CN107163949A - 土壤改良剂深绿木霉dq1复合粉剂tlb制备及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及的是土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB及其应用，这种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB通过以下制备方法制备而成：一：将深绿木霉DQ1菌株接种于PDA斜面培养基培养制成孢子液，接入灭菌的PD培养液中培养；二：用麸皮、硅藻土、稻壳、水制作孢子悬浮液，该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液；三：固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素、无菌水按质量比50：25：1：50搅拌后灭菌；将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液混合，培养，风干后的浅盘发酵产物粉碎后，收集得到深绿木霉DQ1孢子粉；四：制备土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB。本发明可有效防治蔬菜土传病害，对人畜无毒，不污染环境。
Description
一、技术领域
本发明涉及的是农作物病害防治的生物菌剂，具体涉及土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB及其应用。
二、背景技术
随着农作物种植年限增长，种植模式较固定，导致土壤内积累了大量的有害生物，病害发生越来越重，另外土壤的连年耕种，造成土壤物理性质明显改变，土壤出现大量板结，肥力和耕力下降，最后导致农作物产量、质量大幅度下降，所以土传病害和土壤肥力下降已成为影响农作物生产的重要限制因素。然而目前防治农作物病害主要依靠化学手段，众所周知，化学农药在作物、空气、水和土壤中有残留，引起农药残留超标和环境污染，并且单一药剂的使用容易引起病虫产生抗药性，同时也杀害土壤中一些有益微生物，减少了土壤有益微生物群体，降低了土壤有机质含量，降低肥力并导致土壤板结，对此带来诸多的社会、经济和生态问题。随着人们生活水平的提高和环保意识的增强，公众对绿色蔬菜的要求也与日俱增。同时，农产品出口的需要也在呼唤需要绿色蔬菜。
深绿木霉属于半知菌门，丝孢目，木霉属。是一类分布广、繁殖快、具有较高生防价值且对一些广谱性杀菌剂不敏感的生防有益真菌，具有适应性强、抗菌谱广的特点，还能促进植物生长，具有重寄生作用、竞争作用、产生裂解酶、产生拮抗化合物，抑制或杀死病原菌、诱导寄主植物对病菌的防卫反应等作用方式，具有重要的经济意义。
三、发明内容
本发明的一个目的是提供了土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB，这种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB解决了目前使用的化学农药在防治农作物根部病害和土传病害时产生的对人畜有毒，污染环境，有残留的问题，本发明的另一个目的是提供这种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB的应用。
为了实现上述目的，本发明采用的具体技术方案如下：这种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB通过以下制备方法制备而成：
步骤一：将深绿木霉DQ1菌株接种于PDA斜面培养基，28℃培养72-96 h，用灭菌蒸馏水洗下分生孢子，制成孢子液，孢子液中孢子数为106个／mL， 然后将其按PD培养液的体积的1%接入灭菌的PD培养液中，在28℃，120rpm培养36-48h；
步骤二：将麸皮、硅藻土、稻壳、水按质量比2:1:1:4的比例混合，搅拌均匀后，装入200mL塑料瓶，装入量为塑料瓶高的1/2，然后再121℃高压湿热灭菌20 min，冷却后按1%接种量接入塑料瓶中，上下摇均匀，放在温度28℃，湿度80％培养5-7 d；将塑料瓶的发酵菌种按质量比1：500-1：1000加入无菌水中，搅拌均匀成制作孢子悬浮液，该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液；
步骤三：固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素、无菌水按质量比50：25：1：50搅拌均匀后，分装于塑料袋中，于121℃下灭菌20～30 min后待用；育秧盘设置于固体发酵车间中，对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾混合液密闭熏蒸灭菌24h，然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按质量比10：1的比例混合，均匀铺展育秧盘里，铺至厚度1 -2cm，在恒温28℃，保湿RH≥80％的条件下，培养7d，再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物，风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后，过200目筛，收集得到深绿木霉DQ1孢子粉；
步骤四：将步骤三得到的深绿木霉DQ1孢子粉、淡紫拟青霉、硅藻土、腐殖酸钠按质量比1000：1：2: 500: 100的比例混合，混匀得到土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB。
上述土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB的应用：在翻土时，将所述的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB施入土壤中，亩施1公斤，然后浇水保湿处理，用于活化土壤，提高土壤有机质含量，防治土传病害，线虫、立枯病、灰霉病、纹枯病、根腐病。
上述土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB的应用：将所述的将深绿木霉DQ1复合粉剂TLB与水按质量比1：300-500溶于水中，搅拌均匀，直接浇灌土壤中，用于活化土壤，提高土壤有机质含量，防治土传病害，线虫、立枯病、灰霉病、纹枯病、根腐病。
有益效果：
1、本发明可以促进肥料的吸收和作物生长，提高作物产品品质，改良土壤，诱导植物产生抗性，抑制有害菌的生长繁殖，对人畜无毒，不污染环境。
2、本发明具有快速占据生态位优势，产生抗生性次生代谢物，有效防治蔬菜土传病害，如线虫、立枯病、灰霉病、纹枯病、根腐病。
四、具体实施方式
下面对本发明做进一步的说明：
实施例1：
这种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB通过以下制备方法制备而成：
步骤一：将深绿木霉DQ1菌株接种于PDA斜面培养基，28℃培养72h，用灭菌蒸馏水洗下分生孢子，制成孢子液，孢子液中孢子数为106个／mL， 然后按1%（体积比）接入灭菌的PD培养液中，放入28℃，120rpm培养36h；
步骤二：将麸皮、硅藻土、稻壳、水按2:1:1:4（质量比）的比例混合，搅拌均匀后，装入200mL塑料瓶，装入量为塑料瓶高的1/2，然后再121℃高压湿热灭菌20 min，冷却后按1%接种量接入塑料瓶中，上下摇均匀，放在温度28℃，湿度80％培养6 d；将塑料瓶的发酵菌种按质量比：1：500加入无菌水中，搅拌均匀成制作孢子悬浮液，该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液；
步骤三： 固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素和无菌水（50：25：1：50）（质量比）搅拌均匀后，分装于塑料袋中，于121℃下灭菌20 min后待用；育秧盘设置于固体发酵车间中，对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾混合液密（2:1）（质量比）闭熏蒸灭菌24 h，然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按10：1（质量比）的比例混合，均匀铺展育秧盘里，铺至厚度1 cm，在恒温28℃，保湿RH≥80％的条件下，培养7d，再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物，风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后，过200目筛，收集得到深绿木霉DQ2孢子粉。
步骤四：将步骤三得到的深绿木霉DQ1孢子粉、淡紫拟青霉、硅藻土、腐殖酸钠按质量比1000：1：2: 500: 100的比例混合，混匀得到土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB。
本实施例提供的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB的应用：直接施入土壤中，在翻土时，将所述的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB施入土壤中，亩施1公斤，然后浇水保湿处理，用于活化土壤，提高土壤有机质含量，防治土传病害，线虫、立枯病、灰霉病、纹枯病、根腐病。
实施例2：
这种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB通过以下制备方法制备而成：
步骤一：将深绿木霉DQ1菌株接种于PDA斜面培养基，28℃培养96 h，用灭菌蒸馏水洗下分生孢子，制成孢子液，孢子液中孢子数为106个／mL， 然后按1%（体积比）接入灭菌的PD培养液中，放入28℃，120rpm培养40h；
步骤二：将麸皮、硅藻土、稻壳、水按2:1:1:4（质量比）的比例混合，搅拌均匀后，装入200mL塑料瓶，装入量为塑料瓶高的1/2，然后再121℃高压湿热灭菌20 min，冷却后按1%接种量接入塑料瓶中，上下摇均匀，放在温度28℃，湿度80％培养7 d；将塑料瓶的发酵菌种按质量比：1：800加入无菌水中，搅拌均匀成制作孢子悬浮液，该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液；
步骤三： 固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素和无菌水（50：25：1：50）（质量比）搅拌均匀后，分装于塑料袋中，于121℃下灭菌30 min后待用；育秧盘设置于固体发酵车间中，对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾混合液（甲醛和高锰酸钾混合液中甲醛和高锰酸钾的质量比为2:1）密闭熏蒸灭菌24 h，然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按10：1（质量比）的比例混合，均匀铺展育秧盘里，铺至厚度2cm，在恒温28℃，保湿RH≥80％的条件下，培养7d，再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物，风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后，过200目筛，收集得到深绿木霉DQ2孢子粉。
步骤四：将步骤三得到的深绿木霉DQ1孢子粉、淡紫拟青霉、硅藻土、腐殖酸钠按质量比1000：1：2: 500: 100的比例混合，混匀得到土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB。
本实施例提供的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB的应用：浇灌土壤处理，将所述的将深绿木霉DQ1复合粉剂TLB与水按1：300-500（质量比）溶于水中，搅拌均匀，直接浇灌土壤中，用于活化土壤，提高土壤有机质含量，防治土传病害，线虫、立枯病、灰霉病、纹枯病、根腐病。
实施例3：
这种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB通过以下制备方法制备而成：
步骤一：将深绿木霉DQ1菌株接种于PDA斜面培养基，28℃培养84 h，用灭菌蒸馏水洗下分生孢子，制成孢子液，孢子液中孢子数为106个／mL， 然后按1%（体积比）接入灭菌的PD培养液中，放入28℃，120rpm培养48h；
步骤二：将麸皮、硅藻土、稻壳、水按2:1:1:4（质量比）的比例混合，搅拌均匀后，装入200mL塑料瓶，装入量为塑料瓶高的1/2，然后再121℃高压湿热灭菌20 min，冷却后按1%接种量接入塑料瓶中，上下摇均匀，放在温度28℃，湿度80％培养7 d；将塑料瓶的发酵菌种按质量比：1：1000加入无菌水中，搅拌均匀成制作孢子悬浮液，该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液；
步骤三： 固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素和无菌水（50：25：1：50）（质量比）搅拌均匀后，分装于塑料袋中，于121℃下灭菌30 min后待用；育秧盘设置于固体发酵车间中，对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾混合液（2:1）（质量比）密闭熏蒸灭菌24 h，然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按10：1（质量比）的比例混合，均匀铺展育秧盘里，铺至厚度2cm，在恒温28℃，保湿RH≥80％的条件下，培养7d，再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物，风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后，过200目筛，收集得到深绿木霉DQ2孢子粉。
步骤四：将步骤三得到的深绿木霉DQ1孢子粉、淡紫拟青霉、硅藻土、腐殖酸钠按质量比1000：1：2: 500: 100的比例混合，混匀得到土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB。
本实施例提供的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB的应用：直接施入土壤中，在翻土时，将所述的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB施入土壤中，亩施1公斤，然后浇水保湿处理，用于活化土壤，提高土壤有机质含量，防治土传病害，线虫、立枯病、灰霉病、纹枯病、根腐病。
Claims (3)
1.一种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB，其特征在于：这种土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB通过以下制备方法制备而成：
步骤一：将深绿木霉DQ1菌株接种于PDA斜面培养基，28℃培养72-96 h，用灭菌蒸馏水洗下分生孢子，制成孢子液，孢子液中孢子数为106个／mL， 然后将其按PD培养液的体积的1%接入灭菌的PD培养液中，在28℃，120rpm培养36-48h；
步骤二：将麸皮、硅藻土、稻壳、水按质量比2:1:1:4的比例混合，搅拌均匀后，装入200mL塑料瓶，装入量为塑料瓶高的1/2，然后再121℃高压湿热灭菌20 min，冷却后按1%接种量接入塑料瓶中，上下摇均匀，放在温度28℃，湿度80％培养5-7 d；将塑料瓶的发酵菌种按质量比1：500-1：1000加入无菌水中，搅拌均匀成制作孢子悬浮液，该孢子悬浮液作为固体浅盘发酵种子液；
步骤三：固体浅盘发酵基质以麦麸、硅藻土、链霉素、无菌水按质量比50：25：1：50搅拌均匀后，分装于塑料袋中，于121℃下灭菌20～30 min后待用；育秧盘设置于固体发酵车间中，对固体发酵车间用甲醛和高锰酸钾混合液密闭熏蒸灭菌24h，然后将已灭菌发酵基质和固体浅盘发酵种子液按质量比10：1的比例混合，均匀铺展育秧盘里，铺至厚度1 -2cm，在恒温28℃，保湿RH≥80％的条件下，培养7d，再倒入无菌室中进行风干浅盘发酵产物，风干后的浅盘发酵产物放入低温粉碎仪中粉碎后，过200目筛，收集得到深绿木霉DQ1孢子粉；
步骤四：将步骤三得到的深绿木霉DQ1孢子粉、淡紫拟青霉、硅藻土、腐殖酸钠按质量比1000：1：2: 500: 100的比例混合，混匀得到土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB。
2.一种权利要求1所述的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB的应用，其特征在于：在翻土时，将所述的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB施入土壤中，亩施1公斤，然后浇水保湿处理，用于活化土壤，提高土壤有机质含量，防治土传病害，线虫、立枯病、灰霉病、纹枯病、根腐病。
3.一种权利要求1所述的土壤改良剂深绿木霉DQ1复合粉剂TLB的应用，其特征在于：将所述的将深绿木霉DQ1复合粉剂TLB与水按质量比1：300-500溶于水中，搅拌均匀，直接浇灌土壤中，用于活化土壤，提高土壤有机质含量，防治土传病害，线虫、立枯病、灰霉病、纹枯病、根腐病。
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