CN109355233A

CN109355233A - 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用

Info

Publication number: CN109355233A
Application number: CN201811473006.5A
Authority: CN
Inventors: 魏婷婷; 王芳; 杨德玉; 赵彭年; 王洪庆; 王远; 李继广
Original assignee: Shenyang Research Institute of Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Shenyang Research Institute of Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 2018-12-04
Filing date: 2018-12-04
Publication date: 2019-02-19
Anticipated expiration: 2038-12-04
Also published as: CN109355233B

Abstract

本发明涉及生物防治和生物工程技术领域，具体的说是一种解淀粉芽孢杆菌SY‑SF‑01及其应用。解淀粉芽孢杆菌以保藏于中国典型培养物保藏中心的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SY‑SF‑01，保藏号为CCTCC M 2018264，保藏时间为2018年5月14日。并进一步提供了解淀粉芽孢杆菌SY‑SF‑01的筛选方法及其在抑制水稻纹枯病菌、黄瓜枯萎病菌、烟草靶斑病菌、红小豆炭疽病菌、棉花黄萎病菌中的应用。本发明菌株对水稻纹枯病具有十分显著的防治效果，活体防效高达90％以上，对烟草靶斑病也有很好的防治效果，离体抑菌率和活体盆栽防效均可达90％以上。

Description

一种解淀粉芽孢杆菌及其应用

技术领域

本发明涉及生物防治和生物工程技术领域，具体的说是一种解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01及其应用。

背景技术

水稻纹枯病是世界上重要的水稻病害之一，也是我国各大稻区的主要病害之一，其病原菌为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)，主要以菌丝体或菌核在土壤中或在病稻草和其它寄主残体上越冬，具有强腐生性和广寄生性，喜高温高湿的特点。水稻纹枯病在水稻整个生育期都可发生，主要危害叶鞘和叶片，严重时也能危害穗部和深入到茎秆。该病害导致水稻结实率下降，千粒重降低，水稻减产可达50％。

烟草靶斑病是由吴元华等首次在国内报道的新病害，该病害也是由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani Kühn)引起的烟草叶片部位主要病害之一，该病害主要发生在烟草旺盛期和成熟期，是一种潜育期短，流行性快的国内烟草新病害，2005年该病害突然大面积发生在我国辽宁省丹东市植烟区，给烟农带来了巨大的经济损失，随后又相继在辽宁北部、广西和黑龙江等地区被相继报道。

芽孢杆菌Bacillus.spp.是一类好氧或兼性厌氧、革兰氏染色阳性、产芽孢的杆状细菌。芽孢杆菌产生的芽孢有较强的抵抗干燥、热和紫外辐射等外界环境压力的能力，同时芽孢杆菌种群中有许多具有特殊功能的菌株，所以在工业、农业、医学和视频加工等领域中有广泛的应用价值。解淀粉芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一个种，是一种好氧性芽孢杆菌，具有广泛的抗菌能力，在环保、种植业、水产养殖业具有良好的应用前景，可降解制革固体废弃物、降解玉米秸秆、缓解肉鸡肝脏氧化损伤、防治植物病害等。

目前，利用芽孢杆菌防治植物病害在国内外已有报道，具有抑菌作用的芽孢杆菌主要有：枯草芽孢杆菌(Bacillus.subtilis),解淀粉芽孢杆菌(Bacillus.amyliliquefaciens)，苏云金芽孢杆菌(Bacillus.thuringiensis)，多粘芽孢杆菌(Bacillus.polymyxa)，巨大芽孢杆菌(Bacillus.megaterium)和短小芽孢杆菌(Bacillus.pumilis)等。国外对水稻纹枯病等真菌病害生物防治方面研究较多的是枯草芽孢杆菌(Bacillus.subtilis),例如Bie等从Bacillus.subtilis发酵液中分离提取出fengycin类似物，能够明显的抑制棉花黄萎病；Lee.H等从枯草芽孢杆菌(Bacillus.subtilis)的发酵液中提取出一种脂肽bamylocin F，在抑制玉米大斑病方面有良好的效果。在国内，郑臻从枯草芽孢杆菌(Bacillus.subtilis)G-7中分离提取出抗菌肽来防治香蕉枯萎病；王静等将解淀粉芽孢杆菌(Bacillus.amyliliquefaciens)B6定殖在番茄根部来防治番茄枯萎病；杨冬静等利用解淀粉芽孢杆菌菌株XZ-1对甘薯黑斑病进行生物防治。由此可见芽孢杆菌防治植物病害种类繁多，没有预见性以及相应的启示。

发明内容

本发明的目的在于提供一种解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01及其应用。

为实现上述目的，本发明采用技术方案为：

一种解淀粉芽孢杆菌，其特征在于：解淀粉芽孢杆菌以保藏于中国典型培养物保藏中心的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SY-SF-01，保藏号为CCTCC M2018264，保藏时间为2018年5月14日。

菌株SY-SF-01是从黑龙江省五常市水稻田的土壤中分离出芽孢杆菌；该菌株经16S rDNA基因测序法鉴定为解淀粉芽孢杆菌；解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01的形态特征：菌株SY-SF-01为革兰氏阳性好氧菌，在蛋白胨培养基平板上形成的菌落呈圆形或近圆形，乳白色，有光泽,伴随培养时间延长，菌落有突起，显微镜下观察菌体杆状，内生芽孢。

一种所述解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01在防治水稻纹枯病、黄瓜枯萎病、烟草靶斑病、红小豆炭疽病或棉花黄萎病中的应用。

一种生防菌剂，生防菌剂含所述解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01。

所述解淀粉芽孢杆菌为该菌株的培养物、培养浓缩物、培养菌悬液、发酵液或发酵分离上清液。

所述发酵液中，解淀粉芽孢杆菌活菌数不小于1×10⁸cfu/mL。

所述发酵液为将所述菌活化后，接种于蛋白胨液体培养基中，于120～200r/min，25～30℃下振荡培养24h～72h，即得所述发酵液；

所述培养浓缩物为将上述发酵液经过离心分离、阳离子交换树脂D101吸附、75％乙醇解吸附、乙酸乙酯萃取，即可得培养浓缩物。

培养本发明菌株的培养条件没有特别限制，培养温度、pH、振荡速度、装液量等适合所述菌株生长即可。通常温度控制在25～30℃、pH在7.0-8.0之间，振荡速度在120～200r/min，装液量一般250mL装80～120mL培养基，培养24～72小时(优选48小时)，最终菌体浓度在1×10⁸～1×10¹⁰cfu/mL。

所述生防菌剂的应用，所述生防菌剂在防治水稻纹枯病、黄瓜枯萎病、烟草靶斑病、红小豆炭疽病或棉花黄萎病中的应用。

所述生防菌剂的应用，所述生防菌剂喷施在水稻或烟草植株上，用于防治水稻纹枯病或烟草靶斑病。

本发明具有如下的优点及有益效果：

本发明解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01具有较广的抑菌谱，对化学药剂难以防控的作物土传病害防治效果明显，对水稻纹枯病菌、黄瓜枯萎病菌、红小豆炭疽病菌、烟草靶斑病菌、棉花枯萎病菌均具有较好的抑制作用，在无公害大田作物和蔬菜种植中可发挥重要价值，并且生产成本低廉、易于生产、实际应用操作简单，在植物病害生物防治方面应用潜力大；具体为：

本发明解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01对水稻纹枯病菌、黄瓜枯萎病菌、红小豆炭疽病菌、烟草靶斑病菌、棉花枯萎病菌等多种病菌有明显的抑菌作用，对水稻纹枯病的防效高达90％以上，本发明还公开了解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01对水稻纹枯病有显著的防治效果，活体生防效果抑菌率为93.2％，且，对水稻纹枯病的室内盆栽防治效果和田间防治效果均达到90％以上；另外，对烟草靶斑病的抑菌率和活体盆栽防治效果，高达90％以上，同时对黄瓜枯萎病也有良好的防治效果。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的保护范围并不限于此。

实施例1、菌株SY-SF-01的分离筛选及鉴定

解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01，由黑龙江省五常市水稻田的土壤中分离获得。

分离方法：将采集的土壤样品10g于装有100mL蒸馏水的250mL三角瓶中，放于摇床中在28℃条件下振荡2d，制成样品悬浮液，取0.5mL样品悬浮液加入盛有4.5ml无菌水离心管中进行10倍逐级稀释，各取0.1mL 10⁴、10⁵、10⁶、10⁷倍稀释液涂布于蛋白胨培养基(蔗糖30g，蛋白胨5g，FeSO₄·7H₂O 0.01g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，KCl 0.5g，K₂HPO₄1g，琼脂粉20g，蒸馏水1000ml，pH＝7.0～7.2)平板上，在28℃恒温培养箱中培养2d,根据形态。大小，色泽等特点，共挑取单菌落180株，反复划线纯化，获得纯系菌株。

筛选方法：采取离体平板对峙培养法测定筛选菌株的抑菌活性，将水稻纹枯病菌接种于PDA培养基平板中央位置，在距离菌饼左右2.5cm处，用蘸有分离菌株的接种环进行划线培养，28℃培养24h后测量病原菌与分离菌株之间抑菌带的宽度，筛选抑菌带宽的菌株，将得到的抑菌能力最强，并且易繁殖的菌株命名为SY-SF-01。

鉴定方法：菌株SY-SF-01为革兰氏阳性好氧菌，在蛋白胨培养基平板上形成的菌落呈圆形或近圆形，乳白色，有光泽,伴随培养时间延长，菌落有突起，显微镜下观察菌体杆状，大小为1.0-1.2μm×0.6-0.8μm，内生芽孢。扩增SY-SF-01菌株的16S rDNA基因，测出其16S rDNA基因序列(见序列表)，登陆http://www.ncbi.nlm.nih.gov网站，在GenBank中进行核苷酸比对，结果显示生防菌SY-SF-01与Bacillusamyloliquefaciens的亲缘关系最近。综合分析确定菌株SY-SF-01为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。

SY-SF-01菌株的16S rDNA序列为：

TGTCACTTCGGCGGCTGGCTCCATAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTG

TTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGT

ATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAGCTTCACGC

AGTCGAGTTGCAGACTGCGATCCGAACTGAGAACAGATTTGTGGGATTGG

CTTAACCTCGCGGTTTCGCTGCCCTTTGTTCTGTCCATTGTAGCACGTGT

GTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCC

TCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCA

ACTAAGATCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACG

ACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACTCTGCCCCCGAAGGG

GACGTCCTATCTCTAGGATTGTCAGAGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTC

TTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCC

CGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGTCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAGT

GCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTAAGGGGCGGAAACCCCCTAACACTTA

GCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCT

CCCCACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGTCGCCTTC

GCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGAA

TTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGTTCCCCAGTTTCCAATGACCCTCC

CCGGTTGAGCCGGGGGCTTTCACATCAGACTTAAGAAACCGCCTGCGAGC

CCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGC

GGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAGGTACCGTCAAGG

TGCCGCCCTATTTGAACGGCACTTGTTCTTCCCTAACAACAGAGCTTTAC

GATCCGAAAACCTTCATCACTCACGCGGCGTTGCTCCGTCAGACTTTCGT

CCATTGCGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTG

TCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTC

GCCTTGGTGAGCCGTTACCTCACCAACTAGCTAATGCGCCGCGGGTCCAT

CTGTAAGTGGTAGCCGAAGCCACCTTTTATGTCTGAACCATGCGGTTCAA

ACAACCATCCGGTATTAGCCCCGGTTTCCCGGAGTTATCCCAGTCTTACA

GGCAGGTTACCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAACATCAGGGAGC

AAGCTCCCATCTGTCCGCTCGACTGCATGTATAGCACGCCC

实施例2、菌株SY-SF-01的进一步平板抑菌效果

发酵培养基：蔗糖30g，蛋白胨5g，FeSO₄·7H₂O 0.01g，MgSO₄·7H₂O0.5g，KCl0.5g，K₂HPO₄ 1g，蒸馏水1000ml，pH＝7.0-7.2

生防菌SY-SF-01发酵液制备：将实施例1中所得的SY-SF-01纯菌株用灭过菌的牙签接种至装液量为50ml的250ml三角瓶中，在28℃，转速为160r/min的恒温摇床上振荡培养48h，得发酵液，备用。

将病原菌水稻纹枯病菌、黄瓜枯萎病菌、红小豆炭疽病菌、烟草靶斑病菌、棉花枯萎病菌接种于PDA培养基上，至长满培养皿，用直径为6mm的打孔器从菌落边缘打出菌饼，接种在空白PDA培养基平板中央位置，在距菌饼等距离的两边接种1μl生防菌SY-SF-01的发酵液，以无菌水为对照，27℃恒温培养并观察对峙培养抑菌情况，每个处理3次重复，待对照PDA培养基平板中病原菌菌丝即将长满全板时，测量病原菌菌落的生长半径，采用以下公式计算菌株SY-SF-01对病原菌真菌生长的相对抑菌率。

相对抑菌率＝(对照菌落半径-处理菌落半径)/对照菌落半径×100％

解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01对水稻纹枯病菌、黄瓜枯萎病菌、红小豆炭疽病菌、烟草靶斑病菌、棉花枯萎病菌均有明显的抑菌作用，结果见表1，其相对抑菌率分别为93.2％、87.5％、89.5％、92.9％、89.7％。

表1解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01对不同病原菌的抑菌效果

实施例3、菌株SY-SF-01的发酵液浓缩液制备

将实施例1中所得的解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01接种于蛋白胨固体培养基上活化菌株，活化后的菌株用灭过菌的牙签接种至装液量为50ml的250ml三角瓶中，在28℃，转速为160r/min的恒温摇床上振荡培养24h，制成发酵种子液，将种子液按体积比5％接种量接入扩大发酵培养基(组成与实施例2中发酵培养基相同)，温度控制在25～30℃、转速在120～200r/min条件下培养24h～72h得发酵液，稀释平板法检测菌体浓度达1×10⁸～1×10¹⁰cfu/mL，1000r/min条件下离心，取离心上清液，用非极性阳离子交换树脂D101进行吸附，每个盛有300ml离心上清液的1000ml三角瓶中加入10g非极性阳离子交换树脂D101，振荡24h，过滤出树脂，用75％乙醇洗脱至无色，洗脱液再用乙酸乙酯萃取，再用旋转蒸发仪去除萃取溶剂，得浓缩液，同时用无菌水将发酵液浓缩液稀释，得到发酵液浓缩液10倍稀释液和发酵液浓缩液100倍稀释液，备用。

蛋白胨固体培养基：蔗糖30g，蛋白胨5g，FeSO₄·7H₂O 0.01g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，KCl 0.5g，K₂HPO₄ 1g，琼脂粉20g，蒸馏水1000ml，pH＝7.0～7.2

发酵培养基：蔗糖30g，蛋白胨5g，FeSO₄·7H₂O 0.01g，MgSO₄·7H₂O0.5g，KCl0.5g，K₂HPO₄ 1g，蒸馏水1000ml，pH＝7.0～7.2

实施例4、菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的盆栽生防效果

在PDA固体培养基(土豆200g，葡萄糖20g，琼脂粉18g，1L蒸馏水)平板上接种水稻纹枯病原菌菌饼，25℃恒温培养，待长出大量菌核备用。

将盐丰47水稻种子播种于育苗钵中，待幼苗长至3叶一心期移栽备用。

将上述实施例3中发酵48h的发酵液浓缩液(原液)、发酵液浓缩液10倍稀释液和发酵液浓缩液100倍稀释液分别均匀喷施在长势一致的移栽后20d的水稻叶片上，每个处理3次重复，空白对照组为喷施等量蒸馏水，24h后，将水稻纹枯病原菌菌核接种于叶鞘内，10d后调查病斑扩展情况。

根据水稻叶鞘及叶片的为害症状分级，水稻纹枯病分级标准如下：

0级：全株无病；

1级：第4叶片及其以下各叶鞘、叶片发病(剑叶为第1片叶)；

3级：第3片叶及其以下各叶鞘、叶片发病；

5级：第2片叶及其以下各叶鞘、叶片发病；

7级：剑叶叶鞘及其以下各个叶鞘、叶片发病；

9级：全株发病，提早死亡。

表2菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的防治效果

由表2可知，发酵时间为48h的菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病有良好的防治效果。

实施例5、发酵时间优化

按实施例2记载的发酵液浓缩液制备方法将发酵时间分别设为24h、36h、48h、60h、72h，分别获得不同发酵时间的发酵液浓缩液(原液)、发酵液浓缩液10倍稀释液和发酵液浓缩液100倍稀释液，再次进行实施例3中的实验，实验结果如下：

表3不同发酵时间的菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的防治效果Ⅰ

表4不同发酵时间的菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的防治效果Ⅱ

表5不同发酵时间的菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的防治效果Ⅲ

表6不同发酵时间的菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的防治效果Ⅳ

表7不同发酵时间的菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的防治效果Ⅴ

由表3～表7可知，发酵时间在24h～72h之间，菌株SY-SF-01的发酵液浓缩液对水稻纹枯病都有很好的防治效果，以发酵时间48h为最佳。

实施例6、菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的田间生防效果

试验设在黑龙江省五常市卫国乡的一水稻田进行，该试验地为多年水稻种植地，水稻品种为辽星1号(粳稻)，并且历年水稻纹枯病均有发生。小区面积为320m²(16m×20m)，随机区组安排，每个处理3次重复，将实施例3中发酵48h的菌株SY-SF-01发酵液浓缩液及其10倍和100倍稀释液按表8安排，采用喷雾法施药，以稲从中上部为重点喷施部位，2018年8月1日施药，2018年9月1日调查各小区的水稻纹枯病发病情况，然后计算病情指数和防治效果，病情指数和防治效果参考《农药田间药效试验准则(一)杀菌剂防治水稻纹枯病》GB/T17980.20-2000进行统计和计算，调查结果如表9所示。

根据植株为害症状程度分级，以叶为单位，每小区随机5点取样，每点调查相连4穴，共20穴，记录调查的总叶数、病叶数和病级数。

水稻纹枯病分级标准

0级：全株无病；

1级：基部叶片叶鞘发病；

2级：第三叶片以下各叶鞘或叶片发病(从顶叶起算第一叶片)；

3级：第二叶片以下各叶鞘或叶片发病；

4级：顶级叶鞘或顶叶发病；

5级：全株发病，枯死。

表8供试药剂试验设计

表9菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对水稻纹枯病的田间防治效果

由表9可知，解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01菌株发酵液浓缩液对田间水稻纹枯病也有很好的防治效果。

实施例7、菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对烟草靶斑病的盆栽生防效果

在PDA固体培养基(土豆200g，葡萄糖20g，琼脂粉18g，1L蒸馏水)平板上接种烟草靶斑病原菌菌饼，26℃恒温培养至长满培养皿，待用。

当烟草NC89长至9叶期时，将上述实施例3中发酵48h的发酵液浓缩液原液、发酵液浓缩液10倍稀释液和发酵液浓缩液100倍稀释液分别喷施在不同的烟草植株叶片上，喷施等量的清水为空白对照，每个处理10次重复，24h后采用针刺法接种烟草靶斑病菌菌饼，菌饼直径为6mm，每株接种第5片和第6片真叶，每片接种3个菌饼，用灭菌后的棉花保湿，48h后去除菌饼和棉花，7d后调查发病率和病情指数，并计算防效。

参考赵艳琴等的温室人工接种烟草靶斑病菌调查病斑直径的方法，病斑分级划分标准为：0级：0.0mm；1级：0.0～1.0mm；3级1.1～2.0mm；5级：2.0～5.0mm；7级：2.01～9.0mm；9级：>9.01mm。

表10菌株SY-SF-01发酵液浓缩液对烟草靶斑病的防治效果

由表8可知，发酵时间为48h的解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01菌株发酵液浓缩液对烟草靶斑病也有很好的防治效果。

以上所述本发明的具体实施方式，并不构成对本发明保护范围的限定。任何根据本发明的技术构思所作出的各种其他相应的改变与变形，均应包含在本发明权利要求的保护范围内。

序列表

<110> 沈阳化工研究院有限公司

<120> 一种解淀粉芽孢杆菌及其应用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1441

<212> DNA

<213> 解淀粉芽孢杆菌 SY-SF-01(Bacillus amyloliquefaciens SY-SF-01)

<400> 1

tgtcacttcg gcggctggct ccataaaggt tacctcaccg acttcgggtg ttacaaactc 60

tcgtggtgtg acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgcg gcatgctgat 120

ccgcgattac tagcgattcc agcttcacgc agtcgagttg cagactgcga tccgaactga 180

gaacagattt gtgggattgg cttaacctcg cggtttcgct gccctttgtt ctgtccattg 240

tagcacgtgt gtagcccagg tcataagggg catgatgatt tgacgtcatc cccaccttcc 300

tccggtttgt caccggcagt caccttagag tgcccaactg aatgctggca actaagatca 360

agggttgcgc tcgttgcggg acttaaccca acatctcacg acacgagctg acgacaacca 420

tgcaccacct gtcactctgc ccccgaaggg gacgtcctat ctctaggatt gtcagaggat 480

gtcaagacct ggtaaggttc ttcgcgttgc ttcgaattaa accacatgct ccaccgcttg 540

tgcgggcccc cgtcaattcc tttgagtttc agtcttgcga ccgtactccc caggcggagt 600

gcttaatgcg ttagctgcag cactaagggg cggaaacccc ctaacactta gcactcatcg 660

tttacggcgt ggactaccag ggtatctaat cctgttcgct ccccacgctt tcgctcctca 720

gcgtcagtta cagaccagag agtcgccttc gccactggtg ttcctccaca tctctacgca 780

tttcaccgct acacgtggaa ttccactctc ctcttctgca ctcaagttcc ccagtttcca 840

atgaccctcc ccggttgagc cgggggcttt cacatcagac ttaagaaacc gcctgcgagc 900

cctttacgcc caataattcc ggacaacgct tgccacctac gtattaccgc ggctgctggc 960

acgtagttag ccgtggcttt ctggttaggt accgtcaagg tgccgcccta tttgaacggc 1020

acttgttctt ccctaacaac agagctttac gatccgaaaa ccttcatcac tcacgcggcg 1080

ttgctccgtc agactttcgt ccattgcgga agattcccta ctgctgcctc ccgtaggagt 1140

ctgggccgtg tctcagtccc agtgtggccg atcaccctct caggtcggct acgcatcgtc 1200

gccttggtga gccgttacct caccaactag ctaatgcgcc gcgggtccat ctgtaagtgg 1260

tagccgaagc caccttttat gtctgaacca tgcggttcaa acaaccatcc ggtattagcc 1320

ccggtttccc ggagttatcc cagtcttaca ggcaggttac ccacgtgtta ctcacccgtc 1380

cgccgctaac atcagggagc aagctcccat ctgtccgctc gactgcatgt atagcacgcc 1440

c 1441

Claims

1.一种解淀粉芽孢杆菌，其特征在于：解淀粉芽孢杆菌以保藏于中国典型培养物保藏中心的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SY-SF-01，保藏号为CCTCC M2018264，保藏时间为2018年5月14日。

2.一种权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01在防治水稻纹枯病、黄瓜枯萎病、烟草靶斑病、红小豆炭疽病或棉花黄萎病中的应用。

3.一种生防菌剂，其特征在于：生防菌剂含权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌SY-SF-01。

4.按权利要求3所述的生防菌剂，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌为该菌株的培养物、培养浓缩物、培养菌悬液、发酵液或发酵分离上清液。

5.按权利要求4所述的生防菌剂，其特征在于，所述发酵液中，解淀粉芽孢杆菌活菌数不小于1×10⁸cfu/mL。

6.根据权利要求4所述生防菌剂，其特征在于，所述发酵液为将所述菌活化后，接种于蛋白胨液体培养基中，于120～200r/min，25～30℃下振荡培养24h～72h，即得所述发酵液；

7.一种权利要求3所述生防菌剂的应用，其特征在于，所述生防菌剂在防治水稻纹枯病、黄瓜枯萎病、烟草靶斑病、红小豆炭疽病或棉花黄萎病中的应用。

8.按权利要求7所述生防菌剂的应用，其特征在于，所述生防菌剂喷施在水稻或烟草植株上，用于防治水稻纹枯病或烟草靶斑病。