CN105407973A

CN105407973A - Nedd8活化酶抑制剂及化学治疗剂的投与

Info

Publication number: CN105407973A
Application number: CN201480033555.4A
Authority: CN
Inventors: 阿里森·伯格; 艾瑞克·S·莱特凯普
Original assignee: Millennium Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Millennium Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2013-05-14
Filing date: 2014-05-13
Publication date: 2016-03-16
Also published as: US20180325904A1; EP2996773B1; JP2016522826A; EP2996773A2; JP6556701B2; WO2014186388A3; JP2019112461A; US20160074404A1; EP2996773A4; CA2923752A1; WO2014186388A2; US10786505B2

Abstract

本发明揭示用于治疗需要此类治疗的患者的各种实体肿瘤的方法。所述方法包含向此类患者投与NEDD8活化酶NAE抑制剂，例如氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯(MLN4924)或医药学上可接受的盐与一或多种化学治疗剂的组合。本发明还揭示用于治疗各种实体肿瘤的药物。

Description

NEDD8活化酶抑制剂及化学治疗剂的投与

优先权主张

本申请案主张2013年5月14日提交的美国临时申请案第61/822,994号、2013年9月6日提交的美国临时申请案第61/874,393号及2013年10月17日提交的美国临时申请案第61/891,943号的优先权。前述申请案中的每一者的全部内容都以引用的方式并入本文中。

技术领域

本发明涉及肿瘤学及用于治疗癌症的方法。确切地说，本发明提供通过投与NEDD8活化酶(NAE)抑制剂与一或多种化学治疗剂的组合来治疗各种实体肿瘤的方法。

背景技术

癌症是美国导致死亡的第二大最常见原因，并且全世界每八个死亡病例中就有一例。据美国国家癌症研究所(NationalCancerInstitute)估计，在2012年1月1日，有约1370万具有癌症病史的美国人存活。这些个体中有一些是无癌症的，而其它个体仍有癌症迹象并且可能已经开始进行治疗。在美国，预期在2013年将诊断出约1,660,290例新增癌症病例。2013年，预期有约580,350个美国人死于癌症，差不多每天1,600人。尽管医学的进步改善了癌症存活率，但仍不断需要新的更有效的治疗。当前可用的实体肿瘤治疗包括新辅助化学疗法和/或放射疗法以及在手术去除或切除之后进行的辅助化学疗法和/或放射疗法。此外，有许多更新的靶向疗法也被用于治疗各种实体肿瘤。

经显示，抑制NEDD8活化酶(NAE)在异种移植物模型中可诱导癌细胞死亡并且抑制肿瘤生长。参见例如，T.A.苏西(T.A.Soucy)等人,自然(Nature),2009,458,732-737；T.A.苏西等人,临床癌症研究(Clin.CancerRes.),2009,15(12),3912-3916；及J.E.布朗尼(J.E.Brownell)等人,分子与细胞(Mol.Cell.),2010,37(1),102-111。有关NAE抑制剂I期临床研究的报告包括R.T.索兹(R.T.Swords)等人,血液(Blood),2010,115,3796-3800；J.S.科奥(J.S.Kauh)等人,临床肿瘤学杂志(J.Clin.Oncol.),2011,29,摘要3013；及S.巴蒂亚(S.Bhatia)等人,临床肿瘤学杂志,2011,29,摘要8529。NAE抑制剂描述于美国专利申请案第11/346,469号(公开案第2006/0189636号，专利第7,951,810号)、第11/700,614号(公开案第2007/0191293号)及第11/890,338号(公开案第2008/0051404号，专利第8,008,307号)中。

为了延长患者的生命，同时维持高品质生活，需要在实体肿瘤治疗中提供有益作用的新的治疗剂组合。另外，新组合可以提供相较于每一单独药剂有所增加的益处。在实体肿瘤可能对当前可用的治疗方案具有抗性或用当前可用的治疗方案难以治愈的情况下，情况尤其如此。

发明内容

在一个方面，本发明涉及治疗癌症的方法，其包含向需要此类治疗的个体组合投与NAE抑制剂与一或多种化学治疗剂。

在一个方面，本发明涉及一种试剂盒，其包含用于治疗需要此类治疗的个体的癌症的药物。所述试剂盒包括含NAE抑制剂的药物，及有关投与所述NAE抑制剂和所述一或多种化学治疗剂的说明书；或所述试剂盒包括含所述一或多种化学治疗剂的药物，及有关投与所述一或多种化学治疗剂和NAE抑制剂的说明书。所述试剂盒可以同时含有包含NAE抑制剂的药物和包含一或多种化学治疗剂的药物，及有关投与所述NAE抑制剂和所述一或多种化学治疗剂的说明书。

在一个方面，本发明涉及一种用于治疗需要此类治疗的个体的癌症的药物。所述药物包含NAE抑制剂和一或多种化学治疗剂。

附图说明

图1显示在向小鼠投与MLN4924和多西他赛(docetaxel)之后，在PHTX02B异种移植物模型中肿瘤体积随时间变化的曲线。

图2显示在向小鼠投与MLN4924和吉西他滨之后，在PHTX02B异种移植物模型中肿瘤体积随时间变化的曲线。

图3显示在向小鼠投与MLN4924和卡铂(carboplatin)之后，在NCI-H69异种移植物模型中肿瘤体积随时间变化的曲线。

图4显示在向小鼠投与MLN4924和多西他赛之后，在LXFE409异种移植物模型中肿瘤体积随时间变化的曲线。

具体实施方式

定义和缩写.

AUC血浆浓度-时间曲线下面积

BSA体表面积

CR完全反应

MTD最大耐受剂量

NAENedd8活化酶

Nedd8神经前体细胞表达发育下调基因8

PR部分反应

QD每天一次

SCLC小细胞肺癌

如本文中所用，术语“癌症”是指以细胞增殖不受控制或失调、细胞分化减少、具有侵袭周围组织的不当能力和/或能够在异位位点建立新生长为特征的一种细胞病症。术语“癌症”包括实体肿瘤和血液肿瘤。术语“癌症”涵盖皮肤、组织、器官、骨骼、软骨、血液及血管的疾病。术语“癌症”进一步涵盖原发性和转移性癌症。

如本文中所用，“临床上有效量”意思指在适当投与患者后足以产生以下作用的治疗性物质的量：(a)使所治疗的病症或疾病状态的严重程度可检测的降低；(b)改善或缓解患者的疾病或病症的症状；或(c)减慢或预防所治疗的病症或疾病状态的发展，或以其它方式使所治疗的病症或疾病状态稳定或延长其稳定(例如防止癌症的另外肿瘤生长)。

当要投与一种以上治疗性物质时，“临床上有效总量”意思指每一种治疗性物质的个别量的总和满足“临床上有效量”的定义，即使多种个别治疗性物质的个别量不满足。举例来说，如果10mgA不是临床上有效量，而且20mgB不是临床上有效量，但是投与10mgA+20mgB引起关于“临床上有效量”的定义所列举的结果中的至少一者，那么10mgA+20mgB的总和将被视为“临床上有效总量”。

在任何形式或组成中，投与的剂量或临床上有效(总)量可以表示为每单位患者BSA的治疗性物质的量，例如以mg/m²表示。

如本文中所用，“患者”意思指经诊断患有疾病、病症或病况；展现疾病、病症或病况的症状，或以其它方式认为罹患疾病、病症或病况的人类。

如本文中所用，“体表面积”(BSA)是使用标准列线图，例如下式计算

B S A (m^{2}) = \sqrt{\frac{H t (c m) \times W t (k g)}{3600}}

或

B S A = \sqrt{\frac{H t (i n) \times W t (l b)}{3131}} .

如本文中所用，卡铂的剂量是基于GFR(肾小球滤过率)的估计值及所需的药物暴露水平，根据浓度×时间曲线下面积(AUC，mg/mL×min)得到，而不是更常见的基于体表面积(mg/m²)的剂量计算。对于所需目标AUC(通常在5与7mg/mL×min之间变化)及GFR估计值，接着通过使用卡尔弗特公式(Calvertformula)计算卡铂的剂量：

总卡铂剂量(mg)＝目标AUC×(估计的肌酸酐清除率+25)。

由于体重或肾功能可能发生变化，故在每次投与卡铂的疗程之前应重复此计算。

GFR的估计是基于根据科克罗夫特-高尔特方程(Cockcroft-GaultEquation)计算肌酸酐清除率(科克罗夫特DW(CockcroftDW),高尔特MH.(GaultMH.),血清肌酸酐中肌酸酐清除率的预测(Predictionofcreatinineclearancefromserumcreatinine.),肾单位(Nephron.)1976；16(1):31-41)：

对于男性：

肌酸酐清除率＝(140-年龄[岁]×体重[kg])])/72×(血清肌酸酐肌酸酐[mg/dL])

对于女性：

肌酸酐清除率＝0.85(140-年龄[岁]×体重[kg])/72×(血清肌酸酐[mg/dL])。

除非另外规定，否则如本文中所用，说明性术语“包括(include)”、“例如”、“举例来说”等(及其变化形式，例如“包括(includes/including)”、“实例”)意图是非限制性的。也就是说，除非另外明确规定，否则这些术语意图暗示“但不限于”，例如“包括”意思指包括(但不限于)。

详细说明

在一些实施例中，本发明涉及一种通过向患者投与MLN4924和一或多种化学治疗剂的组合来治疗患者的实体肿瘤的方法，其中所述化学治疗剂是：(i)紫杉烷(taxane)；(ii)铂类；或(iii)吉西他滨。

化合物氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯：

又称为MLN4924，是一种NEDD8活化酶(NAE)抑制剂。参见例如，T.A.苏西等人,自然,2009,458,732-737；T.A.苏西等人,临床癌症研究,2009,15(12),3912-3916；及J.E.布朗尼等人,分子与细胞,2010,37(1),102-111，其各自以全文引用的方式并入本文中。先前已描述MLN4924、MLN4924的医药组合物、其合成方法及多晶形式。参见例如，美国专利申请案第11/700,614号(公开案第2007/0191293号)、第12/221,399号(公开案第2009/0036678号)及第12/779,331号(公开案第2011/0021544号)，其各自以全文引用的方式并入本文中。如果这些文献中的任一者与本说明书之间存在任何不一致，那么以本说明书为准。

在另一方面，本发明涉及MLN4924或医药学上可接受的盐与一或多种化学治疗剂的组合的用途，其中所述化学治疗剂是：(i)紫杉烷；(ii)铂类；或(iii)吉西他滨，所述组合是用于治疗实体肿瘤。

在另一方面，本发明涉及MLN4924或医药学上可接受的盐与一或多种化学治疗剂的组合的用途，其中所述化学治疗剂是：(i)紫杉烷；(ii)铂类；或(iii)吉西他滨，所述组合是用于制造供治疗实体肿瘤用的药物。

在另一方面，本发明涉及MLN4924或医药学上可接受的盐的用途，其是用于制造供治疗实体肿瘤用的药物，其中所述MLN4924或其医药学上可接受的盐是与一或多种化学治疗剂一起投与，其中所述化学治疗剂是：(i)紫杉烷；(ii)铂类；或(iii)吉西他滨。

在另一方面，本发明涉及一种用于治疗实体肿瘤的试剂盒，其包括含至少一剂MLN4924或其医药学上可接受的盐的至少一种药物，及含至少一剂以下一或多者的至少一种药物：(i)铂类；(ii)紫杉烷；或(iii)吉西他滨或其医药学上可接受的盐，所述用于治疗实体肿瘤的试剂盒进一步包含有关投与所述药物以治疗所识别的有需要的个体的给药说明书。

MLN4924或其医药学上可接受的盐可以与一或多种化学治疗剂组合以单一剂型或以分开的剂型投与。在一个实施例中，当以分开的剂型投与时，所述一或多种化学治疗剂可以在投与MLN4924之前、同时或之后投与。在一些实施例中，当以分开的剂型投与时，可以在所述一或多种化学治疗剂之前投与一或多剂MLN4924或其医药学上可接受的盐。在一些实施例中，所述一或多种治疗剂是在投与MLN4924或其医药学上可接受的盐之前投与。如所属领域技术人员所了解，如本文中所用，MLN4924与化学治疗剂的“组合”投与不仅是指同时或依序投与所述两种药剂，而且还指在单一治疗周期期间投与两种化合物。当将MLN4924或其医药学上可接受的盐与所述一或多种化学治疗剂组合投与时，投与临床上有效总量。

在一些实施例中，MLN4924或医药学上可接受的盐是静脉内(IV)投与的。在一些实施例中，所述一或多种化学治疗剂是静脉内(IV)投与的。

在一些实施例中，所述一或多种化学治疗剂是一种化学治疗剂。在一些实施例中，所述一或多种化学治疗剂是两种化学治疗剂。在一些实施例中，所述一或多种化学治疗剂是三种化学治疗剂。

在一些实施例中，化学治疗剂是含铂化合物(“铂类(platin)”)。含铂化合物包括例如顺铂(cisplatin)、卡铂、奥沙利铂(oxaliplatin)、赛特铂(satraplatin)、吡铂(picoplatin)、奈达铂(nedaplatin)及特瑞铂(triplatin)等药剂。含铂化学治疗剂使DNA以单加合物、链间交联、链内交联或DNA蛋白质交联形式交联。所引起的交联抑制癌细胞中的DNA修复和/或DNA合成。这些药剂有时被描述为类烷化药剂，不过事实上，其不具有烷基。顺铂是最先发现的含铂化合物并且最先在1978年得到美国食品和药物管理局(U.S.FoodandDrugAdministration)批准。卡铂是在1980年代引入并且已展示在卵巢癌和肺癌方面具有比顺铂低的副作用(哈特曼(Hartmann)和利普(Lipp),药物治疗专家观点(Exper.Opin.Pharmacother.)2003,4(6)889-901)。

在一些实施例中，所述铂类是顺铂、卡铂、奥沙利铂、赛特铂、吡铂、奈达铂或特瑞铂。在一些实施例中，所述铂类是奈达铂、顺铂、卡铂或奥沙利铂。在一些实施例中，所述铂类是顺铂、卡铂或奥沙利铂。在一些实施例中，所述铂类是顺铂。在一些实施例中，所述铂类是卡铂。在一些实施例中，所述铂类是顺铂或卡铂。

在一些实施例中，所述化学治疗剂是吉西他滨或医药学上可接受的盐。吉西他滨是通过破坏DNA复制起作用的核苷类似物。吉西他滨被美国食品和药物管理局批准用于治疗，用于治疗若干癌症，包括胰脏癌、非小细胞肺癌及乳癌。吉西他滨可以呈医药学上可接受的盐的形式，例如酸加成盐。在一些实施例中，吉西他滨的酸加成盐是吉西他滨盐酸盐。吉西他滨的一种形式当前以(礼来公司(EliLillyandCompany))出售。

在一些实施例中，化学治疗剂是紫杉烷。紫杉烷是由紫杉类植物(紫杉树)产生的二萜烯。紫杉烷最先是从此天然来源发现并分离，但现在主要是通过合成或半合成方法制造。紫杉烷发挥其作用的原理机制是在细胞分裂期间破坏微管功能，由此防止癌细胞的有效生长和分裂。

紫杉烷类药剂包括太平洋紫杉醇(paclitaxel)和多西他赛。太平洋紫杉醇最初是从太平洋紫杉树的树皮分离，并且随后是以半合成方式制造。太平洋紫杉醇在1992年首次得到美国食品和药物管理局批准。多西他赛也是由紫杉树的针叶以半合成方式得到。多西他赛被美国食品和药物管理局批准用于治疗晚期乳癌、肺癌及卵巢癌。太平洋紫杉醇结合到白蛋白纳米粒子的一种替代性太平洋紫杉醇调配物，称为白蛋白结合型太平洋紫杉醇(nab-paclitaxel)[以Abraxane(塞尔基因公司(CelgeneCorporation))出售]也被美国食品和药物管理局批准用于某些类型的转移性乳癌。在一些实施例中，紫杉烷是太平洋紫杉醇、多西他赛或白蛋白结合型太平洋紫杉醇。在一些实施例中，紫杉烷是太平洋紫杉醇或多西他赛。在一些实施例中，紫杉烷是太平洋紫杉醇。在一些实施例中，紫杉烷是多西他赛。

在一些实施例中，癌症是实体肿瘤。在一些实施例中，实体肿瘤是乳癌、结肠癌、肺癌、胰脏癌、膀胱癌、食道癌或头颈癌。在一些实施例中，实体肿瘤是乳癌、结肠癌、肺癌、胰脏癌、膀胱癌、食道癌、头颈癌或胆管癌。在一些实施例中，实体肿瘤是乳癌、结肠癌、肺癌或胰脏癌。在一些实施例中，实体肿瘤是结肠癌、肺癌或胰脏癌。在一些实施例中，实体肿瘤是肺癌或胰脏癌。在一些实施例中，实体肿瘤是肺癌、头颈癌或胆管癌。在一些实施例中，实体肿瘤是肺癌或头颈癌。

在一些实施例中，实体肿瘤是肺癌。肺癌包括不同亚型，例如小细胞肺癌(SCLC)；非小细胞肺癌(NSCLC)，包括鳞状NSCLC；细支气管肺泡癌(BAC)；及腺癌。在一些实施例中，实体肿瘤是小细胞肺癌。在一些实施例中，实体肿瘤是非小细胞肺癌。在一些实施例中，实体肿瘤是鳞状非小细胞肺癌。

在一些实施例中，实体肿瘤是乳癌。乳癌包括不同亚型，例如管状A型、管状B型、三阴性(基底样)及HER-2型。在一些实施例中，实体肿瘤是三阴性乳癌。

在一些实施例中，实体肿瘤是食道癌。食道癌包括腺癌及鳞状亚型。在一些实施例中，实体肿瘤是鳞状食道癌。

在一些实施例中，实体肿瘤是头颈癌。头颈癌是在头部和颈部区域中产生的癌症，并且所述癌症可以见于例如鼻腔、鼻窦、唇部、口部、唾液腺、咽或喉等区域。90％的头颈癌是鳞状细胞癌(SCCHN)，其起源于这些区域的粘膜内层(上皮)。在一些实施例中，实体肿瘤是鳞状头颈癌。

在一些实施例中，实体肿瘤是结肠癌。在一些实施例中，实体肿瘤是胰脏癌。在一些实施例中，实体肿瘤是胆道癌症，包括胆管癌、胰脏癌、胆囊癌及乏特氏(Vater)壶腹癌症。在一些实施例中，实体肿瘤是胆管癌。

在一些实施例中，实体肿瘤是膀胱癌。膀胱癌包括非侵袭性及侵袭性亚型。在一些实施例中，实体肿瘤是侵袭性膀胱癌。

在一些实施例中，治疗方法进一步包含使用放射疗法。放射疗法可以在投与所述组合之前或在投与所述组合之后投与。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量小于或等于50mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是50mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是37mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是25mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是15mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是20mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是约10mg/m²到约30mg/m²。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量小于或等于100mg/m²。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是100mg/m²。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是75mg/m²。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是50mg/m²。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是25mg/m²。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是20mg/m²。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是15mg/m²。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是约15mg/m²到约40mg/m²。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量小于或等于50mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量小于或等于25mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量是20mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量小于或等于15mg/m²。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在28天时间表的第1天投与。在一些实施例中，在28天时间表的第1天投与的MLN4924或其医药学上可接受的盐的量小于或等于100mg/m²。

在一些实施例中，所述一或多种化学治疗剂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，紫杉烷是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，多西他赛是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的多西他赛的量是75mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的多西他赛的量是约50mg/m²到约100mg/m²。在一些实施例中，太平洋紫杉醇是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的太平洋紫杉醇的量是200mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的太平洋紫杉醇的量是175mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的太平洋紫杉醇的量是135mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的太平洋紫杉醇的量是约135mg/m²到约200mg/m²。

在一些实施例中，铂类是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，卡铂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的卡铂的量是AUC6(依据上述卡尔弗特计算来计算)。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的卡铂的量是AUC5。

在一些实施例中，顺铂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，投与的顺铂的总量小于或等于100mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的顺铂的量是约75mg/m²到约100mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天投与的顺铂的量是约50mg/m²到约70mg/m²。在一些实施例中，顺铂是在21天时间表的第1天、第2天及第3天中的每一天投与。在一些实施例中，顺铂是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与。在一些实施例中，投与的顺铂的总量小于或等于100mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第2天及第3天中的每一天投与的顺铂的量是约25mg/m²。在一些实施例中，在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的顺铂的量是约25mg/m²。

在一些实施例中，一或多种化学治疗剂是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与。在一些实施例中，吉西他滨是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的吉西他滨的量是1000mg/m²。在一些实施例中，在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的吉西他滨的量是800mg/m²。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且所述一或多种化学治疗剂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且一种化学治疗剂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且两种化学治疗剂是在21天时间表的第1天投与。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且紫杉烷是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且多西他赛是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且太平洋紫杉醇是在21天时间表的第1天投与。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且铂类是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且卡铂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且奥沙利铂是在21天时间表的第1天投与。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且顺铂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且顺铂是在21天时间表的第1天、第2天及第3天中的每一天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且顺铂是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且紫杉烷和铂类是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且太平洋紫杉醇和卡铂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且太平洋紫杉醇和顺铂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且多西他赛和卡铂是在21天时间表的第1天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与，并且多西他赛和顺铂是在21天时间表的第1天投与。

在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与，并且所述一或多种化学治疗剂是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与，并且一种化学治疗剂是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与。在一些实施例中，MLN4924或其医药学上可接受的盐是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与，并且吉西他滨是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与。

在实体肿瘤是结肠癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与紫杉烷的组合。在实体肿瘤是结肠癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。在实体肿瘤是结肠癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与太平洋紫杉醇的组合。

在实体肿瘤是结肠癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与铂类的组合。在实体肿瘤是结肠癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与奥沙利铂的组合。

在实体肿瘤是乳癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与紫杉烷的组合。在实体肿瘤是乳癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。在实体肿瘤是乳癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与太平洋紫杉醇的组合。

在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与铂类的组合。在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与卡铂的组合。在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与顺铂的组合。在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与奈达铂的组合。在实体肿瘤是小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与卡铂的组合。在实体肿瘤是小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与顺铂的组合。在实体肿瘤是小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与奈达铂的组合。在实体肿瘤是非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与卡铂的组合。在实体肿瘤是非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与顺铂的组合。在实体肿瘤是非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与奈达铂的组合。在实体肿瘤是鳞状非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与卡铂的组合。在实体肿瘤是鳞状非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与顺铂的组合。在实体肿瘤是鳞状非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与奈达铂的组合。

在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、紫杉烷及铂类的组合。在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂的组合。在实体肿瘤是小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂的组合。在实体肿瘤是非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂的组合。在实体肿瘤是鳞状非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂的组合。

在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及铂类的组合。在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及卡铂的组合。在实体肿瘤是小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及卡铂的组合。在实体肿瘤是非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及卡铂的组合。在实体肿瘤是鳞状非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及卡铂的组合。在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及顺铂的组合。在实体肿瘤是小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及顺铂的组合。在实体肿瘤是非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及顺铂的组合。在实体肿瘤是鳞状非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及顺铂的组合。

在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与紫杉烷的组合。在实体肿瘤是肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。在实体肿瘤是小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。在实体肿瘤是非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。在实体肿瘤是鳞状非小细胞肺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。

在实体肿瘤是胰脏癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与吉西他滨的组合。

在实体肿瘤是侵袭性膀胱癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及顺铂的组合。在实体肿瘤是侵袭性膀胱癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、吉西他滨及卡铂的组合。

在实体肿瘤是鳞状食道癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与紫杉烷的组合。在实体肿瘤是鳞状食道癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。

在实体肿瘤是头颈癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与紫杉烷的组合。在实体肿瘤是头颈癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。在实体肿瘤是鳞状头颈癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。在实体肿瘤是唾液腺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。

在实体肿瘤是胆管癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与紫杉烷的组合。在实体肿瘤是胆管癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐与多西他赛的组合。

在实体肿瘤是头颈癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、紫杉烷及铂类的组合。在实体肿瘤是头颈癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂的组合。在实体肿瘤是鳞状头颈癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂的组合。在实体肿瘤是唾液腺癌的一些实施例中，所述方法包含向需要此类治疗的患者投与MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂的组合。

治疗性物质；医药组合物.

本文所描述的治疗剂中的任一者都可以呈医药学上可接受的盐的形式。在一些实施例中，此类盐衍生自无机或有机酸或碱。有关适合盐的评述，参见例如，贝尔奇(Berge)等人,药物科学杂志(J.Pharm.Sci.),1977,66,1-19及雷明顿：药物科学和实践(Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy),第20版,A.根纳罗(A.Gennaro)(编辑),利平科特威廉姆斯和维尔金斯出版社(LippincottWilliams&Wilkins)(2000)。

适合的酸加成盐的实例包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、富马酸盐、葡糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙烷磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基-丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐及十一烷酸盐。

适合的碱加成盐的实例包括铵盐；碱金属盐，例如钠盐和钾盐；碱土金属盐，例如钙盐和镁盐；与有机碱形成的盐，例如二环己胺盐、N-甲基-D-葡糖胺；以及与例如精氨酸、赖氨酸等氨基酸形成的盐。

举例来说，贝尔奇列举了以下经FDA批准的市售盐：阴离子乙酸盐、苯磺酸盐(besylate/benzenesulfonate)、苯甲酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、依地酸钙(乙二胺四乙酸盐)、樟脑磺酸盐(camsylate/camphorsulfonate)、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐(乙二胺四乙酸盐)、乙二磺酸盐(1,2-乙烷二磺酸盐)、依托酸盐(estolate)(十二烷基硫酸盐)、乙磺酸盐(乙烷磺酸盐)、富马酸盐、葡庚糖酸盐(gluceptate/glucoheptonate)、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙内酰胺苯胂酸盐(glycollylarsanilate/glycollamidophenylarsonate)、己基间苯二酚酸盐、海卓胺(hydrabamine)(N,N'-二(脱氢松香基)-乙二胺)、氢溴酸盐、盐酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、羟乙磺酸盐(2-羟基乙烷磺酸盐)、乳酸盐、乳糖醛酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、杏仁酸盐、甲磺酸盐(甲烷磺酸盐)、甲基溴、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、粘液酸盐、萘磺酸盐(2-萘磺酸盐)、硝酸盐、双羟萘酸盐(恩波酸盐(embonate))、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、丹宁酸盐(tannate)、酒石酸盐、茶氯酸盐(8-氯茶酸盐)及三乙基碘；有机阳离子苯乍生(benzathine)(N,N'-二苯甲基乙二胺)、氯普鲁卡因(chloroprocaine)、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(N-甲基葡糖胺)及普鲁卡因(procaine)；以及金属阳离子铝、钙、锂、镁、钾、钠及锌。

贝尔奇另外列举了以下未经FDA批准的市售(在美国以外出售)盐：阴离子己二酸盐、海藻酸盐、氨基水杨酸盐、脱水亚甲基柠檬酸盐、槟榔碱、天冬氨酸盐、硫酸氢盐、丁基溴、樟脑酸盐、二葡糖酸盐、二氢溴酸盐、二琥珀酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、氢氟酸盐、氢碘酸盐、亚甲基双(水杨酸盐)、萘二磺酸盐(1,5-萘二磺酸盐)、草酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯乙基巴比妥酸盐(phenylethylbarbiturate)、苦味酸盐、丙酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐及十一烷酸盐；有机阳离子苯乙苄胺(benethamine)(N-苯甲基苯乙基胺)、克立咪唑(clemizole)(1-对氯苯甲基-2-吡咯烷-1'-基甲基苯并咪唑)、二乙胺、哌嗪及缓血酸胺(三(羟甲基)氨基甲烷)；以及金属阳离子钡和铋。

如本文中所用，“医药学上可接受的载剂”是指与接受者个体(人类)相容并且适于将活性剂递送到目标位点，而不终止所述药剂的活性的物质。与载剂有关的毒性或副作用(如果存在)优选与活性剂的预定应用的合理风险/权益比相称。

用于本发明方法中的医药组合物可以通过所属领域中众所周知的方法制造，例如尤其常规粒化、混合、溶解、囊装、冻干或乳化方法。组合物可制成各种形式，包括颗粒、沉淀物或微粒、粉末(包括冷冻干燥粉末、旋转干燥粉末或喷雾干燥粉末、非晶形粉末)、片剂、胶囊、糖浆、栓剂、注射剂、乳液、酏剂、悬浮液或溶液。调配物可以含有稳定剂、pH调节剂、表面活性剂、增溶剂、生物利用率调节剂及这些物质的组合。

可以用于这些组合物中的医药学上可接受的载剂包括离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐或碳酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酸酯混合物、水、盐或电解质(例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐)、胶态二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇及羊毛脂。

这些医药组合物被调配用于向人类投与医药。所述组合物可以经口、不经肠、通过吸入喷雾剂、局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或经由植入式贮器投与。如本文中所用，术语“不经肠”包括皮下、静脉内、腹膜内、肌肉内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内及颅内注射或输注技术。在一些实施例中，所述组合物是经口、静脉内或皮下投与。在一些实施例中，所述组合物是经口投与。在一些实施例中，所述组合物是静脉内投与。这些调配物可以设计成短效、快速释放或长效的。此外，所述组合物可以局部而非全身性方式投与，例如投与(例如，通过注射)肿瘤部位。

医药调配物可以使用液体(例如油、水、醇及这些物质的组合)制备成液体悬浮液或溶液。可以包括增溶剂，例如环糊精。对于经口或不经肠投与，可以添加医药学上适合的表面活性剂、悬浮剂或乳化剂。悬浮液可以包括油，例如花生油、芝麻油、棉籽油、玉米油及橄榄油。悬浮液制剂还可以含有脂肪酸酯，例如油酸乙酯、十四烷酸异丙酯、脂肪酸甘油酯及乙酰化脂肪酸甘油酯。悬浮液调配物可以包括醇类，例如乙醇、异丙醇、十六烷醇、甘油及丙二醇；醚类，例如聚(乙二醇)；石油烃类，例如矿物油和矿脂；以及水。

这些医药组合物的无菌可注射形式可以是水性或油性悬浮液。这些悬浮液可以根据所属领域中已知的技术，使用适合分散剂或润湿剂及悬浮剂来调配。无菌可注射制剂也可以是在无毒不经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如呈在1,3-丁二醇中的溶液形式。可以采用的可接受媒剂和溶剂是水、林格氏溶液(Ringer'ssolution)及等渗氯化钠溶液。此外，宜采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可以采用任何温和的不挥发性油，包括合成的单甘油酸酯或二甘油酸酯。脂肪酸(例如油酸及其甘油酸酯衍生物)以及天然医药学上可接受的油(例如橄榄油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙烯化形式)可用于制备可注射制剂。这些油溶液或悬浮液还可以含有长链醇稀释剂或分散剂，例如羧甲基纤维素或常用于调配医药学上可接受的剂型(包括乳液和悬浮液)的类似分散剂。其它常用表面活性剂，例如脱水山梨糖醇烷基酯，例如吐温(Tweens)或斯盘(Span)，及常用于制造医药学上可接受的固体、液体或其它剂型的其它乳化剂或生物利用率增强剂，也可以用于调配目的。化合物可以被调配成通过注射，例如通过快速注射或连续输注不经肠投与。用于注射的单位剂型可以在安瓿中或在多剂量容器中。

这些医药组合物可以呈任何口服可接受的剂型经口投与，所述剂型包括胶囊、片剂、水性悬浮液或溶液。当口服使用需要水性悬浮液时，将活性成分与乳化剂和悬浮剂组合。必要时，还可以添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。对于以胶囊形式经口投与，可用的稀释剂包括乳糖和干燥玉米淀粉。在口服使用的片剂的情况下，常用载剂包括乳糖和玉米淀粉。通常还添加润滑剂，例如硬脂酸镁。包衣可以用于各种目的，例如为了掩盖味道，为了影响溶解或吸收部位，或为了延长药物作用。可以向片剂或用于胶囊中的颗粒状粒子施加包衣。

或者，这些医药组合物可以呈用于直肠投药的栓剂形式投与。这些栓剂可以通过将药剂与适合的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在室温下是固体，但在直肠温度下是液体并且因此将在直肠中熔融以释放药物。此类材料包括可可脂、蜂蜡以及聚乙二醇。

这些医药组合物还可以局部投与，尤其是当治疗目标包括通过局部施用易于达到的区域或器官时，包括眼、皮肤或低位肠道的疾病。容易制备适合局部调配物用于这些区域或器官中之每一者。

可以直肠栓剂调配物(参见上文)或以适合灌肠剂调配物实现对低位肠道的局部施用。也可以使用局部透皮贴片。对于局部施用，医药组合物可以调配成含有悬浮或溶解于一或多种载剂中的活性组分的适合软膏形式。用于局部投与本发明化合物的载剂包括矿物油、液体矿脂、白矿脂、丙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯化合物、乳化蜡及水。或者，医药组合物可以调配成含有悬浮或溶解于一或多种医药学上可接受的载剂中的活性组分的适合洗剂或乳膏形式。适合的载剂包括矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇及水。

对于眼部应用，医药组合物可以在存在或不存在防腐剂(例如苯扎氯铵(benzylalkoniumchloride))情况下，调配成于等渗、pH经调节的无菌生理盐水中的微粉化悬浮液形式，或优选调配为于等渗、pH经调节的无菌生理盐水中的溶液形式。或者，对于眼部应用，医药组合物可以调配成软膏(例如矿脂)形式。

医药组合物还可以通过鼻用气雾剂或吸入投与。此类组合物是根据医药调配领域中众所周知的技术制备，并且可以采用苯甲醇或其它适合防腐剂、增强生物利用率的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其它常规增溶剂或分散剂，制备成在生理盐水中的溶液形式。

本发明的方法是针对治疗这样一些疾病、病症及病况，其中NAE酶活性的抑制对患病细胞或组织的存活和/或扩增不利(例如，细胞对NAE抑制敏感；抑制NAE活性破坏了疾病机制；降低NAE活性使作为疾病机制抑制剂的蛋白质稳定；降低NAE活性引起作为疾病机制活化剂的蛋白质的抑制)。所述疾病、病症及病况还意图包括需要有效滞蛋白和/或泛素化活性的那些疾病、病症及病况，所述活性可以通过降低NAE酶活性进行调控。

在一些实施例中，本发明的方法进一步包含投与抗癌剂。如本文中所用，术语“抗癌剂”是指投与患有癌症的个体以达到治疗癌症的目的的任何药剂。投与其它抗癌剂包括与本发明的组合同时或依序投与。或者，所述其它抗癌剂可以与本发明的组合一起组合于一种组合物中以投与患者。

抗癌剂的非限制性实例包括DNA破坏性化学治疗剂，例如拓扑异构酶I抑制剂(例如，伊立替康(irinotecan)、拓朴替康(topotecan)、喜树碱(camptothecin)及其类似物或代谢物，及多柔比星(doxorubicin))；拓扑异构酶II抑制剂(例如，依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)及道诺霉素(daunorubicin))；烷化剂(例如，美法仑(melphalan)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulfan)、噻替派(thiotepa)、异环磷酰胺(ifosfamide)、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、司莫司汀(semustine)、链脲霉素(streptozocin)、达卡巴嗪(decarbazine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、培美曲塞(pemetrexed)、丝裂霉素C(mitomycinC)及环磷酰胺(cyclophosphamide))；DNA嵌入剂；DNA嵌入剂及自由基产生剂(例如博莱霉素(bleomycin))；及核苷模拟物(例如，5-氟尿嘧啶、卡培他滨(capecitibine)、氟达拉宾(fludarabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、巯基嘌呤(mercaptopurine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、喷司他汀(pentostatin)及羟基脲)。破坏细胞复制的化学治疗剂包括：长春新碱(vincristine)、长春碱(vinblastin)及相关类似物；沙立度胺(thalidomide)、来那度胺(lenalidomide)及相关类似物(例如，CC-5013和CC-4047)；蛋白质酪氨酸激酶抑制剂(例如，甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate)、埃罗替尼(erlotonib)、克唑替尼(croztinib)及吉非替尼(gefitinib))；蛋白酶体抑制剂(例如硼替佐米(bortezomib))；NF-κB抑制剂，包括IκB激酶抑制剂；结合到癌症中过表达的蛋白质并由此下调细胞复制的抗体(例如曲妥珠单抗(trastuzumab)、帕尼单抗(panitumumab)、利妥昔单抗(rituximab)、西妥昔单抗(cetuximab)及贝伐单抗(bevacizumab))；及已知在癌症中上调、过表达或活化并且其抑制下调细胞复制的蛋白质或酶的其它抑制剂。

试剂盒

在一些实施例中，一或多种本文所描述的治疗剂可以经制造以包括在试剂盒中。“试剂盒”是包含至少一种试剂或化学治疗剂的任何制品(例如，包装或容器)。用于本文中的方法中的试剂盒可以包含NAE抑制剂，例如MLN4924或其医药学上可接受的盐。在一些实施例中，所述试剂盒可以进一步包括紫杉烷。在一些实施例中，所述试剂盒可以进一步包括铂类。在一些实施例中，所述试剂盒可以进一步包括吉西他滨。在一些实施例中，所述试剂盒可以进一步包括紫杉烷和铂类。在一些实施例中，所述试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及多西他赛。在一些实施例中，所述试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及顺铂。在一些实施例中，所述试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及卡铂。在一些实施例中，所述试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐、卡铂及太平洋紫杉醇。

在一些实施例中，用于治疗肺癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及多西他赛。在一些实施例中，用于治疗非小细胞肺癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及多西他赛。在一些实施例中，用于治疗鳞状非小细胞肺癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及多西他赛。在一些实施例中，用于治疗头颈癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及多西他赛。在一些实施例中，用于治疗唾液腺癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及多西他赛。在一些实施例中，用于治疗鳞状头颈癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及多西他赛。在一些实施例中，用于治疗胆管癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐及多西他赛。

在一些实施例中，用于治疗肺癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂。在一些实施例中，用于治疗非小细胞肺癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂。在一些实施例中，用于治疗鳞状非小细胞肺癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂。在一些实施例中，用于治疗头颈癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂。在一些实施例中，用于治疗唾液腺癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂。在一些实施例中，用于治疗鳞状头颈癌的试剂盒可以包括MLN4924或其医药学上可接受的盐、太平洋紫杉醇及卡铂。

在一些实施例中，包含MLN4924或其医药学上可接受的盐及另一化学治疗剂的试剂盒可以进一步包括另一组分或试剂。在一些实施例中，试剂盒中的试剂可以是用于制备MLN4924或其医药学上可接受的盐以供投与的稀释剂。在一些实施例中，试剂盒中的试剂可以是用于制备化学治疗剂以供投与的稀释剂。在一些实施例中，试剂盒中的组分可以是用于混合MLN4924与化学治疗剂的组合的容器。在一些实施例中，试剂盒可以包括用于计算试剂盒中每一治疗组分的剂量的说明书。在一些实施例中，所述说明书可以包括卡尔弗特公式。

为了更完全地理解本发明，阐述以下实例。这些实例仅仅是说明性的并且不打算以任何方式限制本发明的范围。

实例

先前已描述MLN4924、MLN4924的医药组合物、其合成方法及多晶形式。参见例如，美国专利申请案第11/700,614号(公开案第2007/0191293号)、第12/221,399号(公开案第2009/0036678号)及第12/779,331号(公开案第2011/0021544号)，其各自以全文引用的方式并入本文中。以下描述的实验使用MLN4924的盐酸盐(氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯盐酸盐)。所列的量反映了所使用的氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯的量。

1.体外细胞活力分析

通用方法：除非另外指出，否则使细胞在补充有10％胎牛血清的其各别生长培养基中生长。A549-汉氏F-12K(Ham'sF-12K)(凯氏(Kaighn's))培养基；Calu-1及HCT-116-含1％谷氨酰胺的麦氏5A培养基(McCoy's5AMedium)；NCI-H69、NCI-H82、NCI-H209、NCI-H510、NCI-H526、HARA、LK-2、LUDLU-1、NCI-H2170、NCI-H520、NCI-H1299、NCI-H1703、NCI-H596、RERF-LC-Sq1及CHAGO-K-1-RPMI1640培养基；EBC-1、SK-MES-1及VMRC-LCP-最低必需培养基、0.1mM非必需氨基酸、1mM丙酮酸钠；LC-1Sq-RPMI-1640与汉氏F12K(凯氏)培养基的1:1混合物；SW900和SW1573-莱博维茨氏L-15(Leibovitz'sL-15)(无CO₂)；EPLC-272H-RPMI1640培养基、20％热灭活FBS；KNS-62-最低必需培养基、0.1mM非必需氨基酸、1mM丙酮酸钠、20％FBS；MIAPaCa-2-DMEM培养基、10％FBS、2.5％马血清、青霉素-链霉素(pen/strep)；BxPC-3-RPMI1640培养基、10％FBS、pen/strep；PANC1-DMEM培养基、10％FBS、pen/strep。将以下数量的细胞接种于384孔涂布聚D-赖氨酸(PDL)的黑色、透明底板(BDBioCoat^TM)的每个孔中并使其在37℃、6％CO2下粘附24小时：A549和HCT116(1000个细胞/孔)；NCI-H69(4000-7000个)；NCI-H82(1500-2000个)；NCI-H209和NCI-H510(5000-7000个)；NCI-H526(1500-2500个)；HARA、LK-2、CHAGO-K-1、NCI-H520、RERF-LC-Sq1、EBC-1、SK-MES-1、KNS-62及VMRC-LCP(1000个)；Calu-1、EPLC-272H及NCI-H1703(1500个)；LUDLU-1、NCI-H596、SW900、SW1573及NCI-H2170(2000个)；LC-1Sq(4000个)；NCI-H1299和MIAPaCa-2(500个)；BxPC3(750个)；PANC1(1000个细胞)。将氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯盐酸盐溶解于DMSO中并将化学治疗剂溶解于DMSO或PBS中。用单独化学治疗剂或化学治疗剂与MLN4924的组合以各种剂量处理细胞48小时(HCT116)、72小时(A549、MIAPaCa-2、BxPC3、PANC1、HARA、LK-2、NCI-H520、RERF-LC-Sq1、EBC-1、SK-MES-1、VMRC-LCP、LUDLU-1、NCI-H2170、LC-1Sq、CHAGO-K-1、Calu-1、EPLC-272H、KNS-62、NCI-H1299、NCI-H1703、NCI-H596、SW1573及SW900)或96小时(NCI-H69、NCI-H82、NCI-H209、NCI-H510、NCI-H526)。使用每一板的一部分作为阳性对照物(不添加药剂)，而每一板的另一部分用于阴性对照物(不添加细胞)。根据制造商的说明书(普洛麦格(Promega))，使用细胞活力试剂评估活力。使用LEADseeker成像系统(通用电气医疗集团(GEHealthcare))测量发光。

统计学分析

标准化.通过按比例调整数据，分别对每一板的活力数据进行标准化，以使得阴性对照物的中值是0并且阳性对照物的中值是100。更正式地，

其中V_i是第i个孔的标准化的活力，U_i是原始活力测量值，中值(U_{_})是阴性对照物的中值，并且中值(U₊)是阳性对照物的中值。标准化之后，丢弃对照物。

响应面模型和拟合.使用与闵托(Minto)等人(C.F.闵托(C.F.Minto)等人,麻醉学(Anesthesiology),2000,92,1603-1616)类似的响应面模型来描述标准化的活力与MLN4924和化学治疗剂浓度之间的关系。对于给定板，假设

C＝(C_A/I₁)+(C_B/I₂)

x＝(C_A/I₁)/C

E_max＝E₁+E₂x+E₃x²+E₄x³

I＝1+I₃x(1-x)

S＝S₁+S₂x+S₃x²+S₄x³

V＝100-E_max(1+(I/C)^S)^-1+误差

其中E₁、E₂、E₃、E₄、I₁、I₂、I₃、S₁、S₂、S₃及S₄是参数，C_A和C_B是药剂A和B对应的浓度，并且V是标准化的活力测量值。假定误差值是独立同分布的正态随机变量。此模型是希尔方程(Hillequation)的扩展(A.V.希尔(A.V.Hill),生理学杂志(J.Physiol.),1910,40,iv-vii)，希尔方程常用于模拟单一药剂的作用。使用最大似然法，利用统计软件程序R(R开发核心团队(RDevelopmentCoreTeam),2008,ISBN3-900051-07-0，参见例如，由统计计算R基金会(TheRFoundationforStatisticalComputing)维护，并由奥地利维也纳的维也纳经济和商业大学(ViennaUniversityofEconomicsandBusiness,Vienna,Austria)代管的统计计算R计划(R-ProjectforStatisticalComputing)网站)将数据拟合到此模型。

质量检查.对所述板应用三种类型的质量检查。第一，检查阳性对照物的变化和阴性对照物的平均值较小。接着，检查新数据与由先前单一药剂实验得到的数据一致。最后，分析从响应面拟合得到的残差以确保残差平方和足够小。所有这些质量检查都是基于数字阀值来做出通过/失败决策，并且对于实验中的所有板使用相同阈值。如果一块板在任一项质量检查中都失败了，那么从所述分析中去除所述板。

测量协同作用和相加作用.使用组合指数(T.C.周(T.C.Chou)和P.塔拉利(P.Talalay),酶调节进展(Adv.EnzymeRegul.),1984,22:27-55)和非线性混合(J.J.彼得森(J.J.Peterson)和S.J.诺维克(S.J.Novik),受体与信号转导杂志(JournalofReceptorsandSignalTransduction),2007,27:125-146)作为药剂协同作用的量度。组合指数是基于等效线图计算，等效线图是具有恒定活力的剂量反应表面片段。关于本分析，使用50％等效线图，这是具有50％活力的剂量等值线。EC50_A和EC50_B定义为单独药剂A和B具有50％的活力的对应剂量。对于沿着50％等效线图的一个点(D_A，D_B)，组合指数定义为(D_A/EC50_A)+(D_B/EC50_B)。因为(D_A，D_B)的选择可以是任意的，所以使用约束条件D_A/D_B＝EC50_A/EC50_B。

在一些情况下，由于EC50_A或EC50_B不存在，故无法计算组合指数。在这些情况下，可以使用非线性混合作为协同作用或相加作用的替代量度。非线性混合是通过考虑与两个浓度轴相交并平行于活力轴延伸的剂量反应表面片段来发现。假设V_A和V_B分别是所述片段与药物A轴及药物B轴相交的活力。假设V_max和V_min是沿所述片段的最大和最小活力。假设

NLB_S＝min(V_A,V_B)-V_min

NLB_A＝V_max-max(V_A,V_B)

如果NLB_S>NLB_A，那么确定非线性混合值是NLB_S，否则是-NLB_A。由于所述片段的选择是任意的，故选择在单独每一药物的EC50值(如果EC50不存在，那么是最高剂量值)之间的片段。使用克拉默-拉奥下限(Cramer-Raolowerbound)发现组合指数和非线性混合的标准误差(H克拉默(HCramer),1946.数理统计方法(MathematicalMethodsofStatistics)；C.R.拉奥(C.R.Rao),加尔各答数学协会公报(BulletinoftheCalcuttaMathematicalSociety),1945,37:81-89)。

概述重复.在完成个别板的分析之后，将所有重复的结果组合。对于给定的量度和一组重复，使用加权平均法计算总平均值和标准误差。接着将对应于相加效应的空平均值(nullmean)与总平均值相比较。空平均值对于组合指数是1并且对于非线性混合是0。接下来，基于估计的平均值和标准误差进行两个规模的Z测试。由此产生每一量度和每一细胞系的p值。

在计算出每一组重复的平均值、标准误差和p值之后，这些值需要解释。因此，使用标准程序在每一种情况下产生分类(协同作用、相加作用、次相加作用、拮抗作用或不确定)。如果超过半数的重复存在组合指数，那么使用这些测量值进行分类。如果大部分重复不存在组合指数，那么使用类似程序，基于非线性混合进行分类。

考虑使用组合指数进行分类的情形。如果p值大于0.05，那么组合指数的估计值并未在统计学上不等于1。然而，如果标准误差也极大，那么所述估计值太不确定而无法提供信息。因此，分类是“不确定”。否则，分类是“相加作用”。当p值小于0.05时，组合指数的估计值在统计学上不等于1。然而，如果平均值仍接近1，那么差异不具有实际意义。因此，结果是基于平均值进行分类。在范围(0.8,1.2)内的平均值被认为足够接近1，由此分类为相加作用。在范围(0,0.8)内的平均值被认为足够低，由此分类为协同作用。在范围(1.2,2)内的平均值由于指示药剂组合降低活力，而所述降低要低于相加作用模型所预测的降低，故其被分类为次相加作用。阈值2可以由组合指数的定义得到。平均值大于2指示，药剂组合使活力增加，因此，所述组合被分类为拮抗作用。表1概括了基于组合指数对结果进行分类的决策规则。对于使用非线性混合对结果进行分类的情形，表2描述了一组类似的决策规则。

表1：解释组合指数。组合指数结果是基于p值、标准误差及平均值进行分类。

P值	标准误差	平均值	分类
				>0.05	>0.25	任何值	不确定
>0.05	<0.25	任何值	相加作用
				<0.05	任何值	0.8到1.2	相加作用
<0.05	任何值	0到0.8	协同作用
				<0.05	任何值	1.2到2	次相加作用
<0.05	任何值	>2	拮抗作用

表2：解释非线性混合。非线性混合结果是以类似于组合指数的方式进行分类。

P值	标准误差	平均值	调用
				>0.05	>15	任何值	不确定
>0.05	<15	任何值	相加作用
				<0.05	任何值	-15到15	相加作用
<0.05	任何值	>15	协同作用
				<0.05	任何值	<-15	拮抗作用

结果：

如表3中所概述，使用根据以上描述的通用方法进行的细胞活力分析来评估MLN4924(氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯盐酸盐；在所有实验中使用MLN4924HCl)与多西他赛、太平洋紫杉醇、吉西他滨、卡铂、顺铂或奥沙利铂的体外组合作用。在6个细胞系(HCT116结肠细胞系；A549NSCLC；及3个胰脏细胞系(PANC1、MIAPaCa-2及BxPC3)中评价吉西他滨组合。在HCT116、A549，及所选小细胞肺癌细胞系(SCLC)，包括NCI-H209、NCI-H510、NCI-H526、NCI-H82及NCI-H69中评价多西他赛、太平洋紫杉醇、顺铂、卡铂及奥沙利铂。另外，在19个另外的NSCLC细胞系中评价卡铂，这些细胞系中有一些被分类为鳞状NSCLC。如上文所描述，对结果进行统计学分析，并且所述分析概述于表3中，所述表列出了如上文及表1和2中所描述来指定的相互作用的组合指数、非线性混合评分及分类。

表3：体外组合分析的概述

表3a：基于紫杉烷的组合

表3a：除MLN4924与太平洋紫杉醇的组合展示拮抗作用的NCI-H69外，MLN4924与多西他赛或太平洋紫杉醇的组合在所测试的7个细胞系的6个中展示相加作用或次相加作用。

表3b：吉西他滨组合

表3b.MLN4924与吉西他滨的组合在HCT116和PANC1细胞系中展示协同作用，在MIAPaCa-2中展示相加作用并且在A549和BxPC3细胞系中展示次相加作用。

表3c：基于铂类的组合

表3c.铂类与MLN4924的组合：MLN4924与卡铂的组合在6个NSCLC细胞系(其中4个为鳞状NSCLC)、1个结肠细胞系及1个SCLC细胞系中展示协同作用，在4个其它SCLC细胞系中展示相加作用，在8个其它NSCLC细胞系(其中7个为鳞状NSCLC)中展示相加作用并且在5个其它NSCLC细胞系(其中3个是鳞状NSCLC)中展示次相加作用。在1个另外的sqNSCLC细胞系中，MLN4924与卡铂的组合结果是不确定的。在高达94％的所鉴别的病例中，鳞状NSCLC样品显示3q扩增(贝伐德尔(Belvedere)等人,基因组学(Genomics),2012；99:18-24)。以下NSCLC细胞系不展示3q扩增并因此可能不表示鳞状细胞系：A549、Calu-1、NCI-H2170、SK-MES-1及SW900。MLN4924与顺铂的组合在NSCLC细胞系、结肠细胞系及SCLC细胞系中展示协同作用，并且在所评价的3个其它SCLC细胞系中展示相加作用或次相加作用。MLN4924与奥沙利铂的组合在一个SCLC细胞系中展示协同作用并且在NSCLC细胞系、结肠细胞系及4个其它SCLC细胞系中展示相加作用。因此，铂类药剂中每一者与MLN4924在至少一个细胞系中展示协同作用。

2.体内肿瘤功效模型

肿瘤模型：

通过IHC，由在手术期间从患有分类为三阴性乳癌(ER-/PR-/Her2-)的侵袭性乳腺管癌的51岁女性收集的患者来源的肿瘤建立PHTX02B乳房异种移植物模型。使用13号套管针将PHTX02B肿瘤片段(约2×2×3mm³)植入雌性SCID-NOD小鼠(5-7周龄，缅因州巴港的杰克逊实验室(JacksonLaboratory,BarHarbor,ME))右背侧腹中的皮下间隙中。

将RPMI-1640培养基中的NCI-H1650(2×10⁶个)肿瘤细胞与相同体积的基质胶(碧迪生物科学公司(BDBiosciences))混合并使用25号针无菌注射到Balb/c裸小鼠(4-6周龄，上海SINO-英国SIPPR/BK实验动物有限公司(ShanghaiSINO-BritishSIPPR/BKLabAnimalLtd))右背侧腹中的皮下间隙中。

使用12号套管针将NCI-H69或NCI-H82小细胞肺肿瘤片段(30到40mg)植入NCrnu/nu小鼠(7-10周龄，查尔斯河实验室公司(CharlesRiverLaboratories,Inc)，马里兰州弗雷德里克(FrederickMD)或马萨诸塞州威明顿(Wilmington,MA))的右侧腹区域中的皮下间隙中。

由在手术期间从患有胰脏腺癌的63岁女性收集的患者来源的肿瘤建立PHTX249Pa胰脏异种移植物模型。使用13号套管针将PHTX249Pa肿瘤片段(约2×2×3mm³)植入雌性CB-17SCID小鼠(7-8周龄，印地安那州剑桥市的泰克里克农场公司(TaconicFarms,Inc.,CambridgeCity,Indiana))右背侧腹中的皮下间隙中。

将LU1143鳞状非小细胞肺癌肿瘤片段(约2×2×3mm³)植入雌性BALB/C裸小鼠(5周龄，中国上海的上海实验室动物中心(ShanghaiLaboratoryAnimalCenter,Shanghai,China))侧腹中的皮下间隙中。

将LXFE409鳞状小细胞肺癌小细胞肺癌肿瘤片段植入雌性NMRInu/nu小鼠(5-7周龄，法国圣贝特万的杰威尔实验室(JanvierLabs,SaintBerthevin,France))侧腹中的皮下间隙中。

测试试剂：

所有化学治疗剂都是从商业来源购买的临床级并且如以下所概述进行投与。

多西他赛(宾夕法尼亚州匹兹堡的亨利肖恩公司(HenrySchein,Inc.,PittsburghPA)；中国山东省济南市的齐鲁制药有限公司(QiluPharmaceuticalCo.,Ltd.,Jinan,Shandong,China)；及赛诺菲-安万特公司(Sanofi-Aventis))是在0.9％生理盐水中调配并且每周一次(QW)以5mg/kg或10mg/kg通过静脉内注射(IV)投与。

吉西他滨(健择公司(Gemzar)；宾夕法尼亚州匹兹堡的亨利肖恩公司；及宾夕法尼亚州诺里斯镇的麦奥登医学公司(MyodermMedical,Norristown,PA))是在0.9％生理盐水中调配并且q3D×4(每3天一次，总计4剂)以2.5mg/kg或10mg/kg通过腹膜内注射(IP)投与，或每周两次(BIW)以20mg/kgIV通过IV注射投与。

顺铂(PCH药物化学公司(PCHPHARMACHEMIE))是在0.9％生理盐水中调配并且q4D×3(每4天一次，总计3剂)以2mg/kg或4mg/kg通过IP注射投与。

卡铂(卡铂注射液(CARBOplatinInjection)，霍斯匹公司(Hospira,Inc.)、中国山东省济南市的齐鲁医药有限公司及德国乌尔姆的梯瓦格里制药股份有限公司(TevaGry-PharmaGmbH,Ulm,Germany))是在0.9％生理盐水中调配并且每周一次(QW)以50mg/kg通过IP注射投与。每周一次时间表还被描述为每7天一次(Q7D)。

MLN4924(MLN4924盐酸盐；(氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯盐酸盐)是在含10％HPbCD或20％HPbCD的无菌水中调配并且遵循以下时间表之一通过皮下注射投与：

A.每天两次(BID)；

B.每天两次持续5天，随后是5天的无治疗日(BID5on/5off)；例如，在第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第11天、第12天、第13天、第14天、第15天每天两次

C.每3天，每天两次，每周总计给药2天(BIDQ3D×2/周)；也被描述为BIDBIW，或根据每周两次的时间表每天两次；例如在第1天、第4天、第8天、第11天、第15天、第18天

D.每2天，每天两次，每周总计给药3天(BIDQ2D×3/周)；例如在第1天、第3天、第5天、第8天、第10天、第12天、第15天、第17天、第19天每天两次

E.每2天，每天一次，每周总计给药3天(Q2D×3/周)；也被描述为一周三次周(TIW)；例如在第1天、第3天、第5天、第8天、第10天、第12天、第15天、第17天、第19天每天一次。

肿瘤测量：

每周两次，使用游标测径规测量肿瘤。使用标准程序计算肿瘤体积(0.5×(长度×宽度²))。当肿瘤体积达到约130mm³(LXFE409)、150mm³(NCI-H1650、NCI-H69、NCI-H82)、170mm³(LU1143)、200mm³(PHTX02B)或225mm³(PHTX249Pa)时，如下表中所描述，将小鼠随机分成具有6-10只的数组，并以下表4-9中所描述的各种剂量和时间表注射媒剂、MLN4924(氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯盐酸盐；在所有实验中使用MLN4924HCl)或一种药剂(吉西他滨、多西他赛、顺铂或卡铂)，或MLN4924与这些药剂之一的组合。在研究持续时间内，大概一周两次测量肿瘤大小和体重。当小鼠的肿瘤体积达到其体重的10％时，或当治疗组或对照组的平均肿瘤体积达到约2000mm³时，对其实施安乐死。在一些研究中，在给药时间段之后，继续监测肿瘤生长。所有研究的所有组在研究的第18天、第21天或第22天的肿瘤体积显示于表4-9中。所选研究中所选组的平均肿瘤体积随时间的变化报导于图A、B及C中。

有关在皮下异种移植物模型中肿瘤生长的组合效应的统计分析.

如表4-9中所说明，分析从第0天到第18天、第21天或第22天的测量值。所有肿瘤体积值加1，随后进行log₁₀转化。对于每一动物，用后续各天的肿瘤体积对数值减去第0天的肿瘤体积对数值。使用梯形规则，使用这一随时间变化的差异来计算每一动物的曲线下面积(AUC)。在治疗组中的动物于研究早期去除的情况下，观察的最后一个肿瘤值结转至所有后续时间点。有关药剂A和B的组合的协同作用评分定义为

100*(平均值(AUC_AB)-平均值(AUC_A)-平均值(AUC_B)+平均值(AUC_ctl))/平均值(AUC_ctl)：

其中AUC_AB、AUC_A、AUC_B及AUC_ctl分别是组合组、A组、B组及对照组中动物的AUC值。协同作用评分的标准误差是基于动物间AUC值的变化来计算。使用双边t测试来确定协同作用评分是否明显不等于零。如果P值大于0.05，那么所述组合被视为相加性的。如果P值小于0.05并且协同作用评分小于零，那么所述组合被视为协同性的。如果P值小于0.05，协同作用评分大于零并且所述组合比任一单独药剂更有效，那么所述组合被视为次相加性的。否则，所述组合分类为拮抗性的。

结果：

使用如以上通用方法中所描述进行的小鼠异种移植物模型来评估MLN4924与多西他赛、MLN4924与吉西他滨、MLN4924与卡铂以及MLN4924与顺铂的体内组合作用。每一研究的详情显示于下表4-9中。使用上文所描述的统计分析来分析结果并且所述组合的分类显示于下表4-9中。在所有实验中使用MLN4924盐酸盐；(氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯盐酸盐)；表4-9中列出的值反映了MLN4924的量。

MLN4924与多西他赛

在PHTX02B乳房异种移植物模型(示于图1中)中，相较于对照媒剂组，给与单一药剂(MLN4924SC60mg/kgBID5天on/5天off)和多西他赛(5mg/kgIVQW)抑制肿瘤生长。然而，单一药剂组中的肿瘤大小在治疗时间段期间继续生长。使用这些剂量和时间表进行的组合治疗引起肿瘤生长的完全抑制，并且肿瘤体积相较于起始体积减小。所述研究的所有治疗组都显示于表4a中。此组合在这一研究中的组合益处被评为相加性的(表4b)。

表4a：在PHTX02B异种移植物模型中多西他赛与MLN4924的组合

表4b：在PHTX02B异种移植物模型中多西他赛与MLN4924的体内组合的分类

另外在NCI-H1650NSCLC模型、LU1143sqNSCLC模型及LXFE409sqNSCLC模型中评价多西他赛与MLN4924的组合并且结果显示于表5a-5e中。在LXFE409sqNSCLC模型中，MLN4924(120mg/kgSCQ2D×3/周，持续3周)与多西他赛(10mg/kgIVQW，持续3周)的组合在用此方案治疗的全部8只小鼠中引起肿瘤消退，并且到第95天研究结束时，在此组合治疗组中维持完全消退。相比之下，用单一药剂MLN4924或多西他赛治疗的肿瘤在治疗时间段结束之后再生长。有关这些结果的图显示于图4中。

表5a：在NCI-H1650异种移植物模型中多西他赛与MLN4924的组合

表5b：在NCI-H1650异种移植物模型中多西他赛与MLN4924的体内组合的分类

表5c：在LU1143异种移植物模型中多西他赛与MLN4924的组合

这一在LU1143异种移植物模型中进行的研究的第4组和第6组含有卡铂并且呈现于表7c中。第1组(媒剂对照组)和第2组(MLN4924组)也呈现于表7c中。

表5d：在LU1143异种移植物模型中多西他赛与MLN4924的体内组合的分类

表5e：在LXFE409异种移植物模型中多西他赛与MLN4924的组合

这一在LXFE409异种移植物模型中进行的研究的第2组、第4组及第5组与MLN4924和卡铂的组合相关并且呈现于表7e中。第1组(媒剂对照组)也呈现于表7e中。

表5f：在LXFE409异种移植物模型中多西他赛与MLN4924的体内组合的分类

MLN4924与吉西他滨

在PHTX02B异种移植物模型(示于图2中)中，相较于对照媒剂组，给与单一药剂(MLN4924SC30mg/kgBID)和吉西他滨(10mg/kgIPq3d×4)抑制肿瘤生长，但所述单一药剂组中的肿瘤大小在治疗时间段期间继续生长。相比之下，组合治疗防止肿瘤生长，并且在治疗时间段结束时，肿瘤体积保持与起始体积相同。所述研究的所有治疗组都显示于表6a中。组合益处被评估为相加性的(表6b)。

在PHTX249Pa异种移植物模型中，相较于对照媒剂组，给与吉西他滨(20mg/kgIVBIW)抑制肿瘤生长，但相较于对照媒剂组，用MLN4924(90mg/kgSCBIDBIW)治疗肿瘤不显示生长抑制作用。组合治疗抑制肿瘤生长的程度与单独吉西他滨类似，并且组合作用被评估为相加性的。治疗组和组合分析显示于表6c和6d中。

表6a：在PHTX02B异种移植物模型中吉西他滨与MLN4924的组合

表6b：在PHTX02B异种移植物模型中吉西他滨与MLN4924的体内组合的分类

表6c：在PHTX249Pa异种移植物模型中吉西他滨与MLN4924的组合

表6d：在PHTX249Pa异种移植物模型中吉西他滨与MLN4924的体内组合的分类

MLN4924与铂类

在NCI-H69异种移植物模型(示于图3中)中，相较于对照媒剂组，给与单一药剂(MLN4924SC120mg/kgBIDQ3D×2/周)和卡铂(50mg/kgIPQW)抑制肿瘤生长。然而，单一药剂组中的肿瘤大小在治疗时间段期间继续生长。相比之下，使用这些剂量和时间表进行的组合治疗引起肿瘤生长的完全抑制，并且肿瘤体积相较于起始体积减小。所述研究的所有治疗组都显示于表7a中。这一治疗的组合益处被评为协同性的(表7b)。在2个sqNSCLC异种移植物模型，即LU1143(表7c、d)和LXFE409(表7e、f)中进一步评价卡铂与MLN4924的组合。在NCI-H69异种移植物模型(表8a、b)中和NCI-H82异种移植物模型(表9a、b)中评价顺铂与MLN4924的组合。

表7a：在NCI-H69异种移植物模型中卡铂与MLN4924的组合

表7b：在NCI-H69异种移植物模型中卡铂与MLN4924的组合的分类

表7c：在LU1143异种移植物模型中卡铂与MLN4924的组合

表7d：在LU1143异种移植物模型中卡铂与MLN4924的组合的分类

表7e：在LXFE409异种移植物模型中卡铂与MLN4924的组合

表7f：在LXFE409异种移植物模型中卡铂与MLN4924的组合的分类

表8a：在NCI-H69异种移植物模型中顺铂与MLN4924的组合

表8b：在NCI-H69异种移植物模型中顺铂与MLN4924的组合的分类

表9a：在NCI-H82异种移植物模型中顺铂与MLN4924的组合

表9b：在NCI-H82异种移植物模型中顺铂与MLN4924的组合的分类

Claims

1.一种治疗实体肿瘤的方法，其包含向需要此类治疗的患者投与氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐与以下一或多者的组合：

i)铂类

ii)紫杉烷；或

iii)吉西他滨(gemcitabine)。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述实体肿瘤是乳癌、结肠癌、肺癌、胰脏癌、食道癌、膀胱癌或头颈癌。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述铂类是顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、赛特铂(satraplatin)、吡铂(picoplatin)、奈达铂(nedaplatin)或特瑞铂(triplatin)。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述紫杉烷是太平洋紫杉醇(paclitaxel)、多西他赛(docetaxel)或白蛋白结合型太平洋紫杉醇(nab-paclitaxel)。

5.根据权利要求1到4中任一权利要求所述的方法，其中所述氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与。

6.根据权利要求1到4中任一权利要求所述的方法，其中所述氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与。

7.根据权利要求1所述的方法，其包含向需要此类治疗的患者投与氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐与紫杉烷的组合。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述紫杉烷是多西他赛。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其中所述氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与。

10.根据权利要求9所述的方法，其中在21天时间表的第1天、第3天及第5天分别投与的氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐的量小于或等于50mg/m²。

11.根据权利要求8所述的方法，其中所述多西他赛是在21天时间表的第1天投与。

12.根据权利要求11所述的方法，其中在所述21天时间表的第1天投与的多西他赛的量是75mg/m²。

13.根据权利要求1所述的方法，其包含向需要此类治疗的患者投与氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐与铂类的组合。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述铂类是顺铂或卡铂。

15.根据权利要求13或14所述的方法，其中所述氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐是在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与。

16.根据权利要求15所述的方法，其中在21天时间表的第1天、第3天及第5天中的每一天投与的氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐的量小于或等于50mg/m²。

17.根据权利要求13到16中任一权利要求所述的方法，其中所述铂类是卡铂。

18.根据权利要求17所述的方法，其进一步包含太平洋紫杉醇。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述卡铂和所述太平洋紫杉醇是在21天时间表的第1天投与。

20.根据权利要求1所述的方法，其包含向需要此类治疗的患者投与氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-(1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐与吉西他滨的组合。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐是在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与。

22.根据权利要求21所述的方法，其中在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐的量小于或等于100mg/m²。

23.根据权利要求20到22中任一权利要求所述的方法，其中在28天时间表的第1天、第8天及第15天中的每一天投与的吉西他滨的量是1000mg/m²。

24.根据权利要求7到12中任一权利要求所述的方法，其中所述实体肿瘤是乳癌、结肠癌、肺癌、胰脏癌、食道癌、膀胱癌或头颈癌。

25.根据权利要求24所述的方法，其中所述实体肿瘤是肺癌或头颈癌。

26.根据权利要求13到19中任一权利要求所述的方法，其中所述实体肿瘤是乳癌、结肠癌、肺癌、胰脏癌、食道癌、膀胱癌或头颈癌。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述实体肿瘤是肺癌或头颈癌。

28.一种用于治疗所识别的有需要的个体的实体肿瘤的试剂盒，其包含：

包含至少一个剂量的氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-(1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐的至少一种药物，及

包含至少一个剂量的以下一或多者的至少一种药物：

i)铂类

ii)紫杉烷；或

iii)吉西他滨

或其医药学上可接受的盐；

所述用于治疗实体肿瘤的试剂盒进一步包含有关投与所述药物以治疗所述所识别的有需要的个体的给药说明书。

29.一种氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐与包含以下一或多者的药物的用途，

i)铂类

ii)紫杉烷；或

iii)吉西他滨

或其医药学上可接受的盐，其是用于治疗需要此类治疗的患者的实体肿瘤。

30.一种氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐的用途，其用于制造至少一种用以治疗实体肿瘤的药物，其中所述氨基磺酸((1S,2S,4R)-4-(4-((1S)-2,3-二氢-1H-茚-1-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)-2-羟基环戊基)甲酯或其医药学上可接受的盐是与以下一或多者一起投与需要此类治疗的患者：

i)铂类

ii)紫杉烷；或

iii)吉西他滨

或其医药学上可接受的盐。

31.根据权利要求28到30中任一权利要求所述的方法，其中所述实体肿瘤是乳癌、结肠癌、肺癌、胰脏癌、食道癌、膀胱癌或头颈癌。

32.根据权利要求31所述的方法，其中所述实体肿瘤是肺癌或头颈癌。