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CN108707551B - 一种细胞观察方法 - Google Patents

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CN108707551B CN201810678273.XA CN201810678273A CN108707551B CN 108707551 B CN108707551 B CN 108707551B CN 201810678273 A CN201810678273 A CN 201810678273A CN 108707551 B CN108707551 B CN 108707551B
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陈林雄
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Shenzhen Eureka Biology Technology Co ltd
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Shenzhen Eureka Biology Technology Co ltd
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Abstract

本发明属于细胞观察技术领域，公开了一种细胞观察方法。该细胞观察装置包括：细胞培养板，其上设有用于盛装培养液的多个培养孔；加液机构，其用于对需要滴加培养液的所述培养孔进行加液；显微成像机构，其用于当所述加液机构对所述培养孔进行加液后的所述培养孔进行细胞观察。本发明通过对需要进行细胞观察的培养孔加液，使得培养液的液面由凹液面变为平液面，以使光线正常照射整个培养孔时，不会在孔边缘产生黑环的现象，提升观察效果，从而解决了现有技术中对小孔径细胞培养板的细胞进行观察时，容易在孔边缘产生黑环的问题。

Description

一种细胞观察方法
技术领域
本发明涉及细胞观察技术领域，尤其涉及一种细胞观察方法。
背景技术
细胞培养板是一种用于细胞培养的实验室器皿，采用特殊工艺而成，可使细胞达到最佳吸附状态，有多个培养孔可同时培养多组细胞。在使用细胞培养板培养细胞时，实验室通常使用相差显微镜对细胞情况进行观察，但是使用相差显微镜成本较高。
此外，小孔径细胞培养板由于孔径小，培养液的液面会因为液体浸润和表面张力形成比较明显的凹液面。在对细胞进行观察时，由于培养液的凹液面的存在，导致靠近孔边缘的光会被折射掉，从而在孔边缘处出现一圈黑环，最终只能观察到孔中心附近的细胞，严重干扰细胞观察结果。
因此，亟待需要提供一种新型细胞观察装置及细胞观察方法来解决上述问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种细胞观察装置及细胞观察方法，以解决现有技术中对小孔径细胞培养板的细胞进行观察时，容易在孔边缘产生黑环的问题。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
一种细胞观察装置，包括：
细胞培养板，其上设有用于盛装培养液的多个培养孔；
加液机构，其用于对需要滴加培养液的所述培养孔进行加液；
显微成像机构，其用于当所述加液机构对所述培养孔进行加液后的所述培养孔进行细胞观察。
作为优选，所述细胞培养板为96孔板。
作为优选，所述加液机构每次对所述培养孔进行加液的量为50μl。
作为优选，所述显微成像机构在不超过八分钟的时间内对滴加培养液后的所述培养孔进行细胞观察。
作为优选，所述显微成像机构包括沿显示光路依次设置的平行光源、显微物镜、反射镜和相机，细胞培养板位于平行光源和显微物镜之间。
作为优选，所述显微物镜的倍数为4倍。
作为优选，所述细胞观察装置在20℃～40℃下进行。
一种细胞观察方法，包括以下步骤：
向盛装有培养液的细胞培养板中滴加培养液；
对滴加培养液后的细胞培养板进行细胞观察。
作为优选，所述滴加培养液的量为50μl。
作为优选，在不超过八分钟的时间内对滴加培养液后的细胞培养板进行细胞观察。
本发明的有益效果：
本发明通过对需要进行细胞观察的培养孔加液，使得培养液的液面由凹液面变为平液面，以使光线正常照射整个培养孔时，不会在孔边缘产生黑环的现象，提升观察效果，从而解决了现有技术中对小孔径细胞培养板的细胞进行观察时，容易在孔边缘产生黑环的问题。
附图说明
图1是本发明提供的细胞观察装置的结构示意图。
图中：
1、平行光源；2、细胞培养板；3、显微物镜；4、反射镜；5、相机；6、加液机构。
具体实施方式
下面结合附图并通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。
如图1所示，其为本发明提供的一种细胞观察装置结构示意图。该细胞观察装置细胞培养板2、加液机构6和显微成像机构，其中：
细胞培养板2上设有用于盛装培养液的多个培养孔，加液机构6用于对需要滴加培养液的培养孔进行加液，显微成像机构用于当加液机构6对培养孔进行加液后的培养孔进行细胞观察。本发明通过对需要进行细胞观察的培养孔加液，使得培养液的液面由凹液面变为平液面，以使光线正常照射整个培养孔时，不会在孔边缘产生黑环的现象，提升观察效果，从而解决了现有技术中对小孔径细胞培养板的细胞进行观察时，容易在孔边缘产生黑环的问题。
具体地，细胞培养板2优选为96孔板，可以理解的是，还可以为48孔板和24孔板等其它规格培养板，当细胞培养板2为96孔板时，孔板直径为9mm，在该范围内，培养液液面会因为液体浸润和表面张力形成比较明显的凹液面，黑环产生的影响最为严重，因此更加适用于本发明提供的细胞观察装置和细胞观察方法。
具体地，加液机构6每次对培养孔进行加液的量为优选为40μl～60μl，在本具体实施方式中，优选为50μl，根据工作人员大量重复性的实验，得到如下结论：加液量为30μl时无法使凹液面达到平液面，而加到40μl及以上时基本可以使凹液面达到平液面。
具体地，显微成像机构在不超过八分钟的时间内对滴加培养液后的培养孔进行细胞观察，根据工作人员大量重复性的实验，得到如下结论：加液后液面经过大约2小时会恢复到完全凹液面，而大概经过8-10分钟凹液面开始形成，即图像边缘(即孔边缘)开始出现阴影(即黑环)，因此加液后应保证在8分钟内进行拍摄。拍照时液面为平液面，避免了凹液面导致的黑环现象，可以直观地看到整个培养孔内的细胞情况并进行自动拍摄。
具体地，显微成像机构包括沿显示光路依次设置的平行光源1、显微物镜3、反射镜4和相机5，细胞培养板2位于平行光源1和显微物镜3之间。具体地，显微物镜3的倍数为2倍～40倍，优选为4倍，采用该显微成像机构对细胞进行观察时，相比相差显微镜而言，其更节约成本。
具体地，细胞观察装置在20℃～40℃下进行，例如可以是在室温下进行，实际对细胞培养观察时温度为37℃，此时培养液挥发更快，因此形成凹液面时间更短，即细胞观察时间应更低于8分钟的时间进行拍摄。
一种细胞观察方法，其优选的具体实施例为上述提供的细胞观察装置，具体包括以下步骤：
向盛装有培养液的细胞培养板2中滴加培养液，对滴加培养液后的细胞培养板2进行细胞观察。
由于小孔径细胞培养板2(如96孔板)的孔径小，培养液的液面会因为液体浸润和表面张力形成比较明显的凹液面。在对细胞进行观察时，由于培养液的凹液面的存在，导致靠近孔边缘的光会被折射掉，从而在孔边缘处出现一圈黑环，最终只能观察到孔中心附近的细胞，严重干扰细胞观察结果。本发明通过对需要进行细胞观察的培养孔加液，使得培养液的液面由凹液面变为平液面，以使光线正常照射整个培养孔时，不会在孔边缘产生黑环的现象，提升观察效果，从而解决了现有技术中对小孔径细胞培养板的细胞进行观察时，容易在孔边缘产生黑环的问题。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为了清楚说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术用户来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种细胞观察方法，其特征在于，包括以下步骤：
向盛装有培养液的96孔细胞培养板(2)上的培养孔中滴加40μl～60μl培养液，以使所述培养孔内的培养液的液面由凹液面变为平液面；
在不超过八分钟的时间内对滴加培养液后的细胞培养板(2)进行细胞观察。
2.根据权利要求1所述的细胞观察方法，其特征在于，每次所述滴加培养液的量为50μl。
3.根据权利要求1所述的细胞观察方法，其特征在于，所述滴加培养液通过加液机构(6)完成。
4.根据权利要求1所述的细胞观察方法，其特征在于，所述细胞观察通过显微成像机构进行。
5.根据权利要求4所述的细胞观察方法，其特征在于，所述显微成像机构包括沿显示光路依次设置的平行光源(1)、显微物镜(3)、反射镜(4)和相机(5)，所述细胞培养板(2)位于所述平行光源(1)和所述显微物镜(3)之间。
6.根据权利要求5所述的细胞观察方法，其特征在于，所述显微物镜(3)的倍数为4倍。
7.根据权利要求1所述的细胞观察方法，其特征在于，所述细胞观察在20℃～40℃下进行。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109374376A (zh) * 2018-11-09 2019-02-22 上海市农业科学院 一种适于香菇菌褶担子细胞形态观察的切片制备方法

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2000113191A (ja) * 1998-10-07 2000-04-21 Nippon Avionics Co Ltd パターン検査装置
CN1322009C (zh) * 2004-12-17 2007-06-20 中国海洋大学 抗白斑症病毒受体的单克隆抗体及其制备方法
US9062283B2 (en) * 2007-02-26 2015-06-23 Stemcell Technologies Inc. Method of reducing curvature in a meniscus of liquid medium
USH2268H1 (en) * 2009-01-30 2012-04-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy Microtiter plate to mitigate cell distribution bias from meniscus edge
US20120034596A1 (en) * 2009-04-22 2012-02-09 Pan-Systech Gmbh Device for automatically cultivating cells in parallel
WO2011089908A1 (ja) * 2010-01-20 2011-07-28 株式会社ニコン 細胞観察装置及び細胞培養方法
WO2013011962A1 (ja) * 2011-07-15 2013-01-24 独立行政法人科学技術振興機構 細胞培養装置、細胞培養長期観察装置、細胞長期培養方法、および細胞培養長期観察方法
CN102585005B (zh) * 2012-02-27 2014-04-02 华中农业大学 用于检测3-甲基喹噁啉-2-羧酸的单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒
WO2014107811A1 (en) * 2013-01-10 2014-07-17 Stemcell Technologies Inc. Meniscus reducing member
KR101767336B1 (ko) * 2015-07-09 2017-08-10 사회복지법인 삼성생명공익재단 자동 세포 배양기 및 그 배양기의 동작 방법
JP6628589B2 (ja) * 2015-12-11 2020-01-08 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 撮像装置
JP6685148B2 (ja) * 2016-03-01 2020-04-22 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 撮像装置および撮像方法
JP6692660B2 (ja) * 2016-03-01 2020-05-13 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 撮像装置
CN205710766U (zh) * 2016-03-22 2016-11-23 湖南中医药大学 一种可预防边缘效应的细胞培养板
JP2018009968A (ja) * 2016-06-30 2018-01-18 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス ウェルプレート及びその使用方法
CN106244455B (zh) * 2016-08-29 2018-09-21 杭州键一生物科技有限公司 全自动智能细胞培养装置及其控制方法
JP2022052558A (ja) * 2020-09-23 2022-04-04 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 培養容器

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