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CN109337309B - 储水多孔二氧化硅磁性颗粒及其制备工艺与应用 - Google Patents

储水多孔二氧化硅磁性颗粒及其制备工艺与应用 Download PDF

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CN109337309B CN201811005909.0A CN201811005909A CN109337309B CN 109337309 B CN109337309 B CN 109337309B CN 201811005909 A CN201811005909 A CN 201811005909A CN 109337309 B CN109337309 B CN 109337309B
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Abstract

本发明公开了一种储水多孔二氧化硅磁性颗粒及其制备工艺与应用；其中，储水多孔二氧化硅磁性颗粒包括以下原料：磁性核芯、硅源烷、硅溶胶、pH调节物质和聚乳酸‑羟基乙酸共聚物。所述的反应组合物中，其中pH调节剂可以使硅源烷和硅溶胶不断沉积到磁性核芯的表面，聚乳酸‑羟基乙酸共聚物吸附硅溶胶并使二氧化硅涂层形成网状多孔的结构，由此形成直径为10um或者更小磁性颗粒。本发明的硅磁性颗粒，对有核酸有较高的结合容量，并且对盐离子、蛋白或者其他的杂质吸附少，它们具有特定孔隙率，其结合容量和结合的特异性可已通过选择性地改变其中合成反应的参数而获得。

Description

储水多孔二氧化硅磁性颗粒及其制备工艺与应用
技术领域
本发明涉及生物纳米材料领域，特别涉及一种储水多孔二氧化硅磁性颗粒及其制备工艺与应用。
背景技术
核酸的分离是分子诊断中的重要步骤之一。从样品中分离的核酸质量和数量大大影响了下游诊断应用的成功，临床的应用也要求分离程序的快速和自动化。一些类型的临床和环境样品对核酸的成功分离提出了特别的挑战，例如在剧烈对样品的处理期间的靶核酸的降解可导致下游检测测定中的假阴性结果，对提取的核酸的纯度和得率有更高的要求可以使下游的检测具有更好的灵敏度和可信度。
成功的基于核酸的诊断实验的先决条件是分离没有降解、无抑制剂，杂质较少，核酸浓度较高的核酸，同时需要简单、易于自动化的核酸分离程序。现在流行使用磁性固体支持物分离核酸，特别流行的是基于二氧化硅或者是玻璃修饰的磁性颗粒，通常被称为“磁性玻璃颗粒”或者“磁性硅颗粒”，这种磁性颗粒具有比表面积大、超顺磁性等诸多优势，可以通过外加磁场的作用快速富集，省去了过滤、离心等繁琐的传统操作。商品化的上述磁性颗粒如美国专利US6870047中描述的溶胶-凝胶法(sol-gel)制备的MGP，世界专利WO1996/041811中描述的小于10nm孔径的玻璃表面改性的磁性颜料，欧洲专利EP0757106中提到的以四氧化三铁颗粒为磁性核芯，正硅酸四乙酯水解修饰的磁性硅颗粒。
基于磁性颗粒的核酸纯化程序包括裂解、结合、清洗和洗脱四个步骤，在使用磁性颗粒分离核酸的一般方法中，在样品中的细胞已被破坏以释放核酸后，使样品与磁性颗粒接触以实现核酸与其结合，也就是传统的两步法，也可以在裂解前将磁性颗粒加入样品中，例如将磁性硅颗粒存在于初始的样品容器中，即一步法，磁性颗粒的存在是不影响裂解步骤的。这样的做法可以使核酸的裂解和结合在一步发生，使细胞裂解释放核酸这一步和磁性颗粒与核酸孵育结合这一步骤在同时完成，即核酸在从细胞中释放的同时磁性颗粒也在完成核酸的吸附结合，这样也就缩短了整个核酸纯化程序的时间，这种方式对临床应用是有优势的，尤其是对环境不太稳定的RNA。
但是这种做法也会带来一些问题，核酸的纯度和浓度都没有两步法(裂解、结合分开)的来的要高，这是因为从细胞释放出来核酸的同时也释放了很多的杂质，杂质也会吸附到磁性颗粒的表面，这样使得之后从细胞释放出来的核酸难以再和磁性颗粒表面进行结合了，导致的结果就是核酸浓度和纯度都会有一定程度上的下降，会导致下游应用中出现一些假阴性状况。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术中的不足，提供一种储水多孔二氧化硅磁性颗粒及其制备工艺与应用。本发明的目的之一在于开发一种磁性颗粒能在一步法核酸纯化中应用，并且使核酸的浓度和纯度可以和一步法效果一致。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种储水多孔二氧化硅磁性颗粒，包括以下原料：磁性核芯、硅源烷、硅溶胶、pH调节物质和聚乳酸-羟基乙酸共聚物。
优选的是，所述磁性核芯具有超顺磁性或顺磁性，其包括氧化物或者由氧化铁组成，比如Fe3O4或者γ-Fe2O3，优先为具有超顺磁性的氧化铁颗粒。优选的是，所述硅源烷为四乙氧基硅烷或四甲氧基硅烷。
优选的是，所述硅溶胶为纳米级的二氧化硅颗粒在水中或溶剂中的分散液，其中SiO2的质量分数为20-40％，平均粒径为5-25nm。更为优选的，SiO2的平均粒径为6-12nm
优选的是，所述pH调节物质为酯类或醛类，如乙酸乙酯、甲酸甲酯、尿素、乙酰胺、戊二醛；或为pH的缓冲试剂，如乙酸-乙酸盐缓冲液，氨水-氯化铵溶液；或为四甲基氯化铵。
其中，pH调节物质可以使硅源烷和硅溶胶不断沉积到磁性核芯的表面，由此形成直径为20um或者更小的储水的多孔二氧化硅磁性颗粒。
优选的是，所述储水多孔二氧化硅磁性颗粒中磁性核芯的重量比为20-70％的重量比，二氧化硅的重量比为30-80％。
优选的是，所述储水多孔二氧化硅磁性颗粒的粒径不大于10um，其具有大孔和微孔结构，其比表面积大于20m2/g。进一步优选的，其比表面积大于40m2/g。
进一步优选的，磁性核芯的直径在5nm-5000nm，10-3500nm，15-3000nm，更为优选地直径为20-1000nm的范围内，所述的磁性核芯由氧化物组成，特别是半金属氧化物或者金属氧化物。
本发明中的磁性颗粒为20um或者更小，其由团聚的硅溶胶形成的包覆涂层，也有硅源烷通过pH调节剂以及聚乳酸-羟基乙酸共聚物水解缩合而形成的网状的硅表面，其中磁性核芯基本上被二氧化硅涂层包封，并且磁性核芯为20-70％的重量比，而二氧化硅为30-80％的重量比。其中储水的多孔二氧化硅磁性颗粒结合核酸的能力至少为15ug/mg，这样相应的高核酸结合能力的二氧化硅磁珠可以用于核酸的分离。
本发明的改进的磁性颗粒使用硅源烷、硅溶胶、pH调节物质、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、磁性核芯，所述的方法涉及向硅溶胶、磁性核芯、聚乳酸-羟基乙酸共聚物的水溶液悬浮液中加入pH调节物质及硅源烷，导致受控的二氧化硅的沉积，产生的二氧化硅修饰的磁性颗粒，这种二氧化硅修饰的磁性颗粒表面具有多孔孔径，存储的水份较传统商业化的磁性玻璃颗粒和磁性硅颗粒多，蛋白质或盐离子等杂质吸附较少。
本发明还公开了上述储水多孔二氧化硅磁性颗粒的制备方法，如下：
一种储水多孔二氧化硅磁性颗粒的制备方法，包括以下步骤：
1)将预先制备的磁性核芯加入到去离子水中，再向其中加入硅溶胶以及聚乳酸-羟基乙酸共聚物及去离子水，机械搅拌混合均匀1到3小时；
2)加入pH调节物质后继续反应1到2小时；
3)加入硅源烷，升温至40-80℃，继续反应2-20小时；
4)降至室温并伴随一个1至10小时的老化过程；
5)使用醇和去离子水的混合物对由上述步骤4)得到的磁性颗粒进行清洗。
优选的，所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒的制备方法，包括以下步骤：
1)将5-20质量份的预先制备的磁性核芯加入到100-500质量份的含有0-10质量份的稳定剂去离子水中，再向其中加入1-50质量份的硅溶胶、5-25质量份的聚乳酸-羟基乙酸共聚物及200-2000质量份的去离子水，机械搅拌混合均匀1到3小时；
2)加入pH调节物质后继续反应1到2小时；
3)加入5-40质量份的硅源烷，升温至40-80℃，继续反应2-20小时；
4)降至室温并伴随一个1至10小时的老化过程；
5)使用醇和去离子水的混合物对由上述步骤4)得到的磁性颗粒进行清洗。
其中，所述磁性核芯为氧化铁颗粒，其制备方法为通过共沉淀的方式在铁盐(优选氯化铁和氯化亚铁)中加入碱性物质(如氢氧化钠、氢氧化钾和氨水)将氧化铁颗粒沉淀出来，或者为通过乙酰丙酮铁在高温下分解还原而制备氧化铁颗粒，或者为通过将氯化铁、乙酸钠、乙二醇的混合溶液在高压釜中反应而制得氧化铁颗粒。进一步优选的，生产氧化铁磁性核芯可以在反应组分中直接包覆二氧化硅涂层，而无需预分离或纯化除氧化铁磁性颗粒。
其中，所述稳定剂为柠檬酸钠、柠檬酸钾、EDTA、聚乙二醇、羧甲基纤维素中的一种或者几种的混合物。
其中，上述的机械搅拌的转速为1000-3000rpm，更大的转速会制备出更小粒径的二氧化硅磁性颗粒，更小粒径的二氧化硅磁性颗粒会使磁性颗粒具有更高的比表面积因此带来更大的核酸结合率，同时更小的粒径具有较低的沉降速率，当使用磁性颗粒去分离核酸时，生产具有缓慢沉降特性的二氧化硅磁性颗粒是有利的。
其中，上述聚乳酸-羟基乙酸共聚物会吸附硅溶胶中的二氧化硅颗粒，并使其最终沉积到磁性核芯的表面，形成具有孔径和孔道的能在内部储存大量水分的二氧化硅磁性颗粒。不仅如此，聚乳酸-羟基乙酸共聚物还可以提高磁性核芯的分散性。
其中，上述的聚乳酸-羟基乙酸共聚物与硅溶胶、硅源烷的比例会影响最后磁性颗粒的孔径，硅源烷可以是四乙氧基硅烷或者是四甲氧基硅烷。
其中，本发明生产的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，具有20um或者更小的尺寸，18um或者更小的尺寸，15um或者更小的尺寸，10um或者更小的尺寸，5um或者更小的尺寸。影响粒径的因素为转速、反应的黏度、磁性核芯的粒径以及其他组分的质量比。本发明的方法允许获得具有相对较窄的粒度分布的粒子，优选80％或90％以上的生产的粒子的中值粒径在10um范围内，更有选在7.5um范围内，更多的中值粒径在5um范围内的。
本发明的生产的磁性颗粒表面完全被二氧化硅包封，这防止磁性核芯暴露于周围介质，这有利于防止从颗粒中释放出大量的氧化铁。
如上所述，本发明的磁性颗粒的优势归功于对杂质的吸附较少，同时对核酸的结合能力也较强，本发明还公开了上述储水多孔二氧化硅磁性颗粒的应用，如下：
本发明涉及制备的二氧化硅磁性颗粒用于分离样品中的核酸用途作为本发明的第二个方面。
一种储水多孔二氧化硅磁性颗粒的应用，其应用于分离样品中的核酸，所述的样品为包括含有核酸的各种来源及含有核酸的体外反应混合物。例如PCR产物，体外转录，核酸杂交测定混合物。优选的样品是指生物样品，包括心脏、脑、细胞、肌肉、细胞培养物、体液、全血、血清、白细胞、拭子、粪便、尿液。
在促进核酸和磁性颗粒的裂解和结合中，存在一种或者多种离液剂，特别是离液盐，离液试剂不限于高氯酸钠、高氯酸钾、碘化钾、碘化钠、盐酸胍、异硫酸氰胍或者其他含有胍盐的离液盐，离液盐浓度可优选在1-8M范围内，更为优选地在2-5M范围内，最为优选在2-3.5M范围内。
此外可以使用甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、正戊醇之类的醇可以促进核酸吸附到二氧化硅表面。
然后将结合至磁性颗粒表面的核酸与未结合的组分进行分离，借助磁场实现分离是对本领域技术人员是公知的，因此不需要进一步的描述。清洗组分中可以是现在已知的合适的洗涤溶液，洗涤溶液中含有醇，或者含有一种或者多种离液剂，如80％乙醇是合适的。
洗脱步骤可以是水或者低盐的水溶液，Tris缓冲液也是合适的，在有些反应中也可以直接携带核酸的二氧化硅磁性颗粒也可以不进行洗脱，直接应用于下游检测，例如杂交测定或者是扩增反应。
本发明的有益效果是：本发明的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，对有核酸有较高的结合容量，并且对盐离子、蛋白或者其他的杂质吸附少，它们具有特定孔隙率，其结合容量和结合的特异性可已通过选择性地改变其中合成反应的参数而获得。
附图说明
图1是本发明的实施例5制备的储水多孔二氧化硅磁性颗粒扫描电镜；
图2是本发明的实施例6制备的储水多孔二氧化硅磁性颗粒扫描电镜；
图3是本发明的实施例实施例7的热重分析a)：0501，b)：实施例5，c)：实施例6；
图4本发明的实施例10的一步法200ul全血基因组DNA的纯化胶图。
具体实施方式
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
实施例1
以下提供一种制备超顺磁性四氧化三铁颗粒的具体实施例：
4.5g三氯化铁六水合物溶解至120mL的乙二醇中，加入1.2g柠檬酸以及7.6g醋酸钠，搅拌均匀后加入至聚四氟乙烯反应釜，放入烘箱在200℃下反应10小时。冷却至室温后用去离子清洗干净，60℃下烘干，得200nm的单分散超顺磁性四氧化三铁颗粒。
实施例2
以下提供另一种制备超顺磁性四氧化三铁颗粒的具体实施例：
2.8g三氯化铁六水合物溶解至100mL的一缩四乙二醇中，加入1.6g聚丙烯酸(mw＝500)以及5.2g醋酸钠，搅拌均匀后加入至聚四氟乙烯反应釜，放入烘箱在200℃下反应10小时。冷却至室温后用去离子清洗干净，60℃下烘干，得120nm的单分散超顺磁性四氧化三铁颗粒。
实施例3
以下提供一种制备超顺磁性四氧化三铁颗粒的具体实施例：
在1L去离子水中加入10g三氯化铁六水合物和4.5g氯化亚铁四水合物，500rpm下机械搅拌30min，加入50mL氨水溶液，继续机械搅拌1小时，磁性分离用去离子清洗至中性，得到15nm的磁性四氧化三铁颗粒。
实施例4
以下提供一种制备超顺磁性四氧化三铁颗粒的具体实施例：
在2L去离子水中加入50g三氯化铁六水合物和24g氯化亚铁四水合物，500rpm下机械搅拌30min，加入100mL 1M氢氧化钠溶液，升温至80度，继续机械搅拌2小时，降温至室温后，磁性分离用去离子清洗至中性，得到30nm的磁性四氧化三铁颗粒。
实施例5
以下提供一种制备储水多孔二氧化硅磁性颗粒的具体实施例：
10g实施例1制备的200nm四氧化三铁颗粒分散至500mL去离子水中，超声10min后加入烧瓶中，500rpm下机械搅拌10min后加入25g硅溶胶(20％SiO2，8nm，pH8～9)、10g的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(Mw＝20000)和1280g去离子水，转速调整至1500rpm，机械搅拌2小时，加入5g四甲基氯化铵继续反应2小时，将10g正硅酸四乙酯和50mL的无水乙醇混合均匀后滴加至上述溶液中，滴加总时间为半小时，滴加完毕后升温至68度，继续反应10小时，随后降至室温，300rpm下继续老化5小时。用95乙醇和纯净水反应清洗后取一小部分在室温下干燥，其余全部60度真空干燥12小时，所得磁性颗粒的平均粒径为3.2um，BET测试比表面积为51.7m2/g，磁性颗粒的扫描电镜见图1。
实施例6
以下提供另一种制备储水多孔二氧化硅磁性颗粒的具体实施例：
20g实施例3制备的15nm四氧化三铁颗粒分散至200mL去离子水中，超声10min后加入烧瓶中，650rpm下机械搅拌10min后加入15g硅溶胶(30％SiO2，6nm，pH8～9)、8.5g的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(Mw＝40000)和1500g去离子水，转速调整至2000rpm，机械搅拌1.5小时，加入40g乙酰胺继续反应2小时，将20g正硅酸四乙酯和80mL的无水乙醇混合均匀后滴加至上述溶液中，滴加总时间为半小时，滴加完毕后升温至50度，继续反应12小时，随后降至室温，300rpm下继续老化6小时。用95乙醇和纯净水反应清洗后取一小部分在室温下干燥，其余全部60度真空干燥12小时，所得磁性颗粒的平均粒径为1.3um，BET测试比表面积为68.2m2/g，磁性颗粒的扫描电镜见图2。
实施例7
使用本发明的磁性颗粒与商品化磁性颗粒做TGA测试，将商品化磁性颗粒(Enriching Biotechnology MSi500-DNA-0501，货号D1-020，以下简称0501)悬浮液取一定的体积，磁性颗粒的质量为5～10mg，移除保存液，将磁珠在室温下25度干燥40小时，将实施例5和6的磁珠也同样处理，然后使用TGA分析。显示如图2所述，0501磁性颗粒在200度前损失的水份为1.8％，而实施例5和实施例6在200度前损失的水份为9.2％。热重分析图如图3所示，其中，a)：0501，b)：实施例5，c)：实施例6。
实施例8
使用本发明的磁性颗粒与商品化磁性颗粒储水含量分析，将实施例5和6以及商品化颗粒从悬浮液中取30～100mg，放置EP管中，在25度室温下自然风干60小时，称重为质量1，，然后继续在80度下真空干燥24小时，称重为质量2，(质量1-质量2)/质量1为损失水份，数据在表1中。我们发现商品化的磁性颗粒损失的水份为2.6～9.8％，而实施例5的水份损失为23.4％，实施例6的水份损失为27.2％，这表明本发明制备的磁性颗粒更有利于储水。
表1：商品化磁性颗粒与本发明磁性颗粒水份损失表
磁性颗粒 供应商 称重1(mg) 称重2(mg) 损失水份
MGP Roche 52.5 49.1 6.4％
Magattract G beads Qiagen 34.5 31.1 9.8％
Magattract B beads Qiagen 67.2 64.2 4.4％
MagneSil Progema 58.3 55.6 4.6％
MyOne Silane Thermo 30.23 29.1 3.6％
0501 Enriching 50.2 48.5 3.5％
0507 Enriching 52.3 50.9 2.6％
Example 5 / 78.2 59.9 23.4％
Example 6 / 48.2 35.1 27.2％
实施例9
使用Roche MGP,英芮诚0507，实施例5制备的磁性颗粒，实施例6制备的磁性颗粒各取2mg用于200ul全血基因DNA纯化，常规两步法操作采用英芮诚磁珠法血液基因组DNA小量提取试剂盒(常规版)货号：BDE-5010。本发明所得实施例5和实施例6具有更好的核酸回收率，具体数据参考表2。
表2：两步法全血基因组DNA纯化OD数值
磁性颗粒 260/280 260/230 洗脱(ul) 得量(ng/ul)
Roche MGP 1.76 1.50 80ul 78.85
Roche MGP 1.73 1.62 80ul 73.09
英芮诚0507 1.76 1.98 80ul 56.51
英芮诚0507 1.76 1.87 80ul 68.78
实施例5 1.76 2.11 80ul 104.93
实施例5 1.76 2.21 80ul 106.88
实施例6 1.75 2.00 80ul 112.57
实施例6 1.75 1.99 80ul 101.85
实施例10
使用商品化磁性颗粒Roche MGP,英芮诚0507以及实施例5制备的磁性颗粒，实施例6制备的磁性颗粒用于200ul全血基因DNA纯化，磁性颗粒各取2mg，使用一步法操作采用英芮诚血液基因组DNA小量提取试剂盒(便捷版)，货号：NBDE-5010。本发明所得实施例5和实施例6具有更好的得量以及纯度，OD数据参考表3，OD数据显示260/280显示对蛋白质的污染较少，OD数值显示260/230显示对酚类和盐残留较小，胶图参考图4，其中，1，2为RocheMGP；3,4为英芮诚0507磁性颗粒，5、6为实施例5制备磁性颗粒，7、8为实施例6制备磁性颗粒。
表3：一步法全血基因组DNA纯化OD数值
磁性颗粒 260/280 260/230 洗脱体积(ul) 浓度(ng/ul)
Roche MGP 1.41 1.38 80 31.84
Roche MGP 1.40 1.28 80 37.27
英芮诚0507 1.56 1.53 80 56.57
英芮诚0507 1.58 1.58 80 62.57
实施例5 1.77 1.95 80 72.96
实施例5 1.84 2.19 80 80.70
实施例6 1.79 1.94 80 64.19
实施例6 1.86 1.87 80 82.27
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。

Claims (10)

1.一种储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，包括以下原料：磁性核芯、硅源烷、硅溶胶、pH调节物质和聚乳酸-羟基乙酸共聚物；
所述储水多孔二氧化硅磁性颗粒的制备方法包括以下步骤：
1)将5-20质量份的预先制备的磁性核芯加入到100-500质量份的含有0-10质量份的稳定剂去离子水中，再向其中加入1-50质量份的硅溶胶、5-25质量份的聚乳酸-羟基乙酸共聚物及200-2000质量份的去离子水，机械搅拌混合均匀1到3小时；
2)加入pH调节物质后继续反应1到2小时；
3)加入5-40质量份的硅源烷，升温至40-80℃，继续反应2-20小时；
4)降至室温并伴随一个1至10小时的老化过程；
5)使用醇和去离子水的混合物对由上述步骤4)得到的磁性颗粒进行清洗。
2.根据权利要求1所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，所述磁性核芯具有超顺磁性或顺磁性，其包括氧化物。
3.根据权利要求2所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，所述磁性核芯为具有超顺磁性的氧化铁颗粒。
4.根据权利要求3所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，所述硅源烷为四乙氧基硅烷或四甲氧基硅烷。
5.根据权利要求4所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，所述硅溶胶为纳米级的二氧化硅颗粒在水中或溶剂中的分散液，其中SiO2的质量分数为20-40％，平均粒径为5-25nm。
6.根据权利要求5所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，所述pH调节物质为酯类或醛类，或为pH的缓冲试剂，或为四甲基氯化铵。
7.根据权利要求6所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，所述储水多孔二氧化硅磁性颗粒中磁性核芯的重量比为20-70％的重量比，二氧化硅的重量比为30-80％，其中，磁性核芯和二氧化硅的重量比之和小于100％。
8.根据权利要求7所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，所述储水多孔二氧化硅磁性颗粒的粒径不大于10um，其具有大孔和微孔结构，其比表面积大于20m2/g。
9.根据权利要求1所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒，其特征在于，
其中，所述磁性核芯为氧化铁颗粒，其制备方法为通过共沉淀的方式在铁盐中加入碱性物质将氧化铁颗粒沉淀出来，或者为通过乙酰丙酮铁在高温下分解还原而制备氧化铁颗粒，或者为通过将氯化铁、乙酸钠、乙二醇的混合溶液在高压釜中反应而制得氧化铁颗粒；
其中，所述稳定剂为柠檬酸钠、柠檬酸钾、EDTA、聚乙二醇、羧甲基纤维素中的一种或者几种的混合物。
10.一种如权利要求1-9中任意一项所述的储水多孔二氧化硅磁性颗粒的应用，其特征在于，其应用于分离样品中的核酸，所述的样品为包括含有核酸的各种来源。
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