CN109310718B - 上消化道内菌群改善剂 - Google Patents

Abstract

本发明的课题通过上消化道内菌群改善剂来解决，所述上消化道内菌群改善剂用于幽门螺旋杆菌阳性者和阴性者，含有乳酸菌作为有效成分。作为乳酸菌，优选使用乳杆菌属乳酸菌，更优选使用格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)OLL 2716(FERM BP‑6999)。上消化道内菌群改善例如为上消化道内双歧杆菌减少和/或上消化道内普氏菌增加。

Description

上消化道内菌群改善剂

技术领域

本发明涉及用于改善上消化道内菌群的上消化道内菌群改善剂等。具体而言，涉及用于减少上消化道双歧杆菌的上消化道内双歧杆菌减少剂和/或用于增加上消化道内普氏菌的上消化道内普氏菌增加剂。

背景技术

以往，尽管内窥镜诊断有所进步，但对于上腹部痛或不舒服感、餐后的胃积食感、上腹部饱胀感、恶心/呕吐、胃脘痛(上腹部痛)、心窝部灼热感等上消化系统症状的主诉，无法解释症状的所见的病例仍多见。虽然有这样的消化系统症状的主诉，但通过包括内窥镜在内的普通检查无法发现器质性疾病、无法获得判明症状的所见，将这种状态称为FD (功能性消化不良(functional dyspepsia)、上腹部不定愁诉(上腹部症状不定的不适主诉)、餐后愁诉(餐后不适主诉)、胃脘痛或者功能性胃肠病)。

由于这些症状不会出现在器质性疾病中，所以有时会漏看其症状、或者误诊。因此，虽然伴有这样的不舒服感但却无法进行明确的病名诊断的具有功能性消化道障碍的人的生活质量(QOL)会下降。

作为改善这些症状的方法，已知有进行给药以使血清素或一氧化氮游离。然而，上述的给药会伴有副作用，因此期待着通过不伴有副作用的方法进行功能性消化道障碍的预防或改善。

为了通过不伴有副作用的方法进行功能性消化道障碍的预防或改善，迄今为止提出了各种提案。

例如，专利文献1和专利文献2中记载着：通过给予谷氨酸、5’-核苷酸等，功能性消化道障碍得到改善(各权利要求1)。

专利文献3中记载了含有谷氨酸和精氨酸等作为有效成分的功能性消化道障碍预防/改善剂。该预防/改善剂可以简便地进行制造，成本低且安全性高，特别是对腹部痛、胃积食、烧心(胃灼热)等功能性胃肠病(FD)、或胃食道反流症(GERD)等上消化道障碍有效(摘要)。

另外，作为使用乳酸菌来进行功能性消化道障碍的预防或改善的技术，例如专利文献4中有关于两歧双歧杆菌(以下有时称作双歧杆菌。)的记载，所述两歧双歧杆菌具有幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori) (以下有时称作幽门杆菌。)的除菌作用，即使在如发酵乳饮料中的需氧条件下也具有高的存活性，该文献中显示：通过摄取含有该双歧杆菌的发酵乳饮料，改善了胃不定愁诉综合征(第0011、0096段)。

专利文献5中显示：格氏乳杆菌MCC1183株具有幽门杆菌的除菌作用，有应用了该见解的关于用于胃炎的预防或者治疗的抗炎药、抗溃疡药和适合于胃积食的饮食品(食品和饮料)的记载(第0023、0052段)。

专利文献6中记载着：含有嗜酸乳杆菌(格氏乳杆菌)等乳杆菌属乳酸菌、粪链球菌等链球菌属乳酸菌和芦荟的胃肠功能亢进(增强)药(权利要求1、2、第0012段)，记载着胃肠功能亢进中还包括胃积食或腹部饱胀感的改善(第0043段)。

即，利用含有双歧杆菌等乳酸菌的发酵乳饮料除去幽门杆菌以改善功能性消化道障碍的技术已经为人所知。另外，使用格氏乳杆菌MCC1183株除去幽门杆菌来改善胃积食也已提案。而且，利用含有乳杆菌属乳酸菌、链球菌属乳酸菌和芦荟的胃肠功能亢进药来改善胃积食或腹部饱胀感也已提案。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2006/030980号；

专利文献2：日本专利第5067145号公报；

专利文献3：国际公开第2009/113594号；

专利文献4：日本专利第4881304号公报；

专利文献5：日本专利第5300772号公报；

专利文献6：日本特开2012-126700号公报；

专利文献7：日本专利第4509250号公报；

专利文献8：国际公开2015/129281号。

发明内容

另一方面，如专利文献7所记载，本申请人对以幽门杆菌的除菌能力高的乳酸菌即格氏乳杆菌OLL2716株作为有效成分的幽门杆菌的除菌和/或防感染药物拥有专利权。该文献中记载着：该药物被用作抗胃炎药或者抗溃疡药(权利要求1、3)。

另外，如专利文献8所记载，本申请人发现了：格氏乳杆菌OLL2716株对功能性消化道障碍的预防和/或改善有效。

然而，尚不明确格氏乳杆菌OLL2716株作为功能性消化道障碍的预防和/或改善剂是否有效，具体以哪一种机制尚不明确。

因此，本发明人进行深入研究发现了：在功能性消化道障碍患者的上消化道内，于胃内存在着在健康人中不能存在的双歧杆菌，发现了格氏乳杆菌OLL2716株对上消化道内双歧杆菌的减少有效。

另外，本发明人进行深入研究发现了：与健康人的上消化道内(胃内)相比，在功能性消化道障碍患者的胃内普氏菌的菌数少，发现了格氏乳杆菌OLL2716株对上消化道内普氏菌的菌数增加有效。

另外，此时，对格氏乳杆菌OLL2716株的上消化道内双歧杆菌减少效果和上消化道内普氏菌增加效果进行了研究，结果令人惊讶的是，发现与格氏乳杆菌OLL2716株介导的幽门杆菌的除菌无关。

而且，还发现格氏乳杆菌OLL2716株对于幽门杆菌阴性者也能够减少上消化道内双歧杆菌和增加上消化道内普氏菌。

即，明确了：格氏乳杆菌OLL2716株不仅对幽门杆菌阳性者、对于幽门杆菌阴性者也会发挥上消化道内双歧杆菌减少效果和上消化道内普氏菌增加效果。

双歧杆菌通常存在于肠内、而不存在于以胃内为代表的上消化道，这是技术常识，更何况是与器质性疾病无关的功能性消化道障碍患者的胃内，认为其中不存在双歧杆菌，这也是技术常识，但这次获得了颠覆该常识的见解。而且，关于以胃内为代表的上消化道内普氏菌，即使罹患与器质性疾病无关的功能性消化道障碍，认为其菌数也不会减少，这是技术常识，但这次也获得了颠覆该常识的见解。

本发明鉴于上述情况而进行的发明，其目的在于：针对幽门杆菌阳性者和阴性者用的这两者，提供上消化道内菌群改善剂、具体是指用于减少上消化道内双歧杆菌的上消化道内双歧杆菌减少剂、或者用于增加上消化道内普氏菌的上消化道内普氏菌增加剂等。

为了达到上述目的，本发明的上消化道内菌群改善剂用于幽门螺旋杆菌阳性者和阴性者，形成含有乳酸菌作为有效成分的构成。

另外，本发明优选使用乳杆菌属乳酸菌作为乳酸菌，更优选使用格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri) OLL 2716(FERM BP-6999)作为乳杆菌属乳酸菌。

而且，本发明优选制成用于幽门杆菌阴性者的上消化道内菌群改善剂。

而且，本发明优选对人而言上述乳酸菌的菌数的每日给予量为2×10⁷～5×10¹⁰个，在每1g的上述乳酸菌培养物中含有10⁷个以上的乳酸菌的情况下，优选对人而言上述乳酸菌培养物的每日给予量为5～1000g。

另外，本发明的上消化道内菌群改善剂具有速效性，其速效性是指摄取后4周内发挥上消化道内菌群改善效果。

而且，作为上消化道内菌群改善，例如可以列举上消化道内双歧杆菌减少、上消化道内普氏菌增加等。

更具体而言，作为上消化道内菌群改善，例如可以列举胃内双歧杆菌减少、胃内普氏菌增加。

另外，还优选将上述本发明的上消化道内菌群改善剂制成以饮食品、健康辅助食品、保健功能食品、补品等功能性食品的形式提供的构成。

根据本发明，能够针对幽门杆菌阳性者和阴性者用的这两者提供上消化道内菌群改善剂等。

具体实施方式

以下，对本发明的优选实施方式进行详细地说明。

本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂的特征在于：用于幽门杆菌阳性者和阴性者，含有乳酸菌作为有效成分。

根据本发明的实施方式，可以提供以通常具有饮食习惯、且几乎没有副作用的乳酸菌作为有效成分的上消化道内菌群改善剂。例如，根据本发明的实施方式，即使对于幽门杆菌阴性者，也能够提供上消化道内菌群改善剂。

乳酸菌通常用于酸奶、奶酪、黄油、泡菜等发酵食品，有的乳酸菌还具有熟悉的风味，容易摄取。

本发明的实施方式中的乳酸菌只要是通过同化糖类而生成乳酸的乳酸菌即可，其属或种或来源等任意。其中，优选乳杆菌属的乳酸菌、特别是格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)，可以适合使用格氏乳杆菌OLL 2716 (FERM BP-6999)。

本发明的实施方式中的上消化道内菌群是指除幽门螺旋杆菌以外的上消化道内的菌。在本发明的实施方式中发现了：通过摄取格氏乳杆菌OLL 2716 (FERM BP-6999)，使上消化道内双歧杆菌减少和/或使上消化道内普氏菌增加，从而接近健康人的上消化道内菌群。双歧杆菌通常存在于肠内、而不存在于以胃内为代表的上消化道内，这是技术常识，更何况是与器质性疾病无关的功能性消化道障碍患者的胃内，认为其中不存在双歧杆菌，这也是技术常识，这次获得了颠覆该常识的见解。而且，关于以胃内为代表的上消化道内普氏菌，认为即使罹患与器质性疾病无关的功能性消化道障碍其菌数也不会减少，这是技术常识，这次也获得了颠覆该常识的见解。

本发明的实施方式中的功能性消化道障碍是指没有确认到如消化性溃疡或癌症症状的器质性疾病，但消化感、胃积食感、腹部饱胀感、恶心/呕吐、上腹部痛、食欲不振或者排便异常等上腹部不定愁诉持续的病态，是指即使没有发现消化道的器质性疾病、但确认到降低患者的QOL的具重现性的消化系统症状的症状。这种功能性消化道障碍是指迄今为止诊断为慢性胃炎或胃炎的疾病，其特征在于呈现腹部痛、胃积食、烧心等症状。另外，这种功能性消化道障碍看不到消化道的器质性疾病，因此作为其原因，有压力等引起的神经系统的异常传递、存在利用内窥镜等无法检测的程度的轻微炎症、消化道的运动功能下降等诸多说法，但尚不明确。

需要说明的是，消化道是指从口腔到肛门的一系列参与消化的管腔脏器，例如可以列举咽、食道、胃、小肠(十二指肠、空肠、回肠)、大肠。另外，上消化道是指咽、食道、胃、十二指肠。

另外，在本发明的实施方式中，作为对人而言的每天的有效量(摄取量)，希望以摄取的菌数优选2×10⁷～5×10¹⁰个、更优选5×10⁷～5×10¹⁰个、进一步优选1×10⁸～5×10¹⁰个、更优选5×10⁸～5×10¹⁰个、进一步优选5×10⁸～2×10¹⁰个的方式于上消化道内菌群改善剂中含有有效成分的乳酸菌。

这是由于：若以摄取的菌数少于2×10⁷个的方式于上消化道内菌群改善剂中含有乳酸菌，则难以获得人的功能性消化道障碍的预防和/或改善效果，即使以摄取的菌数多于5×10¹⁰个的方式于上消化道内菌群改善剂中含有乳酸菌，其效果也未见较大的变化。

另外，在本发明的实施方式中，作为对人而言的每天的有效量(摄取量)，在每1g的乳酸菌培养物中含有10⁷个以上的乳酸菌的情况下，希望以摄取优选5～1000g、更优选10～1000g、进一步优选50～500g、更优选70～300g、进一步优选70～250g、特别优选80～200g的方式于上消化道内菌群改善剂中含有乳酸菌培养物。这里，在本发明的实施方式中，对人而言，每天可以通过1次摄取其有效量(摄取量)、也可以通过两次以上的多次摄取其有效量(摄取量)。

每1g的乳酸菌培养物中所含的乳酸菌的菌数，只要是10⁷个以上即可，可以是10⁷或10⁸个、10⁹个等。增加每1g乳酸菌培养物中所含的乳酸菌的菌数时，可使上消化道内菌群改善剂中包含有效量的乳酸菌的菌数，同时可以减少乳酸菌培养物的有效量，通过更少量摄取乳酸菌培养物，能够获得同等的人的上消化道内菌群改善效果。

本发明的实施方式中的乳酸菌培养物可以使用公知的培养基成分培养(增殖)乳酸菌而获得。另外，通过离心分离所得的乳酸菌培养液等，可以提高每单位重量培养液的乳酸菌数。本发明的实施方式中的乳酸菌可以是刚刚培养(增殖)的状态，也可以是与冷冻保护剂等混合使其冷冻的状态，还可以是冷冻干燥的状态。另外，本发明的实施方式中的乳酸菌可以是活菌也可以是死菌，优选为活菌。

另外，为方便起见，可以使用含有本发明的实施方式中的乳酸菌的市售商品。例如，在为格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri) OLL 2716 (FERM BP-6999)的情况下，为方便起见，可以使用株式会社明治销售的“明治PROBIO YOGURT LG21”。该市售品可以直接摄取，也可以再进行加工。在将本发明的实施方式中的乳酸菌和其他可摄取的成分一同摄取的情况下，对其他可摄取的成分没有限定，例如适合使用乳性成分。乳性成分是指含有乳本身或者将乳进行加工而获得的乳成分的组合物，例如包括鲜奶(牛奶等)、还原乳(奶粉、奶油、黄油)、发酵乳(酸奶、奶酪)、乳制品(乳清、酪蛋白、乳糖、乳清矿物质、渗透物)等含有乳成分的所有成分，对其来源或形态没有特别限定。

另外，本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂的特征在于：具有速效性，特别是4周内发挥上消化道内菌群改善效果。当然，这并不限于长于4周持续摄取本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂，优选持续摄取4周以上，更优选持续摄取8周以上，进一步优选持续摄取12周以上，更优选持续摄取16周以上，进一步优选持续摄取20周以上。

而且，本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂，对其摄取方法和摄取频率没有特别限定。在后述的实施例中，作为一个例子，每天摄取上消化道内菌群改善剂，另外在上述实施方式中还显示了每1天的乳酸菌的优选菌数，但未必是如果没有每天摄取则无法确认到本发明的实施方式所产生的上消化道内菌群改善效果。只要确认到其效果即可，摄取频率例如可以适当调整为2天1次、3天1次、4天1次、5天1次、7天(1周)1次、10天1次、1个月1次等。

本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂可以由每1餐的单剂量包装形式构成，也可以是每个该单剂量包装含有有效的乳酸菌的个数的形态。

例如，每个该单剂量包装中优选以摄取2×10⁷～5×10¹⁰个的方式含有、更优选以摄取5×10⁷～5×10¹⁰个的方式含有、进一步优选以摄取1×10⁸～5×10¹⁰个的方式含有、更优选以摄取5×10⁸～5×10¹⁰个的方式含有、进一步优选以摄取5×10⁸～2×10¹⁰个的方式含有作为有效成分的乳酸菌。

另外，例如在每1g的乳酸菌培养物中含有10⁷个以上的乳酸菌的情况下，每个单剂量包装中优选以摄取5～1000g的方式含有、更优选以摄取10～1000g的方式含有、进一步优选以摄取50～500g的方式含有、更优选以摄取70～300g的方式含有、进一步优选以摄取70～250g的方式含有、特别优选以摄取80～200g的方式含有作为有效成分的乳酸菌培养物。

本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂，在以每个单剂量包装进行包装的情况下，可以使用公知的包装。例如纸、塑料、玻璃、尼龙、不锈钢、铝、铁、铜、银、竹等，没有特别限定。但是，还鉴于乳酸菌为兼性厌氧菌，优选为不与空气或氧接触的形态。例如，在本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂的制造工序或包装工序中，优选设置消除与氧接触的可能性的工序，另外，优选在包装后的保存中选择氧不会透过到包装内部的包装材料。

在本发明的实施方式中，对摄取上消化道内菌群改善剂的方法没有特别限定，口服、经管、经肠、血管注射、涂剂、栓剂等公知的摄取方式均可适用，特别是可以适合采用口服摄取。

在本发明的实施方式中，摄取上消化道内菌群改善剂时的上消化道内菌群改善剂的温度优选设为-30～50℃、更优选设为-20～45℃、进一步优选设为0～45℃、更优选设为0～30℃、进一步优选设为0～20℃、特别优选设为0～10℃。

在本发明的实施方式中，上消化道内菌群改善剂中可以含有其他的可摄取成分、各种添加剂、饮食品、药品的原材料等作为乳酸菌以外的成分。

另外，还优选将本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂形成以饮食品、健康辅助食品、保健功能食品、补品等功能性食品的形式提供的构成。这里，功能性食品是指具有作为食品功能中的第三功能的身体状态调节功能的食品。而且，健康辅助食品是指财团法人 日本健康・营养食品协会(JHFA)认定的健康食品，保健功能食品是指日本消费者事务署所管制的特定保健用食品和营养功能食品。而且，饮食品还包括不符合功能性食品的饮食品。而且，为了能够持续摄取本发明的实施方式所涉及的上消化道内菌群改善剂而不感到厌腻，还可以将其制成饮料、酸奶、奶酪、甜点等，同时将其风味和/或物理性质加工成适合其形态等。

实施例

以下，对用于确认本发明的实施方式的效果而实施的试验进行详细说明，但本发明并不限于以下的构成。

(实施例1)

含有格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri) OLL 2716 (FERM BP-6999)作为有效成分的固体状的上消化道内菌群改善剂，通过以下的方法进行调制。使用原料乳、脱脂奶粉和水进行适当调制，使乳脂肪成分达到3.0重量%、无脂乳固体成分达到9.2重量%，将所得混合物通过常规方法进行均匀化，进行杀菌、冷却处理。之后，接种由株式会社明治“明治PROBIO YOGURT LG21”分离的保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌和格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri) OLL 2716 (FERM BP-6999)，按照常规方法进行培养，以所得培养物作为实施例1(上消化道内菌群改善剂)。需要说明的是，为方便起见，该上消化道内菌群改善剂制成直接摄取含有有效成分的乳酸菌的形式。

在该上消化道内菌群改善剂中，每1g的格氏乳杆菌OLL 2716 (FERM BP-6999)乳酸菌的菌数是大约10⁷个。

(试验方法1)

使用实施例1的上消化道内菌群改善剂(以下，有时将其称作试验样品。)，实施介入试验。

具体而言，以24名无器质性疾病的幽门杆菌阴性的具有功能性消化道障碍的患者为对象。另外，作为对照，以21名无器质性疾病、幽门杆菌阴性的健康人作为对象。

然后，让上述的24名具有功能性消化道障碍的患者分别以1天118g、持续摄取12周上消化道内菌群改善剂。

而且，对于上述的24名具有功能性消化道障碍的患者的胃液，在摄取上消化道内菌群改善剂之前和持续摄取12周之后，通过鼻胃管(naso-gastric tube)，以经过一夜的状态，从胃中直接获取。同样，对于上述的21名健康人的胃液，也通过鼻胃管(naso-gastrictube)，以经过一夜的状态从胃中直接获取。

(胃液内菌群的特定)

按照Ultra Clean Soil DNA分离试剂盒(Mo Bio Laboratories、Carlsbad、CA)中的常规方法，从所得的胃液中提取细菌的DNA。通过PCR法扩增所提取的细菌DNA，特定了双歧杆菌、乳酸杆菌、普氏菌、梭菌属IV簇、梭菌属XIVa亚簇、梭菌属IX簇、梭菌属XI簇、梭菌属XVIII簇、其他细菌的比例。

(胃液内的双歧杆菌)

在上述方法中，特定胃液内的双歧杆菌的比例时，在上述的健康人中为0.0% (n=21)，相对于此，在上述的具有功能性消化道障碍的患者中，在摄取上消化道内菌群改善剂之前为2.5% (n=24)，在摄取上消化道内菌群改善剂之后为0.4% (n=24)。

在“健康人的胃液内的双歧杆菌比例(n=21)”和“上述患者的摄取上消化道内菌群改善剂之前的双歧杆菌比例(n=24)”之间进行差异显著性检验时，P值不足0.001，判定为具有显著性差异。

另外，在“健康人的胃液内的双歧杆菌比例(n=21)”和“上述患者的摄取上消化道内菌群改善剂之后的双歧杆菌比例(n=24)”之间进行差异显著性检验时，P值为0.003，判定为具有显著性差异。

由以上可知：在具有功能性消化道障碍的患者的胃液中存在健康人所不存在的双歧杆菌。另外还可知：通过让具有功能性消化道障碍的患者持续地摄取12周加入有格氏乳杆菌OLL 2716 (FERM BP-6999)乳酸菌的酸奶、即实施例1，可使胃内的双歧杆菌减少，能够达到接近健康人的状态。

(胃液内的普氏菌)

在上述方法中，特定胃液内的普氏菌的比例时，在上述的健康人中为37.4%(n=21)，相对于此，在上述的具有功能性消化道障碍的患者中，摄取胃内菌群改善剂之前为28.3%(n=24)，摄取上消化道内菌群改善剂之后为39.8%(n=24)。

在“健康人的胃液内的普氏菌比例(n=21)”和“上述患者的摄取上消化道内菌群改善剂之前的普氏菌比例(n=24)”之间进行差异显著性检验时，P值为0.004，判定为具有显著性差异。

另外，在“健康人的胃液内的普氏菌比例(n=21)”和“上述患者的摄取上消化道内菌群改善剂之后的普氏菌比例(n=24)”之间进行差异显著性检验时，P值为0.001，判定为具有显著性差异。

由以上可知：与健康人相比，在具有功能性消化道障碍的患者的胃液中普氏菌的比例少。另外，通过让具有功能性消化道障碍的患者持续地摄取12周加入有格氏乳杆菌OLL2716 (FERM BP-6999)乳酸菌的酸奶、即实施例1，可使胃内的普氏菌增加，能够达到接近健康人的状态。

上述对本发明的几个实施方式和/或实施例进行了详细说明，但容易的是本领域技术人员能够在这些作为例示的实施方式和/或实施例中加入多个变更、而实质上并不脱离本发明的新的教导和效果。因此，上述的多个变更包括在本发明的范围内。

本说明书中记载的文献和作为本申请的巴黎公约优先权基础的日本申请说明书的内容均援引于此。

Claims (6)

1.乳酸菌在制造上消化道内菌群改善剂中的应用，其特征在于：上述上消化道内菌群改善剂用于幽门螺旋杆菌阳性者和阴性者，上述上消化道内菌群改善是指上消化道内双歧杆菌减少和/或上消化道内普氏菌增加，

上述乳酸菌为格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri) OLL 2716 (FERM BP-6999)。

2.权利要求1所述的应用，其特征在于：上述上消化道内菌群改善是指胃内双歧杆菌减少和/或胃内普氏菌增加。

3.权利要求1所述的应用，其特征在于：上述上消化道内菌群改善剂用于幽门螺旋杆菌阴性者。

4.权利要求1所述的应用，其特征在于：对人而言上述乳酸菌的菌数的每日给予量为2×10⁷～5×10¹⁰个。

5.权利要求1所述的应用，其特征在于：在每1g的上述乳酸菌培养物中包含10⁷个以上的乳酸菌的情况下，对人而言上述乳酸菌培养物的每日给予量为5～1000g。

6.权利要求1所述的应用，其特征在于：上述上消化道内菌群改善剂在摄取后4周内发挥上消化道内菌群改善效果。