CN106520584A - 酵母菌和乳酸菌共培养用培养基及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基及其制备方法，培养基包括以下重量份数的组分：糙米4‑6份、红糖5‑7份和纯净水112‑132份；制备方法包括以下步骤：步骤一、将4‑6重量份的糙米，蒸煮成糙米饭；步骤二、将5‑7重量份的红糖加2重量份的纯净水溶解后，进行杀菌，制得红糖水；步骤三、将糙米饭、红糖水和纯净水混合，制得培养基。本发明制备的培养基成分简单又能满足酵母菌和乳酸菌繁殖的需要，稳定性好，成本低，保存时间长。

Description

酵母菌和乳酸菌共培养用培养基及其制备方法

技术领域

本发明涉及微生物领域。更具体地说，本发明涉及酵母菌和乳酸菌共培养用培养基及其制备方法。

背景技术

乳酸菌是一类可发酵碳水化合物而主要生成大量乳酸的细菌的总称，通常都是革兰氏阳性菌及非病原性细菌。乳酸菌在生长代谢的过程中，不仅会产生供自身生长的酶类，还可以产生特殊功能的酶，如双歧因子不仅能够促进双歧杆菌的生长，还有可使肠道内的有益茵群增值的特殊生理功能。乳酸菌代谢还可以产生有机酸，降低胃肠道内的pH值，酸性的环境可以使病原菌无法正常的生长、定植；产生的过氧化氢可以激活过氧化氢酶，从而抑制和杀灭过氧化氢酶阳性细菌(大肠杆菌类、沙门氏菌属、假单胞菌属等)；产生的细菌素可以抑制葡萄球菌、梭状芽孢杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌的生长。除此之外，乳酸菌还可产生双乙酰等多种代谢产物且乳酸菌本身可以刺激巨噬细胞，产生干扰素和抗体，促进细胞免疫，促进机体非特异性免疫的反应和特异性免疫的反应，提高机体的抗病能力，增强免疫力。在胃肠道内，厌氧的乳酸菌可以定植，对调节胃肠道菌群平衡、提高机体免疫力有积极的作用。基于以上生理功能，将乳酸菌应用于发酵饲料，代谢产生的有机酸不仅改变了饲料的气味和适口性，同时产生的过氧化氢、细菌素等还可对饲喂动物的机体产生有益的影响。

酵母菌一般泛指能发酵糖类并以芽殖或裂殖的方式进行无性繁殖的一类单细胞真菌。酵母细胞含有丰富的蛋白质、维生素以及各种酶等，是医药、化工和食品发酵工业的重要原料。在农业方面，酵母菌可用于单细胞蛋白(SCP)的生产以及动物饲料的发酵。所以，将酵母菌应用于发酵饲料中，不仅能够使饲喂对象可以吸收利用其本身产生的菌体蛋白和维生素，发酵同时产生的酶类还可以降解饲料中的抗营养成分，使发酵后的饲料更具有营养性。

酵母菌和乳酸菌拥有丰富的酶系和多种经济价值很高的生理活性物质，是继动物蛋白和植物蛋白后的另一种重要蛋白质来源，其发酵产品是优质的饲料添加剂，因此，具有良好的开发利用价值。而目前用于培养酵母菌及乳酸菌的脱脂乳及各菌种的种子培养基虽营养成分丰富，可满足酵母菌和乳酸菌生长繁殖的需要，但是由于其成本高，不宜用来大规模生产酵母菌和乳菌。而大豆、玉米、花生中也含有丰富的营养物质，可以用作酵母菌和乳酸菌的培养基。一些蔬菜如胡萝卜、黄瓜、番茄等也可作为混合培养酵母菌与乳酸菌增殖培养的培养基，但需添加大量的碳源和氮源，使生产操作过于复杂。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基，其成分简单又能满足酵母菌和乳酸菌繁殖的需要，稳定性好，成本低，保存时间长。

本发明的另一个目的是提供一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，其操作简单，适宜大规模生产。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基，包括以下重量份数的组分：

糙米4-6份、红糖5-7份和纯净水112-132份。

一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、将4-6重量份的糙米，洗净，蒸煮成糙米饭，备用；

步骤二、将5-7重量份的红糖加2重量份的纯净水溶解后，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，制得红糖水，备用；

步骤三、将所述步骤一中制得的糙米饭、所述步骤二中制得的红糖水和110-130重量份的纯净水混合，制得培养基。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤三之后，还包括：

步骤四、向步骤三中制得的培养基中加入木醋液至每千克培养基中含有0.1-0.2mL木醋液后，混合均匀，之后向培养基中加入缓冲溶液调节培养基的pH值至5-6。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述缓冲溶液为pH值为7的HAc-NaAc缓冲溶液。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤一中将糙米洗净之后，蒸煮之前，还包括：

将葡萄碾碎后与糙米、黄豆粉按质量比为0.5:1:0.5混合后，浸入10-20重量份的水中，之后向水中加入0.1-0.8重量份的纤维素酶、0.1-1重量份的果胶酶、0.1-1.5重量份的淀粉酶和0.1-1重量份的蛋白酶，并调节pH值至5-6，在温度为40-55℃下酶解2-3h，之后蒸煮20-30min，制得糙米饭。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤四之后，还包括：

步骤五、将保水剂、活化的牡蛎壳粉和沸石粉按质量比为4:1:1混合后，制得混合粉末，备用；

步骤六、将步骤四中制得的培养基表面的混合液用虹吸管抽出后，将5-30重量份的混合粉末浸泡在混合液中至混合液被混合粉末完全吸收，且保水剂吸收有自重200-300倍的混合液后，再将吸收有混合液的混合粉末与抽出混合液后的培养基混合均匀。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤六之后，还包括：

步骤七，在搅拌下向步骤六中制得的培养基中喷洒5-10重量份的质量分数为20-30％的红糖水。

本发明至少包括以下有益效果：

本发明提供的培养基成分简单又能满足酵母菌和乳酸菌繁殖的需要，稳定性好，成本低，保存时间长。

本发明提供的培养基中含有糙米、红糖、木醋液，糙米含有丰富的淀粉、蛋白质、脂肪、维生素及11种矿物质。红糖中含有葡萄糖、果糖等多种单糖和多糖类能量物质及叶酸、微量物质和氨基酸、纤维素等物质，含有纤维素、多糖等有机酸，为酵母菌和乳酸菌提供丰富的碳源、氮源和其他生长因子，满足酵母菌和乳酸菌的生长繁殖需要。木醋液加入食用菌的培养基中，对食用菌的菌丝体、子实体的生长有明显促进作用，能使实用菌增产21-42％。

本发明对葡萄、糙米和黄豆粉进行了酶解，有利于将纤维素、果胶、淀粉和蛋白质等水解为葡萄糖和氨基酸，供酵母菌和乳酸菌利用，酶解能破坏糙米和葡萄的细胞壁，也有利于细胞内有效成分的溶出，为酵母菌和乳酸菌的繁殖提供碳源、氮源和其他生长因子。

乳酸菌和酵母菌宜生长在潮湿的环境中，在用固体培养基进行培养时，上部干化较快，且乳酸菌和酵母菌周围易积累大量的代谢产物，导致培养基的营养成分分布不均匀，影响乳酸菌和酵母菌的繁殖。本发明在培养基中加入了混合粉末，混合粉末具有很强的吸水性，能吸收培养基中的水、木醋液、葡萄糖和其他生长因子后缓慢释放，不断供给乳酸菌和酵母菌，从而能提高乳酸菌和酵母菌的产量。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1

一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基，包括以下重量份数的组分：

糙米5份、红糖6份和纯净水122份。

本方案提供的培养基中含有糙米和红糖，糙米含有丰富的淀粉、蛋白质、脂肪、维生素及11种矿物质。红糖中含有葡萄糖、果糖等多种单糖和多糖类能量物质及叶酸、微量物质和氨基酸、纤维素等物质，含有纤维素、多糖等有机酸，为酵母菌和乳酸菌提供丰富的碳源、氮源和其他生长因子，满足酵母菌和乳酸菌的生长繁殖需要。

一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、将5重量份的糙米，洗净，蒸煮成糙米饭，备用；

步骤二、将6重量份的红糖加2重量份的纯净水溶解后，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，制得红糖水，备用；

步骤三、将所述步骤一中制得的糙米饭、所述步骤二中制得的红糖水和120重量份的纯净水混合，制得培养基。该培养基为固液混合培养基，糙米饭浸入水中。

实施例2

在实施例1的基础上，所述步骤三之后，还包括：

步骤四、向步骤三中制得的培养基中加入木醋液至每千克培养基中含有0.15mL木醋液后，混合均匀，之后向培养基中加入缓冲溶液调节培养基的pH值至5。为酵母菌和乳酸菌的生长提供适宜的酸度环境，通过在培养基中加入木醋液，能促进菌丝体、子实体的生长。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述缓冲溶液为pH值为7的HAc-NaAc缓冲溶液。

实施例3

在实施例1的基础上，所述步骤一中将糙米洗净之后，蒸煮之前，还包括：

将葡萄碾碎后与糙米、黄豆粉按质量比为0.5:1：0.5混合后，浸入15重量份的水中，之后向水中加入0.4重量份的纤维素酶、0.5重量份的果胶酶、0.12重量份的淀粉酶和0.5重量份的蛋白酶，并调节pH值至6，在温度为50℃下酶解2.5h，之后蒸煮25min，制得糙米饭，高温蒸煮能使酶失活，这样酶不会水解酵母菌的细胞壁。对葡萄、糙米和黄豆粉进行了酶解，酶解能破坏糙米和葡萄的细胞壁，有利于将纤维素、果胶、淀粉和蛋白质等水解为葡萄糖和氨基酸，供酵母菌和乳酸菌直接利用，通过破坏糙米和葡萄的细胞壁，也有利于细胞内有效成分的溶出，为酵母菌和乳酸菌的繁殖提供碳源、氮源和其他生长因子。

实施例4

在实施例2的基础上，所述步骤四之后，还包括：

步骤五、将保水剂、活化的牡蛎壳粉和沸石粉按质量比为4:1:1混合后，制得混合粉末，备用；混合粉末具有极强的吸水性，能吸收水、木醋液、氨基酸、葡萄糖等有效成分后缓慢释放，既能保持培养基的湿度，又能为乳酸菌和酵母菌的生长提供碳源、氮源和生长因子。

步骤六、将步骤四中制得的培养基表面的混合液用虹吸管抽出后，将10重量份的混合粉末浸泡在混合液中至混合液被混合粉末完全吸收，且保水剂吸收有自重300倍的混合液后，再将吸收有混合液的混合粉末与抽出混合液后的培养基混合均匀。该培养基为固体培养基，但湿度较大，近视于液体培养基。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤六之后，还包括：

步骤七，在搅拌下向步骤六中制得的培养基中喷洒6重量份的质量分数为25％的红糖水。通过红糖水进一步润湿糙米饭、混合粉末等的表面，使培养基中的湿度更大，并使混合粉末吸收更多的水分直至无法再继续吸收水分，这样混合粉末不会吸收糙米饭表面的水分，待糙米饭的水分含量较低时，再将水分和其他成分缓慢释放出来。

实施例5

一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基，包括以下重量份数的组分：

糙米4份、红糖5份和纯净水112份。

一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、将4重量份的糙米，洗净，蒸煮成糙米饭，备用；

步骤二、将5重量份的红糖加2重量份的纯净水溶解后，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，制得红糖水，备用；

步骤三、将所述步骤一中制得的糙米饭、所述步骤二中制得的红糖水和110重量份的纯净水混合，制得培养基。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤三之后，还包括：

步骤四、向步骤三中制得的培养基中加入木醋液至每千克培养基中含有0.1mL木醋液后，混合均匀，之后向培养基中加入缓冲溶液调节培养基的pH值至5。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述缓冲溶液为pH值为7的HAc-NaAc缓冲溶液。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤一中将糙米洗净之后，蒸煮之前，还包括：

将葡萄碾碎后与糙米、黄豆粉按质量比为0.5:1:0.5混合后，浸入10重量份的水中，之后向水中加入0.1重量份的纤维素酶、0.1重量份的果胶酶、0.1重量份的淀粉酶和0.1重量份的蛋白酶，并调节pH值至5，在温度为40℃下酶解2h，之后蒸煮20min，制得糙米饭。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤四之后，还包括：

步骤五、将保水剂、活化的牡蛎壳粉和沸石粉按质量比为4:1:1混合后，制得混合粉末，备用；

步骤六、将步骤四中制得的培养基表面的混合液用虹吸管抽出后，将5重量份的混合粉末浸泡在混合液中至混合液被混合粉末完全吸收，且保水剂吸收有自重200倍的混合液后，再将吸收有混合液的混合粉末与抽出混合液后的培养基混合均匀。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤六之后，还包括：

步骤七，在搅拌下向步骤六中制得的培养基中喷洒5重量份的质量分数为20％的红糖水。

实施例6

一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基，包括以下重量份数的组分：

糙米6份、红糖7份和纯净水132份。

一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、将6重量份的糙米，洗净，蒸煮成糙米饭，备用；

步骤二、将7重量份的红糖加2重量份的纯净水溶解后，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，制得红糖水，备用；

步骤三、将所述步骤一中制得的糙米饭、所述步骤二中制得的红糖水和130重量份的纯净水混合，制得培养基。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤三之后，还包括：

步骤四、向步骤三中制得的培养基中加入木醋液至每千克培养基中含有0.2mL木醋液后，混合均匀，之后向培养基中加入缓冲溶液调节培养基的pH值至6。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述缓冲溶液为pH值为7的HAc-NaAc缓冲溶液。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤一中将糙米洗净之后，蒸煮之前，还包括：

将葡萄碾碎后与糙米、黄豆粉按质量比为0.5:1:0.5混合后，浸入20重量份的水中，之后向水中加入0.8重量份的纤维素酶、1重量份的果胶酶、1.5重量份的淀粉酶和1重量份的蛋白酶，并调节pH值至6，在温度为55℃下酶解3h，之后蒸煮30min，制得糙米饭。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤四之后，还包括：

步骤五、将保水剂、活化的牡蛎壳粉和沸石粉按质量比为4:1:1混合后，制得混合粉末，备用；

步骤六、将步骤四中制得的培养基表面的混合液用虹吸管抽出后，将30重量份的混合粉末浸泡在混合液中至混合液被混合粉末完全吸收，且保水剂吸收有自重300倍的混合液后，再将吸收有混合液的混合粉末与抽出混合液后的培养基混合均匀。

所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法中，所述步骤六之后，还包括：

步骤七，在搅拌下向步骤六中制得的培养基中喷洒10重量份的质量分数为30％的红糖水。

实验1

将植物乳酸杆菌(Lb.plantarum)ST-Ⅲ菌株(CGMCC NO.0847，购自光明乳业研究院基础研究部)以1％(V/V)的接种量分别接入商品化的MRS培养基(对照组)和本发明实施例1-6的培养基中，再将啤酒酵母(AS2.4)以1％(V/V)的接种量分别接入商品化的MRS培养基和本发明实施例1-6的培养基中，35℃厌氧培养24h和48h后，分别测定乳酸杆菌和酵母菌的菌落总数，结果见表1。

表1采用对照组和实施例1-6的培养基培养后的菌落数

由表1可以看出，采用本发明实施例1-6制备的培养基对乳酸菌和酵母菌进行培养后，菌落数均大于采用MRS培养基进行培养的菌落数，说明采用本发明制备的培养基能促进乳酸菌和酵母菌的生长，从而能提高乳酸菌和酵母菌的产量。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。

Claims (7)

1.一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基，其特征在于，包括以下重量份数的组分：

糙米4-6份、红糖5-7份和纯净水112-132份。

2.一种酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、将4-6重量份的糙米，洗净，蒸煮成糙米饭，备用；

步骤二、将5-7重量份的红糖加2重量份的纯净水溶解后，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，制得红糖水，备用；

步骤三、将所述步骤一中制得的糙米饭、所述步骤二中制得的红糖水和110-130重量份的纯净水混合，制得培养基。

3.如权利要求2所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤三之后，还包括：

步骤四、向步骤三中制得的培养基中加入木醋液至每千克培养基中含有0.1-0.2mL木醋液后，混合均匀，之后向培养基中加入缓冲溶液调节培养基的pH值至5-6。

4.如权利要求3所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液为pH值为7的HAc-NaAc缓冲溶液。

5.如权利要求2所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤一中将糙米洗净之后，蒸煮之前，还包括：

将葡萄碾碎后与糙米、黄豆粉按质量比为0.5:1:0.5混合后，浸入10-20重量份的水中，之后向水中加入0.1-0.8重量份的纤维素酶、0.1-1重量份的果胶酶、0.1-1.5重量份的淀粉酶和0.1-1重量份的蛋白酶，并调节pH值至5-6，在温度为40-55℃下酶解2-3h，之后蒸煮20-30min，制得糙米饭。

6.如权利要求3所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤四之后，还包括：

步骤五、将保水剂、活化的牡蛎壳粉和沸石粉按质量比为4:1:1混合后，制得混合粉末，备用；

步骤六、将步骤四中制得的培养基表面的混合液用虹吸管抽出后，将5-30重量份的混合粉末浸泡在混合液中至混合液被混合粉末完全吸收，且保水剂吸收有自重200-300倍的混合液后，再将吸收有混合液的混合粉末与抽出混合液后的培养基混合均匀。

7.如权利要求6所述的酵母菌和乳酸菌共培养用培养基的制备方法，其特征在于，所述步骤六之后，还包括：

步骤七，在搅拌下向步骤六中制得的培养基中喷洒5-10重量份的质量分数为20-30％的红糖水。