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CN109541215A - 一种肿瘤检测物及其制备方法与应用 - Google Patents

一种肿瘤检测物及其制备方法与应用 Download PDF

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CN109541215A CN201811578161.3A CN201811578161A CN109541215A CN 109541215 A CN109541215 A CN 109541215A CN 201811578161 A CN201811578161 A CN 201811578161A CN 109541215 A CN109541215 A CN 109541215A
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Abstract

本发明涉及分子生物学领域，具体公开了一种肿瘤检测物及其制备方法与应用，所述检测物为“磁珠‑二抗‑抗原‑捕获抗体‑微球”五联复合体。一种肿瘤检测物的制备方法，包括“二抗‑磁珠”复合物的制备，将二抗与超顺磁纳米微球的偶联，二抗可分别与抗原即捕获抗体对应，并与捕获抗体分别结合于该抗原的不同表位上。本发明一种肿瘤检测物主要应用于定量检测肿瘤标志物及同时定量检测不同抗原。解决了现有技术中荧光报告分子容易淬灭，光敏感性低；没有定量分析的准确依据；检测通量存在一定的局限的问题。

Description

一种肿瘤检测物及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及分子生物学领域，具体涉及一种肿瘤检测物及其制备方法与应用。
背景技术
随着生物技术领域各种新技术的不断发展，高通量、准确且快速的检测方法成为生物科学及医学领域的重要研究手段。传统的高通量生物分子检测技术大多基于生物芯片技术，目前常用于生物大分子检测的生物芯片技术是基因芯片和蛋白质芯片。但由于生物芯片的制备成本高、周期长、应用难以普及，使得生物芯片技术的应用存在局限性。
近年来，由美国Luminex公司研制的继基因芯片和蛋白芯片之后的xMAP(FlexibleMulti-Analyte Profiling)技术，针对固相芯片的不足而开发设计，在一定程度上提高了检测的准确性和特异性。xMAP(Flexible Multi-Analyte Profiling)技术又称液相基因芯片技术或微球悬浮点阵技术，是把直径为5.6μm的聚苯乙烯小球用荧光染色的方法进行编码，通过调节两种荧光染料的不同配比获得最多可达100种具有不同特征荧光谱的微球，然后将每种编码微球共价交联上针对特定检测物的抗原、抗体或核酸探针等捕获分子。待加入待检样本后，在液相条件下，靶分子与微球表面交联的捕获分子发生特异性结合，在一个反应孔内可以同时完成多达100种不同的检测反应。最后，微球随液流排成单列传送至液相芯片检测仪自动分析，分析仪通过红、绿两束激光，红色二极管激光激发微球中的分类荧光染料，确定被测物的特异性(定性)；钇铝石榴石激光(YAC)激发结合在微球表面的报告荧光素(如藻红蛋白、Alexa532、Cy3等)，确定被测物的量(定量)，完成对反应的实时定性和定量分析。
液相基因芯片技术虽然增强了反应效率、缩短了反应时间。但xMAP技术也存在一些显著的不足，如：该技术的荧光报告分子容易淬灭，光敏感性低等问题。因此，急需开发一种新型检测物用来弥补现有技术的缺陷。
发明内容
本发明意在提供一种肿瘤检测物及其制备方法与应用，以解决现有技术中荧光报告分子容易淬灭，光敏感性低的问题。
为达到上述目的，本发明的技术方案如下：一种肿瘤检测物，所述检测物为“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体。
此外本技术方案还提供一种肿瘤检测物的制备方法，包括如下步骤，
步骤1：将捕获抗体与多种类型的羧基微球偶联，形成“捕获抗体-微球”二联复合物；
步骤2：将待测样品与“捕获抗体-微球”二联复合物混合形成“抗原-捕获抗体-微球”三联复合物；
步骤3：将二抗与超顺磁纳米微球的偶联，形成“二抗-磁珠”复合物；所述二抗为植物血球凝集素，二抗为分别与抗原及捕获抗体特异性结合的二抗，且二抗与捕获抗体在抗原上的结合位点不同；
步骤4：将步骤2中的“抗原-捕获抗体-微球”三联复合物与步骤3中的“二抗-磁珠”复合物混合，形成“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体，即为检测标记物；
步骤5：步骤4中的五联复合体至于磁力架上，静置后上清液去除掉后，再次溶解沉淀；
步骤6：检测“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体中不同微球的标记信号，确定待测样品中抗原的种类及含量。
本技术方案的原理及有益效果在于：本技术方案中捕获抗体用于与待测样本中的抗原结合，羧基微球用于标记信号，使得在后期检测时，捕获抗体结合了抗原后，在与羧基微球结合时，表面标记有检测荧光，便于筛选。二抗用于与捕获抗体及待测样品中的抗原结合，超顺磁纳米微球用于对结合体进行分离，使得超顺磁纳米微球结合的捕获抗原和待检抗体结合后，在磁力架的磁场作用下能够被吸附而沉淀在反应管底部；而多余的羧基微球和未与待测抗原结合的捕获抗体等复合物则浮于反应管上层清液中，实现成功结合的复合体(待检分子)与未成功结合的复合体(非待检分子)的分离。进而使在后期检测时，理论上均为待检分子，因为非待检分子已经被分离出去，无需将非待检分子也进行检测，因此检测时间相对缩短，避免了荧光基团在长时间的激发光照射下而淬灭的问题，使得荧光强度整体提高。此外，本技术方案中选用植物血球凝集素作为二抗，现有的对植物血球凝集素的应用中，植物血球凝集素通常是单独作为药品来治疗疾病，由于植物血球凝集素的治疗效果较好，根本没有研究其生物特性及结合位点的动机。而发明人在接触到植物血球凝集素后，在了解其功能后做推广应用研究过程中，开创性的研究了生物特异性。由于本方案中的待检样品为全血样品，待检测的抗原通常是在红细胞的表面，而植物血凝素可结合红细胞表面，但结合部位与一般抗原、抗体结合的表面部位不同，不会发生结合冲突，可实现三者的稳定结合。
进一步，羧基微球标记有多个配比的荧光染料。
在羧基微球上标记不同配比的荧光染料，荧光染料的不同配比会使荧光染料的荧光颜色发生改变，使得羧基微球上集成有不同颜色的标记信号，在检测时，可通过不同荧光标记信号的数量确定不同种类抗原的含量，增大了检测范围。
进一步，羧基微球使用前经过活化。
羧基微球经过活化后可与捕获抗体共价偶联，使得制备过程得以进行。
进一步，羧基微球的活化采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液与N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液进行活化。
采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液与N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液进行活化操作简单，且可保证羧基微球的活化效果。
进一步，步骤6中，检测五联复合体中不同微球的标记信号采用液相芯片法。
采用液相芯片法检测不同微球的标记信号，通过测定微球的荧光标记来判定该微球的种类并计数，即可同时测定待检抗原的数量，操作方便，灵敏度高。
进一步，“二抗-磁珠”复合物使用前储存于4℃环境下。
4℃为“二抗-磁珠”复合物存储时的最适温度，可保证“二抗-磁珠”复合物的化学稳定性，避免“二抗-磁珠”复合物在使用前由于存储不当而失效。
进一步，一种利用权利要求1所述的检测物来制备肿瘤检测药物的应用。
具体实施方式
下面通过具体实施方式进一步详细说明：
本发明所用的3种血型抗体A抗体、B抗体、Rh(D)抗体来源于abcam公司；所用二抗为植物血球凝集素来源于Sigma公司；超顺磁纳米微球来源于NEB公司；不同种类的羧基微球购置于上海透景科技公司；1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)、N-羟基硫代琥珀酰亚胺(NHS)均购置于上海生工生物有限公司，选择编号为9号的商品化的微球。
缓冲液配制：
活化缓冲液(Activation buffer)：100mM NaH2PO4，pH 6.3；
偶联缓冲液(Coupling buffer)：50mM HEPES，pH 7.4；
磷酸缓冲液(PBS)：10mM NaH2PO4，150mM NaCl，pH 7.4；
2-吗啉乙磺酸缓冲液(MES)：0.01M，pH 6.0；
2-吗啉乙磺酸吐温溶液(MEST)：0.01M，0.05％Tween-20，pH 6.0；
人癌胚抗原检测方法，检测过程中采用的肿瘤检测物为“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体，“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体的制备方法包括如下步骤：
步骤一：所需微球的活化
1.1全速涡旋羧基微球储存液，形成均一的羧基微球悬液；
1.2用去离子水分别配制5mg/ml的EDC和NHS；
1.3取1ml的微球悬液10000g离心3min，小心移除上清；
1.4加入80μl的活化缓冲液将微球重新悬浮；
1.5分别加入5mg/ml EDC溶液100μl，5mg/ml NHS溶液100μl，混合均匀，于室温(20-25℃)避光，振荡孵育30min。
步骤二：“捕获抗体-微球”二联复合物的制备
2.1用偶联缓冲液将捕获抗体稀释成体积为500μl，浓度为0.2mg/ml的溶液；
2.2将羧基微球在10000g离心3min，小心除去上清；
2.3加入步骤2.1中已经稀释好的抗体溶液；
2.4将活化的羧基微球与抗体溶液，于室温(20-25℃)避光，振荡孵育2h，形成“捕获抗体-微球”二联复合物；
2.5将微球在10000g离心3min，小心除去上清；
2.6加入500μl PBS将微球重新悬浮，10000g离心3min，小心除去上清；
2.7加入1ml PBS/1％BSA(BSA：牛血清白蛋白)将微球重新悬浮；
2.8通过血小板计数器对微球计数；
步骤三：“二抗-磁珠”复合物的制备
3.1取1mg羧基化超顺磁纳米微球，置于洁净离心管中；
3.2用MEST溶液150μl洗涤2次，磁分离后弃上清；
3.3分别取100μl 5mg/ml EDC和NHS溶液与磁珠充分混匀，置于恒温振摇箱中(37℃，150rpm)活化30min，形成“二抗-磁珠”复合物；
3.4用MEST溶液将活化的超顺磁纳米微球洗涤3次，磁分离，弃上清,重新悬浮1mL；
3.5取100μg磁珠，与植物血球凝集素(0.25mg/ml)40μl混匀(溶于MEST)，室温震荡偶联过夜。
3.6将偶联磁珠进行磁分离，取上清于洁净干燥离心管中，在磁珠中加入1％的BSA，振荡封闭30min。
3.7用PBS溶液洗涤4次，磁分离，弃上清,用PBS重新悬浮磁珠，保存于4℃环境下。
步骤四：偶联捕获抗体的微球溶液的配制
取偶联了抗人癌胚抗原的抗体的微球，使微球的终浓度分别为400个/μl，4℃避光保存。
步骤五：“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体的制备及人癌胚抗原的检测
5.1结肠癌患者全血样本20份及正常人全血样本20份；
5.2分别加入偶联抗体的微球溶液及未偶联抗体的微球溶液于96孔酶标板中，20μl/孔；
5.3加入患者、正常人全血样本，20μl/孔；
5.4用排枪上、下混匀混合物，注意控制动作幅度，而后盖上盖子，在室温下避光孵育30min；
5.5加入含有植物血球凝集素的超顺磁纳米微球，20μl/孔；用排枪温柔的上下混匀，盖上盖子，在室温下避光孵育30min，形成“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体；
5.6将96孔酶标板放置于磁力板上，静置3min；
5.7在液相芯片仪(Luminex 200)上，对反应的混合物进行分析，读取荧光标记，每组样本试验重复三次，取平均值。
检测结果及分析
表1CEA抗体微球的计数结果及对比(平均值)
CUTOFF值：2.375
CUTOFF值为本实施例中检测方法的阈值，当检测的比值高于CUTOFF值即为结肠癌患者，上述结果表明，用本发明的方法检测CEA，结合CUTOFF值，从各微球数与内参的比值可以看出，1-20号标本为结肠癌患者标本，其比值均高于CUTOFF值；21-40号标本为正常人标本，其比值均低于CUTOFF值，通过SPSS软件分析可知，该方法的灵敏度及特异性均为100％。
对比实验
选取上述相同的结肠癌患者全血样本20份及正常人全血样本20份，采用临床上常用的人CEA ELISA检测试剂盒(厂家：Sigma公司，型号96T)检测，所有操作步骤按试剂盒说明书中提供的操作步骤进行，检测结果如下表。
检测结果及分析
表1 CEA ELISA检测结果(平均值)
样本编号 OD值 样本编号 OD值
1 1.42 21 0.20
2 0.84 22 0.41
3 0.75 23 0.21
4 1.07 24 0.62
5 0.81 25 0.22
6 1.19 26 0.38
7 0.65 27 0.35
8 1.00 28 0.47
9 1.36 29 0.35
10 1.05 30 0.37
11 0.79 31 0.75
12 1.14 32 0.40
13 1.25 33 0.34
14 0.83 34 0.43
15 1.22 35 0.46
16 1.18 36 0.48
17 1.32 37 0.62
18 1.04 38 0.20
19 1.37 39 0.45
20 0.61 40 0.41
CUTOFF值：0.545
用ELISA检测CEA的检测结果如表2所示，结果表明，1-20号标本为结肠癌患者标本值均高于CUTOF值，21-40号标本中除24、31、37号之外均为检测为正常人标本，但24、31及37号实际为正常人标本，出现了检测错误现象。通过SPSS软件分析可知，该方法的灵敏度为100％，特异性为85％。
在检测样本、检测条件均相同的情况下，本技术方案采用的检测方法检测的灵敏度及特异性均达到了100％，符合肿瘤检测95％以上准确率的要求，而采用ELISA检测时，灵敏度为100％，但特异性仅为85％，低于肿瘤检测的标准要求。因此，本发明的肿瘤检测物特异性强，灵敏度高，可在肿瘤医学研究中提供更稳定的数据来源，提高肿瘤研究的准确度，为肿瘤药物的研发提供理论参考，可信度高。
以上所述的仅是本发明的实施例，方案中公知的具体技术方案和/或特性等常识在此未作过多描述。应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明技术方案的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些也应该视为本发明的保护范围，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准，说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。

Claims (8)

1.一种肿瘤检测物，其特征在于：所述检测物为“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体。
2.一种如权利要求1所述的肿瘤检测物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，
步骤1：将捕获抗体与多种类型的羧基微球偶联，形成“捕获抗体-微球”二联复合物；
步骤2：将待测样品与“捕获抗体-微球”二联复合物混合形成“抗原-捕获抗体-微球”三联复合物；
步骤3：将二抗与超顺磁纳米微球的偶联，形成“二抗-磁珠”复合物；所述二抗为植物血球凝集素，二抗为分别与抗原及捕获抗体特异性结合的二抗，且二抗与捕获抗体在抗原上的结合位点不同；
步骤4：将步骤2中的“抗原-捕获抗体-微球”三联复合物与步骤3中的“二抗-磁珠”复合物混合，形成“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体，即为检测标记物；
步骤5：步骤4中的五联复合体至于磁力架上，静置后上清液去除掉后，再次溶解沉淀；
步骤6：检测“磁珠-二抗-抗原-捕获抗体-微球”五联复合体中不同微球的标记信号，确定待测样品中抗原的种类及含量。
3.根据权利要求2所述的一种肿瘤检测物的制备方法，其特征在于：所述羧基微球标记有多个配比的荧光染料。
4.根据权利要求3所述的一种肿瘤检测物的制备方法，其特征在于：所述羧基微球使用前经过活化。
5.根据权利要求3所述的一种肿瘤检测物的制备方法，其特征在于：所述羧基微球的活化采用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液与N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液进行活化。
6.根据权利要求2所述的一种肿瘤检测物的制备方法，其特征在于：步骤6中，检测五联复合体中不同微球的标记信号采用液相芯片法。
7.根据权利要求2所述的一种肿瘤检测物的制备方法，其特征在于：所述“二抗-磁珠”复合物使用前储存于4℃环境下。
8.一种利用权利要求1所述的检测物来制备肿瘤检测药物的应用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111830251A (zh) * 2020-06-24 2020-10-27 瑞芯智造(深圳)科技有限公司 一种生物样品检测方法及检测试剂盒

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1190464A (zh) * 1995-05-09 1998-08-12 史密丝克莱恩诊断公司 将血液的液体部分与血液的细胞成分分离的装置和方法
US20020045195A1 (en) * 2000-10-13 2002-04-18 Hubscher Thomas T. Method for the visual detection of specific antibodies in human serum by the use of lateral flow assays
CN101445793A (zh) * 2008-12-09 2009-06-03 中国人民解放军南京军区南京总医院 利用冻干制剂快速分离人全血或悬浮红细胞上清的方法
CN102109517A (zh) * 2010-12-14 2011-06-29 邵棠 心脑血管疾病生物标志物的联合检测方法及诊断试剂盒
CN106226513A (zh) * 2016-08-02 2016-12-14 北京乐普医疗科技有限责任公司 一种免疫磁珠定量检测相关抗原的方法及其应用
CN106290867A (zh) * 2016-08-17 2017-01-04 广东省农业科学院动物卫生研究所 一种同时检测五种禽垂直传播疾病抗体的液相芯片及方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1190464A (zh) * 1995-05-09 1998-08-12 史密丝克莱恩诊断公司 将血液的液体部分与血液的细胞成分分离的装置和方法
US20020045195A1 (en) * 2000-10-13 2002-04-18 Hubscher Thomas T. Method for the visual detection of specific antibodies in human serum by the use of lateral flow assays
CN101445793A (zh) * 2008-12-09 2009-06-03 中国人民解放军南京军区南京总医院 利用冻干制剂快速分离人全血或悬浮红细胞上清的方法
CN102109517A (zh) * 2010-12-14 2011-06-29 邵棠 心脑血管疾病生物标志物的联合检测方法及诊断试剂盒
CN106226513A (zh) * 2016-08-02 2016-12-14 北京乐普医疗科技有限责任公司 一种免疫磁珠定量检测相关抗原的方法及其应用
CN106290867A (zh) * 2016-08-17 2017-01-04 广东省农业科学院动物卫生研究所 一种同时检测五种禽垂直传播疾病抗体的液相芯片及方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
QIANQIAN ZHAO等: "Glycan analysis of colorectal cancer samples reveals stage-dependent changes in CEA glycosylation patterns", 《CLINICAL PROTEOMICS》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111830251A (zh) * 2020-06-24 2020-10-27 瑞芯智造(深圳)科技有限公司 一种生物样品检测方法及检测试剂盒
WO2021258618A1 (zh) * 2020-06-24 2021-12-30 瑞芯智造(深圳)科技有限公司 一种生物样品检测方法及检测试剂盒

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