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CN105377237A - 使免疫反应的调节与生物药品的给药相关的方法和制剂 - Google Patents

使免疫反应的调节与生物药品的给药相关的方法和制剂 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种包含生物药品的药物制剂的制备方法，该方法使免疫反应的调节与其给药相关。该制剂包括缓冲液，该缓冲液包括己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或柠檬酸或至少一种其所对应的盐。本发明还涉及一种方法，该方法采用己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或柠檬酸或至少一种所对应的盐以调节药物制剂的免疫原性，还涉及一种药物制剂，以及一种调节或确定与药物制剂给药相关的免疫反应的方法(图4)。

Description

使免疫反应的调节与生物药品的给药相关的方法和制剂
技术领域
本发明涉及一种方法和制剂，其使免疫反应的调节与生物药品的给药相关。
背景技术
由于多种原因，例如分子大小，许多现代药物如生物药物不适合用于口服给药。相反地，需要侵入式注射至血管外位置，如皮下注射(s.c.)、肌内注射(i.m.)、或直接注射至血管系统，如静脉注射(i.v.)。在这些选择中，皮下注射途径通常是最优选的。其中一个主要的原因是，其允许患者自我给药，这对于长期治疗的情况而言是特别重要的。此外，相对于静脉注射给药，皮下注射是微创的，因此相关的风险通常较低，如在较差的卫生条件情况下无意中注入。尽管在皮下空间的吸收仅仅是局部的，且由于生物利用度低通常需要增加剂量从而导致更高的治疗成本，皮下注射给药也是有利的。
除了监管和感觉功能，皮肤的主要功能是保护。它不但充当应对机械应力的屏障，还充当微生物的第一道屏障以保护个体，在感染/炎症的风险增加情况下皮肤会损伤可以说明此事。单独的机械功能是不够的，pH值和某些位置、蛋白酶也对病原体起到附加的化学防御机制。重要的是，保护的高效机制是通过组织的免疫系统加强监视。病原体的生理检测是所期望的，而大多数情况下免疫系统(如病原体)对生物药物的处理是不需要的。从而加强监视解释了生物药物的皮下注射给药的第二个缺陷，也称为不需要的免疫原性，除了因更高量的产品使用而导致成本增加之外，还需要在生产开发这种产品类别上做出更多的努力。这种不需要的免疫原性可能会导致各种后果。可能会导致疗效的损失，增加清除循环(clearancefromcirculation)或触发潜在危及生命的过敏反应。由于疗效损失可能经过长时间才注意到，而这种产品类别价格高，这也可能意味着将不必要的成本转嫁到医疗保健系统中。从患者和医疗接受者最优选的角度来看，有限的生物利用度和如免疫原性的风险一起会造成严重的问题。
由于对与病人发生免疫原性相关的风险因素(如遗传倾向)知之甚少，从而难以控制。控制和优化产品相关的风险因素是让患者从现代疗法充分受益的唯一机会，如生物制剂，特别是由于规定了它们是在所有其它治疗方案已经失败了情况下才使用，这也是因为其成本过高的结果。
在此背景下，在大多数情况下所希望的调节是旨在减少免疫原性，因为在大多数情况下，药物具有被免疫系统识别的潜在可能性，包括随后抗体的形成，只有当没有这样的免疫反应发生时才是充分有效和安全的。另一方面，疗法存在特异性旨在引起合适的免疫反应，以消除指定目标或使得指定目标失去活性。单独的目标可能是能被识别/中和的异性蛋白。
在所有这些情况下，可能希望进一步增加药物产生预期的免疫反应，和在给药溶液存在柠檬酸的情况下，或前述制造阶段可能是有益于这一方面。
现有技术阶段的制剂，例如作为抗TNF-α(anti-TNFα)抗体阿达木单抗的制剂，含有磷酸盐且以柠檬酸作为缓冲物质，符合给药耐受性、生物药品的稳定性和保质期的要求。
然而，上述制剂具有许多缺点。一个缺点是许多生物制药在皮下注射给药时会诱导如上概述的不需要的免疫原性。由于它们的抗原性质，难以分析的其他蛋白质类污染物也会在人类中触发免疫反应。此外，由于它们通常的物种特定属性，动物来源的蛋白质会在人类中触发免疫反应。即使在现有技术制造方法中这样反应的风险已经很低了，但它可能会随时间积累，特别是在这类药物的慢性再运用中。
特别是要担心的是在皮下注射给药的情况下，这是由于通过血液去除和分配相比静脉注射给药更延迟。因此，一种有利的制剂将有助于减少药物诱发免疫原性并提供更具成本效益的药物，或增加药物诱导免疫原性，在此情况下，这是作为预防性或治疗性干预的预期反应。
本发明要解决的问题是提供一种用于生物药品的制剂形式，其不会表现出上述迄今已知剂型的缺点，如果需要的话，提供的制剂形式是针对低免疫原性或导致增加免疫反应情况。它特别是适合于由患者或受过训练的医疗个人自我给药，且具有减少免疫原性或根据医疗状况增加免疫原性和/或在同一时间避免不期望的皮肤刺激和/或通过注射装置(自)给药时在注射部位发生的疼痛。
因此，有必要提供适用于肠胃外的药物制剂，特别是皮下注射、给药/注射。
这个问题通过在权利要求中表征的实施方式解决。本发明制备制剂的方法具有减少或如在本说明书中描述的增加生物药品的免疫原性的优点。本发明基于令人惊讶的观察结果，即免疫反应可以通过选择适当的制剂进行调节，该制剂包括己二酸和/或适当水平柠檬酸。具有被免疫系统识别的潜力，这对药物而言是特别理想。这使得本发明的制剂在用于即用型注射器和其所提供的试剂盒是合适和有利的，如用于家庭。
发明内容
对本发明进行详细描述之前，应当理解的是，本发明并不限于所描述装置的特定组成部件或所描述方法的工艺步骤，这样的装置和方法是可以变化的。还需要理解的是，本文所使用的术语仅是为了描述特定的实施例，并不意图起限制性作用。必须指出的是，除非上下文另有明确说明外，如在说明书和所附权利要求中的单数形式“一个(a)”，“一个(an)”，及“该(the)”包括单数和/或复数个对象。还需要理解的是，在给出参数范围的情况下，其范围通过给出数值来确定界限，该范围被认为包括这些限定值。
在第一个方面，本发明提供一种制备包含生物药品的药物制剂的方法，该方法使得免疫反应的调节与其给药相关。该方法包括以下步骤：
(1)提供缓冲液，该缓冲液包括：
己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
柠檬酸或至少一种其所对应的盐
(2)将该缓冲液与生物药品接触
(3)可选择地冻干该制剂，及
(4)得到步骤(2)的制剂或悬浮液和/或步骤(3)的冻干制剂。
己二酸(Hexanedioicacid)是羧酸化合物，其也被称为肥酸(adipicacid)，1,4-丁二羧酸，1,6-己二酸，己二酸(acifloctin)，己二酸(acinetten)，己二酸(adipinicacid)，八氟己二酸(octafluorohexanedioic)或熔融的肥酸。肥酸的分子式为C6H10O4，其分子量为146.1g/mol。术语“肥酸(adipicacid)”和“己二酸(hexanedioicacid)”在本文可互换使用。
根据本发明的另一个方面，提供了一种采用己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或柠檬酸或至少一种其所对应的盐的方法，该方法能够调节包含生物药品的药物制剂的免疫原性。
根据本发明的另一个方面，提供一种药物制剂，其可以使免疫反应的调节与其给药相关。该制剂包含生物药品，及
己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
柠檬酸或至少一种其所对应的盐，
或通过上述讨论的方法获得的制剂。
根据本发明，术语“药物制剂”涉及任何适合于对患者给药的制剂，并且包括能表现出治疗和/或诊断效果的药物。这样的“药物制剂”优选为药物缓释制剂。
根据本发明的另一个方面，提供了一种调节与药物制剂给药相关的免疫反应的方法。该方法包括在含有缓冲液的制剂中调整下述物质浓度的步骤，
乙二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
柠檬酸或至少一种其所对应的盐。
如本文所用的术语“免疫原性(immunogenicity)”和/或“免疫原性的(immunogenic)”和/或“免疫原性的速率”应当从分子的势能角度来理解，当注射至受试者，可以被免疫系统识别，包括在随后的反应中，不论是有意或无意的，如抗分子的抗体的形成，即可能导致/诱导影响受试者的免疫系统的反应。
如本文所用的“免疫反应的调节”应理解为增加或减少给定制剂的与给药有关的免疫原性。而在许多情况下，为提高患者的顺应性并降低有害的副作用，免疫原性的减少可能是需要的，在其它情况下免疫原性的增加是需要的。
这里使用的术语“减少的免疫原性”涉及一种包括至少一种生物药品分子的制剂，当注射给患者，例如皮下注射，会造成/诱导免疫反应，该免疫反应实质上不比参照分子引起的免疫反应强烈，参照分子表示为本质上不具有免疫原性。
如本文所用的术语“生物药品”应包括任何从生物或从生物源衍生得到的治疗剂或诊断分子，或化学合成的等同于从该来源获得的产品，如蛋白质、肽、核酸、免疫球蛋白、多糖、细胞产物、植物提取物、动物提取物、重组蛋白或它们的组合。通常，生物药品是指生物药物的活性成分。术语“药物”和“化合物”在本文可互换使用，并且是指用于诊断、预防或治疗疾病的症状、身体或精神状况、损伤或感染的(一个或多个)药剂和/或(一个或多个)药物。
术语“生物利用度”是指在给药后，药物或其他物质被吸收或在生理活性的部位变得有效的程度或速率。大分子的生物利用度可通过在体内采用本领域中已知的药物动力学的方法测定。
合适的免疫原性的评估测定法是本领域熟知的，包括定性和半定量结合测定法、中和测定法、和验证性测定法(免疫以及免疫层析测定法)，用于测定抗药物抗体(ADAs)。进一步的分析包括采用定性测定法进行总抗体测定(屏幕和滴定度(screenandtitre))，采用了ELISA、ECL、RIA和流式细胞仪(包括用于增加耐药性的酸解离“AD”和固相萃取“SPEAD”和“BEAD”化验)验证性试验(特异性)。基于细胞检测用于测定大分子的中和抗体和毒代动力学分析也是众所周知的。
术语“受试者”或“个体”或“动物”或“患者”或“哺乳动物”，是指任何受试者，特别是哺乳动物受试者，对他们来说，诊断、预知、预防或治疗是期望的。为了治疗的目的，“哺乳动物”是指分类为哺乳动物的任何动物，包括但不限于人、家畜、及在动物园、运动所的动物或宠物动物，如狗、马、猫、牛等任何动物。优选地，哺乳动物为人。
在本发明的范围内进行的实验过程中，令人惊讶地发现：给药后一周后，相比市售药物和参考制剂，己二酸缓冲制剂经皮下注射给兔子时具有良好的可接受性/相容性和更低的清除(clearance)。因此，如实施例1和2所示，免疫原性受所选择的制剂或使用的溶液中己二酸的适当浓度的影响。具有被免疫系统识别的潜力，这对于药物而言是特别理想的。
许多因素会影响包括生物药品的药物制剂的免疫原性，包括结构特征(序列变异和糖基化)，贮存条件(由氧化引起的变性或聚集)，在制备过程中的污染物或杂质，治疗时间长度和剂量，以及给药途径，合适的制剂和患者的遗传特征。临床表现已在上面的部分中进行了概述。
如在实验部分的概述的详细说明中，发明人惊奇地发现，相比注射包含柠檬酸的制剂，皮下注射包含己二酸的制剂给兔子表现出更少的免疫反应。同时，发明人惊奇地发现，制剂具有减少量的柠檬酸，或者是基本上不含柠檬酸或其所对应的盐时，皮下注射给兔子时具有更少的免疫反应。后者是特别引人注目，因为通常有机酸等小分子根本不引起免疫反应。不局限于理论，发明人假定，柠檬酸或其所对应的盐可能会产生免疫原性，或在免疫反应的发展中发挥作用。
因此，谨慎的做法是期望相比在如柠檬酸缓冲液中，在己二酸缓冲液中配制的生物药品将引起更少的刺激或免疫反应。与此同时，例如相比在柠檬酸缓冲液中，谨慎的做法是期望在柠檬酸含量更少或者基本上不含有柠檬酸或其所对应的盐的缓冲液中配制的生物药品会诱发更少的刺激或免疫反应。本发明首次公开了这些令人惊讶的观察结果，其中，相应地应用会影响、减少、最小化和/或调节药物的免疫原性，通过免疫系统识别制剂来识别药物，而不影响生物利用度。
此外，谨慎的做法是期望在含有适当高浓度的柠檬酸缓冲液中配制生物药品时，可以进一步提高所期望的免疫反应。
本发明的方法和制剂可以根据本领域技术人员所公知的方法变化，但通常遵循如下文的步骤制备。首先，精制的生物药品，如抗体或蛋白，在溶剂(例如：水)中配置所需要的浓度，优选进一步补充有合适的缓冲剂如NaCl，吐温80(Tween80)或其它本领域已知的pH值为5至8的缓冲剂，其中，生物药品是稳定的。根据本发明的药物制剂包含的生物药品的量是有效地达到治疗效果的量。
在第二个步骤中，将生物药品溶解在至少包含己二酸或至少一种其所对应的盐的缓冲液，缓冲液的合适浓度如下详述，以形成生物药品制剂或生物药品的悬浮液。在根据本发明制备液体制剂中，缓冲物质优选以其游离酸形式提供。溶液所需的pH值是通过加入碱进行调节，例如像碱金属氢氧化物、碱土金属氢氧化物或氢氧化铵。为了这个目的，优选使用氢氧化钠。
通常，生物药品的制剂包含一种或多种缓冲剂、等渗剂(isotonisingagent)和作为溶剂的注射用水。此外，经常添加稳定剂，例如防冻剂。此外，可以加入一种或多种金属螯合剂和表面活性剂。一些药剂可具有双重作用，例如，一些糖或糖醇可以用作防冻剂和等渗剂。
作为本领域技术人员将理解，可以以适当的量添加一个或多个合适的酸(多个)至制备的制剂中。特别优选的是单-或二羧酸，或其所对应的盐，其中至少一个选自如下一组物质：
乙酸或乙酸盐
谷氨酸，或谷氨酸盐
苹果酸，或苹果酸盐
柠檬酸和/或柠檬酸盐，
磷酸和/或磷酸盐
酒石酸，或酒石酸盐，和/或
琥珀酸，或琥珀酸盐。
根据本发明，本领域技术的人员应该理解的是，术语“适量的酸(一个或多个)”所涉及的酸(一个或多个)并不是指免疫原性为“合适的量”，即该术语“适量的酸(一个或多个)”是指所制备的制剂的最终浓度。因此，根据本发明，公知的被免疫系统识别的某些酸(一个或多个)，即产生免疫原性的，和/或在受试者/患者中诱导免疫反应的不视为适用于制备制剂以减少免疫原性。
更多的添加剂，例如稳定剂、表面活性剂、等渗剂、金属离子螯合剂等可添加到制剂和/或悬浮液中，其中添加剂是适用于所期望的应用且为本领域技术人员所熟知的。如本文所用术语“稳定剂”应指有助于维持生物药品的结构完整性的试剂，特别是在冷冻和/或冷冻干燥和/或存储期间。在本发明的上下文中，这样的试剂也称为“防冻剂”或“冻干保护剂”。
在本发明所获得的制剂和/或悬浮液的方法中，作为可选择的步骤，可以通过使用本领域技术人员公知的标准技术进行冻干。在本发明的一个优选实施例中，该制剂的形式选自如下一组中的形式：
a)水溶液形式；
b)冻干形式，和/或
c)悬浮液。
在水溶液形式中，该制剂可以用于给药，而在冻干形式中，该制剂可以在给药前如转换成液体形式，例如通过加入包含或不包含防腐剂的注射用水，如苄基醇、抗氧化剂如维生素A、维生素E、维生素C、棕榈酸视黄酯(retinylpalmitate)和硒，氨基酸半胱氨酸和甲硫氨酸，柠檬酸和柠檬酸钠，合成防腐剂，如对羟基苯甲酸酯和对羟基苯甲酸丙酯。
最后，得到的制剂、悬浮液和/或冻干制剂可以进一步加工，例如添加防腐剂以长期贮存或填充在合适的容器以备所需要的给药。因此，通过本发明的方法获得的制剂用于肠胃外给药治疗和/或诊断药物是有用的。肠胃外给药可以是肌内注射或皮下注射给药，其中皮下注射给药是特别优选的。
特别地，本发明的制剂是被设计为口服给药，除了轮状病毒口服给药以及非口服给药途径外，如包括但不限于肠胃外给药、局部给药、肺部给药。
因此，在一个优选实施例中，本发明涉及的如上所述或者在下面详细描述的药物制剂和/或方法中，其中制剂是非口服剂型，即被设计为非口服给药。
优选地，己二酸作为唯一的羧酸或盐，甚至是根据本发明制剂中的唯一主缓冲液。
特别优选地，该制剂可基本不含有选自下一组中的至少一种缓冲化合物：
乙酸或乙酸盐
谷氨酸，或谷氨酸盐
苹果酸，或苹果酸盐
磷酸和/或磷酸盐
酒石酸，或酒石酸盐，和/或
琥珀酸，或琥珀酸盐。
或任何其他所公知的用于在注射至受试者时诱导或增加免疫原性的添加剂(expedient)。
在一个优选实施例中，根据本发明提供的方法或制剂导致与其给药相关的免疫反应的减少。在一个优选的实施例中，除此之外，以这样的方式，该制剂可以实现具有减少量的，或者是基本上不含柠檬酸或其所对应的盐。优选地，相反地，这种制剂包含己二酸。
如本文所用的术语“减少量的柠檬酸”，是指该制剂优选含有不大于0.01、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.2或1.3mM的柠檬酸或其所对应的盐。
该浓度范围内也可以包含累积浓度的柠檬酸和其所对应的盐，例如，柠檬酸钠。在柠檬酸作为水合物(例如，一水合物)的情况下，各自的浓度应相应修正。
如本文所用术语“基本上不含柠檬酸”，意味没有故意加入到组合物的柠檬酸或其所对应的盐。作为意外污染物的柠檬酸或所对应的盐总量在0.05％以下，优选低于0.01％。最优选的是组合物中不含有柠檬酸或其所对应的盐，可以采用在制药技术中使用的标准分析方法进行检测。
根据本发明特别优选的是己二酸是存在于制剂中，其浓度在≥1且≤100mM之间，优选为在≥2且≤50mM之间，更优选为在≥5且≤25mM之间，最优选为23mM。应该理解的是，在1mM至100mM之间的每个数值可以用于本发明，并且取决于制剂的预期用途和所治疗的患者。
此外，更优选的是，除了于己二酸，药物制剂还可以含有磷酸盐，优选磷酸钠(本文中也称为“NaP”)。术语“磷酸钠”应理解为包含二氢钠和磷酸氢二钠，以及其所有可能的盐和/或其水合物。
在另一个优选的实施例，根据本发明提供的方法或制剂导致与其给药相关的免疫反应的增加。在一个优选的实施例中，除此之外，以这样的方式，该制剂可以包含柠檬酸或其所对应的盐。
优选地，这意味着柠檬酸或其所对应的盐被故意加入到组合物中，虽然该实施例中也包括无需故意添加柠檬酸的制剂。
优选地，制剂将包含大于1.30、1.40、1.50、1.60、1.70、1.80、1.90、2.00、2.10、2.20、2.30、2.40、2.50、2.60、2.70、2.80、2.90、3.00、3.10、3.20、3.30、3.40、3.50、3.60、3.70、3.80、3.90、4.00、4.10、4.20、4.30、4.40、4.50、4.60、4.70、4.80、4.90、5.00、5.10、5.20、5.30、5.40、5.50、5.60、5.70、5.80、5.90、6.00、6.10、6.20、6.30、6.40、6.50、6.60、6.70、6.80、6.90、7.00、7.10、7.20、7.30、7.40、7.50、7.60、7.70、7.80、7.90、8.00、8.10、8.20、8.30、8.40、8.50、8.60、8.70、8.80、8.90、9.00、9.10、9.20、9.30、9.40、9.50、9.60、9.70、9.80、9.90、或10.00mM柠檬酸或其所对应的盐。
该浓度范围内也可以包含累积浓度的柠檬酸和其所对应的盐，例如，柠檬酸钠。在柠檬酸被提供作为水合物(例如，一水合物)的情况下，各自的浓度应相应修正。
优选地，药物制剂的水溶液形式的pH为≥3且≤9，优选为≥4且≤8，更优选为≥5且≤7。
在本发明的另一个优选实施例中，制剂还包含选自如下一组物质中的至少一种稳定剂：氨基酸、糖醇、二糖和/或多糖。
优选地，二糖是选自如下一组物质中的至少一种试剂：蔗糖，海藻糖，麦芽糖和/或乳糖。
同样优选地，糖醇是选自如下一组物质中的至少一种试剂：甘露糖醇和/或山梨糖醇。在这些物质中，甘露糖醇是特别优选的糖醇。优选地，它是用来作为唯一的糖醇，或甚至是根据本发明的药物制剂唯一的稳定剂。
特别优选地，药物制剂中以水溶液形式存在的稳定剂的浓度在≥1mM且≤300mM之间，优选为在≥2mM且≤200mM之间，更优选为在≥5mM且≤150mM。
在本发明的又一优选实施例中，制剂还包含选自下组中的至少一种试剂：
表面活性剂
等渗剂和/或
金属离子螯合剂。
表面活性剂增强了组分的润湿性，并支持它们的溶解度。这是特别重要的，因为生物药品通常需要配制成高浓度(例如，>100mg/1-10ml)。
合适的表面活性剂，例如卵磷脂和其它非离子表面活性剂，如聚山梨酸酯(“吐温”)，或泊洛沙姆(poloxameres)。特别优选的表面活性剂是聚山梨糖醇酯80(“吐温80”)或泊洛沙姆188(poloxamere188)。
根据本发明，该等渗剂用于将制剂的渗透压设定到一种生理上可接受的值，例如设定成血液渗透压。
该等渗剂是生理上可接受的化合物，并没有特别的限制。典型例子是，例如，该等渗剂可以为无机盐如氯化钠、氯化钾或氯化钙和其类似物。这些物质可以单独使用，也可以混合使用。
该金属离子螯合剂用于重金属的复合物形成，否则根据本发明包括在制剂中的生物药品可能会失活。优选地，该金属离子螯合剂是EDTA和/或EGTA。
然而，有越来越多的证据表明在皮下注射高含量的柠檬酸时可能对免疫原性产生影响，该免疫原性可能诱导和/或提高包含在柠檬酸缓冲液组合物中的药物清除，期望避免不想要的药物清除，该药物需要在体内以活性形式存在。
如实施例2以及图3和表4中所概述的，使用的含有己二酸缓冲阿达木单抗但不含有柠檬酸的制剂在皮下注射时表现出惊人的低免疫反应。其结果是，由己二酸缓冲的制剂会导致非常低的免疫反应，从而使制剂在皮下注射呈现特别的优异性。
因此，在又一个优选实施例中，该制剂是适于胃肠外给药的制剂，优选用于肌内注射和/或皮下注射给药。特别优选地，该制剂被设计成用于皮下注射给药。
在本发明的一个优选实施例中，该制剂适合于以聚合物形式保存以保持生物药品的结构完整性，保护电位和热力学稳定性等稳定性。
下表显示了包含嵌合的，人源化或人抗体(IgG形式)的制剂，相比对照的包括磷酸盐/柠檬酸盐体系缓冲液，其显示了更优越聚集行为，例如在受让人提交的WO2012/089778公开的，其中的内容与此通过引用明确地并入本申请。
测量蛋白质稳定性的分析技术是本领域中已知的且已评估的，例如在多肽和蛋白质药物传递(PeptideandProteinDrugDelivery)，247-301(VincentLeeed.，NewYork,N.Y.,1991)和Jones，1993AdvDrugDeliveryRev.10:29-90。在提供作为示例的实施例中，稳定性可在选定的温度选定的时间段进行测量。稳定的制剂的存储(即保质期)优选为至少6个月，更优选为12个月，更优选为12-18个月，并且更优选为2年或更多年。
在本发明另一优选实施例中，该生物药品是蛋白质。该蛋白质可以是天然存在的蛋白质、改性的蛋白质(即，蛋白质相对于其天然对应物经过了改性，也称为支架或模板)，或全合成蛋白(即，该蛋白质没有天然对应物)。
该蛋白质可以从天然生物中分离获得，也可以通过培养生物体的发酵而获得。此外，该蛋白质可以是从生物体获得的同源或异种蛋白质。此外，该蛋白质可以是重组蛋白质。
在一个特别优选的实施例中，生物药品是免疫球蛋白。优选地，其为IgG。
优选地，蛋白质和/或免疫球蛋白在药物制剂以水溶液形式存在，其浓度在≥0.1且≤500mgml-1之间，优选为在≥20且≤200mgml-1之间。
术语“免疫球蛋白”是指包括但不限于抗体和抗体片段(如scFv、Fab、Fc、F(ab')2)，以及抗体的其它遗传工程部分。根据其重链恒定域的氨基酸序列，免疫球蛋白可划分成不同的类。免疫球蛋白主要有五大类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。这其中的几个可进一步分为亚类(同种型)，例如，IgG1、IgG2、IgG3和IgG4；IgA1和IgA2。重链恒定结构域对应于不同类的免疫球蛋白，它们分别称为(α)、(δ)、(ε)、(γ)和(π)。不同类免疫球蛋白的亚基结构和三维构型是众所周知的。
根据本发明，特别优选地，该免疫球蛋白是选自下组物质中至少一种抗体或其片段或衍生物：
杂交瘤衍生的抗体；
嵌合抗体；
人源化抗体，和/或；
人抗体。
特别优选地，该免疫球蛋白是单克隆抗体、或其片段或衍生物。
如本文所用术语“单克隆抗体(mAb)”，是指具有同源的抗体种群的抗体组合物，即同质群体组成的完整免疫球蛋白，或其片段或衍生物。特别优选地，这样的抗体选自如下一组物质：IgG、IgD、IgE、IgA和/或IgM，或其片段或衍生物。
如本文所用术语“片段”是指在某些情况下保持靶结合能力的片段，例如
CDR(互补决定区)
高变区
可变域(Fv)
IgG重链(由VH，CH1，铰链，CH2和CH3区组成)
IgG轻链(由VL和CL区组成)，和/或
Fab和/或F(ab)2。
如本文所用术语“衍生物”是指蛋白质和/或免疫球蛋白构建体，其在结构上不同于普通的抗体概念，但仍具有一些相关的结构关系，例如，scFv、Fab和/或F(ab)2，以及二，三或更高的特异性抗体构建体。所有这些项目在下面进行解释。
本领域技术人员已知的其他抗体衍生物为双抗体，骆驼抗体，域抗体，具有由scFv、IgAs组成的两链的二价同型二聚体(加入了由J链和分泌组分的2个IgG结构)，鲨鱼抗体，由新世界灵长类框架加上非新世界灵长类的CDR组成的抗体，包含CH3+VL+VH的二聚体结构，及抗体结合物(例如抗体或片段或衍生物，如毒素，细胞因子，放射性同位素或标签)。
嵌合的，人源化和/或人源单克隆抗体mAbs的生产方法和/或选择方法是现有技术公知的。例如，由Genentech在US6331415中描述的生产嵌合抗体的方法，由医学研究理事会在US6548640描述的CDR移植技术和通过Celltech在US5859205描述的生产人源化抗体。其中体外抗体库由MorphoSys在US6300064披露并由MRC/Scripps/Stratagene在US6248516中披露。如噬菌体展示技术由Dyax在US5223409中披露。如转基因哺乳动物平台由TaconicArtemis在US200302048621中披露。
IgG、scFv、Fab和/或F(ab)2是本领域技术人员公知的抗体形式。相关可用技术可从相应的教科书获得。
如本文所用术语“Fab”是指包含抗原结合区的IgG片段，该片段由来自每个抗体的重链和轻链的一个恒定和一个可变的结构域组成。
如本文所用术语“F(ab)2”是指通过二硫键彼此连接的两个Fab片段组成的IgG片段。
如本文所用术语“scFv”是指一种单链可变区片段，其作为免疫球蛋白的重和轻链的可变区的融合，连接有短接头，通常为丝氨酸(S)或甘氨酸(G)。尽管这种嵌合分子除去了恒定区和引进的连接肽，其仍然保留了原来的免疫球蛋白的特异性。
改性的抗体形式为：例如双-或三特异性抗体构建体，基于融合蛋白、免疫交联物等的抗体。
在本发明的另一优选实施例中，该抗体或其片段或衍生物是一种抗TNF-α抗体。
在一实施方式中，抗TNF-α抗体由国际申请WO2012089778公开的序列表来定义。其中，序列号1(SEQIDNo1)定义了IgG重链的编码核酸序列，序列号2(SEQIDNo2)定义了IgG轻链的编码核酸序列，序列号3和4(SEQIDNos3和4)分别定义了重链和轻链的氨基酸序列。
序列号5、7和9(SEQIDNos5,7和9)定义了轻链的互补决定区(CDR)的氨基酸序列(即，LCCDR3、LCCDR2和LCCDR1)。序列号6、8和10(SEQIDNo6、8和10)定义了重链的互补决定区的氨基酸序列(即，HCCDR3、HCCDR2和HCCDR1)。
需注意的是，序列号1和2，或其部分可以通过以下方式等效地替换：
相同的蛋白或蛋白链的核酸序列编码，其由SEQID1和2进行编码，但具有核苷酸置换，在遗传密码的简并性下是可耐受的。
由序列号1和2进行编码的序列编码部分、变体、同系物、或蛋白质的衍生物或蛋白质链。
对给定的表达宿主进行代码优化的核酸序列，和/或
与序列号1或2至少有70％，优选为95％的序列同一性的核酸分子。
在一个特别优选的实施例中，根据本发明的方法获得的制剂或药物制剂包括抗体，该抗体包括(i)的氨基酸序列与序列号1和/或2的氨基酸序列至少有80％相同；和/或(ii)CDR区，其与阿达木单抗的CDR区的氨基酸序列具有完全相同的氨基酸序列。
在一个实施例中，本发明的抗体包含至少一种称为阿达木单抗的抗体分子的重链或轻链CDR。在另一个实施例中，本发明的抗体包含来自一个或多个抗体分子的至少两个CDRs。在另一个实施例中，本发明的抗体包含来自一个或多个抗体分子的至少三个CDRs。在另一个实施例中，本发明的抗体包含来自一个或多个抗体分子的至少四个CDRs。在另一个实施例中，本发明的抗体包含来自一个或多个抗体分子的至少五个CDRs。在另一个实施例中，本发明的抗体包含来自一个或多个抗体分子的至少六个CDRs。
在另一个实施例中，根据本发明的方法获得的药物制剂或制剂包含抗体，其包含的氨基酸序列与序列号1和/或2的氨基酸序列至少有80％，85％，90％或95％相同。特别地，该抗体包括，基本上由，或直接由免疫球蛋白轻和/或重链可变区(VL和/或VH)构成，轻链可变区的VL-CDRs中至少一个或轻链可变区的VL-CDRs中至少两个与来自抗体的氨基酸序列的参考轻链VL-CDR1，VL-CDR2或VL-CDR3和/或VH-CDR4，VH-CDR5或VH-CDR6氨基酸序列有至少80％、85％、90％或95％相同，该氨基酸序列由序列号1-10定义。
需要注意的是，序列号3～10，或其中一部分可以等效地被一个或多个携带有至少一个或多个保守氨基酸取代物的氨基酸序列取代。即，不会显著影响蛋白质特征的一个或多个取代物，如靶结合亲和力、免疫原性、ADCC反应，血清半衰期，溶解性等。
其他优选的抗体为能识别任何一种蛋白质或其组合的抗体，该蛋白质包括但不限于上述任意蛋白质和/或下面的抗原：CD2、CD3、CD4、CD8、CD11a、CD14、CD18、CD20、CD22、CD23、CD25、CD33、CD40、CD44、CD52、CD80(B7.1)、CD86(B7.2)、CD147、IL-la、IL-1、IL-2、IL-3、IL-7、IL-4、IL-5、IL-8、IL-10、IL-2受体、IL-4受体、IL-6受体、IL-13受体、IL-18受体亚基、PDGF-β、和它们的类似物，胎盘生长因子(PLGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF)、TGF-β2、TGF-p1、表皮生长因子(EGF)受体、PLGF受体、血管内皮生长因子(VEGF)受体、肝细胞生长因子、骨保护素配体、干扰素γ、B淋巴细胞刺激因子、补体C5、IgE、肿瘤抗原CA125、肿瘤抗原MUC1、PEM抗原、ErbB2/HER-2、在患者的血清水平升高中存在的肿瘤-相关表位，在乳腺癌、结肠癌、鳞状细胞癌、前列腺癌、胰腺癌、肺癌的血清、和/或肾癌细胞和/或在黑色素瘤、神经胶质瘤、神经母细胞瘤或细胞的与癌症相关的表位或蛋白质表达、肿瘤坏死核心、整联蛋白α4β7、整联蛋白VLA-4、整联蛋白B2，TRAIL受体1,2,3，和4，RANK，RANK配体，TNF-α，粘附分子VAP-1，上皮细胞粘附分子(EpCAM)，细胞间粘附分子-3(ICAM-3)、白色整联蛋白粘附(leukointegrinadhesin)、血小板糖蛋白gpIIb/IIIa、心肌肌球蛋白重链、甲状旁腺激素、MHCI、癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤坏死因子(TNF)、Fc-y-1受体、HLA-DR10β、HLA-DR抗原、L-选择素、和IFN-γ。
在一实施方式中，该生物药品是抗体模拟物，即，非免疫球蛋白基于靶结合蛋白分子。上述的许多技术适用于这些分子。例如，这种抗体模拟物来自锚蛋白重复蛋白、C型凝集素、金黄色葡萄球菌的A结构域蛋白、转铁蛋白、脂质运载蛋白、纤连蛋白、Kunitz结构域的蛋白酶抑制剂、泛素、半胱氨酸结(knots或knottins)、硫氧还蛋白A等等，并且是本领域技术人员可以从各文献得知。
在另一个实施例中，该生物药品是重组融合蛋白，其包含上述任何蛋白质或基本相似的蛋白质。例如，重组融合蛋白，其包含上述的一个蛋白质以及一个多聚化结构域，如亮氨酸拉链、卷曲螺旋、抗体的Fc部分、或基本上类似的蛋白质，其可以为包含在本发明制剂中的生物药品。尤其是包含在这类重组融合蛋白中的蛋白质，其中TNFR或RANK的至少一部分融合到抗体的Fc部分。特别优选的，该重组融合蛋白包含靶结合域和IgGFc结构域(所谓的cept分子)。
例如，由于某些抗体必须是定期地进行皮下注射，如每天一次，每周或每两周一次(即，每13-15天)和/或每月一次，目前用于这种目的某些缓冲液在注射后可诱导皮肤局部刺激和/或疼痛和/或诱导注射抗体的清除，因此期望提供一种方法，该方法可有效地调节，如预防，减少到最少化和/或降低免疫原性。
本领域技术人员要理解的是，作为主缓冲化合物的某些酸具有一些缺点，如柠檬酸，即它们在皮下注射时诱发皮肤刺激以及注射周围的疼痛。令人惊奇的是，如实施例中所示的，本发明首次揭示了浓度范围在1.3mM至9.6mM的柠檬酸强烈地影响皮下注射的蛋白质的免疫原性，如抗体阿达木单抗。
在一个实施例中，根据本发明的缓冲组合物意在用于制备药物的用途，优选用于皮下或肌内给药，例如通过预充式注射器或通过输液进行注射，如上所定义的生物制药在长期连续给药情况下是令人满意的。
正如上面已经提到的及在WO2012/089778实施例示出的，阿达木单抗的己二酸缓冲制剂可以在很长一段时间保持稳定，并基本上可存储在任何合适的容器中。因此，本发明还涉及含有上述的和/或实施例中所描述的制剂的容器。
典型地，该容器是常规用于储存和/或生物药品给药的容器，如小瓶、注射器、注射笔、安瓿、笔胆或输液容器，其中根据本发明的制剂在用于即用型注射器，笔和安瓿是特别有利的。在一个优选的实施例中，在注射器或笔中的液体制剂有一个有效的浓度，如术语抗TNF-α抗体，浓度为40mg/0.8ml，如阿达木单抗。
在一个实施例中，本发明涉及一种预充式注射器或笔、小瓶或输液袋，该注射器或笔、小瓶或输液袋包括根据本发明的方法获得的药物制剂/悬浮液制剂和/或冻干形式制剂。
在本发明中的另一方面，提供一种原包装，如预充式注射器或笔、小瓶、或输液袋，其包括根据本发明第一方面的方法和/或根据本发明第二方面的方法获得的制剂。
预充式注射器或笔可含有冻干形式制剂(给药前将冻干形式制剂溶解，例如，用注射用水溶解)，或水溶液形式制剂。该注射器或笔通常是一次性用品，为一次性使用，并且可以具有0.1至20ml的容积。然而，注射器或笔也可以是可多次使用或多剂量的注射器或笔。
该小瓶还可以含有冻干形式或水溶液形式制剂，可作为单次或多次使用的装置。作为多次使用的装置，该小瓶能够具有更大的容积。
该输液袋通常包含水溶液形式制剂，并且可以具有20至5000ml的容积。
在本发明的另一方面中，通过该方法获得的药物制剂或悬浮液制剂和/或冻干制剂和/或如上所述原包装是用于治疗至少一种选自如下一组病理状况：
自身免疫性疾病
传染性疾病
肿瘤和/或恶性疾病(癌症)，以及
神经系统疾病。
合适的自身免疫性疾病为关节炎和风湿性疾病，如牛皮癣、克罗恩病(Crohn’sdisease)或类风湿性关节炎。合适的传染性疾病为病毒和/或细菌感染。合适的肿瘤和/或恶性疾病为肉瘤、癌、淋巴瘤和白血病，优选地，肺癌、乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、前列腺癌、子宫颈癌等等。合适的神经系统疾病为，尤其是神经退行性疾病，如帕金森氏症、阿尔茨海默氏症、多发性硬化症、亨廷顿氏病、或肌萎缩性侧索硬化。
在其他方面，以同样的剂量强度，根据本发明的包括抗TNF-α抗体的制剂可根据(INN：阿达木单抗)的产品信息来使用，特别是关于剂量、给药和医学指征。
根据本发明，由于包含生物药品的制剂在给药之前混合其它赋形剂或采取进一步的准备措施可有利地省略，例如过滤、混合等，根据本发明的生物药品可以在制备后立即给药，例如装在试剂盒中。
在一实施例中，这对医生、药剂师，特别是对患者特别有利的，因此本发明还涉及一种用于肠胃外给药制剂的试剂盒，该制剂由本发明的方法获得或该药物制剂在减少免疫原性中是有用的，包括一个或多个上述容器，优选与用于存储和/或给药的说明书一起使用。
优选地，根据本发明可在试剂盒中提供1或2或3或4或5个注射器或笔或任选更多个，如7个注射器或笔，例如在每天给药要持续一周的情况。
为安全处理的原因，有利地，根据本发明的试剂盒分别具有注射器和注射和/或输液针用的安全室。在这里，也要考虑放电艾滋病针、准备或预先装配的密封帽。
如上所述，根据本发明的制剂在相当长的一段时间是稳定的，特别是在约5℃温度保存，优选历时至少4周。因此，根据本发明的制剂、容器和试剂盒可有利地存储在常规冰箱中。
这些和进一步的实施方式由本发明的权利要求所涵盖。
上述和下述现有技术文献的公开内容通过参考引用并入本文，特别是制备抗TNF抗体和己二酸缓冲液。这些和进一步的实施方式是公开的且是本领域技术人员所熟知的，包括在说明书和本发明的实施例中。在上述赋形剂相关的文献以及电子手段可以从现有技术中获得并按照本发明使用，例如，从公共图书馆获得。此外，进一步的公开数据库可以通过互联网很容易地获得，例如“PubMed”。
用于实施本发明的技术是本领域技术人员已知的，并且可以从相关文献获得，例如参见分子克隆实验室指南(MolecularCloningALaboratoryManual)，第二版，编辑作者Sambrook，Fritsch和Maniatis(冷泉港实验室出版社：1989)；细胞和分子生物学免疫化学方法(ImmunochemicalMethodsInCellAndMolecularBiology)(编辑作者：Mayer和Walker，科学出版社，伦敦，1987年)；实验免疫学手册(HandbookOfExperimentalImmunology)，卷I-IV(编辑作者：D.M.Weir和C.C.Blackwell，1986年)。
附图说明
图1-a：阿达木单抗的个体血清浓度的半对数测井曲线，根据的单次s.c.给药(通过周期标记与ADA反应相关的个体)
图1-b：阿达木单抗的个体血清浓度的半对数测井曲线，根据受让人的阿达木单抗版本的单次s.c.给药，根据配方制造但增加柠檬酸浓度(通过周期标记与ADA反应相关的个体)
图1-c：阿达木单抗的个体血清浓度的半对数测井曲线，根据受让人的阿达木单抗版本的单次s.c.给药，采用己二酸制造但相比具有更低的柠檬酸浓度(通过周期标记与ADA反应相关的个体)
图2：研究1号免疫原性的频率，该三组研究中的柠檬酸浓度和免疫原性速率之间相关性。
图3：根据受让人的阿达木单抗版本的配方制造的研究2号的高滴定度的免疫反应的频率。免疫原性结果在数量级是相同的，即在这方面受让人的阿达木单抗版本可以推广到
图4：研究2号免疫原性发病率，与相比，己二酸制剂的免疫反应分布(高、中、瞬态、无反应)在统计学上表现更显著(p<0,05费舍尔精确T检验；皮尔森：9.167(p＝0.02716)卡方，具有3个自由度且排除零发生细胞在外)
实施例
材料与方法
实施例1：研究1号
动物：
由商业育种者提供的45只纯种雌性新西兰白兔(NZW)。体重大约是3千克左右，且所有的动物进行了外部疾病迹象检查，以确保仅将健康的个体纳入实验。这些个体通过纹身数字来标记。
给药：
在研究的第一天，由动物技师通过皮下快速推注到所有动物的背部进行给药。注射速度约为15秒/每剂，按照0.2ml/kgb.w.剂量进行给药。
治疗组：
测定了三个治疗组，其中两个(第1组和第3组)采用包含了受让人的阿达木单抗版本的制剂进行治疗，并且其中一个(第2组)采用包含了的制剂进行治疗。
表1：组别，剂量水平
通过计算机随机生成方式将动物分配至各组。
饮食/住所/饮用水：
提供认证的商品饲料(K-H(GmbH,59494Soest,Germany)和饮用自来水给动物(自由采食)。将动物单独圈养在标准笼子里，且在室温约为20℃±3℃和相对湿度55％±15％条件下圈养。在清洗阶段发生短期偏离。室外有灯光照明(在大约1.50米房间高度约有150lux)以12小时光照/12小时黑暗进行循环。
采血：
在以下时间点收集血样：给药前，2、8(试验第1天)、24、40(试验第2天)、48、60小时p.a.，及在测试第4、5、8、15、22、29天进行采血。将样品加工成血清并冷冻存储于-20℃或更冷的温度，直到装运并采用夹心酶联免疫(ELISAs)分析阿达木单抗浓度。
实施例2：研究2号
动物：
由提供研究1号商业育种者提供100只纯种雄性新西兰白兔(NZW)。稍微增加了组别，在研究1号中选择了n＝20/组与n＝15/组以确保得到的数据提高稳定性。选择雄性以评估研究1号的结果是否不受性别影响。动物的特征是一样的，作为研究设计的其余方面，即随机分配到研究组，剂量水平、给药体积、饮食、住房条件、饮水和光照条件，血液样品处理和样品储存都是一样的。
治疗组：
测定五个治疗组，其中4个(第2至第5组)采用包含受让人的阿达木单抗的版本的制剂进行了治疗，以及其中一个组(第组1)采用包含了的制剂进行治疗。
表2:组别,剂量水平
血样采集
分析阿达木单抗血清浓度和免疫原性的采血时间点稍微延长一些，以确保最大的清除，尽量减少ADA检测药物的干扰。在下列时间点收集样品：在给药前，2、8(试验第1天)、24、40(试验第2天)、56小时p.a.，和测试第4、第5天以及后面的每周，即在测试第8、15、22、29、36、43、50、57、64、71、78天进行采样。将样品加工成血清，并冷冻保存于-20℃或更冷的温度，直到装运并采用夹心酶联免疫(ELISAs)分析阿达木单抗浓度。
结果
图1示出了在研究1号中单次sc注射给药的阿达木单抗的时间过程。给药后开始约一周，个体的血清水平显著下降约40％。因为靶介导的药物处置排除在这个物种之外，这是由于人类和灵长类动物TNF的阿达木单抗的高特异性，增加的清除很可能是由免疫原性引起的，即抗药物抗体，潜在地中和/抑制特性。相比其中没有抗体结合药物，这种增加的清除表示抗体-药物复合物的一个关键特性。另外，第一次出现的时间点，即一周后，很好滴匹配了这种解释，人类蛋白质给药于动物物种具有可以预期的效果，特别是如果是冒着经由注射引发免疫原性的风险，如皮下注射给药。
图1b示出了第2组研究治疗的结果，根据配方制成的受让人的阿达木版本相同给药量，但采用稍高的柠檬酸浓度。总体来说，制剂没有显著地影响吸收的动力学，达到最大血清浓度时间点，也不是其本身最大浓度，这两者是相同的大小顺序。同样地，给药后一周，在第二组中相当一部分动物显示了急剧变化的清除表明ADA的形成。有趣的是，即使在不考虑个体仅表现出瞬时增大的清除，相比第1组，部分动物表现了更高的ADA反应。而柠檬酸在皮下注射时能导致短时间疼痛是已知的，这种经常使用的组件用于生物制药的免疫原性的作用在迄今为止是没有描述的。
第3组是用于测试的主缓冲组分，即磷酸盐，是否可以与己二酸进行交换而不会影响主要的药物动力学参数和耐受性，事实证明确实如此。选定己二酸是因为其对降解和或聚集过程有利于稳定阿达木单抗。为了确保进行公正的比较，将第1和2组的个体以相同的方式分别圈养、处理和给药，这是至关重要的。此外，通过己二酸替换磷酸盐，按照受让人的阿达木单抗版本给药，采用比更低的柠檬酸浓度，使得在注射时尽可能地减少疼痛。出乎意料的是，不仅第2组中增加柠檬酸的浓度导致免疫原性的发病率增加，且除此之外，降低柠檬酸浓度与在本研究中的最低免疫原性发病率相关(图1c)。
本研究第3组中的柠檬酸浓度和免疫原性速率之间的相关性总结于图2和表3。
表3：研究1组的总体ADA滴定度
*此外，该缓冲液包括以下附加组分[mg/ml]：NaCl5.0-7.0；甘露糖醇10.0-14.0；吐温800.5-1.5；适量氢氧化钠(NaOHq.s.)将pH调节至5.20
**的市售制剂
为了进一步鉴定和确认研究1组的结果，实施了第二组研究，第二组研究的设计本质上反映了研究1组的设置，但是实验室执行的生命部分研究，即动物住房、给药和样品生成是不同的。采取这一步骤是为了确保没有不受控制因子可以导致己二酸/柠檬酸的观察效果。作为附加步骤，开发了专用的ADA测定法，因为这可以直接证明免疫系统的调节，无论是有意或无意的。此外这样的分析可以量化免疫疫反应，也就是说，将其归类到高滴定度/中和/抑制，介质或只是瞬态响应。
着眼于临床最关键的高滴定度响应，图3和表4总结了本研究的结果。首先，从第一项研究的整体确认观察到柠檬酸浓度通过免疫系统的识别强烈地影响药物的免疫原性，如阿达木单抗。
此外，数据表明如果按照与相同的方式配制受让人的阿达木单抗版本，免疫原性的结果具有相同的数量级，在此方面，即受让人的阿达木单抗版本推广到这是被强调的事实，即Cmax，tmax和AUC分别与等同。采用己二酸作为主要成分时，受让人的阿达木单抗版本的柠檬酸的高浓度比柠檬酸的低浓度具有更低的免疫原性。一方面这再次表明，柠檬酸很可能在缓冲体系的多元化上对免疫原性的起到了作用。图4最后示出的己二酸制剂(高，中，瞬变，无应答)的免疫反应曲线比更显著(P<0.05，费希尔精确T检验；皮尔森：9.167(p＝0.02716)卡方，有3个自由度和排除零发生细胞情况)。没有柠檬酸，对己二酸制剂的临床相关高滴定度响应更低。
总之，这些数据表明，免疫反应可以通过选择的制剂或应用溶液的适当浓度进行调节，此外，使用己二酸会导致非常低水平的免疫反应。有潜力被免疫系统识别，这对药物而言是特别理想的。
表4：研究2组高滴定度反应的发生
*此外，该缓冲液包括以下附加组分[mg/ml]：NaCl5.0-7.0；甘露糖醇10.0-14.0；吐温800.5-1.5；适量氢氧化钠(NaOHq.s.)将pH调节至5.20
**的市售制剂

Claims (15)

1.一种包含生物药品的药物制剂的制备方法，所述方法使免疫反应的调节与其给药相关，所述方法包括步骤：
(1)提供缓冲液，所述缓冲液包括
己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
柠檬酸或至少一种其所对应的盐
(2)将所述缓冲液与生物药品接触
(3)可选择地冻干所述制剂，及
(4)得到(2)的制剂或悬浮液和/或(3)的冻干制剂。
2.一种采用己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或柠檬酸或至少一种其所对应的盐以调节包含生物药品的药物制剂的免疫原性的方法。
3.一种使免疫反应的调节与其给药相关的药物制剂，所述制剂包括生物药品，以及
己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
柠檬酸或至少一种其所对应的盐，
或由权利要求1所述的方法获得的所述制剂。
4.一种调节或确定与药物制剂给药相关的免疫反应的方法，所述方法包括在含有缓冲液的所述制剂中调节下述物质浓度的步骤：
己二酸或至少一种其所对应的盐，和/或
柠檬酸或至少一种其所对应的盐。
5.根据上述任意一项权利要求所述的制剂或方法，所述方法或制剂导致与其给药相关的免疫反应的减少。
6.根据权利要求5所述的制剂或方法，其特征在于，所述制剂具有减少量的柠檬酸或其所对应的盐，或者基本上不含有柠檬酸或其所对应的盐。
7.根据权利要求1-4任意一项所述的制剂或方法，所述方法和制剂导致与其给药相关的免疫反应的增加。
8.根据权利要求7所述的制剂或方法，其特征在于，所述制剂包括柠檬酸或其所对应的盐。
9.根据上述任意一项权利要求所述的制剂或方法，其特征在于，所述制剂还包括选自如下一组物质中的至少一种稳定剂：氨基酸、糖醇、二糖和/或多糖。
10.根据权利要求9所述的制剂或方法，其特征在于，所述二糖选自如下一组物质中的至少一种：蔗糖、海藻糖、麦芽糖和/或乳糖。
11.根据权利要求9或10所述的制剂或方法，其特征在于，所述糖醇选自如下一组物质中的至少一种：甘露糖醇和/或山梨糖醇。
12.根据上述任意一项权利要求所述的制剂或方法，其特征在于，所述生物药品是免疫球蛋白。
13.根据权利要求12所述的制剂或方法，其特征在于，所述免疫球蛋白是抗TNF-α抗体。
14.根据上述任意一项权利要求所述的制剂或方法，其特征在于，所述制剂被设计为肌内或皮下注射给药。
15.根据上述任意一项权利要求所述的制剂或方法，其特征在于，所述制剂被设计为非口服给药。
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