CN107438422A

CN107438422A - 包含至少一甘草次酸及至少一没药甾酮的天然物组合物及该天然物组合在化妆品应用中的用途

Info

Publication number: CN107438422A
Application number: CN201680021508.7A
Authority: CN
Inventors: L·韦伯; R·罗伯特
Original assignee: Ang Tuhemu Co Ltd
Current assignee: Ang Tuhemu Co Ltd; OntoChem GmbH
Priority date: 2015-04-13
Filing date: 2016-04-12
Publication date: 2017-12-05
Also published as: EP3283055A1; BR112017021950A2; CA2982397A1; TW201701861A; KR20170134746A; PH12017501756A1; JP2018514506A; MX2017012815A; US20180207078A1; AU2016249759A1; RU2017139120A3; WO2016166091A1; ZA201706881B; RU2017139120A

Abstract

本发明是关于一种包含至少一甘草次酸及至少一没药甾酮的天然物质的组合物及其用于化妆品应用的用途。本发明特别是关于一种囊泡(尤其是用于局部施用)包括至少一甘草次酸及至少一没药甾酮。该囊泡较佳是加入到乳膏剂、乳液剂或凝胶剂，所得乳膏剂、乳液剂或凝胶剂被用于皮肤的美容治疗和/或皮肤治疗和/或用于皮下脂肪团和/或老化皮肤外观的预防和/或用于治疗皮下脂肪或结缔组织的变化，例如脂肪瘤及其它非特异性皮下脂肪堆积，或用于非经疾病引起的脂肪垫的消退或减少，例如脸部区域及颈部区域的脂肪垫，例如泪囊等。

Description

包含至少一甘草次酸及至少一没药甾酮的天然物组合物及该天然物组合在化妆品应用中的用途

技术领域

本发明是关于一种囊泡(尤其是用于局部施用)包括至少一甘草次酸及至少一没药甾酮。该囊泡较佳地加入到乳膏剂、乳液剂或凝胶剂，所得乳膏剂、乳液剂或凝胶剂被用于皮肤的美容治疗和/或皮肤学治疗和/或用于皮下脂肪团(cellulite)和/或老化皮肤外观的预防。乳膏剂、乳液剂或凝胶剂可进一步包括辅助物质(赋形剂)，其例如，改善该乳膏剂、乳液剂或凝胶作为皮肤护理产品的有效性、储存寿命、气味或其它性质。包括至少一甘草次酸和至少一没药甾酮的活性成分组合物的囊泡调配物确保足够的局部渗透，因而对皮下脂肪团和/或老化皮肤有所期望的美容效果和/或皮肤效果。

本发明进一步关于一种包括至少一甘草次酸和至少一没药甾酮的面膜(例如抗老化面膜)。根据本发明的面膜较佳包括本发明的囊泡，该囊泡具有至少一甘草次酸及至少一没药甾酮。

本发明进一步关于一种硬膏剂(plaster)或贴片(patch)(例如用于双下巴、脂肪瘤等等的治疗)，其包括至少一甘草次酸和至少一没药甾酮。根据本发明的硬膏剂或贴片较佳包括本发明的囊泡，该囊泡具有至少一甘草次酸及至少一没药甾酮。

背景技术

有效的美容治疗和/或皮肤治疗和/或皮下脂肪团或老化皮肤外观的预防仍是还没有被令人满意地解决的问题。皮下脂肪团特别是所有女性约80％的美容问题及知觉问题，其主要是由于女性结缔组织与皮下脂肪囤积相结合的特征结构所产生。至于结缔组织松弛的结果，其产生的原因可以是例如与基因、年龄相关的、体重增加或怀孕的结果、皮下脂肪沉积、特别是有大量脂肪囤积，是可见于皮肤表面特征为凹凸不平的“橘皮(orangepeel)”。因此一种治疗皮下脂肪团的可能方法是将皮肤脂肪层和皮下脂肪层塑形，亦即是通过抑制脂肪细胞分化来减少过多的脂肪囤积、通过增加脂肪细胞中的脂肪溶解和诱导脂肪细胞中的细胞凋亡以及促进脂肪组织内在环境稳定来分解现有的脂肪堆积。

许多组成物已被描述作为用于此目的的制剂，特别是呈乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的局部调配物。在大多数情况下，活性成分特别是天然物质或植物萃取物的组合物，该植物萃取物例如下列者。

˙常春藤(ivy)、银杏(gingko)和木贼草(horsetail)萃取物的组合物。

˙生咖啡(green coffee)、可可(cocoa)、海藻(seaweed)(Fucus vesiculosus和Odontella aurita)，亦可作为饮料。

˙莲(lotus)萃取物和卡尼丁(carnitine)的组合物(拜尔斯道夫公司(Beiersdorf)，德国汉堡)。

˙可可多酚(cocoa polyphenols)、雪莲果(yacon)叶萃取物(黎可诗(Nuxe)，法国巴黎)。

˙含有黄角罂粟(horned-poppy)的萃取物的巴西含羞草(Brazilian mimosa)(Nuxe，巴黎)。

在许多情况下，治疗(根据供货商的说明)必须通过例如包覆、按摩或甚至骑乘来支持。临床观察中只有极少数情况下被描述，例如来自Nuxe(巴黎)的10种精油(蜡菊(strawflower)、杉木(cedar)、葡萄柚(grapefruit)等)的组合物。临床研究进行如下，31名女性在皮肤监督下，每天施用两次并持续56天，在参加者中观察到减缩的腹部带(abdominal belt)，且33％的参加者的臀围平均降低达1.5公分(Nuxe，巴黎)。然而，由于皮下脂肪团特别是影响大腿，因此它会关注在该大腿围的变化的测量。在18名女性的大腿围的双盲研究中(9经治疗/9安慰剂)，9名女性使用局部施用呈乳膏剂的2.5％的甘草次酸(在市场上为Minus乳膏剂)，虽然在大腿的浅表脂肪层的厚度有稍微减小，但是该大腿围几乎无法降低(Armanini D.et al.,Steroids2005,70,538-542)。

一般而言，迄今可用的且经测试的所有组成物已经被描述为在关于其抗皮下脂肪团作用的测试是不充分的(Stiftung Warentest,Issue 5,2009)，在大多数情况下可能归因于所使用的天然物质的低生化活性(至少在可以使用且无风险的一剂量下)，再加上通过皮肤屏障的活性成分渗透不足，特别是通过角质层(stratum corneum)。

虽然利用皮肤测试的活性来推进其它组成物，但是因为预期的副作用所以他们并不安全。例如，购自Erlacos(埃尔兰根公司(Erlangen))的(Q-)，是由植物固醇(胆固醇衍生物)和ER1446(17β-O-乙酰基-4-羟基-雄固烯-3-酮)的所谓的双复合物组成，一种酯化的睪固酮衍生物，它具有合成代谢的性质也有雄性素的性质，它可以有效的用于女性的皮下脂肪团的治疗，但是因为预期的雄性素副作用，所以显得并不可取。

例如，WO 2010/121814(L.Weber and T.Wilckens)描述一种11βHSD1抑制剂(例如18β-甘草次酸)的用途、以及一种矿物质肾上腺皮质激素受体的抑制剂(例如Z-没药甾酮)，作为用于各种疾病(例如肿瘤，但也可用于皮下脂肪团)的治疗的医药组合物。然而，在该专利申请案中，所请求的组合物的医药调配物没有以任何实例，或是作为片剂、注射剂、栓剂或作为局部调配物来实现。同样，没有指示可用的剂量。从毒理学研究已知呈甘草甜素(glycyrrhizine)形式的18β-甘草次酸可安全地口服投与，或通过另一种全身性途径投与至一正常人为最多仅约16毫克(mg)的每日剂量(R.A.Isbrucker,G.A.Burdock,RegulatoryToxicology and Pharmacology 2006,46,167-192)。然而，已发现此全身性最大剂量对累积在皮肤中用于皮下脂肪团和/或老化皮肤的有效治疗所必需的浓度实在太低。此外，超过30mg/天(day)的没药甾酮的全身性投与并不安全，这是因为在利用Equisterol(包括没药甾酮的制剂)的一案例中已观察到了肝炎(Grieco A.et al.,Journal of Hepatology2009,50(6),1273-1277)。

发明内容

因此，本发明的目的是提供一种容许调配物(tolerable formulations)(例如，特别是用于局部施用，诸如乳膏剂、乳液剂或凝胶剂)其尤其是经由皮肤的脂肪层的塑型，比以往更有效地许可美容治疗和/或皮肤学治疗和/或老化皮肤或皮下脂肪团外观的预防。

附图说明

图1和图2显示组合没药甾酮与甘草次酸协同地提高甘草次酸对脂肪细胞凋亡的诱导的正向效果，从而减少脂肪组织中脂肪细胞的数目。

具体实施方式

为了将用于皮下脂肪团的治疗的物质运送到它们在深层皮肤层的活性位点，首先必需要在局部施用的情况下有效地渗透浅层皮肤层(角质层、表皮、真皮)，这对于大多数的天然物质是一个不容易解决的问题，特别是由于角质层的天然屏蔽功能。因为浅层皮肤层能被渗透的特殊性，以传统且已知的美容调配物和局部调配物，例如呈典型的乳膏剂(MinusNewfields,Paris)的活性成分通常不会被运送到深层皮肤层，且仅有可达10μm的渗透深度(Elias,P.M.,Friends,D.S.,J.Cell Biol.1975,20,1-19)。

许多方法已知是专用于穿透角质层以供可能的皮下脂肪团治疗，例如使用离子导入(ionophoresis)、电化学方法、无线电波、超音波或微针孔法(microneedles)。然而，这些方法并不容易在日常使用中进行，特别是如果这些方法不是在医疗诊所进行，且因而对此并不适合，尤其对于日常应用是必要的更是不适合。另一种可能性是使用渗透增强剂，例如DMSO、丙二醇或尿素。甘草次酸和没药甾酮两者实际上皆可利用DMSO渗透至深层皮肤层，但是由于DMSO已知的副作用故经常/每日使用DMSO作为渗透增强剂是不适当的(参见negative decision of the United States Environmental Protection Agency onDMSO,16th June 2006)。不同于DMSO，作为甘草次酸或没药甾酮的渗透增强剂，单独的尿素和丙二醇并没有呈现出足够的渗透活性。

用于改善皮肤渗透的其它方法建议将活性成分配制在脂质胶囊封装(encapsulation)中，例如对于所谓的脂质体，其是以卵磷脂或其主要成分为主，磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine)(Artmann C.et al.,Arzneimittelforschung 1990,40(12):1365-1368；Blume G.,Skin Delivery Systems 2008,ed.J.W.Wiechers,AlluredPublishing Corp.USA,269-282)。已经发现使用蛋黄卵磷脂制造的脂质体具有约200nm的尺寸，故将甘草次酸胶囊封装于此脂质体是不会被运送到深层皮肤层。然而，会在浅层皮肤层达到抗发炎作用。

也适用于真皮活性成分运输原理的是所谓的传递体(transfersome)，一种脂质组分与表面活性物质的组合，例如Tween80，其产生高度弹性囊泡，例如当被配制或施用为乳膏剂时，是能够将经封装的活性成分运送到深层皮肤层(Lampen P.et al.,J.Cosmet.Sci.2003,54:119-131；Zhang Y.-T.et al.,Int.J.Pharm.2014,471:449-452；Li C.et al.,Int.J.Nanomed.2013,8:1285-1292；Badran M.et al.,Scientific WorldJournal 2012,Art.ID:134876；Cevc G.et al.,Adv.Drug Deliv.Rev.1996,18:349-378)。同样也被证明的是，即使是非常大的分子，例如蛋白质胰岛素，通过传递体的方式透过皮肤经皮地被运送到全身血流且因此造成显著全身作用，其如果是在胰岛素存在的情况下，则血液中葡萄糖浓度会降低(Cevc G.et al.,Biochim.Biophys.Acta 1998,1368:201-215)。在此发现的基础上，使用传递体作为甘草次酸和没药甾酮的组合的运输囊泡不是优选的，这是因为传递体的标的位几乎可以被限制在皮肤层用以治疗及活性成分组合物的任何全身性投药，亦即不欲意经皮施用以排除任何全身性副作用。

常用脂质体的进一步改良是所谓的含醇脂质体(ethosomes)，其原理也适用于真皮活性成分运输。含醇脂质体通常包括1％-5％的磷脂酰胆碱/卵磷脂及20％-50％的乙醇。它们良好的皮肤渗透作用特别是基于高乙醇含量的渗透促进作用(Romero E.L.et al.,Int.J.Nanomed.2013,8:3171-3181；Touitou E.et al.,J.Contr.Rel.2000,65:403-418)。然而，含醇脂质体的皮肤耐受性是非常有争议的。高乙醇含量可以增加角质层的保护脂质层的溶解化(solubilisation)，从而使皮肤经皮水分损失(Blume G.,Skin DeliverySystems 2008,ed.J.W.Wiechers,Allured Publishing Corp.USA,269-282)。因此含醇脂质体并不适合于每天使用，特别是广泛使用在大腿。此外，高乙醇含量不容易被配制成含有令人愉悦的感官特性(例如气味)的乳膏剂、乳液剂或凝胶剂。因此含醇脂质体作为用于甘草次酸和没药甾酮的组合物的运输囊泡并不是优选的。

令人惊讶地，现已发现基于来自食品添加物群、长链脂肪酸的单酯(例如油酸酯)及视需要的植物油的脂类乳化剂的囊泡适用于至少一甘草次酸和至少一没药甾酮的活性成分组合物的胶囊封装。此调配物使得是亲脂性也是亲水性的物质能被封装，甚至比含卵磷脂的脂质体具有更快的包装速度。

还令人惊讶地，具有至少一甘草次酸和至少一没药甾酮的活性成分组合物的囊泡若是基于磷脂酰胆碱(较佳为来自大豆卵磷脂或向日葵卵磷脂的磷脂酰胆碱)则适用于运输到深层皮肤层。与蛋黄卵磷脂相比，大豆卵磷脂或向日葵卵磷脂，或特别是大豆磷脂酰胆碱和向日葵磷脂酰胆碱可透过特别高含量的不饱和脂肪酸(例如二不饱和亚麻油酸)来区分。令人惊讶地，已进一步发现，包含不饱和脂肪酸和具有相转移低于35℃的磷脂酰胆碱特别适用于将活性成分组合物运输到深层皮肤层。该脂肪酸特别是亚麻油酸、α-次亚麻油酸、棕榈油酸或油酸。

此外，已发现，特别是具有磷脂酰胆碱含量≥80重量％的囊泡是透过角质层以及透过浅层皮肤层出奇有效地将活性成分组合物运输到皮下脂肪组织。

根据本发明的于囊泡中的甘草次酸与没药甾酮的组合物出奇地呈现显著改善的活性轮廓，特别是在相对于治疗和/或预防皮下脂肪团，当相较于单独使用甘草次酸或没药甾酮。这两种天然物质出奇地呈现出组合的协同增强效果。

没药甾酮抑制储存在成熟脂肪细胞中的脂质显著优于甘草次酸(参见表1)。令人惊讶地，组合没药甾酮与甘草次酸也协同地提高甘草次酸对脂肪细胞凋亡的诱导的正向效果，从而减少脂肪组织中脂肪细胞的数目(参见图1和图2)。此外，组合没药甾酮与甘草次酸出奇地增强甘草次酸对成熟脂肪细胞的脂解作用。这表示甘草次酸衍生物和没药甾酮衍生物的组合物出奇地降低成熟的脂肪含量和成熟脂肪细胞两者，且脂肪细胞本身的数目也比此两种天然物质在其单独存在时显著地更有效。

然而，根据目前现有技术此两种天然物质在水中的水溶性差，甘草次酸和没药甾酮在水性基质调配物皆对于局部施用例如乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的使用和有效性是受限的。

根据目前现有技术的现有应用(特别是甘草次酸)的另一个缺点是现有含甘草次酸的护肤产品的渗透性不足，这是由于例如它们在与皮肤特殊的屏障功能组合的水溶性差。

通过胶囊封装根据本发明的于囊泡中的甘草次酸与没药甾酮，令人惊讶地，这是很容易做到将其以证明有效浓度并入用于局部施用的水性调配物，藉此改善根据目前现有技术的水溶性差和局部渗透性不足的关键缺点。

本发明特别是提供一种局部调配物，例如乳膏剂、乳液剂或凝胶剂，其包括本发明的囊泡。

本发明是关于一种囊泡(特别是用于局部施用)，包括：

a)至少一甘草次酸或其盐或其酯；

b)至少一没药甾酮；以及

c)以下两者的一：c1)磷脂酰胆碱(较佳为来自大豆卵磷脂或向日葵卵磷脂的磷脂酰胆碱)、或

c2)来自食品添加物群中的至少一乳化剂及长链脂肪酸的至少一单酯。

本发明特别是关于一种囊泡，包括：

a)至少一甘草次酸或其盐或其酯；

b)至少一没药甾酮；以及

c)磷脂酰胆碱(较佳为来自大豆卵磷脂或向日葵卵磷脂的磷脂酰胆碱)。

本发明进一步特别是关于一种囊泡，包括：

a)至少一甘草次酸或其盐或其酯；

b)至少一没药甾酮；以及

c)来自食品添加物群中的至少一乳化剂及长链脂肪酸的至少一单酯。

本发明进一步特别是关于一种囊泡，包括：

a)至少一甘草次酸或其盐；

b)至少一没药甾酮；以及

本发明进一步特别是关于一种囊泡，包括：

a)至少一甘草次酸或其盐；

b)至少一没药甾酮；以及

本发明进一步较佳是关于一种囊泡，其进一步包括植物油(蔬菜油)，其中该植物油较佳例如是可食用植物的种子油，例如葵花油(Helianthus annuus)、菜油(Brassicanapus)或大豆油(Glycine max)。

至少一甘草次酸或其盐或其酯较佳是选自：18α-甘草次酸和/或18β-甘草次酸或一种或多种其盐或其酯。

进一步较佳地，至少一没药甾酮是选自(Z)-没药甾酮和/或(E)-没药甾酮。

进一步较佳地，至少一甘草次酸或其盐或其酯是以下述形式使用：光果甘草(Glycyrrhiza glabra)的形式或来自光果甘草的萃取物的形式和/或纯化学物质的形式和/或其盐或其酯的形式。

进一步较佳地，至少一没药甾酮是以下述形式使用：古古儿脂(guggul lipid)的形式或古古儿脂的萃取物的形式和/或纯化学物质的形式。

本发明的囊泡较佳是单层。

进一步较佳地，本发明的囊泡的磷脂酰胆碱来源为大豆卵磷脂或向日葵卵磷脂。

此外，磷脂酰胆碱较佳包含两种不饱和脂肪酸，例如亚麻油酸、油酸或α-次亚麻油酸。

此外，囊泡较佳包括至少80重量％的磷脂酰胆碱。

特别较佳地，本发明的囊泡具有20nm-200nm的粒径，较佳为50nm-100nm的粒径。

此外，本发明的囊泡特别较佳具有少于0.25的多分散性指数。

在本发明的囊泡被配制成乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的前，它们较佳是透过PC过滤膜挤压(较佳为具有不大于200nm的孔径，特别较佳为不大于100nm的孔径)或经由本领域中具有通常知识者已知的另一种标准方法来处理，用于对应脂质囊泡的尺寸限制，例如使用膜或过滤器(较佳为具有不大于200nm的孔径，特别较佳为不大于100nm的孔径)来透析或凝胶层析法(例如利用Sephadex G75)。

另外，本发明的囊泡也可仅包括甘草次酸(或其盐或其酯)或没药甾酮。然而，在这种情况下，要再被加入到最终调配物的包括甘草次酸(或其盐或其酯)的囊泡和包括没药甾酮的囊泡两者以较佳为2:1至1:2(尤其是1:1)的比率在混合物的形式。

根据一个实施例，本发明是关于一种组成物，包括：

A)囊泡，包括：

a)至少一甘草次酸或其盐或其酯；以及

c)以下两者的一：c1)磷脂酰胆碱、或

c2)来自食品添加物群中的至少一乳化剂及长链脂肪酸的至少一单酯；以及

B)囊泡，包括：

b)至少一没药甾酮；以及

d)以下两者的一：d1)磷脂酰胆碱、或

d2)来自食品添加物群中的至少一乳化剂及长链脂肪酸的至少一单酯。

特别较佳地，本发明是关于一种囊泡，包括：

每10重量份的磷脂酰胆碱，较佳来自大豆卵磷脂或向日葵卵磷脂：

0.1重量份-0.5重量份的甘草次酸或其盐或其酯(特别是18β-甘草次酸)；

0.1重量份-0.5重量份的没药甾酮(特别是(Z)-没药甾酮)；以及

0.5重量份-3重量份的至少一界面活性剂(特别是胆固醇、胆酸钠和/或脱氧胆酸钠)。

进一步特别较佳地，本发明是关于一种囊泡，包括：

15％-20％(v/v)的可食用植物的种子油(例如向日葵种子油(Helianthusannuus))；

2.5％-10％(w/v)的来自食品添加物群的乳化剂(例如375(柠檬酸甘油酯/乳酸酯/亚麻油酸酯/油酸酯；Cremer Oleo GmbH,Hamburg))；

2.5％-5％(w/v)的长链脂肪酸的至少一单酯(例如聚甘油-2油酸酯)；

10％-20％(v/v)的乙醇；

0.1％-10％(w/v)的18β-甘草次酸；以及

0.1％-10％(w/v)的(Z)-没药甾酮；

补足至100％的水(较佳是重蒸馏水(aqua bidest))。

进一步特别较佳地，本发明是关于一种囊泡，包括：

7％-17.5％(w/v)的来自食品添加物群的乳化剂(例如375(柠檬酸甘油酯/乳酸酯/亚麻油酸酯/油酸酯；Cremer Oleo GmbH,Hamburg))；

3％-7.5％(w/v)的长链脂肪酸的至少一单酯(例如油酸乙酯)；

10％-20％(v/v)的乙醇；

0.1％-10％(w/v)的18β-甘草次酸；以及

0.1％-10％(w/v)的(Z)-没药甾酮；

补足至100％的水(较佳是重蒸馏水)。

根据一较佳的实施例，本发明是关于一种囊泡，其基于来自食品添加物群的脂类乳化剂、长链脂肪酸的单酯及植物油及包括18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮。另外，该囊泡亦可仅包括18β-甘草次酸或(Z)-没药甾酮。然而，在这种情况下，要再被加入到最终调配物的包括18β-甘草次酸的囊泡和包括(Z)-没药甾酮的囊泡两者以较佳为2:1至1:2(尤其是1:1)的比率在混合物的形式。

进一步特别较佳地，本发明是关于一种囊泡，包括：

0％-5％(w/w)的甘草次酸或其盐或其酯；

0％-5％(w/w)的没药甾酮或其盐或其酯；

5％-25％(w/w)的无水乙醇；

1％-30％(w/w)的油酸乙酯；

0％-30％(w/w)的植物油(例如葵花油、大豆油、菜油)；

0.5％-5％(w/w)的单油酸二甘油酯；

0％-5％(w/w)的Imwitor 375(柠檬酸甘油酯/乳酸酯/亚麻油酸酯/油酸酯)；

补足至100％的纯化水；

其中该囊泡包括至少一甘草次酸或其盐或其酯或没药甾酮或其盐或其酯。

根据进一步较佳的实施例，本发明是关于一种囊泡，其基于来自食品添加物群的脂类乳化剂及长链脂肪酸的单酯及包括18β-甘草次酸和(Z)-没药甾酮的活性成分组合物。另外，该囊泡亦可仅包括18β-甘草次酸或(Z)-没药甾酮。然而，在这种情况下，要再被加入到最终调配物的包括18β-甘草次酸的囊泡和包括(Z)-没药甾酮的囊泡两者以较佳为2:1至1:2(尤其是1:1)的比率在混合物的形式。

进一步特别较佳地，本发明是关于一种囊泡，包括：

0％-5％(w/w)的甘草次酸或其盐或其酯；

0％-5％(w/w)的没药甾酮或其盐或其酯；

5％-25％(w/w)的无水乙醇；

1％-10％(w/w)的油酸乙酯；

5％-25％(w/w)的Imwitor 375(柠檬酸甘油酯/乳酸酯/亚麻油酸酯/油酸酯)；

补足至100％的纯化水；

根据进一步较佳的实施例，本发明是关于一种囊泡，其基于合成的棕榈酸鲸蜡酯、植物油(例如荷荷巴油、向日葵种子油、大豆油、菜油)、植物多醣共聚物作为表面活性基质稳定剂或其衍生物(例如菊糖或SP1、微晶纤维素或Avicel PH105等)及硬脂酸基底乳化剂(例如Care PS、Care PSC-3、Care 450等)及包括18β-甘草次酸和(Z)-没药甾酮的活性成分组合物。另外，该囊泡亦可仅包括18β-甘草次酸或(Z)-没药甾酮。然而，在这种情况下，要再被加入到最终调配物的包括18β-甘草次酸的囊泡和包括(Z)-没药甾酮的囊泡两者以较佳为2:1至1:2(尤其是1:1)的比率在混合物的形式。

进一步特别较佳地，本发明是关于一种囊泡，包括：

0％-5％(w/w)的甘草次酸或其盐或其酯；

0％-5％(w/w)的没药甾酮或其盐或其酯；

10％-15％(w/w)的荷荷巴油；

15％-25％(w/w)的棕榈酸鲸蜡酯；

0.2％-1.0％(w/w)的SP1；

1％-3％(w/w)的Care PS；

补足至100％的纯化水；

本发明的囊泡较佳配制成乳膏剂、乳液剂或凝胶剂。

进一步较佳地，本发明的乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的特征在于其包括至少一甘草次酸或其盐或其酯和至少一没药甾酮的活性成分组合物，以该乳膏剂、该乳液剂或该凝胶剂的总重量为基准计，其各自以0.01％-10％(w/w)的含量存在，较佳为0.1％-5％(w/w)。

本发明进一步关于本发明的囊泡在制备用于治疗和/或预防皮下脂肪团的乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的用途。

本发明进一步关于本发明的囊泡在制备用于治疗和/或预防老化皮肤外观的乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的用途。

根据本发明的囊泡的用途，该囊泡包括呈乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的至少一甘草次酸和至少一没药甾酮，其可出奇有效地将活性成分组合物囊泡运输到深层皮下皮肤层，令人惊讶地，藉此实现对成熟脂肪细胞和皮下脂肪堆积的成熟脂肪细胞直接且可量化的作用。此外，令人惊讶地，有可能通过本发明的手段以一持久方式来减少皮肤和皮下脂肪组织中的脂肪细胞的数量，作为抑制脂肪形成和成熟脂肪细胞中细胞凋亡的诱导的结果，其促使有关皮肤外观和弹性的改善，且因此特别关注在皮下脂肪团的治疗和/或预防(橘皮组织(orange peel)的紧缩)。根据本发明的该乳膏剂、该乳液剂或该凝胶剂的用途进一步地改善水分平衡和减少皮肤的粗糙。

本发明的囊泡较佳为脂类运输囊泡。

在本发明的范围内，用语囊泡尤指球形或圆形至椭圆形的脂质(两亲(amphiphilic)的脂质)排列和/或在水性介质中的乳化剂。根据本发明的囊泡可以特别吸收在它们的膜壳或在它们的内腔中的亲脂性、亲水性和/或两亲的化合物。该膜壳可由脂质双层或脂质单层组成，且可包封水性内腔或由植物油组成的内腔或两者。

在本发明的范围内，来自食品添加物群的乳化剂特别是一种或多种多羟基化合物(例如甘油、戊糖、己糖或多醣)与在每种情况下一种或多种不饱和脂肪酸(例如油酸、亚麻油酸或α-次亚麻油酸)和视需要地一种或多种短链(C_2-6)的有机酸(特别是具有2个至6个碳原子的单酸、二酸或三酸且视需要地经一个或多个OH基团或乙酰基取代，例如，乙酸、乳酸、柠檬酸、酒石酸或二乙酰酒石酸)的酯类或脂混合物。实例为单甘油酯或二甘油酯或糖脂肪酸酯或该两种的相应混合物，例如糖甘油酯。糖甘油酯的实例为蔗糖甘油酯以及与上述酯类的混合物。特别较佳的是酯类和包含二酰基甘油酯的脂混合物。

来自食品添加物群的较佳的乳化剂为食品添加物E471至E477(E471、E472a、E472b、E472c、E472d、E472e、E472f、E473、E474、E475、E476和E477)，例如已揭露在2011年11月11日欧洲专利的第1130/2011号或列表在其援助信息服务机构(in the Liste des aidinfodienstes e.V.)(如2014年3月)。

根据本发明，长链脂肪酸较佳是具有12个至24个碳原子和0个至6个双键的无分枝脂肪酸。长链脂肪酸的单酯较佳是具有单羟基化合物或多羟基化合物(例如，乙醇、甘油、戊糖、己糖或多醣)的长链脂肪酸的酯。

长链脂肪酸的单酯的实例为蔗糖油酸酯、海藻糖异硬脂酸酯、甘油单油酸酯、二甘油油酸酯、聚甘油-2油酸酯、聚甘油-4油酸酯、丙二醇油酸酯、油酸乙酯或亚麻油酸、α-次亚麻油酸、二十碳五烯酸或硬脂酸的相应的酯。特别较佳的是不饱和长链脂肪酸(例如油酸、亚麻油酸、α-次亚麻油酸或二十碳五烯酸)的乙酯及聚甘油酯。长链脂肪酸的单酯较佳具有膜稳定作用。

在本发明的范围内，用语卵磷脂尤其是表示磷酸甘油酯的混合物，从天然植物来源获得，该磷酸甘油酯例如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝胺酸、磷脂酸肌醇、神经鞘胆碱(sphingocholines)和醣脂质，其中磷酸甘油酯和天然物的百分组成以及酯化脂肪酸的百分组成两者会依该植物来源而变化。

在本发明的范围内，磷脂酰胆碱特别是表示仅由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱(其可以来自天然植物来源，较佳是大豆油或葵花油或卵磷脂或亦可合成制备)组成的磷脂酰胆碱。当来自植物来源的磷脂酰胆碱一般是具有不同脂肪酸酯化反应(依植物来源而变化的酯化脂肪酸的性质和比例组成)的磷脂酰胆碱的混合物，合成的磷脂酰胆碱可包含两种脂肪酸(较佳是两种不饱和脂肪酸，例如油酸、亚麻油酸或α-次亚麻油酸)的定义的组合。

根据本发明，合成的棕榈酸鲸蜡酯表示具有饱和C₁₂-C₂₄脂肪酸醇(具有平均分子量为约500g/mol)的天然饱及单-或二-或三-不饱和C₁₂-C₂₄脂肪酸的酯类的混合物，包括(例如)饱和棕榈酸(C₁₆)及饱和鲸蜡醇(₁₆)的同名酯类。

根据本发明，作为表面活性基质稳定剂的植物多醣共聚物为多醣衍生物，例如聚果糖衍生物或微晶纤维素衍生物。聚果糖衍生物的实例为菊糖-高达100果糖分子和一末端葡萄糖分子的果糖聚合物的混合物-以及菊糖的衍生物，例如SP1。微晶纤维素(也就是部分聚解的α-纤维素)的实例为Avicel PH纤维素。

根据本发明，硬脂酸基底乳化剂为具有聚甘油(较佳为聚甘油-3)和/或甲基葡萄糖的硬脂酸的单-或二-酯类。该硬脂酸基底乳化剂的实例为甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯(Care PS)、聚甘油-3二柠檬酸酯硬脂酸酯(Care PSC-3)及聚甘油-3甲基葡萄糖二硬脂酸酯(Care 450)。

古古儿(Guggul)(别名:loban、普渡拉克树脂(bdellium resin)、普渡拉克(bedellium)、普渡拉克(bdellium)、胶印度香胶树脂(gum guggulu)、印度没药(Indianmyrrh))为香脂树印度没药(Commiphora mukul)的树脂。

古古儿脂脂的主要成分为没药甾酮，其以(E)及(Z)构型存在。其迄今仍未被观察到在两种形式的间有显著不同的生物活性的差异。

光果甘草(Glycyrrhiza glabra)是一种来自蝶形花植物亚科(Faboideae)的植物。光果甘草包含甘草甜素(glycyrrhizine)、甘草酸(glycyrrhizinic acid)的钾盐和钙盐的混合物。通过裂解甘草酸的二葡萄糖醛酸苷(diglucuronide)，从甘草甜素形成有甘草次酸(glycyrrhetinic acids，GA)，18β-甘草次酸及(以更小比例)18α-甘草次酸的混合物。

甘草次酸的较佳的盐类为碱金属或碱土金属盐类，例如钠、钾、锂、钙或镁盐、铵盐或有机碱的盐类，例如甲基胺、二甲基胺、三乙基胺、六氢吡啶、伸乙二胺、离胺酸、氢氧化胆碱、葡甲胺(meglumin)、吗福林(morpholine)或精胺酸。

甘草次酸的较佳的酯类为具有1个至18个碳原子的饱和、直链或分支链的醇类的酯类。特别较佳的酯类为甲基酯类、甘油酯类及硬脂基酯类。

本发明的囊泡较佳包括界面活性剂，其可特别用于修饰该囊泡的性质，例如，举例而言胆固醇、胆酸钠或脱氧胆酸钠。

根据本发明的较佳的实施例，根据本发明的组成物(例如以乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的形式)可包括赋形剂例如鹿角菜、1,2-己二醇、丁二醇二辛酸酯、丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷、牛油树油脂(shea butter)、丙烯酸酯/C₁₀-C₃₀烷基丙烯酸酯交联聚合物、C₁₂-C₁₅苯甲酸烷酯、辛酸三甘油酯、辛酰基甘油/癸二酸、Carbomer 140、Care PS、卡波姆(Carbopol)981、羧甲基纤维素、鲸蜡硬脂醇、棕榈酸鲸蜡酯、鲸蜡醇、十六烷基硬脂醇、柠檬酸、癸基油酸酯、己二酸二丁酯、二乙基氨基羟基苯甲酰苯甲酸己酯、油酸二庚酯、二甲聚硅氧烷(dimethicone)、乙二胺四乙基钠(sodium EDTA)及乙二胺四乙基二钠(disodiumEDTA)、、乙基己基甘油、月桂酸乙基己酯、水杨酸乙基己酯、乙基己基硬脂酸酯、辛酸乙酯、甘油、单硬脂酸甘油酯、甘油硬脂酸酯柠檬酯、尿素、氢化可可-甘油酯、SP1、棕榈酸异丙酯、月桂酸异辛酯、荷荷巴油、山梨酸钾、Keltrol CG-SFT、柠檬烯、芳樟醇(linanool)、Macrogol 20单硬脂酸甘油酯、硫酸镁七水合物、甘露醇、羟苯甲酸甲酯、对羟苯甲酸甲酯、甲基丙二醇、Miglyol 812、氯化钠、依地酸钠(sodiumedetate)、玻糖醛酸钠(sodium hyaluronate)、氢氧化钠、辛基十二烷醇、泛醇(panthenol)、黏性石蜡、香料、戊二醇(pentylene glycol)(钠菱沸石(Hydrolite))、Pionier 1033、聚氧乙烯月桂酯(PEG-6L)、苯氧乙醇、苯基苯并咪唑磺酸、Phospholipon、丙二醇、羟基苯甲酸丙酯、聚丙烯酸、聚乙烯吡咯烷酮、硬脂酰谷氨酸钠、SLM 2026、硬脂醇、鲨烷、蔗糖硬脂酸酯、三甘油二异硬脂酸酯、伸乙二胺三钠、蜂蜡、卡波姆钠(sodiumcarbomer)、乙醇、含水的乳化软膏(unguentum emulsificans aquosum)、白凡士林(vasilinum album)、维生素E乙酸酯、水(重蒸馏水)、黄原胶或技术人员熟知其它适合的赋形剂。

本发明的囊泡可经由对乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的熟知方法进行处理。

特别较佳是根据本发明给出具有高流动性和形状弹性相对较小、单层囊泡。这些囊泡特别较佳具有20nm-200nm(尤其是50nm-100nm)的粒径、小于0.25的多分散性指数(两者均经由测量动态光散射(DLS)例如使用Zetasizer Nano ZS,Malvern Instruments,Germany所测得)及具有对天然物质的高包合率(inclusion rate)，因为该囊泡出奇呈现对渗透人类皮肤极有利的能力，且同时对皮肤具有可忽略不计的毒性和刺激性，以及出奇呈现以乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的调配物的高粒子稳定性。

根据本发明，符合上述要求的粒径、稳定性、皮肤渗透和副作用分布(例如皮肤刺激性、全身性副作用的风险)，特别是含有大豆或向日葵卵磷脂或大豆或向日葵磷脂酰胆碱(尤其至少80重量％的磷脂酰胆碱的含量及大量不饱和脂肪酸)的弹性囊泡或基于来自食品添加物群的脂类乳化剂、长链脂肪酸的单酯例如油酸酯和视需要地植物油的弹性囊泡。

本发明的另一方面是关于一种面膜(例如抗老化面膜)，其包括至少一甘草次酸或其盐或其酯及至少一没药甾酮。本发明的面膜较佳包括本发明具有至少一甘草次酸或其盐或其酯及至少一没药甾酮的囊泡。

本发明的面膜较佳的特征在于其包括至少一甘草次酸或其盐或其酯及至少一没药甾酮的一活性成分组合物，以该面膜的总重量为基准计，至少一甘草次酸或其盐或其酯及至少一没药甾酮各自以0.01％-5％(w/w)，较佳为0.1％-2.5％(w/w)的含量存在。

本发明进一步关于一种根据本发明的囊泡在制备用于治疗和/或预防老化皮肤或受压皮肤(stressed skin)的面膜的用途。

根据本发明可被治疗的皮下脂肪或结缔组织的进一步较佳的变化为例如脂性水肿、脂肪瘤、腹壁的脂肪瘤病(lipomatosis)、皮肤脂膜炎畸形(dermatopanniculosisdeformans)、假性男子女乳症(pseudogynecomastia)、HIV病患中的水牛肩突(buffalohump)及非特异性皮下脂肪堆积。此外，非经由疾病引起的脂肪垫，例如脸部区域及颈部区域的脂肪垫(例如泪囊、鼻唇沟(nasolabial fold)、两颊松弛(flabby cheeks)、双下巴等等)可以根据本发明恢复原状或可以减少。本发明进一步关于一种本发明的囊泡或至少一甘草次酸(或其盐或其酯)及至少一没药甾酮的组合物用于在抽脂后的后处理的用途。

本发明的另一方面是关于一种硬膏剂或贴片，其包括至少一甘草次酸或其盐或其酯及至少一没药甾酮。根据本发明的硬膏剂或贴片较佳包括本发明具有至少一甘草次酸及至少一没药甾酮的囊泡。

另外，根据本发明的硬膏剂或贴片可包括本发明的囊泡，其各自仅包括甘草次酸(或其盐或其酯)或没药甾酮。然而，在这种情况下，要再被加入到硬膏剂或贴片的包括甘草次酸(或其盐或其酯)的囊泡和包括没药甾酮的囊泡两者以较佳为2:1至1:2(尤其是1:1)的比率在混合物的形式。

该硬膏剂或贴片可包括例如(i)顶层或覆盖层、(ii)视需要可移除的保护层以及(iii)一层或多层含有活性成分的层或储药层(reservoirs)各自布置在该顶层和该视需要可移除的保护层的间。

描述「含有活性成分的层或储药层」表示其包括至少一甘草次酸或其盐或其酯和/或至少一没药甾酮的层或储药层。含有活性成分的层或储药层较佳包括根据本发明具有至少一甘草次酸及至少一没药甾酮的囊泡、或根据本发明各自包括仅甘草次酸(或其盐或其酯)或没药甾酮的囊泡。含有活性成分的层或储药层较佳包括本发明的乳膏剂、凝胶剂或乳液剂的调配物。

硬膏剂或贴片可进一步具有在皮肤侧的黏着层或经该覆盖层承载的黏着层。在本发明的硬膏剂或贴片中，黏着层可以是自黏性聚合物基质层。

在本发明的特别的实施例中，黏着层具有一开口或是在至少一区域中为非黏着性形式。黏着层较佳不延伸到含有活性成分的层。

本发明的硬膏剂或贴片可包括0.1mg至1000mg，尤其是1mg至500mg，较佳是1mg至250mg的甘草次酸及没药甾酮的一。

根据本发明具有一层或多层有活性成分的层或一层或多层储药层的硬膏剂或贴片可以是例如基质系统或储药系统。

在本发明的硬膏剂或贴片中，至少一甘草次酸和/或至少一没药甾酮可以一层或多层含有活性成分的层或一层或多层含有活性成分的储药层存在，较佳以根据本发明的乳膏剂、凝胶剂或乳液剂的调配物的形式。

黏着层可由以下组成或可包括：任何皮肤兼容的黏着剂，其经认可供皮肤使用。该黏着性系统(例如基于形成水凝胶剂、聚异丁烯、泥罨剂(cataplasms)、聚丙烯酸或聚丙烯酸酯的聚合物)对所属技术领域中具有通常知识者是已知的。黏着层较佳是防水的，为了防止在出汗时与硬膏剂的滑动。

在本发明的硬膏剂或贴片中的黏着层可进一步包括至少一组分或由选自以下群组组成的组分：天然橡胶、合成的橡胶、聚丙烯酸酯、聚乙酸乙烯酯、聚异丁烯、硅酮，尤其是聚二甲基硅氧烷及水凝胶剂，尤其高分子量聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇及寡聚聚氧化乙烯或其混合物。

本发明的硬膏剂或贴片中的黏着层尤其可包括或由聚丙烯酸酯组成。

在本发明的硬膏剂或贴片中，该聚丙烯酸酯可包括一种或多种单体单元，其为衍生自选自以下群组的一种或多种单体：正丁基丙烯酸酯、异丁基丙烯酸酯、丙基丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯、2-乙基己基丙烯酸酯、2-羟基乙基丙烯酸酯及2-羟基乙基甲基丙烯酸酯。

本发明的硬膏剂或贴片中的合成橡胶可以是苯乙烯-丁二烯-苯乙烯嵌段共聚物或苯乙烯-丁二烯嵌段共聚物。

本发明的硬膏剂或贴片中的含有活性成分的层和/或黏着层可进一步包括交联剂。

本发明的硬膏剂或贴片中的含有活性成分的层可进一步为材料的基质，该材料可用来开始溶解或通过皮肤水分被溶解。

本发明的硬膏剂或贴片可进一步包括水凝胶剂中的至少一甘草次酸和/或至少一没药甾酮。此外，本发明的硬膏剂或贴片可包括本发明呈作为乳膏剂、凝胶剂或乳液剂的调配物的形式的至少一甘草次酸和/或至少一没药甾酮。

本发明的硬膏剂或贴片的特征在于羟基甲基纤维素、羟基丙基纤维素、卡波姆或聚乙烯醇作为水凝胶剂。

本发明的硬膏剂或贴片可进一步包括增稠剂或膨胀剂，较佳为羟基丙基纤维素，特别是Klucel。

本发明的硬膏剂或贴片可进一步包括一种或多种渗透促进剂。因此，本发明的硬膏剂或贴片可包括来自以下群组的至少一渗透促进剂：乙醇、异丙醇、辛苯酚、聚乙二醇(PEG)，尤其是PEG400、戊二醇、丙二醇、聚乙二醇辛基苯基醚、油酸、亚麻油酸、次亚麻油酸、荷荷巴油、大豆油、芦荟萃取物、十二醇、尿素、Labrafil、Labrasol、脂肪酸酯类，尤其是肉荳蔻酸异丙酯、单月桂酸酯，较佳为月桂酸甲酯、单月桂酸丙二醇酯、单月桂酸甘油酯及单月桂酸聚乙二醇酯、辛基十二醇乳酸酯、甘油单油酸酯及乙二醇单油酸酯、还氧二元醇(Transcutol)、生育酚、生育酚乙酸酯、泛醇、N-癸基二甲亚砜、甘油三乙酸酯及N-甲基吡咯烷酮。

本发明的硬膏剂或贴片可进一步包括一种或多种防腐剂，尤其是来自以下群组：醇类、季胺类、有机酸类、对羟苯甲酸酯(parabens)及苯酚。

本发明的硬膏剂或贴片可进一步包括一种或多种过饱和稳定剂，例如聚乙烯吡咯烷酮。

本发明的硬膏剂或贴片可进一步的特征在于由选自以下群组的材料组成或包括选自以下群组的材料：聚烯烃、聚酯、聚偏二氯乙烯、聚胺甲酸酯(polyurethane)、棉、黏胶(viscose)或羊毛。该覆盖膜较佳由聚酯组成或包括聚酯。

该顶层可进一步由以下组成或包括以下：例如涂料纸、聚硅酮、聚乙烯、聚丙烯、乙烯和乙酸乙烯酯的共聚物、聚酯、聚胺甲酸酯、聚酰胺、聚丙烯酸酯及聚异丁烯。顶层可以闭合膜或打孔膜、梭织物(woven fabric)或打孔非织物的形式使用。

根据本发明的硬膏剂或贴片的特征可在于具有0.01mm至1.5mm，且尤其是0.03mm至1.0mm的厚度的覆盖膜。

本发明的硬膏剂可具有1cm²至50cm²的尺寸，且可以是矩形、正方形、圆形、椭圆形或梯形。该硬膏剂较佳为具有约1cm-5cm的边缘长度的正方形或具有1cm-10cm的边缘长度的矩形。

本发明的硬膏剂或贴片可进一步具有2cm²至100cm²，较佳为5cm²至50cm²，尤其是10cm²至40cm²，例如约20cm²的表面积。

最后，根据本发明的硬膏剂或贴片可以上覆胶带(overtape)来提供。

该顶层、该黏着层和/或该基质层可包括芳香族油类或香料。这些层可进一步渗透空气和水分以改善穿着舒适。

根据较佳实施例，该至少一含有活性成分的层包括本发明的囊泡或囊泡混合物。

根据进一步较佳的实施例，本发明是关于一种微胶粒(micelles)，其包括至少一甘草次酸或其盐或其酯及至少一没药甾酮。另外，本发明的微胶粒亦可仅包括甘草次酸(或其盐或其酯)或没药甾酮。然而，在这种情况下，要再被加入到最终调配物的包括甘草次酸(或其盐或其酯)的微胶粒和包括没药甾酮的微胶粒两者以较佳为2:1至1:2(尤其是1:1)的比率在混合物的形式。该微胶粒的实例为具有亲水性片段及疏水性片段的嵌段共聚物的聚合物微胶粒。

在本发明中所述的「具有亲水性片段及疏水性片段的嵌段共聚物」较佳意指一共聚物，其可以水性介质较佳以核心(其包括主要的疏水性片段)-外壳(其包括主要的亲水性片段)类型的聚合物微胶粒的形式存在。形成该嵌段共聚物的「亲水性片段」包括聚(乙烯氧化物)、聚(苹果酸)、聚(醣)、聚(丙烯酸)、聚(乙烯醇)及聚(乙烯基吡咯烷酮)片段。「疏水性片段」包括聚胺基酸的片段。「疏水性片段」尤其包括聚-(β-苯甲基天冬胺酸酯)、聚-(γ-苯甲基麸酰胺酸酯)、聚-(β-烷基天冬胺酸酯)、聚(乳酸交酯)、聚-(ε-己内酯)、聚-(δ-戊内酯)、聚-(γ-丁内酯)及聚-(α-胺基酸)的片段以及其两种或更多种类型。

根据本发明，本发明的微胶粒(如本发明的囊泡或与其一起的囊泡)可被配制成乳膏剂、乳液剂、凝胶剂或面膜，或可用于本发明的硬膏剂或贴片。

实施例

细胞培养

在37℃，95％湿度及5％CO₂下，将3T3-L1小鼠纤维母细胞培养在包括10％胎牛血清(fetal calf serum；FCS)及2mM L-麸酰胺酸(L-glutamine)的良伊格尔氏培养液(Dulbecco.s modified Eagle.s medium(DMEM))。

如下期刊所述诱导脂肪细胞分化及成熟(Yang J.Y.et al.,Obesity 2008,16,16-22；Shugart E.C.and Umek R.M.,Cell Growth&Differentiation 1997,8,1091-1098)。如一般常规，细胞不仅利用地塞米松(dexamethasone)刺激，且更理想，亦利用皮质醇(cortisol)刺激。

将细胞接种到96孔板中，并培养至汇合(confluence)。达到细胞汇合后两天(D0＝0天)，通过添加含有10％FCS、167nM胰岛素、0.5μM IBMX和1μM地塞米松或200nM皮质醇的DMEM来诱导细胞分化持续2天(D2)。然后在含有10％FCS和167nM胰岛素的DMEM中再培养该细胞另外两天(D4)，随后在DMEM/10％FCS中再培养该细胞另外四天(D8)。最后，>20％-30％的细胞为具有累积的脂质储存的成熟脂肪细胞。

细胞内脂质含量的测定

作为脂肪形成的程度的指示剂，通过亲脂性显色试剂尼罗红(Nile red)来检测细胞的脂质含量(细胞内脂质小滴(lipid droplets))，如以下期刊所述(Yang J.Y.et al.,Obesity 2008,16,16-22；Greenspan P.,The Journal of Cell Biology 1985,100,965-973)。达到细胞汇合后，在96孔板中培养3T3-L1细胞(5,000-10,000细胞/孔)再另外两天(D0)。然后该细胞以没药甾酮和/或甘草次酸处理(单独或组合)，在脂肪形成的天数为D0-D2、D2-D4、D4-D6和D0-D6(浓度范围：1-200μM)。每两天更换或更新含有或不含有测试物质的培养液。细胞系如以下处理作为对照组：(1)纯细胞培养培养液(未分化的对照组)、(2)纯分化培养液(未处理的对照组)、以及(3)在分化培养液中的DMSO，对应于在测试批次中最高DMSO浓度(DMSO对照组)。

在第6天(D6)，通过尼罗红测定法来量化细胞内脂质累积(脂质小滴)。为此，丢弃细胞培养液且以100μl/孔的PBS(pH 7.4)洗涤细胞。然后细胞以50μl/孔的溶于PBS中的尼罗红(10μg/ml)在室温培养20分钟。使用读取器(Synergy 2plate reader)(BioTek,Winooski,USA)(激发：485nm，发射：560nm，反射：550nm)来进行脂质含量的荧光测定。尼罗红选择性地染色中性脂质，例如溶于细胞内小滴的中的三酸甘油酯(triacylglyceride)。

通过荧光显微镜分析后，如上述在细胞培养玻片(Lab-Tek^TM chamber slides)(Nunc,Langenselbold,Germany)上处理细胞，并以没药甾酮和/或甘草次酸(50μM或100μM；单独或等摩尔组合)在脂肪形成的天数为D2-D4培养细胞。然后丢弃培养液且细胞以PBS洗涤及以50μl/孔的溶于PBS中的尼罗红(10μg/ml)和DAPI(1μg/ml)在室温染色20分钟。移除染色溶液后，细胞以PBS洗涤及以溶于PBS中的4％多聚甲醛(paraformaldehyde)在室温固定30分钟。最后，细胞以PBS洗涤3次及经由荧光封固剂(Fluorescence Mounting medium)(Dako,Carpinteria,USA)将细胞封固在载玻片上。通过使用具有配备(ApoTome)的荧光显微镜(Zeiss Axio Observer.Z1)(Carl Zeiss MicroImaging,Jena,Germany)使用DAPI和GFP滤镜设置来拍摄荧光显微镜影像。

细胞活性(cell viability)分析

通过基于刃天青的荧光分析(fluorimetric Resazurin-based assay)来测量以测试化合物处理后的成熟脂肪细胞的细胞活性。有生命活力的，也就是代谢活性，细胞能够将刃天青转换成荧光衍生物试卤灵(Resorufin)(Strotmann U.J.et al.,Ecotox.Environ.Safety 1993,25,79-89)。

将3T3-L1细胞接种到96孔板(5,000细胞/孔-10,000细胞/孔)，且如上述，培养至成熟(D8)。在第8天(D8)，成熟脂肪细胞在含有没药甾酮和/或甘草次酸(1μM-250μM)的标准培养条件下培养24小时。细胞系如以下处理作为对照组：(1)纯细胞培养培养液(未分化的对照组)、(2)纯分化培养液(未处理的对照组)、(3)在分化培养液中的DMSO，对应于在测试批次中最高DMSO浓度(DMSO对照组)、以及(4)150μg/ml溶于DMEM的毛地黄皂苷(digitonin)(细胞死亡对照组)。24小时后，丢弃培养液且以100μl/孔的DMEM洗涤细胞，然后在含有50μl/孔的刃天青溶液(60μM溶于DMEM)的标准培养条件下培养2小时。最后，通过读取器(Synergy 2plate reader)(BioTek,Winooski,USA)(激发：540nm，发射：590nm，反射：550nm)侦测试卤灵荧光。

细胞凋亡分析

为了评估在成熟脂肪细胞中可能诱导细胞凋亡是由于以(Z)-没药甾酮和/或甘草次酸处理的结果，使用分析套组(Caspase-3/7assay kit(Promega,Mannheim,Germany))。

将3T3-L1细胞接种到96孔板(5,000细胞/孔-10,000细胞/孔)，且如上述，培养至成熟(D8)。在第8天(D8)，成熟脂肪细胞在含有没药甾酮和/或甘草次酸(1μM-250μM)的标准培养条件下培养24小时。细胞系如以下处理作为对照组：(1)纯细胞培养培养液(未分化的对照组)、(2)纯分化培养液(未处理的对照组)、以及(3)在分化培养液中的DMSO，对应于在测试批次中最高DMSO浓度(DMSO对照组)。24小时后，丢弃培养液且以100μl/孔的DMEM洗涤细胞，然后以150μl/孔加入溶于DMEM的试剂(Caspase-3/7reagent)(1：1，v/v)。在室温培养2小时后，通过读取器(Synergy 2plate reader)(BioTek,Winooski,USA)侦测该试剂的冷光讯号(luminescence signal)。

脂肪溶解(Lipolysis)分析

通过甘油释出含量检测法(glycerol release assay)来侦测成熟脂肪细胞的脂肪溶解是由于以没药甾酮和/或甘草次酸处理的结果。为此目的，使用游离甘油染色试剂(free glycerol staining reagent)(Cayman Chemical,Ann Arbor,USA)来量化释放到细胞培养液的甘油是由于细胞的脂肪溶解的结果。

将3T3-L1细胞接种到96孔板(5,000细胞/孔-10,000细胞/孔)，且如上述，培养至成熟(D8)。在第8天(D8)，成熟脂肪细胞在含有没药甾酮和/或甘草次酸(1μM-250μM)的标准培养条件下培养24小时。细胞系如以下处理作为对照组：(1)纯细胞培养培养液(未分化的对照组)、(2)纯分化培养液(未处理的对照组)、以及(3)在分化培养液中的DMSO，对应于在测试批次中最高DMSO浓度(DMSO对照组)。

培养的后，取各试样中的25μl细胞培养液转入至新的96孔盘的对应孔中，并以90μl游离甘油染色试剂在室温下培养15分钟。以90μl蒸馏水(aqua dest)取代上述试剂并与25μl试样作为测定基准(measurement reference)。最后，通过读取器(Synergy 2platereader)(BioTek,Winooski,USA)以在540nm的吸收为基准来测定被释放的甘油的含量。

前脂肪细胞中的脂质含量

脂质含量(亦即细胞内脂质小滴中三酸甘油酯的储存)是脂肪形成的程度的指标。我们使用尼罗红测定法来研究(Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸分别对经地塞米松-或经皮质醇-刺激脂肪形成的3T3-L1小鼠纤维母细胞的影响。由于染色试剂尼罗红(当在485nm激发及在560nm荧光检测)对中性脂质是非常有选择性的，因此它可能专一地在脂肪形成进展期间测量三酸甘油酯的细胞内累积。

在脂肪细胞第6天的分化期间内处理的期间对于(Z)-没药甾酮或18β-甘草次酸在细胞脂质累积(其是要观察的)的影响是非常重要。当(Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸被施用在整个6天分化期间时，(Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸两种化合物抑制细胞的脂质累积皆达最大程度。显微镜分析非常清楚地显示出在脂肪形成的D0-D6期间(经以1μM地塞米松刺激)的(Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸对3T3前脂肪细胞的脂质含量的影响，该3T3前脂肪细胞系以100μM的(Z)-没药甾酮及100μM的18β-甘草次酸分别处理。经刺激但未经处理的细胞作为参考，且显示出高度的脂肪储存。相较的下，细胞分别以(Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸处理的后，检测到显著较少和较小的脂质小滴。

在大多数情况下，这种效应在D0-D2天被诱导，亦即脂肪细胞分化的初始阶段。在D0-D2天期间，对应处理的3T3前脂肪细胞(分别以0μM-100μM(Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸处理)的脂质含量的降低总结在下表中。

表1

在脂肪形成的第6天(D6)，通过尼罗红测定法(激发：485nm；发射：560nm；反射：550nm)来进行细胞内脂质小滴的累积的荧光测量。经标准化的数据和脂质累积是以百分比表示，未刺激细胞使用作0％参考，且经刺激但未处理细胞使用作100％参考。

细胞在经整个6天脂肪细胞分化(D0-D6)处理后，获得约5μM的(Z)-没药甾酮及约20μM的18β-甘草次酸的细胞脂质累积的抑制的IC₅₀值。(Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸两种化合物因而抑制3T3-L1细胞在脂肪形成期间的三酸甘油酯的累积，但没药甾酮在此方面比甘草次酸稍微更有效。在18β-甘草次酸(≥50μM)的活性范围中，另外以等摩尔量检测与(Z)-没药甾酮结合使用的协同作用(synergistic action)。

细胞在中间分化期间(天数D2-D4)的处理同样也带来良好脂质累积的抑制。对于脂肪细胞分化的刺激，皮质醇(更生理性)也被用来取代传统的地塞米松作为比较，且结果没有实质性的差异被观察到。

细胞活性/成熟脂肪细胞的数目

为了探讨经以(Z)-没药甾酮和/或18β-甘草次酸处理对成熟3T3脂肪细胞的活性及由此的数目可能的影响，进行基于荧光刃天青细胞活性检测法。为此，成熟3T3脂肪细胞以1μM的地塞米松刺激，然后在含有浓度渐增的(Z)-没药甾酮或18β-甘草次酸或两种化合物的等摩尔混合物的标准培养条件下再处理24小时。最后，通过刃天青检测法测量细胞活性作为细胞数目和适应度的测量。

如图1所示，经以高达250μM的(Z)-没药甾酮处理24小时没有损害细胞活性。另一方面，250μM的18β-甘草次酸降低细胞活性，亦即在相同的处理时间降低28％的成熟脂肪细胞的数目。细胞以两种化合物((Z)-没药甾酮和18β-甘草次酸)的等摩尔混合物处理后产生显著的协同效果。250μM的该两种化合物的一种的组合降低56％的细胞活性。(Z)-没药甾酮(尽管自己不造成影响)似乎能够增强18β-甘草次酸对成熟脂肪细胞造成的细胞生长抑制作用(cytostatic effect)。

在成熟脂肪细胞中细胞凋亡的诱导

对观察到降低细胞活性的可能的原因可能是测试化合物的抗增殖作用(anti-proliferative effect)(亦即，细胞周期停滞(cell cycle arrest)的诱导)、细胞代谢活性的降低、或有活力的脂肪细胞在以下细胞凋亡的诱导后的数目的降低。

为了测试是否是18β-甘草次酸的影响(不论是单独使用或是与(Z)-没药甾酮等摩尔组合使用)，在降低细胞活性中可以基于细胞凋亡的诱导探讨对应地处理的脂肪细胞有关效应物凋亡蛋白酶(effector caspases)3/7的活化(在晚期细胞凋亡的情况)。无论脂肪细胞刺激的类型，使用地塞米松或使用皮质醇，(Z)-没药甾酮显示没有凋亡蛋白酶3/7的诱导。相较的下，相较于未处理细胞，细胞以250μM的18β-甘草次酸处理24小时带来2.5倍-3.0倍的凋亡蛋白酶3/7活性的增加。两种化合物((Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸)的等摩尔组合显示(符合活性检测法的结果)该两种化合物与凋亡蛋白酶活化的偕同效果有关。相较于未处理细胞，250μM的该两种化合物的一种的组合带来3.5倍-4.0倍的凋亡蛋白酶3/7活性的增加(第2图)。

综上所述，18β-甘草次酸通过诱导凋亡细胞死亡程序抑制成熟脂肪细胞的活性，结果特别是凋亡蛋白酶3/7被活化。虽然(Z)-没药甾酮本身在本文中是非活性的，但是它能够增强18β-甘草次酸的效果。

成熟脂肪细胞中的脂肪溶解

为了研究在成熟脂肪细胞中细胞内三酸甘油酯储药层可能的降解，亦即脂肪溶解，作为以(Z)-没药甾酮和/或18β-甘草次酸处理的结果，进行甘油释出含量检测法。三酸甘油酯的酵素降解导致甘油的产生，其是膜渗透性的且因此释放到周围培养液中。培养液中的游离甘油可以通过特定染色试剂以分光光度计来量化。相较于未处理对照组，在以两种化合物((Z)-没药甾酮及18β-甘草次酸)的等摩尔组合(每一种250μM)处理24小时的后，细胞内三酸甘油酯的降解增加约66％。

以下实施例旨在说明本发明的例示性实施例。

实施例1：含有弹性大豆-磷脂酰胆碱的脂质体包括18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的活性成分组合物

为了制备含有弹性大豆-磷脂酰胆碱的脂质体，将大豆磷脂酰胆碱(90G；类脂质(Lipoid)，Ludwigshafen)、界面活性剂例如胆固醇或胆酸钠、以及18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮以10/0.5-3/0.1-0.5/0.1-0.5(w/w/w/w)的重量比混合。较佳的调配物包括10/1/0.3/0.3(w/w/w/w)比例的90G(≥95％的大豆磷脂酰胆碱)、胆酸钠、18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮。将脂质及界面活性剂溶解于氯仿(chloroform)/MeOH(1：2v/v)并在旋转蒸发器(rotary evaporator)在40℃真空下(invacuo)浓缩至干燥。所得脂质膜以PBS(pH 7.4)再水化(rehydrated)(1h/30℃/200rpm)，其包含甘草次酸及没药甾酮对应含量，以获得10％脂质悬浮液。该悬浮液以超音波处理20分钟(on/off间隔：10秒)并透过PC过滤膜(100nm孔径)挤压。囊泡尺寸是透过动态光散射(dynamic light scattering)使用仪器(Zetasizer Nano ZS(Malvern InstrumentsGmbH,Herrenberg,Germany；在室温下5分钟))来检测且其范围在50nm-100nm。

实施例2：基于来自食品添加物群、长链脂肪酸的单酯及植物油的脂类乳化剂的囊泡包括18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的活性成分组合物

为了制备含有甘草次酸及没药甾酮的油乳化剂囊泡，将15％-20％(v/v)的向日葵种子油(Helianthus annuus)、2.5％-10％(w/v)的375(柠檬酸甘油酯/乳酸酯/亚麻油酸酯/油酸酯；Cremer Oleo GmbH,Hamburg)、2.5％-5％(w/v)的聚甘油-2油酸酯、10％-20％(v/v)的乙醇与0.1％-10％(w/v)的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的一种混合并以重蒸馏水补足至100％。较佳的调配物包括溶解于重蒸馏水中20％(v/v)的向日葵种子油、5％(w/v)的375、2.5％(w/v)的聚甘油-2油酸酯、15％(v/v)的乙醇、5％(w/v)的18β-甘草次酸及5％(w/v)的(Z)-没药甾酮。将向日葵种子油、375、聚甘油-2油酸酯、18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮在室温下伴随震荡(500rpm)溶解于乙醇中。在恒定的状况下，再缓慢及均匀地(200μl/min)加入重蒸馏水至100％(v/v)，并将整体充分地混合。最后，将分散液涡旋(vortexed)5分钟，以超音波处理5分钟(on/off间隔：10秒)及透过PC过滤膜(100nm孔径)挤压。囊泡尺寸是通过动态光散射使用仪器(Zetasizer Nano ZS(Malvern Instruments GmbH,Herrenberg,Germany；在室温下5分钟))来检测且其范围在80nm-100nm。

实施例3：基于来自食品添加物群及长链脂肪酸的单酯的脂类乳化剂的囊泡包括18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的活性成分组合物

为了制备含有甘草次酸及没药甾酮的乳化剂囊泡，将7％-17.5％(w/v)的375(柠檬酸甘油酯/乳酸酯/亚麻油酸酯/油酸酯；Cremer Oleo GmbH,Hamburg)、3％-7.5％(w/v)的油酸乙酯、10％-20％(v/v)的乙醇与0.1％-10％(w/v)的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的一种混合并以重蒸馏水补足至100％。较佳的调配物包括溶解于重蒸馏水中的10.5％(w/v)的375、4.5％(w/v)的Crodamol^TM油酸乙酯(CrodaGmbH,Nettetal Kaldenkirchen)、15％(v/v)的乙醇、5％(w/v)的18β-甘草次酸及5％(w/v)的(Z)-没药甾酮。将375、油酸乙酯、18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮在室温下伴随震荡(500rpm)溶解于乙醇中。在恒定的状况下，再缓慢及均匀地(200μl/min)加入重蒸馏水至100％(v/v)，并将整体充分地混合。最后，将分散液在200bar均质化5分钟。囊泡尺寸是通过动态光散射使用仪器(Zetasizer Nano ZS(Malvern Instruments GmbH,Herrenberg,Germany；在室温下5分钟))来检测且其范围在100nm-150nm。

实施例4：作为乳膏剂的调配物

根据本发明的乳膏剂较佳包括含有根据实施例1的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体，该囊泡是以10％(w/v)的含量并入至基底乳膏剂DAC，该基底乳膏剂DAC包括硬脂酸甘油单酯60 4g、鲸蜡醇6g、Miglyol(Miglycol)812 7.5g、白凡士林(vasilinum album)25.5g、Macrogol 20硬脂酸甘油单酯7g、丙二醇10g及重蒸馏水补足至100g。该含有根据实施例1的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体藉此因而在40℃下均匀地并入至该基底乳膏剂作为最后乳膏剂组分。

实施例5：作为乳膏剂的调配物

根据本发明的乳膏剂较佳包括含有根据实施例2的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡，该囊泡是以10％(w/v)的含量并入乳膏剂，该乳膏剂包括月桂酸异辛酯10g、十六烷基硬脂醇(cetyl stearyl alcohol)21g、甘油(85％v/v)5g、羟基苯甲酸丙酯0.05g、羟苯甲酸甲酯0.15g、0.3g的柠檬烯(limonene)、0.3g的芳樟醇(linanool)、乙醇(90％v/v)1.8mg及重蒸馏水补足至100g。该含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡藉此因而在40℃下均匀地并入至该乳膏剂作为最后乳膏剂组分。

实施例6：作为乳膏剂的调配物

根据本发明的乳膏剂较佳包括含有根据实施例3的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的乳化剂囊泡，该囊泡是以10％(w/v)的含量并入乳膏剂，该乳膏剂包括PEG-8L(polyoxyethylene laurate ester；聚氧乙烯月桂酯)15g、辛酸乙酯(ethyl octanoate)5g、C₁₂-C₁₅苯甲酸烷酯4.5g、甘油3g、二甲聚硅氧烷(dimethicone)0.5g、EDTA-二钠0.1g及重蒸馏水补足至100g。该含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的乳化剂囊泡藉此因而在40℃下均匀地并入至该乳膏剂作为最后乳膏剂组分。

实施例7：作为乳膏剂的调配物

将含有根据实施例2的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡以10％(w/v)的含量并入至乳膏剂，该乳膏剂包括1,2-己二醇0.5g、丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷4.0g、乳油木果油(Butyrospermum parkii butter)(牛油树油脂(shea butter))6.0g、C₁₂-C₁₅苯甲酸烷酯2.0g、Tego Carbomer 140 0.3g、棕榈酸鲸蜡酯1.0g、鲸蜡醇1.0g、十六烷基硬脂醇1.0g、己二酸二丁酯(dibutyl adipate)3.0g、水杨酸乙基己酯4.5g、甘油10.0g、单硬脂酸甘油酯2.5g、氢化可可甘油酯1.0g、甲基丙二醇2.0g、玻糖醛酸钠0.15g、香料、苯氧乙醇0.6g、苯基苯并咪唑磺酸2.0g、硬脂酰谷氨酸钠0.2g、氯化钠0.2g、蜂蜡1.0g、EDTA-钠/氢氧化钠2.5g、重蒸馏水补足至100g。该含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡藉此因而在40℃下均匀地并入至该乳膏剂作为最后乳膏剂组分。

实施例8：作为乳膏剂的调配物

将含有根据实施例1的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体以10％(w/v)的含量并入至层状基底(lamellar base)乳膏剂，其包括SLM 2026(类脂质AG，Steinhausen，Switzerland)25g、辛酸三甘油酯18g、Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)6g、戊二醇3.75g、甘油3g、维生素E醋酸酯1g、泛醇0.5g、Tego Carbomer 140 0.2g、氢氧化钠(20％v/v)0.15g、Keltrol CG-SFT 0.1g、重蒸馏水补足至100g。该含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体藉此因而在40℃下均匀地并入至层状基底乳膏剂作为最后乳膏剂组分。

实施例9：作为乳膏剂的调配物

将含有根据实施例1的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体以10％(w/v)的含量并入至层状基底乳膏剂，其包括SLM 2026(类脂质AG,Steinhausen,Switzerland)30g、Miglyol812 15g、戊二醇10g、Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)5g、乳油木果油(牛油树油脂)2.0g、鲨烷(squalane)1g、Phospholipon 90H 1g、维生素E醋酸酯1g、泛醇0.5g、(Symrise,Holzminden,Germany；不同花萃取物的混合物)1g、重蒸馏水补足至100g。脂肪相和水相首先各别在60℃伴随搅拌而混合。脂肪相以20,000rpm进行均质化3分钟，然后伴随搅拌将水相加入该脂肪相，且混合物以20,000rpm进行均质化5分钟。冷却后，将含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体及在40℃均匀地并入乳膏剂并调整pH至5.0-6.0。

实施例10：作为乳膏剂的调配物

将18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮以2.5g的含量各自并入层状基底乳膏剂，其包括SLM 2026(类脂质AG,Steinhausen,Switzerland)30g、Miglyol 812 15g、戊二醇10g、Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)5g、乳油木果油(牛油树油脂)2.0g、鲨烷1g、Phospholipon 90H 1g、维生素E醋酸酯1g、泛醇0.5g、(Symrise,Holzminden,Germany；不同花萃取物的混合物)1g、重蒸馏水补足至100g。SLM 2026基底乳膏剂、脂肪相和水相首先各别在60℃伴随搅拌而混合或加热。将18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮加入热的脂肪相且混合物强烈地均质化，然后在60℃伴随搅拌将脂肪相加入SLM 2026基底乳膏剂，且混合物强烈地均质化。然后在60℃伴随搅拌加入热的水相，且混合物在20,000rpm 5分钟后均质化。冷却后，将在40℃均匀地并入乳膏剂并调整pH至5.0-6.0。

实施例11：作为乳膏剂的调配物

将含有根据实施例1的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体以10％(w/v)的含量并入至乳膏剂，其包括乙基己基硬脂酸酯10g、Simmondsiachinensis oil(荷荷巴油)5g、甘油硬脂酸酯柠檬酯4g、戊二醇3g、癸基油酸酯2g、维生素E醋酸酯1g、(Symrise,Holzminden,Germany；不同花萃取物的混合物)1g、泛醇0.5g、鲸蜡硬脂醇0.5g、琥珀酸二辛酯0.5g、carbomer 0.5g、重蒸馏水补足至100g。脂肪相和水相首先各别在60℃伴随搅拌而混合。脂肪相以15,000rpm进行均质化3分钟，然后伴随搅拌将水相加入脂肪相，且混合物以20,000rpm进行均质化5分钟。冷却后，将含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体及在40℃均匀地并入乳膏剂并调整pH至5.0-6.0。

实施例12：作为乳膏剂的调配物

将18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮以2.5g的含量各自并入层状基底乳膏剂，其包括乙基己基硬脂酸酯8g、Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)4g、甘油硬脂酸酯柠檬酯4g、癸基油酸酯4g、甘油3g、戊二醇3g、蔗糖硬脂酸酯1g、维生素E醋酸酯1g、(Symrise,Holzminden,Germany；不同花萃取物的混合物)1g、泛醇0.5g、鲸蜡硬脂醇0.5g、琥珀酸二辛酯0.4g、carbomer 0.4g、丙烯酸酯/C₁₀-C₃₀烷基丙烯酸酯交联聚合物0.1g、辛酰基甘油/癸二酸0.1g、乙二胺二琥珀酸三钠(trisodiumethylenediamine)0.02g、重蒸馏水补足至100g。脂肪相和水相首先各别在60℃伴随搅拌而混合。脂肪相以15,000rpm进行均质化3分钟，然后伴随搅拌将水相加入该脂肪相，且混合物以20,000rpm进行均质化5分钟。冷却后，将在40℃均匀地并入乳膏剂并调整pH至5.0-6.0。最后，以15,000rpm再次进行均质化处理3分钟。

实施例13：乳液剂

根据本发明的乳液剂较佳包括20％(w/v)的含有根据实施例2的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡以及甘油5g、含水的乳化软膏(unguentum emulsificansaquosum)15g、羟基苯甲酸丙酯0.3g、羟苯甲酸甲酯0.7g、乙醇(90％v/v)0.9g、重蒸馏水补足至100g。含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡在40℃因而均匀地并入乳液剂作为最后组分。

实施例14：凝胶剂

对75％(w/v)的含有根据实施例2的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡加入2％丙二醇、0.5％卡波姆钠(sodium carbomer)(PNC 400)及蒸馏水补足至100％。含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡在40℃因而均匀地并入凝胶剂作为最后组分。

实施例15：凝胶剂

将15g的含有根据实施例1的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体与75克的凝胶剂基底混合，该凝胶剂基底包括5g的甘露醇、0.1g的依地酸钠、1g的丙二醇、1g的卡波姆934(Carbopol 934)及95g的水。含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体在40℃因而均匀地并入凝胶剂作为最后组分。

实施例16：凝胶剂

将18.5g的含有根据实施例1的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体与1.75g的类脂质PG 14：1,14：1、3.75g的乙醇及76g的蒸馏水进行处理以形成凝胶剂。含有18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的弹性大豆磷脂酰胆碱脂质体在40℃因而均匀地并入凝胶剂作为最后组分。

实施例17：凝胶剂

将18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮以2.5g的含量各自并入由13.5g的Phospholipon90G、1.5g的类脂质PG 14：1,14：1、3.75g的乙醇及76.25g的蒸馏水组成的磷脂质凝胶剂。为此，将Phospholipon 90G伴随加热和搅拌(60℃/100rpm)溶解于乙醇中。在60℃下使18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮与类脂质PG 14：1,14：1熔化及均匀地混合。然后将溶解的Phospholipon 90G加入并在60℃与已存在的成分制成浆糊。在冷却至45℃期间，滴加蒸馏水及缓慢进行搅拌以形成凝胶剂。然后在45℃缓慢搅拌另外5分钟的前，使凝胶剂留在45℃膨胀，以获得均质的凝胶剂。

实施例18：基于来自食品添加物群的脂类乳化剂、长链脂肪酸的单酯及植物油及包括18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的活性成分组合物的囊泡

较佳的调配物包括囊泡，其包括溶解于重蒸馏水(补足至100％)的8.5％(w/w)的大豆油、3.5％(w/w)的375、10％(w/w)的油酸乙酯、10％(w/w)的乙醇、1.5％(w/w)的单油酸二甘油酯、0.75％(w/w)的18β-甘草次酸及0.75％(w/w)的(Z)-没药甾酮。

亦较佳的囊泡包括1.5％(w/w)的含量的18β-甘草次酸或(Z)-没药甾酮的一种。

(a)含有13.5％(w/w)的向日葵种子油、3.5％(w/w)的375、5％(w/w)的油酸乙酯、10％(w/w)的乙醇、1.5％(w/w)的单油酸二甘油酯的溶解于重蒸馏水(补足至100％)的1.5％(w/w)的18β-甘草次酸。

(b)含有8.5％(w/w)的向日葵种子油、3.5％(w/w)的375、10％(w/w)的油酸乙酯、10％(w/w)的乙醇、1.5％(w/w)的单油酸二甘油酯的溶解于重蒸馏水(补足至100％)的1.5％(w/w)的(Z)-没药甾酮。

(a)和(b)两种囊泡类型较佳以1:1比率加入最终调配物。

将植物油(大豆油或葵花油)、375、油酸乙酯、单油酸二甘油酯、18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮在室温下伴随震荡(500rpm)溶解于乙醇中。在恒定的状况下，再缓慢及均匀地(200μl/min)加入重蒸馏水至100％(v/v)，并将整体充分地混合。最后，将分散液涡旋5分钟，以超音波处理5分钟(on/off间隔：10秒)及透过PC过滤膜(200nm孔径)挤压。囊泡尺寸的检测是通过动态光散射使用仪器(Zetasizer Nano ZS(Malvern InstrumentsGmbH,Herrenberg,Germany；在室温下5分钟))且其范围在80nm-140nm。

实施例19：基于来自食品添加物群的脂类乳化剂及长链脂肪酸的单酯及包括18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的的活性成分组合物的囊泡

较佳获得的囊泡包括1.5％(w/w)的含量的18β-甘草次酸或(Z)-没药甾酮的一种。

(a)含有10.5％(w/w)的375、4.5％(w/w)的油酸乙酯、16％(w/w)的乙醇的溶解于重蒸馏水(补足至100％)的1.5％(w/w)的18β-甘草次酸。

(b)含有14％(w/w)的375、6％(w/w)的油酸乙酯、16％(w/w)的乙醇的溶解于重蒸馏水(补足至100％)的1.5％(w/w)的(Z)-没药甾酮。

(a)和(b)两种囊泡类型较佳以1:1比率加入最终调配物。

将375、油酸乙酯、18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮在室温下伴随震荡(500rpm)溶解于乙醇中。在恒定的状况下，再缓慢及均匀地(200μl/min)加入重蒸馏水至100％(v/v)，并将整体充分地混合。最后，将分散液涡旋5分钟，以超音波处理5分钟(on/off间隔：10秒)及透过PC过滤膜(200nm孔径)挤压。囊泡尺寸的检测是通过动态光散射使用仪器(Zetasizer Nano ZS(Malvern Instruments GmbH,Herrenberg,Germany；在室温下5分钟))且其范围在80nm-160nm。

实施例20：基于合成的棕榈酸鲸蜡酯、植物油、植物多醣共聚物及硬脂酸基底乳化剂及包括18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的的活性成分组合物的囊泡

较佳的调配物包括20％(w/w)的棕榈酸鲸蜡酯、10％(w/w)的荷荷巴油、5％(w/w)的18β-甘草次酸、5％(w/w)的(Z)-没药甾酮、1.5％(w/w)的Care PS及0.5％(w/w)的SP1溶解于重蒸馏水(补足至100％)的囊泡。

亦较佳的囊泡包括5％(w/w)的含量的18β-甘草次酸或(Z)-没药甾酮的一种。

(a)含有20％(w/w)的棕榈酸鲸蜡酯、10％(w/w)的荷荷巴油、1.5％(w/w)的Care PS及0.5％(w/w)的SP1的溶解于重蒸馏水(补足至100％)的5％(w/w)的18β-甘草次酸。

(b)含有20％(w/w)的棕榈酸鲸蜡酯、10％(w/w)的荷荷巴油、1.5％(w/w)的Care PS及0.5％(w/w)的SP1的溶解于重蒸馏水(补足至100％)的5％(w/w)的(Z)-没药甾酮。

(a)和(b)两种囊泡类型较佳以1:1比率加入最终调配物。

将18β-甘草次酸或(Z)-没药甾酮伴随搅拌悬浮于荷荷巴油中。棕榈酸鲸蜡酯在60℃熔化，伴随强烈地搅拌加入Care PS及含有甘草次酸和/或没药甾酮的荷荷巴油。将SP1在60℃溶解于纯化水中。在60℃将脂质混合物逐渐地加入SP1溶液。分散液在60℃通过高压均质机来均质化且最后冷却至室温。

实施例21：作为乳膏剂面膜的调配物

将18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮以2.5g的含量各自并入层状基底乳膏剂，其包括SLM 2026(类脂质AG,Steinhausen,Switzerland)86.5g、Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)6g、维生素E醋酸酯1g、泛醇0.5g、mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g。该成分在40℃因而逐步均匀地并入层状基底乳膏剂。

实施例22：作为乳膏剂面膜的调配物

将含有根据实施例12的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡以10％(w/v)的含量并入至层状基底乳膏剂，其包括SLM2026(类脂质AG,Steinhausen,Switzerland)81.5g、Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)6g、维生素E醋酸酯1g、泛醇0.5g、mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g。含有根据实施例16的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡在40℃因而均匀地并入乳膏剂作为最后乳膏剂组分。

实施例23：作为乳膏剂面膜的调配物

本发明的乳膏剂面膜较佳包括2.5g的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的一种，其并入至基底乳膏剂DAC，包括单硬脂酸甘油酯60 4g、鲸蜡醇6g、Miglyol 812 7.5g、白凡士林(vasilinum album)25.5g、Macrogol 20单硬脂酸甘油酯7g、丙二醇10g及重蒸馏水补足至100g。该乳膏剂面膜进一步包括维生素E醋酸酯1g、Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)5g及mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g。该成分在40℃因而逐步均匀地并入基底乳膏剂。

实施例24：作为乳膏剂面膜的调配物

将含有根据实施例13的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的乳化剂囊泡以10％(w/v)的含量并入至基底乳膏剂DAC，其包括单硬脂酸甘油酯60 4g、鲸蜡醇6g、Miglyol 8127.5g、白凡士林(vasilinum album)25.5g、Macrogol 20单硬脂酸甘油酯7g、丙二醇10g及重蒸馏水补足至100g。该乳膏剂面膜进一步包括维生素E醋酸酯1g、乙醇5g及mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g。含有根据实施例17的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的乳化剂囊泡在40℃因而均匀地并入基底乳膏剂作为最后乳膏剂组分。

实施例25：作为乳膏剂面膜的调配物

将含有根据实施例14的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的囊泡以10％(w/v)的含量并入至基底乳膏剂DAC，其包括单硬脂酸甘油酯60 4g、鲸蜡醇6g、Miglyol 812 7.5g、白凡士林(vasilinum album)25.5g、Macrogol 20单硬脂酸甘油酯7g、丙二醇10g及重蒸馏水补足至100g。该乳膏剂面膜进一步包括维生素E醋酸酯1g、泛醇0.5g及mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g。含有根据实施例18的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的囊泡在40℃因而均匀地并入乳膏剂作为最后乳膏剂组分。

实施例26：作为乳膏剂面膜的调配物

将含有根据实施例12的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡以10％(w/v)的含量并入至乳膏剂，其包括PEG-8L(聚氧乙烯月桂酯)15g、辛酸乙酯5g、C₁₂-C₁₅苯甲酸烷酯4.5g、甘油(85％)3g、丙二醇3g、维生素E醋酸酯1g、二甲聚硅氧烷350 0.5g、mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g及重蒸馏水补足至100g。含有根据实施例16的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的油乳化剂囊泡在40℃因而均匀地并入调配物作为最后组分。

实施例27：作为凝胶剂面膜的调配物

根据本发明的凝胶剂面膜较佳包括2.5g的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的一种、乙醇5g、甘露醇5g、依地酸钠1g、丙二醇1g、维生素E醋酸酯1g、卡波姆981 0.5g、mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g及重蒸馏水补足至100g。该成分在40℃因而逐步均匀地并入调配物。

实施例28：作为凝胶剂面膜的调配物

根据本发明的凝胶剂面膜较佳包括2.5g的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的一种、2-丙醇10g、维生素E醋酸酯1g、卡波姆981 0.5g、mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g及重蒸馏水补足至100g。该成分在40℃因而逐步均匀地并入调配物。

实施例29：作为软膏剂面膜的调配物

根据本发明的软膏剂面膜较佳包括2.5g的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的一种、乙醇5g、维生素E醋酸酯1g、含水的乳化软膏(unguentum emulsificans aquosum N SR(包括非离子型，乳化醇类21g、2-月桂酸乙基己酯10g、甘油(85％)5g、山梨酸钾0.14g、柠檬酸盐(无水)0.07g、以水补足至100g)、mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g及重蒸馏水补足至100g。该成分在40℃因而逐步均匀地并入调配物。

实施例30：作为软膏剂面膜的调配物

根据本发明的软膏剂面膜较佳包括2.5g的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的一种、Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)5g、维生素E醋酸酯1g、含水擦剂(Linimentumaquosum N(包括乳化十六烷基硬脂醇(类型A)11.5g、2-月桂酸乙基己酯5g、甘油(85％)2.5g、山梨酸钾0.07g、柠檬酸盐(无水)0.035g、以水补足至100g)、mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g及重蒸馏水补足至100g。该成分在40℃因而逐步均匀地并入调配物。

实施例31：作为乳液剂面膜的调配物

根据本发明的乳液剂面膜较佳包括2.5g的18β-甘草次酸及(Z)-没药甾酮的一种、乙醇2g、维生素E醋酸酯1g、泛醇0.5g、甘油(85％)5g、Pionier 1033 7g、黏性石蜡20g、尿素2g、白凡士林20g、硫酸镁七水合物(magnesium sulfate heptahydrate)0.5g、羟苯甲酸甲酯0.3g、羟基苯甲酸丙酯0.7g、mix(花萃取物；Symrise,Holzminden,Germany)1g及重蒸馏水补足至100g。该成分在40℃因而逐步均匀地并入调配物。

实施例27至31的面膜是使用实施例16、17和18的囊泡进一步地制备。

实施例4至17的乳膏剂、乳液剂和凝胶剂是使用实施例16、17和18的囊泡进一步制备。

实施例32：面膜的组成物的另外实施例：

成分组成物A：

纯化水

膨润土(Bentonite)

甘油

阿拉伯胶树(Acacia senegal gum)

黄原胶

苯甲醇

乙醇

去水醋酸钠

Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)

柠檬酸钠

去氢乙酸

柠檬酸

花萃取物(fragrance)

卡波姆

1,2-己二醇

辛酸乙二醇(Caprylyl glycol)

苯甲酸钠

乳酸

山梨酸钾(Potassium sorbate)

褐藻胶(Algin)

泛醇

生育酚乙酸酯(Tocopheryl acetate)

成分组成物B：

纯化水

Simmondsia chinensis oil(荷荷巴油)

乳油木果脂(Butyrospermum parkii(shea))油木果油萃取物甘油

甘油硬脂酸酯

鲸蜡硬脂醇

Cera alba(Cear alba)(蜂蜡)

辛酸/癸酸三酸甘油酯(Caprylic/capric triglyceride)

苯甲醇

水杨酸钠

花萃取物(fragrance)

乙酰丙酸(Levulinic acid)

黄原胶

乙酰丙酸钠(Sodium levulinate)

氢氧化钠

去氢乙酸

苯甲酸钠

山梨酸钾

柠檬酸

泛醇

乙酸生育酚

成分组成物C：

纯化水

辛酸/癸酸三酸甘油酯

水辉石(Hectorite)

鲸蜡硬脂醇

戊二醇

异硬脂酸异丙酯

甘油

甘油硬脂酸酯

鲸蜡硬脂醇醚-20(Ceteareth-20)

泛醇

生育酚

乙酸生育酚

苯甲醇

尿囊素(Allantoin)

鲸蜡硬脂醇醚-12

棕榈酸鲸蜡酯

花萃取物(fragrance)

柠檬酸

苯甲酸

玻糖醛酸钠(0.01％-0.5％)

山梨酸

苯甲醇

对这些组成物A、B或C加入18β-甘草次酸或(Z)-没药甾酮或根据本发明的囊泡。

Claims

1.一种囊泡，包括：

a)至少一甘草次酸或其盐或其酯；

b)至少一没药甾酮；以及

c)以下两者之一：c1)磷脂酰胆碱、或

c2)来自食品添加物群中的至少一乳化剂和长链脂肪酸的至少一单酯。

2.如权利要求1所述的囊泡，其中该囊泡包括：

a)至少一甘草次酸或其盐或其酯；

b)至少一没药甾酮；和

c)磷脂酰胆碱。

3.如权利要求1所述的囊泡，其中该囊泡包括：

a)至少一甘草次酸或其盐或其酯；

b)至少一没药甾酮；以及

c)来自食品添加物群中的至少一乳化剂和长链脂肪酸的至少一单酯。

4.如权利要求1或2所述的囊泡，其中该磷脂酰胆碱源自于大豆卵磷脂或向日葵卵磷脂。

5.如权利要求1或2所述的囊泡，其中该磷脂酰胆碱是以大豆卵磷脂或向日葵卵磷脂的形式使用。

6.如权利要求3所述的囊泡，其进一步包括一植物油。

7.如前述权利要求中任一项所述的囊泡，其中该至少一甘草次酸或其盐或其酯是选自18α-甘草次酸和/或18β-甘草次酸或一种或多种该18α-甘草次酸和/或18β-甘草次酸的盐或酯，且该至少一没药甾酮是选自(Z)-没药甾酮和/或(E)-没药甾酮。

8.如前述权利要求中任一项所述的囊泡，其中该至少一甘草次酸或其盐或其酯是以下述形式使用：光果甘草的形式、或来自光果甘草的萃取物的形式和/或纯化学物质的形式和/或其盐或其酯的形式，和/或该至少一没药甾酮是以下述形式使用：古古儿脂的形式或古古儿脂的萃取物的形式和/或纯化学物质的形式。

9.如权利要求1或3所述的囊泡，其中该来自食品添加物群中的至少一乳化剂是来自以下食品添加物：E471、E472a、E472b、E472c、E472d、E472e、E472f、E473、E474、E475、E476和E477。

10.如权利要求1所述的囊泡，其中该囊泡包括：

每10重量份的磷脂酰胆碱：

0.1重量份-0.5重量份的甘草次酸或其盐或其酯；

0.1重量份-0.5重量份的没药甾酮；和

0.5重量份-3重量份的至少一界面活性剂。

11.如权利要求1所述的囊泡，其中该囊泡包括：

15％-20％(v/v)的可食用植物的种子油；

2.5％-10％(w/v)的来自食品添加物群中的一种或多种乳化剂；

2.5％-5％(w/v)的长链脂肪酸的至少一单酯；

10％-20％(v/v)的乙醇；

0.1％-10％(w/v)的18β-甘草次酸；

0.1％-10％(w/v)的(Z)-没药甾酮；和

以水补足至100％。

12.如权利要求1所述的囊泡，其中该囊泡包括：

7％-17.5％(w/v)的来自食品添加物群中的一种或多种乳化剂；

3％-7.5％(w/v)的长链脂肪酸的至少一单酯；

10％-20％(v/v)的乙醇；

0.1％-10％(w/v)的18β-甘草次酸；

0.1％-10％(w/v)的(Z)-没药甾酮；和

以水补足至100％。

13.一种包括乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的组成物，其包括前述权利要求中任一项所述的囊泡。

14.如权利要求13所述的包括乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的组成物，其中以该乳膏剂、该乳液剂或该凝胶剂的总重量为基准计，至少一甘草次酸或其盐或其酯及至少一没药甾酮各自以0.01％-10％(w/w)的含量存在。

15.一种囊泡，包括：

0％-5％(w/w)的甘草次酸或其盐或其酯；

0％-5％(w/w)的没药甾酮；

5％-25％(w/w)的无水乙醇；

1％-30％(w/w)的油酸乙酯；

0％-30％(w/w)的植物油(例如向日葵油，大豆油，菜油)；

0.5％-5％(w/w)的单油酸二甘油酯；

0％-5％(w/w)的Imwitor 375(柠檬酸甘油酯/乳酸/亚油酸酯/油酸酯)；和

补足至100％的纯化水；

其中该囊泡包括至少一甘草次酸或其盐或其酯或没药甾酮。

16.一种囊泡，包括：

0％-5％(w/w)的甘草次酸或其盐或其酯；

0％-5％(w/w)的没药甾酮；

5％-25％(w/w)的无水乙醇；

1％-10％(w/w)的油酸乙酯；

5％-25％(w/w)的Imwitor 375(柠檬酸甘油酯/乳酸/亚油酸酯/油酸酯)；和

补足至100％的纯化水；

该囊泡包括至少一甘草次酸或其盐或其酯或没药甾酮。

17.一种囊泡，包括：

0％-5％(w/w)的甘草次酸或其盐或其酯；

0％-5％(w/w)的没药甾酮；

10％-15％(w/w)的荷荷巴油；

15％-25％(w/w)的棕榈酸鲸蜡酯；

0.2％-1.0％(w/w)的SP1；

1％-3％(w/w)的Care PS；和

补足至100％的纯化水；

其中该囊泡包括至少一甘草次酸或其盐或其酯或没药甾酮。

18.一种调配物，包括如权利要求1至12和15至17中任一项所述的囊泡作为如权利要求13或14所述的包括乳膏剂、乳液剂或凝胶剂的组成物，是用于美容治疗和/或皮肤治疗和/或皮下脂肪团的预防和/或用于老化皮肤外观的治疗和/或预防。

19.一种面膜，包括至少一甘草次酸或其盐或其酯和至少一没药甾酮。

20.一种面膜，包括如权利要求1至12或15至17中任一项所述的囊泡。

21.一种面膜，包括至少一甘草次酸或其盐或其酯及至少一没药甾酮，以该面膜的总重量为基准计，各自存在0.01％-5％(w/w)，较佳地0.1％-2.5％(w/w)的含量。

22.一种如权利要求1至12或15至17中任一项所述的囊泡在制备用于治疗和/或预防老化皮肤或受压皮肤的面膜的用途。

23.一种如权利要求1至12或15至17中任一项所述的囊泡或者至少一甘草次酸或其盐或其酯和至少一没药甾酮的组合的用途，其中，所述囊泡或所述组合用于治疗皮下脂肪或结缔组织的变化，例如，腹壁的脂肪瘤病、脂肪瘤、脂性水肿HIV病患的皮肤脂膜炎畸形、假性男子女乳症、HIV病患的水牛肩突及非特异性皮下脂肪堆积；或者用于消退或减少非经疾病引起的脂肪垫，例如位于脸部区域及颈部区域(例如泪囊、法令纹、脸颊松弛、双下巴)的脂肪垫；或者用于抽脂后的后处理。

24.一种包括硬膏剂或贴片的制剂，包括至少一甘草次酸或其盐或其酯和至少一没药甾酮。

25.一种包括硬膏剂或贴片的制剂，包括如权利要求1至12或15至17中任一项所述的囊泡。

26.一种组成物，包括：

A)囊泡，包括：

a)至少一甘草次酸或其盐或其酯；以及

c)以下两者之一：c1)磷脂酰胆碱、或

c2)来自食品添加物群中的至少一乳化剂及长链脂肪酸的至少一单酯；和

B)囊泡，包括：

b)至少一没药甾酮；和

d)以下两者的一：d1)磷脂酰胆碱、或

27.一种包括乳膏剂、乳液剂、凝胶剂、硬膏剂、贴片或面膜的组合物，包括如权利要求26所述的组成物。

28.一种调配物，包括如权利要求26所述的组成物作为如权利要求27所述的包括乳膏剂、乳液剂、凝胶剂、硬膏剂、贴片或面膜的组合物，是用于美容治疗和/或皮肤治疗和/或皮下脂肪团的预防和/或用于老化皮肤外观的治疗和/或预防。

29.一种如权利要求26所述的组成物在制备用于治疗和/或预防老化皮肤或受压皮肤的面膜的用途。

30.一种如权利要求26所述的组成物的用途，该组成物用于治疗皮下脂肪或结缔组织的变化，例如，腹壁的脂肪瘤病、脂肪瘤、脂性水肿HIV病患的皮肤脂膜炎畸形、假性男子女乳症、HIV病患的水牛肩突及非特异性皮下脂肪堆积；或者用于消退或减少非经疾病引起的脂肪垫，例如位于脸部区域及颈部区域(例如泪囊、法令纹、脸颊松弛、双下巴)的脂肪垫；或者用于抽脂后的后处理。