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CN107810189A - 用于制备氮芥衍生物的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了用于生产化合物(III)或其去保护产物的方法：包括：在还原剂的存在下，使化合物(II)与氯乙酸反应：其中，PG是保护基团，并且R是合适保护形式的OH、或

Description

用于制备氮芥衍生物的方法
技术领域
本发明涉及一种用于制备美乐芬(melflufen)或其盐、以及美法仑或其盐的改进方法。本发明进一步提供了在本发明方法中形成的新型中间体化合物。
背景技术
烷化剂(如衍生自氮芥的药物，即双(2-氯乙基)胺衍生物)用于在多种癌症治疗中用作化疗药物。美法仑、或对双(2-氯乙基)-氨基-L-苯丙氨酸(化合物(Id)，CAS No.148-82-3)是烷化剂，是氮芥和氨基酸苯丙氨酸的结合物(US 3,032,584)。美法仑临床用于治疗转移性黑色素瘤，但是具有有限的疗效、限制剂量的毒性，并且会产生抗药性。
美法仑氟灭酰胺乙酯(L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯，美乐芬，化合物(Ib))是与氨基酸苯丙氨酸结合的美法仑，产生了二肽(WO 01/96367)：
美法仑的单盐酸盐(L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯单盐酸盐；(Ib)的盐酸盐；CAS No.380449-54-7)被称为盐酸美乐芬(melflufen hydrochloride)。
当在人类肿瘤细胞的培养物中研究代表约20种人类癌症(包括骨髓瘤)的不同诊断时，美乐芬显示出比美法仑高50倍至100倍的效力(http://www.oncopeptides.se/ products/melflufen/，2015年3月26日访问)。在Arghya等人的第5届ASH年会和博览会(ASHAnnual Meeting and Exposition)摘要2086“一种新型烷化剂美法仑氟灭酰胺乙酯引发多发性骨髓瘤细胞中不可逆的DNA损伤(A Novel Alkylating Agent MelphalanFlufenamide Ethyl Ester Induces an Irreversible DNA Damage in MultipleMyeloma Cells)”(2014)公开的数据显示了美乐芬引发了快速、稳健且不可逆的DNA损伤，可以导致其克服多发性骨髓瘤细胞美法仑耐药性的能力。美乐芬现正进行多发性骨髓瘤中的I/II期临床试验。
以盐酸盐形式制备美乐芬的方法描述于WO 01/96367中，并在以下方案1中进行说明。在该方法中，N-叔丁氧羰基-L-美法仑与对氟苯丙氨酸乙酯反应，以得到N-叔丁氧基羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯。通过梯度柱色谱纯化后，该步骤的产率为43％。
方案1.美乐芬(以盐酸盐形式)现有途径
如方案1所示，制备美乐芬(以盐酸盐形式)的已知方法使用细胞毒剂美法仑作为原材料，并以多步骤顺序合成美乐芬。美法仑是高毒性的，因此原材料和所有的中间体、以及所产生的废物流都是极其有毒的。这是在大规模使用该方法时在安全性、环境影响和成本方面的主要缺点。因此，非常需要改进和安全的方法，特别是用于大规模生产美乐芬。此外，市售可得的美法仑由于其稳定性差导致纯度差，在所述方法的各步骤中的产率差，并且通过已知方法制备的最终产品的纯度不高。
WO 2014/141294中描述了制备美法仑的方法。在WO 2014/141294中，将双(2-氯乙基)基团引入分子的步骤包括：通过与环氧乙烷气体反应将伯苯胺转化为叔苯胺二醇。这得到52.6％的产率。然后通过与磷酰氯反应将胺二醇转化成双(2-氯乙基)苯胺。使用环氧乙烷或氯乙醇将芳族胺转化为相应的双-(2-羟乙基)胺，然后氯化该中间体，这是生产芳族双-(2-氯乙基)胺的常用技术。还已知从氯代芳烃开始并使其与二乙醇胺进行SNAr反应。本发明人已经采用这些方法制备美乐芬(以其盐的形式)，如以下方案2所示。
方案2.美乐芬的替换途径
发明人已经发现在THF中使用环氧乙烷(方案2的途径(a))，在55℃下不发生烷基化；温度升至60℃会导致形成二烷基化中间体，但反应非常慢。为了提高产率和反应速率，反应将需要高温，但这将导致压力增加，使得反应需要在压力反应器中进行。这种情况可能导致形成副产物。类似的反应条件、但使用50:50的环氧乙烷和乙酸混合物(方案2的路径(b))导致更快的反应时间，但会形成副产物。使用碳酸钾和氯乙醇(方案2的路径(c))也导致形成副产物，可能是由于氯乙醇与乙酯进行部分酯交换。
本发明人还尝试二烷基化化合物的氯化。
使用亚硫酰氯在二氯甲烷中使得方案2的双-(2-羟乙基)化合物(4)氯化会导致形成显著的脱保护副产物。使用POCl3使方案2的双-(2-羟乙基)化合物(4)氯化需要高温和长反应时间。此外，由于安全性考虑，亚硫酰氯和POCl3是大规模处理的难题。本发明人还通过用甲磺酰氯和三乙胺进行处理将方案2的双(2-羟乙基)化合物(4)转化为相应的二甲苯磺酸酯。然后在120℃下于DMF中用氯化钠处理二甲苯磺酸酯。然而，该反应的粗产物含有显著的副产物，使得该途径在经济上不适合大规模使用。
总之，发现这些路径都不适合大规模生产高纯度的美乐芬。它们不能有效合成美乐芬，导致较差的产率，并且是低效的。此外，方案2所示路径需要多个步骤以形成N,N-双氯乙基胺并使用了有毒试剂。
本发明人已经发现了一种用于生产美乐芬(特别是其盐酸盐形式的美乐芬)的改进方法，其以出色产率和非常高的纯度提供该化合物。
发明内容
本发明提供了用于生产化合物(III)以及其去保护产物的方法：
包括：在还原剂的存在下，使化合物(II)与氯乙酸反应：
其中，PG是保护基团，并且R是合适保护形式的OH、或
发明人惊讶地发现，芳族胺化合物(II)转化为氮芥可以在单一步骤中实现，并具有高产率和高纯度。
本发明还提供了一种用于生产化合物(I)或其盐的方法：
所述方法包括：实施如上所述生产化合物(III)的方法，并进一步使化合物(III)去保护以产生化合物(I)、或其盐，
其中，R是可选地合适保护形式的OH、或
本发明进一步提供了一种用于生产化合物(VIb)的方法：
所述方法包括化合物(IV)与化合物(V)反应：
其中，PG是保护基团。
本发明进一步提供了一种用于生产化合物(II)的方法：
所述方法包括化合物(VI)与还原剂反应：
其中，PG是保护基团，并且R是可选地合适保护形式的OH、或
本发明进一步涉及提供具有以下结构的化合物：
其中，Y是NH2或NO2，并且PG是保护基团。
具体实施方式
本发明提供了用于合成美乐芬或其盐、或者美法仑或其盐的改进方法，所述方法包括：在单一步骤中使用氯乙酸和还原剂将芳族伯胺(化合物(II))转化为芳族N,N-双氯乙基胺。该方法效果非常好，获得了高纯度产品的良好产率。所述方法非常有效率，因为两个单一步骤(双羟烷基化和氯化)由单一容器中的单一操作所替代。
为了避免疑问，除非另有明确说明，在本文中提及“美乐芬”可以指美乐芬或其盐(例如盐酸美乐芬)。
为了避免疑问，本发明方法或者本文所述化合物的实施方式或任何一个特征的优选方面可以与本发明方法或者本文所述化合物的任何实施方式或另一特征的优选方面组合，以产生其它实施方式。
美法仑具有“L”立体化学；美乐芬具有“LL”立体化学，并且是在本申请中描述的结构中的“L”和“LL”立体化学。本发明的方法和本文所述的化合物同样适用于“D”或“DL”、“LD”和“DD”异构体或异构体的混合物(包括外消旋混合物)。
本发明提供了用于生产化合物(III)或其去保护产物的方法：
所述方法包括以下步骤：
(c)在还原剂的存在下，使化合物(II)与氯乙酸反应：
其中，PG是保护基团，并且R是合适保护形式的OH、或
在本发明优选实施方式中，R是由此本发明提供了用于生产化合物(IIIb)或其去保护产物的方法：
所述方法包括以下步骤：
(c)在还原剂的存在下，使化合物(IIb)与氯乙酸反应：
其中，PG是保护基团。
PG是适用于保护伯胺的保护基团。该保护基团是技术人员已知的，参见Wuts,P.G.M.,Greene的Protective Groups in Organic Synthesis(《有机合成中的保护基团》),第5版,2014,约翰韦利父子公司(John Wiley&Sons)。选择保护基团是常规的，并且为技术人员的常见做法。例如，PG可以选自下组：甲基氧羰基、乙基氧羰基、9-茐甲基氧羰基(Fmoc)、叔丁基氧羰基(Boc)、苯甲基氧羰基(Cbz)、对甲氧基苯甲基氧羰基(Moz)、1-金刚烷基氧羰基(Adoc)、对溴苄基氧羰基、三氟乙酰基、氯乙酰基、苯乙酰基、苯并乙酰基(benzacetyl)、对甲苯磺酰基(甲苯磺酰基，Ts)、2-硝基苯磺酰基(Nps)、叔丁基磺酰基(Bus)、2-或4-硝基苯磺酰基(Nosyl)、2,4-二硝酮磺酰基(nitrobenzenesulfonyl，DNs)、以及2-萘磺酰基。
例如，式(IIIb)的化合物可以是：甲基氧羰基-L-美法仑、乙基氧羰基-L-美法仑、9-茐甲基氧羰基-L-美法仑、叔丁基氧羰基-L-美法仑、苯甲基氧羰基-L-美法仑、对甲氧基苯甲基氧羰基-L-美法仑、1-金刚烷基氧羰基-L-美法仑、对溴苄基氧羰基-L-美法仑、三氟乙酰基-L-美法仑、氯乙酰基-L-美法仑、苯乙酰基-L-美法仑、苯并乙酰基-L-美法仑、对甲苯磺酰基-L-美法仑、2-硝基苯磺酰基-L-美法仑、叔丁基磺酰基-L-美法仑、2-或4-硝基苯磺酰基-L-美法仑、2,4-二硝酮磺酰基-L-美法仑、2-萘磺酰基-L-美法仑；甲基氧羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、乙基氧羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、9-茐甲基氧羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、叔丁基氧羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、苯甲基氧羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、对甲氧基苯甲基氧羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、1-金刚烷基氧羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、对溴苄基氧羰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、三氟乙酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、氯乙酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、苯乙酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、苯并乙酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、对甲苯磺酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、2-硝基苯磺酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、叔丁基磺酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、2-或4-硝基苯磺酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、2,4-二硝酮磺酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯、或2-萘磺酰基-L-美法仑基-L-对氟苯丙氨酸乙酯。
例如，式(II)的化合物可以是：(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(甲基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(乙基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(9-茐甲基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(叔丁基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(苯甲基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(对甲氧基苯甲基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(1-金刚烷基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(对溴苄基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(三氟乙酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(氯乙酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(苯乙酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(苯并乙酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(对甲苯磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(2-硝基苯磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(叔丁基磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(4-硝基苯磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(2-硝基苯磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(2,4-二硝酮磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、或(2S)-2-[[(2S)-3-(4-氨基苯基)-2-(2-萘磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯。
优选PG选自下组：Fmoc、Boc、Cbz、Moz、Adoc、溴苄基氨基甲酸酯、和三氟乙酰胺。更优选PG是Boc。
因此，本发明提供了用于生产化合物(IIIa)或其去保护产物的方法：
所述方法包括以下步骤：
(c)在还原剂的存在下，使化合物(IIa)与氯乙酸反应：
其中，R是合适保护形式的OH、或
在R是合适保护形式的OH的实施方式中，OH基团(以及可选地相邻羰基)可以由适用于保护羧酸的任意基团进行保护。该保护基团是技术人员已知的，例如参见Wuts,P.G.M.,Greene的Protective Groups in Organic Synthesis(《有机合成中的保护基团》)，第5版，2014，约翰韦利父子公司(John Wiley&Sons)。选择用于羧酸内的保护基团是常规的，并且是技术人员的常见做法。例如，保护基团可以选自下组：甲酯、甲氧基甲酯、9-芴基甲酯、叔丁酯、苄酯、二苯基甲酯、三苯基甲酯、2,6-二甲基苯基酯、三甲基甲硅烷基(tremethylsilyl)酯、三乙基甲硅烷基酯、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲酯、2-(三甲基甲硅烷基)乙酯、S-叔丁酯、和2-烷基-1,3-噁唑啉。
在特别优选的实施方式中，PG是Boc，并且R是
因此，本发明提供了用于生产化合物(IIIc)或其去保护产物的方法：
所述方法包括以下步骤：
(c)在还原剂的存在下，使化合物(IIc)与氯乙酸反应：
在本发明步骤(c)中使用的还原剂可以是：例如，适于在还原氨化反应或还原烷基化反应中使用的还原剂。优选的还原剂是氢化物供体，例如，选自下组的还原剂：硼烷、硼烷-路易斯碱复合物、硼氢化物、金属氢化物、以及在金属催化剂存在下的H2。在本发明的某些实施方式中，还原剂选自：B2H6、B10H14、BH3SMe2(硼烷二甲硫醚、BMS)、BH3THF、NaBH4、LiBH4、NaBH3CN、氢化铝(铝烷)、双(2-甲氧基乙氧基)氢化铝钠、和在金属催化剂存在下的H2(例如，可选地在载体(例如碳)上的选自下组的催化剂：钯、铂、镍、钌、铑、以及它们的化合物(例如它们的氧化物))。在还原剂是H2的情况下，优选的催化剂是钯(H2/Pd)。更优选还原剂选自下组：硼烷和硼烷-路易斯碱复合物，例如B2H6、B10H14、BH3SMe2、BMS或BH3THF。最优选所述还原剂选自下组：BMS和BH3THF。更加优选还原剂选是BMS。
反应优选在溶剂存在下进行。选择合适的溶剂是常规的，并且是技术人员的常见做法。优选地，所述溶剂是极性非质子溶剂。例如，溶剂可选自下组：四氢呋喃(THF)、2-甲基四氢呋喃(2-MeTHF)、甲基环戊醚以及其二丁醚混合物。更优选溶剂选自下组：THF和2-MeTHF。在一优选实施方式中，溶剂是THF。在另一优选实施方式中，溶剂是2-MeTHF。
优选反应温度范围为1～80℃。在某些优选实施方式中，反应温度范围为1～50℃，优选4～45℃，更优选5～40℃，例如在5～30℃的范围内。在一优选实施方式中，反应在5～20℃的范围内进行，例如，反应可以在5～7℃开始进行，随后在反应期间温度升高至20～30℃，例如约20℃。
在一优选实施方式中，反应在1～50℃(更优选4～45℃)的范围内进行，例如，反应可以在1～10℃(例如3～7℃，优选4～6℃)开始进行，随后在反应期间温度升高至20～30℃，例如约20℃～25℃。更优选，反应可以在1～10℃(例如3～7℃，更优选4～6℃)的范围内开始进行，随后在反应期间温度升高至5～15℃，例如5～13℃，随后升高至约20～30℃，例如约20℃～25℃。
在一实施方式中，所述反应温度初始升高至约40～50℃。例如，在反应期间，反应温度升高至45℃，然后冷却至约1～10℃(例如，3～7℃，如3、4、5、6、或7℃，优选约4～6℃)，然后温度升高至约20～30℃，例如，约20～25℃。更优选，在反应期间，反应温度升高至45℃，然后冷却至约1～10℃(例如，3～7℃，如3、4、5、6、或7℃，优选约4～6℃)，然后温度升高至约5～15℃，例如，5～13℃，随后升高至约20～30℃，例如约20～25℃。
优选，化合物(II)：氯乙酸的摩尔比等于或低于1:2，优选等于或低于1:5，更优选等于或低于1:10，最优选等于或低于1:20。在某些优选实施方式中，化合物(II)：氯乙酸的摩尔比为1:20-1:100；优选1:5-1:40；更优选1:10-1:35；更优选1:15-1:30；并且最优选1:20-1:28，例如1:20、1:21、1:22、1:23、1:24、1:25、1:26、1:27或1:28，优选1:26)。
优选，化合物(II)：还原剂的摩尔比等于或低于1:1，优选等于或低于1:3，更优选等于或低于1:7。在某些优选实施方式中，化合物(II)：还原剂的摩尔比为1:1-1:50；优选1:3-1:30；更优选1:5-1:20；更优选1:8-1:18；并且最优选1:00-1:15，例如1:10、1:11、1:12、1:13、1:14或1:25，优选1:13。
本发明人进一步惊讶地发现当在缓冲剂(例如，由与氯乙酸组合用作缓冲液的氯乙酸盐提供缓冲剂)存在下进行时，如上所述获得化合物(III)的化合物(II)的反应进一步得到改进。发明人发现与仅使用氯乙酸的方法相比，氯乙酸盐用作缓冲剂导致以更高产率获得具有更高纯度的化合物(III)。观察到在氯乙酸盐的存在下进行反应时具有更少的副产物，特别是由PG基团脱保护引起的副产物。例如，当化合物(II)是化合物(IIc)时，观察到存在更少的由失去Boc基团得到的副产物。
在某些优选实施方式中，反应在缓冲剂存在下进行。缓冲剂是在添加另一酸或碱之后用于使得溶液pH保持在所选值附近的一种试剂。在典型的用于本发明还原的非水性溶剂中，能够从溶液中去除酸(即质子)的任何化合物都可以被认为是缓冲剂。例如，缓冲剂可以是与弱酸或碱的盐组合的弱酸或碱，例如，磷酸和磷酸盐(如磷酸钠和/或磷酸氢钠和/或磷酸二氢钠)。由于氯乙酸存在于反应中，缓冲剂可以是一种氯乙酸的盐。
在某些特别优选的实施方式中，缓冲剂是氯乙酸盐。氯乙酸盐可以选自下组：氯乙酸钠、氯乙酸钾、氯乙酸镁、氯乙酸钙以及它们的混合物。优选氯乙酸盐是氯乙酸钠，即，在氯乙酸钠存在下进行反应。
优选当在氯乙酸盐的存在下进行反应时，氯乙酸盐和氯乙酸的量能够获得缓冲溶液。缓冲溶液是当少量酸或碱加入其中时抵抗pH变化、或非水性溶剂中变化、溶液中酸(即质子)量变化的溶液。
在氯乙酸存在下进行反应的实施方式中，发明人发现通过使用化合物(II)：氯乙酸盐的某些摩尔比可以尽可能减少副产物的形成。优选，在氯乙酸盐存在下进行反应的情况下，化合物(II)：氯乙酸盐的摩尔比等于或低于1:3，更优选等于或低于1:4，并且更优选等于或低于1:7，例如，等于或低于1:9，等于或低于1:12，等于或低于1:15。在某些优选实施方式中，化合物(II)：氯乙酸盐的摩尔比为1:4-1:50；优选1:5-1:30；更优选1:7-1:20；更优选1:8-1:15，例如1:10。
在某些优选实施方式中，氯乙酸：氯乙酸盐的摩尔比为至少1:1，优选至少2:1。在某些优选实施方式中，氯乙酸：氯乙酸盐的摩尔比为1:1-10:1，优选1:1-6:1；更优选2:1-5:1；更优选2:1-4:1，例如2.6:1)。
优选当在氯乙酸盐存在下进行反应时，对于每一摩尔当量的化合物(I)，存在至少2摩尔当量的氯乙酸、至少1摩尔当量的氯乙酸盐；以及至少1摩尔当量的还原剂。更优选，对于每一摩尔当量的化合物(I)，存在至少8摩尔当量的氯乙酸、至少4摩尔当量的氯乙酸盐；以及至少4摩尔当量的还原剂。更优选，对于每一摩尔当量的化合物(I)，存在至少14摩尔当量的氯乙酸、至少7摩尔当量的氯乙酸盐；以及至少7摩尔当量的还原剂。更优选，对于每一摩尔当量的化合物(I)，存在至少20摩尔当量的氯乙酸、至少7摩尔当量的氯乙酸盐；以及至少10摩尔当量的还原剂。最优选，对于每一摩尔当量的化合物(I)，存在至少24摩尔当量的氯乙酸(例如24、26、28、或30摩尔当量)、至少9摩尔当量的氯乙酸盐(例如，9、10、12、或15摩尔当量)；以及至少12摩尔当量的还原剂(例如12、13或15摩尔当量)。
在某些优选实施方式中，对于每一摩尔当量的化合物(I)，存在2-60摩尔当量的氯乙酸、1-50摩尔当量的氯乙酸盐；以及1-30摩尔当量的还原剂。更优选，存在8-60摩尔当量的氯乙酸、4-50摩尔当量的氯乙酸盐；以及4-30摩尔当量的还原剂。更优选，对于每一摩尔当量的化合物(I)，存在14-40摩尔当量的氯乙酸、7-25摩尔当量的氯乙酸盐；以及7-20摩尔当量的还原剂；最优选，对于每一摩尔当量的化合物(I)，存在24-30(例如26)摩尔当量的氯乙酸、9-15摩尔(例如10)当量的氯乙酸盐；以及12-15(例如13)摩尔当量的还原剂。
优选，一旦反应步骤(c)完成，则反应用极性质子溶剂(例如醇或水)停止。在一优选实施方式中，反应用乙醇停止。在另一优选实施方式中，反应用水停止。
在某些优选实施方式中，根据本发明形成的化合物(III)在一种或多种溶剂(例如，选自如下的溶剂：乙醇、乙酸乙酯、丙酮、2-MeTHF以及它们的混合物)以及一种或多种抗溶剂(例如，庚烷)中进行重结晶以去除杂质。在化合物(III)是化合物(IIIc)的实施方式中，发明人发现化合物(IIIc)在升高温度下溶解于乙醇、乙酸乙酯、丙酮或2-MeTHF中，降低温度，然后添加(例如)庚烷可以提高纯度。例如，在约7体积的丙酮中于50℃下重结晶、随后加入庚烷并冷却可以将通过HPLC的产物纯度从96.8提高至98.6面积％。在某些实施方式中，化合物(III)(例如化合物(IIIc))在丙酮/庚烷的混合物或2-MeTHF/庚烷的混合物中重结晶。
在反应用水停止的实施方式中，在加入水之后，化合物(III)可以从反应溶液中沉淀出来(例如通过将反应溶液冷却至约4℃-约8℃)，随后重新溶解于升高的温度(例如约30～40℃)的反应溶液中。随后可以分离有机相或水相，并且对有机相进行洗涤(例如，用水性盐溶液(例如NaCl水溶液，优选20％NaCl水溶液)进行洗涤)随后，有机相可以进行浓缩以使得化合物(III)沉淀出来。优选地，随后化合物(III)可以用溶剂洗涤，例如非质子溶剂、非质子溶剂的混合物，更优选2-MeTHF/庚烷混合物。在化合物(III)是化合物(IIIc)的实施方式中，发明人发现，这些分离步骤获得了令人惊讶的高纯度化合物(IIIc)，而无需其它纯化步骤(例如，重结晶)。
根据本发明的化合物(III)或(IIIa)的去保护产物是式(III)或(IIIc)的化合物，其中PG保护基团被去除，或者当R是合适保护形式的OH时OH保护基团被去除。优选PG保护基团被去除(例如式(I)的化合物)。更优选，PG保护基团被去除，并且当R是合适保护形式的OH时去除OH保护基团。
根据本发明的化合物(IIIb)或(IIIc)的去保护产物是其中PG保护基团被去除的式(IIIb)或(IIIc)的化合物(例如式(Ib)的化合物)。
在某些实施方式中，形成化合物(III)的盐或化合物(III)的去保护产物的盐。同样，本发明还提供一种用于生产化合物(III)的盐(例如化合物(IIIa)、(IIIb)或(IIIc)的盐)、或化合物(III)的去保护产物的盐(例如化合物(IIIa)、(IIIb)或(IIIc)的去保护产物的盐)的方法，所述方法包括：生产如上所述化合物(III)(例如化合物(IIIa)、(IIIb)或(IIIc))的方法，以及形成盐的步骤、例如形成盐酸盐的步骤。
形成化合物(III)的盐、或化合物(III)的去保护产物的盐的步骤可以是独立于形成化合物(III)或其去保护产物的步骤；或者形成盐的步骤可以作为形成化合物(III)或其去保护产物的步骤的一部分进行。
所述方法可选地包括其它步骤(d)：去除化合物(III)的PG保护基团以获得化合物(I)或其盐：
其中PG和R如上述步骤(c)定义。
优选化合物(I)的盐是药学上可接受的盐(即，药学上可接受的化合物(I)的盐适用于在药物中使用，其中抗衡离子是药学上可接受的)。优选，化合物(I)的盐是药学上可接受的酸的盐，特别优选盐酸盐。
特别是，根据本发明用酸形成的合适的盐包括用以下酸形成的盐：无机酸；强有机羧酸，例如未取代或者被例如卤素取代的1-4个碳原子的链烷羧酸，例如饱和或不饱和二羧酸，例如羟基羧酸，例如氨基酸，或者有机磺酸，例如,未取代或者被(例如卤素)取代的(C1-C4)烷基-磺酸或芳基-磺酸。药学上可接受的酸加成盐包括由以下酸形成的盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、柠檬酸、酒石酸、乙酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、醋酸、三氟乙酸、琥珀酸、高氯酸、富马酸、马来酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、草酰乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸、苯磺酸、羟乙磺酸、抗坏血酸、苹果酸、邻苯二甲酸、天门冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸和精氨酸。
在本发明的优选实施方式中，获得了化合物(I)的盐。更优选，获得药学上可接受的盐，最优选药学上可接受的酸的盐，特别优选盐酸盐。
在优选实施方式中，R是并且，步骤(d)包括：去除化合物(IIIb)的PG保护基团以获得化合物(Ib)(美乐芬)或其盐；其中PG如上述步骤(c)所限定。
优选获得化合物(Ib)的盐。更优选，获得药学上可接受的盐，最优选药学上可接受的酸的盐，特别优选盐酸盐。
非常广泛范围的反应条件可以用于实现在步骤(d)中去除去保护基团PG。步骤(d)中需要的反应条件取决于PG保护基团的性质。选择用于去除根据步骤(c)中PG限定的保护基团的条件是常规的，并且是技术人员的常见做法。例如，在保护基团是氨基甲酸酯基团的情况下，可以使用酸去除保护基团，例如，盐酸(HCl)或三氟乙酸(TFA)(优选HCl)。用于去除保护基团的合适条件在如下中揭示：例如，Wuts,P.G.M.,Greene的Protective Groups inOrganic Synthesis(《有机合成中的保护基团》)，第5版，2014，约翰韦利父子公司(JohnWiley&Sons.Inc.)。
例如，在PG是Boc(即，化合物(III)是化合物(IIIa))的情况下，步骤(d)包括：在酸性反应条件下使得化合物(IIIa)发生反应以获得化合物(I)(美乐芬或美法仑)或其盐(优选其盐酸盐)；其中PG和R如上述步骤(c)所限定。
在另一优选实施方式中，PG是Boc，并且R是并且，步骤(d)包括：去除化合物(IIIc)的PG保护基团以获得化合物(Ib)(美乐芬)或其盐。优选获得化合物(Ib)的盐。更优选，获得化合物(Ib)的药学上可接受的盐，最优选化合物(Ib)的药学上可接受的酸的盐，特别优选化合物(Ib)的盐酸盐：
在其中PG是酸不稳定保护基团(例如Boc)的实施方式中，优选化合物(III)(例如化合物(IIIa)或化合物(IIIc))在酸性环境下进行反应，优选与HCl反应，以去除保护基团从而形成化合物(I)(例如(Ib))或其盐。优选，形成化合物(I)(例如(Ib))的盐酸盐。
用于步骤(d)的合适的HCl源的例子包括：1.3M的HCl/EtOH、2.5M的HCl/EtOH、1M的HCL/EtOAc、3M的HCl/EtOH、和5-6M HCl/iPrOH。优选化合物(III)：HCl的摩尔比为1:1-1:50；更优选1:3-1:30；更优选1:5-1:20；更优选1:7-1:17，例如1:10。
优选用于去保护的溶剂选自下组：乙醇(EtOH)、异丙醇、乙酸乙酯、THF、丙酮以及它们的混合物。例如，反应可以在HCl/EtOH、乙酸乙酯/HCl/EtOH、丙酮/HCl/EtOH、或THF/HCl/EtOH的混合物中进行。例如，HCl/EtOH、丙酮/HCl/EtOH、或THF/HCl/EtOH。优选，反应在HCl/EtOH、或乙酸乙酯/HCl/EtOH的混合物中进行。
步骤(d)的产物可以进行纯化，例如通过用溶剂洗涤(例如，用乙醇进行一次或多次洗涤，如，用乙醇进行3次洗涤)和/或结晶(例如，在乙醇中重结晶和/或在甲基叔丁醚中进行重结晶；如，在甲基叔丁醚中进行重结晶；或者如，在甲基叔丁醚中进行重结晶，随后在乙醇中进行重结晶)进行纯化。
优选，去保护是形成N,N-双氯乙基胺的步骤(c)之后的单独步骤。然而，在某些实施方式中，去保护可以在一锅法合成中作为步骤(c)的一部分下进行。在该情况下，本发明的方法直接提供了化合物(I)的去保护产物。
在本发明的某些实施方式中，形成了化合物(I)的盐(例如化合物(Ib)的盐)。同样，本发明还提供一种用于生产化合物(I)的盐(例如化合物(Ib)的盐)的方法，所述方法包括：生产如上所述化合物(I)(例如化合物(Ib))的方法，以及形成化合物(I)的盐(例如化合物(Ib)的盐)步骤、例如形成盐酸盐的步骤。
形成化合物(I)的盐(例如，化合物(Ib)的盐)的步骤可以是去保护步骤(d)后的独立步骤，或者形成盐的步骤可以作为去保护步骤(d)的一部分进行。在一优选实施方式中，形成化合物(I)的盐(例如，化合物(Ib)的盐，优选化合物(Ib)的盐酸盐)的步骤可以作为去保护步骤(d)的一部分进行。在该实施方式中，优选PG是酸不稳定保护基团，例如Boc，并且优选化合物(III)(例如化合物(IIIa)或化合物(IIIc))在酸性反应条件下进行反应，更优选与HCl反应，以去除保护基团从而形成在其盐中的化合物(I)(例如(Ib))。更优选，形成化合物(I)(例如(Ib))的盐酸盐。
在另一优选实施方式中，形成化合物(I)的盐(例如，化合物(Ib)的盐)的步骤和去保护步骤可以在一锅法合成中作为步骤(c)的一部分进行。在该情况下，本发明的方法直接提供了化合物(I)的去保护产物的盐。
发明人另外发现了一种新颖的方法，所述方法包括：使两个取代的苯丙氨酸进行反应以产生化合物(VIb)：PG-对硝基-L-苯丙氨酸(化合物(IV))和对氟-L-苯丙氨酸乙酯(化合物(V))，其中，PG如上述步骤(c)所限定：
氨基酸可以进行偶联以形成化合物(VIb)。然后化合物(VIb)可以进行还原以形成芳族胺化合物(IIb)。用于形成化合物(IIb)的方法使用无毒性原材料，并且在随后的合成美乐芬的方法中使用时，避免在最终步骤前产生毒性产物。同样，该方法比使用在已知美乐芬合成方法中使用的含有双-(2-氯乙酸)的原材料更安全。
因此，本发明还提供了一种用于生产化合物(VIb)的方法，所述方法包括以下步骤：
(a)化合物(IV)与化合物(V)反应：
其中，PG如上述步骤(c)定义。
在某些优选的实施方式中，PG是Boc，并且所述方法包括以下步骤：
(a)使化合物(IVc)与化合物(V)反应以获得化合物(VIc)：
本发明方法的步骤(a)可以在适用于酰胺偶联反应的任何环境下使用。选择酰胺偶联反应条件是是常规的，并且是技术人员的常见做法。反应条件的要求可以取决于PG保护基团的性质。
适用于在本发明中使用的酰胺偶联剂包括：碳化二亚胺，例如，二环己基碳化二亚胺(DCC)、二异丙基碳化二亚胺(DIC)、乙基-(N’,N’-二甲基氨基)丙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC)；基于磷鎓(phosphonium)的试剂，例如，(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)、苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷鏻六氟磷酸盐(PyBOP)；基于铵的试剂，例如，N,N,N′,N′-四甲基-O-(1H-苯并三唑-1-基)脲鎓(uronium)六氟磷酸盐(HBTU)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(HATU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TBTU)、O-(6-氯代苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HCTU)、O-(3,4-二氢-4-氧代-1,2,3-苯并三嗪-3-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TDBTU)；基于亚铵(immonium aminium)的试剂，例如，(1H-苯并三唑-1-基氧基)-N,N-二甲基甲烷亚铵六氯锑酸盐(BOMI)、5-(1H-苯并三唑-1-基氧基)-3,4-二氢-1-甲基2H-吡咯鎓(pyrrolium)六氯锑酸盐(BDMP)和5-(7-氮杂苯并三唑-1-基氧基)-3,4-二氢-1-甲基2H-吡咯鎓六氯锑酸盐(AOMP)；产生酰氯的试剂，例如，亚硫酰氯、五氯化磷、三光气、三嗪(例如，氰尿酰氯、氰尿酰氟(cyanuric fluoride)、及其衍生物)、四甲基氟代甲脒六氟磷酸盐(tetramethylfluoroformamidiniumhexafluorophosphate,TFFH)、双(四亚甲基)氟代甲脒(bis(tetramethylene)fluoroformamidinium，BTFFH)、和1,3-二甲基-2-氟-4,5-二氢-1H-咪唑鎓六氟磷酸盐(DFIH)；或其它偶联剂，例如，3-(二乙基磷酰氧基)-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮(DEPBT)、羰基二咪唑(CDI)、丙基磷酸酐(T3P)、和N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氢喹啉(EEDQ)。
在酰胺偶联条件中可以包含其它试剂以抑制外消旋，例如，羟基苯并三唑(HOBt)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(HOAt)、2-氰基-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(oxyma)。优选抑制外消旋的其它试剂是HOBt。
在某些优选实施方式中，酰胺偶联使用如下方式进行：HATU或HBTU与N,N-二异丙基乙基胺(DIPEA)或N-甲基吗啉(NMM)；EDC和羟基苯并三唑(HOBt)与DIPEA或NMM；丙基磷酸酐(T3P)与DIPEA；PyBOP与DIPEA。
优选，步骤(a)在EDC的存在下进行。优选，步骤(a)在EDC、HOBt和NMM的存在下进行。使用这些反应条件，可以以非常高的粗制纯度获得化合物(VIb)，例如超过96％的纯度。最优选，步骤(a)在1.1当量的EDC、0.1当量的HOBt、3.5当量的NMM的存在下使用各约1当量的化合物(IV)和化合物(V)进行。
选择用于具体酰胺偶联反应条件的溶剂是常规的，并且是技术人员的常见做法。优选地，用于反应的溶剂是非质子溶剂。例如，溶剂可选自下组：乙酸乙酯、丙酮、THF、2-MeTHF、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、环戊基甲酯以及它们的混合物。优选，溶剂选自下组：DMF、乙酸乙酯、丙酮、2-MeTHF、及它们的混合物。更优选，所述溶剂是乙酸乙酯或丙酮。发明人发现丙酮是用于本发明酰胺偶联反应的出奇有效的溶剂，在整个反应中将反应混合物保持为溶液。同样，最优选的溶剂是丙酮。
在下一反应前，步骤(a)的产物进行进一步纯化，例如通过结晶纯化。或者，步骤(a)的产物可以直接用于工艺步骤(b)(如下所述)，而无需使化合物(VIb)进行进一步分离或纯化。
发现反应的(a)-(d)各步骤中产物的纯度是重要的，因为每个步骤中的杂质可以贯穿该过程，例如步骤(a)的产物的纯度会影响后续反应步骤(b)、(c)和(d)的纯度。因此，重要的是，该方法中的各步骤导致具有尽可能高纯度的产物，以获得最高纯度的化合物(III)和因此的最高纯度的化合物(I)。本发明的各步骤(a)至(d)导致具有高纯度的产物，使得整个反应工艺对于制造高纯度的化合物(III)以及因此的高纯度的化合物(I)特别有效。
本发明还提供了一种用于生产化合物(II)的本发明方法，所述方法包括以下步骤：
(b)使化合物(VI)与还原剂反应：
其中，PG如上述步骤(c)所限定，并且R是可选地合适保护形式的OH、或
例如，式(VI)的化合物可以是：(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(甲基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(乙基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(9-茐甲基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(叔丁基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(苯甲基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(对甲氧基苯甲基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(1-金刚烷基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(对溴苄基氧羰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(三氟乙酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(氯乙酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(苯乙酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(苯并乙酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(对甲苯磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(2-硝基苯磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(叔丁基磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(4-硝基苯磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(2-硝基苯磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(2,4-二硝酮磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯、或(2S)-2-[[(2S)-3-(4-硝基苯基)-2-(2-萘磺酰基氨基)丙酰基]氨基]-3-(4-氟苯基)丙酸乙酯。
例如，在PG是Boc的情况下，所述方法包括以下步骤：
(b)使化合物(VIa)与还原剂(例如H2/Pd/C)反应以获得化合物(IIa)：
其中，R是可选地合适保护形式的OH、或
在某些优选实施方式中，R是
所述方法可包括以下步骤：
(b)使化合物(VIb)与还原剂(例如H2/Pd/C)反应以获得化合物(IIb)，
其中，PG如上述步骤(c)定义。
在PG是Boc且R是的某些优选的实施方式中，所述方法可以包括以下步骤：
(b)使化合物(VIc)与还原剂反应，例如H2/Pd/C，
以获得化合物(IIc)。
本发明方法的步骤(b)可以在适用于将硝基基团还原为氨基基团的条件下使用。反应条件的要求可以取决于PG保护基团的性质。选择还原反应条件是常规的，并且是技术人员的常见做法。
在某些优选实施方式中，步骤(b)的还原反应可以是氢化反应，更优选催化氢化反应，即，氢化反应在氢气和催化剂存在下进行。因此，步骤(b)的还原剂可以是氢气(H2)和催化剂。优选所述催化剂是金属催化剂，例如选自下组的催化剂：铂、钯、铑、钌、镍(例如，雷尼镍或漆原镍(Urushibara nickel))、铁、以及它们的化合物(例如，它们的氧化物)。催化剂可以是均相或非均相的；优选催化剂是非均相的。优选地，催化剂是在催化剂载体上的，例如，选自下组的催化剂载体：碳、氧化铝、二氧化硅、和碳酸钙。最优选催化剂载体是碳。
在本发明的优选实施方式中，所述催化剂是钯(Pd)，更优选钯碳(Pd/C),即还原反应(b)使用H2气体以及Pd/C催化剂(H2/Pd/C)(即，步骤(b)的还原剂是H2/Pd/C)。更优选，Pd/C催化剂是在活性炭上的1-15％Pd，优选在活性炭上的1-10％Pd，更优选在活性炭上的3-6％Pd，最优选在活性炭上的3-5％Pd。优选的Pd/C催化剂是约50％水分的催化剂。
优选地，H2压力为1-8巴，更优选1-3巴。催化剂的含量优选1-30w/w％，更优选3-20w/w％；更优选3-10w/w％，最优选3-6w/w％，例如3、4、4.5、5或6w/w％。
选择用于氢化反应的合适溶剂是常规的，并且是技术人员的常见做法。合适溶剂的例子包括：2-MeTHF、乙酸乙酯、乙醇以及它们的混合物。优选地，所述溶剂是2-MeTHF。
在完成后，可以通过过滤、例如通过碳粉料(carbon frit)过滤去除催化剂。
在于所述方法步骤(c)中使用之前，步骤(b)的产物(化合物(III))可以在一种或多种溶剂(例如，乙醇、乙酸乙酯、2-MeTHF以及它们的混合物)以及一种或多种抗溶剂(例如，庚烷)中进行结晶以去除杂质。发明人发现化合物(II)在升高的温度下溶解于乙醇、乙酸乙酯、或2-MeTHF、或它们的混合物中，降低温度，以及添加(例如)庚烷，可以提高纯度。优选化合物(II)由2-MeTHF/庚烷混合物进行结晶。
如上所述步骤(b)可以与如上所述步骤(c)和/或步骤(d)组合使用。因此，本发明提供一种包括如下步骤的方法：
(b)用于生产化合物(II)的方法，所述方法包括：使化合物(VI)与还原剂反应；
(c)用于生产化合物(III)、或其去保护产物、或其去保护产物的盐的方法，所述方法包括：在还原剂的存在下，使化合物(II)与氯乙酸反应；以及/或者
(d)用于生产化合物(I)或其盐的方法，所述方法包括：使化合物(III)去保护以生产化合物(I)或其盐；
其中，PG是保护基团，并且R是可选地合适保护形式的OH、或优选PG是Boc。
在一优选实施方式中，步骤(c)是用于生产化合物(III)的去保护产物的方法，并且所述方法进一步包括：形成化合物(III)去保护产物的盐的步骤。在另一优选实施方式中，步骤(d)是用于生产化合物(I)的盐的方法，并且所述方法进一步包括：形成化合物(I)的盐的步骤。
在一个R是的优选实施方式中，如上所述步骤(a)和/或步骤(b)可以与如上所述步骤(c)和/或步骤(d)组合使用。因此，本发明提供一种包括一个或多个如下步骤的方法：
(a)用于生产化合物(VIb)的方法，所述方法包括：使化合物(IV)与化合物(V)反应；以及/或者
(b)用于生产化合物(IIb)的方法，所述方法包括：使化合物(VIb)与还原剂反应；以及/或者
(c)用于生产化合物(IIIb)、或其去保护产物的方法，所述方法包括：在还原剂的存在下，使化合物(IIb)与氯乙酸反应；以及/或者
(d)用于生产化合物(Ib)或其盐的方法，所述方法包括：使化合物(IIIb)去保护以生产化合物(Ib)或其盐，
其中，PG如上步骤(c)定义。
在该实施方式中，优选PG是Boc。
在一优选实施方式中，步骤(c)是用于生产化合物(IIIb)的去保护产物的方法，并且所述方法进一步包括：形成化合物(IIIb)去保护产物的盐的步骤。在另一优选实施方式中，步骤(d)是用于生产化合物(Ib)的盐的方法，并且所述方法进一步包括：形成化合物(Ib)的盐的步骤。
本发明还提供通过本文所述方法制造的化合物(III)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)，或其去保护产物，或其去保护产物的盐；通过本文所述方法制造的式(I)、(Ib)的化合物，或其盐；通过本文所述方法制造的式(VIb)的化合物；或者通过本文所述方法制造的式(II)或(IIc)的化合物。
本文还公开了一种用于生产可选地由如下物质合适地保护的化合物(X)或其盐的方法：
所述方法包括以下步骤：
(c)在还原剂的存在下，在可选的合适溶剂中，使化合物(XI)与氯乙酸反应：
优选的反应条件是如上述步骤(c)优选的反应条件。
实施例
通用实验详述
除非另有说明，否则所有试剂/溶剂从商业来源获得并使用而无需进一步纯化。
化合物在装备有C18反相柱的HPLC系统上进行纯化，并在262nm波长处使用UV检测。所有化合物以乙腈/水梯度进行分离。
实施例1-化合物(VIc)的合成
向装备有氮气进口和回流冷凝器的具有挂顶式搅拌器的反应器中，加入Boc-硝基苯丙氨酸(化合物(IVc))(35.0g，112.8mmol，1当量)，随后加入丙酮(420mL)、N-甲基吗啉(43.4mL，394.8mmol，3.5当量)、氟-L--苯丙氨酸乙酯盐酸盐(化合物(V))(28.5g，115mmol，1.02当量)、EDC(23.8g，124.1mmol，1.1当量)和HOBt·H2O(1.7g，11.3mmol，0.1当量)。浆液在室温下搅拌18.5小时，根据HPLC，这导致化合物(IVc)完全消耗掉。加入水(180mL)和2-MeTHF(965mL)。然后通过蒸发从澄清的两相有机混合物中去除约640g溶剂(TJ:35℃)。然后两次加入360mL2-MeTHF并蒸发掉。通过加入58mL的2M硫酸使得水相酸化至pH＝3。将有机层加热至35-40℃，随后依次进行以下操作：用水(90mL)洗涤，用饱和NaHCO3溶液(90mL)洗涤两次，随后用盐水(90mL)洗涤，最后用水(90mL)洗涤。向溶解于2-MeTHF的产物中在35-40℃逐滴加入庚烷(270mL)，然后在搅拌下使得混合物彻夜保持室温。逐滴加入另外135mL庚烷，随后将米色浆液冷却至10℃。使产物分离，并用100mL冷2-MeTHF/庚烷6/4洗涤。产物化合物(VIc)湿润储存(82.5g)。产物的少量样品通过检测极限(LOD)进行分析，显示出固体含有43.8％的溶剂残留物。基于此，纯化产物以82％的产率获得。通过HPLC确定的纯度为99.4面积％。
1H-NMR(300MHz,DMSO-D6)δ8.48(宽d,1H,J＝7.5Hz),8.16(2H,d,J＝8.7Hz),7.55(2H,d,J＝9Hz),7.28(2H,dd,J＝8,7,8.1Hz),7.12-7.02(3H,m),4.49(1H,dd,J＝14.4,7.2Hz),4.32-4.24(1H,m),4.04(2H,dd,J＝14.4,7.2Hz),3.08-2.95(3H,m),2.84(1H,dd,J＝13.2,10.8Hz),1.27(s,9H),1.11(3H,t,J＝7.2Hz)
13C-NMR(75MHz,DMSO-D6)δ171.4(C＝O),171.2(C＝O),161.2(C-F,d,J＝242.3Hz),155.2(C＝O),146.6(C),146.2(C),133.1(C),131.1(2碳,CH,d,J＝8.3Hz),130.6(2碳,CH),123.1(C),114.9(2碳,CH,J＝20.4Hz),78.1(C),60.6(CH2),55.1(CH),53.6(CH),37.3(CH2),35.9(CH2),28.0(3碳,CH3),14.0(CH3)
实施例2-化合物(IIc)的合成
向加氢高压釜中加入湿固体产物化合物(VIc)(约4.9g干重，9.7mmol，1当量)、2-MeTHF(75mL)和3w/w％的5％Pd/C-催化剂(147mg，50％水分)。用氮气对反应混合物进行脱气，然后，加入1barg氢气气体。搅拌设定为600rpm，并且TJ设定为36℃。反应在4小时内完成。用10mL 2-MeTHF洗涤加氢高压釜，并将洗涤部分加入到E烧瓶的反应溶液中。然后，加入碳(250mg，5wt％)，并将所获得的混合物在室温下搅拌15分钟，随后进行过滤。过滤器用10mL的2-MeTHF洗涤，然后将洗涤部分加入到过滤器中。淡黄色/粉色滤液包含白色沉淀产物。将浆液加热至约40℃，以溶解固体，随后在1小时内逐滴加入庚烷(42mL)。关闭加热器，彻夜搅拌下使混合物达到室温。加入另外的21mL庚烷，随后将混合物冷却至约7℃(冰/水浴)。使固体分离，然后用10mL冷2-MeTHF/庚烷6/4进行洗涤。在35℃下对潮湿固体(5.7g)进行真空干燥，获得4.2g的化合物(IIc)干重，等于91％的产率。通过HPLC确定的纯度为99.1面积％。
1H-NMR(300MHz,DMSO-D6)δ8.26(1H,d,J＝7.5Hz),7.26(dd,2H,J＝8.1,5.7Hz),7.09(2H,t,J＝8.7Hz),6.86(2H,d,J＝8.1Hz),6.71(1H,d,J＝8.7Hz),6.45(1H,d,J＝8.1Hz),4.87(2H,s),4.45(1H,dd,J＝14.4,7.5Hz),4.07-4.00(3H,m),3.06-2.91(2H,m),2.71(1H,dd,J＝13.8,3.9Hz),2.54-2.46(1H,m),1.31(s,9H),1.11(3H,t,J＝6.9Hz).
13C-NMR(75MHz,DMSO-D6)δ171.4(C＝O),171.2(C＝O),161.2(C-F,d,J＝242.3Hz),155.1(C＝O),146.9(C),133.2(C,d,J＝3.0Hz),131.1(2碳,CH,d,J＝8.3Hz),129.5(2碳,CH),124.8(C),114.8(2碳,CH,J＝21.1Hz),113.6(2碳,CH),77.9(C),60.5(CH2),56.0(CH),53.5(CH),36.7(CH2),35.9(CH2),28.1(3碳,CH3),13.9(CH3)
本发明人数次重复实施例2，其中使用了粗制化合物(VIc)或重结晶的化合物(VIc)(纯度：99.1面积％)作为原材料，并改变了各种反应条件，例如H2的压力、Pd/C的w/w％、溶剂和温度。当使用重结晶化合物(VIc)作为原材料时粗制纯度(97.2面积％)略高于使用粗制化合物(VIc)(在该情况下，粗制纯度通常为95-96面积％)时的纯度。最终产率和纯度也略高于当由粗制化合物(VIc)(98-98.5面积％)开始的情况。
本发明人使用MeTHF作为溶剂，通过改变Pd/Cw/w％、温度、H2压力和浓度数次重复实施例2。由于3至6巴的Pd/C w/w％；温度范围为30至40℃，H2压力为1至6barg，以及由于不同的反应浓度，获得化合物(VIc)(>99.5面积％)的高转化率。在所有尝试中得到的粗制纯度是相似的(95.3-96.2面积％)，由2-MeTHF/庚烷结晶后的分离产物的纯度也是如此(98.0-98.5面积％)。
实施例3——化合物(III)的制备
(i)在氯乙酸盐的存在下使用BH3SMe2进行
向具有顶部悬挂搅拌机的0.5L干燥反应器，加入化合物(IIc)(6.99g，14.76mmol)，随后在TI＝5-13℃下加入无水四氢呋喃(46mL)、氯乙酸(36.3g,383.8mmol)，氯乙酸钠盐(17.2g,147.6mmol)。然后历时45分钟加入BH3SMe2溶液(14.6g，191.9mmol，18.2mL)。在加入之后，将反应温度调整至TI＝25-30℃，并在到达该温度后保持2小时。反应用乙醇(17.7g，383.8mmol，22.4mL)缓慢停止，并在TJ＝5℃下彻夜搅拌，随后用蒸馏水(138mL)缓慢稀释，以使得产物(化合物(IIIc))沉淀。将温度调整到TI＝15℃，并且提高搅拌速率，随后加入K2CO3水溶液(8.0M,27mL)，使得pH＝7.0-7.5。将反应浆液收集于过滤器中，并且用水(2×40mL)洗涤反应容器和滤饼。使滤饼在TJ＝20℃下于水中重新糊化(re-slurred)1小时，并再次过滤。用水(50mL)洗涤，随后在TJ＝35℃于高真空下进行干燥，生产粗制白色产物，化合物(IIIc)，未校正的产量为7.85g(88.8％)。HPLC纯度为97.5面积％。
将根据所述过程制造的粗制化合物(IIIc)(7.5g)加入反应器中，并用用2-MeTHF(80mL)进行洗涤。在TJ＝50℃下加热以使物质溶解。在TI＝45-50℃下边搅拌边加入庚烷(80mL)，随后进行搅拌，然后将温度调整到TJ＝10℃。通过过滤收集沉淀的固体，并在TJ＝35℃在高真空下进行干燥，产生6.86g(91.5％)白色产物，化合物(IIIc)。HPLC纯度为99.1面积％。
1H-NMR(300MHz,DMSO-D6)δ8.30(1H,d,J＝7.8Hz),7.26(2H,dd,J＝8.1,6Hz),7.09-7.05(3H,m),6.79(1H,d,J＝8.9Hz),6.63(2H,d,J＝8.4Hz),4.49-4.42(1H,dd,J＝14.7,7.5Hz),4.07-3.99(3H,m),3.68(8H,s),3.06-2.91(2H,m),2.76(1H,dd,J＝13.8,4.2Hz),2.56(1H,m),1.29(9H,s),1.1(3H,t,J＝6.6Hz)
13C-NMR(75MHz,DMSO-D6)δ172.1(C＝O),171.3(C＝O),161.2(C-F,d,J＝242.3Hz),155.2(C＝O),144.7(C),133.2(C,d,J＝3.0Hz),131.1(2碳,CH,d,J＝7.5Hz),130.2(2碳,CH),126.1(C),114.9(2碳,CH,J＝21.1Hz),111.6(2碳,CH),78.0(C),60.6(CH2),55.9(CH),53.5(CH),52.2(CH2),41.2(CH2),36.4(CH2),35.9(CH2),28.1(3碳,CH3),14.0(CH3)
(ii)在氯乙酸盐的存在下使用BH3SMe2进行
在具有顶部悬挂搅拌器的0.5L干燥容器中，加入化合物(IIc)(7.5g,15.84mmol)，随后加入2-MeTHF(150mL)。将混合物加热至45℃以形成澄清溶液。将溶液冷却至4℃，随后在TI＝5-13℃下加入氯乙酸(38.9g,411.8mmol)、随后加入氯乙酸钠盐(18.4g,158.4mmol)。然后历时90分钟加入BH3SMe2溶液(15.6g,205.9mmol,19.5mL)。在加入之后，将反应温度调整至TI＝20-25℃，并在到达该温度后保持5小时。反应在水相中TI＝15-25℃、pH＝3.5条件下用水(150g,8333mmol,150mL)缓慢停止，随后在TI＝6℃彻夜静置而无需搅拌。产物(化合物(IIIc))在有机相中沉淀出来，并且在搅拌的同时将温度调整到TI＝35℃，并形成两个澄清相。使相分离，并且去除水相。用20％NaCl(水溶液)洗涤有机相三次，在三个水相中的pH为：1.7、1.1和1.1。在去除第三次水相后，将有机相转移到圆底烧瓶中，并在蒸发器中使其体积浓缩一半。产物(化合物(IIIc))开始沉淀出来，并且使得产物浆液在6℃熟化19小时。将浆液收集在过滤器中，并且用2-MeTHF:正庚烷(2×40mL)洗涤圆底烧瓶和滤饼，随后在高真空下在TJ＝35℃进行干燥，以生产粗制白色产物，化合物(IIIc)，未校正的产量为8.3g(87.6％)。HPLC纯度为99.4面积％。
(iii)在氯乙酸盐的存在下使用硼烷-四氢呋喃进行
在具有磁力搅拌子的100mL干燥圆底烧瓶中，在缓慢氮气气流下加入化合物(IIc)(0.75g,1.58mmol)，随后加入无水四氢呋喃(6mL)、氯乙酸(3.89g,41.2mmol)、和氯乙酸钠盐(1.84g,15.8mmol)。在TI＝5-13℃下，历时30分钟加入1M的BH3THF溶液(20.6mmol,20.6mL)。在加入之后，将反应温度调整至TI＝23-28℃，并在到达该温度后保持2小时。在过程中，对照样品(HPLC)显示出不完全反应，并且将夹套温度设定为TJ＝40℃，当内部温度达到TI＝40℃时，反应在该温度下保持2小时，当在进行时，样品(HPLC)显示出6.7面积％原材料、7.1％的酰化加合物(杂质)和84.1％化合物(IIIc)。反应在TI＝23℃下进行，并且在用乙醇(2.4g,3mL)缓慢冷却前静置4天。加入水(100mL)，并用1M K2CO3水溶液将pH调节至7。将反应浆液收集在过滤器中，并且用水(2×20mL)洗涤反应容器和滤饼，随后在高真空下在TJ＝35℃进行干燥，生产粗制无色产物，未校正的产量为0.85g(89.6％)。HPLC纯度为94.3面积％，并且一个主要杂质归因于3.8面积％的原材料的氯酰基化加合物。
(iv)使用BH3SMe2进行而不加入氯乙酸盐
在具有磁力搅拌子的100mL干燥圆底烧瓶中，在缓慢氮气气流下加入化合物(IIc)(0.75g,1.58mmol)，随后加入无水四氢呋喃(6mL)、和氯乙酸(3.89g,41.2mmol)。在TI＝5-16℃下，历时30分钟加入BH3THF溶液(1.56g，20.6mmol,2.0mL)。在加入之后，将反应混合物调整至TI＝25℃，并在到达该温度后保持2.5小时。工艺对照样品(HPLC)为66面积％的美乐芬(化合物(Ib))，化合物(IIIc)的Boc去保护形式。用乙醇(2.9g，3.7mL)使反应缓慢停止。反应的pH用1M的K2CO3水溶液至pH＝8，随后加入EtOAc(40mL)。使得层分离，水层用EtOAc(50mL)重新萃取。使有机层合并，并在<30mbar/35℃下减少为油状物。所述油状物由EtOAc(30mL)重新蒸馏2次，残留物在TJ＝23℃/5mbar下进行干燥，从而留下1.6g的褐色油。化合物(Ib)的HPLC纯度为66.1面积％。
实施例4—化合物(Ib)盐酸盐的制备
Boc-美乐芬(化合物(IIIc)(5.0g，8.3mmol))加入装有磁力搅拌子以及氮气进口的圆底烧瓶中。加入溶于乙醇的1.3M HCl(无水)(64mL,83.5mmol,10当量)。在19小时后，转化率为99.4％。溶剂在旋转蒸发仪上在TJ＝33℃进行部分蒸馏，随后加入乙醇(18mL)。该操作重复两次。加入晶种，并在30分钟后，产物沉淀。将浆料搅拌21小时，然后进行浓缩。在室温下以均匀速率历时30分钟加入甲基叔丁醚(MTBE)(108mL)。在室温下搅拌100分钟后，通过真空过滤收集沉淀物，并用2×25mL乙醇:MTBE(1:6)洗涤。在真空烘箱中在TJ＝35℃/5mbar下进行彻夜干燥。以其盐酸盐形式的化合物(Ib)的产量为4.0g(90％)。HPLC纯度为98.7面积％。
1H-NMR(300MHz,MeOH-D4)δ7.26(2H,dd,J＝8.4,8.1Hz),7.17(2H,d,J＝8.4Hz),7.02(2H,dd,J＝9,8.4Hz),6.74(2H,d,J＝8.4Hz),4.69(1H,dd,J＝7.8,6.3Hz),4.15(2H,dd,J＝14.1,7.2Hz),4.04(1H,dd,J＝8.4,5.4Hz),3.76(4H,dd,J＝6.3,6Hz),3.67(4H,dd,6.6,5.7Hz),3.17(2H,dd,J＝14.4,6Hz),3.06-2.88(2H,m),1.22(3H,t,J＝7.2Hz)
13C-NMR(75MHz,MeOH-D4)δ172.2(C＝O),169.8(C＝O),163.4(C-F,d,J＝244.5Hz),147.4(C),133.9(C,d,J＝3Hz),132.1(2碳,CH,d,J＝7.5Hz),131.8(2碳,CH),123.4(C),116.2(2碳,CH,d,J＝21.9Hz),113.7(2碳,CH),62.6(CH2),55.6(CH),55.5(CH),54.3(CH2),41.6(CH2),37.6(CH2),37.6(CH2),14.5(CH3)
在乙酸乙酯存在下，在1.3M至2.5M的不同浓度的HCl以及6℃至室温的不同温度下成功地重复实施例4。

Claims (25)

1.一种用于生产化合物(III)或其去保护产物的方法：
所述方法包括：在还原剂的存在下，使化合物(II)与氯乙酸反应：
其中，PG是保护基团，并且R是合适保护形式的OH、或
2.如权利要求1所述的方法，所述方法在选自下组的还原剂的存在下进行：硼烷、硼烷-路易斯碱复合物、硼氢化物、金属氢化物、以及在金属催化剂存在下的H2。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述还原剂是BH3或硼烷二甲硫醚。
4.如权利要求1～3中任一项所述的方法，其特征在于，PG选自下组：甲基氧羰基、乙基氧羰基、9-茐甲基氧羰基、叔丁基氧羰基、苯甲基氧羰基、对甲氧基苯甲基氧羰基、1-金刚烷基氧羰基、对溴苄基氧羰基、三氟乙酰基、氯乙酰基、苯乙酰基、苯并乙酰基、对甲苯磺酰基、2-硝基苯磺酰基、叔丁基磺酰基、2-或4-硝基苯磺酰基、2,4-二硝酮磺酰基、以及2-萘磺酰基。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述PG是叔丁基氧羰基。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，所述方法在3-50℃、例如4-45℃的温度范围下进行。
7.如权利要求1-5中任一项所述的方法，所述方法在5-70℃的温度范围下进行。
8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，所述方法在缓冲剂的存在下进行。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述缓冲剂是氯乙酸盐，例如氯乙酸钠。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，氯乙酸：氯乙酸盐的摩尔比为2:1至5:1。
11.如权利要求9或10所述的方法，其特征在于，化合物(II)：氯乙酸盐的摩尔比为1:7至1:20。
12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其特征在于，所述R是
13.一种用于生产化合物(III)的盐、或化合物(III)的去保护产物的盐的方法，所述方法包括：如权利要求1～12任一项所述的方法，以及形成盐的步骤、例如形成盐酸盐步骤。
14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其特征在于，所述化合物(II)通过化合物(VI)与还原剂反应产生：
其中，PG如化合物(II)所限定，并且R是可选地合适保护形式的OH、或
15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述还原剂是氢气和催化剂，例如H2/Pd/C。
16.如权利要求14或15所述的方法，其特征在于，所R是并且通过化合物(IV)与化合物(V)反应产生化合物(VI)：
其中，PG如化合物(II)所限定。
17.一种用于生产化合物(I)或其盐的方法：
所述方法包括：实施如权利要求1-16中任一项所述的方法，并进在单一步骤中使化合物(III)去保护以产生化合物(I)、或其盐，
其中，R是可选地合适保护形式的OH、或
18.如权利要求17所述的方法，其特征在于，化合物(I)是化合物(Ib)或其盐：
19.一种用于生产化合物(I)的盐的方法，所述方法包括：如权利要求17或18所述的方法，以及形成盐的步骤、例如形成盐酸盐步骤。
20.如权利要求19所述的方法，其特征在于，所述方法用于生产化合物(Ib)的盐酸盐：
21.一种用于生产化合物(VIb)的方法，
所述方法包括化合物(IV)与化合物(V)反应：
其中，PG是保护基团。
22.一种用于生产化合物(II)的方法，
所述方法包括化合物(VI)与还原剂反应：
其中，PG是保护基团，并且R是可选地合适保护形式的OH、或
23.如权利要求22所述的方法，其特征在于，所述还原剂是氢气和催化剂，例如H2/Pd/C。
24.一种具有以下结构的化合物：
其中，Y是NH2或NO2，并且PG是保护基团。
25.如权利要求24所述的化合物，其特征在于，所述PG是叔丁基氧羰基。
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2021004474A (es) * 2018-10-18 2021-08-24 Oncopeptides Ab Compuestos que contienen deuterio.
JP7475635B2 (ja) * 2020-01-30 2024-04-30 公立大学法人大阪 含窒素化合物およびその製造方法、ならびに該含窒素化合物を含む光機能性材料
CN112546969B (zh) * 2020-12-07 2022-12-23 安徽贝克制药股份有限公司 催化加氢连续生产装置和利托那韦中间体的制备方法
EP4347615A1 (en) 2021-06-01 2024-04-10 Synthon B.V. Process for making melflufen or a salt thereof
GB202204171D0 (en) 2022-03-24 2022-05-11 Oncopeptides Ab Novel formulations

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001096367A1 (en) * 2000-06-13 2001-12-20 Oncopeptides Ab Melphalan derivatives and their use as cancer chemotherapeutic drugs
CN101300255A (zh) * 2005-05-20 2008-11-05 艾伦药物公司 咪唑啉酮苯丙氨酸衍生物vla-4拮抗剂
CN102177140A (zh) * 2008-10-08 2011-09-07 赛福伦公司 用于制备苯达莫司汀的方法
WO2014141294A2 (en) * 2013-03-11 2014-09-18 Biophore India Pharmaceuticals Pvt. Ltd. An improved process for the synthesis of melphalan and the hydrochloride salt
WO2014191426A1 (en) * 2013-05-31 2014-12-04 Farmabios S.P.A. Process for the purification of melphalan

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6992207B2 (en) * 2000-06-13 2006-01-31 Oncopeptides Ab Melphalan derivatives and their use as cancer chemotherapeutic drugs
RU2316326C2 (ru) * 2001-12-03 2008-02-10 Байер Фамэсьютиклс Копэрейшн Способ и композиция для лечения ракового заболевания, тозилат и фармацевтически приемлемые соли n-(4-хлор-3-(трифторметил)фенил)-n'-(4-(2-(n-метилкарбамоил)-4-пиридилокси)фенил)мочевины
TW200615273A (en) * 2004-11-10 2006-05-16 Nicholas Piramal India Ltd Fused tricyclic compounds as inhibitors of tumor necrosis factor-alpha
CN100491339C (zh) 2007-04-20 2009-05-27 苏州市立德化学有限公司 一种抗肿瘤药物美法仑的合成工艺
RS60719B1 (sr) 2011-04-28 2020-09-30 Oncopeptides Ab Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida
US20130079383A1 (en) * 2011-07-13 2013-03-28 Arrowhead Research Corporation Lipid Compounds Targeting VLA-4
SI2928463T1 (sl) 2012-10-26 2020-03-31 Oncopeptides Ab Liofilizirani pripravki melfalan flufenamida

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001096367A1 (en) * 2000-06-13 2001-12-20 Oncopeptides Ab Melphalan derivatives and their use as cancer chemotherapeutic drugs
CN101300255A (zh) * 2005-05-20 2008-11-05 艾伦药物公司 咪唑啉酮苯丙氨酸衍生物vla-4拮抗剂
CN102177140A (zh) * 2008-10-08 2011-09-07 赛福伦公司 用于制备苯达莫司汀的方法
WO2014141294A2 (en) * 2013-03-11 2014-09-18 Biophore India Pharmaceuticals Pvt. Ltd. An improved process for the synthesis of melphalan and the hydrochloride salt
WO2014191426A1 (en) * 2013-05-31 2014-12-04 Farmabios S.P.A. Process for the purification of melphalan

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