CN105510504B - 测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，即食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的量化分析方法，是一种基于气相色谱‑串联质谱仪测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，包括内标溶液、标准工作溶液和样品溶液的制备，气相色谱‑串联质谱仪分析，以及测定结果的计算等步骤。本发明操作简便，响应灵敏、定性定量分析准确，有效地减少了因样品基质复杂带来的干扰。

Description

测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法

技术领域

本发明涉及一种基于气相色谱—串联质谱仪测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，属于食品添加剂理化指标检测技术领域。

背景技术

咪唑(分子结构式如下所示)，即1,3-二氮唑，是一个五元杂环芳香性有机化合物，化学式为C₃H₄N₂，分子量为68.08，CAS号为288-32-4，它也是一个生物碱，呈白色或浅黄色固体结晶，易溶于水、乙醇、乙醚、氯仿、吡啶，微溶于苯，极微溶于石油醚，具有酸性，也具有碱性。咪唑为平面五元环状化合物，它的两个氮原子间存在永久偶极，极性很强，偶极矩为3.61D，并且分子间存在氢键缔合，导致了咪唑具有反常高的沸点(256℃)。分子中存在一个6电子共轭大π键，故具有典型的芳香性。与氢以σ键相连的氮原子提供一对电子，环内其余四个原子各提供一个电子成键。毒理学数据表明该物质有毒，对小鼠经口LD50为18.80mg/kg，注射LD50为610mg/kg，其毒性及防护方法与乙二胺相似。此外，该物质对环境可能有危害，对水体应给予特别注意。综合文献结果，一般说来，咪唑并不直接当作食品添加剂使用，很大可能是作为副产物而被引入使用。

二甲苯麝香(分子结构式如下所示)，又称2,4,6-三硝基-3,3-二甲基-5-叔丁基苯，由间二甲苯用异丁烯烷基化后再硝化反应而得，它是单一的化合物，不同于麝香属于天然的多组分混合物。化学式为C₁₂H₁₅N₃O₆，分子量为297.27，CAS号为81-15-2，呈现浅黄色粉状或针状结晶，具较粗麝香香气，熔点为112.5-114.5℃，沸点为200-202℃，在95％乙醇中的溶解度为7g/L(25℃)，易溶于苯甲酸苄酯和邻苯二甲酸二乙酯，不溶于水、甘油和丙二醇，有干甜的麝香样动物香气，气势较弱但留香长。二甲苯麝香作为高持久性、高生物蓄积性物 质，已被欧盟化学品管理署(ECHA)列为高关注度物质(Substances of Very HighConcern,SVHC)。欧盟“保健和环境科学委员会”致癌、致突变或致生殖毒性(CMR)专家工作组在第29次会议上将二甲苯麝香列为第3类物质。国际日化香料协会(IFRA)计划在IFRA标准第44次修订稿中建议二甲苯麝香不作为日化香料成分使用。国际日化香料研究所(RIFM)也建议二甲苯麝香不得用于唇用产品或口腔卫生用品。我国化妆品卫生规范及欧盟化妆品规程(Council Direc2tive 76/768/EEC)中规定二甲苯麝香为化妆品组分中限用物质(不得用于口腔卫生用品)，在香精、花露水和其它产品中的限量分别为1.0％、0.4％和0.03％。

芝麻酚(分子结构式如下所示)，又称3,4-亚甲二氧基苯酚，化学式为C₇H₆O₃，分子量为138.12，CAS号为533-31-3，熔点为62-65℃，沸点为113-116℃，略溶于水，呈现白色至浅黄色结晶性粉末或颗粒，易溶于乙醇、乙醚，芝麻酚的合成技术主要有三条：其一是从芝麻油中提取，其二是从胡椒胺出发进行全合成，其三是从洋茉莉醛出发的半合成路线。芝麻酚的致肿瘤数据表明：大鼠经口TDLo为874mg/kg/2Y-C，瘤-致癌的RTECS标准，胃肠道-肿瘤；小鼠经口TDLo为1092mg/kg/2Y-C，瘤-致癌的RTECS标准，胃肠道-肿瘤；大鼠经口TD为1092mg/kg/2Y-C，瘤-致癌的RTECS标准，胃肠道-肿瘤；小鼠经口TD为1612mg/kg/2Y-C，瘤-致癌的RTECS标准，胃肠道-肿瘤。2006年，日本厚生劳动省宣布禁用的42种食品添加剂中就包括芝麻酚。

食用香精是日常生活、轻工业生产中不可或缺的化合物质，其安全性是食品总体安全性非常重要的一个方面，而食品安全性控制的源头，根本在于生产原料，为此，必须对食用香精中关注的化合物质进行监控。文献调研表明，现行检测咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的方法主要有气相色谱和液相色谱。鉴于咪唑、二甲 苯麝香和芝麻酚在食用香精中有可能被用到，因此探索一种快速、准确的同时检测咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的方法，对食用香精中该系列物质的残留量进行有效控制，进而保障食用添加剂的使用安全性，就显得非常迫切和十分必要。

发明内容

本发明旨在克服现有的技术缺陷，提供一种采用气相色谱-串联质谱仪测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，该方法能准确量化分析食用香精中痕量咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的残留量，测定结果准确、灵敏度高，基质干扰少。

具体来说，本发明采用了以下技术方案：

一种测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)内标溶液的制备：以丙酸苯乙酯为内标物，使用乙醇为溶剂，制备内标溶液；

(2)标准工作溶液的制备：以咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的标准品为目标物，使用乙醇为溶剂，经逐级稀释制备成标准储备溶液，然后分别加入一定量的内标溶液，制备成标准工作溶液；

(3)样品溶液的制备：称取一定量的食用香精样品于离心管中，加入一定量的水，再准确移入一定体积的内标溶液，用漩涡混合器分散均匀；接着再加入一定体积的乙醇，超声萃取，加入一定量的无水硫酸钠，摇匀后静置，之后于离心机内离心，取上层清液过有机相滤膜，得样品溶液；

(4)气相色谱-串联质谱仪分析：用气相色谱-串联质谱仪对标准工作溶液和样品溶液进行检测分析；

(5)标准工作曲线的绘制及样品结果的计算。

其中，步骤(1)内标溶液的制备包括：

(1a)内标储备液：称取0.2g丙酸苯乙酯，精确至0.0001g，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀；

(1b)内标溶液：准确移取0.1mL内标储备液，用乙醇定容至100mL容量瓶中，摇匀。

另外，步骤(2)标准工作溶液的制备包括：

(2a)一级标准储备液：分别称取咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚各0.1g，精确至0.0001g，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀；

(2b)二级标准储备液：准确移取1mL一级标准储备液，于100mL的容量瓶中，用乙醇稀释并定容至刻度；

(2c)标准工作溶液：分别准确移取二级标准储备液20μL、50μL、100μL、200μL、500μL和1000μL至10mL的容量瓶中，再分别准确加入100μL内标溶液，用乙醇稀释并定容至刻度，得系列标准工作溶液。

进一步，步骤(3)样品溶液的制备包括：称取0.5g样品，精确到0.0001g，置于50mL离心管中，加入1mL水，准确移入100μL内标溶液，用漩涡混合器分散均匀，再加入8mL乙醇，置于超声波发生器内超声萃取20min，加入0.5g无水硫酸钠，摇匀后静置5min，之后于离心机内在4000r/min转速下离心5min，取上层清液过0.45μm有机相滤膜，得到样品进样溶液。

优选地，步骤(4)GC-MS/MS分析的仪器分析条件为：采用规格为30m×0.25mm×0.25μm的HP-INNOWAX毛细管色谱柱；载气为氦气，恒流速度为1.0mL/min；进样方式：进样量为1μL，脉冲不分流进样，进样脉冲压力为25psi，时间为1min；进样口温度为250℃；传输线温度为260℃；升温程序为初始温度为100℃，以3℃/min的速率升高至240℃，保持5min；质谱分析条件为：电离方式为EI源，正离子模式；离子源温度：230℃；四极杆温度：均为150℃；碰撞气：氮气，流速1.5mL/min，载气氦气流速为2.25mL/min；多反应监测MRM模式，详细参数列于下表:

目标物的MRM参数情况

在以上方法中，步骤(5)标准曲线绘制及结果计算如下：以标准工作溶液中目标物与内标的浓度之比为横坐标，以色谱图中目标物与内标的峰面积之比为纵坐标，进行线性回归分析，得到标准工作曲线，将相同条件下测得的样品溶液中目标物与内标的色谱峰面积比，代入标准工作曲线，根据下列公式求得食用香精样品中目标物的含量：

式中：

W——食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量，单位为mg/kg；

A——咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的峰面积；

As——内标物丙酸苯乙酯的峰面积；

b——标准工作曲线的截距；

Ms——添加内标物丙酸苯乙酯的质量，单位为μg；

a——标准工作曲线的斜率；

M——食用香精样品的质量，单位为支。

有益效果：本发明的检测方法对样品处理方法及色谱质谱分析条件进行了优 化确认。与现有技术相比，本发明具有如下优良效果：

(1)本发明方法创新使用气相色谱-串联质谱仪测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚痕量级别的残留量，解决了该类物质残留量水平低，以及复杂基质对目标物的分析干扰严重等因素的影响。

(2)本发明在样品前处理过程中，针对食用香精样品来源广泛、复杂不一的特征，使用少剂量水+多剂量乙醇的溶剂体系进行溶解，再结合使用漩涡混合器将其混合均匀，对目标物进行萃取。方法思路新颖，简便可靠，创新性强，弥补了现行方法的不足。

(3)本发明方法利用内标法定量，可以不用精准定容，且可以减少由前处理方法重现性和仪器精密度问题带来的误差。

附图说明

图1为本发明测定方法的流程图；

图2为标准工作溶液中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚和内标丙酸苯乙酯的离子对色谱图；

图3为食用香精(加标)样品中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚和内标丙酸苯乙酯的离子对色谱图。

具体实施方式

本发明公开一种量化分析食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，包括以下步骤：

(1)内标溶液的制备：以丙酸苯乙酯为内标物，使用乙醇为溶剂，制备内标溶液；

(2)标准工作溶液的制备：以咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚等物质的标准品为目标物，使用乙醇为溶剂，经逐级稀释制备成标准储备溶液，然后分别加入一 定量的内标溶液，制备成标准工作溶液；

(3)样品溶液的制备：称取一定量的食用香精样品于离心管中，加入一定量的水，再准确移入一定体积的内标溶液，用漩涡混合器分散均匀；接着再加入一定体积的乙醇，超声萃取，加入一定量的无水硫酸钠，摇匀后静置。之后于离心机内离心，取上层清液过有机相滤膜，得样品溶液；

(4)气相色谱-串联质谱仪分析：用气相色谱-串联质谱仪(GC-MS/MS)对标准工作溶液和样品溶液进行检测分析；

(5)标准工作曲线的绘制及样品结果的计算。

所述的内标溶液的制备，具体包括以下步骤：(1)内标储备液：称取0.2g(精确至0.0001g)丙酸苯乙酯，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀。(2)内标溶液：准确移取0.1mL内标储备液，用乙醇定容至100mL容量瓶中，摇匀。

所述的标准工作溶液的制备具体包括以下步骤：(1)一级标准储备液：分别称取咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚各0.1g，精确至0.0001g，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀。(2)二级标准储备液：准确移取1mL一级标准储备液，于100mL的容量瓶中，用乙醇稀释并定容至刻度。(3)标准工作溶液：分别准确移取二级标准储备液20μL、50μL、100μL、200μL、500μL和1000μL至10mL的容量瓶中，再分别准确加入100μL内标溶液，用乙醇稀释并定容至刻度，得系列标准工作溶液。

所述的样品溶液的制备具体包括以下过程：称取0.5g(精确到0.0001g)于50mL离心管中，加入1mL水，准确移入100μL内标溶液，用漩涡混合器分散均匀，再加入8mL乙醇，置于超声波发生器内超声萃取20min，加入0.5g无水硫酸钠，摇匀后静置5min。之后于离心机内在4000r/min转速下离心5min，取上层清液过0.45μm有机相滤膜，得到样品进样溶液。

所述的GC-MS/MS分析，其仪器分析条件为：采用HP-INNOWAX(30m×0.25mm×0.25μm)毛细管色谱柱；载气为氦气，恒流速度为1.0mL/min； 进样方式：进样量为1μL，脉冲不分流进样，进样脉冲压力为25psi，时间为1min；进样口温度为250℃；传输线温度为260℃；升温程序为初始温度为100℃，以3℃/min的速率升高至240℃，保持5min。其质谱分析条件为：电离方式为EI源，正离子模式；离子源温度：230℃；四极杆温度：均为150℃；碰撞气：氮气，流速1.5mL/min，载气(氦气)流速为2.25mL/min；多反应监测(MRM)模式，详细参数列于下表。

目标物的MRM参数情况

所述的标准曲线绘制及结果计算如下：以标准工作溶液中目标物与内标的浓度之比为横坐标，以色谱图中目标物与内标的峰面积之比为纵坐标，进行线性回归分析，得到标准工作曲线。将相同条件下测得的样品溶液中目标物与内标的色谱峰面积比，代入标准工作曲线，根据下列公式求得食用香精样品中目标物的含量：

式中：

W——食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)；

A——咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的峰面积；

As——内标物丙酸苯乙酯的峰面积；

b——标准工作曲线的截距；

Ms——添加内标物丙酸苯乙酯的质量，单位为微克(μg)；

a——标准工作曲线的斜率；

M——食用香精样品的质量，单位为支。

下面再结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

本实施例对食用香精中痕量咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的检测方法如下(所述检测方法的流程图如图1所示)：

(1)内标溶液的制备

①内标储备液：准确称取0.2060g丙酸苯乙酯，于100mL的容量瓶中，用乙醇溶解并定容至刻度。②内标溶液：准确移取0.1mL内标储备液，于100mL的容量瓶中，用乙醇稀释并定容至刻度。其中丙酸苯乙酯的浓度为2.06μg/mL。

(2)标准工作溶液的制备

①一级标准储备液：一级标准储备液：分别称取咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚各0.1000g、0.1020g和0.1019g，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀。②二级标准储备液：准确移取1mL一级标准储备液，于100mL的容量瓶中，用乙醇稀释并定容至刻度。③标准工作溶液：分别准确移取二级标准储备液20μL、50μL、100μL、200μL、500μL和1000μL至10mL的容量瓶中，再分别准确加入100μL内标溶液，用乙醇稀释并定容至刻度，得系列标准工作溶液。其中咪唑的浓度范围为0.02～1.00μg/mL、二甲苯麝香的浓度范围为0.0204～1.02μg/mL和芝麻酚的浓度范围为0.0202～1.019μg/mL，其中内标丙酸苯乙酯的浓度为0.0206μg/mL。

(3)样品溶液的制备

以一市场销销的食用香精为分析对象，称取0.5132g样品于50mL离心管中， 加入1mL水，准确移入100μL内标溶液，用漩涡混合器分散均匀，再加入8mL乙醇，置于超声波发生器内超声萃取20min，加入0.5g无水硫酸钠，摇匀后静置5min。之后于离心机内在4000r/min转速下离心5min，取上层清液过0.45μm有机相滤膜，得到样品进样溶液。

(4)气相色谱-串联质谱分析

分别取6不同浓度的标准工作溶液和样品待测溶液进行气相色谱-串联质谱分析(所述标准工作溶液、典型加标样品溶液中目标物和内标物的色谱图如图2～图3所示)。

其仪器分析条件为：采用HP-INNOWAX(30m×0.25mm×0.25μm)毛细管色谱柱；载气为氦气，恒流速度为1.0mL/min；进样方式：进样量为1μL，脉冲不分流进样，进样脉冲压力为25psi，时间为1min；进样口温度为250℃；传输线温度为260℃；升温程序为初始温度为100℃，以3℃/min的速率升高至240℃，保持5min。其质谱分析条件为：电离方式为EI源，正离子模式；离子源温度：230℃；四极杆温度：均为150℃；碰撞气：氮气，流速1.5mL/min，载气(氦气)流速为2.25mL/min；多反应监测(MRM)模式，详细参数列于下表。

目标物的MRM参数情况

(5)标准曲线绘制及结果计算

首先，以标准工作溶液中目标物与内标的浓度之比为横坐标，以色谱图中目标物与内标的峰面积之比为纵坐标，进行线性回归分析，得到标准工作曲线。取最低浓度的标准工作溶液，做9次平行检测分析，计算其标准偏差，以3倍的标准偏差对应的浓度，换算得出方法的检出限。与标准工作曲线相对应的回归方程、相关系数、检出限等数据见下表。

分析方法的工作曲线和检出限

将相同条件下测得的样品溶液中目标物与内标的色谱峰面积比，代入标准工作曲线，根据下列公式求得食用香精样品中目标物的含量。

式中：

W——食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量，单位为毫克每千克(mg/kg)；

A——咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的峰面积；

As——内标物丙酸苯乙酯的峰面积；

b——标准工作曲线的截距；

Ms——添加内标物丙酸苯乙酯的质量，单位为微克(μg)；

a——标准工作曲线的斜率；

M——食用香精样品的质量，单位为支。

本实施例中食用香精样品主流烟气中8种主要吡嗪类香味物质检测结果见下表：

物质名称	含量(mg/kg)
		咪唑	ND
二甲苯麝香	ND
		芝麻酚	ND

备注：ND为未检出，表示结果低于检出限。

实施例2

本实施例对本发明的精密度和加标回收率的检测方法如下：

以实施例1中所用的香精样品为分析对象，对其添加适量的标准溶液得到试验样品。然后，分别进行了日内精密度实验，日内精密度实验为相同样品在同一条件下平行测定6次(同一批次处理)，分别计算6次平行测定结果的相对标准偏差(RSD)，测定结果见下表。表中结果显示，本实验方法的日内重复性的RSD<10％，对于痕量物质的定量分析来说，表明方法具有良好的精密度。

以重复性试验所用试验样品为分析对象，按照上述样品前处理方法进行处理，加入其释放量相当的含量的标样，进行基质加标试验，结果见下表。从表中可以看出，样品的加标回收率在84.50％～118.88％之间，说明方法具有较好的准确性。

物质名称	RSD(％)
		咪唑	89.65
二甲苯麝香	94.37
		芝麻酚	104.24

本实施例所用到的标准溶液仅以其中的一个浓度为例进行说明的，其它浓度值所制备的标准溶液经气相色谱-串联质谱仪分析所获得的标准曲线及回归方程与上述实施例相同，在此不在一一列举。所举实施例只是为了更好的理解本发明方法，并不具有任何限制作用，即上述方法或者等同上述情况的方法均包含在本 发明的技术方案的保护范围中。

上面结合附图对本发明的实施方式作了详细的说明，但是本发明不限于上述实施方式，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下做出各种变化。

Claims (5)

1.一种测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)内标溶液的制备：以丙酸苯乙酯为内标物，使用乙醇为溶剂，制备内标溶液；

(2)标准工作溶液的制备：以咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的标准品为目标物，使用乙醇为溶剂，经逐级稀释制备成标准储备溶液，然后分别加入一定量的内标溶液，制备成标准工作溶液；

(3)样品溶液的制备：称取一定量的食用香精样品于离心管中，加入一定量的水，再准确移入一定体积的内标溶液，用漩涡混合器分散均匀；接着再加入一定体积的乙醇，超声萃取，加入一定量的无水硫酸钠，摇匀后静置，之后于离心机内离心，取上层清液过有机相滤膜，得样品溶液；

(4)气相色谱-串联质谱仪分析：用气相色谱-串联质谱仪对标准工作溶液和样品溶液进行检测分析；

(5)标准工作曲线的绘制及样品结果的计算，

其中，步骤(4)GC-MS/MS分析的仪器分析条件为：采用规格为30m×0.25mm×0.25μm的HP-INNOWAX毛细管色谱柱；载气为氦气，恒流速度为1.0mL/min；进样方式：进样量为1μL，脉冲不分流进样，进样脉冲压力为25psi，时间为1min；进样口温度为250℃；传输线温度为260℃；升温程序为初始温度为100℃，以3℃/min的速率升高至240℃，保持5min；质谱分析条件为：电离方式为EI源，正离子模式；离子源温度：230℃；四极杆温度：均为150℃；碰撞气：氮气，流速1.5mL/min，载气氦气流速为2.25mL/min；多反应监测MRM模式，详细参数列于下表:

目标物的MRM参数情况

2.根据权利要求1所述的测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，步骤(1)内标溶液的制备包括：

(1a)内标储备液：称取0.2g丙酸苯乙酯，精确至0.0001g，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀；

(1b)内标溶液：准确移取0.1mL内标储备液，用乙醇定容至100mL容量瓶中，摇匀。

3.根据权利要求1所述的测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，步骤(2)标准工作溶液的制备包括：

(2a)一级标准储备液：分别称取咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚各0.1g，精确至0.0001g，用乙醇溶解并定容至100mL容量瓶中，摇匀；

(2b)二级标准储备液：准确移取1mL一级标准储备液，于100mL的容量瓶中，用乙醇稀释并定容至刻度；

(2c)标准工作溶液：分别准确移取二级标准储备液20μL、50μL、100μL、200μL、500μL和1000μL至10mL的容量瓶中，再分别准确加入100μL内标溶液，用乙醇稀释并定容至刻度，得系列标准工作溶液。

4.根据权利要求1所述的测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，步骤(3)样品溶液的制备包括：称取0.5g样品，精确到0.0001g，置于50mL离心管中，加入1mL水，准确移入100μL内标溶液，用漩涡混合器分散均匀，再加入8mL乙醇，置于超声波发生器内超声萃取20min，加入0.5g无水硫酸钠，摇匀后静置5min，之后于离心机内在4000r/min转速下离心5min，取上层清液过0.45μm有机相滤膜，得到样品进样溶液。

5.根据权利要求1所述的测定食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量的方法，其特征在于，步骤(5)标准曲线绘制及结果计算如下：以标准工作溶液中目标物与内标的浓度之比为横坐标，以色谱图中目标物与内标的峰面积之比为纵坐标，进行线性回归分析，得到标准工作曲线，将相同条件下测得的样品溶液中目标物与内标的色谱峰面积比，代入标准工作曲线，根据下列公式求得食用香精样品中目标物的含量：

$W=\frac{(\frac{A}{As}-b)\&times;Ms}{a\&times;M}$

式中：

W——食用香精中咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚残留量，单位为mg/kg；

A——咪唑、二甲苯麝香和芝麻酚的峰面积；

As——内标物丙酸苯乙酯的峰面积；

b——标准工作曲线的截距；

Ms——添加内标物丙酸苯乙酯的质量，单位为μg；

a——标准工作曲线的斜率；

M——食用香精样品的质量，单位为支。