CN105906633B

CN105906633B - 含有色酮结构的吡唑类n‑苯基马来酰亚胺衍生物及其制备方法与应用

Info

Publication number: CN105906633B
Application number: CN201610279071.9A
Authority: CN
Inventors: 邓莉平; 王玮; 陈国庆; 胡纯琦; 吴春雷; 莫忆伟; 李琰
Original assignee: University of Shaoxing
Current assignee: University of Shaoxing
Priority date: 2016-04-29
Filing date: 2016-04-29
Publication date: 2018-01-02
Anticipated expiration: 2036-04-29
Also published as: CN105906633A

Abstract

本发明公开了一种3‑（6‑溴‑4‑氧‑4H‑色酮）‑1,5‑二苯基‑1,6a‑二氢吡咯啉[3,4‑c]吡唑‑4,6（3aH,5H）‑二酮及其制备方法与应用，该制备方法用1,3‑偶极环加成方法在N‑取代苯基马来酰亚胺结构中引入吡唑环，与色酮衍生物反应导入色酮结构，从而合成一个新型的3‑（6‑溴‑4‑氧‑4H‑色酮）‑1,5‑二苯基‑1,6a‑二氢吡咯啉[3,4‑c]吡唑‑4,6（3aH,5H）‑二酮，上述化合物对于肿瘤细胞株具有良好的抑制作用，其中对于口腔癌细胞具有更好的抑制率和选择性，在制备抗肿瘤药物等方面，具有非常好的工业应用前景。

Description

含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物，具体是指3-(6-溴-4-氧-4H-色酮)-1,5-二苯基 -1,6a-二氢吡咯啉[3,4-c]吡唑-4,6(3aH,5H)-二酮及其制备方法与应用。

背景技术

N-苯基马来酰亚胺，化学名：1-苯基吡咯烷-2,5-二酮，化学结构式如下：

1-苯基吡咯烷-2,5-二酮

1,3-偶极环加成反应以其良好的区域和主体选择性而成为合成五元杂环化合物最主要的方法,也是杂环药物化学研究中较为活跃的一类反应。近几年来,由于色酮广泛的生物活性,诸如抗癌、抗菌、抑制血小板凝聚等而倍受关注。所以,无论是从药理学还是从合成角度考虑,这类杂环化合物都有很高的合成价值。

吡唑衍生物作为一类有用的中间体以及它们本身所显示出来的多种药物活性而受到人们的广泛关注。本发明通过研究不同杂环在同一分子中聚集而对药理活性所产生的影响,从而提供一种全新的含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物。

发明内容

本发明的第一方面目的是提供一种新的含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物。

本发明采取的技术方案如下：

一种含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物，其化学名称为：3-(6-溴-4-氧-4H-色酮)-1,5-二苯基-1,6a- 二氢吡咯啉[3,4-c]吡唑-4,6(3aH,5H)-二酮，其结构式如下：

该化合物相关实验数据如下：

申请人通过研究发现：在N-苯基马来酰亚胺引入五元吡唑环的基础上再导入了色酮的结构，获得了一种全新的含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物，该化合物可以改变药理活性。

本发明的第二方面目的是提供一种上述含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将顺丁烯二酸酐和苯胺反应合成N-苯基马来酰亚胺(3)，然后采用3位有甲醛基取代6-溴代色酮与苯肼脱水反应合成6-溴代色酮苯腙(4)，最后将N-苯基马来酰亚胺和6-溴代色酮苯腙进行偶极环加成反应，合成含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物(5)，即3-(6-溴-4- 氧-4H-色酮)-1,5-二苯基-1,6a-二氢吡咯啉[3,4-c]吡唑 -4,6(3aH,5H)-二酮。

本发明涉及的反应方程式如下：

进一步的，所述的一种含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、N-苯基马来酰亚胺的合成：

将顺丁烯二酸酐和苯胺溶解于丙酮溶剂中,搅拌下反应，并逐步产生淡黄色沉淀,室温反应2小时后,依次加入醋酸锰、三乙胺和醋酐,升温后,沉淀逐步溶解,在50～60℃下反应2 小时,溶液由橙黄变成红黑,逐渐出现新的沉淀即N-苯基马来酰亚胺(3)，冷却至室温,沉淀经水洗、干燥,用丙酮重结晶得到产物N-苯基马来酰亚胺(3)；

(2)、6-溴代色酮苯腙的合成：

所述的6-溴代色酮苯腙(4)为已知化合物，CAS号为 68287-82-1，本发明采用3位有甲醛基取代6-溴代色酮与苯肼脱水反应生成席夫碱的方法进行合成：取2mmol的苯肼加入盛有10mL四氢呋喃的烧瓶中，加热回流搅拌至溶解，然后缓慢滴加入20mL溶有2mmol 3位有甲醛基取代6-溴代色酮的无水乙醇溶液，继续回流搅拌1h，滴加10滴盐酸，有淡黄色沉淀出现，连续加热回流搅拌5h，停止加热，冷却至室温后加人20mL蒸馏水搅拌，淡黄色沉淀颜色变深，抽滤得6-溴代色酮苯腙(4)，黄红色针状产物；用无水乙醚冲洗多次，真空干燥得产物6-溴代色酮苯腙(4)；

(3)、导入色酮结构：

将N-苯基马来酰亚胺和6-溴代色酮苯腙溶于无水乙醇中，加入氯胺T，回流12小时，进行1,3-偶极环加成加成反应，导入色酮和吡唑结构，用甲醇再结晶，真空干燥得到化合物(5)。

更进一步的设置在于：

所述的步骤(1)中，反应得到的淡黄色沉淀需进行减压过滤。

本发明的第三方面目的是提供一种前述含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物在制备抗肿瘤药物方面的应用。通过实验验证：上述化合物，对于不同瘤株如人肝癌细胞、口腔癌细胞、胃癌细胞、卵巢癌细胞、白血病细胞、肠癌细胞等，均具有抑制作用，其中对于KB(口腔癌细胞) 具有更佳的抑制率和选择性，可单独制备抗肿瘤药物、也可以作为活性成分与其他抗肿瘤药物制备抗肿瘤组合物，具有非常好的工业应用前景。

本发明的有益效果如下：

本申请人经研究发现，在N-苯基马来酰亚胺引入五元吡唑环的基础上再导入色酮的结构，可以改变药理活性，经进一步实验及分析，研究不同杂环在同一分子中聚集而对药理活性所产生的影响,申请人通过偶极环加成反应合成了含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物，该方法制备的新型含色酮结构吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物，在制备抗肿瘤药物方面，具有非常好的工业应用前景。

具体实施方式

氯胺T：英文名称Chloramine-T,化学结构为

以下结合实施例对本发明做进一步描述，但实施例不应解释为限定本发明的范围。

实施例1：N-苯基马来酰亚胺的合成：

将顺丁烯二酸酐和苯胺溶解于一定量的丙酮溶剂中,在搅拌下将苯胺溶液滴加至含有顺丁烯二酸酐溶液的反应瓶, 反应放热并逐步产生淡黄色沉淀,室温反应2小时后,依次加入醋酸锰、三乙胺和醋酐,升温后,沉淀逐步溶解,在50～60℃下反应2小时,溶液由橙黄变成红黑,逐渐出现新的沉淀即化合物(3)，冷却至室温,水中沉淀经大量水洗、干燥,用丙酮重结晶得到产物N-苯基马来酰亚胺(3)；

实施例2：6-溴代色酮苯腙的合成:

采用3位有甲醛基取代6-溴代色酮与苯肼脱水反应生成席夫碱的方法：取2mmol的苯肼加入盛有10mL四氢呋喃的烧瓶中，加热回流搅拌至溶解，然后缓慢滴加入20mL溶有2mmol 3位有甲醛基取代6-溴代色酮的无水乙醇溶液，继续回流搅拌1h，滴加10滴盐酸，有淡黄色沉淀出现。连续加热回流搅拌5h，停止加热，冷却至室温后加人20mL蒸馏水搅拌，淡黄色沉淀颜色变深，抽滤得6-溴代色酮苯腙，黄红色针状产物。用无水乙醚冲洗多次，真空干燥得产物6-溴代色酮苯腙(4)；

实施例3：3-(6-溴-4-氧-4H-色酮)-1,5-二苯基-1,6a-二氢吡咯啉[3,4-c]吡唑-4,6(3aH,5H)-二酮的合成:

将1mmol N-苯基马来酰亚胺和1.1mmol 6-溴代色酮苯腙于20mL乙醇中，再加入1.2mL氯胺T，回流12小时。将沉淀过滤，95％乙醇清洗，用甲醇再结晶，真空干燥后得到产物。产物为黄色结晶,产率44.3％,产物经检测：分子式为C₂₆H₁₆BrN₃O₄，名称为：3-(6-溴-4-氧-4H- 色酮)-1,5-二苯基-1,6a-二氢吡咯啉[3,4-c]吡唑-4,6(3aH,5H) -二酮(化合物5)，m.p.139.5-141℃。

结构确认：C₂₆H₁₆BrN₃O₄

¹H NMR(DMSO)δ:7.288-7.492(m,13H,Ar-H),6.47 (s,1H,C＝C-H),5.82(d,J＝1010Hz,1H),5.34(d, J＝1014Hz,1H)

IR 3457(N-C＝O),3085(ArH),1720(C＝O), 1575(C＝N),1293(C-O-C)cm^-1

m/e:513.03(100.0％),515.03(97.6％)。

Anal.calcd.for C₂₆H₁₆BrN₃O₄：C,60.72；H,3.16；N, 8.15。

应用实施例4：采用MTT法检测受试化合物对不同瘤株的的抗肿瘤活性。

将上述实施例制备的化合物(5)，分别以不同瘤株(肿瘤细胞Bel-7402、KB、SGC7901、HO8901、HL-60、ECA109) 为实验对象，测试化合物(5)对于不同瘤株的体外抑制作用：实验采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)，活性用半数抑制浓度表示(IC₅₀)。

具体实验步骤如下：

将化合物5用DMSO溶解，稀释，肿瘤细胞Bel-7402(人肝癌细胞)、KB(口腔癌细胞)、SGC7901(胃癌细胞)、HO8901 (卵巢癌细胞)、HL-60(白血病细胞)、ECA109(肠癌细胞) 在96孔板上种入4000个/200μL/孔，每孔加入化合物2μL，终浓度为12.0μM，6.0μM，3.0μM，1.5μM，共同于37℃、 5％CO₂细胞培养箱中孵育72小时，以DMSO(1％)为空白对照。72小时后，加入终浓度为0.25mg/mL的MTT，置于 37℃、5％CO₂细胞培养箱中4小时，之后吸干溶剂，每孔加入100μl DMSO，用酶联免疫仪于570nm处测定吸光度(OD 值)，所得数据用于计算IC₅₀值。

不同浓度的受试化合物用96孔板进行粗筛，根据所得的抑制率，计算IC₅₀值，结果见下表。

表1、含色酮结构吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物对六种肿瘤细胞株的IC₅₀值。

通过上表数据可以看出：本发明制备的化合物，对于六种肿瘤细胞株均具有抑制作用，其中对于KB(口腔癌细胞)具有更好的抑制率和选择性，可以单独制备抗肿瘤药物、也可以作为活性成分与其他抗肿瘤药物制备抗肿瘤组合物，具有非常好的工业应用前景。

Claims

1.含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物，其结构式如下：

2.一种含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将顺丁烯二酸酐和苯胺反应合成N-苯基马来酰亚胺，然后采用3位有甲醛基取代的6-溴代色酮与苯肼脱水反应合成6-溴代色酮苯腙，最后将N-苯基马来酰亚胺和6-溴代色酮苯腙进行偶极环加成反应，合成含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物。

3.根据权利要求2所述的一种含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)N-苯基马来酰亚胺的合成：

将顺丁烯二酸酐和苯胺溶解于丙酮溶剂中,搅拌下反应，并逐步产生淡黄色沉淀,室温反应2小时后,依次加入醋酸锰、三乙胺和醋酐,升温后,沉淀逐步溶解,在50～60℃下反应2小时,溶液由橙黄变成红黑,逐渐出现新的沉淀即N-苯基马来酰亚胺，冷却至室温,沉淀经水洗、干燥,用丙酮重结晶得到产物N-苯基马来酰亚胺；

(2)6-溴代色酮苯腙的合成：

取2mmol的苯肼加入盛有10mL四氢呋喃的烧瓶中，加热回流搅拌至溶解，然后缓慢滴加入20mL溶有2mmol 3位有甲醛基取代的6-溴代色酮的无水乙醇溶液，继续回流搅拌1h，滴加10滴盐酸，有淡黄色沉淀出现，连续加热回流搅拌5h，停止加热，冷却至室温后加人20mL蒸馏水搅拌，淡黄色沉淀颜色变深，抽滤得6-溴代色酮苯腙，黄红色针状产物；用无水乙醚冲洗多次，真空干燥得产物6-溴代色酮苯腙；

(3)导入色酮结构：

将N-苯基马来酰亚胺和6-溴代色酮苯腙溶于无水乙醇中，加入氯胺T，回流12小时，进行1,3-偶极环加成加成反应，导入色酮和吡唑结构，用甲醇再结晶，真空干燥得到含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物。

4.根据权利要求3所述的一种含有色酮结构的吡唑类N-苯基马来酰亚胺衍生物的制备方法，其特征在于：所述的步骤(1)中，反应得到的淡黄色沉淀需进行减压过滤。

5.一种权利要求1所述化合物在制备抗肿瘤药物方面的应用。