CN107802630B - 木通苯乙醇b及组合物在制备综合防治脂异常与糖尿病的药物或食品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了木通苯乙醇B及组合物在制备综合防治脂异常与糖尿病的药物或食品中的应用。本发明发现，木通苯乙醇B既可以单独或与洛伐他汀联合用于降脂以及由高脂引发的高脂血症、非酒精性脂肪肝等，又可以降血糖，改善糖耐量和胰岛素抵抗，因而可以用于综合防治脂异常与糖尿病；本发明还提供了一种性质稳定的木通苯乙醇B氯化钠注射液。

Description

木通苯乙醇B及组合物在制备综合防治脂异常与糖尿病的药 物或食品中的应用

技术领域

本发明属于医药领域，涉及已知化合物的新用途，具体涉及木通苯乙醇B及组合物在制备综合防治脂异常与糖尿病的药物或食品中的应用。

背景技术

糖尿病是由遗传和环境因素相互作用而引起的一组代谢异常综合征。可引起全身多个系统器官的慢性并发症，具有较高的致残率和致死率。随着当今社会的经济发展，人们生活水平的提高，生活节奏变快人们日常高蛋白高热量食物的摄入过多，而人们的体力劳动、能量消耗越来越少，血脂异常和肥胖已经成为了伴随当今人们的普遍现象。已有较多的研究发现，2型糖尿病患者常多合并肥胖、高血压、高血脂，即所谓的代谢综合征，最新的临床荟萃分析结果表示，代谢综合症是心血管事件发生增加的危险因素。根据2004年中华医学会糖尿病分会建议的代谢综合症的诊断标准中包括超重或肥胖、高血糖、高血压、血脂紊乱。大部分文献认为代谢综合症以胰岛素抵抗为中心环节，脂肪组织增加与胰岛素抵抗相关。肥胖时脂肪组织代谢紊乱，游离脂肪酸产生增多，形成“脂毒性”，使胰岛素的生物效应降低、葡萄糖代谢障碍，导致胰岛素抵抗。另一方面，脂肪组织还是一个分泌活跃的内分泌器官，主要分泌一些生物肽类及慢性炎症因子，包括瘦素、脂联素、抵抗素、纤溶酶原激活物-1、肿瘤坏死因子α、白介素、前列腺素等50余种。这些因子间的作用失衡可导致胰岛素抵抗、糖尿病发生。另外，肥胖者体内脂肪细胞体积肥大、增生，组织细胞上胰岛素受体数目减少，活性减低，致使对胰岛素敏感性下降，也是糖尿病发病的一方面因素。正常人的血液中出现血脂异常，血液中甘油三酯(TG)或者低密度脂蛋白(LDL)含量过高超过肝脏正常代谢能力时，就会出现甘油三酯大量聚集在体内，使脂肪细胞变大、变多，造成人体的肥胖。

金晔等随机抽取2008-2009年来首都医科大学附属北京友谊医院门诊就诊的病人，且未诊断过糖尿病的人群，填写一份糖尿病危险因素调查问卷，并做口服糖耐量实验(OGTT)，剔除调查对象中资料不全者，根据是否血脂异常将人群分为两组，共7270人，正常人群为A组3680人，血脂异常人群为B组3590人，结果A组确诊糖尿病230人，占6.25％，糖耐量异常(包括IFG及IGT)349人，占9.48％；B组确诊糖尿病1008人，占28.08％，糖耐量异常(包括IFG及IGT)1686人，占46.96％。两组糖尿病患病率及糖耐量异常患病率有统计学意义(参考文献：血脂异常对糖尿病发病及相关危险因素的影响，中国实验诊断学2011年5月第15卷第5期)。陶然等采用多阶段整群随机抽样方法在江苏省14个成人慢性病及其危险因素监测点抽取8400名≥18岁成年居民并进行面访问卷调查，分析血脂异常与糖尿病的关系，结果显示：江苏省成年人血脂异常患病率为35.0％，其中总胆固醇(TC)升高率为4.7％，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)降低率为21.1％，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高率为1.7％，甘油三酯(TG)升高率为13.4％；糖尿病患病率为8.5％；相关分析结果显示，TC、LDL-C、TG与空腹血糖均呈正相关(P＝0.000)，HDL-C与空腹血糖呈负相关(r＝-0.054，P＝0.000)；多因素非条件logistic回归分析结果显示，血脂异常、TC升高、HDL-C降低和TG升高的成年人糖尿病患病风险分别为正常成年人的2.40倍(OR＝2.40，95％ CI＝2.03～2.83)、1.91倍(OR＝1.91，95％ CI＝1.41～2.58)、1.77倍(OR＝1.77，95％ CI＝1.47～2.13)和2.24倍(OR＝2.24，95％ CI＝1.83～2.73)；TC、LDL-C和TG每增加1个标准差，糖尿病患病风险分别增加17％(OR＝1.17，95％ CI＝1.07～1.26)、20％(OR＝1.20，95％ CI＝1.11～1.30)和26％(OR＝1.26，95％ CI＝1.19～1.34)，HDL-C每增加1个标准差，糖尿病患病风险降低32％(OR＝0.76，95％ CI＝0.70～0.84)，TC、LDL-C、TG和HDL-C对糖尿病患病风险的影响依次升高(参考文献：江苏省成年人血脂异常与糖尿病关系，中国公共卫生2015年5月第31卷第5期)。由此可见，血脂异常与糖尿病密切相关，应加强血脂异常与糖尿病的综合防治。

目前，血脂异常与糖尿病综合防治过程中，采用降血脂药可以有效调节血脂且有助于缓解糖尿病的病情，但是降血脂药是通过降脂间接防治糖尿病，并非直接调节血糖，且对改善糖尿病病人的糖耐量和胰岛素抵抗作用不大；采用磺酰脲类、双胍类、噻唑烷二酮类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、瑞格列奈、胰岛素等降糖药物可以有效降低血糖水平，但是仅噻唑烷二酮类可改善胰岛素抵抗，且不能明显调节血脂水平。

木通苯乙醇B，又称木通苯乙醇苷B或荷苞花苷B，其化学结构式如下：

目前尚未见木通苯乙醇B在脂异常与糖尿病综合防治中的应用。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供木通苯乙醇B在制备脂异常与糖尿病综合防治的药物中的应用，其可以单独或与洛伐他汀联合用于降脂以及由高脂引发的高脂血症、非酒精性脂肪肝等，或单独用于防治糖尿病。本发明还提供了一种木通苯乙醇B注射液。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

如下化学结构的木通苯乙醇B在制备综合防治脂异常与糖尿病的药物中的应用：

木通苯乙醇B在制备降脂的药物中的应用。

进一步地，所述降脂的药物为组合物，还含有洛伐他汀。

木通苯乙醇B在制备治疗高脂血症的药物中的应用。

木通苯乙醇B在制备治疗非酒精性脂肪肝的药物中的应用。

木通苯乙醇B在制备降血糖的药物中的应用。

木通苯乙醇B在制备治疗糖尿病的药物中的应用，所述治疗包括改善糖尿病病人的糖耐量和胰岛素抵抗。

进一步地，所述糖尿病为高脂诱导的并发症。

一种用于综合防治脂异常与糖尿病的药物制剂或食品，以木通苯乙醇B为活性成分，还含有可接受的载体或赋形剂，制成可接受的剂型。

进一步地，所述剂型为注射液，有效成分为木通苯乙醇B，载体为氯化钠溶液。

本发明发现，木通苯乙醇B既可以单独或与洛伐他汀联合用于降脂以及由高脂引发的高脂血症、非酒精性脂肪肝等，又可以降血糖，改善糖耐量和胰岛素抵抗，因而可以用于综合防治脂异常与糖尿病；本发明还提供了一种性质稳定的木通苯乙醇B氯化钠注射液。

附图说明

图1为各组小鼠丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶的对比；

图2为木通苯乙醇B对口服糖耐量曲线下面积的影响，与正常对照组和模型组对比；

图3为木通苯乙醇B对口服胰岛素耐量线下面积的影响，与正常对照组和模型组对比。

具体实施方式

下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。

实施例1：木通苯乙醇B的降脂作用

一、实验动物及方法

C57BL小鼠，SPF级，雄性，体重(20±2)g，随机分成两组，第一组14只，为正常对照组，给与正常饲料，其余小鼠(44只)用于制造高脂模型，给与高脂饲料(基础饲料加入20％猪油，1.25％胆固醇，0.5％的胆酸钠)，均自由摄食、饮水。连续喂养8周后，从正常对照组和造模小鼠中分别处死4只，比较两组小鼠的血清和肝脏生化指标，以及肝脏组织病理切片，判断模型是否建立成功。将造模成功的40只小鼠随机分为4组，模型组(10只)，木通苯乙醇B组(10只)，阳性对照组(洛伐他汀组10只)，联合给药组(洛伐他汀+木通苯乙醇B，10只)，连续灌胃给药6周。给药期间，除正常对照组给予标准饲料饲养外，其余各组继续给予高脂饮食，直到实验结束。木通苯乙醇B组在高脂饮食同时采用口服灌胃(50mg/kg/d)方式给药，阳性对照组在高脂饮食同时采用口服灌胃洛伐他汀(20mg/kg/d)方式给药，联合对照组口服灌胃(25mg/kg/d木通苯乙醇B组+10mg/kg/d)。

观察指标

1、动物行为：实验动物在SPF动物房中饲养，12h光照12h黑夜，自由饮食饮水，实验期间动物状态正常。

2、肝功能相关指标：血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)。

3、血脂相关指标：禁食血糖、TC、TG、HDL-c、LDL-c。

二、实验结果

如表1所示，与正常对照组相比，模型组总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白均明显升高，说明高脂模型造模成功。与模型组相比，洛伐他汀组和木通苯乙醇B组总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白均明显降低，高密度脂蛋白明显升高，说明木通苯乙醇B能显著降低高脂模型小鼠的总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白，并升高其高密度脂蛋白，具有与阳性药洛伐他汀相似的降脂效果，从而可以用于治疗高脂血症。洛伐他汀与木通苯乙醇B组合后可以获得更为优异的降脂效果，二者可以联合用药(表1注：^###P<0.001，与正常对照组相比；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，与模型组相比；a P<0.05，c P<0.001，与洛伐他汀相比；e P<0.01，fP<0.001，与木通苯乙醇B相比)。

血浆中天门冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)是评价肝功能的重要指标。如表2和图1所示，与正常对照组比，模型组小鼠血浆中AST和ALT含量显著升高，肝脏重量明显升高，且肝脏中甘油三酯和胆固醇明显升高，病理切片显示肝脏脂肪变性严重，说明模型组呈现明显的脂肪肝变性。与模型组相比，洛伐他汀组和木通苯乙醇B组小鼠血浆中AST、ALT含量和肝脏重量显著降低，且肝脏中甘油三酯和胆固醇含量明显降低，病理切片显示肝脏脂肪变性得到明显改善；洛伐他汀与木通苯乙醇B联合给药可以进一步改善肝功能。这些结果表明，木通苯乙醇B可以单独或与洛伐他汀联合用于治疗非酒精性脂肪肝(表2注：^###P<0.001，与正常对照组相比；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001，与模型组相比；a P<0.05，与洛伐他汀相比；a P<0.05，fP<0.001，与木通苯乙醇B相比)。

表1各组小鼠血脂指标的变化

表2各组小鼠丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸转氨酶的变化

实施例2：木通苯乙醇B的降糖作用

一、实验动物及方法

建模和给药方法同实施例1，建模后连续灌胃给药6周。

糖耐量实验方法：小鼠连续给药6周后，禁食过夜，口服葡萄糖2g/kg后分别于0、15、30、60、90、120min时，尾尖采血测血糖，使用GraphPad Prism软件计算相应线下面积(AUC)。

胰岛素耐受实验方法：小鼠连续给药6周后，禁食过夜，腹腔注射胰岛素0.75IU/kg后于0、30、60、90、120、150min时，尾尖采血测定相应血糖，使用GraphPad Prism软件计算相应线下面积(AUC)。

实验数据进行方差分析，结果以x±s表示。

二、实验结果

如表3所示，与正常对照组比，模型组空腹血糖显著升高，且高于7mM(糖尿病临床诊断的初步标准)，说明糖尿病模型造模成功。与模型组相比，木通苯乙醇B组空腹血糖显著下降，且低于7mM，具有统计学差异，说明木通苯乙醇B降低了糖尿病小鼠的空腹血糖(禁食血糖)水平(表3注：^###P<0.001，与正常对照组相比；*P<0.05与模型组相比)。

如表4所示，与正常对照组比，模型组各时间点血糖显著升高，说明模型组小鼠糖耐量下降；与模型组相比，木通苯乙醇B组各时间点血糖显著下降，说明木通苯乙醇B改善了糖尿病小鼠的糖耐量(表4注：^###P<0.001，与正常对照组相比；*P<0.05与模型组相比)。

如表5和图2，与正常对照组比，模型组在监测时间段内血糖显著升高，说明模型组小鼠糖耐量下降；与模型组比，木通苯乙醇B组在监测时间段内血糖显著下降，说明木通苯乙醇B改善了糖尿病小鼠的糖耐量(注：^###P<0.001，与正常对照组比；*P<0.05与模型组比)。

如表6所示，与正常对照组比，模型组各时间点血糖显著升高，说明模型组小鼠出现了胰岛素抵抗；与模型组比，木通苯乙醇B组各时间点血糖显著下降，说明木通苯乙醇B改善了糖尿病小鼠的胰岛素抵抗(表6注：^###P<0.001，与正常对照组比；*P<0.05与模型组比)。

如表7和图3所示，与正常对照组比，模型组在监测时间段内血糖显著升高，说明模型组小鼠出现了胰岛素抵抗；与模型组相比，木通苯乙醇B组在监测时间段内血糖显著下降，说明木通苯乙醇B改善了糖尿病小鼠的胰岛素抵抗(表7注：^###P<0.001，与正常对照组相比；*P<0.05与模型组相比)。

表3木通苯乙醇B对高脂诱导的糖尿病禁食血糖的影响

组别	空腹血糖(mM)
		正常对照组	4.10±0.69
模型组	9.27±1.00<sup>###</sup>
		木通苯乙醇B组	8.00±1.07*

表4木通苯乙醇B对糖尿病小鼠口服糖耐量的影响

表5木通苯乙醇B对口服糖耐量曲线下面积数据分析

组别	线下面积(AUC)
		正常对照组	787.89±75.71
模型组	1711.9±178.18<sup>###</sup>
		给药组	1494.30±262.28*

表6木通苯乙醇B对糖尿病小鼠胰岛素耐量的影响(单位：mM)

时间	正常对照组	模型组	给药组
				0min	7.48±0.77	10.21±0.96<sup>###</sup>	8.7±1.97*
30min	4.56±0.69	7.46±0.92<sup>###</sup>	6.43±1.26*
				60min	3.50±0.70	5.78±0.93<sup>###</sup>	5.04±0.94
90min	2.81±0.30	5.13±0.79<sup>###</sup>	4.32±0.99
				120min	3.10±0.29	5.27±1.08<sup>###</sup>	4.59±0.72
150min	3.61±0.31	6.09±0.84<sup>###</sup>	5.19±0.72*

表7木通苯乙醇B对口服胰岛素耐量线下面积数据分析

组别	线下面积(AUC)
		正常对照组	570.9±52.69
模型组	956.75±125.08<sup>###</sup>
		给药组	817.55±76.79*

实施例3：药物制剂或食品中的应用

1、木通苯乙醇B片剂

木通苯乙醇B10mg，淀粉88g，硬脂酸镁3g。

制备工艺：取木通苯乙醇B加淀粉、硬脂酸镁混合均匀，制成颗粒，干燥，压片，即得。

2、木通苯乙醇B胶囊

木通苯乙醇B10mg，淀粉88g，硬脂酸镁3g。

制备工艺：取木通苯乙醇B加淀粉、硬脂酸镁混合均匀，制成颗粒，干燥，装胶囊。

3、木通苯乙醇B氯化钠注射液

木通苯乙醇B 47mg，注射用氯化钠7mg。

制备工艺：取木通苯乙醇B加1.9mL注射用水溶解，加入注射用氯化钠至等渗，调节pH值至7-7.1，滤过，冷藏24小时，加注射用水至规定量，滤过，灌封，灭菌，即得。

木通苯乙醇B存在一个双键顺反异构体。从分子势能角度，木通苯乙醇B为E型优势构象，其Z型异构体为劣势构象，二者自然状态下会相互转化，但木通苯乙醇B占绝对优势，平衡状态下木通苯乙醇B占比约87-93％。二者化学结构和转化示意如下式所示：

申请人发现，在制备木通苯乙醇B注射液时，氯化钠对E型的木通苯乙醇B具有绝对的选择性，促进Z型向E型转化，抑制E型向Z型转化。申请人提供了葡萄糖注射液作为对比，与上述氯化钠注射液的区别仅在于使用葡萄糖替代氯化钠作为等渗调节物质，其余工艺相同。将氯化钠注射液和葡萄糖注射液置于(25±2)℃自然状态下放置一个月，按照如下公式测定计算注射液中木通苯乙醇B的含量：木通苯乙醇B含量(％)＝E型构象浓度/(E型构象浓度+Z型构象浓度)×100％。结果木通苯乙醇B葡萄糖注射液中木通苯乙醇B含量为6.33％，木通苯乙醇B氯化钠注射液中木通苯乙醇B含量小于0.2％。

4、木通苯乙醇B和洛伐他汀复合片剂

木通苯乙醇B10mg，洛伐他汀1mg，淀粉88g，硬脂酸镁3g。

制备工艺：取木通苯乙醇B和洛伐他汀加淀粉、硬脂酸镁混匀，制成颗粒，干燥，压片。

5、木通苯乙醇B的食品制剂

干酵母5g、温水90ml、水、面粉150g、木通苯乙醇B5mg，植物油10g、低钠盐少许。

饼干做法：把酵母撒在温水里搅拌倒溶化，加入木通苯乙醇B。加入面粉搅拌，再加入植物油，揉成光滑的面团；面团制成0.2cm厚的薄片；压出造型，刺洞，表面撒上水，撒上一点低钠盐，室温发酵10分钟；烤箱预热120度，放在上层，烤10分钟。

综上，本发明发现，木通苯乙醇B既可以单独或与洛伐他汀联合用于降脂以及由高脂引发的高脂血症、非酒精性脂肪肝等，又可以降血糖，改善糖耐量和胰岛素抵抗，因而可以用于综合防治脂异常与糖尿病；本发明还提供了一种性质稳定的木通苯乙醇B氯化钠注射液。

上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。

Claims (4)

1.如下化学结构的木通苯乙醇B在制备降脂的药物中的应用：

2.木通苯乙醇B在制备治疗高脂血症的药物中的应用。

3.木通苯乙醇B在制备治疗非酒精性脂肪肝的药物中的应用。

4.木通苯乙醇B在制备降脂的注射液中的应用，该注射液以木通苯乙醇B为活性成分，以氯化钠溶液为载体。

Images