CN105640882A - 一种卡巴他赛胶束载药系统及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种卡巴他赛胶束载药系统及其制备方法，以及其治疗肿瘤方面疾病的应用，所述载药系统由质量分数为85％-99.9％的两亲性嵌段共聚物和质量分数为0.1-15％的卡巴他赛组成，所述两亲性嵌段共聚物包括亲水性链段和疏水性链段，亲水性链段为分子量100-6000的聚乙二醇或分子量300-6000的甲氧基聚乙二醇，疏水性链段为分子量200-6000的聚丙交酯，疏水性链段以含有芴甲氧羧基的基团和/或含有苯环结构的氨基酸进行封端，聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.1-30∶1；还提供了该载药系统在制备治疗肿瘤药物的应用。

Description

一种卡巴他赛胶束载药系统及其制备方法和应用

技术领域

本发明提供了一种卡巴他赛胶束载药系统及其制备方法，以及其治疗肿瘤方面疾病的应用，属于药物领域。

背景技术

卡巴他赛为新的紫杉醇的衍生物，从欧洲紫衫天然母树中提取的10-脱乙酰基巴卡丁III的半合成化合物的衍生物，属于第三代紫衫烷类抗肿瘤化合物，其作用机制与紫杉醇类似，通过加强微管蛋白聚合作用和抑制微管解聚作用，导致形成稳定的非功能性微管束，因而破坏肿瘤细胞的有丝分裂，抑制肿瘤细胞的分化；体外肿瘤模型中的抗增殖活性具有和多西他赛相同的药效，和多西他赛一样有效的促进了体外微管蛋白的聚合和可在冷诱导解聚作用中稳定微管。

卡巴他赛的分子式：C₄₅H₅₇NO₁₄，C₃H₆O分子量为835.93(无溶剂)，结构式如下：

聚合物胶束是近年来发展起来的一种稳定的胶体分散体系。胶束通常由双亲性嵌段高分子聚合物通过自组装形成，其疏水链段向内，亲水链向外，呈现典型的“核-壳”结构。聚合物胶束可以显著提高难溶性药物的溶解度；疏水性的药物包裹于胶束的核中，可以降低药物的毒副反应；此外，胶束作为一种纳米药物递释系统，可通过增强渗透效应(EnhancedPermeabilityandRetentionEffect，EPR效应)达到肿瘤组织被动靶向的目的。

为了有效发挥纳米载体的EPR效应，提高药物的瘤组织靶向性，就要求载体能够在血液中保持稳定，通过纳米载体在血液中长时间的循环提高进入肿瘤组织的机率。然而，对自组装聚合物胶束而言，近年来的研究发现：胶束在进入血液后的极短时间内药物便释放出来，释放的药物基本通过无规扩散的方式完成组织和肿瘤的转运(JournalofControlledRelease164(2012)：108-114)。出现这一情况的主要原因是嵌段高分子中的疏水链段和药物之间的作用力较弱，胶束在进入血液后经过血液的稀释，药物很容易从胶束的核中扩散出来。由此可见，要提高胶束的稳定性，从而更有效的发挥被动靶向作用，核心的问题是增加疏水链段和药物分子之间的作用力。

针对上述技术问题，发明人通过理论可行性论证和大量试验结果的收集，提供了一种卡巴他赛胶束载药系统，除含有有效量的卡巴他赛，该系统还包括了一种新型两亲性嵌合共聚物，该共聚物由亲水段和疏水段共同组成，亲水段选用了聚乙二醇(PEG)或甲氧基聚乙二醇(mPEG)，这两种具有聚合物具有良好的生物相容性和生物可降解性，而疏水段则需用聚丙交酯，从而构建了PEG-PLA或mPEG-PLA聚合物，并在PEG-PLA或mPEG-PLA的末端羟基上引入芴甲氧羰基(Fmoc)基团，由于Fmoc基团中电子云的离域范围非常大，因此能够和含有苯环、双键等基团的药物之间形成很强的共轭作用，而卡巴他赛也恰恰是富含苯环的药物，因此以此制备了高分子聚合物可以与卡巴他赛具有很强的相互作用，并将药物分子牢牢的限制于胶束的“核中”不易溶出，制得一种体内外具有高度稳定性的胶束载药系统，可以提高药物的肿瘤组织的靶向性。

发明内容

根据说明书技术背景内容，本发明所解决的技术问题是，提高聚合物胶束与卡巴他赛之间的作用力，从而使之在药物作用过程中，能够高度稳定的存在，提高卡巴他赛对于肿瘤组织的靶向性。

基于上述目的，本发明提供了一种卡巴他赛胶束载药系统，所述载药系统由质量分数为85％-99.9％的两亲性嵌段共聚物和质量分数为0.1-15％的卡巴他赛组成，所述两亲性嵌段共聚物包括亲水性链段和疏水性链段，亲水性链段为分子量100-6000的聚乙二醇或分子量300-6000的甲氧基聚乙二醇，疏水性链为分子量200-6000的聚丙交酯，疏水性链以含有芴甲氧羧基的基团和/或含有苯环结构的氨基酸进行封端，聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.1-30∶1。

在两亲性嵌合胶束载药系统中，疏水链也可以以其他氨基酸进行封端；进一步优选，疏水链可以苯丙氨酸进行封端。

上述载药系统，其中，聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.5-10∶1。

由于甲氧基聚乙二醇和聚丙交酯的分子量不同，导致它们组成载药系统稳定性有差异。所以，上述载药系统，优选地，亲水链为分子量300-4000的甲氧基聚乙二醇，疏水链为分子量300-5000的聚丙交酯；更优选，亲水链为分子量600-3000的甲氧基聚乙二醇，疏水链为分子量400-4000的聚丙交酯；其中，聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.5-10∶1。

在本发明的优选实施例中，上述载药系统由质量分数为90％-97％的两亲性嵌段共聚物和质量分数为3-10％的卡巴他赛组成；所述亲水性链段是分子量为1500-3000的甲氧基聚乙二醇，疏水性链是分子量1000-2000的聚丙交酯，该疏水性链以含有芴甲氧羧基的基团和/或含有苯环结构的氨基酸进行封端，甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.5-10∶1。

上述载药系统，其中疏水性链以含有芴甲氧羧基的基团和/或含有苯环结构的氨基酸进行封端，所述芴甲氧羧基的基团可以为6-芴甲氧羰基氨基或6-芴甲氧羰基氨基氧羰基氨基己酸的任一或组合。进一步优选，疏水性链以6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸、6-芴甲氧羰基氨基-2-苄氧羰基氨基己酸、6-芴甲氧羰基氨基-2-苄氧羰基氨基苯丙氨酸、6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基苯丙氨酸的任一或组合进行封端。

本发明所述的含有芴甲氧羧基的基团更优选为6-芴甲氧羰基氨基、6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸、6-芴甲氧羰基氨基-2-苄氧羰基氨基己酸中的任一或其组合。

在本发明的优选实施例中，上述载药系统由质量分数为85％-99.9％的两亲性嵌段共聚物和质量分数为0.1-15％的卡巴他赛组成，优选，上述载药系统由质量分数为88％-98％的两亲性嵌段共聚物和质量分数为2-12％的卡巴他赛组成，即，共聚物的载药量2％-12％，更优选，由质量分数为90％-97％的两亲性嵌段共聚物和质量分数为3-10％的卡巴他赛组成；所述亲水性链段是分子量为1500-3000的甲氧基聚乙二醇，疏水性链是分子量1000-2000的聚丙交酯，该疏水性链以含有芴甲氧羧基的基团和/或含有苯环结构的氨基酸进行封端。

优选地，所述的含有芴甲氧羧基的基团为6-芴甲氧羰基氨基-2-苄氧羰基氨基己酸和/或6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸。

一般胶束载药系统中共聚物的载药量不超过5％，高于5％的载药量在业内比较难以做到，本发明的载药系统中共聚物的载药量能够达到甚至超过5％，最高可超过10％，提高了聚合物胶束与卡巴他赛之间的作用力，从而使之在药物作用过程中能够高度稳定的存在，提高卡巴他赛对于肿瘤组织的靶向性。这是本发明的比较明显的有益效果，也是本发明创新点之一。

上述载药系统能够有效的解决了胶束疏水链与药物相互作用力弱，载药系统稳定性差的技术难题，这是本发明的另一方面的有益效果。

另外，现用于临床的卡巴他赛制剂，以聚山梨酯80作为助溶剂，制成粘稠状注射用浓缩液，生产工艺为采用聚山梨酯80和乙醇溶解，再冻干除去乙醇，工艺危险性大，冻干之前需要保证无菌操作，不仅操作繁琐且成本巨大。此外，近年来的研究还发现，聚山梨酯80在体内易引发过敏反应，并且会导致血液毒性和体液潴留等副作用，因此临床使用前患者需进行脱敏处理并且严密观察输液过程。

因此将所需载药系统可以采用冻干制剂给药就显得尤为重要。

本发明提供的卡巴他赛胶束载药系统，除含有有效量的卡巴他赛，还包括了一种新型两亲性嵌合共聚物，该共聚物由亲水段和疏水段共同组成，亲水段选用了聚乙二醇(PEG)或甲氧基聚乙二醇(mPEG)，这两种具有聚合物具有良好的生物相容性和生物可降解性，而疏水段则需用聚丙交酯，从而构建了PEG-PLA或mPEG-PLA聚合物，并在PEG-PLA或mPEG-PLA的末端羟基上引入芴甲氧羰基(Fmoc)基团，由于Fmoc基团中电子云的离域范围非常大，因此能够和含有苯环、双键等基团的药物之间形成很强的共轭作用，而卡巴他赛也恰恰是富含苯环的药物，因此以此制备了高分子聚合物可以与卡巴他赛具有很强的相互作用，并将药物分子牢牢的限制于胶束的“核中”不易溶出，制得一种体内外具有高度稳定性的胶束载药系统，可以提高药物的肿瘤组织的靶向性。

在本发明的实施例中，提供了一种载药系统的制备方法，包括

(1)将聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇加入到聚合瓶中，升温搅拌并抽真空，冷却后加入丙交酯，辛酸亚锡，反应物高温聚合后产物用二氯甲烷溶解，沉淀后过滤得固体聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物；

(2)将芴甲氧羰基氨基用无水四氢呋喃溶解后加入三乙胺，降温后加入新戊酰氯，有沉淀生成，反应物升温后继续反应，过滤除去杂质后蒸发溶剂至干，得粘稠液体为芴甲氧羰基氨基的新戊酐；

(3)将聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物溶解于二氯甲烷中，加入三乙胺，4-吡咯烷基吡啶，将此溶液冷却后，将上述反应所得的芴甲氧羰基氨基的新戊酐溶解于二氯甲烷中，后加入到聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物的二氯甲烷溶液中，搅拌后升温，继续搅拌反应。反应物沉淀后过滤得固体即为芴甲氧羰基氨基封端的聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段聚合物；

(4)将聚合物和卡巴他赛制成胶束溶液。

在本发明的优选实施例中，还提供了一种载药系统的制备方法，包括：

(1)mPEG-PLA的合成

将聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇加入到聚合瓶中，升温搅拌并抽真空，冷却后加入丙交酯，辛酸亚锡，反应物经过高温聚合后产物用二氯甲烷溶解，沉淀后过滤得固体聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物；

(2)酸酐制备

将6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸用无水四氢呋喃溶解后加入三乙胺，降温后加入新戊酰氯，有沉淀生成，反应物升温后继续反应，过滤除去杂质后蒸发溶剂至干，得粘稠液体为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐；

(3)封端反应

将聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物溶解于二氯甲烷中，加入三乙胺，4-吡咯烷基吡啶，将此溶液冷却后，将上述反应所得的6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐溶解于二氯甲烷中，后加入到聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物的二氯甲烷溶液中，搅拌后升温，继续搅拌反应。反应物沉淀后过滤得固体即为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸封端的聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段聚合物；

(4)胶束冻干合成

将聚合物、卡巴他赛和和合适的药物辅料制成胶束溶液后进行冻干。

根据上述的制备方法，本发明还提供了一种优选的方法，包括以下步骤：

(1)10g甲氧基聚乙二醇2000加入到聚合瓶中，升温搅拌并抽真空，冷却后加入丙交酯11g，辛酸亚锡5.5mg，反应物高温聚合后产物用二氯甲烷溶解，沉淀后过滤得白色固体既为mPEG-PLA嵌段聚合物；

(2)11.7g6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸用无水四氢呋喃溶解后加入3-10mL三乙胺，降温后加入新戊酰氯2-5mL，有沉淀生成。反应物升温后继续反应1h，过滤除去杂质后蒸发溶剂至干，得粘稠液体为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐；

(3)20gmPEG-PLA溶解于二氯甲烷中，加入三乙胺5mL，4-吡咯烷基吡啶1.0g，将此溶液冷却后，将上述反应所得的6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐溶解于二氯甲烷中，后加入到mPEG-PLA的二氯甲烷溶液中，搅拌反应1h后升温，继续搅拌反应。反应物沉淀后过滤得固体既为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸封端的甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段聚合物(mPEG-PLA-Lys(Fmoc))。

本发明还提供了所述载药系统制备成冻干制剂的制备方法，包括：

将上述步骤(4)所制得胶束溶液与冻干辅料混合冻干，即制得冻干制剂。

优选所述冻干步骤前还有无菌处理的步骤。

上述合成工艺路线如下：

(4)将聚合物、卡巴他赛和和合适的药物辅料制成胶束溶液后进行冻干。

根据上述所述方法，其中药物辅料为冻干赋形剂，优选在冻干步骤前具有无菌处理步骤。所述冻干赋形剂可以为乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、果糖、葡萄糖、海藻酸钠或者明胶的一种或多种组合，优选乳糖或甘露醇。

根据上述制备方法，优选60mg卡巴他赛和1140mgmPEG-PLA-Lys(Fmoc)于45℃下溶解于20mL乙醇，旋转蒸发去除乙醇后加入20mL超纯水溶解药膜，所得溶液经0.22um滤膜过滤后加入400mg甘露醇后冻干得到卡巴他赛胶束冻干粉。

通过上述方法可以制备得到了一种卡巴他赛胶束载药系统的冻干制剂。

本发明还提供了含有上述载药系统的冻干制剂，所述冻干制剂由载药系统和冻干辅料组成，卡巴他赛与冻干辅料的的重量比是1∶0.1-50，优选，卡巴他赛与冻干辅料的重量比是1∶0.5-30，更优选，卡巴他赛与冻干辅料的重量比是1∶1-10。所述冻干辅料为乳糖、甘露醇、木糖醇、山梨醇、蔗糖、海藻糖、果糖、葡萄糖、海藻酸钠或者明胶的一种或多种组合。

在本发明的优选实施例中，上述载药系统中所述的两亲性嵌段共聚物中卡巴他赛及药学辅料的重量比是1∶0.5-30，所述的共聚物载药量为2-12％，所述亲水性链段是分子量为1500-3000的甲氧基聚乙二醇，疏水性链是分子量1000-2000的聚丙交酯，该疏水性链以含有芴甲氧羧基的基团进行封端；所述的药物辅料是乳糖或甘露醇。

本发明载有卡巴他赛的聚合物胶束冻干制剂，大大提高了卡巴他赛的溶解度，且制备的胶束粒径小，包封率高，稳定性好，具有被动靶向和长循环等特点，其中mPEG-PLA-Lys(Fmoc)嵌段聚合物具有克服多药耐药的效果，制备成的胶束能显著增加药物在细胞内的蓄积，可应用在逆转肿瘤多耐药领域，有很好的应用前景。

本发明还提供了含有卡巴他赛的载药系统在制备治疗肿瘤的药物中的应用。

附图说明

图1是采用GPC方法测定高分子的分子量及分子量分布系数图。

图2是Fmoc的核磁氢谱图。

具体实施方式

发明人通过以下实验来验证本发明化合物的实用性和有益效果。

再次重申：以下实验只是本发明研发过程中众多实验中的示例性实验，并未涵盖和穷尽了发明人为本发明所做的所有实验，目的仅仅在于用那些数据来阐述本发明所具有了特点和应用。

实施例1

甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段共聚物的制备

1)mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀的合成

10g甲氧基聚乙二醇2000加入到聚合瓶中，升温至130℃搅拌并抽真空1h，冷却至室温后加入D，L-丙交酯11g，辛酸亚锡5.5mg，真空密闭聚合瓶，反应物在130℃聚合15h后产物用二氯甲烷溶解，冰乙醚沉淀后过滤得白色固体既为mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀嵌段共聚物，核磁计算聚合物分子量为3300，凝胶渗透色谱(GelPermeationChromatography，GPC)测定高分子的分子量及分子量分布系数分别为4596，1.06。(见图1和相关数据表1)。

表1广义相对峰值

2)封端反应

11.7g6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸用50mL无水四氢呋喃溶解后加入3.5mL三乙胺，降温至-10℃后加入新戊酰氯3.05mL，立刻有白色沉淀生成。反应物升温至0℃反应2h后继续升温至25℃反应1h，过滤除去不溶物后蒸发溶剂至干得无色粘稠液体为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐。

20gmPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀溶解于100mL二氯甲烷，加入三乙胺3.5mL，4-吡咯烷基吡啶0.37g，将此溶液冷却至0℃后，将上述反应所得的6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐溶解于50mL二氯甲烷后加入到mPEG-PLA的二氯甲烷溶液中，搅拌反应1h后升温至25℃继续搅拌反应24h。反应物用冰乙醚沉淀后过滤得白色固体既为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸封端的甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段共聚物(mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀-Lys(Fmoc))，核磁氢谱见图2。

实施例2

1)mPEG₂₀₀₀-PLA₁₀₀₀的合成

10g甲氧基聚乙二醇2000加入到聚合瓶中，升温至130℃搅拌并抽真空1h，冷却至室温后加入D，L-丙交酯7g，辛酸亚锡3mg，真空密闭聚合瓶，反应物在130℃聚合15h后产物用二氯甲烷溶解，冰乙醚沉淀后过滤得白色固体既为mPEG₂₀₀₀-PLA₁₀₀₀嵌段共聚物，核磁计算聚合物分子量为3000，GPC测定高分子的分子量及分子量分布系数分别为3943，1.05。

2)封端反应

11.7g6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸用50mL无水四氢呋喃溶解后加入3-10mL三乙胺，降温至-10℃后加入新戊酰氯2-5mL，立刻有白色沉淀生成。反应物升温至0℃反应2h后继续升温至25℃反应1h，过滤除去不溶物后蒸发溶剂至干得无色粘稠液体为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐。

20gmPEG₂₀₀₀-PLA₁₀₀₀溶解于100mL二氯甲烷，加入三乙胺3.5mL，4-吡咯烷基吡啶0.37g，将此溶液冷却至0℃后，将上述反应所得的6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐溶解于50mL二氯甲烷后加入到mPEG-PLA的二氯甲烷溶液中，搅拌反应1h后升温至25℃继续搅拌反应24h。反应物用冰乙醚沉淀后过滤得白色固体既为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸封端的甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段共聚物(mPEG₂₀₀₀-PLA₁₀₀₀-Lys(Fmoc))

实施例3

1)mPEG₂₀₀₀-PLA₁₅₀₀的合成

10g甲氧基聚乙二醇2000加入到聚合瓶中，升温至130℃搅拌并抽真空1h，冷却至室温后加入D，L-丙交酯13g，辛酸亚锡6mg，真空密闭聚合瓶，反应物在130℃聚合15h后产物用二氯甲烷溶解，冰乙醚沉淀后过滤得白色固体既为mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀嵌段共聚物，核磁计算聚合物分子量为3500，GPC测定高分子的分子量及分子量分布系数分别为4746，1.06。

2)封端反应

11.7g6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸用50mL无水四氢呋喃溶解后加入3.5mL三乙胺，降温至-10℃后加入新戊酰氯3.05mL)，立刻有白色沉淀生成。反应物升温至0℃反应2h后继续升温至25℃反应1h，过滤除去不溶物后蒸发溶剂至干得无色粘稠液体为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐。

20gmPEG₂₀₀₀-PLA₁₅₀₀溶解于100mL二氯甲烷，加入三乙胺3.5mL，4-吡咯烷基吡啶0.37g，将此溶液冷却至0℃后，将上述反应所得的6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐溶解于50mL二氯甲烷后加入到mPEG-PLA的二氯甲烷溶液中，搅拌反应1h后升温至25℃继续搅拌反应24h。反应物用冰乙醚沉淀后过滤得白色固体既为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸封端的甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段共聚物(mPEG₂₀₀₀-PLA₁₅₀₀-Lys(Fmoc))

实施例4

1)mPEG₂₀₀₀-PLA₁₈₀₀的合成

10g甲氧基聚乙二醇2000加入到聚合瓶中，升温至130℃搅拌并抽真空1h，冷却至室温后加入D，L-丙交酯15g，辛酸亚锡8mg，真空密闭聚合瓶，反应物在130℃聚合15h后产物用二氯甲烷溶解，冰乙醚沉淀后过滤得白色固体既为mPEG2000-PLA1800嵌段共聚物，核磁计算聚合物分子量为3800，GPC测定高分子的分子量及分子量分布系数分别为4938，1.06。

2)封端反应

11.7g6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸用50mL无水四氢呋喃溶解后加入3.5mL三乙胺，降温至-10℃后加入新戊酰氯3.05mL，立刻有白色沉淀生成。反应物升温至0℃反应2h后继续升温至25℃反应1h，过滤除去不溶物后蒸发溶剂至干得无色粘稠液体为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐。

20gmPEG₂₀₀₀-PLA₁₈₀₀溶解于100mL二氯甲烷，加入三乙胺3.5mL，4-吡咯烷基吡啶0.37g，将此溶液冷却至0℃后，将上述反应所得的6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐溶解于50mL二氯甲烷后加入到mPEG-PLA的二氯甲烷溶液中，搅拌反应1h后升温至25℃继续搅拌反应24h。反应物用冰乙醚沉淀后过滤得白色固体既为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸封端的甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段共聚物(mPEG₂₀₀₀-PLA₁₈₀₀-Lys(Fmoc))。

实施例5

20mg卡巴他赛和由实施例1制得的mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀-Lys(Fmoc)80mg于45℃下溶解于20mL乙醇，旋转蒸发去除乙醇后加入2mL超纯水溶解药膜，所得溶液经过0.22um滤膜过滤后加入500mg甘露醇后冻干得到卡巴他赛胶束冻干粉，载药量2％。

实施例6

60mg卡巴他赛和实施例1制得的mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀-Lys(Fmoc)1140mg于45℃溶解于20mL乙醇，旋转蒸发除乙醇后加入20mL超纯水溶解药膜，所得溶液经过0.22um滤膜过滤后加入300mg甘露醇后冻干得到卡巴他赛胶束冻干粉，载药量5％。

实施例7

80mg卡巴他赛和由实施例2制得的mPEG₂₀₀₀-PLA₁₀₀₀-Lys(Fmoc)455mg于45℃下溶解于20mL乙醇，旋转蒸发去除乙醇后加入2mL超纯水溶解药膜，加入10mg甘露醇后所得溶液经过0.22um滤膜过滤后冻干得到卡巴他赛胶束冻干粉，载药量15％。

实施例8

30mg卡巴他赛和由实施例3制得的mPEG₂₀₀₀-PLA₁₅₀₀-Lys(Fmoc)270mg于45℃下溶解于5mL乙醇，旋转蒸发去除乙醇后加入10mL超纯水溶解药膜，所得溶液经过0.22um滤膜过滤后加入300mg蔗糖后冻干得到卡巴他赛胶束冻干粉，载药量10％。

实施例9

10mg卡巴他赛和由实施例4制得的mPEG₂₀₀₀-PLA₁₈₀₀-Lys(Fmoc)990mg于45℃下溶解于5mL乙醇，旋转蒸发去除乙醇后加入5mL超纯水溶解药膜，所得溶液经过0.22um滤膜过滤后加入10mg葡萄糖后冻干得到卡巴他赛胶束冻干粉，载药量1％。

实施例10

分别制备mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀/卡巴他赛胶束溶液和mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀-Lys(Fmoc)/卡巴他赛胶束溶液(药物浓度为2mg/mL)，分别在两种胶束溶液中加入胎牛血清(FBS)并调节血清浓度至50％，采用动态光散射测定不同时间胶束的粒径变化，两种卡巴他赛胶束的初始粒径均在21nm左右，然后mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀-Lys(Fmoc)/卡巴他赛胶束在50％的血液溶液中12h后粒径依然没有明显变化；然而mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀/卡巴他赛胶束在50％的血清溶液中测得的胶束粒径分布明显变宽，说明胶束发生了聚集。由此可见，mPEG₂₀₀₀-PLA₁₃₀₀-Lys(Fmoc)/卡巴他赛胶束具有很高的稳定性。

本发明中所述超纯水为注射用水，为本领域技术人员公知。

本发明不局限于上述实施方式，任何人在本发明的启示下得出的其他任何与本发明相同或相近似的产品，均不排除在本发明的保护范围之外。

Claims (14)

1.一种卡巴他赛胶束载药系统，其特征在于，所述载药系统由质量分数为85％-99.9％的两亲性嵌段共聚物和质量分数为0.1-15％的卡巴他赛组成，所述两亲性嵌段共聚物包括亲水性链段和疏水性链段，亲水性链段为分子量100-6000的聚乙二醇或分子量300-6000的甲氧基聚乙二醇，疏水性链段为分子量200-6000的聚丙交酯，疏水性链段以含有芴甲氧羧基的基团和/或含有苯环结构的氨基酸进行封端，聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.1-30∶1。

2.根据权利要求1所述载药系统，其特征在于，亲水链为分子量300-4000的甲氧基聚乙二醇，疏水链为分子量300-5000的聚丙交酯；聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.5-10∶1。

3.根据权利要求1所述载药系统，其特征在于，亲水链为分子量600-3000的甲氧基聚乙二醇，疏水链为分子量400-4000的聚丙交酯；聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.5-10∶1。

4.根据权利要求1-3任一项所述载药系统，其特征在于，所述载药系统由质量分数为90％-97％的两亲性嵌段共聚物和质量分数为3-10％的卡巴他赛组成；所述亲水性链段是分子量为1500-3000的甲氧基聚乙二醇，疏水性链段是分子量1000-2000的聚丙交酯，该疏水性链段以含有芴甲氧羧基的基团和/或含有苯环结构的氨基酸进行封端，甲氧基聚乙二醇与聚丙交酯的重量比例是0.5-10∶1。

5.根据权利要求1所述载药系统，其特征在于，所述的含有芴甲氧羧基的基团为6-芴甲氧羰基氨基、6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸、6-芴甲氧羰基氨基-2-苄氧羰基氨基己酸中的任一或其组合。

6.一种含有权利要求1所述载药系统的冻干制剂，其特征在于，所述冻干制剂由载药系统和冻干辅料组成，卡巴他赛与冻干辅料的的重量比是1∶0.1-50。

7.根据权利要求6所述的冻干制剂，其特征在于，所述卡巴他赛与冻干辅料的重量比是1∶0.5-30。

8.根据权利要求6所述的冻干制剂，其特征在于，所述卡巴他赛与冻干辅料的重量比是1∶1-10。

9.根据权利要求1所述的冻干制剂，其特征在于，所述冻干辅料为乳糖、甘露醇、木糖醇、山梨醇、蔗糖、海藻糖、果糖、葡萄糖、海藻酸钠或者明胶的一种或多种组合。

10.一种权利要求1所述载药系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇加入到聚合瓶中，升温搅拌并抽真空，冷却后加入丙交酯，辛酸亚锡，反应物高温聚合后产物用二氯甲烷溶解，沉淀后过滤得固体聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物；

(2)将芴甲氧羰基氨基用无水四氢呋喃溶解后加入三乙胺，降温后加入新戊酰氯，有沉淀生成，反应物升温后继续反应，过滤除去杂质后蒸发溶剂至干，得粘稠液体为芴甲氧羰基氨基的新戊酐；

(3)将聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物溶解于二氯甲烷中，加入三乙胺，4-吡咯烷基吡啶，将此溶液冷却后，将上述反应所得的芴甲氧羰基氨基的新戊酐溶解于二氯甲烷中，后加入到聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇嵌段聚合物的二氯甲烷溶液中，搅拌后升温，继续搅拌反应。反应物沉淀后过滤得固体即为芴甲氧羰基氨基封端的聚乙二醇或甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段聚合物；

(4)将聚合物和卡巴他赛制成胶束溶液。

11.如权利要求10所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)10g甲氧基聚乙二醇2000加入到聚合瓶中，升温搅拌并抽真空，冷却后加入丙交酯11g，辛酸亚锡5.5mg，反应物高温聚合后产物用二氯甲烷溶解，乙醚沉淀后过滤得白色固体既为mPEG-PLA嵌段聚合物；

(2)11.7g6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸用无水四氢呋喃溶解后加入3-10mL三乙胺，降温后加入新戊酰氯2-5mL，有沉淀生成。反应物升温后继续反应1h，过滤除去杂质后蒸发溶剂至干，得粘稠液体为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐；

(3)20gmPEG-PLA溶解于二氯甲烷中，加入三乙胺5mL，4-吡咯烷基吡啶1.0g，将此溶液冷却后，将上述反应所得的6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸新戊酐溶解于二氯甲烷中，后加入到mPEG-PLA的二氯甲烷溶液中，搅拌反应1h后升温，继续搅拌反应。反应物沉淀后过滤得固体既为6-芴甲氧羰基氨基-2-叔丁氧羰基氨基己酸封端的甲氧基聚乙二醇-聚丙交酯嵌段聚合物(mPEG-PLA-Lys(Fmoc))；

(4)将聚合物和卡巴他赛制成胶束溶液。

12.如权利要求11所述的制备方法，其特征在于，所述载药系统制备成冻干制剂，包括以下步骤：

将步骤(4)所得胶束溶液与冻干辅料混合冻干，制得冻干制剂。

13.根据权利要求10所述制备方法，其特征在于，所述冻干步骤前有无菌处理的步骤。

14.一种权利要求1所述载药系统在制备治疗肿瘤疾病的药物的应用。