CN107338288A

CN107338288A - 一种生物分子检测方法

Info

Publication number: CN107338288A
Application number: CN201710446455.XA
Authority: CN
Inventors: 杨华卫; 曾冀
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2017-06-14
Filing date: 2017-06-14
Publication date: 2017-11-10

Abstract

本发明涉及一种生物分子检测方法，属于生物检测技术领域。本发明提供的检测方法采用包括以下部件的生物芯片实现多个待测样本的同步检测：基托；以阵列的形式安装在基托上的若干芯片柄，芯片柄沿垂直于基托的方向相互平行地从所述基托中伸出；以及布置在各个芯片柄的自由端处的用于标记检测探针的芯片反应界面，芯片反应界面的纵向布置成与芯片柄的纵向重合。使用本发明提供的方法检测生物分子，可以实现多个待测样本的同步检测，且避免了检测过程中的交叉污染，可以节省大量检测步骤和操作时间，提高检测效率和检测结果准确性，以及提高多个样本检测结果的横向比较的精确性。

Description

一种生物分子检测方法

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种生物分子检测方法。

背景技术

在传统膜芯片的生物分子检测中，需要将每个待测样本逐个地依次加入到芯片孔或槽中进行孵育。然后，将孵育后的样本从芯片孔或槽中逐个地移除，并多次地将洗涤液依次加入用来检测的孔或槽中进行洗涤。洗涤之后，将反应液依次加入孔或槽中进行反应，反应后的液体需要逐个地依次移除。在移除了反应后的液体之后，需要进行多次洗涤用来检测的孔或槽，并将孔或槽中的液体移除。之后，需要将作为检测信号的液体逐个孔或槽地依次加入进行反应。反应之后，需要在每个孔或槽中依次加入中止液混匀来读取检测数据。

在传统玻璃芯片的生物分子检测中，需要把每个反应样本溶液加到芯片表面，然后把玻璃芯片封闭在塑料芯片盒里卡紧。芯片盒置于水浴锅加热几小时，或者空气浴加热过夜。之后取出芯片盒，拆开芯片盒并取出芯片，放到烧杯中。分两次加入洗涤液进行摇洗，之后取出芯片并吹干。之后再放入芯片扫描仪阅读。

生物分子的传统的检测方法操作步骤繁多、检测时间长，且由于不同样本之间存在处理时间间隔，导致检测结果误差大。因此，有必要提出新的生物分子检测方法来提高检测效率，降低检测误差。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提出了一种新的生物分子检测方法，包括以下步骤：

步骤一、提供生物芯片(或称为生物芯片装置)，所述生物芯片包括：

基托，

以阵列的形式安装在基托上的若干芯片柄，芯片柄沿垂直于基托的方向相互平行地从基托中伸出；和

布置在各个芯片柄的自由端处的芯片反应界面，芯片反应界面的纵向布置成与芯片柄的纵向重合；

步骤二、在各个芯片反应界面上分别固定用于特异性检测待测生物分子的检测探针；

步骤三、使各个芯片反应界面与待测样品接触，以检测待测样品中的待测生物分子；和

步骤四、获取各个芯片反应界面的检测信号。

根据本发明提供的检测方式，使用一种由若干个由芯片柄和芯片反应界面组合形成的生物芯片单元在一维、二维或三维上以阵列的形式安装在基托上形成的生物芯片装置来检测生物分子。

在步骤二中，可单独地对每一个芯片反应界面固定检测探针，也可以同时对所有的芯片反应界面进行检测探针的固定。优选地，同时在各个芯片反应界面上分别固定用于特异性检测待测生物分子的检测探针。

在检测待测样本中，需要将芯片反应界面进入待测样本溶液中，使芯片反应界面上固定的检测探针与待测样本中的生物分子充分接触反应。在步骤三中，所有的芯片反应界面可以浸入同一个待测样本中，实现芯片反应界面上各检测探针对待测样本中的生物分子的检测；也可以使每个芯片反应界面分别浸入各自的待测样本中，即芯片柄和芯片反应界面组合形成的生物芯片单元与待测样本一一对应，实现多个芯片反应界面同时对多个组成相同或不同的待测样本的检测。在本发明的一些优选实施方式中，在步骤三中，使各个芯片反应界面同时分别与各个待测样本接触。

如本领域技术人员所熟知的，在生物分子的检测过程中，在芯片与待测样本接触反应后，可根据需要对芯片进行洗涤、干燥等后处理，然后再对其进行检测信号检测。根据本发明的一些优选实施方式，在步骤三中，使各个芯片反应界面同时分别与各个待测样本接触，并对各个芯片反应界面同时实施后处理。即在检测过程中，可实现对若干个待测样本同步检测，从而在最短时间内实现批量处理。由于不管是在与待测样本的接触还是对芯片进行洗涤等后处理过程中都消除了各个待测样本检测之间的时间差(各芯片反应界面同时同步移动)，使得待测样本之间的检测结果对比的误差降至最低，从而提高检测结果准确性，并极大地提高了检测效率。

由于采用了特定结构的生物芯片装置，本发明在步骤四中，同样可以实现单个芯片反应界面的信号采集或同时获取所有芯片反应界面的检测信号。作为本发明的一些优选实施方式，在步骤四中，同时获取各个芯片反应界面的检测信号。由此，消除了本发明提供的检测方法的每一个步骤中对各个待测样本的检测时间差，从而有利于对各个待测样本的生物分子含量情况进行精确的横向比较。

此外，芯片反应界面的纵向布置成与芯片柄的纵向重合的技术方案可以缩小使用的反应槽的体积，对于样本量较少的情况特别适用。或者，可以缩小使用的反应槽的横截面积，由此可在单位面积内增加反应槽的数量，对于发展便携式检测设备尤为有利。

根据本发明，所述检测探针是待测生物分子的特异性的生物分子探针，例如可以是核酸探针(例如寡核苷酸探针)和/或蛋白探针(例如抗原探针、抗体探针)，或者其他生物分子探针。

根据本发明，芯片反应界面可以为平面的、曲面的、粒状、棒状等形状；其工作时可以是水平的、直立的、倾斜的等。例如，所述芯片反应界面可以是塑料膜(例如硝酸纤维素膜、尼龙膜、聚苯乙烯膜)、玻璃片、塑料片或陶瓷片等，优选为硝酸纤维素膜、尼龙膜或聚苯乙烯膜，更优选为硝酸纤维素膜。应理解，在本发明中，膜/膜片是厚度比片更薄，且具有一定柔韧性、例如可以弯曲甚至折叠性能的膜体；而片是指硬质的片体。

根据本发明提供的方法，可以满足同一芯片反应界面上标记多个检测探针，可根据实际需要来选择检测探针的数目。例如，芯片反应界面标记的探针可以为1～500个，优选为1～50个，更优选2～20个。

根据本发明提供的方法，可以满足多待测溶液的同时检测，可根据实际需要来设置芯片柄的数目。例如，芯片柄的个数可以为1～100个，优选为1～50个，更优选2～20个。

根据本发明，芯片柄的材质可以是塑料、玻璃等不与待测样本或其他处理液发生反应的材质。

根据本发明，可以通过显色反应法、荧光法、化学发光法和就胶体金法(纳米金法)等方式获取检测信息。因此，步骤四中，所述检测信号可以是显色信号、荧光信号或化学发光信号中的任意一种。

在本发明的一些实施方式中，芯片反应界面贴合在芯片柄的侧面，并靠近芯片柄的自由端。芯片反应界面直接贴合在芯片柄的侧面，结构简单，制造成本低。优选地，芯片柄为塑料棒。材质为塑料的芯片柄，制作成本低。

在本发明的一些实施方式中，芯片柄为长条状，并且在其第一侧面上设有用于固定芯片反应界面的夹具。通过夹具可以确保芯片反应界面的纵向与芯片柄的纵向重合且牢靠地固定在芯片柄上。优选地，所述夹具为对折式夹紧片，用于将芯片反应界面夹紧固定在第一侧面上。对折式夹紧片构造简单，使用方便，且能够实现简单快速地装配和更换芯片反应界面的效果。

在本发明的一些实施方式中，芯片柄为长条状，在芯片柄的第一侧面上设有安装孔，芯片反应界面布置在安装孔内。

根据本发明的一些优选实施方式，基托为带有若干孔的矩形基托，各个孔构造成能够与相应的一个芯片柄的安装端可拆卸式地卡接。这样，可方便生物芯片装置的拆卸、维修。

根据本发明提供的检测方法，还可以包括检测探针的合成、待测样本配制等常规操作步骤。在本发明中，检测探针的合成、检测探针在芯片反应界面上的固定、待测样本的配制或预处理以及芯片反应界面的洗涤等处理操作都是本领域普通技术人员可以根据实际情况来常规操作的，在此不作赘述。

根据本发明，检测过程可以是手持生物芯片操作的手动模式，也可以是使用机械手操作生物芯片的自动化检测模式。

使用根据本发明提供的生物分子检测方法进行检测时，所有的样本、反应液和洗涤液都可预配好放置在反应槽内，不需要来回移动加入或移除，仅需在盛放样本、反应溶液和洗涤溶液的反应槽之间来回移动生物芯片即可。相比现有技术中芯片检测需要每个样本一个一个依次加入、每个反应液一个一个依次加入，反应后的液体一个一个地依次移除，洗涤液一个一个依次加入、移除的繁多步骤，本发明的检测方法节省了大量检测步骤和操作时间，并且避免了繁多的手工移液器的操作动作和更换tip头动作，以及避免了这些动作所导致的潜在的样本污染。并且，这种生物芯片在反应槽之间的来回移动可以通过自动化芯片检测仪器操作，操作时间可以进一步减少。

芯片反应界面竖直地布置在芯片柄的自由端处，使得需插入待测溶液中的部分的横截面积小，因此尤其适用于反应槽为离心管等体长腰细的深槽容器的情况。这样，在单位面积上能够排布数量更多的反应槽和芯片，检测的样本数量就多，从而检测效率更高，更节省试验空间。当检测较少的临床样本数量时，可以使用体积更小的检测设备就可以完成检测，检测方便，还可以降低成本。

同时，上面所述的基托可以将连接芯片反应界面的的芯片柄串联起来，实现不同芯片间的组合。这样，可以确保检测同一批样本的同一组芯片在每个步骤中都是同步操作，可以进一步节省检测中的步骤和检测时间，并且显著提高检测效率和同一批样本检测结果的横向比较精确性。同时，由于基托可以确保同一组芯片相互之间可以保持确定的间距，可以防止不同反应液间的交叉造成芯片间的相互污染。再者，这种组合的三维芯片同步操作，能够消除不同样本间的反应时间差异，减少操作的误差率。同时相比现有技术，由于降低了使用移液器的频率和减少了耗材tip头的使用量，从而降低了成本。

附图说明

在下文中将基于实施例并参考附图来对本发明进行更详细的描述。

图1示意性显示了本发明使用的实施例1使用的生物芯片。

图2显示了本发明实施例1中探针在膜上的排布示意图和检测结果。其中，图2a是探针在膜上的排布示意图，图2b、2c、2d分别是样本01、02、03的检测信号图。

图3示意性显示了本发明实施例2使用的生物芯片。

图4示意性显示了本发明实施例3使用的生物芯片。

图5显示了本发明实施例3中探针在膜上的排布示意图和检测结果。其中，图5a是探针在膜上的排布示意图，图5b、5c分别是样本04、05的检测信号图。

在附图中，相同的部件使用相同的附图标记。附图并未按照实际的比例。

具体实施方式

下面将结合附图和具体实施例对本发明作进一步详细说明，但并不因此而限制本发明的保护范围。

图1示意性显示了本发明的一个实施例的生物芯片10。如图1所示，本实施例的生物芯片10包括基托3。在该实施例中，基托3为板状，其中开有若干个孔8。孔8优选地呈阵列式布置。生物芯片10还包括若干芯片柄2。在该实施例中，芯片柄2为细长的长方体，其数量优选地与孔8的数量一一对应。每个芯片柄2均可插入到一个对应的孔8中，并被固定地夹持住。容易理解，可以使用多种方式来将芯片柄2固定在基托3中，例如卡接、胶粘等。在一个未示出的实施例中，芯片柄2以可拆卸的方式固定到基托3上。

根据本发明，生物芯片10还包括用于标记检测探针的芯片反应界面1。如图所示，在芯片柄2的一个侧面上，在靠近其自由端的区域处设有安装孔5，芯片反应界面1即布置在安装孔5内。芯片反应界面1沿竖直方向布置，也就是说，芯片反应界面1的纵向与芯片柄2的纵向重合。芯片反应界面1标记的探针可以为1到50个，优选为1～10个。

使用根据本发明生物芯片进行检测时，上面所述的基托可以将连接芯片反应界面的的芯片柄串联起来，实现不同芯片间的组合。这样，可以确保检测同一批样本的同一组芯片在每个步骤中都是同步操作，可以节省检测中的步骤和检测时间。

由于基托可以确保同一组芯片相互之间保持确定的间距，可以防止不同反应液间的交叉造成芯片间的相互污染。这种组合的三维芯片同步操作，能够消除不同样本间的反应时间差异，减少操作的误差率。同时相比现有技术，由于降低了使用移液器的频率和减少了耗材tip头的使用量，从而降低了成本。

其次，使用根据本发明生物芯片进行检测时，所有的样本、反应液和洗涤液都预配好放置在反应槽内，不需要来回移动加入或移除，仅需在盛放样本、反应溶液和洗涤溶液的反应槽之间来回移动生物芯片就可以了。相比现有技术中芯片检测需要每个样本一个一个依次加入、每个反应液一个一个依次加入，反应后的液体一个一个地依次移除，洗涤液一个一个依次加入、移除的繁多步骤，本发明涉及的生物芯片节省了大量检测步骤和操作时间。并且，本发明涉及的生物芯片在反应槽之间的来回移动可以通过自动化芯片检测仪器操作，操作时间可以进一步减少。

再次，使用根据本发明生物芯片进行检测时，芯片反应界面竖直地布置在芯片柄的自由端处，其横截面积小，因此尤其适用于反应槽为离心管等体长腰细的深槽容器的情况。这样，在单位面积上能够排布数量更多的反应槽和芯片，检测的样本数量就多，从而检测效率高。当检测较少的临床样本数量时，可以使用体积更小的检测设备就可以完成检测，检测方便，还可以降低成本。

另外，如图1所示的芯片反应界面1的布置方式使得其能够被稳定、牢固地固定在芯片柄5上，降低了本身厚度很薄的芯片反应界面1脱落或其他不定因素导致的受损等问题的发生。

下面通过一个具体的示例来介绍根据本发明提供的检测方法的实施过程，其中采用如图3所示的生物芯片。

示例1

在本示例中，采用如图1所示的生物芯片来进行分枝杆菌鉴定，检测4种分枝杆菌核酸。临床能够引起的结核病的分枝杆菌属有很多种，其中常见的有结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌等。

本示例中的芯片反应界面为玻璃芯片，检测信号的方式采用荧光标记方式。本示例中，固定了分枝杆菌探针的玻片嵌入芯片柄的一个侧面上，在靠近其自由端的区域处设置的安装孔中。检测时，玻片浸泡在溶液中进行芯片杂交、洗涤和荧光信号扫描等操作。

以下介绍使用如图1所示的生物芯片来进行分枝杆菌鉴定鉴定的方法的各步骤。

步骤1：分枝杆菌鉴定基因分型玻璃芯片的制作

设计合成各分枝杆菌种的探针：

结核分枝杆菌探针TBTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAAGACATGCATCCCGT

鸟分枝杆菌探针：TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCATGCGTCTTGAGGTC

胞内分枝杆菌探针：TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAAGACATGCGCCTAAA

堪萨斯分枝杆菌探针：

TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCGCCAAGTGGTCCTAT

阳性对照探针：TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTAACTGCAGCTTGGACTACGC

阴性对照探针：TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTATGCCTTTAAGCATGGCA

阳性对照靶序列：GCGTAGTCCAAGCTGCAGTT(5’端荧光素CY3标记，能够与阳性对照探针杂交反应)

探针溶液配制：使用TE溶液将探针配制、稀释成10μM浓度。

探针在玻片上的固定：点样，取上面6个探针溶液各0.2μL点到氨基修饰玻片上。将点样后的基片置于80℃烘箱中保温80分钟增强固定效果。将固定好探针的芯片，浸在60℃的超纯水中摇洗1分钟，晾干备用。

探针排布方式见图2a。

将固定探针的玻片嵌入到塑料棒自由端侧面的安装孔中固定好。干燥密封，-20℃保存。

步骤2：检测样品准备

样本01:鸟分枝杆菌核酸样本

样本02：胞内分枝杆菌核酸样本

阴性样本03:无菌水

使用16SDNA基因的引物序列、taq酶等配制PCR体系扩增样本01、样本02。

上游引物序列Y01:GG TGG CTC AGG ACG AAC G(5’端荧光素CY3标记)；下游引物序列Y02:GGCT TGC GCC CAT TGT G，配制成20μM浓度。

PCR扩增反应体系配制(50μL)：

PCR反应程序：95℃，10min；95℃，2min，50℃，1min，68℃，1min，35cycles；72℃，5min。PCR产物-20℃贮存备用。

步骤3：检测

1)取3个1.5ml EP管，做好标记，加入常用磷酸缓冲液(3×SSPE)1ml，和阳性对照序靶列10μL(10μM)。然后取20μL的2个样本(01、02)的PCR产物加入，于95℃加热10min变性，取出置于冰水混合物处理。

2)准备一块24孔板，选择3个孔做好标记，将1)处理后的样本对应加到孔内。

3)取出3个制备的芯片，作标记。然后分别插入上面3个孔内，置于48℃水浴锅内孵育0.5hr。

4)将玻璃芯片取出，转入到另外3个加有1ml 0.2×SSC溶液(pH7.0，每1000ml溶液含有1.75g NaCl，0.88g柠檬酸钠)的孔内，摇洗2min。

5)将玻璃芯片转入纯水中摇洗2min。

6)取出玻璃芯片，吹干，取下嵌入的玻片，把玻片放入芯片荧光扫描仪内扫描荧光信号判读结果。

检测结果见下表1和图4。

表1

可见，采用本发明提供的检测方法来检测分枝杆菌，通过荧光标记方式，获得了精确的检测结果。本示例使用了三个芯片反应界面分别同时测定三个样本，依次类推，可以根据需要增加芯片反应界面数目和待测样本数目，通过同时操作，所有待测样本可被同时检测，提高检测效率。

实施例2

图3示意性显示了可用于本发明中的另一种芯片柄12。该芯片柄12构造为塑料棒。各塑料棒的一端安装在基托上。芯片反应界面11竖直地布置在芯片柄12的侧面的靠近其自由端的区域。这种生物芯片的结构简单，成本较低。

实施例3

图4示意性显示了本发明中的另一种生物芯片，采用了如图所示的芯片柄22。该芯片柄22构造为细长的条片，其一端(图中的右上端)安装在基托上。芯片反应界面21竖直地布置在芯片柄22的第一侧面(即图4中的上表面)的靠近其自由端的区域。芯片柄22还包括夹具24，其构造为具有中空区域的薄片。薄片构造成能够进行对折，从而将芯片反应界面21固定地夹持住，但能使芯片反应界面21通过其中空区域而露出。芯片反应界面21可以是标记了检测探针的硝酸纤维素膜，也可以为尼龙膜、塑料、玻璃、陶瓷，等等。这种夹具24的构造简单，使用方便，且能够实现简单快速地装配和更换芯片反应界面21的效果。

示例2

在本示例中，采用如图4所示的生物芯片来进行结核分枝杆菌鉴定。固定了分枝杆菌探针的硝酸纤维素膜片被固定在塑料棒的末端，末端塑料片可以折叠起来夹住膜芯片。检测时，末端浸泡在溶液中完成芯片杂交、洗涤和显色等过程。相关参数如下：核酸膜阵列，采用2个检测点，含2个检测核酸探针(分枝杆菌属探针、结核分枝杆菌探针)；显色斑点，通过肉眼判读结果。

以下介绍使用如图4所示的生物芯片来进行结核分枝杆菌鉴定的方法的各步骤。

步骤1：膜芯片的制作

设计合成分枝杆菌探针：

分枝杆菌属探针序列MY：TTTTTTTTTTGTATTAGACCCAGTTTCCC

结核分枝杆菌探针TB：TTTTTTTTTTAAGACATGCATCCCGT

阴性对照探针YX：TTTTTTTTTTATGCCTTTAAGCATGGCA

探针溶液配制：使用TE溶液将探针配制、稀释成10μM浓度。

探针在膜芯片上的固定：在硝酸纤维素膜(10×SSC缓冲液浸泡5min，烘干)点样，取上面3个探针溶液各1μL点到膜上，于80℃烘干2hr。

探针排布示意图如图5a所示。

将膜芯片夹到塑料棒末端，固定好。干燥密封，保存。

步骤2：检测样品准备

样本04:结核分枝杆菌核酸

样本05:无菌水

使用16SDNA基因的引物序列、taq酶等配制PCR体系扩增样本04、样本05。

上游引物序列Y01:GG TGG CTC AGG ACG AAC G(生物素标记)；下游引物序列Y02GGCT TGC GCC CAT TGT G，配制成20μM浓度。

PCR扩增反应体系配制(50μL)：

步骤3：检测

1)取2个1.5ml EP管，做好标记，加入常用磷酸缓冲(3×SSPE)1ml，取20μL的2个样本的PCR产物加入，于95℃加热10min变性，取出置于冰水混合物处理。

2)取出2个制备的竖式膜芯片，作标记。将竖式膜芯片分别插入上面2个EP管内，置于50℃水浴锅内孵育1hr。

3)将竖式膜芯片取出，转入到另外两个加有1ml缓冲液1(0.1M Tris-HCl，pH7.5；0.1M NaCl)的EP管，涮洗2次。

4)将竖式膜芯片取出，转入到另外两个加有1ml链酶亲和素溶液(1μg/ml，用加有3％牛血清白蛋白(BSA)的缓冲液1稀释)的EP管内，42℃水浴锅内孵育30min。

5)将竖式膜芯片取出，转入到另外两个加有1ml缓冲液2(0.1M Tris-HCl，pH9.5；0.1M NaCl；50M MgCl₂)的EP管，涮洗2次。

6)将竖式膜芯片取出，转入到另外两个加有1ml显色液(NBT溶液和BCIP溶液混合液)的EP管内，常温显色10min。

7)将竖式膜芯片取出，于水中涮洗两次，判读结果。

检测结果如图5和下表2所示。

表2

可见，采用本发明提供的检测方法来检测结核分枝杆菌，通过斑点显示的方式，获得了精确的检测结果。本示例使用了两个芯片反应界面分别同时测定两个样本，可以根据需要增加芯片反应界面数目和待测样本数目，通过同时操作，所有待测样本可被同时检测，提高检测效率。

上述实施例中，生物芯片的基托可以将连接芯片反应界面的的芯片柄串联起来，实现不同芯片间的组合，这样在检测过程中可以确保检测同一批样本的同一组芯片在每个步骤中都是同步操作，可以进一步节省检测中的步骤和检测时间。同时，由于基托可以确保同一组芯片相互之间可以保持一定的间距，可以防止在检测过程中不同反应液间的交叉造成芯片间的相互污染。在本发明提供的检测方法中，采用这种组合的三维芯片同步操作，能够消除不同样本间的反应时间差异，减少操作的误差率。同时相比现有技术，由于降低了使用移液器的频率和减少了耗材tip头的使用量，从而简化了检测操作工序，也降低了成本。

上述实施例中的生物芯片可以使用自动化芯片检测仪器操作。在检测过程中，可以通过自动化芯片检测仪器操作生物芯片在反应槽之间来回移动，从而可以进一步提高检测效率，能够消除不同样本间的反应时间差异，减少操作的误差率。

虽然已经参考优选实施例对本发明进行了描述，但在不脱离本发明范围的情况下，可以对其进行各种改进并且可以用等效物替换其中的部件。尤其是，只要不存在结构冲突，各个实施例中所提到的各项技术特征均可以任意方式组合起来。本发明并不局限于文中公开的特定实施例，而是包括落入权利要求范围内的所有技术方案。

Claims

1.一种生物分子检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、提供生物芯片，所述生物芯片包括：

基托，

以阵列的形式安装在所述基托上的若干芯片柄，所述芯片柄沿垂直于所述基托的方向相互平行地从所述基托中伸出，和

布置在各个所述芯片柄的自由端处的芯片反应界面，所述芯片反应界面的纵向布置成与所述芯片柄的纵向重合；

步骤三、使各个芯片反应界面与待测样本接触，以检测待测样品中的待测生物分子；和

步骤四、获取各个芯片反应界面的检测信号。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述芯片反应界面贴合在所述芯片柄的侧面；优选所述芯片柄为塑料棒。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述芯片柄为长条状，并且在其第一侧面上设有用于固定所述芯片反应界面的夹具；优选所述夹具为对折式夹紧片，用于将所述芯片反应界面夹紧固定在所述第一侧面上。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述芯片柄为长条状，在所述芯片柄的第一侧面上设有安装孔，所述芯片反应界面布置在所述安装孔内。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述基托为带有若干孔的矩形基托，各个孔构造成能够与相应的一个芯片柄的安装端可拆卸式地卡接。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述芯片柄的数目为1～100个，优选2～20个。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述芯片反应界面为标记了检测探针的硝酸纤维素膜、尼龙膜、聚苯乙烯膜、玻璃片、塑料片或陶瓷片，优选为硝酸纤维素膜、尼龙膜或聚苯乙烯膜。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测探针为核酸探针和/或蛋白探针，优选所述芯片反应界面标记的探针为1～50个；和/或

所述检测信号为显色信号、荧光信号或化学发光信号中的任意一种。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤二中，同时在各个芯片反应界面上分别固定用于特异性检测待测生物分子的检测探针。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤三中，使各个芯片反应界面同时分别与各个待测样本接触，并对各个芯片反应界面同时实施后处理；和/或

在步骤四中，同时获取各个芯片反应界面的检测信号。