CN108368062A

CN108368062A - Nk1受体拮抗剂

Info

Publication number: CN108368062A
Application number: CN201680071724.2A
Authority: CN
Inventors: 宫城贵史; 小林雅周; 西村俊洋
Original assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-12-07
Filing date: 2016-12-06
Publication date: 2018-08-03
Also published as: ES2813596T3; EP3388423A4; US20190002414A1; EP3388423B1; US10399949B2; KR20180090302A; WO2017099049A1; EP3388423A1; JPWO2017099049A1

Abstract

本发明解决了提供具有NK₁受体拮抗活性并可用于预防和治疗施用抗肿瘤剂伴发的恶心和呕吐的新型化合物的问题。本发明涉及由式(I)表示的化合物(在该式中，W表示氟原子等，环A表示环烷基等，X₁表示CH或N，R表示甲基等，Y表示0至2的数字，并且U¹、U²和U³各自独立地表示单键等)或其药理学上可接受的盐。该化合物或其药理学上可接受的盐具有优异的NK₁受体拮抗活性，并可用作施用抗肿瘤剂伴发的恶心和呕吐的预防剂或治疗剂。

Description

NK1受体拮抗剂

技术领域

本发明涉及可用作药物的NK₁受体拮抗剂。

更具体地说，本发明涉及NK₁受体拮抗剂或其药学上可接受的盐，其具有P物质/神经激肽1(NK₁)受体拮抗剂活性并可用作癌症化疗引起的恶心和呕吐(CINV)等的预防剂或治疗剂。

背景技术

当位于延髓外侧网状结构中的呕吐中枢受到刺激时，发生CINV。延髓的最后区和孤束核含有NK₁受体，并且NK₁受体被认为密切参与呕吐。

施用抗肿瘤剂促进消化道中肠嗜铬(EC)细胞的血清素分泌，而血清素通过消化道中的5-羟色胺₃(5-HT₃)受体直接刺激呕吐中枢。还有，当血清素通过位于第四脑室的最后区中的化学受体触发区(CTZ)刺激呕吐中枢时，发生恶心和呕吐。P物质如血清素存在于消化道的EC细胞中，并且施用抗肿瘤剂促进了它的分泌。近年来，已经揭示，P物质通过CTZ中的NK₁受体或通过与中枢神经系统中的NK₁受体结合来诱发呕吐，因此NK₁受体作为开发止吐剂的靶标已经引起了关注(非专利文献1)。

阿瑞吡坦(Aprepitant)是世界上第一个被批准作为与施用抗肿瘤剂相关的恶心和呕吐的预防剂的选择性NK₁受体拮抗剂。关于阿瑞吡坦的作用机制，认为阿瑞吡坦选择性抑制P物质与中枢神经系统中NK₁受体的结合，所述P物质与中枢神经系统中NK₁受体的结合是CINV的诱发途径之一，并由此预防CINV。阿瑞吡坦已经作为CINV的预防剂投放市场(非专利文献2)。

已知阿瑞吡坦通过细胞色素P450(CYP)3A4代谢。还有，已知阿瑞吡坦对CYP3A4具有剂量依赖性抑制作用、具有CYP3A4诱导作用和CYP2C9诱导作用。因此，阿瑞吡坦可能引起与抑制或诱导CYP3A4的药物或者与通过CYP3A4或CYP2C9代谢的药物的药物间相互作用。例如，据报道，阿瑞吡坦对CYP3A4的抑制作用有时抑制地塞米松的代谢，因此当地塞米松与阿瑞吡坦联用时，应该调整剂量(非专利文献3)。

因此，当使用阿瑞吡坦时，基于阿瑞吡坦对CYP3A4的抑制作用应该充分注意药物间相互作用，需要新型NK₁受体拮抗剂作为CINV的预防剂。

专利文献1至4中描述了具有NK₁受体拮抗剂活性的化合物。

但是，在上述文献中，关于本发明的NK₁受体拮抗剂均没有任何描述或提示。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本专利公布2003-511377号公报

专利文献2：日本专利公布2006-45208号公报

专利文献3：日本专利公布2007-197428号公报

专利文献4：国际公布WO 2008/133344

非专利文献

非专利文献1：P.J.Hesketh等，European Journal of Cancer，2003，第39卷，第1074-1080页

非专利文献2：Toni M.Dando等，Drugs，2004，第64卷，第7号，第777-794页

非专利文献3：Jacqueline B.McCrea等，CLINICAL PHARMACOLOGY&THERAPEUTICS，2003，第74卷，第1期，第17-24页

发明内容

发明要解决的问题

本发明的问题是提供一种新型化合物，其具有NK₁受体拮抗剂活性并且可用于预防或治疗癌症化疗引起的恶心和呕吐。

解决问题的手段

本发明涉及由下面式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐。

也就是说，本发明涉及以下[1]至[10]等。

[1]由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐：

[化学式1]

其中

W是氢原子或氟原子；

环A是选自由下列(a)至(d)组成的组的基团：

[化学式2]

其中

带有*的键是与U²键合的位点；

k表示1至5的整数；

r是1或2；

m和n各自独立地是1、2或3；

X¹是CH或N；

R是甲基、羟基或卤素原子；

Y是0、1或2；

当Y是2时，两个R任选地彼此不同；

U¹、U²和U³各自独立地是单键、羰基或可具有选自取代基组α的任何基团的亚甲基；

当环A是由上面的(a)表示的基团时，U¹或U²中的任一个是羰基；取代基组α是由卤素原子、羟基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基组成的组。

[2]根据上面[1]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X¹是N。

[3]根据[1]或[2]所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中W是氟原子。

[4]根据上面[3]所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Ia)表示：

[化学式3]

其中

环B是由下式表示的基团：

[化学式4]

其中

带有*的键是与U²键合的位点；

U¹、U²和U³具有与上面[1]中所述的相同含义。

[5]根据上面[4]所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Ib)表示：

[化学式5]

其中

U⁴、U⁵和U⁶各自独立地是单键或可具有选自取代基组α的任何取代基的亚甲基；

取代基组α具有与上面[1]中所述的相同含义。

[6]根据上面[5]所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Ic)表示：

[化学式6]

其中

U⁷和U⁸各自独立地是单键或可具有选自取代基组β的任何取代基的亚甲基；

取代基组β是由氟原子和甲基组成的组。

[7]根据上面[6]所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Id)表示：

[化学式7]

其中

U⁹是单键或亚甲基。

[8]根据上面[1]所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Ie)表示：

[化学式8]

其中

U¹⁰和U¹¹各自独立地是是单键或亚甲基。

[9]一种药物组合物，其包含根据上面[1]至[8]中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。

[10]根据上面[9]所述的药物组合物，其用于预防癌症化疗引起的恶心和呕吐。

发明的效果

本发明的化合物具有优异的NK₁受体拮抗剂活性。因此，本发明的化合物或其药学上可接受的盐可用作癌症化疗引起的恶心和呕吐的预防剂或治疗剂。

具体实施方式

下面将进一步详细描述本发明的实施方式。

在本发明中，除非另有说明，各术语具有以下含义。

术语“C_1-6烷基”是指具有1至6个碳原子的直链或支链烷基基团，例如，可以例举甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。

术语“C_1-6烷氧基”是指具有1至6个碳原子的直链或支链烷氧基基团，例如，可以例举甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基等。

术语“可具有选自取代基组α的任何基团的亚甲基”是指任选地具有1至2个选自取代基组α的相同或不同基团，并优选没有或有1个取代基。

术语“可具有选自取代基组β的任何基团的亚甲基”是指任选地具有1至2个选自取代基组β的相同或不同基团，并优选没有或有1个取代基。

在本发明的由式(I)表示的化合物含有一个或多个不对称碳原子的情况下，每个不对称碳处的R或S构型的所有立体异构体和它们的混合物都被包括在本发明中。在这样的情况下，消旋化合物、消旋混合物、单独的对映异构体以及非对映异构体的混合物都被包括在本发明的范围内。在本发明的由式(I)表示的化合物具有顺-反异构体的情况下，所有顺-反异构体都被包括在本发明中。

在本发明中，立体化学结构也可以根据本领域公知的方法来确定。例如，也参见“特论NMR立体化学”(讲谈社)，(2012年发行)，第59页。

本发明的由式(I)表示的化合物可以根据常规方法转变为其药学上可接受的盐。作为这样的盐，可以例举酸加成盐和与碱形成的盐。

作为酸加成盐，可以例举与无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的酸加成盐，以及与有机酸例如甲酸、乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、丙酸、柠檬酸、琥珀酸、酒石酸、富马酸、丁酸、草酸、丙二酸、马来酸、乳酸、苹果酸、碳酸、苯甲酸、谷氨酸、天冬氨酸等形成的酸加成盐。

作为与碱形成的盐，可以例举与无机碱例如锂、钠、钾、钙、镁等形成的盐，以及与有机碱例如N-甲基-D-葡糖胺、N,N'-二苄基乙二胺、三乙胺、哌啶、吗啉、吡咯烷、精氨酸、赖氨酸、胆碱等形成的盐。

在本发明中，药学上可接受的盐也包括其与药学上可接受的溶剂例如水、乙醇等形成的溶剂合物。

本发明的由式(I)表示的化合物也可以例如通过下述的方法或与其类似的方法、或者文献中描述的方法或与其类似的方法来制备。

在本发明的由式(I)表示的化合物的一个实施方式中，环A可以使用5或6元杂芳基例如噻唑基、吡咯基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、吡啶基等；3至8元杂环烷基例如哌嗪基、四氢呋喃基、吗啉基等；杂环化合物例如吲哚基、苯并咪唑基、咪唑并吡嗪基、咪唑并吡啶基等。

在本发明的由式(I)表示的化合物的一个实施方式中，Y优选是0。

在本发明的由式(I)表示的化合物的一个实施方式中，U¹和U²优选是选自由下述(1)至(6)组成的组的基团：

(1)U¹是单键且U²是单键；

(2)U¹是单键且U²是可具有选自取代基组α的任何基团的亚甲基；

(3)U¹是单键且U²是羰基；

(4)U¹是可具有选自取代基组α的任何基团的亚甲基且U²是羰基；

(5)U¹是羰基且U²是可具有选自取代基组α的任何基团的亚甲基；以及

(6)U¹是可具有选自取代基组α的任何基团的亚甲基且U²是可具有选自取代基组α的任何基团的亚甲基。

本发明的由式(I)表示的化合物也可以例如通过方案1至方案11中描述的方法或与其类似方法、或者在文献中描述的方法或与其类似的方法而被制备为化合物(IA)至(IK)。

由式(IA)表示的化合物可以例如通过方案1的工序1中描述的方法来制备。

[化学式9]

方案1

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是如上面(b)中所述的基团。U¹是单键且U²是单键。

工序1

化合物(IA)也可以通过使化合物(1)与环酮化合物在惰性溶剂中反应、然后在存在或不存在乙酸的情况下与还原剂反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为还原剂，可以例举硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、2-甲基吡啶硼烷等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从10分钟至7天。作为通过工序1合成的化合物，例如，可以例举实施例1、6、12等。

由式(IB)表示的化合物可以例如通过方案2的工序2中描述的方法来制备。

[化学式10]

方案2

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是选自由上面(b)、(c)和(d)组成的组的基团。U¹是单键且R¹是氢原子或C_1-6烷基。

工序2

化合物(IB)也可以通过使化合物(1)与化合物(2)在惰性溶剂中反应、然后在存在或不存在乙酸的情况下与还原剂反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为还原剂，可以例举硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、2-甲基吡啶硼烷等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从10分钟至7天。作为通过工序2合成的化合物，例如，可以例举实施例4、5、7、8、11、13、14等。

由式(IC)表示的化合物可以例如通过方案3的工序3中描述的方法来制备。

[化学式11]

方案3

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是选自由上面(b)、(c)和(d)组成的组的基团。U¹是单键且U²是可具有选自取代基组α的任何取代基的亚甲基。L¹表示离去基团例如氯原子、溴原子、碘原子等。

工序3

化合物(IC)也可以通过使化合物(1)与化合物(3)在惰性溶剂中在存在或不存在碱的情况下反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。作为通过工序3合成的化合物，例如，可以例举实施例9等。

由式(ID)表示的化合物可以例如通过方案4的工序4A或4B中描述的方法来制备。

[化学式12]

方案4

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是选自由上面(b)、(c)和(d)组成的组的基团。U¹是单键且U²是羰基。

工序4A

化合物(ID)也可以通过在惰性溶剂中，在碱存在或不存在下，利用缩合剂使化合物(1)与羧酸化合物进行缩合反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。作为缩合剂，可以例举1,1'-羰基二咪唑(CDI)、1-羟基苯并三唑(HOBt)、N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(水溶性碳二亚胺盐酸盐(WSCD·HCl))、PyBOP(注册商标)、PyBroP(注册商标)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HATU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。作为通过工序4A合成的化合物，例如，可以例举实施例2、3等。

工序4B

化合物(ID)也可以通过使化合物(1)与酰氯化合物在惰性溶剂中在存在或不存在碱的情况下反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从10分钟至7天。

由式(IE)表示的化合物可以例如通过方案5的工序5中描述的方法来制备。

[化学式13]

方案5

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是选自由上面(a)、(b)、(c)和(d)组成的组的基团。U¹是单键且U²是羰基。

工序5

化合物(IE)也可以通过使化合物(1)与活性酯化合物例如化合物(4)在惰性溶剂中在存在或不存在碱的情况下反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。作为通过工序5合成的化合物，例如，可以例举实施例10等。

由式(IF)表示的化合物可以例如通过方案6的工序6中描述的方法来制备。

[化学式14]

方案6

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是上面(a)中所述的基团。U¹是单键且U²是羰基。

工序6

化合物(IF)也可以通过使化合物(1)与环状羧酸化合物在惰性溶剂中在存在或不存在碱的情况下利用缩合剂进行反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。作为缩合剂，可以例举CDI、三光气等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。

由式(IG)表示的化合物可以例如通过方案7的工序7中描述的方法来制备。

[化学式15]

方案7

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是选自由上面(a)、(b)、(c)和(d)组成的组的基团。U¹是可具有选自取代基组α的任何取代基的亚甲基且U²是羰基。L¹表示离去基团例如氯原子、溴原子、碘原子等。

工序7

化合物(IG)也可以通过使化合物(1)与化合物(5)在惰性溶剂中在存在或不存在碱的情况下反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。

由式(IH)表示的化合物可以例如通过方案8的工序8A或8B中描述的方法来制备。

[化学式16]

方案8

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是选自由上面(a)、(b)、(c)和(d)组成的组的基团。U¹是羰基且U²是可具有选自取代基组α的任何取代基的亚甲基。

工序8A

化合物(IH)也可以通过在惰性溶剂中在碱存在或不存在下利用缩合剂使化合物(1)与羧酸化合物进行缩合反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。作为缩合剂，可以例举CDI、HOBt、DCC、WSCD·HCl、PyBOP(注册商标)、PyBroP(注册商标)、HATU、HBTU等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。

工序8B

化合物(IH)也可以通过使化合物(1)与酰氯化合物在惰性溶剂中在存在或不存在碱的情况下反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从10分钟至7天。

由式(IJ)表示的化合物可以例如通过方案9的工序9中描述的方法来制备。

[化学式17]

方案9

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是选自由上面(a)、(b)、(c)和(d)组成的组的基团。U²是可具有选自取代基组α的任何取代基的亚甲基。R¹表示氢原子或C_1-6烷基。

工序9

化合物(IJ)也可以通过使化合物(1)与化合物(6)在惰性溶剂中反应、然后在存在或不存在乙酸的情况下与还原剂反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为还原剂，可以例举硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、2-甲基吡啶硼烷等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从10分钟至7天。

由式(IK)表示的化合物可以例如通过方案10的工序10中描述的方法来制备。

[化学式18]

方案10

在该式中，W、R、Y、X¹和U³具有与上述定义相同的含义。环A是选自由上面(a)、(b)、(c)和(d)组成的组的基团。U¹是可具有选自取代基组α的任何取代基的亚甲基且U²是可具有选自取代基组α的任何取代基的亚甲基。L¹表示离去基团例如氯原子、溴原子、碘原子等。

工序10

化合物(IK)也可以通过使化合物(1)与化合物(7)在惰性溶剂中在存在或不存在碱的情况下反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。。

在化合物(1)中，其中X¹是碳原子的化合物(1-1)可以例如通过方案11的工序11至17中描述的方法来制备。

[化学式19]

方案11

在该式中，W具有与上述定义相同的含义。PG表示保护基团。

工序11

化合物(9)也可以通过使化合物(8)与碱在惰性溶剂中反应、然后与三氟甲磺酰基试剂反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、2,6-二叔丁基吡啶、氢氧化钠、二异丙基氨基锂、双(三甲基甲硅烷基)氨基钠、双(三甲基甲硅烷基)氨基锂、双(三甲基甲硅烷基)氨基钾等。作为三氟甲磺酰基试剂，可以例举三氟甲磺酸酐、N-苯基-双(三氟甲磺酰亚胺)、N-(5-氯-2-吡啶基)双(三氟甲磺酰亚胺)等。反应温度通常在-78℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从10分钟至7天。

工序12

化合物(11)也可以通过使化合物(9)与化合物(10)在惰性溶剂中在碱和钯催化剂存在下进行偶联反应来制备。作为惰性溶剂，例如，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、乙醚、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯、乙醇、水及其混合溶剂等。作为碱，例如，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氟化钾、氟化铯、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。作为钯催化剂，可以例举1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)-二氯甲烷络合物(1:1)、四(三苯基膦)钯(0)等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。上述偶联反应还可以通过使用微波反应器(Biotage)来进行。当使用微波反应器时，基于所使用的原料、溶剂和型号而异，所述反应在压力范围：1至30巴、功率范围：1至400W、反应温度：室温至300℃、和反应时间：1分钟至1天下进行。

工序13

化合物(12)也可以通过将化合物(11)的苄基去保护、然后用叔丁氧基羰基对它进行保护来制备。

工序14

化合物(13)也可以通过催化还原法等还原化合物(12)的烯烃来制备。所述催化还原法可以例如通过在氢气气氛下在惰性溶剂中使用催化剂让化合物(12)反应来进行。作为惰性溶剂，例如，可以例举甲醇、乙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃和乙酸。作为催化剂，例如，可以例举钯-碳粉末、铑-碳粉末、铂-碳粉末、氧化铂(IV)、钒掺杂的铂-碳粉末。反应温度通常在室温至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。

工序15

化合物(14)也可以通过在惰性溶剂中进行化合物(13)的碱性水解来制备。作为惰性溶剂，可以例举甲醇、乙醇、四氢呋喃、1,4-二烷、水、其混合溶剂等。作为碱，可以使用氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、甲醇钠、乙醇钠等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。作为碱性水解的替代，化合物(14)也可以通过进行酸水解或氢解来制备。

工序16

化合物(16)也可以通过在惰性溶剂中利用缩合剂使化合物(14)与化合物(15)反应来制备。作为惰性溶剂，可以例举N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、四氢呋喃、1,4-二烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯及其混合溶剂等。作为碱，可以例举碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、2,6-二甲基吡啶、和1,8-二氮杂双环[5.4.0]-7-十一碳烯等。作为缩合剂，可以例举CDI、HOBt、DCC、WSCD·HCl、PyBOP(注册商标)、PyBroP(注册商标)、HATU、HBTU等。反应温度通常在0℃至回流温度。反应时间基于所使用的原料、溶剂和反应温度等而异，通常从30分钟至7天。

工序17

化合物(1-1)也可以通过将化合物(16)的叔丁氧基羰基基团去保护来制备。

上述方案对于制备本发明的由式(I)表示的化合物及其合成中间体来说是示例性的。上述方案可以被改变或修改为本领域普通技术人员可以易于理解的方案。

在上述方案中，化合物(1)的盐也可以用作代替化合物(1)的原料。当使用化合物(1)的盐时，也可以通过添加作为游离形式使用的碱等来实施反应。

在上述方案中，当基于官能团的变化需要保护基团时，引入和除去的操作也可以根据一般方法任选地以组合形式实施。

如果需要，本发明的由(I)表示的化合物及其中间体也可以根据相关领域普通技术人员公知的常规分离和纯化技术例如溶剂萃取、结晶、重结晶、色谱、制备型高效液相色谱等进行分离和纯化。

本发明的化合物具有优异的NK₁受体拮抗剂活性，因此也可以用作由NK₁受体介导的各种疾病的预防剂或治疗剂。例如，本发明的化合物可用作止吐剂，尤其可用作癌症化疗(例如顺铂)引起的胃肠道症状(例如恶心和呕吐)的预防剂。本发明的优选化合物不仅可用于癌症化疗引起的急性恶心和呕吐，而且可用于癌症化疗引起的迟发性恶心和呕吐。

在一种实施方式中，本发明的化合物具有优异的NK₁受体拮抗剂活性，因此也可以用作术后恶心和呕吐(PONV)、放疗伴发的恶心和呕吐、咖啡诱发的呕吐或晕运的预防剂，以及精神分裂症、社交恐惧症、焦虑和抑郁、酒精中毒、过敏性肠综合征、溃疡性结肠炎、咳嗽、哮喘、特应性皮炎、银屑病、搔痒症、疼痛、偏头痛、耳鸣、良性前列腺增生、膀胱过度活动症或尿失禁的治疗剂。

取决于它们的用法，本发明的药物组合物可以以各种剂型施用。作为这样的剂型，例如，可以例举粉剂、颗粒剂、细粒剂、干糖浆剂、片剂、胶囊剂、注射剂、液体剂、软膏剂、栓剂和贴敷剂，它们经口或肠胃外施用。

本发明的药物组合物可以通过使用由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐和至少一种药物添加剂来制备。取决于它们的剂型，这些药物组合物可以根据常规配制程序通过与适当的药物添加剂例如赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、稀释剂、缓冲剂、张度剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、增溶剂等混合，或者用所述药物添加剂稀释或溶解来配制。

当本发明的药物组合物用于预防或治疗时，由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的剂量取决于各患者的年龄、性别、体重、疾病和治疗的程度等适当决定。成人的剂量在经口施用的情况下可以在例如0.1至1000mg/日、0.1至500mg/日、0.1至100mg/日或0.1至50mg/日的范围内决定，并且所述日剂量可以分成每日一、二、三或四次施用。并且，成人的剂量在肠胃外施用的情况下可以在例如0.1至1000mg/日、0.1至500mg/日、0.1至100mg/日或0.1至50mg/日的范围内决定，并且所述日剂量可以分成每日一、二、三或四次施用。

当本发明的药物组合物用于预防癌症化疗引起的恶心和呕吐时，该药物也可以在施用抗肿瘤剂之前施用。例如，所述药物可以在化疗中施用之前立即至施用一个半小时之前施用，并且在第二日之后，也可以在上午施用所述药物。

在一种实施方式中，本发明的由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐也可以与NK₁受体拮抗剂以外的任何其他药物组合使用。作为组合使用的这类其他药物，例如，可以例举皮质类固醇和5-HT₃受体拮抗剂型止吐剂。

当本发明的由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐与其他药物组合使用时，它可以作为将这些活性成分包含在一起的制剂或作为每种活性成分分别配制的制剂施用。当分别配制时，这些制剂可以分别或同时施用。

此外，本发明的由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐的剂量可以根据组合使用的其他药物的剂量而减少。

实施例

通过以下参考例、实施例和试验例进一步更详细地说明本发明。然而，本发明不限于此。

参考例1

{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基]环己基}乙酸甲酯

将(S)-2-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羧酸[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲酰胺甲磺酸酯(1:1)(0.059g)、4-氧代-环己基)乙酸甲酯(0.026g)和三乙胺(0.020g)在四氢呋喃(3mL)中的溶液在室温下搅拌10分钟。在室温下向所述反应混合物添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.042g)和乙酸(0.012g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取所生成的混合物。将有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯/甲醇)来纯化，得到标题化合物(0.050g)。

参考例2和3

顺式-4-乙氧基羰基甲基环己烷羧酸苄酯(参考例2)和反式-4-乙氧基羰基甲基环己烷羧酸苄酯(参考例3)

向4-乙氧基羰基甲基环己烷羧酸(8.96g)在二氯甲烷(50mL)中的溶液添加N,N-二甲基甲酰胺(0.010mL)，在室温下向所生成的混合物滴加草酰氯(10.62g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩，向残渣添加二氯甲烷，然后再次浓缩。将该步骤重复3次。向所得的残渣添加二氯甲烷(50mL)和三乙胺(6.35g)，在冰冷却下向所生成的混合物滴加苯甲醇(5.43g)，并将所述混合物在室温下搅拌过夜。向所述反应混合物添加饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取所生成的混合物。将有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯)来纯化，得到参考例2(2.51g)和参考例3(3.43g)两者。在上述色谱中，参考例2的化合物在低极性侧，而参考例3的化合物在高极性侧。

参考例4

顺式-4-乙氧基羰基甲基环己烷羧酸

在氢气气氛下，将顺式-4-乙氧基羰基甲基环己烷羧酸苄酯(2.51g)和10％碳载钯(0.03g，湿)在乙醇(20mL)中的悬液在室温下搅拌过夜。将所述反应混合物通过Celite(注册商标)垫过滤，并将滤液在减压下浓缩，得到标题化合物(1.81g)。

参考例5

使用相应的原料，以与参考例4中所述的类似方式制备参考例5的化合物。

参考例6

顺式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羰基]环己基}乙酸乙酯

在室温下向(S)-2-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羧酸[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲酰胺甲磺酸酯(0.059g)、顺式-4-乙氧基羰基甲基环己烷羧酸(0.032g)和N,N-二异丙基乙胺(0.039g)在N,N-二甲基甲酰胺中的溶液添加O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(0.076g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加水，并用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤两次，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝80/20至0/100)来纯化，得到标题化合物(0.070g)。

参考例7

使用相应的原料，以与参考例6中所述的类似方式制备参考例7的化合物。

参考例8

顺式-(4-羟基甲基环己基)乙酸乙酯

在氩气气氛下，向顺式-4-乙氧基羰基甲基环己烷羧酸(0.43g)在四氢呋喃(10mL)中的溶液滴加硼烷-四氢呋喃络合物(1.0mol/L的四氢呋喃溶液，3.0mL)。将所述混合物在室温下搅拌过夜后，在相同温度下向所述混合物添加水。向所述混合物添加盐水，并用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝60/40至0/100)来纯化，得到标题化合物(0.33g)。

参考例9

使用相应的原料，以与参考例8中所述的类似方式制备参考例9的化合物。

参考例10

顺式-(4-甲酰基环己基)乙酸乙酯

在冰冷却下，向顺式-(4-羟基甲基环己基)乙酸乙酯(0.33g)在二氯甲烷(10mL)中的溶液添加戴斯-马丁高碘烷(0.85g)，并将所述混合物在室温下搅拌4小时。将所述反应混合物用乙酸乙酯稀释，并将所生成的混合物用1.0mol/L氢氧化钠水溶液和盐水洗涤。有机层经无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝85/15至0/100)来纯化，得到标题化合物(0.20g)。

参考例11

使用相应的原料，以与参考例10中所述的类似方式制备参考例11的化合物。

参考例12至14

使用相应的原料，以与参考例1中所述的类似方式制备参考例12至14的化合物。

参考例15

顺式-4-羟甲基环己烷羧酸甲酯

在冰冷却下，向顺式-环己烷-1,4-二羧酸单甲酯(1.0g)在四氢呋喃(50mL)中的溶液添加硼烷-二甲基硫醚络合物(0.61g)，并将所述混合物在相同的温度下搅拌15分钟并在室温下搅拌4小时。在室温下向所述反应混合物添加甲醇(0.17g)，并搅拌20分钟，并将所述混合物在减压下浓缩。在室温下向残渣添加甲基叔丁基醚(30mL)，并将所述混合物搅拌一会儿，并通过Celite(注册商标)垫过滤来除去不溶物，并将滤液在减压下浓缩。向残渣添加1.0mol/L氢氧化钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取所述混合物。将有机层用水和盐水洗涤。有机层经无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂，得到标题化合物(0.87g)。

参考例16

使用相应的原料，以与参考例15中所述的类似方式制备参考例16的化合物。

参考例17

顺式-4-甲酰基环己烷羧酸甲酯

在氩气气氛下，在-78℃下向二甲基亚砜(0.90g)在二氯甲烷(40mL)中的溶液添加草酰氯(0.73g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌5分钟。在-78℃下向所述反应混合物滴加顺式-4-羟甲基环己烷羧酸甲酯(0.83g)在二氯甲烷(10mL)中的溶液，并将所述混合物在相同温度下搅拌30分钟。在-78℃下向所述反应混合物添加三乙胺(2.43g)，并在相同温度下搅拌15分钟。在冰冷却下向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(15mL)，并分离有机层。将有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂，得到标题化合物(0.78g)。

参考例18

使用相应的原料，以与参考例17中所述的类似方式制备参考例18的化合物。

参考例19和20

使用相应的原料，以与参考例1中所述的类似方式制备参考例19和20的化合物。

参考例21

{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]苯基}乙酸甲酯

在室温下向(S)-2-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羧酸[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲酰胺甲磺酸酯(0.080g)在N,N-二甲基甲酰胺(0.32mL)中的溶液添加N,N-二异丙基乙胺(0.039g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌30分钟。在冰冷却下向所述反应混合物添加(4-溴甲基苯基)乙酸甲酯(0.036g)在N,N-二甲基甲酰胺(0.15mL)中的溶液，并将所述混合物在相同温度下搅拌30分钟。向所述反应混合物添加水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。残渣通过氨丙基化硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯)来纯化，得到标题化合物(0.086g)。

参考例22

4-乙氧基羰基甲基哌啶-1-羧酸4-硝基苯酯

在室温下向哌啶-4-基乙酸乙酯(0.20g)在四氢呋喃(18mL)中的溶液添加氯甲酸4-硝基苯酯(0.26g)和三乙胺(0.36g)，并将所述混合物在相同的温度下搅拌12小时。过滤反应混合物，将滤液在减压下浓缩。残渣通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯)来纯化，得到标题化合物(0.33g)。

参考例23

{1-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羰基]哌啶-4-基}乙酸乙酯

在室温下向(S)-2-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羧酸[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲酰胺甲磺酸酯(0.051g)在N,N-二甲基甲酰胺(0.50mL)中的溶液添加三乙胺(0.017g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌30分钟。在室温下向所述反应混合物添加4-乙氧基羰基甲基哌嗪-1-羧酸4-硝基苯酯(0.043g)，并将所述混合物在120℃下搅拌15小时。将反应混合物冷却至室温，并添加水。将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。将水层用乙酸乙酯再萃取。合并的有机层经无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。残渣通过氨丙基化硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯)来纯化，得到标题化合物。

参考例24

3-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]双环[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯

在室温下向(S)-2-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羧酸[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲酰胺甲磺酸酯(0.12g)和3-甲酰基双环[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯(0.049g)在四氢呋喃(5.3mL)中的溶液添加N,N-二异丙基乙胺(0.055g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌30分钟。在室温下向所述反应混合物添加三乙酰氧基硼氢化钠(0.090g)和乙酸(0.026g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌12小时。向所述反应混合物添加饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取所生成的混合物。萃取物经无水硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。残渣通过氨丙基化硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯)来纯化，得到标题化合物(0.048g)。

参考例25

1-苄基-5-(4-氟-2-甲基苯基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-羧酸乙酯

在冰冷却下向氢化钠(60％，0.67g)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的悬液添加1-苄基-3-氧代哌嗪-4-羧酸乙酯盐酸盐(2.0g)，并将所述混合物在冰冷却下搅拌5分钟。在冰冷却下向所述反应混合物添加N-苯基双(三氟甲磺酰亚胺)(2.64g)，并将所述混合物在室温下搅拌2小时。向所述反应混合物添加水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和氯化铵水溶液和盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝91/9至50/100)来纯化，得到1-苄基-5-三氟甲磺酰氧基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-羧酸乙酯(2.82g)。在氩气气氛下，在室温下向1-苄基-5-三氟甲磺酰氧基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-羧酸乙酯(2.82g)、4-氟-2-甲基苯基硼酸(1.55g)、甲苯(20mL)和水(2mL)的混合物添加四(三苯基膦)钯(0)(0.39g)和碳酸钾(0.93g)，并将所述混合物在100℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，并添加水。将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。将有机层用饱和氯化铵水溶液和盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝91/9至50/50)来纯化，得到标题化合物(2.29g)。

参考例26

5-(4-氟-2-甲基苯基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-羧酸乙酯盐酸盐

在室温下向1-苄基-5-(4-氟-2-甲基苯基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-羧酸乙酯(2.29g)在乙酸乙酯(20mL)中的溶液添加氯化氢溶液(4.0mol/L乙酸乙酯溶液，1.78mL)。向所述反应混合物添加正己烷(20mL)，并将所述混合物在相同温度下搅拌1小时。通过过滤来收集析出的晶体，并在减压下干燥，得到粗产物。在室温下向所述粗产物、乙醇(75mL)和甲醇(15mL)的混合物添加10％碳载钯(0.8g，湿)，并将所生成的混合物在氢气气氛下在室温下搅拌过夜。将所述反应混合物通过Celite(注册商标)垫过滤，并将滤液在减压下浓缩，得到标题化合物(1.98g)。

参考例27

5-(4-氟-2-甲基苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1,4-二羧酸1-叔丁基4-乙酯

在室温下向5-(4-氟-2-甲基苯基)-1,2,3,6-四氢吡啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(1.94g)和三乙胺(1.44g)在乙腈(50mL)中的溶液添加二碳酸二叔丁酯(2.12g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌2天。将反应混合物在减压下浓缩。向残渣添加水，并用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝95/5至50/50)来纯化，得到标题化合物(1.70g)。

参考例28

3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁基4-乙酯

在氢气气氛下，将5-(4-氟-2-甲基苯基)-3,6-二氢-2H-吡啶-1,4-二羧酸1-叔丁基4-乙酯(1.69g)和氧化铂(IV)(0.21g)在乙酸(8mL)中的悬液在室温下搅拌24小时。将所述反应混合物通过Celite(注册商标)垫过滤，并将滤液在减压下浓缩。向残渣添加甲苯，然后两次共沸除去溶剂。向残渣添加饱和碳酸氢钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取所述混合物。将有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝95/5至50/50)来纯化，得到标题化合物(0.62g)。

参考例29

3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁酯

在室温下向3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1,4-二羧酸1-叔丁基4-乙酯(0.62g)在甲醇(8mL)中的溶液添加甲醇钠(28％甲醇溶液，0.66mL)，并将所述混合物在回流下加热5小时。向所述反应混合物添加1.0mol/L氢氧化钠水溶液(5.1mL)和四氢呋喃(20mL)，并将所述混合物在60℃下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(10mL)和盐水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。将水层用乙酸乙酯再萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤两次，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂，得到标题化合物(0.59g)。

参考例30

[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲胺D-(+)-苹果酸酯

在氩气气氛下，在室温下向1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙酮(10.25g)在甲醇(15mL)中的溶液添加甲胺(9.8mol/L甲醇溶液，10.2mL)，并将所述混合物在室温下搅拌24小时。在冰冷却下向所述反应混合物添加硼氢化钠(0.95g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌30分钟。在冰冷却下向所述反应混合物添加硼氢化钠(0.58g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌4小时。将反应混合物在减压下浓缩，并向残渣添加饱和氯化铵水溶液，并用乙酸乙酯萃取所述混合物。将水层用乙酸乙酯再萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂，得到残渣。向所得的残渣添加乙酸乙酯(90mL)进行溶解，并在室温下向所述混合物添加L-(-)-苹果酸(4.83g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。将得到的悬浮液在冰冷却下搅拌3小时。通过过滤来收集晶体后，向滤液添加饱和碳酸钠水溶液，并用乙酸乙酯萃取所述混合物。将有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂，得到残渣。在室温下向所述残渣在乙酸乙酯(55mL)中的溶液中添加D-(+)-苹果酸(3.21g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌3小时。通过过滤来收集析出的晶体，并在减压下干燥。将得到的粗晶体在乙酸乙酯(65mL)中加热进行溶解，并将溶液在室温下搅拌1小时并在冰冷却下搅拌1.5小时。通过过滤来收集析出的晶体，在减压下干燥，得到标题化合物(4.76g)。

参考例31

(3S,4S)-4-{[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

向[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲胺D-(+)-苹果酸酯(1.03g)添加饱和碳酸钠水溶液，并将所述混合物用乙酸乙酯萃取。将水层用乙酸乙酯再萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸钠干燥，在减压下除去溶剂。将残渣溶解在N,N-二甲基甲酰胺中后，在室温下向所述混合物添加3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1,4-二羧酸1-叔丁酯(0.57g)、N,N-二异丙基乙胺(0.66g)和O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.29g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。将水层用乙酸乙酯再萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，并经无水硫酸镁干燥，在减压下除去溶剂。所得粗产物通过硅胶柱色谱(洗脱液：正己烷/乙酸乙酯＝95/5至50/50)来纯化，得到标题化合物(0.39g)。

参考例32

(3S,4S)-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-4-羧酸[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲酰胺盐酸盐

在室温下向(3S，4S)-4-{[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.39g)在乙醇(5mL)中的溶液添加4mol/L氯化氢在乙酸乙酯(0.66mL)中的溶液，并将所述混合物在50℃下搅拌5小时。将所述反应混合物冷却到室温后，在减压下浓缩溶剂。向所述残渣添加乙酸乙酯和乙醚，然后通过过滤来收集析出的晶体，并在减压下干燥，得到标题化合物(0.23g)。

参考例33至35

使用相应的原料，以与参考例1中所述的类似方式制备参考例33至35的化合物。

实施例1

{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基]环己基}乙酸

在室温下向{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基-氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基]环己基}乙酸甲酯(0.043g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.014g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(0.33mL)和水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.03g)。

实施例2

顺式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羰基]环己基}乙酸

在室温下向顺式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羰基]环己基}乙酸乙酯(0.066g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.048g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(1.15mL)和水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.06g)。

实施例3

反式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羰基]环己基}乙酸

在室温下向反式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羰基]环己基}乙酸乙酯(0.062g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.019g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(0.45mL)和水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.04g)。

实施例4

顺式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]环己基}乙酸

在室温下向顺式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]环己基}乙酸乙酯(0.062g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.019g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(0.46mL)和水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.06g)。

实施例5

反式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]环己基}乙酸

在室温下向反式-{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]环己基}乙酸乙酯(0.065g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.020g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(0.45mL)和水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.06g)。

实施例6

4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基]环己烷羧酸

在室温下向4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基]环己烷羧酸乙酯(0.040g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.026g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌2天。向所述反应混合物添加2.0mol/L盐酸(0.50ml)，并用乙酸乙酯萃取所述混合物。将有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.036g)。

实施例7

顺式-4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]环己烷羧酸

在室温下向顺式-4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]环己烷羧酸甲酯(0.053g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.035g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌2天。向所述反应混合物添加2.0mol/L盐酸(0.50ml)，并用乙酸乙酯萃取所述混合物。将有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.040g)。

实施例8

反式-4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]环己烷羧酸

在室温下向反式-4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]环己烷羧酸甲酯(0.058g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.038g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌2天。向所述反应混合物添加2.0mol/L盐酸(0.50ml)，并用乙酸乙酯萃取所述混合物。将有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.052g)。

实施例9

{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]苯基}乙酸

在室温下向{4-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基-氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]苯基}乙酸甲酯(0.084g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(0.5mL)和水(0.5mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.016g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌11小时。向所述反应混合物添加2.0mol/L盐酸(0.19mL)和水，并用乙酸乙酯萃取所生成的混合物。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.081g)。

实施例10

{1-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羰基]哌啶-4-基}乙酸

在室温下向{1-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基-氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-羰基]哌啶-4-基}乙酸乙酯(0.11g)、四氢呋喃(1.6mL)、甲醇(0.8mL)和水(0.8mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.021g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌4小时。向所述反应混合物添加2.0mol/L盐酸(0.25mL)和水，并用乙酸乙酯萃取所生成的混合物。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.10g)。

实施例11

3-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]双环[1.1.1]戊烷-1-羧酸

在室温下向3-[(S)-4-{[(R)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基-氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌嗪-1-基甲基]双环[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯(0.048g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(0.5mL)和水(0.5mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.010g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌4小时。向所述反应混合物添加2.0mol/L盐酸(0.12mL)和水，并用乙酸乙酯萃取所生成的混合物。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.050g)。

实施例12

{4-[(3S,4S)-4-{[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-基]环己基}乙酸

在室温下向{4-[(3S,4S)-4-{[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]-甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-基]环己基}乙酸甲酯(0.042g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.020g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(0.47mL)和水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.030g)。

实施例13

顺式-{4-[(3S,4S)-4-{[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-基甲基]环己基}乙酸

在室温下向顺式-{4-[(3S,4S)-4-{[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)-哌啶-1-基甲基]环己基}乙酸乙酯(0.035g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.011g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(0.26mL)和水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.020g)。

实施例14

反式-{4-[(3S,4S)-4-{[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)哌啶-1-基甲基]环己基}乙酸

在室温下向反式-{4-[(3S,4S)-4-{[(S)-1-(3,5-双三氟甲基苯基)乙基]甲基氨甲酰基}-3-(4-氟-2-甲基苯基)-哌啶-1-基甲基]环己基}乙酸乙酯(0.039g)、四氢呋喃(1mL)、甲醇(1mL)和水(0.3mL)的混合物添加氢氧化锂一水合物(0.012g)，并将所述混合物在相同温度下搅拌过夜。向所述反应混合物添加1.0mol/L盐酸(0.29mL)和水，并将所生成的混合物用乙酸乙酯萃取。有机层经无水硫酸镁干燥。在减压下浓缩溶剂，得到标题化合物(0.030g)。

表1至6显示了上述参考例1至35的化合物的化学结构，以及上述实施例1至14的化合物的化学结构和物理性质。这些表中的缩写：“Ref No.”、“Ex No.”、“Str.”、“物理数据”、“¹H-NMR”和“CDCl₃”分别表示参考例编号、实施例编号、化学结构、物理性质、质子核磁共振谱和氯仿-d1。并且，“MS”表示质谱，“ESI_APCI”表明它是通过电喷雾电离法-大气压化学电离法的多电离法来测量的。

[表1]

[表2]

[表3]

[表4]

[表5]

[表6]

试验例1

对人NK₁受体的亲和性

(1)人NK₁受体表达载体的制备

使用人类成人正常组织来源的脑cDNA(BioChain)作为模板，利用SEQ ID NO：1的正向引物和SEQ ID NO：2的反向引物，使用PCR酶PrimeSTAR Max DNA聚合酶或PrimeSTARGXL DNA聚合酶(注册商标，Takara Bio)进行PCR。使用Zero Blunt PCR克隆试剂盒(注册商标，Life Technologies)将扩增产物插入到质粒(pCR-BluntII-TOPO(注册商标)，LifeTechnologies)中。通过常规方法，用其中已插入所述扩增产物的质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)(One Shot TOP 10感受态细胞，Life Technologies)。将所述大肠杆菌细胞在含有50μg/mL卡那霉素的LB琼脂培养基上培养一天。培养后，选择菌落并在含有50μg/mL卡那霉素的LB培养基中培养。培养后，使用Quantum Prep质粒微量制备试剂盒(Bio-Rad)纯化所述质粒。将所述质粒使用限制性酶XhoI和HindIII(New England Biolabs)双重消化约2小时。然后，使用1％琼脂糖凝胶进行电泳，收集被切开的片段并使用TaKaRaRICOCHIP(Takara Bio)进行纯化。另外，也从已经被载体(pcDNA3.1(-)(注册商标)，LifeTechnologies)转化的大肠杆菌纯化质粒，并将所述质粒使用限制性酶XhoI和HindIII(NewEngland Biolabs)双重消化约2小时。然后，使用1％琼脂糖凝胶进行电泳，收集被切开的载体并使用TaKaRa RICOCHIP(Takara Bio)进行纯化。使用DNA连接试剂盒<Mighty Mix>(Takara Bio)连接从pCR-Blunt-II切下的片段和用所述限制性酶处理的pcDNA3.1(-)载体。通过常规方法，用通过所述连接得到的质粒转化大肠杆菌(One Shot TOP 10感受态细胞，Life Technologies)。将所述大肠杆菌细胞在含有50μg/mL氨苄青霉素的LB琼脂培养基上培养一天。培养后，选择菌落并在含有50μg/mL氨苄青霉素的LB培养基中培养，然后使用Quantum Prep质粒微量制备试剂盒(Bio-Rad)纯化所述质粒。得到的质粒的编码蛋白质的核苷酸序列(SEQ ID NO：3)与已知的数据库(NCBI)上登记的人速激肽受体1(TACR1，NK1R)的核苷酸序列(NM_001058.3)完全一致。因此，证实了所克隆的基因序列是人NK₁受体的核苷酸序列并且将被翻译的氨基酸序列是人NK₁受体。其中插入了SEQ ID NO：3核苷酸序列的pcDNA3.1(-)(注册商标)被用作人NK₁受体表达质粒。

(2)人NK₁受体表达细胞的制备

(2-1)293T细胞的培养

使用补充有抗生素青霉素-链霉素溶液(Life Technologies，青霉素终浓度为100U/mL，链霉素终浓度为100μg/mL)和胎牛血清(终浓度为10％)的液体D-MEM(Dulbecco改良的Eagle培养基)培养基(低葡萄糖，含有L-谷氨酰胺，和光纯药工业)，在培养箱中在5％CO₂气体和37℃的条件下培养293T细胞(RIKEN)。

(2-2)293T细胞的传代培养

将基本汇合的细胞用PBS(磷酸盐缓冲盐水，和光纯药工业)洗涤，使用0.05％胰蛋白酶-EDTA(Life Technologies)剥离并悬浮在液体培养基中。将所述细胞悬液用上述液体培养基以使分散比成为1:10这样的方式稀释，然后培养所述细胞。

(2-3)人NK₁受体表达细胞的制备

将汇合的细胞用PBS洗涤，使用0.05％胰蛋白酶-EDTA(Life Technologies)剥离并悬浮在补充有胎牛血清(终浓度为10％)的液体D-MEM培养基(低葡萄糖，含有L-谷氨酰胺，和光纯药工业)中。将所述细胞悬液用所述液体培养基稀释，并且将所述细胞以5x10⁴细胞/孔的密度和100μL/孔的液体培养基体积接种在聚-D-赖氨酸包被的96-孔微孔板(BDBiocoat(注册商标)，Nippon Becton Dickinson)的孔中。接种后，将所述细胞在培养箱中在5％CO₂气体和37℃的条件下培养约4至5小时，由此制备要用所述人NK₁受体表达质粒转染的细胞。

(2-4)人NK₁受体表达质粒的293T细胞转染

使用Lipofectamine 2000(注册商标，Life Technologies)进行所述人NK₁受体表达质粒的转染。将所述人NK₁受体表达质粒用Opti-MEM(注册商标)I血清减少的培养基(Life Technologies)稀释到一定浓度以产生0.2μg/25μL/孔。同时，将Lipofectamine2000(注册商标，Life Technologies)用Opti-MEM(注册商标)I血清减少的培养基(LifeTechnologies)稀释到一定浓度以产生0.4μg/25μL/孔并在室温下温育5分钟。5分钟后，为了形成人NK₁受体表达质粒/Lipofectamine 2000的复合物，将所述稀释的人NK₁受体表达质粒和所述稀释的Lipofectamine2000混合并在室温下温育20至25分钟。温育后，将50μL/孔的所述复合物溶液添加到要用所述人NK₁受体表达质粒转染的细胞，并将所述细胞在培养箱中在5％CO₂气体和37℃的条件下培养约48小时。培养48小时的所述细胞被作为人NK₁受体表达细胞用于分析。

(3)与人NK₁受体的结合亲和性的测定

(3-1)从人NK₁受体表达细胞制备膜级分

在175cm²培养瓶(Nippon Becton Dickinson)中制备人NK₁受体表达细胞。人NK₁受体表达质粒和Lipofectamine 2000的复合物的形成是通过计算培养面积比率并将上文2-4中描述的方法的规模按所述比率增加来实施的。将人NK₁受体表达细胞收集在用于膜级分制备的缓冲液(50mM Tris(和光纯药工业)，120mM氯化钠(和光纯药工业)，5mM氯化钾(和光纯药工业)，1mM乙二胺四乙酸(Sigma)，0.002mg/mL糜蛋白酶抑素(Peptide Institute)，0.04mg/杆菌肽(和光纯药工业)，0.005mg/mL磷氨米酮(Peptide Institute)和0.5mM苯甲基磺酰氟(和光纯药工业)，pH7.4)中并以1,880g离心10分钟，并将细胞沉淀悬浮在用于膜级分制备的缓冲液中。在将所述细胞冻融一次后，使用Dounce型匀浆器将所述细胞破碎(在冰上冷却，1000rpm，20次)。将破碎细胞的悬液以20,000rpm离心10分钟，并除去上清液以得到细胞沉淀。将所述细胞沉淀再次悬浮在所述用于膜级分制备的缓冲液中并使用Dounce型匀浆器破碎(在冰上冷却，1000rpm，30次)。将所述细胞悬液以20,000rpm离心10分钟，并除去上清液以得到细胞沉淀。再次重复同样的破碎和离心，并得到最终的细胞沉淀。将所述最终的细胞沉淀悬浮在用于受体结合试验的缓冲液(50mM Tris(和光纯药工业)，3mM氯化镁(和光纯药工业)，0.002mg/mL糜蛋白酶抑素(Peptide Institute)，0.04mg/杆菌肽(和光纯药工业)和0.02％牛血清白蛋白(Sigma)，pH 7.4)中，并使用BCA蛋白分析试剂盒(Pierce)测定蛋白质浓度。

(3-2)受体结合试验

将所述用于受体结合试验的缓冲液以22.5μL/孔分配到96-孔分析板(Greiner)的孔中。使用100％二甲基亚砜(DMSO)以高80倍的浓度制备试验化合物的DMSO溶液，将所述试验化合物的DMSO溶液以2.5μL/孔添加到孔中(终浓度为1nM至100nM)，并将所述溶液混合。使用¹²⁵I-P物质(P物质，[¹²⁵I]Tyr⁸-，PerkinElmer)作为放射标记的配体。将¹²⁵I-P物质用所述用于受体结合试验的缓冲液稀释到一定浓度以产生125pmol/25μL/孔并添加到所述96-孔分析板，并将所述溶液混合。将从所述人NK₁受体表达细胞制备的膜级分用所述用于受体结合试验的缓冲液稀释到一定浓度以产生8至10μg/孔，进行悬浮直到所述悬液变成均匀状态以致该悬液可以顺利流过27G注射针，然后以150μL/孔添加到所述96-孔分析板。然后，在振荡所述板的同时，将所述板在室温下温育60分钟。将所述反应溶液通过已经用0.3％聚乙烯亚胺预处理的多筛96-孔滤板(Millipore)进行抽吸过滤，并通过用洗涤液(50mM Tris和0.02％牛血清白蛋白，pH 7.4)洗涤四次来终止反应。将所述微孔板的底部在60℃下干燥，然后向孔分配100μL/孔的MicroScint 20(PerkinElmer)。将所述板的上部用TopSeal A(PerkinElmer)密封，并将板振荡5至10分钟。然后，用TopCount NXT(注册商标)(PerkinElmer)测定放射活性。各孔的放射活性通过减去其中添加了10μM阿瑞吡坦的孔的放射活性(非特异性结合)来计算。计算¹²⁵I-P物质的结合率(％)＝(添加试验化合物的组的放射活性)/(添加介质的组的放射活性)x100，然后将所述结合率(％)针对试验化合物的浓度绘图，并使用Microsoft Excel(注册商标，Microsoft Corporation)计算50％抑制所需的浓度的反对数值，pIC50。这些结果显示在表7中。在表中，Ex.No.表示实施例编号，pIC₅₀表示50％抑制所需的浓度的反对数值。

(4)结果

[表7]

Ex.No.	p IC₅₀
		1	8.65
2	8.86
		3	8.85
4	9.07
		5	9.07
6	8.77
		7	8.69
8	8.73
		9	8.81
10	8.93
		11	8.72
12	9.55
		13	9.19
14	8.87

如表7中所示，证明了本发明的化合物表现出对人NK₁受体的高结合亲和性。

试验例2

对人NK₁受体的抑制作用

(1)人NK₁受体表达细胞的制备

通过与试验例1的2-3和2-4中所述的相同方法制备人NK₁受体表达细胞。

(2)对细胞内钙浓度增加的抑制作用的研究

将人NK₁受体表达细胞用300μL/孔的洗涤液(20mM HEPES/Hanks平衡盐溶液(HBSS)pH 7.3)洗涤。将荧光钙指示剂(Fluo-4直接钙分析试剂盒，Life Technologies，含有0.42mM丙磺舒和0.1％牛血清白蛋白，按照该产品的方案制备)以150μL/孔添加到孔中，并将所述板在培养箱中在37℃下温育30分钟。使用100％二甲基亚砜(DMSO)以高80倍的浓度制备试验化合物的DMSO溶液，然后将所述试验化合物的DMSO溶液以2.5μL/孔添加到孔中(终浓度为0.1、1和10μM)，并将所述溶液混合。然后，将所述板在培养箱中在37℃下进一步温育30分钟。30分钟后，立即测定细胞内钙浓度。

细胞内钙浓度各自使用FDSS(注册商标)7000(Hamamatsu Photonics)作为荧光信号测定。在开始读数后10秒，使用分析缓冲液(20mM HEPES/Hanks平衡盐溶液(HBSS)pH7.3，含有0.1％牛血清白蛋白)以0.4μM或4μM制备的P物质(Peptide Institute，Inc.)溶液被自动地以50μL/孔添加到每个孔(终浓度为0.1或1μM)，并测定荧光信号直到120秒。

添加了试验化合物的细胞的细胞内钙浓度(％)通过下面的方程式计算，其中添加介质的组的荧光信号被视为100％，而添加P物质前的荧光信号被视为0％。

细胞内钙浓度(％)＝(试验化合物添加组的荧光信号)/(介质添加组的荧光信号)x100

所计算的细胞内钙浓度(％)被视为P物质的残存的激动剂活性(残存的P物质响应：SPRR)。这些结果在表8中显示。在该表中，Ex.No.表示实施例编号。SPRR(％)表示当P物质浓度是1μM并且化合物浓度是0.1μM时得到的值。

(3)结果

[表8]

Ex.No.	SPRR(％)
		1	15
2	25
		3	50
4	2.1
		5	8.9
6	14
		7	6.6
8	14
		9	38
10	30
		11	24
12	4.9
		13	4.1
14	14

如表8中所示，证明了本发明的化合物表现出人NK₁受体拮抗剂活性。

试验例3

对CYP3A4的抑制作用

制备比评价浓度高1000倍浓度的试验化合物的二甲亚砜(DMSO)溶液，并通过稀释所述溶液来制备反应溶液。通过在含有1μM至10μM试验化合物、3.2mM氯化镁、0.2pmol人CYP3A4(BD Biosciences)、0.5mM还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)和3μM荧光素-IPA(Promega)的磷酸钾缓冲液(pH 7.4)中在37℃下温育10分钟，进行酶反应。反应溶液的体积是50μL/孔。30分钟预温育组在添加底物荧光素-IPA溶液(12.5μL/孔)之前在37℃下温育30分钟。在酶反应结束时，向孔添加50μL/孔的荧光素检测试剂(Promega)，并将所述板在室温下留置20分钟。然后，用Infinite M1000(TECAN)测定发光强度，并计算相对于没有添加所述试验化合物的组的值的酶活性(％)。作为比较例，以同样方式测试NK₁受体拮抗剂阿瑞吡坦。

试验通过上述试验方法测定，当试验化合物的浓度为10μM时，结果显示在表9中。在该表中，Ex.No.表示实施例编号，预温育(30min)(％)表示使用试验化合物的30分钟预温育组的酶活性(％)。

[表9]

如表9中所示，证明了本发明化合物的CYP3A4抑制活性与阿瑞匹坦的CYP3A4抑制活性相比降低。因此，预期本发明的化合物具有比阿瑞吡坦少的基于对CYP3A4的抑制作用的药物间相互作用。

试验例4

对叩足的作用

(1)对叩足的作用

通过将试验化合物溶解在介质(50％N,N-二甲基乙酰胺(和光纯药工业)、30％丙二醇(和光纯药工业)、4％2-羟丙基-β-环糊精(和光纯药工业)和16％蒸馏水的混合物)中来制备试验化合物溶液。

将雄性沙鼠(Japan SLC)用异氟烷麻醉，并从颈静脉施用0.3mg/kg的试验化合物。4小时后，在异氟烷麻醉下，在头部前囟侧方1mm和4.5mm深度的部位将NK₁受体激动剂GR73632(5pmol/5μl盐水)施用到脑室中。施用后，将沙鼠移动到观察笼，并测定在翻正反射恢复后30分钟期间的叩足时间。作为比较例，以同样方式测试NK₁受体拮抗剂阿瑞吡坦。各试验化合物的叩足抑制率(％)通过以下方程式计算。叩足抑制率(％)＝{1-(施用试验化合物时的叩足时间)/(施用溶剂时的叩足时间)}x100

(2)药物浓度测定

在叩足结束后，立即在乙醚麻醉下进行开腹术，并从腹腔静脉取血样。同时，摘取脑。使用液相色谱-质谱法(LC/MS)通过定量分析来测定血浆和脑中的试验化合物浓度。

(3)结果

对叩足的作用通过上述试验方法测定，结果在表0中显示。在该表中，Ex.No.表示实施例编号。抑制(％)表示叩足抑制率，浓度(nM)表示脑内药物浓度。

[表10]

Ex.No.	抑制(％)	浓度(nM)
			4	100	162
5	100	181

如表10中所示，本发明的化合物渗透到中枢神经系统中并还在体内表现出优异的NK₁受体拮抗剂活性。

工业实用性

本发明的化合物或其药学上可接受的盐具有优异的NK₁受体拮抗剂活性，因此也可用作癌症化疗引起的恶心和呕吐的预防剂或治疗剂。

序列表自由文本

<序列表1>

SEQ ID NO：1是用于DNA扩增SEQ ID NO：3的正向引物的序列。

<序列表2>

SEQ ID NO：2是用于DNA扩增SEQ ID NO：3的反向引物的序列。

序列表

<110> 橘生药品工业株式会社

<120> NK1受体拮抗剂

<130> PCT-A1614-00

<150> JP2015-238122

<151> 2015/12/07

<160> 3

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 28

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 正向引物

<400> 1

tacctcgaga gatagtaggg ctttaccg 28

<210> 2

<211> 28

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 反向引物

<400> 2

gccaagcttc taggagagca cattggag 28

<210> 3

<211> 1224

<212> DNA

<213> 智人（Homo sapiens）

<400> 3

atggataacg tcctcccggt ggactcagac ctctccccaa acatctccac taacacctcg 60

gaacccaatc agttcgtgca accagcctgg caaattgtcc tttgggcagc tgcctacacg 120

gtcattgtgg tgacctctgt ggtgggcaac gtggtagtga tgtggatcat cttagcccac 180

aaaagaatga ggacagtgac gaactatttt ctggtgaacc tggccttcgc ggaggcctcc 240

atggctgcat tcaatacagt ggtgaacttc acctatgctg tccacaacga atggtactac 300

ggcctgttct actgcaagtt ccacaacttc tttcccatcg ccgctgtctt cgccagtatc 360

tactccatga cggctgtggc ctttgatagg tacatggcca tcatacatcc cctccagccc 420

cggctgtcag ccacagccac caaagtggtc atctgtgtca tctgggtcct ggctctcctg 480

ctggccttcc cccagggcta ctactcaacc acagagacca tgcccagcag agtcgtgtgc 540

atgatcgaat ggccagagca tccgaacaag atttatgaga aagtgtacca catctgtgtg 600

actgtgctga tctacttcct ccccctgctg gtgattggct atgcatacac cgtagtggga 660

atcacactat gggccagtga gatccccggg gactcctctg accgctacca cgagcaagtc 720

tctgccaagc gcaaggtggt caaaatgatg attgtcgtgg tgtgcacctt cgccatctgc 780

tggctgccct tccacatctt cttcctcctg ccctacatca acccagatct ctacctgaag 840

aagtttatcc agcaggtcta cctggccatc atgtggctgg ccatgagctc caccatgtac 900

aaccccatca tctactgctg cctcaatgac aggttccgtc tgggcttcaa gcatgccttc 960

cggtgctgcc ccttcatcag cgccggcgac tatgaggggc tggaaatgaa atccacccgg 1020

tatctccaga cccagggcag tgtgtacaaa gtcagccgcc tggagaccac catctccaca 1080

gtggtggggg cccacgagga ggagccagag gacggcccca aggccacacc ctcgtccctg 1140

gacctgacct ccaactgctc ttcacgaagt gactccaaga ccatgacaga gagcttcagc 1200

ttctcctcca atgtgctctc ctag 1224

Claims

1.由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐：

[化学式1]

其中

W是氢原子或氟原子；

环A是选自由下列(a)至(d)组成的组的基团：

[化学式2]

其中

带有*的键是与U²键合的位点；

k表示1至5的整数；

r是1或2；

m和n独立地是1、2或3；

X¹是CH或N；

R是甲基、羟基或卤素原子；

Y是0、1或2；

当Y是2时，两个R任选地彼此不同；

当环A是由上面的(a)表示的基团时，U¹或U²中的任一个是羰基；

取代基组α是由卤素原子、羟基、C_1-6烷基和C_1-6烷氧基组成的组。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中X¹是N。

3.根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中W是氟原子。

4.根据权利要求3所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Ia)表示：

[化学式3]

其中

环B是由下式表示的基团：

[化学式4]

其中

带有*的键是与U²键合的位点；

U¹、U²和U³具有与权利要求1中所述的相同含义。

5.根据权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Ib)表示：

[化学式5]

其中

取代基组α具有与权利要求1中所述的相同含义。

6.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Ic)表示：

[化学式6]

其中

取代基组β是由氟原子和甲基组成的组。

7.根据权利要求6所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Id)表示：

[化学式7]

其中

U⁹是单键或亚甲基。

8.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物由式(Ie)表示：

[化学式8]

其中

U¹⁰和U¹¹各自独立地是是单键或亚甲基。

9.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至8任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。

10.根据权利要求9所述的药物组合物，其用于预防癌症化疗引起的恶心和呕吐。