CN107075455B

CN107075455B - 具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌hac01菌株及其用途

Info

Publication number: CN107075455B
Application number: CN201580041507.4A
Authority: CN
Inventors: 威廉·霍扎菲尔; 申铉吉; 玄昌骑; 池耀瑟; 朴昭英; 姜智姬
Original assignee: Handong Global University Industry Academic Cooperation Foundation; Atogen Co Ltd
Current assignee: Atogen Co Ltd
Priority date: 2014-08-22
Filing date: 2015-05-27
Publication date: 2021-02-09
Anticipated expiration: 2035-05-27
Also published as: US20170251710A1; WO2016027964A1; KR101500974B1; CN107075455A; US10405569B2

Abstract

本发明涉及具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HAC01菌株、益生菌制剂、抗炎症组合物及用于改善代谢疾病的健康食品组合物，所述益生菌制剂、抗炎症组合物及用于改善代谢疾病的健康食品组合物含有选自所述菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

Description

具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌HAC01菌株及其用途

技术领域

本发明涉及具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌(Lactobaci llusplantarum)HAC01菌株及其用途，更详细而言，涉及具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌HAC01菌株、益生菌制剂、抗炎症组合物及用于改善代谢疾病的健康食品组合物，所述益生菌制剂、抗炎症组合物及用于改善代谢疾病的健康食品组合物含有选自所述菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

背景技术

在整个历史上，乳杆菌一直被人类食用，并且作为对人体健康产生非常有益影响的微生物，其有用性与日俱增。近来，对乳杆菌的研究正积极进行，从而不仅作为普通食品，而且作为健康食品及药品而进行开发等，其应用范围正逐步扩大。这些乳杆菌栖息在动物的肠内，分解动物摄取的营养成分及纤维素等而将其用作能量源，并且生产乳酸及抗生物质等而抑制肠内有害菌的发育，从而对维持肠内健康起到重要的作用。此外，乳杆菌还用于促进动物的生长及改善饲料利用率、增加对病的抵抗力、抑制有害细菌的增殖、减少死亡率、抑制腐烂有毒物质的形成及形成各种维生素。然而，若要发挥上述的功效，从外部流入的乳杆菌应不受任何干扰地到达肠内而显示其功能。为此，在口服时，由胃酸引起的破坏要小，且对胆汁酸的耐性要强。

肥胖在外观上的审美方面也成为社会的话题，但实际上，肥胖的最严重问题是其会引起健康上的严重危险，如糖尿病、高血压等代谢疾病并发症等。这种与肥胖的病态相关的症状为在肥胖个体中出现的全身性慢性炎症(systemic chronic inflammation)。炎症反应为在体内发生的免疫机制之一，当局部性发生时，其为保护身体的重要反应，使得身体免受外部病原菌或病毒的侵入。然而，由于体内免疫反应的失衡，使这种炎症反应全身性、慢性地过度活化时，会对体内发生的代谢作用引起障碍。因肥胖引起的慢性炎症反应是糖尿病、心血管疾病、动脉硬化等各种代谢疾病的原因，并且是将肥胖规定为疾病的最重要的因素。在没有因慢性炎症反应引起的继发性代谢疾病的病发时，肥胖仅为美容上的问题，近期世界卫生组织也将如糖尿病等显著降低生活质量的、能够引发继发性代谢疾病的慢性炎症反应列为理由，并把肥胖规定为疾病。

另一方面，韩国公开专利第2011-0000871号中公开了“具有抗氧化及抗炎症功效的植物乳杆菌HY7711及含有其作为有效成分的产品，”然而，并没有公开本发明的具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌HAC01菌株。

发明内容

要解决的技术问题

本发明是根据上述要求而得出，本发明人从无辣味的白泡菜中分离出耐酸性及耐胆汁性强、没有生成生物胺的能力、对抗生素没有耐性的植物乳杆菌HAC01菌株，并将所述菌株与超高脂肪食物一起经口施用给小鼠时，与对照组相比，确认了炎症缓解效果和血液中胆固醇、中性脂肪等的水平的降低，从而完成了本发明。

技术方案

为了解决上述技术问题，本发明提供具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌HAC01菌株。

此外，本发明提供益生菌制剂，其特征在于，其包含选自所述菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

此外，本发明提供抗炎症组合物，其特征在于，其包含选自所述菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

此外，本发明提供用于改善代谢疾病的健康食品组合物，其特征在于，其包含选自所述菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

有益效果

本发明的具有优异的耐酸性及耐胆汁性、对各种种类的抗生素没有耐性、没有生成生物胺的能力、具有抑制各种引发炎症的细胞因子表达的功效的植物乳杆菌HAC01菌株可以利用为益生菌制剂、缓解慢性炎症的功能性食品、功能性食品添加剂等，并且期待能够利用为用于生产各种乳杆菌发酵乳及发酵产品的发酵食品功能性发酵剂。此外，本发明的植物乳杆菌HAC01菌株可降低血液中葡萄糖、胆固醇及中性脂肪的水平，从而可以应用于用于代谢疾病改善的健康食品中，因此期待其能够具有产业实用性。

附图说明

图1为用血液分析仪测定并分析施用本发明的植物乳杆菌(Lactobacil lusplantarum)HAC01的组(HF-LP)、对照组(HF-PBS)和施用鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)GG益生菌作为参考菌株的组(HF-LG)的小鼠血浆中的葡萄糖(A)、胆固醇(B)及中性脂肪(C)的水平的结果。

图2为对施用本发明的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HAC01的组(HF-LP)、对照组(HF-PBS)和施用鼠李糖乳杆菌GG益生菌作为参考菌株的组(HF-LG)的小鼠的体重变化(A)及内脏脂肪量(B)进行分析的结果。

图3为对施用本发明的植物乳杆菌HAC01的组(HF-LP)、对照组(HF-PBS)和施用鼠李糖乳杆菌GG益生菌作为参考菌株的组(HF-LG)的小鼠中由小鼠的内脏脂肪细胞产生的脂肪因子中与缓解炎症相关的脂联素(A)、以及与引发炎症相关的瘦蛋白(B)、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1(C)及白细胞介素(IL，interleukin)-1b(D)的mRNA表达量进行分析的结果。

图4为对施用本发明的植物乳杆菌HAC01的组(HF-LP)、对照组(HF-PBS)和施用鼠李糖乳杆菌GG益生菌作为参考菌株的组(HF-LG)的小鼠的脾脏中与抗炎症相关的细胞因子白细胞介素-10(A)和转化生长因子(TGF)-β(B)、在调节性T细胞中特异性表达的Foxp3转录因子(C)、作为与引发炎症相关的细胞因子的白细胞介素-12(D)，肿瘤坏死因子(TNF)-α(E)及白细胞介素-6(F)的mRNA表达水平变化进行确认的结果。

图5为示出用酶联免疫吸附法(ELISA)对施用本发明的植物乳杆菌H AC01的组(HF-LP)、对照组(HF-PBS)和施用鼠李糖乳杆菌GG益生菌作为参考菌株的组(HF-LG)的小鼠血清中脂联素(A)和瘦蛋白(B)的变化量进行测定的结果。

具体实施方式

为了实现本发明的目的，本发明提供具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HAC01菌株。

本发明人从白泡菜中分离出作为乳杆菌的植物乳杆菌，并对分离出的乳杆菌的耐酸性及耐胆汁性、抗生素耐性及生成生物胺的能力进行分析的结果，确认了分离出的乳杆菌显示出优异的耐酸性及耐胆汁性，没有抗生素耐性，也没有生成生物胺的能力，因此，将所述分离出的菌株命名为植物乳杆菌HAC01，并于2014年8月6日保藏于韩国生命工学研究院(保藏编号：KCTC 12647BP)。

对于本发明一具体实施方案的菌株，所述抗炎症功效可以通过增加与缓解炎症相关的脂联素蛋白质的水平、降低与引发炎症相关的瘦蛋白的蛋白质水平、抑制与引发炎症相关的单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1，mo nocyte chemoattractant protein-1)、白细胞介素-1b、白细胞介素-12的mR NA表达水平来显示，但并不限定于此。

此外，对于本发明一具体实施方案的菌株，所述代谢疾病改善功效可以为降低血液中的葡萄糖、胆固醇及中性脂肪的水平，但并不限定于此。所述代谢疾病可以为肥胖、糖尿病、高血压、高脂血症、高胆固醇症、动脉硬化症、脂肪肝和心脏病等，但并不限定于此。

此外，本发明提供益生菌制剂，其特征在于，其含有选自本发明的植物乳杆菌HAC01菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

本发明的植物乳杆菌HAC01菌株具有优异的耐酸性及耐胆汁性(表3)，没有生成能够引发过敏性免疫反应的生物胺的能力，并且没有观察到对红霉素、庆大霉素、氨苄西林、四环素、氯霉素、链霉素、环丙沙星及青霉素等抗生素的耐性，从而可有利地用作益生菌制剂。

所述益生菌制剂可以根据本领域公知的方法，以多种剂型和方法来制备及施用。例如，本发明的植物乳杆菌HAC01菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液或干燥物可以与药剂学领域中通常使用的载体进行混合而制备成粉剂(powder)、液剂(液体和溶液(liquids and solution s))、片剂(tablet)、胶囊剂(capsule)、糖浆剂(syrup)、混悬剂(suspension)或颗粒剂(granule)等形式并进行施用。作为所述载体，可例举为粘合剂、润滑剂、崩解剂、赋形剂(vehicle)、加溶剂、分散剂、稳定剂、悬浮剂、色素及香料等，但并不限定于此。此外，施用量可根据在体内的有效成分的吸收度、非活性形式的有效成分的比率、排泄速度、受试者的年龄、性别、物种、状态及疾病的严重程度等进行适当的选择。

此外，本发明提供包含所述益生菌制剂的食品。

本发明的所述益生菌制剂包含选自植物乳杆菌HAC01菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

将本发明的所述益生菌制剂作为食品添加剂来使用时，所述益生菌制剂可以直接添加，或者可以与其它食品或食品成分一起使用，并且可以根据通常的方法来适当使用。有效成分的混合量可以根据其使用目的(预防、健康或治疗性处理)进行适当的调整。一般在制备食品或饮料时，相对于原料，本发明的益生菌制剂添加量为15重量份以下，优选的添加量为10重量份以下。但是，在以健康及卫生为目的或以调节健康为目的的长时间摄取的情况下，混合量可以为上述范围以下，因安全性方面没有任何问题，因此也可以使用上述范围以上的混合量。

此外，本发明提供抗炎症组合物，其特征在于，其含有选自本发明的植物乳杆菌HAC01菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

本发明的抗炎症组合物可以通过提高血清中脂联素(与缓解炎症相关)蛋白质的水平、降低瘦蛋白(与引发炎症相关)蛋白质的水平、在作为主要免疫器官的脾脏中抑制与引发炎症相关的MCP-1、白细胞介素-1b、白细胞介素-12的mRNA的表达来显示抗炎症功效，但并不限定于此。

本发明的抗炎症组合物可以为药学组合物或健康食品组合物的形式，当所述抗炎症组合物为药学组合物时，可以包含药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。当所述抗炎症组合物为健康食品组合物形式时，所述健康食品只要是被摄取用于增加抗炎症活性，就不受特别的限定。所述健康食品包含耐酸性及耐胆汁性优异的植物乳杆菌HAC01菌株，因此可以为酸乳、乳酸菌饮料(Calpis)、奶酪、黄油等乳杆菌发酵乳食品或豆腐、大酱、清国酱、果冻、泡菜等发酵产品等，但并不限定于此。所述发酵乳及发酵产品可以在通常的制备方法中只将菌株替换为本发明的植物乳杆菌HAC01菌株而容易地制备。

此外，本发明提供用于改善代谢疾病的健康食品组合物，其特征在于，其含有选自本发明的植物乳杆菌HAC01菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。

所述健康食品只要被摄取用于预防或改善代谢疾病，就不受特别的限定。

将本发明的用于改善代谢疾病的健康食品组合物作为食品添加剂使用时，所述组合物可以直接添加，或者可以与其它食品或食品成分一起使用，并且可根据通常的方法来适当使用，其中所述用于改善代谢疾病的健康食品组合物含有选自本发明的植物乳杆菌HAC01菌株、所述菌株的培养物、所述培养物的浓缩液及干燥物中的一种以上作为有效成分。有效成分的混合量可根据其使用目的进行适当的调整。一般制备食品或饮料时，相对于原料，本发明的组合物添加量为15重量份以下，优选的添加量为10重量份以下。但是，以健康及卫生为目的或以调节健康为目的的长时间摄取的情况下，所述混合量可以为上述范围以下，因安全性方面没有任何问题，因此也可以使用上述范围以上的量。

所述食品的种类不受特别的限定。可添加所述健康食品组合物的食品可例举如包括肉类、香肠、面包、巧克力、糖类、点心类、饼干类、比萨饼、拉面、其它面类、口香糖类、冰淇淋类的乳制品等，其包含通常意义上的所有健康食品。

本发明的健康饮料组合物与通常的饮料相同，可以进一步含有多种香味剂或甜味剂或天然碳水化合物等作为其它成分。所述天然碳水化合物为如葡萄糖、果糖的单糖，如麦芽糖、蔗糖的二糖，以及如糊精、环糊精的多糖，如木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇等的糖醇。作为甜味剂可以使用如奇异果甜蛋白(thaumatin)、甜菊(stevia)提取物的天然甜味剂或如糖精、阿斯巴甜的合成甜味剂等。

以下，根据实施例详细说明本发明。但下述实施例仅用于例示本发明，本发明的内容并不被下述实施例所限定。

材料及方法

菌株的分离及鉴定

从制备后经过10～15天以上且pH为4.5以下的白泡菜中分离出乳杆菌。在经过高压灭菌的袋子中装入90ml的生理盐水(0.85％NaCl/L)，并加入10g的白泡菜样品后均匀混合，然后取1ml混合物并加至9ml的生理盐水中进行10倍梯度稀释，并反复涂抹于MRS固体培养基中3次。之后，在37℃的培养器中培养48小时以上，之后通过利用0.3％过氧化氢的触酶(catalase)试验和革兰氏染色法分析了经过培养的菌。之后将触酶阴性、革兰氏阳性且为杆(rod)状的菌定为乳杆菌(lactobacillus)预备候选菌后进行分离。

分析被分离菌株的16S rDNA基因核苷酸序列，并查明分类学上的种(species)。菌株核苷酸序列的查明则委托Solgent公司(韩国)来执行。

耐酸性及耐胆汁性测试

乳杆菌与食物一起摄取时，在分泌强胃酸的胃中滞留1小时左右，然后在十二指肠的高浓度胆汁中滞留2小时左右后移动到肠中。乳杆菌只有在这种恶劣的环境中存活并进入肠中才能粘附在肠中，从而给宿主产生好的影响，并能够起到作为益生菌的作用。因此，本发明中实施了通过以与人体(胃和十二指肠)环境相似的条件设定的模拟胃十二指肠通路(SSDP，simulated stomach duodenum passage)方法来进行分离的乳杆菌的耐酸性及耐胆汁性实验。简单而言，将分离的植物乳杆菌菌株在MR S液体培养基中培养18小时，然后将1ml的菌株培养液装入经过灭菌的一次性菌管中，并在4℃下以12,000xg离心分离5分钟后，废弃上层液并用生理盐水洗涤细胞沉淀，所述洗涤过程反复实施2次。之后，去除生理盐水，将沉淀的菌加入到pH调节成3的10ml的MRS液体培养基中后充分混合。在其悬浮液中取1ml进行10倍梯度稀释后，涂抹于MR S固体培养基中并进行计数，确定初始菌的CFU(菌落形成单位)/ml，剩余的9ml在37℃下培养1小时后，连续混合4ml的胆汁酸(混合10g的牛胆汁(oxgall)和100ml的蒸馏水并进行高压灭菌后使用)和17ml的十二指肠液(duodenumjuice；6.4g/L的NaHCO₃、0.239g/L的KCl及1.28g/L的NaCl与蒸馏水充分混合后，将pH调节为7.4，并进行高压灭菌后使用)。在37℃的培养器中培养2小时后，进行10倍梯度稀释并涂抹于MRS固体培养基中，对存活的菌数进行计数。然后，比较经过计数的初始菌的C FU/ml和3小时后存活的菌的CFU/ml，并显示为存活率。

抗生素耐性测试

制备用二倍稀释法以0.025～64μg/ml的浓度加入抗生素(红霉素(erythromycin)、庆大霉素(gentamycin)、氨苄西林(ampicillin)、四环素(tetracycl ine)、氯霉素(chloramphenicol)、链霉素(streptomycin)、环丙沙星(ciproflo xacin)及青霉素G(penicillin G))的MRS固体培养基。将培养18小时的植物乳杆菌菌株接种于混有抗生素的固体培养基中，使其达到10⁵个/斑点(s pot)的密度，然后在37℃下培养24～48小时并测定最小抑菌浓度(MIC)。

生物胺生成测试

制备添加有0.1％的氨基酸前体(L-酪氨酸二钠盐(tyrosine disodium s alt)、L-组氨酸盐酸盐一水合物(histidine monohydrochloride monohydrat e)、L-鸟氨酸盐酸盐(ornithine monohydrochloride)、L-赖氨酸盐酸盐(lysi ne monohydrochloride))的MRS液体培养基，并接种1％分离的植物乳杆菌于含氨基酸前体的MRS液体培养基后，进行5～10次传代培养，从而活化脱羧酶(decarboxylase)。在脱羧酶培养基(将0.5％的胰蛋白胨、0.5％的酵母提取物、0.5％的肉提取物、0.5％的氯化钠、0.25％的葡萄糖、0.05％的聚山梨酯(tween)-80、0.02％的硫酸镁、0.005％的硫酸锰、0.004％的硫酸铁、0.2％的柠檬酸盐、0.001％的硫胺素、0.2％的K₂PO₄、0.01％的碳酸钙、0.005％的吡哆醛-5-磷酸酯(pyridoxal-5-phosphate)、1％的氨基酸、0.006％的溴甲酚紫(bromocresol purple)及2％的琼脂混合于蒸馏水后，将p H调节为5.3并使用)中涂抹具有活化的酶的菌后，在37℃下培养24～48小时，确认颜色是否变成紫色，从而辨别生成生物胺的能力。

脱羧酶培养基中的溴甲酚紫在pH为5.2时会呈黄色，但是当pH上升到6.8时，则会变成紫色。因此，可以利用因生物胺的生成而引起pH上升时变成紫色来确认生物胺的生成。

动物实验

购买24只7周龄的雄性C57BL/6J小鼠(无特定病原体)，然后分成如下3组(每组8只)，在23℃、湿度为55±10％、明/暗周期为12小时的环境中养殖12小时。作为微生物对照组则使用已被商品化的鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG，以下称为LGG)。

A.超高脂肪食物(60％脂肪)+PBS

B.超高脂肪食物(60％脂肪)+分离的菌株

C.超高脂肪食物(60％脂肪)+LGG

所有小鼠经过第1周的适应期后，从本实验的第1周到第12周，喂食超高脂肪食物和PBS或者喂食混合有菌株的超高脂肪食物，向动物经口施用总体积为30μL的PBS或者菌种以3x10⁸cfu/日的浓度稀释于其中的30μL PBS。水和食物以自由采食(ad-libitum)的方式提供。在总共12周的实验期间，以每周1次的间隔测量小鼠的体重，在实验最后一天以颈椎脱位处死小鼠后，取出血液、脾脏、内脏脂肪并记录重量，然后立即保管于-80℃后，在后续实验中使用。

生物指标分析

利用自动化学分析仪(autochemistry analyzer)(迈瑞BS130，迈瑞医疗(MindrayMedical)，中国)分析了血液中的葡萄糖(glucose)、胆固醇、中性脂肪的量，测量是在浦项科技园实施的。此外，血液中的脂联素和瘦蛋白的量是使用特定的小鼠ELISA试剂盒(Komabiotech，韩国)来测定的。

使用迷你RNeasy提取试剂盒(mini RNeasy extraction kit)(普洛麦格(Promega)，美国)，根据制造公司提示的方法提取内脏脂肪和脾脏的总R NA后，利用GoScript逆转录酶试剂盒(GoScript Reverse Transcriptase ki t)(Promega)逆转录成cDNA后使用SYBR预混合EX Taq II(SYBR premi x EX Taq II)(Takara，日本)来确认了mRNA表达量。mRNA表达水平分析是使用实时PCR分析仪Step One Plus(PCR analyzer stepone plus)(美国应用生物系统公司(Applied Biosystems)，美国)来进行分析的，PCR中使用的引物信息如下述表1中所示。

[表1]

PCR引物序列信息

实施例1.植物乳杆菌HAC01菌株的特性

分析由白泡菜中分离的触酶阴性、革兰氏阳性且为杆状的菌株的16S rDNA基因核苷酸序列的结果，确认了其为植物乳杆菌，并将本发明中分离的菌株命名为植物乳杆菌HAC01。

使用API 50CH试剂盒(生物梅里埃(Biomerieux))，并根据该指南的方法来实施，从而确认本发明中分离的植物乳杆菌HAC01菌株的糖利用特性。结果是，本发明的植物乳杆菌HAC01菌株显示出如下述表2中所示的糖利用特性。

[表2]

植物乳杆菌HAC01菌株的糖利用特性结果

实施例2.植物乳杆菌HAC01菌株的耐酸性及耐胆汁性分析

对本发明中分离的植物乳杆菌HAC01菌株的耐酸性及耐胆汁性进行了分析。分析时，与已熟知的作为益生菌菌株的鼠李糖乳杆菌GG进行了比较，并确认到本发明的植物乳杆菌HAC01菌株与比较菌株相比，显示出更优异的耐酸性及耐胆汁性(表3)。

[表3]

植物乳杆菌HAC01菌株的耐酸性及耐胆汁性分析结果

实施例3.植物乳杆菌HAC01菌株的抗生素耐性及生物胺生成与否分析

对分离的植物乳杆菌HAC01菌株的抗生素耐性进行调查的结果，确认了以最小抑制浓度为基准，对红霉素、庆大霉素、氨苄西林、四环素、氯霉素、链霉素、环丙沙星及青霉素共8种抗生素没有抗生素耐性(表4)。

[表4]

植物乳杆菌HAC01菌株的抗生素耐性试验结果

此外，对所述菌株植物乳杆菌HAC01菌株的生成生物胺的能力进行分析的结果，确认了对酪氨酸、组胺、腐胺、尸胺均为阴性，从而确认了本发明的菌株没有生成能够引发过敏性免疫反应的生物胺的能力(表5)。

[表5]

对植物乳杆菌HAC01菌株生成4种不同生物胺的能力进行调查的结果

实施例4.植物乳杆菌HAC01菌株的抗炎症效果及代谢疾病改善效果分析

将植物乳杆菌HAC01菌株与超高脂肪食物一起混合供给小鼠作为饲料后，与对照组(超高脂肪食物+PBS)及比较组(超高脂肪食物+鼠李糖乳杆菌GG)一起对血液中葡萄糖、胆固醇及中性脂肪的变化及炎症相关因子的表达变化进行了分析。

结果是，在与超高脂肪食物一起摄取本发明的植物乳杆菌HAC01菌株的小鼠血浆中，确认了葡萄糖和胆固醇的水平相对于对照组低，且与比较组显示出相似的水平，而另一方面，确认了中性脂肪的水平相对于对照组及比较组低(图1)。此外，还确认了施用本发明菌株的小鼠的体重变化及内脏脂肪量相对于对照组有减少的倾向(图2)。

并且，在提取的小鼠内脏脂肪细胞中，检测出作为具有缓解炎症特性的激素的脂联素的mRNA表达水平相对于对照组和比较组处于较低水平(图3A)，并且可以确认到与引发炎症相关的瘦蛋白、MCP-1及白细胞介素-1b的mRNA表达水平相对于比较组及对照组显示出显著低的水平(图3)。此外，确认在作为对感染或炎症产生反应的重要淋巴器官的脾脏中作为抗炎症细胞因子的白细胞介素-10和TGF-β的mRNA表达水平的结果，并确认与调节性T细胞的形成、维持及功能相关的主要转录因子F oxp3的mRNA表达水平，以及作为引发炎症的细胞因子的白细胞介素-12、TNF-α、白细胞介素-6的mRNA表达水平的结果，确认了在摄取本发明的植物乳杆菌HAC01菌株的小鼠的脾脏中白细胞介素-10、TGF-β及F oxp3的mRNA表达水平相对于对照组及比较组高，并且确认了引发炎症的因子的mRNA表达水平与对照组及比较组相似或处于较低水平(图4)。最后通过ELISA对各组小鼠的血清中作为与引发炎症相关的因子的脂联素的水平及瘦蛋白的水平进行确认的结果，在摄取本发明的植物乳杆菌HAC01菌株的组中，确认到脂联素蛋白的量相对于对照组及比较组高，而对于瘦蛋白，确认到其蛋白量相对于对照组及比较组低(图5)。

[保藏编号]

保藏机构名称：韩国生命工学研究院

保藏编号：KCTC 12647BP

保藏日期：20140806

序列表

<110> 韩东大学校产学协力团

株式会社ATOGEN

<120> 具有抗炎症及代谢疾病改善功效的植物乳杆菌HAC01菌株及其用途

<130> PCT1513-CN

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ctgggaagtg ggtgcagtta 20

<210> 11

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 11

cactgatacg cctgagtg 18

<210> 12

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 12

gtgagcgctg aatcgaaa 18

<210> 13

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 13

cccatcccca ggagtcttg 19

<210> 14

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 14

ccatgactag gggcactgta 20

<210> 15

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 15

tcacatctca tctccccaaa 20

<210> 16

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 16

tctgctaaca cattgagggg 20

<210> 17

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 17

actgccagaa gaggcactcc 20

<210> 18

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 18

cgatcacccc gaagttca 18

<210> 19

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 19

agttgccttc ttgggactga 20

<210> 20

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 引物

<400> 20

cagaattgcc attgcacaac 20

Claims

1.植物乳杆菌HAC01菌株，其保藏编号：KCTC 12647BP，其特征在于，其具有抗炎症及代谢疾病改善功效。

2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌HAC01菌株，其特征在于，所述菌株具有耐酸性及耐胆汁性，不具有抗生素耐性，并且不具有生成生物胺的能力。

3.根据权利要求1所述的植物乳杆菌HAC01菌株，其特征在于，所述菌株抑制单核细胞趋化蛋白-1、白细胞介素-1b、白细胞介素-12的表达，从而具有抗炎症功效。

4.根据权利要求1所述的植物乳杆菌HAC01菌株，其特征在于，所述菌株降低血液中的葡萄糖、胆固醇及中性脂肪的水平，从而具有代谢疾病改善功效。

5.益生菌制剂，其特征在于，其含有选自权利要求1～4中任一项所述的菌株作为有效成分。

6.食品，其特征在于，其包含权利要求5所述的益生菌制剂。

7.抗炎症组合物，其特征在于，其含有选自权利要求1～4中任一项所述的菌株作为有效成分。

8.用于改善代谢疾病的健康食品组合物，其特征在于，其含有选自权利要求1～4中任一项所述的菌株作为有效成分。