CN106721009A - 促生长提品质饲料添加剂及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种促生长提品质饲料添加剂的生产方法，包括以下步骤：1、液体发酵制得菌种液。2、固体分时发酵。3、低温二级沸腾干燥。具体发酵步骤：在发酵罐中分别培养枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、粪肠球菌，制得成熟菌液。将杜仲叶粉、麸皮、玉米粉、豆粕、木聚糖酶、中温淀粉酶、果胶酶、轻质碳酸钙等原料混合均匀，置于固体发酵罐中，升温至40℃酶解40min，68℃~70℃，保持30分钟，降温到30~37℃，分别依次接入枯草芽孢、酿酒酵母、粪肠球菌菌种液，固态发酵48小时。放出用二级旋转低温沸腾干燥脱去水分，最终水分≤8%。本发明所提供的方法发酵后，饲料中活菌数达20亿/g，小肽≥10%，绿原酸含量≥0.1%。
Description
技术领域
本发明涉及生物饲料发酵领域，具体为一种促生长提品质饲料添加剂及制备方法。
背景技术
随着养殖业的快速发展和生活水平的不断提高，人们对肉制品的需求已经从量到质转变。品质优良、风味鲜美、安全、营养的肉制品是畜牧业未来发展的方向。现代饲料工业中，饲料添加剂是其不可或缺的成分，也是实现饲料工业化生产和养殖现代化的重要物质前提。
安全、高效、营养、健康具有促生长改善肉品质和的饲料添加剂不仅能促进动物的生长速度，还能改善肉品质，提高风味，缩短出栏时间，降低养殖风险，增加养殖效益，有利于促进饲料和畜牧行业健康有序的发展，对提高养殖效益，降低养殖风险具有重要意义。
杜仲叶具有清除体内垃圾，加强人体细胞物质代谢，防止肌肉骨骼老化，平衡人体血压，分解体内胆固醇，降低体内脂肪，恢复血管弹性，利尿清热，广谱抗菌，兴奋中枢神经，提高白血球药理作用。现代研究进一步证明还有调节血压、降低人体胆固醇含量、预防心脑血管硬化、促进记忆、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、提高综合免疫力以及预防老年骨质疏松等功效，成为老龄化社会一个受世人关注的保健用品。
益生菌发酵杜仲叶粉，采用现代生物工程技术，在人体外建立一个“工业化肠胃系统”，采用人体肠道内的多种益生菌，对中药进行预消化、分解和转化，把大分子的中间物质，分解转化成为能够被直接吸收的有效小分子物质，发酵后相药效提高4-28倍。
发明内容
本发明的目的在于提供一种促生长提品质饲料添加剂，经微生物发酵，降解杜仲叶粉中的抗营养因子，同时提高有效成分的消化吸收率。经微生物发酵后，单宁和果胶等抗营养因子降解率分别达到99.0%和66.1%，杜仲绿原酸和乳酸菌功能小肽分别提高13~15%和8~10%。通过发酵改善了适口性和利用率，抗营养因子显著降低，最大限度提高杜仲叶粉的饲用价值。
本发明是采用以下技术方案来实现：
一种促生长提品质饲料添加剂，由以下成分按比例构成，按杜仲叶粉60~80%，麸皮10~20%，玉米粉5~10%，豆粕3~8%，木聚糖酶0.01~0.05%，中温淀粉酶0.005~0.01%，果胶酶0.005~0.01%，轻质碳酸钙0.2~0.5%，水5%比例，混合均匀。
上述饲料添加剂的制备方法，包括粉碎、原料混合、原料酶解及杀菌、接种菌液进行固态分时发酵、低温二级沸腾干燥、包装。
具体如下：
（1）、粉碎：用粉碎机将杜仲叶粉粉碎成20目粉。
（2）、原料混合：按杜仲叶粉（20目）60~80%，麸皮（大片）10~20%、玉米粉（40目）5~10%、豆粕（40目）3~8%、木聚糖酶0.01~0.05%、中温淀粉酶0.005~0.01%、果胶酶0.005~0.01%、轻质碳酸钙0.2~0.5%，水5%比例，混合均匀。
（3）、原料酶解及杀菌：将上所述原料放入固体发酵罐，蒸汽升温至37~40℃，保温酶解40min；二次升温至 68~70℃，保持30min，快速降温到30℃。
（4）、先接入枯草芽孢杆菌，维持30℃发酵8~12h；接入酿酒酵母菌，维持28℃发酵6~8h；接入粪肠球菌，维持37℃发酵24~32h。
（5）、低温二级沸腾干燥：
一级干燥：物料放出后分批进入干燥塔，保持进风温度70~75℃，风量220m3/min，品温30℃，干燥20~30min，水分15~20%放出，至二级干燥塔；
二级干燥：物料分批进入干燥塔，保持进风温度60~65℃，风量150m3/min，品温36℃以下，干燥30min，水分8%以下放出，粉碎30目。
步骤（4）中，枯草芽孢杆菌液接种量5~10%，枯草芽孢杆菌液的制备如下：
（1）、菌种斜面制备：将保存的菌种DY-98-M1取两环菌膜于10ml生理盐水中，100℃水浴2min，自来水激冷，涂布到牛肉膏蛋白胨培养基平板上，30℃培养24h；挑取单菌落接入牛肉膏蛋白胨培养基斜面上，30℃培养36h，置入4℃冰箱备用；其中，牛肉膏蛋白胨培养基配方为：蛋白胨 1%，牛肉膏 0.3%，酵母膏0.2%，氯化钠 0.2%，琼脂 2%，pH 7.0～7.2，121℃灭菌30min。
（2）、种子液制备：取无菌生理盐水，加入菌种斜面，用刮刀将菌种剥离，倾入接种瓶中。
（3）、一级种子罐种子培养：按照0.5%的接种量将种子液接种到一级种子罐，种子罐装液量为总体积70%（500L装液350L），在30℃，搅拌转速180r/min，通风量0.6vvm，罐压0.05Mpa条件下培养16小时，镜检，菌数合格时，转入二级种子罐培养。其中一级种子罐培养基配方为：豆饼粉1.5%，玉米粉3.5%，麸皮5.5%，磷酸二氢钾0.03%，磷酸氢二钠0.3%，碳酸钠0.135%，泡敌适量（0.02%）。消前pH7.0，实消40min，消后pH6.0。
（4）、二级发酵罐培养：将一级种子罐菌液全部接入二级发酵罐中，二级发酵罐装液量50%，在30℃，搅拌转速180r/min条件下，罐压0.05Mpa，培养时间4h，第5h开始每小时升温2℃，最高至38℃，第9h后每小时降温2℃，第13h后保持30℃培养；通气量前6个小时0.4vvm，后6个小时0.6vvm；镜检，菌数达到20亿CFU/ml时，转入暂存罐。其中二级发酵罐培养基配方为：豆饼粉2.4%，玉米粉5.6%，麸皮8.8%，磷酸二氢钾0.03%，磷酸氢二钠0.3%，碳酸钠0.135%，泡敌适量（0.02%）。消前pH7.0，实消40分钟，消后pH6.0。
步骤（4）中，酿酒酵母菌液接种量5~10%；酿酒酵母菌液的制备如下：
（1）、菌种制备：将保存的菌种DY-38-M2取菌膜涂布到PDA培养基平板上，30℃培养3d，挑取单菌落接入PDA试管培养基，28℃培养3~5d。其中PDA培养基配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15~20g，水1000ml自然pH；制法：马铃薯去皮后，切成小块，加水煮烂（煮沸20-30min），用4层纱布过滤，再加糖和琼脂，加热溶化后在补足水分至1000 ml，121℃灭菌40min。
（2）、种母瓶制备：配制YEPD培养基，150ml培养基分装到500ml三角瓶中，121℃灭菌25min，用PDA试管斜面菌种接入种母瓶，28℃培养12h。其中YEPD培养基：酵母粉10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，蒸馏水1000mL，pH6.0，121℃湿热灭菌20min。
（3）、一级种子罐：按照0.5%的接种量将种母菌液接种到一级种子罐，种子罐装液量为总体积80%，在28℃，通风量0.2vvm，罐压0.05Mpa条件下培养24h。其中一级种子罐培养基配方为YEPD培养基；酵母粉10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，蒸馏水1000mL，pH6.0，121℃湿热灭菌20min。
（4）、二级发酵罐： 按照1%的接种量将种母菌液接种到发酵罐，装液量为总体积80%，在28℃，通风量0.2vvm，罐压0.05Mpa条件下培养24h，菌数达到10亿CFU/ml时，转入暂存罐。其中二级发酵罐培养基配方为：糖蜜8%，尿素0.05%，磷酸二氢钾0.05%。
步骤（4）中，粪肠球菌液接种量5~10%；粪肠球菌液的制备如下：
（1）、菌种的制备：将斜面保存的粪肠球菌在蛋白胨加富培养基平板上活化3次，挑取平板上透明圈较大的单菌落，接入液体试管，37℃培养12~16h后，以1%接种量接入种母液体培养基，培养18~24h作为种子液；其中蛋白胨加富培养基配方为：蛋白胨 1%，牛肉膏 0.3%，酵母膏0.2%，氯化钠 0.2%，轻质碳酸钙1%，琼脂 2%，pH 7.0～7.2，121℃灭菌30min；种母液体培养基配方为：蛋白胨4%，牛肉膏0.5%，氯化钠0.5%，葡萄糖4%，猪肝粉0.3%，牛心粉0.3%，碳酸钙0.5%。
（2）、摇瓶种子培养：种母液体培养液按照5~10%的接种量接入到一级种子罐培养基中，在37℃培养箱中静置培养16~20h；
按照2~5%接种量将一级种子罐种子液接到二级种子罐培养基中，在37℃，罐压0.03~0.05MPa，搅拌60r/min条件下培养12~18h，待总菌数达到1~3×109CFU/ml以上时，转入发酵罐培养；其中种子罐培养基配方同种母液体培养基。
（3）、发酵罐培养：按照5~10%的接种量将二级种子罐种子液转入发酵罐；在37℃，罐压0.03~0.05MPa，搅拌60r/min条件下培养12~18h，待总菌数达到30亿CFU/ml以上时，转入暂存罐。其中发酵罐培养基配方为：蛋白胨3.7%，猪肝浸粉0.5%，氯化钠0.5%，葡萄糖4%，杜仲提取物0.5%，碳酸钙0.5%。
所述葡萄糖溶液中葡萄糖含量为发酵液总量的2~4%。
本发明所提供的方法发酵后，饲料添加剂中活菌数达20亿CFU/g，小肽≥10%，绿原酸含量≥0.1%。
该饲料添加剂使用时的添加比例为2~5kg/t。
为了验证效果，分别在安徽，山东，河南、河北，陕西等地做动物实验。安徽区试验结果如下：
1、安徽蚌埠，试验，共21天。养殖规模110头母猪，800头育肥猪。试验猪品种为三元猪。详细试验结果见表1。
表1
结果分析：试验组初始重稍低于对照组，但日增重和采食量高于对照组，而且料肉比低于对照组。试验结果说明产品提高了饲料利用率、采食量和日增重。每头猪每天多长二两三（115克），料肉比降低5.9%。
2、安徽安庆宿松试验，共32天。规模经产母猪260，后备母猪60头。育肥2400头左右。品种为三元猪，含有一定太湖体系。详细试验结果见表2。
表2
结果分析：试验组平均初始重较高，平均日增重增加110g。
3、山东菏泽市巨野县共28天试验，规模：母猪62头，育肥360头。品种为三元。详细试验结果见表3。
表3
结果分析：上述可知试验组初始重略低于对照组，但末重高于对照组，且料肉比低于对照组。每头猪每天多长三两八（190克），料肉比降低25.1%。
本发明产品的作用是，通过有益菌发酵降低抗营养因子，同时改善该饲料适口性和利用率，并利用乳酸菌调节动物肠道菌群平衡，最大限度提高杜仲叶粉绿原酸、桃叶珊瑚苷等有效成分的释放与吸收，从而达到促生长提品质的效果。
本发明设计合理，具有生产成本低，效果好、安全，无残留，抗应激，促生长，提高肉蛋奶品质等作用。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施例进行详细说明。
实施例1
一种促生长提品质饲料添加剂，由如下比例的组分制得：杜仲叶粉75%，麸皮15%、玉米粉5%、豆粕8%、木聚糖酶0.05%、中温淀粉酶0.005%、果胶酶0.01%、轻质碳酸钙0.5%，水5%比例，混合均匀。
上述饲料添加剂的制备方法包括如下步骤：
（1）、粉碎：用粉碎机将杜仲叶粉粉碎成20目粉。
（2）、原料混合：将杜仲叶粉、麸皮、玉米粉、豆粕、木聚糖酶、中温淀粉酶、果胶酶、轻质碳酸钙混合，加入水，混合均匀。
（3）、原料酶解及杀菌：将上所述原料放入固体发酵罐，蒸汽升温至37~40℃，保温酶解40min。二次升温至 68℃~70℃，保持30min，快速降温到30℃。
（4）、先接入枯草芽孢杆菌液5~10%，维持30℃发酵8~12h。接入酿酒酵母菌液5~10%，维持28℃发酵6~8h。接入粪肠球菌液5~10%维持37℃发酵24~32h。
（5）、低温二级沸腾干燥：
一级干燥：物料放出后分批进入干燥塔，保持进风温度70~75℃，风量220m3/min，品温30℃，干燥20~30min，水分15~20%放出，至二级干燥塔。
二级干燥：物料分批进入干燥塔，保持进风温度60~65℃，风量150m3/min，品温36℃以下，干燥30min，水分8%以下放出，粉碎30目。
实施例2
一种促生长提品质饲料添加剂，由如下比例的组分制得：杜仲叶粉80%，麸皮20%、玉米粉10%、豆粕5%、木聚糖酶0.03%、中温淀粉酶0.01%、果胶酶0.005%、轻质碳酸钙0.5%，水5%比例，混合均匀。
其制备方法同实施例1。
实施例3
一种促生长提品质饲料添加剂，由如下比例的组分制得：杜仲叶粉60%，麸皮10%、玉米粉8%、豆粕3%、木聚糖酶0.01%、中温淀粉酶0.01%、果胶酶0.01%、轻质碳酸钙0.2%，水5%比例，混合均匀。
其制备方法同实施例1。
最后所应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照本发明实施例进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，都不脱离本发明的技术方案的精神和范围，其均应涵盖权利要求保护范围中。
Claims (5)
1.一种促生长提品质饲料添加剂，其特征在于：由以下成分按比例构成，按杜仲叶粉60~80%，麸皮10~20%，玉米粉5~10%，豆粕3~8%，木聚糖酶0.01~0.05%，中温淀粉酶0.005~0.01%，果胶酶0.005~0.01%，轻质碳酸钙0.2~0.5%，水5%比例，混合均匀。
2.一种促生长提品质饲料添加剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）、粉碎：用粉碎机将杜仲叶粉粉碎成20目粉；
（2）、原料混合：按杜仲叶粉60~80%，麸皮10~20%、玉米粉5~10%、豆粕3~8%、木聚糖酶0.01~0.05%、中温淀粉酶0.005~0.01%、果胶酶0.005~0.01%、轻质碳酸钙0.2~0.5%，水5%比例，混合均匀；
（3）、原料酶解及杀菌：将上所述原料放入固体发酵罐，升温至37~40℃，保温酶解40min；二次升温至 68~70℃，保持30min，快速降温到30℃；
（4）、先接入枯草芽孢杆菌，维持30℃发酵8~12h；接入酿酒酵母菌，维持28℃发酵6~8h；接入粪肠球菌，维持37℃发酵24~32h；
（5）、低温二级沸腾干燥：
一级干燥：物料放出后分批进入干燥塔，保持进风温度70~75℃，风量220m3/min，品温30℃，干燥20~30min，水分15~20%放出，至二级干燥塔；
二级干燥：物料分批进入干燥塔，保持进风温度60~65℃，风量150m3/min，品温36℃以下，干燥30min，水分8%以下放出，粉碎30目。
3.根据权利要求2所述的促生长提品质饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，枯草芽孢杆菌液接种量5~10%，枯草芽孢杆菌液的制备如下：
（1）、菌种斜面制备：将保存的菌种取两环菌膜于10ml生理盐水中，100℃水浴2min，自来水激冷，涂布到牛肉膏蛋白胨培养基平板上，30℃培养24h；挑取单菌落接入牛肉膏蛋白胨培养基斜面上，30℃培养36h，置入4℃冰箱备用；其中，牛肉膏蛋白胨培养基配方为：蛋白胨 1%，牛肉膏 0.3%，酵母膏0.2%，氯化钠 0.2%，琼脂 2%，pH 7.0～7.2，121℃灭菌30min；
（2）、种子液制备：取无菌生理盐水，加入菌种斜面，用刮刀将菌种剥离，倾入接种瓶中；
（3）、一级种子罐种子培养：按照0.5%的接种量将种子液接种到一级种子罐，在30℃，搅拌转速180r/min，通风量0.6vvm，罐压0.05Mpa条件下培养16h，镜检，菌数合格时，转入二级种子罐培养；其中一级种子罐培养基配方为：豆饼粉1.5%，玉米粉3.5%，麸皮5.5%，磷酸二氢钾0.03%，磷酸氢二钠0.3%，碳酸钠0.135%，泡敌0.02%；
（4）、二级发酵罐培养：将一级种子罐菌液全部接入二级发酵罐中，在30℃，搅拌转速180r/min条件下，罐压0.05Mpa，培养时间4h，第5h开始每小时升温2℃，最高至38℃，第9h后每小时降温2℃，第13h后保持30℃培养；通气量前6个小时0.4vvm，后6个小时0.6vvm；镜检，菌数达到20亿CFU/ml时，转入暂存罐；其中二级发酵罐培养基配方为：豆饼粉2.4%，玉米粉5.6%，麸皮8.8%，磷酸二氢钾0.03%，磷酸氢二钠0.3%，碳酸钠0.135%，泡敌0.02%。
4.根据权利要求2所述的促生长提品质饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，酿酒酵母菌液接种量5~10%；酿酒酵母菌液的制备如下：
（1）、菌种制备：将保存的菌种取菌膜涂布到PDA培养基平板上，30℃培养3d，挑取单菌落接入PDA试管培养基，28℃培养3~5d；其中PDA培养基配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15~20g，水1000ml自然pH；制法：马铃薯去皮后，切成小块，加水煮烂，用4层纱布过滤，再加糖和琼脂，加热溶化后在补足水分至1000 ml，121℃灭菌40min；
（2）、种母瓶制备：配制YEPD培养基，150ml培养基分装到500ml三角瓶中，121℃灭菌25min，用PDA试管斜面菌种接入种母瓶，28℃培养12h；其中YEPD培养基：酵母粉10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，蒸馏水1000mL，pH6.0，121℃湿热灭菌20min；
（3）、一级种子罐：按照0.5%的接种量将种母菌液接种到一级种子罐，在28℃，通风量0.2vvm，罐压0.05Mpa条件下培养24h；其中一级种子罐培养基配方为YEPD培养基；
（4）、二级发酵罐： 按照1%的接种量将种母菌液接种到发酵罐，在28℃，通风量0.2vvm，罐压0.05Mpa条件下培养24h，菌数达到10亿CFU/ml时，转入暂存罐；其中二级发酵罐培养基配方为：糖蜜8%，尿素0.05%，磷酸二氢钾0.05%。
5.根据权利要求2所述的促生长提品质饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，粪肠球菌液接种量5~10%；粪肠球菌液的制备如下：
（1）、菌种的制备：将斜面保存的粪肠球菌在蛋白胨加富培养基平板上活化3次，挑取平板上透明圈最大的单菌落，接入液体试管，37℃培养12~16h后，以1%接种量接入种母液体培养基，培养18~24h作为种子液；其中蛋白胨加富培养基配方为：蛋白胨 1%，牛肉膏 0.3%，酵母膏0.2%，氯化钠 0.2%，轻质碳酸钙1%，琼脂 2%，pH 7.0～7.2，121℃灭菌30min；种母液体培养基配方为：蛋白胨4%，牛肉膏0.5%，氯化钠0.5%，葡萄糖4%，猪肝粉0.3%，牛心粉0.3%，碳酸钙0.5%；
（2）、摇瓶种子培养：种母液体培养液按照5~10%的接种量接入到一级种子罐培养基中，在37℃培养箱中静置培养16~20h；
按照2~5%接种量将一级种子罐种子液接到二级种子罐培养基中，在37℃，罐压0.03~0.05MPa，搅拌60r/min条件下培养12~18h，待总菌数达到1~3×109CFU/ml以上时，转入发酵罐培养；其中种子罐培养基配方同种母液体培养基；
（3）、发酵罐培养：按照5~10%的接种量将二级种子罐种子液转入发酵罐；在37℃，罐压0.03~0.05MPa，搅拌60r/min条件下培养12~18h，待总菌数达到30亿CFU/ml以上时，转入暂存罐；其中发酵罐培养基配方为：蛋白胨3.7%，猪肝浸粉0.5%，氯化钠0.5%，葡萄糖4%，杜仲提取物0.5%，碳酸钙0.5%。
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