CN106721021A - 一种仔猪无抗生素饲料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种仔猪无抗生素饲料及其制备方法,属于饲料配方设计与加工工艺领域,主要由以下重量份数的原料制成:玉米50‑60份,蒸汽鱼粉2‑4份,豆粕10‑16份,膨化大豆1‑5份,面粉3‑5份,乳清粉3‑6,椰子油0.5‑1,大豆油0.5‑1,抗菌肽0.02‑0.03,益生菌1‑3,丝兰提取物0.012份,石粉0.3‑0.7份,食盐0.3‑0.5份,磷酸氢钙0.8‑1.2份,氨基酸0.3‑0.8份,复合酶0.03‑0.05份,复合维生素0.3‑0.4份,复合微量元素0.2‑0.6份;本发明从仔猪无抗日粮营养标准、采用抗菌肽等措施替代抗生素,通过添加益生菌等方面综合解决以上问题,日增重提高6.17%,日均采食量提高5.38%,腹泻率降低8.72%。仔猪肠道健康状态好,抗病力强,为早出栏、不用药、提供安全肉品奠定前期基础。
Description
技术领域
本发明属于饲料配方设计与饲料加工工艺领域,具体地涉及一种仔猪无抗生素的饲料,并涉及该饲料的制备方法。
背景技术
随着饲料特别是配合饲料的产生,使规模化、现代化的生猪养殖成为可能,而在饲料中添加一些饲料添加剂,比如添加生猪生长所需的微量元素等,对生猪的生长发育起到积极的作用,可以使生猪的日增重提高,缩短生猪的出栏时间,降低生猪的饲养成本,取得较好的经济效益,从而带来了生猪饲养业的快速发展壮大,也使人们日常生活中的肉食品可以得到有力的保障。然而,在生猪饲养过程中,为了使生猪能够通过食物获得一定的抗病能力,往往需要在饲料中添加抗生素类添加剂,这些成分的添加虽然提高了猪肉总产量,然而抗生素对动物生长及其产品质量的副作用主要包括:使细菌产生抗药性、造成畜禽机体的免疫力下降、引起畜禽内源性感染和二重感染、导致肉蛋奶品质下降、会在畜产品和环境中造成残留等,直接威胁到人类健康与安全。
解决猪健康问题必须依靠综合措施,在继续加强和规范猪病防治的疫苗和药物管理的同时,寻求新思路,研究和应用新理论、新技术、新产品十分重要和必要。现代医学和生物学研究表明,营养是决定健康的关键因素。营养是一切生命活动的物质基础,既影响动物生产潜力和效率,也决定了动物健康状况。
公开号:103750073A的中国发明《一种增强生猪免疫力提高猪肉品质的猪饲料及其制备方法》公开了一种增强生猪免疫力提高猪肉品质的猪饲料及其制备方法,其主要是由玉米、豆粕、麸皮、大青叶、益母草、苦瓜、猪笼草等按一定重量配比制备而成,本发明具有丰富的蛋白质、维生素、氨基酸等营养物质及清热解毒,滋肾润肺的健体功能,按量搭配饲养不仅可增强生猪免疫力,而且还提高了猪肉的品质及营养价值。
公开号:103404730A的中国发明《一种含丝兰提取物的仔猪饲料配方》公开了一种含丝兰提取物的仔猪饲料配方;主要由下述重量份的物料混合而成:玉米粉35~65份、高粱粉15~30份、豆粕15~30份、酒糟10~20份、小麦次粉10~20、麦麸5~15份、丝兰提取物5~20份、食盐1~8份;该发明用于仔猪饲养,可增强仔猪免疫力,提高其生长速度。但其配方不够科学合理,不能满足仔猪的营养需求,且该发明中添加了土霉素。
公开号:104945484A的中国发明《一种抗菌肽及其制备方法与应用》公开了一种人工设计合成的活性抗菌多肽,其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,其分子量为1483.88Da,等电点为10.30。该抗菌肽在仔猪饲料中应用,主要用于抑菌、提高断奶仔猪日增重和采食量、降低料重比、降低断奶仔猪腹泻率,以及改善断奶仔猪肠道功能。与现有技术相比,本发明的抗菌肽具有分子量小、人工合成方便、杀菌作用强、细胞毒性低等优点,在仔猪饲料中应用能够显著改善仔猪肠道健康、提高仔猪的生长性能。
公开号:105325695A的中国发明《一种抗腹泻中草药发酵型乳仔猪饲料的制备方法》公开了一种抗腹泻中草药发酵型乳仔猪饲料的制备方法,属于饲料和微生物发酵技术领域。本发明按比例将山楂、黄芪、陈皮、党参、车前草、乌梅、金银花、玉米粉、豆粕与水混合水调浆制成发酵培养基,升温浸泡、灭菌,并降温到38-40℃时接入产酶地衣芽孢杆菌、产酶黑曲霉和凝结乳酸芽孢杆菌,发酵24-108h后,干燥制成抗腹泻中草药发酵型乳仔猪饲料。该饲料富含抗腹泻中草药、小肽和乳酸,具有营养高、易消化、适口性好、抗营养因子含量低、促生长性能好等特点。该发明主要通过发酵特定组合的中药来抗仔猪腹泻,存在起效快,成本较高的缺点。
公开号:103719585A的中国发明《一种仔猪饲料》公开了一种仔猪饲料,主要由下列重量份的原料制成:玉米粉10-18份、豆粕8-15份、鱼粉5-10份、贝壳粉1-8份、麸皮10-20份、糖精钠0.5-2份、类乳剂1-10份、微生物制剂1-5份、微量元素0.1-1份、食盐0.1-1份。饲料中的鱼粉可以满足仔猪对动物性蛋白的营养需求,贝壳粉可以为仔猪提供充足的钙源。酵母粉、枯草芽孢杆菌粉和低壳聚糖配合使用,可以调节仔猪肠体内益生菌菌群,增强仔猪的自身免疫力,减少疾病害的发生;糖精钠为仔猪饲料提供充足的甜味,和提供乳味的类乳剂配合使用,为仔猪提供类似母乳的味道,诱导仔猪进食。该发明配方过于简单,组成不够合理,营养不均衡,不能满足仔猪的营养需求。
公开号:101999560A的中国发明《一种低系酸力乳仔猪饲料及其制备方法》公开了一种低系酸力乳仔猪饲料的配制与生产方法,采用玉米、豆粕、发酵豆粕、乳清粉、维生素和微量元素等作为原料,通过膨化、粉碎后低温制粒等特殊加工方式制成;本发明改变了常规乳仔猪饲料高系酸力的缺点,降低了乳仔猪的低消化率的情况,提高饲料适口性,改善乳仔猪肠道健康,提高乳仔猪生产成绩。该发明成分复杂,制备不易,营养不均衡,不利于推广应用。
上述专利文献中所述饲料均有不同的优势特点,而本发明根据仔猪无抗日粮营养标准、采用抗菌肽等措施替代抗生素,具有氨基酸吸收利用率高,适口性好的优点;通过添加益生菌等,确保仔猪肠道健康,增强抗病力,为早出栏、不用药、提供安全肉品奠定前期基础。
发明内容
本发明以仔猪为研究对象,设计抗病营养标准,通过添加抗菌肽、丝兰提取物、益生菌等方面来设计日粮配方,确保仔猪肠道健康,增强抗病力。
本发明采用的技术方案是:一种仔猪无抗生素饲料,由以下重量份数的原料制成:玉米50-60份,蒸汽鱼粉2-4份,豆粕10-16份,膨化大豆1-5份,面粉3-5份,乳清粉3-6,椰子油0.5-1,大豆油0.5-1,抗菌肽0.02-0.03,益生菌1-3,丝兰提取物0.012份,石粉0.3-0.7份,食盐0.3-0.5份,磷酸氢钙0.8-1.2份,氨基酸0.3-0.8份,复合酶0.03-0.05份,复合维生素0.3-0.4份,复合微量元素0.2-0.6份;
进一步的,所述复合酶组成为:纤维素酶1,蛋白酶2,α-淀粉酶2;
进一步的,所述复合维生素组成为:维生素D2.5-6份、生物素0.8-1.2份、叶酸1-2份;
进一步的,所述复合微量元素组成为:酵母硒1-2份、氧化锌1-2份。
所述仔猪无抗生素饲料:净能2450Kcal/kg,蛋白质含量18%。
所述仔猪无抗生素饲料:抗病条件下的理想氨基酸比例Lys:(Met+Cys):Thr:Trp:Arg:Val=100:65:77:22:108:90。
所述丝兰提取物由北京华辰兴业科技有限公司提供。
所述仔猪无抗生素饲料于:使用阶段为断奶两周后——15kg的仔猪。
所述益生菌较佳的为保藏编号CGMCC No.12789的酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)tlj2016,;
较佳的,所述酵母菌由如下方法培养制备:
(1)摇瓶培养
取tlj2016斜面菌种一环,接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液;
摇瓶培养基(g/L):(NH4)2SO4 6、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O 3、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0;
(2)5L发酵罐培养
将种子液按10%质量百分比接种量,接入装有3L发酵培养基的发酵罐中,30℃,通气量6L/min,罐压0.03MPa,500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养,发酵至30h时,一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸,总发酵时间为50h;
发酵完毕,调节pH至6.5,喷雾干燥得酵母菌粉剂;
发酵培养基(g/L):(NH4)2SO4 10、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O 8、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0。
本发明同时提供一种仔猪无抗生素饲料的制备方法,包括如下步骤:按配方,将玉米和豆粕先混合,经粉碎机粉碎,粉碎筛片孔径1.0mm,然后调质1min,在0.272-0.275Mpa蒸汽压力与80度条件下对产品进行熟化,再将熟化后原料与其他原料混合,于65度条件下制粒。
有益效果:
从仔猪无抗日粮营养标准、采用抗菌肽等措施替代抗生素,通过添加益生菌等方面综合解决以上问题,日增重提高6.17%,日均采食量提高5.38%,腹泻率降低8.72%。仔猪肠道健康状态好,抗病力强,为早出栏、不用药、提供安全肉品奠定前期基础。
本发明采用的是无抗配合饲料,玉米进行脱皮处理,使用膨化大豆、既保留了谷物的原始香味,又提高了其中的营养物质的消化率;没有添加抗生素,因此,本发明对于猪只健康、猪肉安全、回归自然、绿色消费具有重要意义。特别是添加高产谷胱苷肽的保藏菌种tlj2016,谷胱苷肽作为体内重要的抗氧化剂和自由基清除剂,如与自由基、重金属等结合,从而把机体内有害的毒物转化为无害的物质,排泄出体外,对改善乳猪的身体机能很有益处;
生物素和叶酸促进IFN-γ合成,缓解PCV2对猪淋巴组织的破坏,促进免疫应答反应和PCV2抗体生成,发病率降低10%。维生素D通过促进仔猪轮状病毒(RV)抗体和肠道黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIgA)生成,调节RIG-1信号通路关键分子表达,降低RV攻击下仔猪肠道黏膜炎症反应,显著降低腹泻率。色氨酸可促进生长猪IGF-1分泌及特异性抗体合成,缓解因接种PRRSV和PRV弱毒苗引起的生长抑制。苏氨酸通过增强淋巴细胞功能、促进特异和非特异性抗体产生、下调TLR表达、减少炎性因子产生以及促进蛋白质合成等途径缓解PRV对仔猪的损伤。精氨酸可下调仔猪TLR4和TLR5及其信号途径关键分子表达,缓解沙门氏杆菌对免疫系统的激活。
在氧化应激状况下,仔猪硒的代谢和需要量发生变化,0.2mol/kg的硒添加量不能满足抗体抗氧化的需要;硒抗氧化应激的机制可能与影响三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)的分泌、调节细胞因子白细胞介素-1β(1L-1β)和白细胞介素-6(1L-6)的生成以及NF-kB活性有关。硒源和硒水平对仔猪生长性能及免疫功能具有调节效应,从而确定仔猪获得最佳免疫保护效应的硒源和硒水平。对锌的研究发现,NRC(1998)推荐的仔猪锌需要量足以满足正常条件下仔猪生长和适宜免疫力的需要,但在免疫应激条件下需要大大提高锌的添加量。
抗菌肽是广泛存在于细菌、植物、两栖动物、软体动物、鱼类、鸟类和哺乳动物体内的一类小分子多肽。
丝兰提取物成分中能够消除表面张力,改善肠道pH,提高小肠黏膜细胞通透性,可以提高对营养物质的乳化能力,尤其是脂肪和脂溶性物质的吸收率,从而提高饲料利用率和畜禽生产性能。
益生菌不仅能通过改善肠道微生态平衡促进机体健康,而且能够减少养殖环境及粪便中氨气、硫化氢、有机磷等有害物质的含量,减少畜牧业对环境造成的污染,保护生态环境,具有明显的经济效益和社会效益。
具体实施方式
所述酿酒酵母菌株具体为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016,该菌株已于2016年7月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.12789,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100101。
所述酿酒酵母tlj2016的最适生长pH为6.0-6.5,最适生长温度为28-35℃;
所述酿酒酵母tlj2016是从一株宁夏果园中分离得到的酿酒酵母出发菌株经以下步骤得到:
原始出发菌种→试管活化→硫酸二乙酯(DES)诱变→高渗平板筛选→亚硝基胍(NTG)诱变筛选→高渗平板初筛→摇瓶筛选→发酵复筛(产谷胱苷肽GSH能力)→传代稳定性试验。
经过诱变后获得的菌株tlj2016,其葡萄糖耐受能力以及L-半胱氨酸耐受能力均得到提高,一方面在高浓度葡萄糖培养下能够提高细胞密度,另一方面L-半胱氨酸耐受能力的提高将有利于GSH在胞内大量合成,从而提高菌株大规模生产GSH的能力。
本发明所采用的酿酒酵母对葡萄糖的耐受能力达到300g/L,利于其在高浓度葡萄糖条件下生产GSH;在5L发酵罐中发酵生产GSH终浓度达到3308mg/L;耐受L-半胱氨酸的能力远高于出发菌株,在5mmol/L L-半胱氨酸作用下仍能缓慢生长,在40mmol/LL-半胱氨酸作用下仍能保持GSH大量合成;耐盐能力达到18%,有利于扩展其应用领域。
1.DES诱变选育
1)在超净台上取试管斜面上的出发菌株1一环,接入装有50mL麦芽汁培养基的250mL三角瓶中,200rpm,30℃培养10h左右,使菌体处于对数生长前期。
2)取5mL菌液,5000rpm离心10min收集菌体,用生理盐水洗涤2次。
3)用pH7.0磷酸缓冲液稀释成107个/mL菌悬液。
4)取32mL pH7.0的磷酸钾缓冲液、8mL菌悬液、0.4mL DES在预先放入转子的150mL三角瓶中充分混合,使DES最终浓度为1%(v/v)。
5)在30℃摇床中150rpm反应30min,取1mL混合液,加入0.5mL 25%Na2S2O3溶液中止反应。
6)稀释涂布于含150g/L KCl的麦芽汁培养基平皿中,在30℃培养2-3天后挑取菌落最大的菌株1。
2.亚硝基胍诱变
1)在超净台上取试管斜面上的酿酒酵母菌菌株1一环,接入装有50mL麦芽汁培养基的250mL三角瓶中,200rpm,30℃培养10h左右,使菌体处于对数生长前期。
2)取5mL菌液5000rpm离心10min收集菌体,用生理盐水洗涤2次。
3)用pH6.0磷酸缓冲液稀释成107个/mL菌悬液。
4)取10mL菌悬液转移至100mL三角瓶中,加入10mg的NTG,配制成终浓度为10mg/mL的NTG溶液,并加入4-5滴丙酮,以利于NTG溶解。
5)在30℃下200rpm振荡反应30min,5000rpm离心10min收集菌体,用无菌生理盐水洗涤数次,中止反应。
6)适当稀释涂布,取最后稀释度的菌液0.2mL,涂布于含200g/L KCl的麦芽汁培养基平皿中。在30℃培养2-3天后挑取菌落20支。
3.摇瓶初筛
1)在超净台上分别取上述20支酿酒酵母菌各一环,分别接入装有50mL麦芽汁培养基的250mL三角瓶中,200rpm,30℃培养12h左右,使菌体处于对数生长中期。
2)取5mL菌液,接入装有50mL高渗麦芽汁培养基(葡萄糖浓度为300g/L)中的250mL三角瓶中,200rpm,30℃培养3-4天,每天检测葡萄糖浓度和乙醇浓度变化。发酵结束后,比较20株菌种的葡萄糖和乙醇消耗速率、最终残糖浓度和乙醇浓度、葡萄糖对乙醇的转化率以及杂酸含量。
3)选择葡萄糖消耗速率快、最终残糖浓度低和乙醇浓度高的5株菌命名为Y-1,Y-2,Y-3,Y-4,Y-5。
4.发酵复筛
将步骤3中所得的5株菌Y-1,Y-2,Y-3,Y-4,Y-5以及出发菌株,分别按照10%质量分数接种量,在装有30mL液体培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h,取发酵液测定GSH浓度;
液体培养基(g/L):(NH4)2SO4 6、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O 3、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1;
GSH测定方法:发酵液离心洗涤后得新鲜酵母,30℃下,40%乙醇处理3h,离心取上清液做GSH测定样品;
采用四氧嘧啶法进行GSH测定:其原理为GSH上的-SH与四氧嘧啶反应,生成的物质在305nm处有吸收峰,且与谷胱甘肽浓度成线性关系,故可用紫外分光光度计进行定量测定GSH含量。
表1:GSH检测结果
菌株 | 出发菌株 | Y-1 | Y-2 | Y-3 | Y-4 | Y-5 |
GSH浓度(mg/L) | 127.9 | 195.7 | 172.3 | 263.2 | 216.5 | 185.2 |
由表1结果可知,菌株Y-3具有最高的GSH发酵能力,因此确定Y-3为最终的生产菌株,并将其命名为tlj2016。
5.遗传稳定性试验
将tlj2016菌在斜面上连续十次传代,并用摇瓶复筛的方法检测每次传代后的发酵情况。实验发现,在斜面上连续十次传代,该菌种性状没有明显变化,各项性能指标都正常,说明该菌种的遗传稳定性较强。
酿酒酵母tlj2016高糖条件下发酵产GSH能力实验
(1)摇瓶培养
取tlj2016斜面菌种一环,接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液;
摇瓶培养基(g/L):(NH4)2SO4 6、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O 3、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0;
(2)5L发酵罐培养
将种子液按10%质量分数接种量,接入装有3L发酵培养基的发酵罐中,30℃,通气量6L/min,罐压0.03MPa,500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养,发酵至30h时,一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸,总发酵时间为50h;
发酵培养基(g/L):(NH4)2SO4 10、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O 8、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0;
发酵结束后,测定发酵液中GSH的含量为3308mg/L。
酿酒酵母tlj2016L-半胱氨酸耐受力实验
将出发菌株以及tlj2016斜面菌种各一环,分别接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养进行培养,在培养至12h时,向摇瓶中加入不同终浓度的L-半胱氨酸,再培养10h,测定细胞干重,结果表2、3;
摇瓶培养基(g/L):(NH4)2SO4 6、葡萄糖20、K2HPO4·3H2O 3、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0;
表2:出发菌株L-半胱氨酸耐受力
表3 tlj2016L-半胱氨酸耐受力
L-半胱氨酸浓度mmol/L | 0 | 5 | 10 | 15 | 20 | 40 |
tlj2016干重g/L | 25.7 | 28.5 | 23.6 | 21.2 | 20.6 | 18.7 |
GSH浓度(mg/L) | 73.2 | 98.3 | 113.5 | 121.7 | 127.5 | 135.8 |
从表2的结果可以看出,对于出发菌株,培养基中添加L-半胱氨酸,细胞停止生长,并且开始自溶,导致GSH增长率随着L-半胱氨酸浓度的升高而降低;从表3的结果可以看出,低浓度L-半胱氨酸下,tlj2016仍能够缓慢生长,随着L-半胱氨酸浓度的提高,tlj2016菌株的细胞干重缓慢下降,而GSH浓度持续增长,这一结果将有利于GSH生产过程中通过添加前体氨基酸-L-半胱氨酸促进GSH的生产。
酿酒酵母tlj2016耐盐能力实验
取tlj2016菌液1mL接种菌种于含有不同NaCl浓度的(含量梯度为0%、2%、5%、10%、15%、18%)的10mL YPD液体培养基(pH=6.5),置于30℃下分别培养24h,每个处理3个重复。各取1ml样品菌液于9ml生理盐水中混匀,制备稀释度溶液,取0.1ml稀释液于YPD固体平板中涂布,于30℃生化培养箱中倒置培养36小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平板上的菌数个数。结果见表4,可知该菌的耐盐浓度为18%,说明tlj2016不仅可以在常规环境中生存,在高盐条件下依然具有活力,可应用于酱油、腌制品等高盐食品加工过程中耗糖产谷胱甘肽。
表4 耐盐能力检测(×107cfu/ml)
实施例1
一种仔猪无抗生素饲料,由以下重量份数的原料制成:
玉米55份,蒸汽鱼粉3份,豆粕13份,膨化大豆3份,面粉4份,乳清粉4,椰子油0.5,大豆油1,抗菌肽0.02,益生菌2份,丝兰提取物0.012份,石粉0.5份,食盐0.4份,磷酸氢钙1.0份,氨基酸0.6份,复合酶0.04份,复合维生素0.35份,复合微量元素0.4份;
所述仔猪无抗生素饲料:净能2450Kcal/kg,蛋白质含量18%。
所述仔猪无抗生素饲料:抗病条件下的理想氨基酸比例Lys:(Met+Cys):Thr:Trp:Arg:Val=100:65:77:22:108:90。
所述复合酶组成为:纤维素酶1,蛋白酶2,α-淀粉酶2;
所述复合维生素组成为:维生素D 4份、生物素1份、叶酸1份;
所述复合微量元素组成为:酵母硒2份、氧化锌1份。
所述丝兰提取物由北京华辰兴业科技有限公司提供。
所述仔猪无抗生素饲料于:使用阶段为断奶两周后——15kg的仔猪。
所述益生菌为酵母菌;
所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016,保藏编号为CGMCC No.12789;
所述酵母菌由如下方法培养制备:
(1)摇瓶培养
取tlj2016斜面菌种一环,接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液;
摇瓶培养基(g/L):(NH4)2SO4 6、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O 3、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0;
(2)5L发酵罐培养
将种子液按10%接种量,接入装有3L发酵培养基的发酵罐中,30℃,通气量6L/min,罐压0.03MPa,500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养,发酵至30h时,一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸,总发酵时间为50h;
发酵完毕,调节pH至6.5,喷雾干燥得酵母菌粉剂;
发酵培养基(g/L):(NH4)2SO4 10、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O 8、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0。
本发明同时提供一种仔猪无抗生素饲料的制备方法,包括如下步骤:按配方,将玉米和豆粕先混合,经粉碎机粉碎,粉碎筛片孔径1.0mm,然后调质1min,在0.272-0.275Mpa蒸汽压力与80度条件下对产品进行熟化,再将熟化后原料与其他原料混合,于65度条件下制粒。
实施例2
一种仔猪无抗生素饲料,由以下重量份数的原料制成:
玉米50份,蒸汽鱼粉4份,豆粕16份,膨化大豆1份,面粉5份,乳清粉3,椰子油1,大豆油0.5,抗菌肽0.03,益生菌1,丝兰提取物0.012份,石粉0.7份,食盐0.3份,磷酸氢钙0.8份,氨基酸0.3份,复合酶0.05份,复合维生素0.4份,复合微量元素0.2份;
所述仔猪无抗生素饲料:净能2450Kcal/kg,蛋白质含量18%。
所述仔猪无抗生素饲料:抗病条件下的理想氨基酸比例Lys:(Met+Cys):Thr:Trp:Arg:Val=100:65:77:22:108:90。
所述复合酶组成为:纤维素酶1,蛋白酶2,α-淀粉酶2;
所述复合维生素组成为:维生素D 6份、生物素0.8份、叶酸1份;
所述复合微量元素组成为酵母硒1份、氧化锌2份。
所述丝兰提取物由北京华辰兴业科技有限公司提供。
所述仔猪无抗生素饲料于:使用阶段为断奶两周后——15kg的仔猪。
所述益生菌为保藏菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016,保藏编号为CGMCC No.12789;
所述酵母菌由本领域常规方法培养制备。
实施例3
一种仔猪无抗生素饲料,由以下重量份数的原料制成:
玉米60份,蒸汽鱼粉2份,豆粕10份,膨化大豆5份,面粉5份,乳清粉6,椰子油0.5,大豆油0.5,抗菌肽0.03,益生菌3,丝兰提取物0.012份,石粉0.3份,食盐0.5份,磷酸氢钙1.2份,氨基酸0.8份,复合酶0.03份,复合维生素0.4份,复合微量元素0.6份;
所述仔猪无抗生素饲料:净能2450Kcal/kg,蛋白质含量18%。
所述仔猪无抗生素饲料:抗病条件下的理想氨基酸比例Lys:(Met+Cys):Thr:Trp:Arg:Val=100:65:77:22:108:90。
所述复合维生素组成为:维生素D2.5份、生物素1.2份、叶酸2份;
所述复合微量元素组成为:酵母硒2份、氧化锌1份。
所述丝兰提取物由北京华辰兴业科技有限公司提供。
所述仔猪无抗生素饲料于:使用阶段为断奶两周后——15kg的仔猪。
所述益生菌为保藏菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016,保藏编号为CGMCC No.12789;
实施例4
试验例:采用实施例1-3制备的仔猪无抗生素饲料与市售同类饲料做以下验证
1 试验材料
1.1 试验时间
2016年9月-11月完成。
1.2 试验地点
动物试验分别在辽宁省凌源禾丰种猪场和辽宁省凤城种猪场实施。
1.3 试验日粮
试验设对照组和试验组共4个处理,每个处理4个重复。试验组日粮配方为本发明,对照组为市售常见仔猪配合饲料。
2 结果与分析
2.1 凌源禾丰种猪场试验结果
对照组 | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | |
初始体重(kg) | 10.52 | 10.52 | 10.52 | 10.52 |
日增重(g) | 400 | 435 | 438 | 442 |
日均采食量(g) | 647 | 690 | 685 | 695 |
料重比 | 1.62 | 1.59 | 1.56 | 1.57 |
腹泻率(%) | 1.75 | 1.59 | 1.50 | 1.55 |
结果表明:试验组日增重提高9.58%,日均采食量提高6.65%,腹泻率降低11.62%。
2.2 凤城种猪场试验结果
对照组 | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | |
初始体重(kg) | 10.81 | 10.81 | 10.81 | 10.81 |
日增重(g) | 405 | 430 | 433 | 428 |
日均采食量(g) | 650 | 685 | 690 | 685 |
料重比 | 1.60 | 1.59 | 1.59 | 1.60 |
腹泻率(%) | 1.95 | 1.78 | 1.75 | 1.76 |
结果表明:试验组日增重提高6.26%,日均采食量提高5.64%,腹泻率降低9.57%。
Claims (8)
1.一种仔猪无抗生素饲料,由以下重量份数的原料制成:玉米50-60份,蒸汽鱼粉2-4份,豆粕10-16份,膨化大豆1-5份,面粉3-5份,乳清粉3-6,椰子油0.5-1,大豆油0.5-1,抗菌肽0.02-0.03,益生菌1-3,丝兰提取物0.012份,石粉0.3-0.7份,食盐0.3-0.5份,磷酸氢钙0.8-1.2份,氨基酸0.3-0.8份,复合酶0.03-0.05份,复合维生素0.3-0.4份,复合微量元素0.2-0.6份。
2.根据权利要求1所述一种仔猪无抗生素饲料,其特征在于:所述复合酶组成为:纤维素酶1,蛋白酶2,α-淀粉酶2。
3.根据权利要求1所述一种仔猪无抗生素饲料,其特征在于:所述复合维生素组成为:维生素D2.5-6份、生物素0.8-1.2份、叶酸1-2份。
4.根据权利要求1所述一种仔猪无抗生素饲料,其特征在于:所述复合微量元素组成为:酵母硒1-2份、氧化锌1-2份。
5.根据权利要求1所述一种仔猪无抗生素饲料,其特征在于:所述益生菌为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016,保藏编号为CGMCC No.12789。
6.根据权利要求1所述一种仔猪无抗生素饲料,其特征在于:制备方法包括如下步骤:按配方,将玉米和豆粕先混合,经粉碎机粉碎,粉碎筛片孔径1.0mm,然后调质1min,在0.272-0.275Mpa蒸汽压力与80度条件下对产品进行熟化,再将熟化后原料与其他原料混合,于65度条件下制粒。
7.根据权利要求1所述一种仔猪无抗生素饲料,其特征在于:由以下重量份数的原料制成:
玉米55份,蒸汽鱼粉3份,豆粕13份,膨化大豆3份,面粉4份,乳清粉4,椰子油0.5,大豆油1,抗菌肽0.02,益生菌2份,丝兰提取物0.012份,石粉0.5份,食盐0.4份,磷酸氢钙1.0份,氨基酸0.6份,复合酶0.04份,复合维生素0.35份,复合微量元素0.4份;
所述仔猪无抗生素饲料:净能2450Kcal/kg,蛋白质含量18%;
所述仔猪无抗生素饲料:抗病条件下的理想氨基酸比例Lys:(Met+Cys):Thr:Trp:Arg:Val=100:65:77:22:108:90;
所述复合酶组成为:纤维素酶1,蛋白酶2,α-淀粉酶2;
所述复合维生素组成为:维生素D 4份、生物素1份、叶酸1份;
所述复合微量元素组成为:酵母硒2份、氧化锌1份;
所述丝兰提取物由北京华辰兴业科技有限公司提供;
所述仔猪无抗生素饲料于:使用阶段为断奶两周后——15kg的仔猪;
所述益生菌为酵母菌;
所述酵母菌为保藏菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)tlj2016,保藏编号为CGMCC No.12789;
所述酵母菌由如下方法培养制备:
(1)摇瓶培养
取tlj2016斜面菌种一环,接入装有30mL摇瓶培养基的250mL摇瓶中150rpm,30℃培养30h得种子液;
摇瓶培养基(g/L):(NH4)2SO4 6、葡萄糖35、K2HPO4·3H2O 3、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0;
(2)5L发酵罐培养
将种子液按10%质量百分比接种量,接入装有3L发酵培养基的发酵罐中,30℃,通气量6L/min,罐压0.03MPa,500rpm,恒pH6.0条件下进行发酵培养,发酵至30h时,一次性添加终浓度为25mmol/L的L-半胱氨酸,总发酵时间为50h;
发酵完毕,调节pH至6.5,喷雾干燥得酵母菌粉剂;
发酵培养基(g/L):(NH4)2SO4 10、葡萄糖100、K2HPO4·3H2O 8、KH2PO4 0.5、酵母粉11、MnSO4 0.1、KCL 0.1、FeSO4 0.1、MgSO4·7H2O 0.1,pH6.0;
所述仔猪无抗生素饲料的制备方法,包括如下步骤:按配方,将玉米和豆粕先混合,经粉碎机粉碎,粉碎筛片孔径1.0mm,然后调质1min,在0.272-0.275Mpa蒸汽压力与80度条件下对产品进行熟化,再将熟化后原料与其他原料混合,于65度条件下制粒。
8.一种仔猪无抗生素饲料的制备方法,包括如下步骤:按配方,将玉米和豆粕先混合,经粉碎机粉碎,粉碎筛片孔径1.0mm,然后调质1min,在0.272-0.275Mpa蒸汽压力与80度条件下对产品进行熟化,再将熟化后原料与其他原料混合,于65度条件下制粒。
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