[go: up one dir, main page]

CN106244666A - 一种粪大肠菌群培养基及其应用 - Google Patents

一种粪大肠菌群培养基及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106244666A
CN106244666A CN201610776922.0A CN201610776922A CN106244666A CN 106244666 A CN106244666 A CN 106244666A CN 201610776922 A CN201610776922 A CN 201610776922A CN 106244666 A CN106244666 A CN 106244666A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture medium
colibacillus group
excrement colibacillus
cholate
excrement
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610776922.0A
Other languages
English (en)
Inventor
李�杰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhengzhou Dian Shi Bioisystech Co Ltd
Original Assignee
Zhengzhou Dian Shi Bioisystech Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhengzhou Dian Shi Bioisystech Co Ltd filed Critical Zhengzhou Dian Shi Bioisystech Co Ltd
Priority to CN201610776922.0A priority Critical patent/CN106244666A/zh
Publication of CN106244666A publication Critical patent/CN106244666A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开一种粪大肠菌群显色培养基及应用，属于医学检验技术领域，是由下述组分组成：蛋白胨10～20g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖5～15g/L，胆盐0.5～1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.03～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温80 10～15g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。本发明的培养基用于检测化妆品中的粪大肠菌群，检测灵敏度高、特异性好，直接根据培养基颜色就可对菌株作出鉴别，检测周期短，适用于处理大批量的样本、易于产业化生产，可对化妆品中的粪大肠菌群进行全面、系统、准确的检测和初步的鉴定，为化妆品检测提供了新的途径。

Description

一种粪大肠菌群培养基及其应用
技术领域
本发明涉及医学检验技术领域，特别涉及一种粪大肠菌群培养基及其应用。
背景技术
粪大肠菌群为总大肠菌群的一个亚种；粪大肠菌群细菌来源于人和温血动物的粪便。检出粪大肠菌群表明该化妆品已被粪便污染，有可能存在其他肠道致病菌或寄生虫等病原体的危险。考虑到总大肠菌群中的细菌除生活在肠道中外，在自然环境(水与土壤)中亦经常存在。在粪大肠菌群这一组群细菌中大肠埃希氏菌(E.coli)数量最多，是较理想的指示菌，但欲正确鉴定此细菌，手续较繁复，因此在化妆品检验中采用粪大肠菌群列为重要的卫生指标菌。
中华人民共和国卫生部在1987-7-1就颁布实施了在化妆品中必须要检测粪大肠菌群，但许多检验人员对这项目的检验技术要求细节存在着的这样那样的问题，菌落的判断及识别主要依赖于检验人员的肉眼观察和经验判断，对于不典型形态特征的菌落可能会造成漏检。因此，开发一种培养时间短、特异性好、对主观依赖较小的粪大肠菌群的培养基意义重大。
发明内容
本发明提供一种粪大肠菌群培养基，解决现有的化妆品粪大肠菌群检测中依赖于检验人员的主观判断的问题、检测准确性不高的问题。
为解决上述技术问题，本发明的技术方案为：
一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨10～20g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖5～15g/L，胆盐0.5～1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.03～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温80 10～15g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
其中，优选地，所述动物组织消化物为肝浸粉。
其中，优选地，一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨12～18g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖8～12g/L，胆盐0.8～1.2g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.04～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温80 12～14g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨15g/L，动物组织消化物3g/L，乳糖10g/L，胆盐1.0g/L，十二烷基硫酸钠0.3/L，溴甲酚紫0.05g/L，卵磷脂2g，吐温8013g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
一种粪大肠菌群显色培养基在检测粪大肠菌群中的应用。
其中，优选地，是将粪大肠菌群接种至显色培养基，44±0.5℃中培养24～48小时，培养基变黄色的含有粪大肠菌群，培养基为紫色不变色不含有粪大肠菌群。
因自然环境中生活的大肠菌群培养的最合适温度为25℃左右，如在37℃培养则仍可生长，但如将培养温度再升高至44.5℃，则不再生长，而直接来自粪便的大肠菌群细菌也就是粪大肠菌群，习惯于37'C左右生长，如将培养温度升高至44.5℃仍可继续生长。因此，可用提高培养温度方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分。
加入中和剂卵磷脂和吐温80后，含中和剂的乳糖胆盐培养基中能够检出粪大肠菌群的最低细菌浓度，比标准乳糖胆盐培养基下降了1个级数。
其中，胆盐和十二烷基硫酸钠具有抑制革兰氏阳性菌的作用，二者共同使用，有效的抑制其它杂菌的生长，提高了检测的准确性。胆盐的品种来源及用量不同，其抑菌效果也不同。本发明中的胆盐为猪、牛或羊的胆盐。
本发明的有益效果：
本发明的粪大肠菌群显色培养基粪大肠菌群的培养时间为24～48小时，培养时间短，且检测灵敏度高、特异性好，直接根据培养基颜色就可对菌株作出鉴别，检测周期短，适用于处理大批量的样本、易于产业化生产，可对化妆品中的粪大肠菌群进行全面、系统、准确的检测和初步的鉴定，为化妆品检测提供了新的途径。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨15g/L，肝浸粉3g/L，乳糖10g/L，胆盐1.0g/L，十二烷基硫酸钠0.3/L，溴甲酚紫0.05g/L，卵磷脂2g，吐温8013g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
其中，所述胆盐的猪的胆盐。
上述培养基的使用方法：
1.称取本培养基75.0g，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装至带导管的试管中，每管装培养基10ml，115℃，20min高压蒸汽灭菌，备用。
2.取合适稀释度的化妆品10ml(含有粪大肠菌群)，加到含有培养基的试管中，混匀，于44±0.5℃中培养24～48小时，并将活化后的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌分别加入上述培养基中，44±0.5℃中培养24～48小时。
结果：
菌种类别 生长情况 培养基颜色
化妆品(含有粪大肠菌群) +++ 黄色
金黄色葡萄球菌 ++ 紫色
绿脓杆菌 -- 紫色
变形杆菌 ++ 紫色
沙门氏菌 + 紫色
实施例2
本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨10g/L，肝浸粉4g/L，乳糖5g/L，胆盐1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2/L，溴甲酚紫0.06g/L，卵磷脂1g，吐温8015g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
其中，所述胆盐的猪的胆盐。
上述培养基的使用方法：
1.称取本培养基75.0g，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装至带导管的试管中，每管装培养基10ml，115℃，20min高压蒸汽灭菌，备用。
2.取合适稀释度的化妆品10ml(不含有粪大肠菌群)，加到含有培养基的试管中，混匀，于44±0.5℃中培养24～48小时，并将活化后的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌分别加入上述培养基中，44±0.5℃中培养24～48小时。
结果：
菌种类别 生长情况 培养基颜色
化妆品(含有粪大肠菌群) +++ 紫色
金黄色葡萄球菌 ++ 紫色
绿脓杆菌 -- 紫色
变形杆菌 ++ 紫色
沙门氏菌 + 紫色
实施例3
本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨20g/L，肝浸粉2g/L，乳糖15g/L，胆盐0.5g/L，十二烷基硫酸钠0.4g/L，溴甲酚紫0.03g/L，卵磷脂3g，吐温8010g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
其中，所述胆盐的猪的胆盐。
上述培养基的使用方法：
1.称取本培养基75.0g，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装至带导管的试管中，每管装培养基10ml，115℃，20min高压蒸汽灭菌，备用。
2.取合适稀释度的化妆品10ml(含有粪大肠菌群)，加到含有培养基的试管中，混匀，于44±0.5℃中培养24～48小时，并将活化后的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌分别加入上述培养基中，44±0.5℃中培养24～48小时。
结果：
菌种类别 生长情况 培养基颜色
化妆品(含有粪大肠菌群) +++ 黄色
金黄色葡萄球菌 ++ 紫色
绿脓杆菌 -- 紫色
变形杆菌 ++ 紫色
沙门氏菌 + 紫色
实施例4
本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨12g/L，肝浸粉4g/L，乳糖8g/L，胆盐1.2g/L，十二烷基硫酸钠0.2g/L，溴甲酚紫0.06g/L，卵磷脂1g，吐温8014g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
其中，所述胆盐的猪的胆盐。
上述培养基的使用方法：
1.称取本培养基75.0g，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装至带导管的试管中，每管装培养基10ml，115℃，20min高压蒸汽灭菌，备用。
2.取合适稀释度的化妆品10ml(含有粪大肠菌群)，加到含有培养基的试管中，混匀，于44±0.5℃中培养24～48小时，并将活化后的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌分别加入上述培养基中，44±0.5℃中培养24～48小时。
结果：
菌种类别 生长情况 培养基颜色
化妆品(含有粪大肠菌群) +++ 黄色
金黄色葡萄球菌 ++ 紫色
绿脓杆菌 -- 紫色
变形杆菌 ++ 紫色
沙门氏菌 + 紫色
实施例5
本实施例提供一种粪大肠菌群显色培养基，是由下述组分组成：蛋白胨18g/L，肝浸粉2g/L，乳糖8g/L，胆盐1.2g/L，十二烷基硫酸钠0.4g/L，溴甲酚紫0.04g/L，卵磷脂3g，吐温8012g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
其中，所述胆盐的猪的胆盐。
上述培养基的使用方法：
1.称取本培养基75.0g，加入去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装至带导管的试管中，每管装培养基10ml，115℃，20min高压蒸汽灭菌，备用。
2.取合适稀释度的化妆品10ml(含有粪大肠菌群)，加到含有培养基的试管中，混匀，于44±0.5℃中培养24～48小时，并将活化后的金黄色葡萄球菌、变形杆菌、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌分别加入上述培养基中，44±0.5℃中培养24～48小时。
结果：
菌种类别 生长情况 培养基颜色
化妆品(含有粪大肠菌群) +++ 黄色
金黄色葡萄球菌 ++ 紫色
绿脓杆菌 -- 紫色
变形杆菌 ++ 紫色
沙门氏菌 + 紫色
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于是由下述组分组成：蛋白胨10～20g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖5～15g/L，胆盐0.5～1.5g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.03～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温8010～15g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
2.根据权利要求1所述的一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于：所述动物组织消化物为肝浸粉。
3.根据权利要求1所述的一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于：所述胆盐为猪、牛或羊的胆盐。
4.根据权利要求1所述的一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于是由下述组分组成：蛋白胨12～18g/L，动物组织消化物2～4g/L，乳糖8～12g/L，胆盐0.8～1.2g/L，十二烷基硫酸钠0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.04～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐温8012～14g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
5.根据权利要求1所述的一种粪大肠菌群显色培养基，其特征在于是由下述组分组成：蛋白胨15g/L，动物组织消化物3g/L，乳糖10g/L，胆盐1.0g/L，十二烷基硫酸钠0.3/L，溴甲酚紫0.05g/L，卵磷脂2g，吐温8013g/L，其余为去离子水，pH值7.4±0.2。
6.一种权利要求1所述的粪大肠菌群显色培养基在检测粪大肠菌群中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于是将粪大肠菌群接种至显色培养基，44±0.5℃中培养24～48小时，培养基变黄色的含有粪大肠菌群，培养基为紫色不变色不含有粪大肠菌群。
CN201610776922.0A 2016-08-29 2016-08-29 一种粪大肠菌群培养基及其应用 Pending CN106244666A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610776922.0A CN106244666A (zh) 2016-08-29 2016-08-29 一种粪大肠菌群培养基及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610776922.0A CN106244666A (zh) 2016-08-29 2016-08-29 一种粪大肠菌群培养基及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106244666A true CN106244666A (zh) 2016-12-21

Family

ID=58079955

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610776922.0A Pending CN106244666A (zh) 2016-08-29 2016-08-29 一种粪大肠菌群培养基及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106244666A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107860769A (zh) * 2017-11-08 2018-03-30 新疆天润生物科技股份有限公司 一种用于防治奶啤产粘污染的快速检测方法、其检测制剂及应用
CN113088556A (zh) * 2021-03-29 2021-07-09 新疆碧水源环境资源股份有限公司 一种用于污水处理厂的粪大肠菌群检测试验方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN86102137A (zh) * 1986-03-31 1987-10-14 宛吉斌 系列水中细菌检验卡及取样器
CN1995373A (zh) * 2006-08-07 2007-07-11 山东省疾病预防控制中心 水中粪大肠菌群快检纸片
CN101294190A (zh) * 2007-12-05 2008-10-29 姚毓才 大肠菌群复合快速显色诊检试剂及其研发工艺流程
CN103642891A (zh) * 2013-11-29 2014-03-19 中山鼎晟生物科技有限公司 一种化妆品微生物的检测方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN86102137A (zh) * 1986-03-31 1987-10-14 宛吉斌 系列水中细菌检验卡及取样器
CN1995373A (zh) * 2006-08-07 2007-07-11 山东省疾病预防控制中心 水中粪大肠菌群快检纸片
CN101294190A (zh) * 2007-12-05 2008-10-29 姚毓才 大肠菌群复合快速显色诊检试剂及其研发工艺流程
CN103642891A (zh) * 2013-11-29 2014-03-19 中山鼎晟生物科技有限公司 一种化妆品微生物的检测方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107860769A (zh) * 2017-11-08 2018-03-30 新疆天润生物科技股份有限公司 一种用于防治奶啤产粘污染的快速检测方法、其检测制剂及应用
CN113088556A (zh) * 2021-03-29 2021-07-09 新疆碧水源环境资源股份有限公司 一种用于污水处理厂的粪大肠菌群检测试验方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Doyle et al. Emerging microbiological food safety issues related to meat
Kozińska Dominant pathogenic species of mesophilic aeromonads isolated from diseased and healthy fish cultured in Poland
Nahar et al. Multidrug resistant-Proteus mirabilis isolated from chicken droppings in commercial poultry farms: bio-security concern and emerging public health threat in Bangladesh
Chumpol et al. In vitro and in vivo selection of probiotic purple nonsulphur bacteria with an ability to inhibit shrimp pathogens: acute hepatopancreatic necrosis disease‐causing Vibrio parahaemolyticus and other vibrios
Vanantwerpen et al. Within-batch prevalence and quantification of human pathogenic Yersinia enterocolitica and Y. pseudotuberculosis in tonsils of pigs at slaughter
Islam et al. Isolation and epidemiology of multidrug resistant Escherichia coli from goats in Cox's Bazar, Bangladesh
Suzuki et al. Antibiotic-resistant Escherichia coli isolated from dairy cows and their surrounding environment on a livestock farm practicing prudent antimicrobial use
Desneux et al. Fate of viable but non-culturable Listeria monocytogenes in pig manure microcosms
CN106244666A (zh) 一种粪大肠菌群培养基及其应用
Sarder et al. Prevalence and antibiotic susceptibility of Aeromonas hydrophila isolated from freshwater fishes
DUMITRU et al. Preliminary Characterization of the Probiotic Properties of a Bacterial Strain for Used in Monogastric Nutrition.
CN101440391B (zh) 用于沙门菌、副溶血弧菌和大肠杆菌o157:h7多重荧光pcr同步检测的引物和探针序列
Abunna et al. Occurrence and antimicrobial susceptibility profile of Salmonella from dairy farms in and around Meki Town, Oromia, Ethiopia
CN101935688B (zh) 一种检验和计数活体微生物的方法
Ghiasi et al. Screening and evaluation of the ruminal cellulolytic bacteria and their potential application as probiotics
Gogoi et al. Microbial contamination of community pond water in Dibrugarh district of Assam
Jafari et al. Influence of heat shock temperatures and fast freezing on viability of probiotic sporeformers and the issue of spore plate count versus true numbers
CN105936929A (zh) 一种用于检测水中肠球菌的酶底物培养基及其应用
Jahan et al. Bacteriological quality assessment of raw beef sold in Sylhet Sadar
Rizaldi et al. Antibiotic resistance of Escherichia coli in pork sold at Tamiang Layang market, East Barito district
CN106086159B (zh) 一种能够同时检测两种粪便污染指示菌的酶底物培养基及其应用
CN107260796A (zh) 百里香复方植物精油在防治鸡坏死性肠炎中的应用
Chauhan et al. Microbiological Methods for Water, Soil and Air Analysis
CN105255994A (zh) 一种土壤抗生素污染对人体健康影响的评估方法
Arani et al. Microbial quality of some medicinal herbal products in Kashan, Iran

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20161221

RJ01 Rejection of invention patent application after publication