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CN108517308A - 一种微生态菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种微生态菌剂及其制备方法和应用 Download PDF

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CN108517308A CN201810502619.0A CN201810502619A CN108517308A CN 108517308 A CN108517308 A CN 108517308A CN 201810502619 A CN201810502619 A CN 201810502619A CN 108517308 A CN108517308 A CN 108517308A
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microecological microbial
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microecological
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Bright Dairy and Food Co Ltd
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Abstract

本发明公开了一种微生态菌剂及其制备方法，包括以下步骤：(a)将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828分别接种于MRS培养基中进行发酵，得到发酵液；(b)将所得发酵液离心取菌体沉淀，以脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥、干混复配即得。还公开了该微生态菌剂在提高饲料利用率方面的应用，经证实，本发明制备的微生态菌剂混入奶牛饲料中，可显著提高饲料的利用率，披露了植物乳杆菌CGMCC No.0847和干酪乳杆菌CGMCC No.0828的混合菌剂具有提高饲料利用率的新用途，拓宽了促饲料降解制剂的微生物来源，具备良好的应用前景；该微生态菌剂具有耐保藏、稳定性佳的优点。

Description

一种微生态菌剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种微生态菌剂及其制备方法和应用。
背景技术
随着我国的畜牧业生产产业结构的不断调整，反刍动物的发展已获得极大的重视；居民饮食结构的变化要求餐桌上有更多的牛、羊肉及乳制品。近20年来由于我国草原草场牲畜过载，草原退化极其严重。为了恢复生态，保护环境,我国中西部地区的草原畜牧业正在进行养殖业的改革，由放牧养畜改为舍饲、半舍饲养畜。充足的草料资源是发展反刍动物养殖业和舍饲养畜的重要保障，我国每年都有大量的农副产品，其中农作物如秸秆，苜蓿和燕麦草等的产量很大，对反刍动物而言是一个的潜在饲料资源,但由于这些农作物营养物质含量较低，动物的唾液分泌不足，随意采食量又较低，因此，从饲料中摄取的营养物质往往难以满足动物的需要。
因此，提高饲料利用率可解决反刍动物摄取营养不足的问题。通常提高饲料利用率的途径主要有两种,其一是通过物理的、化学的破坏植物细胞壁上纤维素的晶体结构,弱化或破坏木质素与纤维素或半纤维素之间的酯键。其二是改变粗饲料的适口性,提高动物的进食量,加速食糜在消化道中的流通速度。微生物一类广泛存在于自然界的微小生物，大部分微生物在动物体内具有良好的益生作用，但有关微生物应用于饲料利用率提高的报道相对较少，因此，筛选获得具有促进饲料降解作用的微生物制成微生态菌剂，并应用于奶牛饲料提高其利用效率是当务之急。上述这些都是本领域技术人员亟待解决的问题。
发明内容
基于上述技术问题，本发明提供了一种微生态菌剂及其制备方法，还提供了该微生态菌剂在提高奶牛饲料利用率方面的用途。
具体的，提供了一种微生态菌剂的制备方法，包括以下步骤：(a)将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828分别接种于MRS培养基中进行发酵，得到发酵液；(b)将所得发酵液离心取菌体沉淀，以脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥、干混复配即得。
进一步地，上述步骤(a)中，所述植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCCNo.0828的接种量均为7x106～3.5x107cfu/mL。
进一步地，上述步骤(a)中，所述发酵为厌氧培养。
进一步地，上述步骤(a)中，所述发酵的温度为26℃～42℃，发酵的时间为8～24h。
进一步地，上述步骤(b)中，所述离心的速度为8000～12000g，离心的时间为10～20min。
进一步地，上述步骤(b)中，所述脱脂乳的浓度为8～10％(w/v)。
进一步地，上述步骤(b)中，所述植物乳杆菌和干酪乳杆菌冻干粉的干混复配的比例为：1:9～9:1(w/w)。
第二方面，还提供了一种微生态菌剂，由上述任一种制备方法制得。
进一步地，所述微生态菌剂中植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCCNo.0828的活菌数量均为≥6x108cfu/g。
第三方面，还提供了一种微生态菌剂在提高奶牛饲料利用率方面的应用，添加的微生态菌剂与奶牛饲料的质量比例为0.1％～0.5％。
进一步地，所述奶牛饲料为全混合日粮(TMR)、苜蓿和燕麦草。
进一步地，所述利用率提高效果为＞10％。
上述技术方案，首次披露了植物乳杆菌CGMCC No.0847和干酪乳杆菌CGMCCNo.0828的混合菌剂具有提高饲料利用率的新用途，拓宽了促饲料降解制剂的微生物来源，具备良好的应用前景。同时，该微生态菌剂具有耐保藏、稳定性佳的优点。
具体实施方式
为更清楚的对本发明技术方案予以阐述，下面将结合具体实施方式对本发明的技术方案进行进一步阐述：
在一个具体的实施方式中，提供了一种微生态菌剂的制备方法，包括以下步骤：(a)将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828分别接种于MRS培养基中进行发酵，得到发酵液；(b)将所得发酵液离心取菌体沉淀，以脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥、干混复配即得。
进一步地，上述步骤(a)中，植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCCNo.0828的接种量优选地为7x106～3.5x107cfu/mL；较佳地为1.4x107～2.8x107cfu/mL，更佳地为2.1x107cfu/mL。
进一步地，上述步骤(a)中，优选的培养方式为厌氧培养。
进一步地，上述步骤(a)中，优选的发酵温度为26℃～42℃；较佳地为30℃～38℃；更佳地为34℃。
进一步地，上述步骤(a)中，优选的发酵时间为8～24h；较佳地为12～20h；更佳地为16h。
进一步地，上述步骤(b)中，优选的离心的速度为8000～12000g，较佳地为9000～11000g，更佳地为10000g；优选的离心时间为10～20min，较佳地为13～17min，更佳地为15min。
进一步地，上述步骤(b)中，优选的脱脂乳浓度为8～10％(w/v)，更佳地为9％(w/v)。
进一步地，上述步骤(b)中，优选的植物乳杆菌和干酪乳杆菌冻干粉的干混复配的比例为：1:9～9:1(w/w)，更佳地为1:1(w/w)。
结合对比例1亦可知，在优选发酵和复配参数的范围之外时，植物乳杆菌CGMCCNo.0847和干酪乳杆菌CGMCC No.0828发酵MRS培养基所制备的微生态菌剂对奶牛饲料利用率的提高效果均发生明显的下降。而在优选范围之内，接种量，培养温度，发酵时间，菌株的复配比例以及菌剂与饲料配比相互影响，使得制备获得的微生态菌剂产生的奶牛饲料利用率的提高效果更佳。
在另一个具体的实施方式中，提供了一种微生态菌剂，该微生态菌剂由上述任一种微生态菌剂的制备方法制得。
进一步地，所述微生态菌剂中植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCCNo.0828的活菌数量均为≥6x108cfu/g。
在另一个具体的实施方式中，提供了一种将所述微生态菌剂添加于奶牛饲料中以提高其利用率的用途，添加的微生态菌剂与奶牛饲料的质量比例为0.1％～0.5％。微生态菌剂有助于奶牛饲料在瘤胃中降解，且微生态菌剂中的益生菌在牛胃肠道组织上定植和生长，可显著改善瘤胃的发酵功能，提高饲料的利用率。
进一步地，所述奶牛饲料为全混合日粮(TMR)、苜蓿和燕麦草。
进一步地，所述利用率提高效果为＞10％。
上述技术方案，首次披露了植物乳杆菌CGMCC No.0847和干酪乳杆菌CGMCCNo.0828的混合菌剂具有提高饲料利用率的新用途，拓宽了促饲料降解制剂的微生物来源，具备良好的应用前景。同时，该微生态菌剂具有耐保藏、稳定性佳的优点。
下面通过实施例进一步说明上述具体实施方式，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。实施例中所使用的试剂若未加说明，均为分析纯试剂，购买自国药集团。其他试验仪器、试剂、菌种，如未做特别说明，均可通过商业途径直接购得。
实施例1
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)的制备：
植物乳杆菌CGMCC No.0847：将植物乳杆菌CGMCC No.0847(该菌株已在公开号为CN 1467290A的中国专利中公开)的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于MRS固体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，37℃厌氧培养24h取出，用接种环挑取单菌落放入10mLMRS液体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，运用涡旋振荡器将菌落均匀分散于液体培养基内，37℃厌氧培养24h取出，以2％(v/v)接种量接种于MRS液体培养基(购买自OXOIDCo.，英国)，37℃厌氧培养24h后，培养物15000rpm离心10分钟，弃去上清，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到发酵用的种子，种子液的菌浓度为7x108cfu/mL。
干酪乳杆菌CGMCC No.0828：将干酪乳杆菌CGMCC No.0828(该菌株已在公开号为CN 1566326A的中国专利中公开)的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于MRS固体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，37℃厌氧培养24h取出，用接种环挑取单菌落放入10mLMRS液体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，运用涡旋振荡器将菌落均匀分散于液体培养基内，37℃厌氧培养24h取出，以2％(v/v)接种量接种于MRS液体培养基(购买自OXOIDCo.，英国)，37℃厌氧培养24h后，培养物15000rpm离心10分钟，弃去上清，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到发酵用的种子，种子液的菌浓度为7x108cfu/mL。
(b)微生态菌剂对奶牛饲料利用率提高效果的测定方法。
(1)对照组：直接用TMR饲料按一日三次(9：00、13：00，19：00)饲喂给10头装有永久瘤胃瘘管的成年奶牛(体重550～600kg)，自由饮水，连续饲喂五天后即得对照组瘘管奶牛。
实验组：将微生态菌剂以0.3％(w/w)比例与TMR饲料均匀，按一日三次(9：00、13：00，19：00)等量饲喂给10头装有永久瘤胃瘘管的成年奶牛，自由饮水，连续饲喂五天后即得实验组瘘管奶牛。
(2)称取10g TMR、苜蓿和燕麦草分别装于三个尼龙袋内，固定于塑料管上，待晨饲1h后，将塑料管通过瘘管放入试验牛(对照组和实验组)的瘤胃内。
(3)24h后，将尼龙袋中饲料取出冲洗掉消化液后，置鼓风干燥箱中60℃烘至恒质量，记录质量。
(4)饲料利用率，即瘤胃降解率(P)：
P＝(降解前饲料质量-降解后饲料质量)/降解前饲料质量×100
(5)饲料利用率的提高效果(T％)：
T％＝(P实验组-P对照组)/P对照组
2、微生态菌剂的制备及其对奶牛饲料利用率提高效果的检测
将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828种子以接种量3％(v/v)无菌接种于MRS液体培养基中，37℃厌氧培养16h得发酵液，分别将所得的两种发酵液10000g离心15min，弃上清，取菌体沉淀部分，用9％(w/v)脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥后将获得的植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828冻干粉以1：1(w/w)的比例干混复配即得微生态菌剂A，经检测，其中植物乳杆菌CGMCC No.0847的活菌数量为4.5x109cfu/g，干酪乳杆菌CGMCC No.0828的活菌数量为4.5x109cfu/g。
微生态菌剂A对奶牛饲料利用率的提高效果如表1所示：
表1微生态菌剂A对奶牛饲料利用率的提高效果
TMR 苜蓿 燕麦草
P对照组 38.1 34.2 32.7
P实验组 47.4 41.5 38.5
提高T％ 24.3％ 21.2％ 17.8％
由表1可知，饲喂微生态菌剂A可有效提高奶牛饲料的利用率，TMR、苜蓿和燕麦草的利用率分别提高24.3％、21.2％和17.8％。
实施例2
1、材料与方法
微生态菌剂的添加比例为0.1％(w/w)，其他同实施例1。
2、微生态菌剂的制备及其对奶牛饲料利用率提高效果的检测
将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828种子以接种量1％(v/v)无菌接种于MRS液体培养基中，40℃厌氧培养20h得发酵液，分别将所得的两种发酵液12000g离心10min，弃上清，取菌体沉淀部分，用10％(w/v)脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥后将获得的植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828冻干粉以9：1(w/w)的比例干混复配即得微生态菌剂B，经检测，其中植物乳杆菌CGMCC No.0847的活菌数量为6.3x109cfu/g，干酪乳杆菌CGMCC No.0828的活菌数量为0.7x109cfu/g。
微生态菌剂B对奶牛饲料利用率的提高效果如下表所示：
表2微生态菌剂B对奶牛饲料利用率的提高效果
TMR 苜蓿 燕麦草
P对照组 38.1 34.2 32.7
P实验组 44.3 39.9 37.2
提高T％ 16.2％ 16.6％ 13.8％
由表2可知，饲喂微生态菌剂B可有效提高奶牛饲料的利用率，TMR、苜蓿和燕麦草的利用率分别提高16.2％、16.6％和13.8％。
实施例3
1、材料与方法
微生态菌剂的添加比例为0.5％(w/w)，其他同实施例1。
2、微生态菌剂的制备及其对奶牛饲料利用率提高效果的检测
将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828种子以接种量5％(v/v)无菌接种于MRS液体培养基中，32℃厌氧培养8h得发酵液，分别将所得的两种发酵液8000g离心20min，弃上清，取菌体沉淀部分，用8％(w/v)脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥后将获得的植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828冻干粉以1：9(w/w)的比例干混复配即得微生态菌剂C，经检测，其中植物乳杆菌CGMCC No.0847的活菌数量为0.6x109cfu/g，干酪乳杆菌CGMCC No.0828的活菌数量为5.4x109cfu/g。
微生态菌剂C对奶牛饲料利用率的提高效果如下表所示：
表3微生态菌剂C对奶牛饲料利用率的提高效果
TMR 苜蓿 燕麦草
P对照组 38.1 34.2 32.7
P实验组 43.5 39.3 37
提高T％ 14.3％ 14.9％ 13.1％
由表3可知，饲喂微生态菌剂C可有效提高奶牛饲料的利用率，TMR、苜蓿和燕麦草的利用率分别提高14.3％、14.9％和13.1％。
实施例4
1、材料与方法
微生态菌剂的添加比例为0.2％(w/w)，其他同实施例1。
2、微生态菌剂的制备及其对奶牛饲料利用率提高效果的检测
将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828种子以接种量2％(v/v)无菌接种于MRS液体培养基中，42℃厌氧培养24h得发酵液，分别将所得的两种发酵液9000g离心18min，弃上清，取菌体沉淀部分，用9.5％(w/v)脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥后将获得的植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828冻干粉以3：7(w/w)的比例干混复配即得微生态菌剂D，经检测，其中植物乳杆菌CGMCC No.0847的活菌数量为0.9x109cfu/g，干酪乳杆菌CGMCC No.0828的活菌数量为2.1x109cfu/g。
微生态菌剂D对奶牛饲料利用率的提高效果如下表所示：
表4微生态菌剂D对奶牛饲料利用率的提高效果
TMR 苜蓿 燕麦草
P对照组 38.1 34.2 32.7
P实验组 44.0 39.3 37.8
提高T％ 15.6％ 14.8％ 15.5％
由表4可知，饲喂微生态菌剂D可有效提高奶牛饲料的利用率，TMR、苜蓿和燕麦草的利用率分别提高15.6％、14.8％和15.5％。
实施例5
1、材料与方法
微生态菌剂的添加比例为0.4％(w/w)，其他同实施例1。
2、微生态菌剂的制备及其对奶牛饲料利用率提高效果的检测
将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828种子以接种量4％(v/v)无菌接种于MRS液体培养基中，26℃厌氧培养12h得发酵液，分别将所得的两种发酵液11000g离心12min，弃上清，取菌体沉淀部分，用8.5％(w/v)脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥后将获得的植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828冻干粉以6：4(w/w)的比例干混复配即得微生态菌剂E，经检测，其中植物乳杆菌CGMCC No.0847的活菌数量为2.4x109cfu/g，干酪乳杆菌CGMCC No.0828的活菌数量为1.6x109cfu/g。
微生态菌剂E对奶牛饲料利用率的提高效果如下表所示：
表5微生态菌剂E对奶牛饲料利用率的提高效果
TMR 苜蓿 燕麦草
P对照组 38.1 34.2 32.7
P实验组 44.7 40.4 38.2
提高T％ 17.3％ 18.1％ 16.9％
由表5可知，饲喂微生态菌剂E可有效提高奶牛饲料的利用率，TMR、苜蓿和燕麦草的利用率分别提高17.3％、18.1％和16.9％。
效果实施例1冷藏条件下微生态菌剂对奶牛饲料利用率提高的稳定性
将实施例1～5制备的微生态菌剂A、B、C、D和E置于冷藏条件(8℃)保存0、60、120和180天后取出，分别测定各样品对奶牛饲料(TMR)利用率提高的效果，结果如表6所示。
表6冷藏条件下对奶牛饲料(TMR)利用率提高的稳定性
由表6可知，所有测试的微生态菌剂在冷藏(8℃)保存180天后，对奶牛饲料(TMR)利用率的提高效果保持在同一水平，稳定性较好。
对比例1
将实施例1中的接种量，培养温度，发酵时间，菌株的复配比例以及菌剂与饲料配比逐一进行调整，获得了以下一组不同方法制备的微生态菌剂，将各组所得菌剂参照实施例1所述方法测定对奶牛饲料利用率的提高效果，结果如表7所示。
表7不同方法制备的微生态菌剂提高对奶牛饲料利用率的提高效果
参照表7所示的结果中可以得出，将所述微生态菌剂的制备方法中接种量，培养温度，发酵时间，菌株的复配比例以及菌剂与饲料配比调整到优选范围之外的时候，所制备的菌剂依然可以提高奶牛饲料的利用率，但是效果明显下降。
对比例2
参考实施例1所述方法，比较由植物乳杆菌CGMCC No.0847和干酪乳杆菌CGMCCNo.0828、植物乳杆菌ATCC 14917和干酪乳杆菌ATCC 393(从ATCC购买获得)制备的微生态菌剂对奶牛饲料利用率的提高效果，具体操作如下：
1、材料与方法
(a)种子(发酵菌种)的制备：
植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828、植物乳杆菌ATCC 14917、干酪乳杆菌ATCC 393：将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828、植物乳杆菌ATCC 14917和干酪乳杆菌ATCC393的冻干粉用少量无菌蒸馏水溶解，用接种环取一环划线于MRS固体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，37℃厌氧培养24h取出，用接种环挑取单菌落放入10mL MRS液体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，运用涡旋振荡器将菌落均匀分散于液体培养基内，37℃厌氧培养24h取出，以2％(v/v)接种量接种于MRS液体培养基(购买自OXOID Co.，英国)，37℃厌氧培养24h后，培养物15000rpm离心10分钟，弃去上清，菌体用无菌蒸馏水洗涤2次后，用原培养体积的无菌蒸馏水悬浮，得到发酵用的种子，种子液的菌浓度为7x108cfu/mL(CGMCC No.0847)、7x108cfu/mL(CGMCC No.0828)、6x108cfu/mL(ATCC14917)、5x108cfu/mL(ATCC 393)。
(b)植物乳杆菌CGMCC No.0847和干酪乳杆菌CGMCC No.0828制备的微生态菌剂、植物乳杆菌ATCC 14917和干酪乳杆菌ATCC 393制备的微生态菌剂对奶牛饲料利用率的提高效果的测定方法：同实施例1。
2、各组微生态菌剂的制备及其对奶牛饲料利用率提高效果的检测
将各菌种子以接种量3％(v/v)无菌接种于MRS液体培养基中，37℃厌氧培养16h得发酵液，分别将所得的两种发酵液10000g离心15min，弃上清，取菌体沉淀部分，用9％(w/v)脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥后将获得的植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828冻干粉以1：1(w/w)的比例干混复配即得微生态菌剂S，其中植物乳杆菌CGMCC No.0847的活菌数量为4.5x109cfu/g，干酪乳杆菌CGMCC No.0828的活菌数量为4.5x109cfu/g。将植物乳杆菌ATCC 14917、干酪乳杆菌ATCC 393冻干粉也以1：1(w/w)的比例干混复配即得微生态菌剂T1，其中植物乳杆菌ATCC14917的活菌数量为3.9x109cfu/g，干酪乳杆菌ATCC 393的活菌数量为3.0x109cfu/g。将植物乳杆菌CGMCC No.0847冻干粉直接用作微生态菌剂T2使用，其中植物乳杆菌CGMCC No.0847的活菌数量为9.0x109cfu/g。将干酪乳杆菌CGMCC No.0828冻干粉直接用作微生态菌剂T3使用，其中干酪乳杆菌CGMCCNo.0828的活菌数量为9.0x109cfu/g。
各组微生态菌剂对奶牛饲料利用率的提高效果如表8所示。
表8不同菌株制备的微生态菌剂对奶牛饲料利用率的提高效果
由表8可知，其他常规菌株制备的微生态菌剂基本不具有的提高奶牛饲料利用率的能力，而植物乳杆菌CGMCC No.0847和干酪乳杆菌CGMCC No.0828单菌所制备的微生态菌剂对奶牛饲料的提高效果较差(<10％)，但植物乳杆菌CGMCC No.0847和干酪乳杆菌CGMCCNo.0828双菌复配制备的微生态菌剂却可以显著促进奶牛饲料在瘤胃中的降解，最后达到提高饲料利用效率的目的。
以上对本发明所提供的微生态菌剂及其制备方法和应用进行了详细介绍。本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (10)

1.一种微生态菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(a)将植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828分别接种于MRS培养基中进行发酵，得到发酵液；
(b)将所得发酵液离心取菌体沉淀，以脱脂乳将菌体悬浮起来，冷冻干燥、干混复配即得。
2.根据权利要求1所述的微生态菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(a)中，所述植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828的接种量均为7x106～3.5x107cfu/mL。
3.根据权利要求1所述的微生态菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(a)中，所述发酵为厌氧培养。
4.根据权利要求1所述的微生态菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(a)中，所述发酵的温度为26℃～42℃，发酵的时间为8～24h。
5.根据权利要求1所述的微生态菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(b)中，所述离心的速度为8000～12000g，离心的时间为10～20min。
6.根据权利要求1所述的微生态菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(b)中，所述脱脂乳的浓度为8～10％。
7.根据权利要求1所述的微生态菌剂的制备方法，其特征在于，步骤(b)中，所述植物乳杆菌和干酪乳杆菌冻干粉的干混复配的质量比例为：1:9～9:1。
8.一种微生态菌剂，其特征在于，由权利要求1～7任一项所述的制备方法制得。
9.根据权利要求8所述的微生态菌剂，其特征在于，植物乳杆菌CGMCC No.0847、干酪乳杆菌CGMCC No.0828的活菌数量均为≥6x108cfu/g。
10.权利要求8～9所述的微生态菌剂的应用，其特征在于，将所述微生态菌剂添加于奶牛饲料中以提高其利用率，添加的微生态菌剂与奶牛饲料的质量比例为0.1％～0.5％。
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