CN108752395A

CN108752395A - 稳定的铁寡糖复合物

Info

Publication number: CN108752395A
Application number: CN201810292732.0A
Authority: CN
Inventors: 汉斯·安德烈亚森
Original assignee: Pharmacosmos Holding AS
Current assignee: Pharmacosmos Holding AS
Priority date: 2009-03-25
Filing date: 2009-03-25
Publication date: 2018-11-06
Also published as: PT2411053T; KR20120016063A; AU2009342799A1; DK2411053T3; BRPI0924653A2; US8815301B2; PL2411053T3; US20250026864A1; KR101580348B1; CN102361651A; US20120010166A1; HRP20201903T1; US9439969B2; EA023917B1; AU2009342799B2; EP2411053B1; US10865255B2; CY1123651T1; RS61104B1; UA103373C2

Abstract

本发明涉及一种稳定的铁寡糖复合物。具体地，本发明涉及一种具有改进的稳定性的铁寡糖复合物，其包含与羟基氧化铁稳定缔合的氢化寡糖，基于所述氢化寡糖的总重量，所述氢化寡糖中的二聚体糖类的含量为2.9重量％以下。在另外的方面中，提供用于制备所述复合物的方法以及所述复合物用于制备用于治疗缺铁性贫血的组合物的用途。

Description

稳定的铁寡糖复合物

本申请是PCT国际申请日为2009年3月25日，PCT国际申请号为PCT/DK2009/050069、中国国家申请号为200980158296.7、发明名称为《稳定的铁寡糖复合物》的申请的分案申请。

本发明在第一方面中涉及一种具有改进的稳定性的铁寡糖复合物(，compound)。在第二方面中，本发明涉及一种用于制备根据本发明的第一方面的铁寡糖复合物的方法。此外，在第三方面中，本发明涉及所述复合物用于制备用于治疗缺铁性贫血的组合物的用途。

由于其广泛的发生性，缺铁性贫血仍是主要关注的全球性健康问题。在人和家畜等中，它是最频繁观察到的病理状态之一。

尽管缺铁性贫血通常可以通过含铁制剂的口服给药来预防或治愈，但是在许多情况下，优选使用可经肠胃外给药的铁制剂，以避免在口服给药的生物利用率方面的变化并且保证有效的给药。

因此，用于肠胃外用途即皮下、肌内或静脉内给药的含铁制剂多年来已经处于兽医或人医师的处置之下。

尽管已经使用或建议各种的含铁物质作为抗缺铁性贫血的可肠胃外注射的制剂中的组分，但是当前所接受的最常见的制剂是这样的制剂，其包含与糖类，特别是葡聚糖或糊精缔合的羟基氧化铁(或氢氧化铁)的结合产物。葡聚糖是由微生物肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)产生的聚合物碳水化合物，而糊精是淀粉的解聚产物。

已知另外的用于治疗缺铁性贫血的铁制剂，例如铁-蔗糖和铁-葡糖酸盐(酯)复合物。这些化合物与铁结合不太紧密，从而导致较高的游离Fe³⁺离子浓度，这增加在肠胃外给药时铁化合物的毒性，并且可能导致在经口给药时的消化紊乱。

用于肠胃外注射的含铁制剂应当明显地满足若干要求，包括铁对于血红蛋白合成的容易可得性，缺乏局部或全身副作用，和使得满足在环境温度令人满意的保质期的储存稳定性。

在一些情况下，希望经口给药铁制剂，因为这对于接受者来说是最方便的。在经口给药铁制剂以后遭遇的频繁不利之处是受损的消化作用。良好的铁制剂应当以控制的方式在胃肠道中对身体提供铁，以通过肠上皮提供用于吸收的充足的铁，并且同样地不应当对消化作用有不利影响。

近十年来已经销售了用于治疗贫血的铁糖类制剂，并且着眼于改善这种制剂的稳定性并且降低在它们的给药时遭遇的副作用的严重性，已经建议了在制造方法方面并且在原料的选择方面的许多变化。

在研究、测试中得到的结果和实际经历表明，上述问题涉及所使用的糖类的分子量分布。

通常认识到的是，高分子量的葡聚糖涉及比低分子量的葡聚糖更高的过敏性反应的风险，但是还发现，由初始水解步骤产生的低分子量的碳水化合物例如单糖的存在也可能产生困难。当通过在具有宽的(ample)分子量分布的糖类的溶液中沉淀氢氧化铁而与铁反应时，低分子量的碳水化合物与铁结合以形成它们本身的配合物或缔合复合物。后一复合物与期望的中等分子量的铁寡糖复合物相比不太稳定，从而导致氢氧化铁或羟基氧化铁的沉淀和/或凝胶形成反应，这有可能导致溶液在若干天或若干月内完全凝固。

考虑到所述问题的重要性，相当大的注意力已经投向了其中寡糖组分表现出适当的分子量分布的铁寡糖复合物的开发。

GB 1,076,219公开了一种用于制备用于预防或治疗缺铁性贫血的含有铁、低分子量糊精或葡聚糖和山梨醇的配合物的方法。

US 4,927,756描述了一种用于制备铁葡聚糖复合物的程序，其中所述葡聚糖的分子量在2000-4000的范围内。

WO 1999/48533公开了铁葡聚糖，其由与羟基氧化铁稳定缔合的重均分子量为700至1400并且数均分子量为400至1400道尔顿的葡聚糖组成。所公开的铁葡聚糖配合物引起减少数量的过敏副作用的发生。

WO 2003/087164公开了铁糊精复合物，其由与羟基氧化铁稳定缔合的重均分子量为3,000道尔顿以下并且数均分子量为400道尔顿以上的糊精组成。所述复合物显示了低程度的毒性。

然而，根据在以上内容中提及的已知方法和复合物，仍需要进一步改进可用于制备用于治疗或预防缺铁性贫血的组合物的铁寡糖复合物的稳定性，使得可以将它们在环境温度长期储存，而没有它们的最重要性质的显著劣化。

因此，本发明的一个目的是提供一种适于进入到用于治疗或预防缺铁性贫血的组合物中的具有增强的稳定性的铁寡糖复合物。该复合物应当仍满足现有技术中的一般标准，所述一般标准是：1)在经口给药时，在不引起消化问题的情况下，高的用于肠内吸收的铁利用率；2)以容易在肠中吸收的形式提供铁；3)在肠胃外给药时，在没有由高局部浓度的Fe³⁺引起的毒性风险的情况下，高的铁利用率；4)最小的过敏性反应风险；5)高的铁含量；和6)形成包含高量铁的溶液的能力，所述溶液满足用于药物组合物的基本要求，即，经得起杀菌，优选通过热压处理，并且其在环境温度在长期储存的过程中也稳定。

为了满足该目的，根据本发明的第一方面提供一种铁寡糖复合物，所述铁寡糖复合物包含与羟基氧化铁稳定缔合的氢化寡糖，所述氢化寡糖具有小于3,000道尔顿，优选约1,000道尔顿的重均分子量(Mw)，基于氢化寡糖的总重量，所述氢化寡糖中的二聚体糖类的含量为2.9重量％以下。

举例来说，根据本发明使用的用于制备氢化寡糖的原料可以是葡聚糖1(Dextran1)，其满足欧洲药典(European Pharmacopoeia)，目录(entry)01/2009：1506。该原料根据欧洲药典(European Pharmacopoeia)具有下列规格：重均分子量(Mw)：850至1150道尔顿，具有一个或两个糖类(即二聚体)单元的分数：小于15％，和具有大于9个糖类单元的分数：小于20重量％。通常，葡聚糖1中的二聚体糖类的量为约8重量％。通过经由例如膜过滤移除较小的分子，得到期望量的2.9重量％以下的二聚体糖类。

在上下文中和在以下内容中，术语“重均分子量”和“数均分子量”应当被理解为是在发生配合物形成时的基于来自单体的所有寡糖分子及以上的寡糖的各个分子量。

令人惊奇地发现的是，与铁(III)-羟基氧化物稳定缔合的寡糖中的二聚体的量是关于最终复合物的稳定性的关键因素，并且该效果以高度非线性的方式表现出来。通常，铁(III)-羟基氧化物是在根据本发明的铁糖类组合物中使用的单一组分。然而，对于某些应用，例如，具有磁性能力的造影剂，期望使用铁(II)-氧化物和铁(III)-羟基氧化物的混合物。本发明的铁寡糖复合物包括从这样的混合物制备的复合物。

根据本发明，为了表现出令人满意的稳定性，必须将二聚体的含量降低至或低于2.9重量％。因而，通过控制在与铁反应之前的寡糖中的二聚体的量，以有效并且成本有效的方式提供稳定的铁寡糖复合物。在都是包含α1，6-键和α1，4-键的葡萄糖聚合物的葡聚糖或糊精的情况下，所讨论的二聚体是异麦芽糖(通过α1，6-键结合的两个葡萄糖单体)和麦芽糖(通过α1，4-键结合的两个葡萄糖单体)。

优选地，基于氢化寡糖的总重量，在所述氢化寡糖中的单体糖类的含量为0.5重量％以下。这起到将归因于从单体和铁的复合物释放游离铁离子的有毒效果的风险最小化的作用，特别是当存在于用于肠胃外给药的制剂中时。在所述制剂中，游离单体糖类如葡萄糖的升高的浓度本身也可能是不期望的。

根据本发明的一个实施方案，所使用的氢化寡糖是重均分子量(Mw)介于500至3000道尔顿之间，数均分子量大于500道尔顿的氢化葡聚糖，其中90重量％的所述葡聚糖具有小于3500道尔顿的分子量，并且10％重量分数的具有最高分子量的葡聚糖的Mw低于4500道尔顿。优选地，已经对葡聚糖进行具有介于340至800道尔顿之间的截取值的膜处理。以此方式，确保将不期望的副作用的发生最小化。

在一个备选的实施方案中，氢化寡糖是数均分子量(Mn)高于或等于500道尔顿的氢化糊精，其中10％分数的具有最高分子量的所述葡聚糖具有小于4500道尔顿的重均分子量(Mw)，并且90％的所述糊精具有小于3500道尔顿的分子量。所述糊精具有低毒性和允许糊精溶液的容易和可靠操作的适当粘度。

适当地，根据本发明的铁寡糖复合物具有120至180kD的表观分子量(M_P)。优选地，表观分子量(M_P)介于130至160kD之间。

暗示的是，对经热压处理的水溶液测量表观分子量，所述经热压处理的水溶液通过以稳定溶液的形式将氢化寡糖与羟基氧化铁的400g粉末溶解在1,000m1水中而制备，所述粉末的铁(Fe)的量为25重量％。包含通过另一种方法制备的本发明的复合物或处于另一浓度的溶液可以导致从本方法衍生的表观分子量。

表观分子量使用尺寸排阻层析测量。柱基于含有极性二醇基团的二氧化硅粒子。使用葡聚糖和铁葡聚糖作为标样并且0.1％的叠氮化钠作为洗脱液进行校准。

本发明的铁寡糖复合物中的铁的量可以根据最终组合物的期望用途而变化。通常，铁寡糖复合物中的铁的量为50重量％以下。适当地，铁寡糖的量大于10重量％。

在一个实施方案中，氢化寡糖中的二聚体的含量为2.5重量％以下，备选地，2.3重量％以下。

不希望受到任何具体理论束缚，假设的是，二聚体以小的量与含有寡糖和FeOOH之间的配合物的胶体粒子配位。当二聚体的含量超过2，9％时，二聚体显然起到胶体粒子的“溶解剂(dissolver)”的作用，从而使得寡糖和FeOOH的复合物不稳定并且能够随着时间而凝胶化。

在本发明的一个实施方案中，铁寡糖复合物是优选具有10-50重量％的铁含量的干燥粉末的单独的或部分的组分。备选地，铁寡糖复合物可以溶解或分散在水性液体中，优选在得到的溶液或分散体中产生1-30％w/v的铁含量。当用作注射液时，包含大量的铁的液体所提供的有利之处是需要将较少量的液体注射到被治疗的受试者中，这对于被治疗的受试者而言以及对于进行治疗的人而言显然是有利之处。

根据本发明的另外的方面，提供一种组合物，所述组合物包含药理学有效量的根据本发明的第一方面的复合物，以及至少一种药用载体。该组合物可以适用于肠胃外、口服或任何另外的给药形式。

包含根据本发明的铁寡糖复合物的药物组合物可以使用技术人员熟知的程序制备。用于口服用途的组合物的实例是片剂、胶囊、糖浆、糊剂和混合物。

包含根据本发明的铁寡糖复合物的药物组合物可以配制具有另外的营养或药物试剂，例如维生素，优选水溶性维生素，微量营养素(micronutrients)，例如痕量金属，例如钴，铜，锌或硒，抑菌剂，或抗生素如泰乐菌素。在水中不溶的维生素甚至可以通过使用合适的乳化剂来乳化到包含根据本发明的铁寡糖复合物的水溶液中。

根据本发明的再一个方面，提供一种用于制备铁寡糖复合物的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)将多糖水解以降低其分子量，

(b)将得到的寡糖氢化，以将醛官能团转化成醇基团，

(c)将氢化寡糖根据分子量分级，使得纯化的级分具有等于或小于3,000道尔顿的重均分子量，

(d)将产生的分级氢化寡糖与至少一种水溶性铁盐作为水溶液结合，

(e)向得到的水溶液中加入碱以形成氢氧化铁，和

(f)加热得到的碱性溶液，以将所述氢氧化铁转变成与所述寡糖缔合的羟基氧化铁。

其中，步骤(c)包括通过具有介于340至800道尔顿之间的截取值的一个或多个膜处理进行纯化的程序，所述程序连续进行，直至基于氢化寡糖的总重量，寡糖的纯化级分中的二聚体糖类的含量减小至2.9重量％以下。原理上，纯化可以备选地使用用于寡糖分级的其它程序进行，所述其它程序适于分级成窄范围的分子量，例如色谱方法。然而，通过膜处理的纯化是优选的。在任何情况下，基于沉淀的传统分级技术都不是适用于本发明的合适分级技术，因为得到的寡糖级分将过于分散。

优选地，多糖的初始水解作为酸水解的形式进行，使用强无机酸，例如硫酸，磷酸或盐酸。

在一个优选的实施方案中，得到的寡糖的氢化通过加入硼氢化钠水溶液而进行。

优先地，通过加入至少一种有机羟基酸的盐，优选选自柠檬酸盐的盐稳定得到的羟基氧化铁与寡糖的缔合。

有利地，通过具有介于340至800道尔顿之间的截取值的一个或多个膜处理的所述纯化连续进行，直至寡糖的纯化级分中的单体的含量被降低到2.9％(w/w)以下。

在本发明上下文中使用的术语多糖用于描述包含葡萄糖的单体单元的任何聚合物。根据一个实施方案中，使用的多糖为葡聚糖。

在步骤(c)中优选通过具有适于阻止分子量高于2,700道尔顿的葡聚糖的截取值的一个或多个膜处理来纯化葡聚糖。

当在步骤(e)中向得到的水溶液中加入碱以形成氢氧化铁时，优选将所述水溶液调节至pH高于10。

步骤(f)中的加热有利地在高于100℃的温度进行，直至溶液变成黑色或深棕色胶体溶液，将所述溶液在中和后过滤，并且加入一种或多种稳定剂。有用的过滤器是0.45μm过滤器。在加入所述稳定剂之前，还可以使用过滤、加热和膜处理将所述溶液进行另外的纯化和稳定。

最后，在一个优选的实施方案中，可以将得到的碱性溶液干燥以得到作为稳定粉末的铁-葡聚糖复合物。备选地，可以省略干燥操作，使得可以从纯化溶液制备注射液，而没有所述纯化溶液的中间干燥。粉末适当地含有50重量％以下的量的铁-葡聚糖复合物的中的铁(Fe)。

根据一个备选的实施方案，使用的多糖是淀粉或糊精。糊精通常通过使用已知解聚手段如酸、碱或酶的淀粉的解聚制成。取决于其来源，淀粉含有一定量的位于聚葡萄糖链的支化点处的α1，6-糖苷键。因此，糊精也可以含有类似低分数的α1，6-糖苷键。通过调节用于淀粉解聚的条件，可以有利于α1，4-糖苷键或α1，6-糖苷键的断裂，使得这些类型的键之间的比率在最初淀粉和制备的糊精之间不同。

淀粉和糊精的特征性质之一是它们的胶凝性质。与葡聚糖形成对比，淀粉和高级糊精甚至在最适度的温度也胶凝，这使得操作更困难。

当分子量通过水解降低时，淀粉和糊精的胶凝趋向减轻。然而，水解应当不过于完全，因为与以上内容比较，小的糊精当与铁以缔合配合物的形式结合时可能带来毒性问题。优选地，将淀粉水解，直至其不与碘形成强的着色配合物。在此程度上水解的淀粉的溶液包含大量的处于期望尺寸范围内的糊精并且表现出足够低的允许容易和精确操作的粘度。对于淀粉的水解，盐酸是优选的酸。

在与铁结合之前，将糊精的还原能力降低。这可以通过将糊精的末端醛基氢化成醇而完成。此降低可以使用熟知程序进行。优选使用硼氢化钠的氢化。在氢化以后，糊精的还原能力应当小于3.0％，如通过二价铜氧化方法确定的。

在一个优选的实施方案中，在步骤(c)中纯化糊精，以得到高于或等于500道尔顿的数均分子量(Mn)，其中10％分数的具有最高分子量的所述氢化糊精具有小于4,500道尔顿的重均分子量(Mw)，并且90％的糊精具有小于3,500道尔顿的分子量。

在一个特别优选的实施方案中，10％分数的具有最高分子量的糊精具有小于4,000Da的平均分子量，90％的糊精具有小于3,000道尔顿的分子量，并且10％分数的具有最低分子量的糊精具有800道尔顿以上的重均分子量。这样分子量分布的糊精显示出适当的粘度并且提供与铁的安全且稳定的缔合配合物。

在步骤(d)中，将纯化并氢化的糊精与至少一种水溶性铁盐作为水溶液结合，所述水溶性铁盐的优选实例是氯化铁。

在步骤(e)中，向得到的溶液中加入碱以形成氢氧化铁，优选得到高于8.5的pH。

在步骤(f)中加热得到的碱性溶液，以将氢氧化铁转变以与糊精缔合的的羟基氧化铁，并且优选所述加热在高于85℃的温度进行，直至溶液变成黑色或深棕色胶体溶液，将所述溶液在中和以后过滤，并且加入一种或多种稳定剂。在加入所述稳定剂之前，还可以使用过滤、加热和膜处理将所述溶液进行另外的纯化和稳定。

最后，在一个优选的实施方案中，可以将得到的碱性溶液干燥以得到作为稳定粉末的铁-葡聚糖复合物。备选地，可以省略干燥操作，使得可以从纯化溶液制备注射液，而没有所述纯化溶液的中间干燥。

根据本发明的另外方面，提供根据本发明的第一方面的复合物用于制备可肠胃外或经口给药的治疗组合物的用途，所述可肠胃外或经口给药的治疗组合物用于预防或治疗动物或人受试者中的缺铁性贫血。

根据本发明的另一个方面，提供一种氢化寡糖，其具有小于3,000道尔顿的重均分子量(Mw)和2.9重量％以下的二聚体糖类的含量，并且优选地，0.5重量％以下的单体的含量。所述寡糖是根据本发明的第一方面的铁寡糖复合物的制备中的中间体。

根据本发明的另外的方面，提供一种用于制备根据本发明的前一方面的所述中间体氢化寡糖的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)将多糖水解以降低其分子量，

(b)将得到的寡糖氢化，以将醛官能团转化成醇基团，和

其中，步骤(c)包括通过具有介于340至800道尔顿之间的截取值的一个或多个膜处理进行纯化的程序，所述程序连续进行，直至基于氢化寡糖的总重量，寡糖的纯化级分中的二聚体糖类的含量减小至2.9重量％以下。优选地，连续进行所述纯化，直至将寡糖的纯化级分中单体的含量降低至0.5重量％以下。

根据本发明的另外方面，提供一种用于制备含有根据本发明的第一方面的复合物的方法，在所述方法中，将作为干燥粉末的铁寡糖复合物溶解在水性介质中，必要时调节pH，任选加入稳定剂，和将液体在填充到安瓿或小瓶中之前通过过滤进行杀菌，或将液体在填充到这样的安瓿或小瓶中之后通过高压釜处理进行杀菌。

备选地，将含有所述复合物的液体纯化，对铁含量和pH进行调节，稳定，并且在将其填充到安瓿或小瓶中之前通过过滤进行杀菌，或在将其填充到所述安瓿或小瓶中之后通过高压釜处理进行杀菌。

根据本发明的铁寡糖复合物在水中高度可溶，这使得可以制备含有大量铁的注射液。根据本发明的一个实施方案，提供一种适于对人给药的注射液，其包含1-20％(w/v)的铁。本发明的另一个实施方案提供一种适于对动物给药的注射液，其包含10-30％(1w/v)的铁。

根据本发明的铁寡糖复合物的溶液可以通过在没有溶液的实质物理变化的情况下通过热压进行杀菌。因而，可以在没有配合物的分子量或溶液粘度的任何明显变化的情况下对溶液进行热压处理。

铁寡糖复合物的水溶液可以使用任何已知的保存技术保存，例如热压处理，在无菌条件下通过0.2-0.5微米的过滤器进行过滤，或加入防腐剂。作为防腐剂的一个实例，可以提及的是0.5％苯酚。

然而，热压处理是用于保存根据本发明的复合物的水溶液的优选方法。特别优选的是在121-135℃的温度进行热压处理5-40分钟的时间。

根据本发明的铁寡糖复合物的水溶液显示出优异的稳定性并且不容易通过储存，例如通过凝胶化或沉淀而劣化。

现在将通过下列非限制性的实施例举例说明本发明。

实施例

葡聚糖的水解和氢化

将一定量的来自具有截取值＜5,000道尔顿的膜的作为渗透物(permeate)的预水解葡聚糖进一步在95℃的温度在pH 1.5水解。

使用凝胶渗透色谱(GPC)监测水解并且通过冷却终止，此时估计被水解的材料的分子量已经达到期望值，即700-1，400道尔顿的重均分子量。

在水解中，制备了低分子量葡聚糖，但是还形成葡萄糖和异麦芽糖。通过水解，二糖含量为7-8重量％。

在冷却和中和以后，通过具有340-800道尔顿的截取值的膜处理减少单体和二聚体的量。通过凝胶渗透色谱监测溶液中单糖和二糖的浓度，并且继续分级，直至获得2.9重量％以下的二聚体浓度和0.5重量％以下的单体浓度。

其后，通过旋光性确定葡聚糖的含量，并且通过使用索莫吉氏(Somogyi)试剂确定还原糖的量。为了使得还原能力低于3％，向处于碱性pH的溶液中加入硼氢化钠。硼氢化钠相对于分级的葡聚糖的施用比率为1∶34.7。

将溶液中和至pH＜7.0并且随后去离子化。平均分子量和分子量分布通过色谱法确定。色谱法揭示的是实现了期望条件，即，90重量％的葡聚糖具有小于2,700道尔顿的分子量，并且10重量分数％的具有最高分子量的葡聚糖的重均分子量(Mw)低于3,200道尔顿。相对于预水解的葡聚糖的初始量，去离子化以后的葡聚糖的最终收率为约50％。

铁-葡聚糖的合成

将120kg以上制备的葡聚糖与150kg FeCl₃，6H₂O混合作为18％溶液。向搅动的混合物中加入作为饱和水溶液的93kg Na₂CO₃，随之使用24升浓NaOH水溶液(27％(w/v))将pH升高为10.5。

将所得到的混合物加热至高于100℃，直至其变为黑色或深棕色胶体溶液。在冷却以后，将溶液使用12升浓盐酸中和以得到5.8的pH。在过滤以后，将溶液使用膜处理纯化直至溶液中的氯化物含量小于基于含有5％(w/v)铁的溶液计算的0.55％。

如果溶液的氯化物含量对于得到等渗透溶液不太理想，则加入氯化钠并且将pH最终调节至5.6，并且将溶液过滤通过0.45μm(或备选地，0.2μm)膜过滤器。

将溶液喷雾干燥，并且铁-葡聚糖粉末适于销售或用于进一步的处理。

作为喷雾干燥的备选方案，可以将溶液用于具有例如10％(w/v)的铁含量的注射液的直接制备，如上所述。

当使用铁-葡聚糖粉末制备注射液或灌注液时，将粉末再溶解在水性介质中，检查pH，并且必要时对pH进行调节，并且将溶液在通过过滤杀菌以后填充到安瓿或小瓶中。备选地，杀菌可以通过在填充到安瓿或小瓶中以后进行热压处理而进行。

铁寡糖复合物相对于它们的二聚体含量的稳定件分析

将多种具有不同二糖含量的铁寡糖复合物关于它们的水解速率和表观分子量进行分析，所述水解速率和表观分子量都是各种复合物的质量的指示。

假定从酸性溶液(0.24M HCl；0，9％NaCl)中的FeOOH和寡糖的复合物的Fe³⁺的水解速率与铁的生理学释放速率相关。因此，由半衰期(t_1/2)表达的水解速率是所研究复合物的重要参数。

Fe³⁺的水解通过在287.3nm的吸光度测量。

此外，发现铁寡糖的热稳定性是它们的表观分子量(M_P)的函数。因而，如果作为测试溶液在高温储存3个月时，表观分子量显著超过160,000道尔顿的值，这样的复合物在不令人满意的程度上是不稳定的。

结果显示在表1中。

表1

如从表1显然的，当寡糖中二聚体的量小于3％时，表观分子量在期望的范围内，即约130kD至约160kD。对于由半衰期表达的水解速率也是如此。半衰期(t_1/2)被定义为吸光度是在t＝0处的吸光度的值的一半的时间。

以上表1中所示的结果可以排列为两个系列(series)。当将结果绘制成t₁/₂相对于二聚体含量的表时，出现图1。适合两个系列的两条直线显示了在3.5重量％的二聚体含量和12.6小时的t_1/2处的相交。

Claims

1.一种氢化寡糖，所述氢化寡糖具有小于3,000道尔顿的重均分子量(Mw)，其特征在于，基于所述氢化寡糖的总重量，所述氢化寡糖具有2.9重量％以下的二聚体糖类含量。

2.根据权利要求1所述的氢化寡糖，其中基于所述氢化寡糖的总重量，单体糖类的含量为0.5重量％以下。

3.根据权利要求1或2所述的氢化寡糖，其中所述氢化寡糖是氢化葡聚糖，所述氢化葡聚糖具有介于500至3,000道尔顿之间的重均分子量(Mw)、高于500道尔顿的数均分子量(Mn)，其中90重量％的所述葡聚糖具有小于3,500道尔顿的分子量，并且10％重量分数的具有最高分子量的所述葡聚糖的Mw低于4,500道尔顿。

4.根据权利要求1或2所述的氢化寡糖，其中所述氢化寡糖是氢化糊精，所述氢化糊精具有高于或等于500道尔顿的数均分子量(Mn)，其中10％分数的具有最高分子量的所述氢化糊精具有小于4,500道尔顿的重均分子量(Mw)，并且90％的所述糊精具有小于3,500道尔顿的分子量。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的氢化寡糖，其中所述重均分子量(Mw)为1,600道尔顿以下，而所述数均分子量(Mn)为1,600道尔顿以下。

6.根据前述权利要求中任一项所述的氢化寡糖，其中基于所述氢化寡糖的总重量，所述氢化寡糖中的二聚体糖类的含量为2.5重量％以下。

7.根据权利要求6所述的氢化寡糖，其中基于所述氢化寡糖的总重量，所述氢化寡糖中的二聚体糖类的含量为2.3重量％以下。

8.一种用于制备氢化寡糖的方法，所述方法包括下列步骤：

(a)将多糖水解以降低其分子量，

(b)将得到的寡糖氢化，以将醛官能团转化成醇基团，和

其特征在于，步骤(c)包括通过具有介于340至800道尔顿之间的截取值的一个或多个膜处理进行纯化的程序，所述程序连续进行，直至基于所述氢化寡糖的总重量，已经将寡糖的纯化级分中的二聚体糖类的含量减小至2.9重量％以下。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述纯化继续进行，直至基于所述氢化寡糖的总重量，已经将寡糖中的纯化级分中的单体糖类含量降低到0.5重量％以下。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中所述多糖为葡聚糖。

11.根据权利要求10所述的方法，其中在步骤(c)中通过具有适于阻止分子量高于2,700道尔顿的葡聚糖的截取值的一个或多个膜处理来纯化所述葡聚糖。

12.根据权利要求8所述的方法，其中所述多糖为淀粉或糊精。

13.根据权利要求12所述的方法，其中在步骤(c)中纯化氢化糊精，以得到高于或等于500道尔顿的数均分子量(Mn)，其中10％分数的具有最高分子量的所述氢化糊精具有小于4,500道尔顿的重均分子量(Mw)，并且90％的所述糊精具有小于3,500道尔顿的分子量。

14.根据权利要求8至13中任一项所述的方法，其中步骤(b)中的所述氢化使用硼氢化钠水溶液进行。