CN106383083B - 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 - Google Patents
流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106383083B CN106383083B CN201610934604.2A CN201610934604A CN106383083B CN 106383083 B CN106383083 B CN 106383083B CN 201610934604 A CN201610934604 A CN 201610934604A CN 106383083 B CN106383083 B CN 106383083B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- signal
- fluorescence
- fluorescent
- time delay
- scattered light
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 238000003672 processing method Methods 0.000 title abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 21
- 230000010363 phase shift Effects 0.000 claims abstract description 14
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims abstract description 3
- 238000013508 migration Methods 0.000 claims abstract 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 claims abstract 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 claims description 25
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 9
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical group O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 9
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 2
- BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L disodium;(2',7'-dibromo-3',6'-dioxido-3-oxospiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-4'-yl)mercury;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Na+].O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Br)=C([O-])C([Hg])=C1OC1=C2C=C(Br)C([O-])=C1 BFMYDTVEBKDAKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000000295 emission spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 2
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 2
- 238000002189 fluorescence spectrum Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- OALHHIHQOFIMEF-UHFFFAOYSA-N 3',6'-dihydroxy-2',4',5',7'-tetraiodo-3h-spiro[2-benzofuran-1,9'-xanthene]-3-one Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(I)=C(O)C(I)=C1OC1=C(I)C(O)=C(I)C=C21 OALHHIHQOFIMEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001208 nuclear magnetic resonance pulse sequence Methods 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1429—Signal processing
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Signal Processing (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
本发明提供了一种流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法，所述方法包括以下步骤：1)利用互相关算法对荧光信号相对于散射光信号的时延进行估计，并对电路系统引入的时延进行校正，得到荧光信号相应的荧光寿命，2)利用得到的荧光寿命τ1，τ2对检测到的类高斯脉冲信号进行人为调制，利用相移特征对时延量进行表征，3)引入具有特定相移特性的参考信号，实现原始脉冲信号的频谱迁移，并经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除。
Description
技术领域
本发明涉及荧光检测及光谱分析领域，具体涉及流式细胞仪的荧光强度检测及数字调制消除光谱重叠领域。
背景技术
流式细胞仪是一种采用激光束激发快速直线流动状态中的单行细胞或生物颗粒，对它的散射光和激发的荧光信号进行探测采集，从而进行多参数、快速的定性、定量分析或分选的仪器。目前商品化的流式细胞仪产品已具有6色、8色甚至十几色荧光同时标记检测的能力。随着多色多参数流式细胞仪的快速发展，光谱重叠补偿算法在流式数据分析中越来越重要，该算法不仅影响定性分析检测结果的正确性，而且直接决定检测结果定量分析的准确性。荧光寿命测量能够提供有机荧光素、荧光蛋白和其他可发荧光的无机分子相关的荧光弛豫、强度衰减等信息。并且荧光寿命不存在荧光强度测量过程中存在的非线性问题，所以荧光寿命被引入到流式细胞仪单细胞测量中作为一个多参数信息。
为了更加精细的分析细胞特性而进行多色法荧光测量，即使用多种荧光染料标记微粒，并且使用具有不同接收光波段的多个光检测器(如PD、PMT等)测量从每种荧光染料所发射的荧光。利用多色法荧光测量时，通过根据使用的荧光染料的荧光波长选择在光检测器侧的滤光片进行荧光的检测。然而目前所使用的各种荧光染料的激发或发射波长具有宽发射谱的性质，经光学滤片滤光后，发射光谱范围仍有一定的干扰重叠。因此，若将这些染料组合进行多色测量，即使使用滤光片将从荧光染料发出的荧光分成各个波段，从非目标荧光染料发出的荧光也可能泄漏进目标荧光检测器。如果发生荧光泄漏，在光检测器处测量的荧光强度和来自目标荧光染料的真实荧光强度之间将存在差异，导致测量误差。为了补偿测量误差，需要对检测器的实际测量值进行荧光补偿。荧光补偿是修正荧光信号渗漏的过程，其目的是从荧光目标检测器中除去除匹配荧光以外的任何干扰荧光信号。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法，所述方法包括以下步骤：1)利用互相关算法对荧光信号相对于散射光信号的时延进行估计，并对电路系统引入的时延进行校正，得到荧光信号相应的荧光寿命，所述互相关算法的公式为：
其中，fs为散射光信号；fla，flb为光谱重叠后检测到的荧光信号，K1，C1，D1为实际荧光信号强度；t0为fs的中心点位置；t0’为散射光信号未经过电路系统之前的中心点位置；τ1，τ2为fl1，fl2的荧光寿命；h0(t),h1(t),h2(t)分别为fs，fl1，fl2电路系统传递函数；2)利用得到的荧光寿命τ1，τ2对检测到的类高斯脉冲信号进行人为调制，利用相移特征对时延量进行表征，所述进行人为调制的方法如下述公式：
其中，K2，C2，D2为调制后的荧光信号强度；φ1，φ2为人为引入的相移，用于对时延特性进行表征，φ1＝ω0*τ1，φ2＝ω0*τ2；ω0为调制频率；3)引入具有特定相移特性的参考信号，实现原始脉冲信号的频谱迁移，并经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除。
优选地，所述步骤3)中引入具有特定相移特性的参考信号通过如下公式来实现：
其中，为参考信号的相位，
优选地，所述步骤3)中经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除通过如下公式来实现：
优选地，所述步骤1)中fs、fla、flb的采样频率为100MHz。
优选地，所述散射光采用波长488nm的激光激发荧光染料的荧光发射光。
优选地，所述荧光染料选自FITC、PE。
应当理解，前述大体的描述和后续详尽的描述均为示例性说明和解释，并不应当用作对本发明所要求保护内容的限制。
附图说明
参考随附的附图，本发明更多的目的、功能和优点将通过本发明实施方式的如下描述得以阐明，其中：
图1为荧光发射光谱交叉重叠示意图；
图2为光谱重叠的影响示意图；
图3为本发明的利用数字调制消除光谱重叠原理示意图；
图4为利用本发明的数字处理方法得到的结果图，其中图4(a)为原始信号；图4(b)为调制后信号；图4(c)为引入参考信号的输出；图4(d)为消除光谱重叠影响的荧光信号。
具体实施方式
通过参考示范性实施例，本发明的目的和功能以及用于实现这些目的和功能的方法将得以阐明。然而，本发明并不受限于以下所公开的示范性实施例；可以通过不同形式来对其加以实现。说明书的实质仅仅是帮助相关领域技术人员综合理解本发明的具体细节。
在下文中，将参考附图描述本发明的实施例。在附图中，相同的附图标记代表相同或类似的部件，或者相同或类似的步骤。
本发明提供了一种数字处理方法对荧光脉冲信号进行人为调制，并引入具有特性相移的参考信号对光谱重叠的影响进行消除，实现对检测通道的真实荧光信号的测量。首先，利用互相关算法对荧光信号相对于散射光信号的时延进行估计。然后，利用数字信号处理方法对初始荧光信号进行人为调制，利用相移特征对时延量进行表征。最后，引入具有特定相移特性的参考信号并经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除。光谱重叠信号数字处理方法具有以下优势：(1)硬件电路系统结构简单，易于实现；(2)避免了光强调制及高速处理模块之间的同步等问题；(3)完全由数字信号处理芯片完成，计算速度快，灵活性好。
基于流式细胞仪散射光及荧光脉冲信号的类高斯特性，散射光信号(fs)及两路荧光信号(fl1,fl2)可利用公式1表示，其中K,A,B为信号强度；t0为fs的中心点位置；Δt1,Δt2为fl1，fl2相对于fs的时延。Δt1,Δt2为荧光寿命与电路系统引入时延的总和。
假定荧光激发过程为单指数衰减特性，检测通道的光谱重叠信号可用公式2表示。其中，K1，C1，D1为实际荧光信号强度；t0’为散射光信号未经过电路系统之前的中心点位置；τ1，τ2为fl1，fl2的荧光寿命；h0(t),h1(t),h2(t)分别为fs，fl1，fl2电路系统传递函数。
利用互相关算法对荧光信号相对于散射光信号的时延进行估计，并对电路系统引入的时延进行校正得到荧光信号相应的荧光寿命。利用得到的荧光寿命τ1，τ2对检测到的类高斯脉冲信号进行人为调制，如公式3所示。其中，K2，C2，D2为调制后的荧光信号强度；φ1，φ2为人为引入的相移，用于对时延特性进行表征，φ1＝ω0*τ1，φ2＝ω0*τ2；ω0为调制频率。
分别将两路调制后的荧光信号与具有特定相移的参考信号进行混合，实现原始脉冲信号的频谱迁移，如公式4所示。其中，为参考信号的相位。
与参考信号混合后的信号经过低通滤波即可得到去除光谱重叠影响后的真实荧光信号，如公式5所示。最终得到的荧光信号不包括光谱重叠引入的误差，信号幅值降为原始强度的1/2*cos(φ1-φ2)倍。
本发明的一个具体实施例中由488nm激光激发的荧光染料(FITC、PE)荧光发射光谱交叉重叠示意图如图1所示。fl1，fl2为真实荧光信号，fla，flb为光谱重叠后检测到的荧光信号。k11，k12，k21，k22为泄漏系数。
本发明对光谱重叠的影响进行了分析，光谱重叠会造成脉冲信号的峰值点位置及峰值发生变化。光谱重叠影响示意图如图2所示。当脉冲信号特征及泄漏系数按照表1变化时，引入的误差如表2所示。其中A,B为fl1，fl2的信号强度；Δt1,Δt2为fl1，fl2相对于fs的时延。
本发明利用数字调制方法实现光谱重叠消除的原理图如图3所示。单细胞流在流动室内经激光逐个激发，产生散射光信号fs及荧光信号fl1，fl2。光脉冲信号经过光学系统(滤光片，二向色镜)后进行光电准换。fs经光电二极管转换为电脉冲信号经过电路系统0；光谱重叠后的荧光信号fla，flb经PMT转换为电脉冲信号经过电路系统1,2，并进行模数转换。本发明对脉宽为4μs左右的荧光脉冲信号进行处理，fs、fla、flb的采样频率为100MHz，即脉冲序列相邻数据点之间的时间间隔为10ns。
本发明利用互相关算法对数字脉冲信号进行计算，得到荧光信号相对于散射光信号的时延，并经电路系统时延校准后得到真实的荧光寿命τ1，τ2。本发明调制频率ω0＝10MHz，参考信号的相位φref1＝φ2＝ω0*τ2，φref2＝φ1＝ω0*τ1。本发明方法的关键步骤处理结果如图4所示。
表1.脉冲信号特性及泄漏系数
表2.光谱重叠引入的误差
结合这里披露的本发明的说明和实践，本发明的其他实施例对于本领域技术人员都是易于想到和理解的。说明和实施例仅被认为是示例性的，本发明的真正范围和主旨均由权利要求所限定。
Claims (6)
1.一种流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法，所述方法包括以下步骤：
1)利用互相关算法对荧光信号相对于散射光信号的时延进行估计，并对电路系统引入的时延进行校正，得到荧光信号相应的荧光寿命，所述互相关算法的公式为：
其中，fs为散射光信号；fla，flb为光谱重叠后检测到的荧光信号，K1，C1，D1为实际荧光信号强度；t0为fs的中心点位置；t0’为散射光信号未经过电路系统之前的中心点位置；τ1，τ2为fl1，fl2的荧光寿命；h0(t),h1(t),h2(t)分别为fs，fl1，fl2电路系统传递函数；K0，C0，D0为荧光信号强度；Δta，Δtb为fla，flb相对于fs的时延；t为时间，σ为标准差；
2)利用得到的荧光寿命τ1，τ2对检测到的类高斯脉冲信号进行人为调制，利用相移特征对时延量进行表征，所述进行人为调制的方法如下述公式：
其中，K2，C2，D2为调制后的荧光信号强度；φ1，φ2为人为引入的相移，用于对时延特性进行表征，φ1＝ω0*τ1，φ2＝ω0*τ2；ω0为调制频率，t为时间，σ为标准差；
3)引入具有特定相移特性的参考信号，实现原始脉冲信号的频谱迁移，并经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤3)中引入具有特定相移特性的参考信号通过如下公式来实现：
其中，为参考信号的相位，t为时间。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤3)中经过低通滤波实现光谱重叠影响的消除通过如下公式来实现：
其中，t为时间，σ为标准差。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述步骤1)中fs、fla、flb的采样频率为100MHz。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述散射光采用波长488nm的激光激发荧光染料的荧光发射光。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述荧光染料选自FITC、PE。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610934604.2A CN106383083B (zh) | 2016-11-01 | 2016-11-01 | 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 |
| CN201811182206.5A CN109557015B (zh) | 2016-11-01 | 2016-11-01 | 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201610934604.2A CN106383083B (zh) | 2016-11-01 | 2016-11-01 | 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811182206.5A Division CN109557015B (zh) | 2016-11-01 | 2016-11-01 | 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106383083A CN106383083A (zh) | 2017-02-08 |
| CN106383083B true CN106383083B (zh) | 2018-10-16 |
Family
ID=57958197
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201610934604.2A Expired - Fee Related CN106383083B (zh) | 2016-11-01 | 2016-11-01 | 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 |
| CN201811182206.5A Expired - Fee Related CN109557015B (zh) | 2016-11-01 | 2016-11-01 | 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201811182206.5A Expired - Fee Related CN109557015B (zh) | 2016-11-01 | 2016-11-01 | 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (2) | CN106383083B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110196218A (zh) * | 2019-03-18 | 2019-09-03 | 北京信息科技大学 | 一种脉冲时延估计的荧光寿命表征方法 |
| CN114062230B (zh) * | 2020-07-30 | 2025-04-04 | 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 | 血细胞脉冲信号识别方法、流式细胞仪及可读存储介质 |
| CN114937046A (zh) * | 2022-03-08 | 2022-08-23 | 桂林优利特医疗电子有限公司 | 一种基于深度卷积网络的重叠波分割方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0515211A3 (en) * | 1991-05-23 | 1993-04-07 | Becton Dickinson And Company | Apparatus and method for phase resolved fluorescence lifetimes of independent and varying amplitude pulses |
| US5270548A (en) * | 1992-07-31 | 1993-12-14 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Phase-sensitive flow cytometer |
| US5315122A (en) * | 1992-08-25 | 1994-05-24 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for fluorescent lifetime measurement |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62116260A (ja) * | 1985-11-15 | 1987-05-27 | Toa Medical Electronics Co Ltd | フロ−サイトメ−タ信号処理装置 |
| EP1169722A1 (en) * | 1999-03-18 | 2002-01-09 | Cambridge Research & Instrumentation, Inc. | High-efficiency multiple probe imaging system |
| US20070096039A1 (en) * | 2002-05-03 | 2007-05-03 | Rakesh Kapoor | Evaluation Of Multicomponent Mixtures Using Modulated Light Beams |
| WO2007051170A2 (en) * | 2005-10-28 | 2007-05-03 | The Regents Of The University Of California | Apparatus and method for improved optical detection of particles in fluid |
| EP2485040A1 (en) * | 2009-09-29 | 2012-08-08 | Mitsui Engineering & Shipbuilding Co., Ltd. | Method and device for fret measurement |
| JP5534214B2 (ja) * | 2009-10-05 | 2014-06-25 | ベイバイオサイエンス株式会社 | フローサイトメータおよびフローサイトメトリ方法 |
| JP5986623B2 (ja) * | 2011-03-31 | 2016-09-06 | ヌビオ，インコーポレイテッド | スケーラブルなスペクトル検出および計測 |
| JP5502124B2 (ja) * | 2012-03-23 | 2014-05-28 | 三井造船株式会社 | 蛍光検出装置及び蛍光検出方法 |
| WO2015021332A1 (en) * | 2013-08-07 | 2015-02-12 | The Regents Of The University Of California | Real-time label-free high-throughput cell screening in flow |
| CN104320361B (zh) * | 2014-11-02 | 2017-07-21 | 天津理工大学 | 一种基于参数估计下的星载ais信号串行分离方法 |
| CN104697649B (zh) * | 2015-03-02 | 2022-07-12 | 中国科学院物理研究所 | 单发激光脉冲检测装置 |
| CN104898172B (zh) * | 2015-05-19 | 2017-05-10 | 吉林大学 | 一种基于互相关的核磁共振全波信号噪声滤除方法 |
| CN105067489B (zh) * | 2015-08-07 | 2018-01-09 | 中国科学院计算技术研究所 | 一种基于动态光散射技术的悬浮颗粒粒径测量装置及方法 |
| CN105372678B (zh) * | 2015-10-30 | 2019-04-19 | 哈尔滨工程大学 | 一种正弦boc调制信号的无模糊跟踪方法 |
-
2016
- 2016-11-01 CN CN201610934604.2A patent/CN106383083B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2016-11-01 CN CN201811182206.5A patent/CN109557015B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0515211A3 (en) * | 1991-05-23 | 1993-04-07 | Becton Dickinson And Company | Apparatus and method for phase resolved fluorescence lifetimes of independent and varying amplitude pulses |
| US5270548A (en) * | 1992-07-31 | 1993-12-14 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Phase-sensitive flow cytometer |
| US5315122A (en) * | 1992-08-25 | 1994-05-24 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for fluorescent lifetime measurement |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106383083A (zh) | 2017-02-08 |
| CN109557015A (zh) | 2019-04-02 |
| CN109557015B (zh) | 2021-05-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8582098B2 (en) | Single photon spectrometer | |
| US7402817B2 (en) | System and method for cross-talk cancellation in a multilane fluorescence detector | |
| US20010033376A1 (en) | Automatic G-factor calibration | |
| US20110278471A1 (en) | Fluorescence detecting device and fluorescence detecting method | |
| US20030062485A1 (en) | Compact multiwavelength phase fluorometer | |
| CN106383083B (zh) | 流式细胞仪光谱重叠信号数字处理方法 | |
| JP2018527559A (ja) | サイトメータ測定を調整するためのシステム及び方法 | |
| US8817244B2 (en) | Fluorescence measurement device and fluorescence measurement method | |
| Wang et al. | Toward quantitative fluorescence measurements with multicolor flow cytometry | |
| US9632031B2 (en) | System for in vitro detection and/or quantification by fluorometry | |
| Grinvald et al. | Fast relaxation processes in a protein revealed by the decay kinetics of tryptophan fluorescence | |
| CN106644901A (zh) | 一种用于流式细胞仪的荧光补偿方法 | |
| WO2010032451A1 (ja) | 強度変調したレーザ光による蛍光検出装置および蛍光検出方法 | |
| Houston et al. | Digital analysis and sorting of fluorescence lifetime by flow cytometry | |
| US20110266462A1 (en) | Fluorescence detecting device and fluorescence detecting method | |
| CN101694466B (zh) | 背照式ccd阵列光谱仪标准具效应的校正方法 | |
| US9052288B2 (en) | Fluorescence measuring apparatus and fluorescence measuring method | |
| RU2478192C2 (ru) | Способ оптического дистанционного обнаружения соединений в среде | |
| US7751051B2 (en) | Method for cross interference correction for correlation spectroscopy | |
| Phase | Analysis of Heterogeneous Emissions by Multifrequency Phase and | |
| Iwata et al. | FPGA-based photon-counting phase-modulation fluorometer and a brief comparison with that operated in a pulsed-excitation mode | |
| Dertinger et al. | Advanced FCS: an introduction to fluorescence lifetime correlation spectroscopy and dual-focus FCS | |
| Iwata et al. | A proposal of a pseudo-lock-in light-detection scheme by sinusoidal modulation of bias voltages applied to two dynodes in a photomultiplier tube | |
| SU1278614A1 (ru) | Импульсный лазерный флоуресцентный спектрометр | |
| SU1599672A1 (ru) | Способ измерени отношени сигнал/шум лампы с полым катодом |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Zhu Lianqing Inventor after: Lou Xiaoping Inventor after: Pan Zhikang Inventor after: Liu Chao Inventor after: Dong Mingli Inventor after: Meng Xiaochen Inventor after: Zhang Wenchang Inventor before: Zhu Lianqing Inventor before: Zhang Wenchang Inventor before: Lou Xiaoping Inventor before: Pan Zhikang Inventor before: Liu Chao Inventor before: Dong Mingli Inventor before: Meng Xiaochen |
|
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20181016 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |