CN108226352A - Lhj增溶剂在难溶食品添加剂定量测定中的应用 - Google Patents

Abstract

LHJ增溶剂由酶、辅酶、丁二醇、苯扎氯铵组成；主要用于卫生理化检验领域；解决原国标《食品卫生检验方法，理化部分》，对难溶解食品合成添加剂定量测定回收率很低难题。不用LHJ加标回收率30％‑60％；用上LHJ加标回收率90％‑110％，符合仪器分析要求；LHJ还可用于药物、饲料、化妆品中添加剂、食品禁止使用物、农药残留、兽药残留等定量测定。技术方案：将难溶解食品粉碎，放入水或流动相中，加入一定量LHJ，LHJ将大有机化合物酶解‑增溶‑剥离，使添加剂暴露到水溶液中，再离心‑过滤‑在高效液相色谱、气相色谱仪定量测定。LHJ将粘附色谱柱憎水物剥离溶解，缩短冲洗时间，可作色谱柱洗脱剂。

Description

LHJ增溶剂在难溶食品添加剂定量测定中的应用

技术领域：本发明涉及难溶解食品卫生理化检验领域；确切说是LHJ酶-辅酶、非-阳离子表面活性剂将难溶解食品大有机分子酶解成小分子，非-阳离子表面活性剂降低水表面张力，将胶体-悬浮体颗粒剥离分散，使添加剂充分溶解在水相中，解决原国标方法，难溶解食品添加剂定量测定回收率很低难题。

背景技术：本人从事多年高效液相色谱工作，发现<<中华人民共和国国家标准食品卫生检验方法(一)P_1-709，(二)P_1-596仅适应液体样品(如汽水、饮料、配制酒)，对固体-半固体食品，如果冻、陈皮、果酱、蜜饯、糕点等食品中防腐剂、甜味剂、色素、增白剂等，定量测定回收率(30％-60％)，无法准确测定添加剂真实含量，更不能严格控制超标食品流入市场！对人民群众健康非常不利，特别致癌物！为此进行长期研究工作，用水或流动相溶解难溶解食品，有许多胶体-悬浮体，胶块-悬浮体分子间(范德华力、氢键、内聚能)引力很大，特别内聚能，用蛋白沉淀剂-超声也不降低，将添加剂牢牢吸附囊裹着！多年来一直寻找一种试剂，消除悬浮体引力-剥离分散悬浮体粒度，把添加剂从悬浮体中拽出来，充分暴露溶解水相中；后来儿子吃果冻时，用芦荟汁滴在果冻上，结果，果冻溶解一个坑！这下提醒了我，为此开始长达数年LHJ提取混配-应用研究工作，LHJ研究成功用于难溶解食品中苯甲酸、山梨酸钾、糖精钠、过氧化苯甲酰定量测定中，《LHJ增溶剂用于果冻中苯甲酸和山梨酸定量测定的研究》，论文刊登<<中国卫生检验杂志>>2004.12.14卷6期P_713-714，获市科技进步二等奖。《深色、难溶食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠LHJ增溶高效液相色谱测定法》刊登在《职业与健康》2009年25卷23期；《面粉中过氧化苯甲酰的硫代硫酸钠还原LHJ增溶高效液相色谱测定法》刊登在2009年25卷24期，几种方法加标回收率在90％-110％之间，符合仪器分析要求。《LHJ增溶剂对难溶性食品中添加剂定量测定的研究、高效夜相色法》，获市科学技术进步二等奖(2013年)；其它添加剂定量测定方法正在研究中。

发明内容：将难食品粉碎，称取1.0-2.5克样品，放入10.0-25.0毫升比色管，加5.0-10.0毫升流动相，振摇，加LHJ2.0-5.0ml充分振摇，放30min，加入200g/L乙酸锌和100g/L亚铁氰化钾各0.5ml或2.5mL，充分振摇，加流动相定容到10.0mL-25.0mL刻度，摇匀，离心，取上清液过0.45um滤膜，取10.0uL样品溶液和标准溶液注入高效液相色谱仪进行定量测定。

高效液相色谱采用反向柱分离，紫外或二极管鉴定器定量测定添加剂真实含量；关键是LHJ把含有植-动物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂等，酶解-增溶-剥离，使悬浮体粒度最小化！添加剂充分暴露溶解水相，再离心、过微孔滤膜，上高效液相色谱定量测定。

实施例1、LHJ增溶剂在难溶食品中防腐剂定量测定的应用：

(附图说明：附图1是用与不用LHJ对果冻中苯甲酸、山梨酸定量测定结果对比)食品防腐剂28种；对含植-动物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂等(如果冻、陈皮、酱类、蜜饯、软糖、果酱、肉、蛋、鱼、禽制品、胶原蛋白糖衣、果酱糕点面包、蛋糕、月饼)等，苯甲酸、山梨酸定量测定，在没用LHJ前，果冻加标回收率只有30％，当用上LHJ，胶体完全消失，苯甲酸、山梨酸完全溶解在水相中，加标回收率苯甲酸90.7％、山梨酸钾96.7％，完全符合仪器分析要求，论文刊登在《中国卫生检验杂志》2004、12、14、6期P_713-714，2005年，获市科进步二等奖。

实施例2-1、LHJ增溶剂在难溶解食品中甜味剂定量测定的应用：

(附图说明：附图2是用与不用LHJ对难溶食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠定量测定结果对比)；GB 2760-2013，甜味剂有十几种，常用有糖精钠、甜蜜素、安塞蜜、阿力甜，阿斯巴甜、纽甜等；样品处理：将含(植-动物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂)等食品，如蜜饯、雪糕、冰淇类罐头、果酱等捣碎放入水或流动相，有许多胶体-悬浮体出现！对甜味剂有很强吸附囊裹作用，造成定量测定回收率在40％左右；用上LHJ大大提高了甜味剂的溶解度；原理与实施例1相同，论文《深色、难溶食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的LHJ增溶高效液相色谱测定法》刊登在《职业与健康》2009年25卷23期，加标回收率苯甲酸90％-108％，山梨酸90％-100％，糖精钠90％；技术指标都符合仪器分析要求。

实施例2-2、LHJ增溶剂在难溶解食品中甜味剂(甜蜜素)定量测定的应用：

将果冻样品倒碎，放入试管中，加少量水溶解，加LHJ充分振摇溶解定容，在酸性介质中甜蜜素与亚硝酸反应生成环己醇亚硝酸酯，用正己烷提取，气相色谱分离，保留时间定性，外标法定量；结果该方法在0.25-10毫克范围内线性关系良好，相关系数为0.9996，检出限为0.001g/kg，回收率90％-102％；结论，该方法灵敏度-精密度好，回收率高，用LHJ处理样品甜蜜素测定结果提高2-3倍；论文《LHJ增溶剂对冻中甜蜜素定量测定的应用》刊登在《医学动物防制》2015年08期。

实施例3、LHJ增溶剂在增白剂定量测定中的应用：

(附图说明：附图3是用与不用LHJ面粉中过氧化苯甲酰定量测定结果对比)增白剂有多种，过氧化苯甲酰属于食品禁止使用物，因在人体分解成苯甲酸，有致癌作用！可不法分子总在使用，所以研究准确定量方法很有必要；有资料报道，用乙醇溶解再与碘化钾反应生成苯甲酸，因乙醇和碘化钾加入量太大，基线不归零，溶剂峰特宽与过氧化苯甲酰分解产物苯甲酸峰分不开，无法准确测定苯甲酸真实含量，乙醇和碘化钾加入量太少过氧化苯甲分解不完全，还有大分子对苯甲酸吸附囊裹作用，几种因素所致！过氧化苯甲酰含量忽高忽低，无法测定真值。采用硫代硫酸钠还原，LHJ酶解-增溶-剥离，消除悬浮体对苯甲酸吸附作用，使苯甲酸充分暴露溶解在水相，溶剂峰变窄，苯甲酸在基线归零情况下才出峰，最终建立过氧化苯甲酰准确定量方法，《面粉中过氧化苯甲酰的硫代硫酸钠还LHJ增溶高效液相色谱测定法》加标回收率92.0％，技术指标均符合仪器分析要求。

实施例4、LHJ增溶剂在难溶食品中着色剂定量的应用：

GB2760-2013着色剂有几十种，合成色素有七种(笕菜红、胭脂红、赤鲜红、新红、柠檬黄、日落黄、亮蓝、靛蓝)，含动-植物胶和增稠剂难溶解食品有糖果、糕点、青梅、山楂制品、红绿丝、染色樱桃罐头、红肠肠衣，冰淇淋、调味酱、果冻西瓜酱罐头、糖果、雪糕、饼干等，这些食品在溶解过程中有胶体-悬浮体对色素有吸附囊裹性，色素不能溶解在水中，定量测定回收率很低，加上LHJ回收率90％-110％之间，符合仪器分析要求。

实施例5、色素测对高效液相色谱柱损害严重，一次色素测定，当天没有把柱子冲洗干净，第二天冲洗，色素粘附柱子上，用水-甲醇怎么也洗不净，后来用LHJ很快就冲下许多物质，剃度洗脱3次柱子冲洗好了；高效液相色谱测定关键是柱子冲洗，许多有机-无机物黏附在柱子上，用流动相或甲醇需要冲洗很长时间，用LHJ很快洗干净，使用方法，在进样口反复注射LHJ即可。

实施例6、LHJ在难溶解体系是具酶解-增溶-剥离为一体化学试剂，能解决国标方法对难溶解食品添加剂定量测定回收率非常低的难题。

Claims (6)

1.LHJ增溶剂其特征在于：LHJ是由芦荟酶-辅酶、丁二醇、苯扎氯铵组成；主要功能是酶-辅酶将动-植物胶、蛋白、脂肪、多糖、纤维、增稠剂等大分子酶解；非-阳离子表面活性剂降低水相表面张力，剥离分散悬浮体粒度，使添加剂充分暴露溶解在水相中；没用LHJ以前，难溶解食品放水中充分振摇，溶液以胶体-悬浮体存在，固相引力(内聚能、氢键、范德华力)很大，牢牢将添加剂吸附囊裹着，添加剂不能暴露溶解在水相中，造成添加剂定量测定回收率30％-60％；当加入LHJ增溶剂将大有机分子酶解，非-阳离子表面活性剂亲水基与水形成个氢键，增加在水中溶解度，亲水基由锯齿型变为曲折型，亲水型氧位于链外侧，憎水基-CH2^-基位于链内侧，因而周围变得与水容易结合，同时阳离子表面活性剂发挥剥离分散功能，使悬浮体粒度最小化，添加剂充分暴露溶解在水相；离心-过小微孔滤膜，样品溶液呈现无色透明状态，高效液相色谱定量测定，回收率在90％-110％之间；LHJ还用于(饲料、药物、日用品、化装品)中添加剂、食品禁止使用物、农药残留，兽药残留的定量测定。

2.根据权利要求1所诉的以LHJ其特征在于，LHJ能将含动-植物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂、抗氧化剂等大分子酶解成小分子；非-阳离子表面活性剂降低水表面张力，剥离分散悬浮体粒度，使添加剂充分暴露溶解在水相；操作简单、快速，样品处理在一个容器进行，减少系统误差，提高添加剂定量测定回收率；那什么是难溶食品呢？一般固体、半固体食品均属于难溶解食品！将其粉碎放入水相，以胶体-悬浮体形式存在；添加剂定量测定回收率30％-60％；都需用LHJ酶解-增溶-剥离；再离心-过微孔滤膜-上仪器定量测定。这是本专利保护的主要内容；LHJ还用于(饲料、药物、日用品、化装品)中添加剂、食品(禁止使用物、农药残留，兽药残留)定量测定。

3.根据权利要求2所诉的含有动-植物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂等难溶食品，需用LHJ酶解-增溶-剥离，那什么样食品含动-植物胶、蛋白、脂肪、碳水化合物、增稠剂呢？如果冻、雪糕、冰激凌、糕点、饼干、速溶咖啡、巧克力、面包、乳制品、肉制品、果酱、花色酱汁、起酥油膨化食品、鱼制品、胶姆糖、面条、果汁、炼乳、氢化植物油沙司、植物蛋白饮料、酱类、粮食制品、蜜饯等，都属于难溶食品；需用LHJ酶解-增溶-剥离，离心 -过微孔滤膜-上高效液相色谱测定。这是本专利保护主要内容。LHJ还用于(饲料、药物、日用品、化装品)中添加剂、食品(禁止使用物、农药残留，兽药残留)定量测定。

4.根据权利要求3所诉，难溶食品添加剂测定需用LHJ酶解-增溶-剥离，然后高效夜相色谱定量测定；食品添加剂有防腐剂、甜味剂、增白剂、着色剂、酸度剂、抗结剂、抗氧化剂、乳化剂等，见GB2760-2011。基础检验方法《中华人民共和国国家标准食品卫生检验方法(一)P_1-700，(二)P_1-596>；难溶食品添加剂测定，在使用国标法基础上，用LHJ样品前处理，再上高效液相色谱测定，目前已有实例，其回收率在90％-110％之间，符合仪器分析要求；其它定量测定方法正在研究中，这是本专利保护主要内容；LHJ还用于(饲料、药物、日用品、化装品)中添加剂、食品(禁止使用物、农药残留，兽药残留)的定量测定。

5.根据权利要求2所诉以LHJ其特征在于，它能将大分子酶解成小分子，非-阳离子表面活性剂降低水表面张力-剥离分散柱子上粘附物，进入流动相，缩短柱子冲洗时间，可作为高效液相色谱柱洗脱剂；这是本专利保护的内容。

6.LHJ在难溶体系，它是具酶解-增溶-剥离为一体的化学试剂，来解决难溶食品添加剂定量测定回收率低的难题。