物中，并在零度下连续搅拌反应2小时，反应混合物逐渐变成黄色，TLC跟踪直到原料转化完毕，滤去不溶物，反应瓶用二氯甲烷洗涤三次，每次0.12mL，洗涤液体淋洗不溶物，收集二氯甲烷黄色液体。减压浓缩(20度下)蒸干二氯甲烷，再高真空度下抽干1小时，得到标记前体物I(III)-SPIAd-Ac-2-Larotrectinib黄色固体(138.15mg,收率46.6％)。

实施例48

类似实施例47的方法制备I(III)-SPIAd-Ac-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Ac-5-Larotrectinib，收率46％(138mg)。

实施例49

制备标记前体I(III)-SPIAd-Tf-2-Larotrectinib

在2mL圆底烧瓶中，添加三氟乙酸酐(0.068mL,0.489mmol，102.75mg),三氟乙酸(0.18mL,0.276g,2.43mmol),氯仿0.18mL,搅拌下，慢慢添加Oxone(136.36mg,0.225mmol)，加完后，再加入I-Tf-2-Larotrectinib(139.12mg，0.22mmol)，反应混合物冰水浴冷却至零度左右，随后缓慢添加无水硫酸镁(60mg,0.5mmol)，加完后,反应混合物室温25℃下反应6小时，TLC检测原料I-Tf-2-Larotrectinib反应完毕，将反应物转入3mL冰水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，食盐水洗涤3次，每次2mL，有机相无水硫酸镁干燥，过滤减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱)，得到中间体I-Tf-TfAc-2-Larotrectinib浅黄色固体(117.46mg，0.137mmol,62.2％得率)。

在2mL圆底烧瓶中，添加K2CO3(128.34mg,0.93mmol),甲醇(0.52ml),SPIAd(39.1mg,0.17mmol),非均相混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌5分钟，混合物成乳白色悬浮液。中间体I-Tf-TfAc-2-Larotrectinib(117.46mg，0.137mmol)一次性加入到上述激烈搅拌的混合物中，并在零度下连续搅拌反应2小时，反应混合物逐渐变成黄色，TLC跟踪直到原料转化完毕，滤去不溶物，反应瓶用二氯甲烷洗涤三次，每次0.12mL，洗涤液体淋洗不溶物，收集二氯甲烷黄色液体。减压浓缩(20度下)蒸干二氯甲烷，再高真空度下抽干1小时，得到标记前体物I(III)-SPIAd-Tf-2-Larotrectinib黄色固体(53.9mg,收率45.4％)。

实施例50

类似实施例49的方法制备I(III)-SPIAd-Tf-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Tf-5-Larotrectinib，收率46％(54mg)。

实施例51

制备标记前体I(III)-SPIAd-CAc-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,搅拌下，添加三氟乙酸0.3mL、三氟乙酸酐(0.9mL)、Oxone(H₃K₅O₁₈S₄＝614.76，101.44mg，0.165mmol),氯仿0.13mL，室温下激烈搅拌均匀，加入I-CAc-2-Larotrectinib(67.41mg，0.11mmol)，产生的混合物冷却至零度，无水醋酸钠(0.53g,6.45mmol)缓慢添加到激烈搅拌的混合物中，加完，混合物加热到40度，激烈搅拌反应2小时，TLC跟踪直到原料转化完毕，混合物冷却到室温，转入2mL水中稀释，二氯甲烷萃取3次，每次3毫升，合并萃取有机相，饱和食盐水洗涤3次，每次3mL,无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，剩余物用正庚烷/乙酸乙酯洗涤，过滤的得到黄色固体I-CAc-TfAc-2-Larotrectinib(57.12mg,0.068mmol,61.9％yield)。

在2mL反应器中，添加KHCO3(93mg,0.93mmol),乙醇(0.52ml),SPIAd(39.1mg,0.17mmol),非均相混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌5分钟，混合物成乳白色悬浮液。中间体I-CAc-TfAc-2-Larotrectinib(57.12mg,0.068mmol)一次性加入到上述激烈搅拌的混合物中，并在零度下连续搅拌反应2小时，反应混合物逐渐变成黄色，TLC跟踪直到原料转化完毕，滤去不溶物，反应瓶用二氯甲烷洗涤三次，每次0.12mL，洗涤液体淋洗不溶物，收集二氯甲烷黄色液体。减压浓缩(20度下)蒸干二氯甲烷，再高真空度下抽干1小时，得到标记前体物I(III)-SPIAd-CAc-2-Larotrectinib黄色固体(26.84mg,收率46.6％)。

实施例52

类似实施例51的方法制备I(III)-SPIAd-CAc-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-CAc-5-Larotrectinib，收率46％(27mg)。

实施例53

制备标记前体I(III)-SPIAd-DCAc-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,搅拌下，添加三氟乙酸0.3mL、三氟乙酸酐(0.9mL)、Oxone(H₃K₅O₁₈S₄＝614.76，101.44mg，0.165mmol),氯仿0.13mL，室温下激烈搅拌均匀，加入I-DCAc-2-Larotrectinib(71.2mg，0.11mmol)，产生的混合物冷却至零度，无水醋酸钠(0.53g,6.45mmol)缓慢添加到激烈搅拌的混合物中，加完，混合物加热到40度，激烈搅拌反应2小时，TLC跟踪直到原料转化完毕，混合物冷却到室温，转入2mL水中稀释，二氯甲烷萃取3次，每次3毫升，合并萃取有机相，饱和食盐水洗涤3次，每次3mL,无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，剩余物用正庚烷乙酸乙酯洗涤，过滤的得到黄色固体I-DCAc-TfAc-2-Larotrectinib(65.32mg,0.075mmol,68％yield)。

在2mL反应瓶中，加入含有辅助酸金刚烷(SPI-Adaman(0.1mmol,23mg)的10％碳酸钠水溶液(w/v.0.75mL,0.33M)，加入乙醇(1mL),随后迅速加入I-DCAc-TfAc-2-Larotrectinib(0.096mmol,84.53mg)，反应混合物室温下，激烈搅拌反应0.5h,TLC跟踪反应至原料转化完全，反应混合物转入2mL水中稀释，二氯甲烷萃取三次，每次3mL，合并有机萃取相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析，用正庚烷/乙酸乙酯＝10/1洗脱，得到标记前体I(III)-SPIAd-DCAc-2-Larotrectinib白色固体(43.16mg,收率46.8％,2步总收率46.8％)。

实施例54

类似实施例53的方法制备I(III)-SPIAd-DCAc-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-DCAc-5-Larotrectinib(43mg,收率47％,2步总收率46.8％)。

实施例55

制备标记前体I(III)-SPIAd-Moc-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,添加三氟乙酸0.36mL、氯仿0.18mL,搅拌下，添加I-Moc-2-Larotrectinib(89.16mg，0.15mmol)、Oxone(110.66mg,0.18mmol)，混合物升温至45度搅拌反应3小时，然后减压浓缩去溶剂，剩余物中添加乙醇1.2mL,SPIAd(34.5mg,0.15mmol)溶解于10％碳酸钠溶液0.68mL,并用10％碳酸钠溶液调节pH12。混合物50度搅拌3小时，TLC跟踪反应至原料转化完全，将反应物转入3mL水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，硫酸镁干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-40％乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱)，得到标记前体I(III)-SPIAd-Moc-2-Larotrectinib白色固体(38.91mg,得率31.3％)。

实施例56

类似实施例55的方法制备I(III)-SPIAd-Moc-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Moc-5-Larotrectinib，收率31％(39mg)。

实施例57

制备标记前体I(III)-SPIAd-Eoc-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,添加三氟乙酸0.36mL、氯仿0.18mL,搅拌下，添加I-Eoc-2-Larotrectinib(91.26mg，0.15mmol)、Oxone(110.66mg,0.18mmol)，混合物升温至37度搅拌反应3小时，然后减压浓缩去溶剂，剩余物中添加乙醇1.2mL,SPIAd(34.5mg,0.15mmol)溶解于10％碳酸钠溶液0.68mL,并用10％碳酸钠溶液调节pH11。混合物室温60度搅拌2小时，TLC跟踪反应至原料转化完全，将反应物转入3mL水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，硫酸镁干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-40％乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱)，得到标记前体I(III)-SPIAd-Eoc-2-Larotrectinib白色固体(33.57mg,得率33.2％)。

实施例58

类似实施例57的方法制备I(III)-SPIAd-Eoc-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Eoc-5-Larotrectinib，收率33％(34mg)。

实施例59

制备标记前体I(III)-SPIAd-Boc-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,加入二氯甲烷0.8mL,搅拌下，添加I-Boc-2-Larotrectinib(89.11mg，0.14mmol)、mCPBA(40mg,0.18mmol)，混合物室温激烈搅拌反应1-2h，TLC跟踪直到原料转化完毕，待用。

在2mL反应器中，加入KOH＝56.1(47.12mg,0.84mmol),二氯甲烷(0.47ml),SPIAd(39.1mg,0.17mmol),非均相混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌5分钟，混合物呈现乳白色悬浮液,溶液酸碱度pH12。将上述待用物料一次性转入到激烈搅拌的混合物中，并在零度下连续搅拌反应2小时，反应混合物逐渐变成黄色，TLC跟踪直到原料转化完毕，滤去不溶物，反应瓶用二氯甲烷洗涤三次，每次0.12mL，洗涤液体淋洗不溶物，收集二氯甲烷黄色液体。减压浓缩(20度下)蒸干二氯甲烷，再高真空度下抽干1小时，得到标记前体物I(III)-SPIAd-Boc-2-Larotrectinib黄色固体(49.74mg,收率40.8％),m.p.88.6度(分解)。

实施例60

类似实施例59的方法制备I(III)-SPIAd-Boc-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Boc-5-Larotrectinib，收率40％(49mg)。

实施例61

制备标记前体I(III)-SPIAd-Troc-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,添加三氟乙酸0.36mL、氯仿0.18mL,搅拌下，添加I-Troc-2-Larotrectinib(106.76mg，0.15mmol)、Oxone(110.66mg,0.18mmol)，混合物升温至70度搅拌反应2小时，然后减压浓缩去溶剂，剩余物中添加乙醇1.2mL,SPIAd(34.5mg,0.15mmol)溶解于10％碳酸钠溶液0.68mL,并用10％碳酸钠溶液调节pH9。混合物室温搅拌70分钟，TLC跟踪反应至原料转化完全，将反应物转入3mL水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，硫酸镁干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-40％乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱)，得到标记前体I(III)-SPIAd-Troc-2-Larotrectinib白色固体(53.92mg,得率38％)。

实施例62

类似实施例61的方法制备I(III)-SPIAd-Troc-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Troc-5-Larotrectinib，收率38％(53mg)。

实施例63

制备标记前体I(III)-SPIAd-Teoc-2-Larotrectinib

在2mL圆底烧瓶中，添加三氟乙酸酐(0.068mL,0.489mmol，102.75mg),三氟乙酸(0.18mL,0.276g,2.43mmol),氯仿0.18mL,搅拌下，慢慢添加Oxone(136.36mg,0.225mmol)，加完后，再加入I-Teoc-2-Larotrectinib(147.73mg，0.22mmol)，反应混合物冰水浴冷却至零度左右，随后缓慢添加无水硫酸镁(60mg,0.5mmol)，加完后,反应混合物室温25度下反应6小时，TLC检测原料I-Teoc-2-Larotrectinib反应完毕，将反应物转入3mL冰水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，食盐水洗涤3次，每次2mL，有机相无水硫酸镁干燥，过滤减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱)，得到中间体I-teoc-TfAc-2-Larotrectinib浅黄色固体(153.96mg，0.173mmol,78.4％得率)。

在10mL圆底烧瓶中，添加KOH(52.08mg,0.93mmol),MeCN(0.52ml),SPIAd(39.1mg,0.17mmol),非均相混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌5分钟，混合物成乳白色悬浮液。中间体I-Teoc-TfAc-2-Larotrectinib(143.91mg，0.17mmol)一次性加入到上述激烈搅拌的混合物中，并在零度下连续搅拌反应2小时，反应混合物逐渐变成浓稠的奶油混合物。添加水10mL,混合物再搅拌1分钟，过滤除去米黄色双相溶液中蓬松的白色悬浮物，滤饼水洗涤2次，每次5mL,每次洗涤时均需要将水抽干，滤饼再用乙醚(10mL)洗涤1次，高真空干燥得到标记前体物I(III)-SPIAd-Teoc-2-Larotrectinib类白色固体(121.31mg,78％,2步总收率61.1％),m.p.115度(分解)。

实施例64

类似实施例63的方法制备I(III)-SPIAd-Teoc-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Teoc-5-Larotrectinib(121mg,78％，2步总收率61％)。

实施例65

制备标记前体I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib

在10mL反应器中,添加三氟乙酸0.39mL、乙腈0.13mL,搅拌下，混合物冷却至零度，添加Oxone(100mg,0.165mmol)，添加I-TBS-2-Larotrectinib(70.2mg，0.11mmol)，混合物零度搅拌反应30分钟，剩余物中添加乙醇0.8mL，SPIAd(25.3mg,0.11mmol)溶解于10％碳酸钠溶液0.5mL，并用10％碳酸钠溶液0.3mL调节pH9。混合物室温搅拌70分钟，然后加水5mL稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，硫酸镁干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱)，得到标记前体I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib白色固体(17.52mg,得率18％)。

实施例66

类似实施例65的方法制备I(III)-SPIAd-TBS-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-TBS-5-Larotrectinib(38mg,30％)。

实施例67

制备标记前体I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib的另一种方法

在2mL反应器中,加入二氯甲烷0.8mL,搅拌下，添加I-TBS-2-Larotrectinib(89.11mg，0.14mmol)、mCPBA(40mg,0.18mmol)，混合物室温激烈搅拌反应1-2h，TLC跟踪直到原料转化完毕，待用。

在2mL反应器中，加入KOH＝56.1(47.12mg,0.84mmol),二氯甲烷(0.47ml),SPIAd(39.1mg,0.17mmol),非均相混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌5分钟，混合物呈现乳白色悬浮液,溶液酸碱度pH12。将上述待用物料一次性转入到激烈搅拌的混合物中，并在零度下连续搅拌反应2小时，反应混合物逐渐变成黄色，TLC跟踪直到原料转化完毕，滤去不溶物，反应瓶用二氯甲烷洗涤三次，每次0.12mL，洗涤液体淋洗不溶物，收集二氯甲烷黄色液体。减压浓缩(20度下)蒸干二氯甲烷，再高真空度下抽干1小时，得到标记前体物I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib黄色固体(38.16mg,总收率30.8％)。

实施例68

类似实施例67的方法制备I(III)-SPIAd-TBS-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-TBS-5-Larotrectinib(38mg,30％)。

实施例69

制备标记前体I(III)-SPIAd-TBDPS-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,添加三氟乙酸0.53mL、氯仿0.18mL,氯化镁(MgCl2，0.95mg,0.01mmol)搅拌下，添加I-TBDPS-2-Larotrectinib(116.22mg，0.15mmol),Oxone(H₃K₅O₁₈S₄＝614.76，136.36mg,0.225mmol)，混合物升温至80℃，搅拌反应3小时，TLC跟踪至原料反应完全，过滤除固体，然后减压浓缩去溶剂，剩余物中添加乙醇1.2mL,SPIAd(34.5mg,0.15mmol)溶解于10％碳酸钠溶液0.68mL,并用10％碳酸钠溶液0.41mL调节pH9。混合物室温搅拌70分钟，TLC跟踪反应完成，将反应物转入3mL水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，无水硫酸镁干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-40％乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱)，得到标记前体I(III)-SPIAd-PMP-2-Larotrectinib白色固体(52.97mg,得率35％)。

实施例70

类似实施例69的方法制备I(III)-SPIAd-TBS-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-TBS-5-Larotrectinib(53mg,35％)。

实施例71

制备标记前体I(III)-SPIAd-TIPS-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,二氯甲烷4mL，搅拌下，添加三氟乙酸酐(0.16mL，0.24g,1.14mmol)、Oxone(67.63mg，0.11mmol),2,2,6,6-四甲基哌啶-氧化物(TEMPO，0.001mmol,0.056mg)、无水氯化锂(LiCl,0.42mg,0.01mmol)，室温下搅拌均匀，加入I-TIPS-2-Larotrectinib(86.33mg，0.11mmol)，产生的混合物室温反应2小时，TLC跟踪反应过程，原料消失后，过滤去除固体物，浓缩有机相后，剩余物硅胶柱层析分离(展开剂：0-50％乙酸乙酯-正庚烷，v/v,洗脱)，收集目标产物洗脱液，浓缩得到无色固体I-TIPS-TfAc-2-Larotrectinib(63.67mg,0.069mmol,63％yield)，

在2mL反应瓶中，加入含有辅助酸金刚烷(SPI-Adaman(0.1mmol,23mg)的10％碳酸钠水溶液(w/v.0.75mL,0.33M)，加入乙醇(1mL),随后迅速加入I-TIPS-TfAc-2-Larotrectinib(0.069mmol,63.67mg)，反应混合物室温下，激烈搅拌反应4h,TLC跟踪反应至原料转化完全，将反应物转入3mL水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(展开剂：0-50％乙酸乙酯-石油醚，v/v,洗脱)，收集目标产物洗脱液，浓缩得到标记前体I(III)-SPIAd-TIPS-2-Larotrectinib白色固体(42.82mg,2步总收率42％)。

实施例72

类似实施例71的方法制备I(III)-SPIAd-TIPS-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-TIPS-5-Larotrectinib(42mg，2步总收率42％)。

实施例73

制备标记前体I(III)-SPIAd-PMB-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,添加三氟乙酸0.53mL、氯仿0.18mL,搅拌下，添加I-PMB-2-Larotrectinib(98.47mg，0.15mmol)，氯化钠(0.59mg,0.01mmol),Oxone(H₃K₅O₁₈S₄＝614.76，138.32mg,0.225mmol)，混合物升温至80℃，搅拌反应3小时，TLC跟踪至原料反应完全，然后减压浓缩去溶剂，剩余物中添加乙醇1.2mL,SPIAd(34.5mg,0.15mmol)溶解于10％碳酸钠溶液0.68mL,并用10％碳酸钠溶液调节pH9。混合物室温搅拌70分钟，TLC跟踪反应完成，将反应物转入3mL水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，无水硫酸镁干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-40％乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱)，得到标记前体I(III)-SPIAd-PMB-2-Larotrectinib黄色固体(44.89mg,得率33.6％)。

实施例74

类似实施例73的方法制备I(III)-SPIAd-PMB-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-PMB-5-Larotrectinib(45mg,34％)。

实施例75

制备标记前体I(III)-SPIAd-MOM-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,乙腈0.4mL，搅拌下，添加Oxone(H₃K₅O₁₈S₄＝614.76，67.63mg，0.11mmol),丙酮0.05mL,室温下搅拌均匀，加入I-MOM-2-Larotrectinib(63.84mg，0.11mmol)，产生的混合物升温至60度，反应2小时，冷却至室温，滴加三氟乙酸酐(0.16mL，0.24g,1.14mmol)，加完，混合物室温反应2小时，TLC跟踪反应过程，原料消失后，过滤去除固体物，剩余物硅胶柱层析分离(展开剂：0-50％乙酸乙酯-正庚烷，v/v,洗脱)，收集目标产物洗脱液，浓缩得到黄色固体I-MOM-TfAc-2-Larotrectinib(48.79mg,0.061mmol,55％yield)，

在2mL反应瓶中，加入含有辅助酸金刚烷(SPI-Adaman,0.1mmol,23mg)的10％碳酸钠水溶液(w/v.0.75mL,0.33M)，加入乙醇(1mL),随后迅速加入I-MOM-TfAc-2-Larotrectinib(0.061mmol,48.79mg)，反应混合物室温下，激烈搅拌反应3h,TLC跟踪反应至原料转化完全，反应混合物转入3mL水中稀释，二氯甲烷萃取三次，每次5毫升，合并有机萃取相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(展开剂：0-50％乙酸乙酯-石油醚，v/v,洗脱)，收集目标产物洗脱液，浓缩得到标记前体I(III)-SPIAd-MOM-2-Larotrectinib白色固体(38.53mg,2步总收率43％)。

实施例76

类似实施例75的方法制备I(III)-SPIAd-MOM-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-MOM-5-Larotrectinib(38mg，2步总收率43％)。

实施例77

制备标记前体I(III)-SPIAd-MEM-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,乙腈0.4mL，搅拌下，添加Oxone(67.63mg，0.11mmol),NaBr(0.011mmol,1.13mg),室温下搅拌均匀，加入I-MEM-2-Larotrectinib(68.69mg，0.11mmol)，产生的混合物升温至60℃，激烈搅拌反应2小时，冷却至室温，滴加三氟乙酸酐(0.16mL，0.24g,1.14mmol,1.511C g/mL)，加完，混合物室温反应2小时，TLC跟踪反应过程，原料消失后，过滤去除固体物，浓缩有机相后，剩余物硅胶柱层析分离(展开剂：0-50％乙酸乙酯-正庚烷，v/v,洗脱)，收集目标产物洗脱液，浓缩得到无色固体I-MEM-TfAc-2-Larotrectinib(52.39mg,0.062mmol,56％yield)

在2mL反应瓶中，加入含有辅助酸金刚烷(SPI-Adaman,0.1mmol,23mg)的10％碳酸钠水溶液(w/v.0.75mL,0.33M)，加入乙醇(1mL),随后迅速加入I-MEM-TfAc-2-Larotrectinib(0.062mmol,52.39mg)，反应混合物室温下，激烈搅拌反应4h,TLC跟踪反应至原料转化完全，反应混合物转入3mL水中稀释，二氯甲烷萃取三次，每次5毫升，合并有机萃取相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(展开剂：0-50％乙酸乙酯-石油醚，v/v,洗脱)，收集目标产物洗脱液，浓缩得到标记前体I(III)-SPIAd-MEM-2-Larotrectinib白色固体(30.23mg,2步总收率32％)。

实施例78

类似实施例77的方法制备I(III)-SPIAd-MEM-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-MEM-5-Larotrectinib(30mg，2步总收率32％)。

实施例79

制备标记前体I(III)-SPIAd-SEM-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,加入乙腈0.13mL、三氟乙酸(0.39mL，5.26mmol,0.6g,1.5351克/厘米³)、Oxone(100mg,0.165mmol)，混合物冰水浴冷却至0-5度搅拌反应0.5小时，缓慢将I-SEM-2-Larotrectinib(73.32mg，0.11mmol)添加到激烈搅拌的混合物中，混合物在0-5度下继续搅拌反应1小时，加入乙醇(0.5mL)稀释，在迅速加入含有辅助酸金刚烷(SPI-Adaman(25.3mg,0.11mmol)的10％碳酸钠溶液(0.1mL)，并用10％碳酸钠溶液调节混合溶液pH9左右(注意：此步骤有气泡产生)。混合物0-5度下搅拌3小时，然后转入5mL水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，硫酸镁干燥，减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析(正庚烷/乙酸乙酯＝10/1)，得到标记前体I(III)-SPIAd-SEM-2-Larotrectinib白色固体(20.81mg,2步总收率21％)。

实施例80

类似实施例79的方法制备I(III)-SPIAd-SEM-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-SEM-5-Larotrectinib(20mg，2步总收率21％)。

实施例81

制备标记前体I(III)-SPIAd-THP-2-Larotrectinib

在1mL反应器中,搅拌下，添加二氯甲烷0.13mL，过氧化叔丁醇(tBuOOH，TBHP，2.79g,31mmol),加入I-THP-2-Larotrectinib(68.25mg，0.11mmol)，产生的混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌1小时，TLC跟踪直到原料转化完毕，待用。

在2mL反应器中，加入KOH(47.12mg,0.84mmol),二氯甲烷(0.47ml),SPIAd(39.1mg,0.17mmol),非均相混合物冰水浴下冷却至零度，激烈搅拌5分钟，混合物呈现乳白色悬浮液。将上述待用物料一次性转入到激烈搅拌的混合物中，并在零度下连续搅拌反应2小时，反应混合物逐渐变成黄色，TLC跟踪直到原料转化完毕，滤去不溶物，反应瓶用二氯甲烷洗涤三次，每次0.12mL，洗涤液体淋洗不溶物，收集二氯甲烷黄色液体。减压浓缩(20度下)蒸干二氯甲烷，再高真空度下抽干1小时，得到标记前体物I(III)-SPIAd-THP-2-Larotrectinib黄色固体(27.08mg,收率28.8％)。

实施例82

类似实施例81的方法制备I(III)-SPIAd-THP-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-THP-5-Larotrectinib(27mg,28％)。

实施例83

制备标记前体I(III)-SPIAd-EE-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,加入氯仿0.13mL、三氟乙酸0.3mL、三氟乙酸酐(0.9mL)、Oxone(H₃K₅O₁₈S₄＝614.76，101.44mg，0.165mmol)、I-EE-2-Larotrectinib(71.2mg，0.11mmol)，冰水浴冷却至零度，激烈搅拌下搅拌均匀，无水醋酸钾(0.53g,6.45mmol)缓慢添加到混合物中，加完，混合物0-5℃继续搅拌反应0.5小时，用水稀释，二氯甲烷萃取，合并萃取有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，剩余物用正庚烷乙酸乙酯洗涤，过滤的得到无色固体I-EE-TfAc-2-Larotrectinib(52.24mg,0.064mmol,58％yield).

在2mL反应瓶中，加入含有辅助酸金刚烷(SPI-Adaman(0.1mmol,23mg)的10％碳酸钠水溶液(w/v.0.75mL,0.33M)，加入乙醇(1mL),随后迅速加入I-EE-TfAc-2-Larotrectinib(0.096mmol,84.53mg)，反应混合物室温下，激烈搅拌反应4h,TLC跟踪反应至原料转化完全，反应混合物转入3mL中稀释，二氯甲烷萃取三次，每次5毫升，合并有机萃取相，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，剩余物经过硅胶柱层析，用正庚烷/乙酸乙酯＝10/1洗脱，得到标记前体I(III)-SPIAd-EE-2-Larotrectinib白色固体(40.60mg,2步总收率43.8％)。

实施例84

类似实施例83的方法制备I(III)-SPIAd-EE-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-EE-5-Larotrectinib(40mg，2步总收率43％)。

实施例85

制备标记前体I(III)-SPIAd-Als-2-Larotrectinib

在2mL反应器中,加入丙酮0.8mL,搅拌下，添加I-Als-2-Larotrectinib(91.91mg，0.14mmol)、mCPBA(62.86mg,0.22mmol)，混合物于10-15度下激烈搅拌反应1-2h，向反应混合物中添加SPIAd(34.5mg,0.15mmol)溶解于10％碳酸钠溶液1.68mL,并用10％碳酸钠溶液调节pH8。混合物于10-15度下激烈搅拌2h，TLC跟踪直到原料转化完毕，反应液转入装有5mL的反应瓶中稀释，二氯甲烷萃取三次，每次5mL，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-40％乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱)，得到标记前体I(III)-SPIAd-Als-2-Larotrectinib黄色色固体(25.72mg,得率21％)。

实施例86

类似实施例85的方法制备I(III)-SPIAd-Als-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-Als-5-Larotrectinib(26mg,21％)。

实施例87

制备标记前体I(III)-SPIAd-PMP-2-Larotrectinib或

在2mL反应器中,添加三氟乙酸0.53mL、氯仿0.18mL,搅拌下，添加I-PMP-2-Larotrectinib(96.37mg，0.15mmol)，氯化钠(0.59mg,0.01mmol),Oxone(H₃K₅O₁₈S₄＝614.76，138.32mg,0.225mmol)，混合物升温至80度，搅拌反应3小时，TLC跟踪至原料反应完全，然后减压浓缩去溶剂，剩余物中添加乙醇1.2mL,SPIAd(34.5mg,0.15mmol)溶解于10％碳酸钠溶液0.68mL,并用10％碳酸钠溶液调节pH9。混合物室温搅拌70分钟，TLC跟踪反应完成，将反应物转入3mL水中稀释，DCM萃取三次，每次5mL，合并有机相，无水硫酸镁干燥，减压浓缩，剩余物硅胶柱层析(0-40％乙酸乙酯-石油醚溶液洗脱)，得到标记前体I(III)-SPIAd-PMP-2-Larotrectinib黄色固体(43.39mg,得率33％)。

实施例88

类似实施例87的方法制备I(III)-SPIAd-PMP-5-Larotrectinib，得到产物白色固体I(III)-SPIAd-PMP-5-Larotrectinib(43mg,33％)。

步骤三：放射性同位素的制备

使用季铵盐(TEABC)代替毒性较大的K₂₂₂，使用乙腈冲洗阴离子交换盒洗脱富集的[¹⁸F]氟化物，脱水干燥时间﹤5min，提供了一条时间短、毒性低、放射化学纯度高的制备方法。[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程如下：

步骤1、制备[¹⁸F]氟化物靶水：[¹⁸F]氟化物靶水通过1⁸O(p,n)¹⁸F核反应生产。使用GE PETTrace回旋加速器(40μA光束为2分钟可产生大约150mCi[¹⁸F]氟化物靶水)。通过氮气压力将[¹⁸F]氟化物靶水递送到¹⁸O-富集水的无菌铅保护热室，用这种方法生产的[¹⁸F]氟化物靶水在用于研究之前,通常用Milli-Q(密理博公司超纯水仪器)超纯化水进一步稀释成1-3mCi/毫升[¹⁸F]氟化物靶水液体。

步骤2、QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)富集[¹⁸F]氟化物：将含有适量的[¹⁸F]氟化物的目标水的等分试样,在氮气流冲洗下，缓慢通过阴离子交换固相萃取盒(QMA)，该阴离子交换固相萃取盒(QMA)事先通过使用NaHCO _3(aq)(8.4％，1mL)和水(20mL，直到pH指示剂为中性)的冲洗而预活化过，将[¹⁸F]氟化物富集在QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)上，将¹⁸O和其它不纯物分离洗脱除去，得到[¹⁸F]氟化物QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)的[¹⁸F]氟源。

步骤3、洗脱QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)上富集的[¹⁸F]氟化物，得到[¹⁸F]氟化物季铵盐或无机盐溶液：使用有机或无机碱(例如，一定数量的四乙基碳酸氢铵，例如8mg)溶解在乙腈和水(1mL，v/v 7:3)或乙腈(1mL)或甲醇(1mL)或乙醇(1mL)中所得的溶液，冲洗富集在QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)上的[¹⁸F]氟化物，将[¹⁸F]氟化物洗脱到用特氟隆衬垫隔膜密封的V形小瓶中，得到[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的乙腈水溶液或乙腈或甲醇溶液。

步骤4、制备干燥的[¹⁸F]氟化物季铵盐或无机盐：将装有[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的乙腈水溶液或乙腈或甲醇或乙醇溶液的特氟隆衬垫隔膜密封的V形小瓶加热至95-110℃，同时使氮气通过P₂O₅-Drierite^TM柱干燥后吹扫V形小瓶，随后通过通气的小瓶排出尾气。当在小瓶中没有液体可见时，将其从热浴中取出，添加无水乙腈(1mL)，并恢复加热直至干燥。将该步骤重复另外三次。然后将小瓶在氮气流下，在室温下冷却，得到干燥的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐，如[¹⁸F]KF/K₂CO₃/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/K₂C₂O₄/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/KOTf、[¹⁸F]Et₄NF、[¹⁸F]Et₄NHCO₃、[¹⁸F]Et₄NOMs、[¹⁸F]Et₄NOTf，其放射性[¹⁸F]氟化物回收率，根据采用的洗脱工艺不同而有差异。

步骤5、[¹⁸F]-Larotrectinib标记物反应体系的构建：取装有干燥的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐(活度计测量(t₀)活度)的V形小瓶，添加所需溶剂(例如DMF)重新溶解，再添加标记前体，在一定条件下反应，得到[¹⁸F]-Larotrectinib未脱保护的标记物的粗品反应液。

步骤6、[¹⁸F]-Larotrectinib未脱保护的标记物脱保护：采用不添加或添加一定量的有机碱或无机碱或有机酸或无机酸至反应液中，在加热条件下脱除羟基保护基，得到[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的粗品反应液。

步骤7、[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的分离纯化：采用半制备HPLC或Waters Sep-Pak C-18小柱纯化制备高纯度的[¹⁸F]-Larotrectinib标记产物，并用溶剂淋洗进无菌真空瓶，60度下氮气吹干20分钟，用盐水重新复配，其中含有100ul，25％的维生素C的水溶液，100ul，20％吐温80的乙醇溶液，即得[18F]-Larotrectinib标记物注射液。

步骤8、[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的分析鉴定：通过放射性HPLC(60:40CH ₃CN:H₂O+0.1N甲酸铵，Phenomenex Luna C₁₈,250×4.6mm,5μm,UV at 254nm；CH₃CN/0.1M NH4·HCO₂(aq)(v/v,7/3)，流速1.0mL/min)和放射性TLC(EtOAc+0～5％EtOH)测定产物标识和纯度(放射化学纯度和化学纯度)。产物的放射化学纯度>90-99％。产物的化学纯度>90-99％。将放射化学产率确定为从在将标记前体加入DMF稀释的[¹⁸F]Et ₄NHCO₃溶液的V型小瓶中的活度量作为最终产物分离的放射性的百分比，并且没有衰变校正。放射化学得率20～45.3(未经衰减校正)，放射化学纯度大于99％，比活度2.56～18Ci/μmol)。

下面通过实施例具体说明：

实施例89、[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐制备工艺

将含有适量的[¹⁸F]氟化物的目标水的等分试样，在氮气流冲洗下，缓慢通过阴离子交换固相萃取盒(QMA)，该阴离子交换固相萃取盒(QMA)事先通过使用NaHCO _3(aq)(8.4％，1mL)和水(20mL，直到pH值为中性)的冲洗而预活化过，将[¹⁸F]氟化物富集在QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)上，将¹⁸O和其它不纯物分离洗脱除去，得到[¹⁸F]氟化物QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)的[¹⁸F]氟源。

使用不同的有机或无机碱溶解在乙腈和水(1mL，v/v 7:3)或乙腈(1mL)或甲醇(1mL)或乙醇(1mL)中所得的溶液，冲洗富集在QMA阴离子交换固相萃取盒(QMA)上的[¹⁸F]氟化物，将[¹⁸F]氟化物洗脱到用特氟隆衬垫隔膜密封的V形小瓶中，得到[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的乙腈水溶液或乙腈或甲醇溶液。

将装有[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的乙腈水溶液或乙腈或甲醇或乙醇溶液的特氟隆衬垫隔膜密封的V形小瓶加热至95-110℃，同时使氮气通过P₂O₅-Drierite^TM柱干燥后吹扫V形小瓶，随后通过通气的小瓶排出尾气。当在小瓶中没有液体可见时，将其从热浴中取出，添加无水乙腈(1mL)，并恢复加热直至干燥。将该步骤重复另外三次。然后将小瓶在氮气流下，在室温下冷却，得到干燥的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐，如[¹⁸F]KF/K₂CO₃/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/K₂C₂O₄/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/KOTf、[¹⁸F]Et₄NF、[¹⁸F]Et₄NHCO₃、[¹⁸F]Et₄NOMs、[¹⁸F]Et₄NOTf，其放射性[¹⁸F]氟化物回收率，根据采用的洗脱工艺不同而有差异。试验数据如(表一、不同洗脱剂和有机或无机碱对[¹⁸F]氟化物洗脱效率的影响)和(表二、不同有机或无机碱的负载量对[¹⁸F]氟化物洗脱效率的影响，以乙腈作为洗脱溶剂)。

表一、不同洗脱剂和有机碱(8mg)或无机碱(8mg)对[¹⁸F]氟化物洗脱效率的影响

表二、不同有机或无机碱用量对[¹⁸F]氟化物洗脱效率的影响，以1mL乙腈作为洗脱溶剂

实施例90

由标记前体I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

方案一、按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，取[¹⁸F]氟源(0.5mL，活度计测量(t₀)活度1.5mCi)QAM[¹⁸F]氟化物，用N,N,N,N-四乙基甲烷磺酸铵(TBAOMs，8.0mg)溶解于1mL乙腈的溶液洗脱氟源QAM[¹⁸F]氟化物阴离子交换固相萃取盒(QMA)至V型小瓶中，所得[¹⁸F]Et₄NOMs的乙腈溶液，经过无水乙腈反复共沸蒸发脱水至干，剩余物用无水DMF(0.4mL)稀释成20mg/mL的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液。

从上述DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib白色固体(4.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至120度反应20分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Bz2--Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入无水K₂CO₃(0.86mg),加热至100度反应10分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液(15μL，1.05g/cm³)滴加到溶液中和至中性。将反应物进一步用HPLC缓冲液(60:40CH₃CN:H₂O+0.1N甲酸铵，2mL)稀释,并通过已经依次用乙醇(1mL)和水(5mL)冲洗而活化的Waters C-18Sep-Pak。用水(2mL)冲洗Sep-Pak，用乙醇(1mL)洗脱所需产物,淋洗进无菌真空瓶，60度下氮气吹干20分钟，用盐水重新复配，其中含有100ul，25％的维生素C的水溶液，100ul，20％吐温80的乙醇溶液，即得[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液。

样品经过放射TLC分析(硅胶板，100％乙酸乙酯展层)确定放射化学转化(RCC)，通过放射性HPLC(60:40CH₃CN:H₂O+0.1N甲酸铵，Phenomenex Luna C-18柱)和放射性TLC(硅胶板，100％乙酸乙酯展层)测定产物标识和纯度。产物的放射化学纯度>93％，化学纯度>95％。并用放射性与非放射活性对照品共注射法，经过放射性检测器和非放射性紫外检测器双重检测器确定出峰位置的一致性标识标记产物。将放射化学产率确定为在将碘鎓前体加入到DMF稀释的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液，从V型小瓶中的活度量中作为最终产物分离的放射性的百分比，并且没有衰变校正。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为28.56％，并且在最终制剂中获得比活度(18.21Ci/μmol)。保护基脱除率95％。

方案二、操作过程同方案一，不同处在于,采用DMF溶液中分出400uL样品分别含有[¹⁸F]KF/K₂CO₃/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/K₂C₂O₄/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/KOTf、[¹⁸F]Et₄NF、[¹⁸F]Et₄NHCO₃、[¹⁸F]Et₄NOMs、[¹⁸F]Et₄NOTf(均为1.35mCi),分别加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib白色固体(4.0mg)的V型反应瓶中。混合物密闭下加热至120度反应20分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Bz-2-Larotrectinib标记产物。后续步骤分别同方案一，得到产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)及比活度见下表三。

表三、不同有机或无机碱用量对[¹⁸F]-2-Larotrectinib放射化学产率及比活度的影响

方案三、操作过程同方案一，不同处在于采用N,N,N,N-四乙基甲烷磺酸铵(TBAOMs，8mg)溶解于1mL乙腈的溶液洗脱氟源QAM[¹⁸F]氟化物阴离子交换固相萃取盒(QMA)至V型小瓶中，所得[¹⁸F]Et₄NOMs的乙腈溶液，经过无水乙腈反复共沸蒸发脱水至干，剩余物用不同无水溶剂DMF(0.4mL)、DMSO(0.4mL)、DMA(0.4mL)、CH3CN(0.4mL)、NMP(0.4mL)稀释成10mg/mL的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液。后续步骤分别同方案一，得到产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)及比活度见下表四。

表四、不同溶剂种类对[¹⁸F]-2-Larotrectinib放射化学产率及比活度的影响

方案四、操作过程同方案一，不同处在于,分别采用不同数量的N,N,N,N-四乙基甲烷磺酸铵(TBAOMs，1mg、4.0mg、8mg、10mg、12mg)溶解于1mL乙腈的溶液洗脱氟源QAM[¹⁸F]氟化物阴离子交换固相萃取盒(QMA)至V型小瓶中，所得[¹⁸F]Et₄NOMs的乙腈溶液，经过无水乙腈反复共沸蒸发脱水至干，剩余物用无水DMF(0.4mL)稀释成10mg/mL的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液。后续步骤分别同方案一，得到产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)及比活度见下表五。

表五、不同有机或无机碱用量对[¹⁸F]-2-Larotrectinib放射化学产率及比活度的影响

方案五、操作过程同方案一，不同处在于,将DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib白色固体(4.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至不同温度100℃、110℃、120℃、135℃、145℃、155℃、160℃分别反应20分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib基本消失。后续步骤分别同方案一，得到产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)及比活度见下表六。

表六、不同反应温度对[¹⁸F]-2-Larotrectinib放射化学产率及比活度的影响

方案六、操作过程同方案一，不同处在于,将DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有不同数量的标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib白色固体(0.5mg、1.0mg、2.0mg、4.0mg、6mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至145℃反应20分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib基本消失。后续步骤分别同方案一，得到产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)及比活度见下表七。

表七、不同标记前体用量对[¹⁸F]-2-Larotrectinib放射化学产率及比活度的影响

方案七、操作过程同方案一，不同处在于,将DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib白色固体(0.5mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下分别加热至120℃、135℃、145℃、155℃、160℃反应不同时间5min、10min、15min、20min,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib基本消失。后续步骤分别同方案一，得到产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)及比活度见下表八。

表八、不同标记反应时间对[¹⁸F]-2-Larotrectinib放射化学产率及比活度的影响

方案八、按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，取[¹⁸F]氟源(0.5mL，活度计测量(t₀)活度1.5mCi)QAM[¹⁸F]氟化物，用N,N,N,N-四乙基甲烷磺酸铵(TBAOMs，8.0mg)溶解于1mL乙腈的溶液洗脱氟源QAM[¹⁸F]氟化物阴离子交换固相萃取盒(QMA)至V型小瓶中，所得[¹⁸F]Et₄NOMs的乙腈溶液，经过无水乙腈反复共沸蒸发脱水至干，剩余物用无水DMF(0.4mL)稀释成20mg/mL的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液。

从上述DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Bz-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入无水叔丁醇钾(KOtBu，0.70mg),加热至80度反应8分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液(15μL，1.05g/cm³)滴加到溶液中和至中性。将反应物进一步用HPLC缓冲液(60:40CH₃CN:H₂O+0.1N甲酸铵，2mL)稀释,并通过已经依次用乙醇(1mL)和水(5mL)冲洗而活化的Waters C-18Sep-Pak。用水(2mL)冲洗Sep-Pak，用乙醇(1mL)洗脱所需产物,淋洗进无菌真空瓶，60度下氮气吹干20分钟，用盐水重新复配，其中含有100ul，25％的维生素C的水溶液，100ul，20％吐温80的乙醇溶液，即得[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物注射液。

样品经过放射TLC分析(硅胶板，100％乙酸乙酯展层)确定放射化学转化(RCC)，通过放射性HPLC(60:40CH₃CN:H₂O+0.1N甲酸铵，Phenomenex Luna C-18柱)和放射性TLC(硅胶板，100％乙酸乙酯展层)测定产物标识和纯度。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。并用放射性与非放射活性对照品共注射法，经过放射性检测器和非放射性紫外检测器双重检测器确定出峰位置的一致性标识标记产物。将放射化学产率确定为在将碘鎓前体加入到DMF稀释的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液，从V型小瓶中的活度量中作为最终产物分离的放射性的百分比，并且没有衰变校正。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为41.82％，并且在最终制剂中获得比活度(27.11Ci/μmol)。

实施例91

类似实施例90的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Bz-5-Larotrectinib制备[18F]-5-Larotrectinib标记物，产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为41.15％，并且在最终制剂中获得比活度(27.13Ci/μmol)。

实施例92

由标记前体I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，取[¹⁸F]氟源(0.5mL，活度计测量(t₀)活度1.5mCi)QAM[¹⁸F]氟化物，用N,N,N,N-四乙基甲烷磺酸铵(TBAOMs，8.0mg)溶解于1mL乙腈的溶液洗脱氟源QAM[¹⁸F]氟化物阴离子交换固相萃取盒(QMA)至V型小瓶中，所得[¹⁸F]Et₄NOMs的乙腈溶液，经过无水乙腈反复共沸蒸发脱水至干，剩余物用无水DMF(0.4mL)稀释成20mg/mL的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液。

从上述DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记产物。

将反应物进一步用HPLC缓冲液(60:40CH₃CN:H₂O+0.1N甲酸铵，2mL)稀释,并通过已经依次用乙醇(1mL)和水(5mL)冲洗而活化的Waters C-18Sep-Pak。用水(2mL)冲洗Sep-Pak，用乙醇(1mL)洗脱所需产物,淋洗进无菌真空瓶，60度下氮气吹干20分钟，用盐水重新复配，其中含有100ul，25％的维生素C的水溶液，100ul，20％吐温80的乙醇溶液，即得[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物注射液。

样品经过放射TLC分析(硅胶板，100％乙酸乙酯展层)确定放射化学转化(RCC)，通过放射性HPLC(60:40CH₃CN:H₂O+0.1N甲酸铵，Phenomenex Luna C-18柱)和放射性TLC(硅胶板，100％乙酸乙酯展层)测定产物标识和纯度。产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。并用放射性与非放射活性对照品共注射法，经过放射性检测器和非放射性紫外检测器双重检测器确定出峰位置的一致性标识标记产物。将放射化学产率确定为在将碘鎓前体加入到DMF稀释的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液，从V型小瓶中的活度量中作为最终产物分离的放射性的百分比，并且没有衰变校正。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.82％，并且在最终制剂中获得比活度(29.82Ci/μmol)。

实施例93

类似实施例92的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-TBS-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.21％，并且在最终制剂中获得比活度(29.81Ci/μmol)。

实施例94

由标记前体I(III)-SPIAd-SEM-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]2--Larotrectinib标记物

此操作同实施例91。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.82％，并且在最终制剂中获得比活度(29.82Ci/μmol)。

实施例95

类似实施例94的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-SEM-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.55％，并且在最终制剂中获得比活度(29.80Ci/μmol)。

再取样经过放射性TLC检测至脱保护完成。反应混合物用5N氢氧化钠(5N，0.2mL)中和,用HPLC流动相(10％乙醇，28mM盐酸，20nM醋酸铵，pH2,0.5mL)稀释。稀释液注入半制备HPLC(静相：哈密顿PRP-1，250x 10mm,10um；流动相同上，3.5mL/min,t_R＝-17min)，分步收集含有产品的洗脱液，用活度计检测活度，并计算分离获得率80％(未计衰减校正)，总时长(从t₀至合成结束EOS)75±2min。放化纯度95-99％。脱保护转化率98％以上。

混合物(2uL)经过TLC薄板层析(展层剂：100％乙酸乙酯)确定标记率(RCC),然后用15mL水稀释，过C18填料的固相萃取小柱，水(24mL)洗脱，乙腈(1.5mL)冲洗收集于微型瓶中。

取混合物(20uL)和氟-19标准对照品(¹⁹F-Larocetrinib)共注射到放射HPLC中，确定氟-18标记产物(¹⁸F-Larocetrinib)。剩余反应混合物，反应混合物用5N氢氧化钠(5N，0.2mL)中和,用HPLC流动相(10％乙醇，28mM盐酸，20nM醋酸铵，pH2,0.5mL)稀释。稀释液注入半制备HPLC(静相：哈密顿PRP-1，250x 10mm,10um；流动相同上，3.5mL/min,t_R＝-17min)，分步收集含有产品的洗脱液，用活度计检测活度，并计算分离获得率80％(未计衰减校正)，总时长(从t₀至合成结束EOS)75±2min。放化纯度95-99％。脱保护转化率98％以上。

实施例96

由标记前体I(III)-SPIAd-TBDPS-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

此操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.80％，并且在最终制剂中获得比活度(29.84Ci/μmol)。

实施例97

类似实施例96的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-TBDPS-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.50％，并且在最终制剂中获得比活度(29.83Ci/μmol)。

实施例98

由标记前体I(III)-SPIAd-TIPS-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

此操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.89％，并且在最终制剂中获得比活度(29.82Ci/μmol)。

实施例99

类似实施例98的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-TIPS-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.23％，并且在最终制剂中获得比活度(29.31Ci/μmol)。

实施例100

由标记前体I(III)-SPIAd-Teoc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

此操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.82％，并且在最终制剂中获得比活度(29.80Ci/μmol)。

实施例101

类似实施例100的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-TPIS-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.27％，并且在最终制剂中获得比活度(29.31Ci/μmol)。

实施例102

由标记前体I(III)-SPIAd-Piv-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Piv-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Piv-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Piv-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入甲醇钠粉末(NaOMe,0.71mg),加热至90度，8分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.83％，并且在最终制剂中获得比活度(29.85Ci/μmol)。

实施例103

类似实施例102的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Piv-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.64％，并且在最终制剂中获得比活度(29.44Ci/μmol)。

实施例104

由标记前体I(III)-SPIAd-Ac-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Ac-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Ac-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Ac-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入甲醇钠粉末(NaOMe,0.11mg),加热至80度，8分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.84％，并且在最终制剂中获得比活度(29.88Ci/μmol)。

实施例105

类似实施例104的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Ac-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.54％，并且在最终制剂中获得比活度(29.25Ci/μmol)。

实施例106

由标记前体I(III)-SPIAd-Tf-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Tf-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Tf-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Tf-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入乙醇钠粉末(NaOEt,0.15mg),加热至80度，6分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.45％，并且在最终制剂中获得比活度(29.65Ci/μmol)。

实施例107

类似实施例106的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Tf-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.78％，并且在最终制剂中获得比活度(29.54Ci/μmol)。

实施例108

由标记前体I(III)-SPIAd-CAc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-CAc-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-CAc-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-CAc-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入乙醇钠粉末(NaOEt,0.15mg),加热至80度，6分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.83％，并且在最终制剂中获得比活度(29.87Ci/μmol)。

实施例109

类似实施例108的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-CAc-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.25％，并且在最终制剂中获得比活度(29.12Ci/μmol)。

实施例110

由标记前体I(III)-SPIAd-DCAc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-DCAc-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-DCAc-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-DCAc-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入甲醇钠粉末(NaOMe,0.11mg),加热至80度，5分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度和化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.85％，并且在最终制剂中获得比活度(29.86Ci/μmol)。

实施例111

类似实施例110的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-DCAc-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.53％，并且在最终制剂中获得比活度(29.24Ci/μmol)。

实施例112

由标记前体I(III)-SPIAd-Moc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Moc-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Moc-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Moc-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入氢氧化钾(KOH,0.37mg),加热至100度，12分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率89.8％以上。产物的放射化学纯度大于96.3％,化学纯度大于91.3％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为35.45％，并且在最终制剂中获得比活度(22.33Ci/μmol)。

实施例113

类似实施例112的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Moc-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率89％，产物的放射化学纯度>96％,化学纯度>91％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为35.56％，并且在最终制剂中获得比活度(22.23Ci/μmol)。

实施例114

由标记前体I(III)-SPIAd-Eoc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Eoc-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Eoc-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Eoc-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入氢氧化钾(KOH,0.37mg),加热至100度，12分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％HCl水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率90.2％以上。产物的放射化学纯度大于97.5％,化学纯度大于90.1％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为32.15％，并且在最终制剂中获得比活度(21.43Ci/μmol)。

实施例115

类似实施例114的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Eoc-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率90％，产物的放射化学纯度>97％,化学纯度>90％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为32.35％，并且在最终制剂中获得比活度(21.14Ci/μmol)。

实施例116

由标记前体I(III)-SPIAd-Boc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Boc-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Boc-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Boc-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入三氟乙酸(CF₃COOH,0.75mg),加热至100度，6分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaOH水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率100％以上。产物的放射化学纯度大于99％,化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为42.35％，并且在最终制剂中获得比活度(28.25Ci/μmol)。

实施例117

类似实施例116的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Boc-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度和化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.35％，并且在最终制剂中获得比活度(29.51Ci/μmol)。

实施例118

由标记前体I(III)-SPIAd-Troc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Troc-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Troc-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Troc-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入乙酸(CH₃COOH,0.35mg),锌粉(Zn，0.82mg),加热至100度，8分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaOH水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率95.8％以上。产物的放射化学纯度大于97.6％,化学纯度大于95％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为38.63％，并且在最终制剂中获得比活度(25.43Ci/μmol)。

实施例119

类似实施例118的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Troc-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率95％，产物的放射化学纯度>97.5％,化学纯度>97.5％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为38.35％，并且在最终制剂中获得比活度(25.41Ci/μmol)。

实施例120

由标记前体I(III)-SPIAd-PMB-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-PMB-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-PMB-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-PMB-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入2,3-二氯-5,6-二氰对苯醌(DQQ,0.0033mmol,0.75mg),加热至100度，12分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaHCO₃水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率91.7％以上。产物的放射化学纯度大于95.6％,化学纯度大于90.7％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为37.43％，并且在最终制剂中获得比活度(23.12Ci/μmol)。

实施例121

类似实施例120的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-PMB-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率95％，产物的放射化学纯度>97.5％,化学纯度>97.5％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为38.35％，并且在最终制剂中获得比活度(25.40Ci/μmol)。

实施例122

由标记前体I(III)-SPIAd-PMP-Larotrectinib制备[¹⁸F]-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-PMP-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-PMP-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-PMP-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入硝酸铈铵(CAN，0.0033mmol,1.81mg),加热至100度，12分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaHCO₃水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率92.21％以上。产物的放射化学纯度大于95.8％,化学纯度大于91.1％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为37.87％，并且在最终制剂中获得比活度(23.52Ci/μmol)。

实施例123

类似实施例122的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-PMP-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率93％，产物的放射化学纯度>95.5％,化学纯度>91.5％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为37.65％，并且在最终制剂中获得比活度(23.81Ci/μmol)。

实施例124

由标记前体I(III)-SPIAd-MOM-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-MOM-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-MOM-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-MOM-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入6N盐酸(0.0033mmol,0.65mg),加热至80度，12分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaHCO₃水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率92.4％以上。产物的放射化学纯度大于95.2％,化学纯度大于91.4％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为36.35％，并且在最终制剂中获得比活度(22.12Ci/μmol)。

实施例125

类似实施例124的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-MOM-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率93％，产物的放射化学纯度>95.8％,化学纯度>91.8％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为36.25％，并且在最终制剂中获得比活度(22.27Ci/μmol)。

实施例126

由标记前体I(III)-SPIAd-MEM-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-MEM-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-MEM-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-MEM-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入溴化镁(0.0033mmol,0.6mg),加热至155度，10分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaHCO₃水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率96.7％以上。产物的放射化学纯度大于96.3％,化学纯度大于96.2％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为37.29％，并且在最终制剂中获得比活度(23.14Ci/μmol)。

实施例127

类似实施例126的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-MEM-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率97％，产物的放射化学纯度>96％,化学纯度>96％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为37.25％，并且在最终制剂中获得比活度(23.21Ci/μmol)。

实施例128

由标记前体I(III)-SPIAd-THP-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-THP-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-THP-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-THP-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入对甲苯磺酸(0.0033mmol,0.56mg),加热至155度，5分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaHCO₃水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率97.5％以上。产物的放射化学纯度大于98.2％,化学纯度大于96.4％。[¹⁸F]-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为41.32％，并且在最终制剂中获得比活度(27.04Ci/μmol)。

实施例129

类似实施例128的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-THP-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率97％，产物的放射化学纯度>99％,化学纯度>97％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为41.55％，并且在最终制剂中获得比活度(27.81Ci/μmol)。

实施例130

由标记前体I(III)-SPIAd-EE-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-EE-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-EE-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-EE-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入对甲苯磺酸(0.0033mmol,0.56mg),加热至155度，5分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaHCO₃水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率99.8％以上。产物的放射化学纯度大于99％,化学纯度大于99％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.14％，并且在最终制剂中获得比活度(28.23Ci/μmol)。

实施例131

类似实施例130的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-EE-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率100％，产物的放射化学纯度>99％,化学纯度>99％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为45.50％，并且在最终制剂中获得比活度(28.51Ci/μmol)。

实施例132

由标记前体I(III)-SPIAd-Als-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物

按照[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的制备流程，制得无水DMF的[¹⁸F]Et₄NOMs溶液(20mg/mL，0.4mL)。从DMF溶液中分出400uL样品,加入到添加有标记前体物I(III)-SPIAd-Als-2-Larotrectinib白色固体(1.0mg)的V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)。混合物密闭下加热至155度反应12分钟,TLC跟踪标记前体物I(III)-SPIAd-Als-2-Larotrectinib基本消失，放射性TLC跟踪反应混合物取样(1-2uL)经过检测有[¹⁸F]-Als-2-Larotrectinib标记产物。

向反应混合物中加入吗啉与35％甲酸溶液(1：1，1.84mg)，添加催化量四苯基磷钯,加热至80度，8分钟，将反应在0℃冰浴中冷却，然后加入10％NaHCO₃水溶液滴加到溶液中和至中性。后续操作同实施例92。脱保护转化率大于99％以上。产物的放射化学纯度大于96.5％,化学纯度大于96.7％。[¹⁸F]-2-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为41.54％，并且在最终制剂中获得比活度(26.72Ci/μmol)。

实施例133

类似实施例132的方法，由标记前体I(III)-SPIAd-Als-5-Larotrectinib制备[¹⁸F]-5-Larotrectinib标记物。产物脱保护率大于99％，产物的放射化学纯度>97％,化学纯度>97％。[¹⁸F]-5-Larotrectinib的未校正的放射化学产率相对于V型反应瓶中([¹⁸F]Et₄NOMs通常为1.35mCi)为41.75％，并且在最终制剂中获得比活度(26.71Ci/μmol)。

Claims (5)

1.一种[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液的制备方法，其特征在于，[¹⁸F]-Larotrectinib化合物结构式为：

该方法包括以下步骤：

步骤一：羟基保护：碘代Larotrectinib类似物前体通过酯化反应或醚化反应，将碘代Larotrectinib类似物前体上的羟基通过羟基保护官能团保护，从而得到活性羟基官能团保护的碘代Larotrectinib类似物前体，所述的碘代Larotrectinib类似物前体结构式如下：

羟基保护官能团为三甲基硅基(TMS)、叔丁基二甲基硅基(TBDMS)、三乙基硅基(TES)、叔丁基二苯基硅基(TBDPS)、甲基(Me)、苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、对甲氧基三苯甲基(MMT)、二甲氧基三苯甲基(DMT)、叔丁基(tBu)、甲氧基甲基(MOM)、2-甲氧基乙氧基甲基(MEM)、甲硫基甲基(MTM)、苄氧基甲基(BOM)、对甲氧基苄基(PMB)、对甲氧基苄氧基甲基(PMBOM)、3,4-二甲氧基苄基(DMB)、四氢吡喃基(THP)、甲氧羰基(Moc)、乙氧羰基(Eoc)、叔丁氧羰基(Boc)、苄氧羰基(Cbz)、9-芴甲氧基羰酰基(Fmoc)、乙酰基(Ac)、三氟乙酰基(TfAc)、氯乙酰基(CAc)、二氯乙酰基(DCAc)、苯甲酰基(Bz)、特戊酰基(Pv)、甲磺酰基(Ms)、苄基磺酸酰基(Bs)、烯丙基磺酸酰基(Bs)、烯丙基氧羰基(Als)、烯丙氧羰基、C1-16烷酰基、C2-16烯酰基、C3-6炔酰基、C4-10环烷基、C7-16芳酰基、C4-10杂环烷酰基；

步骤二：标记前体制备：将步骤一制得的活性羟基被保护的碘代Larotrectinib类似物前体，与三氟乙酸或三氟乙酸酐、有机溶剂、氧化剂进行反应，使I被三氟醋酸根活化；随后与金刚烷取代的辅助酸SPIAd反应制得标记前体；

所述的有机溶剂为氯仿、二氯甲烷、乙腈、丙酮、过氧化叔丁醇中的一种或几种；

所述的氧化剂为脲-过氧化氢复合物、Oxone、2,2,6,6-四甲基哌啶-氧化物或mCPBA；

步骤三：氟-18标记产物的制备：

(1)制备[¹⁸F]氟化物靶水：[¹⁸F]氟化物靶水通过1⁸O(p,n)¹⁸F核反应生产，使用GEPETTrace回旋加速器，通过氮气压力将[¹⁸F]氟化物靶水递送到¹⁸O-富集水的无菌铅保护热室；

(2)阴离子交换固相萃取盒QMA富集[¹⁸F]氟化物：将含有适量的[¹⁸F]氟化物的目标水的等分试样,在氮气流冲洗下，缓慢通过阴离子交换固相萃取盒QMA，将[¹⁸F]氟化物富集在QMA阴离子交换固相萃取盒QMA上，将¹⁸O和其它不纯物分离洗脱除去，得到阴离子交换固相萃取盒QMA的[¹⁸F]氟源；

(3)洗脱阴离子交换固相萃取盒QMA上富集的[¹⁸F]氟化物，得到[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐溶液：使用冲洗液冲洗富集在阴离子交换固相萃取盒QMA上的[¹⁸F]氟化物，将[¹⁸F]氟化物洗脱到用特氟隆衬垫隔膜密封的V形小瓶中，得到[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的乙腈水溶液或乙腈溶液或甲醇溶液；

(4)制备干燥的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐：将装有[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的乙腈水溶液或乙腈溶液或甲醇溶液的特氟隆衬垫隔膜密封的V形小瓶加热至95-110℃，同时使氮气通过P₂O₅-Drierite^TM柱干燥后吹扫V形小瓶，随后通过通气的小瓶排出尾气；当在小瓶中没有液体可见时，将其从热浴中取出，添加无水乙腈，并恢复加热直至干燥，将该步骤重复另外三次；然后将小瓶在氮气流下，在室温下冷却，得到干燥的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐；

(5)标记前体与氟-18放射性源取代反应：取装有干燥的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐的V形小瓶，添加溶剂重新溶解，再添加标记前体，进行反应，得到[¹⁸F]-Larotrectinib未脱保护的标记物的粗品反应液；

标记物的粗品反应液脱保护：采用不添加或添加一定量的有机碱或无机碱或有机酸或无机酸至[¹⁸F]-Larotrectinib未脱保护的标记物的粗品反应液中，在加热条件下脱除羟基保护基，得到[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的粗品反应液；

[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的粗品反应液分离纯化：将[¹⁸F]-Larotrectinib标记物的粗品反应液通过采用半制备HPLC或Waters Sep-Pak C-18小柱纯化，并用溶剂淋洗进无菌真空瓶，60℃下氮气吹干20分钟，用盐水重新复配，其中含有100ul的25％的维生素C的水溶液，100ul的20％吐温80的乙醇溶液，即得[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液。

2.根据权利要求1所述[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液的制备方法，其特征在于，步骤一的羟基保护方法包括：

(1)苯甲酰氯酯化，反应式如下：

或者，

或；

(2)特戊酰氯酯化，反应式如下：

或；

(3)乙酰氯酯化，反应式如下：

或；

(4)三氟乙酸酐酯化，反应式如下：

或；

(5)氯乙酰氯酯化，反应式如下：

或；

(6)二氯乙酰氯酯化，反应式如下：

或；

(7)氯甲酸甲酯酯化，反应式如下：

或；

(8)氯甲酸乙酯酯化，反应式如下：

或；

(9)Boc酸酐酯化，反应式如下：

或；

(10)氯甲酸-2,2,2-三氯乙酯酯化，反应式如下：

或；

(11)三甲基硅乙氧羰基氯酯化，反应式如下：

或；

(12)叔丁基二甲基氯硅烷醚化，反应式如下：

或；

(13)三异丙基氯甲硅烷醚化，反应式如下：

或；

(14)叔丁基二苯基氯硅烷醚化，反应式如下：

或；

(15)对甲氧苄基醚化，反应式如下：

或；

(16)甲氧甲基醚化，反应式如下：

或；

(17)甲氧基乙氧基甲基氯醚化，反应式如下：

或；

(18)2-(三甲基硅烷基)乙氧甲基氯醚化，反应式如下：

或；

(19)四氢吡喃醚化，反应式如下：

或；

(20)1-乙氧基乙醇乙酸酯(EE)醚化，反应式如下：

或；

(21)烯丙基磺酰氯醚化，反应式如下：

或；

(22)对甲氧基苯酚醚化，反应式如下：

3.根据权利要求1所述[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液的制备方法，其特征在于，步骤二所述标记前体制备，具体包括以下方法：

(1)制备标记前体I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(2)制备标记前体I(III)-SPIAd-Piv-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(3)制备标记前体I(III)-SPIAd-Ac-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(4)制备标记前体I(III)-SPIAd-Tf-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(5)制备标记前体I(III)-SPIAd-CAc-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(6)制备标记前体I(III)-SPIAd-DCAc-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(7)制备标记前体I(III)-SPIAd-Moc-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(8)制备标记前体I(III)-SPIAd-Eoc-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(9)制备标记前体I(III)-SPIAd-Boc-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(10)制备标记前体I(III)-SPIAd-Troc-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(11)制备标记前体I(III)-SPIAd-Teoc-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(12)制备标记前体I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(13)制备标记前体I(III)-SPIAd-TBDPS-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(14)制备标记前体I(III)-SPIAd-TIPS-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(15)制备标记前体I(III)-SPIAd-PMB-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(16)制备标记前体I(III)-SPIAd-MOM-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(17)制备标记前体I(III)-SPIAd-MEM-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(18)制备标记前体I(III)-SPIAd-SEM-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(19)制备标记前体I(III)-SPIAd-THP-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(20)制备标记前体I(III)-SPIAd-EE-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(21)制备标记前体I(III)-SPIAd-Als-2-Larotrectinib，反应式如下：

或；

(22)制备标记前体I(III)-SPIAd-PMP-2-Larotrectinib，反应式如下：

4.根据权利要求1所述[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液的制备方法，其特征在于，步骤三中第(2)步中，阴离子交换固相萃取盒QMA事先使用NaHCO₃溶液和水冲洗而预活化；

第(3)步所述的冲洗液为有机或无机碱溶解在体积比v/v 7:3的乙腈和水、或乙腈、或甲醇中得到，所述的有机或无机碱为四乙基碳酸氢铵；

第(4)步所述的[¹⁸F]氟化物有机盐或无机盐为[¹⁸F]KF/K₂CO₃/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/K₂C₂O₄/K_2.2.2、[¹⁸F]KF/KOTf、[¹⁸F]Et₄NF、[¹⁸F]Et₄NHCO₃、[¹⁸F]Et₄NOMs、[¹⁸F]Et₄NOTf。

5.根据权利要求1所述[¹⁸F]-Larotrectinib标记物注射液的制备方法，其特征在于，步骤三由标记前体制备氟-18标记产物，具体包括以下方法：

(1)由标记前体I(III)-SPIAd-Bz-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(2)由标记前体I(III)-SPIAd-TBS-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(3)由标记前体I(III)-SPIAd-SEM-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(4)由标记前体I(III)-SPIAd-TBDPS-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(5)由标记前体I(III)-SPIAd-TIPS-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(6)由标记前体I(III)-SPIAd-Teoc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(7)由标记前体I(III)-SPIAd-Piv-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(8)由标记前体I(III)-SPIAd-Ac-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(9)由标记前体I(III)-SPIAd-Tf-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(10)由标记前体I(III)-SPIAd-CAc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(11)由标记前体I(III)-SPIAd-DCAc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(12)由标记前体I(III)-SPIAd-Moc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(13)由标记前体I(III)-SPIAd-Eoc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(14)由标记前体I(III)-SPIAd-Boc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(15)由标记前体I(III)-SPIAd-Troc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(16)由标记前体I(III)-SPIAd-Troc-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(17)由标记前体I(III)-SPIAd-PMB-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(18)由标记前体I(III)-SPIAd-MOM-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(19)由标记前体I(III)-SPIAd-MEM-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(20)由标记前体I(III)-SPIAd-THP-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(21)由标记前体I(III)-SPIAd-EE-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：

或；

(22)由标记前体I(III)-SPIAd-Als-2-Larotrectinib制备[¹⁸F]-2-Larotrectinib标记物，反应式如下：