CN105246485B

CN105246485B - α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂的应用

Info

Publication number: CN105246485B
Application number: CN201480014891.4A
Authority: CN
Inventors: M·芬特; D·费尔巴哈; D·琼斯; C·洛佩斯-洛佩斯; K·H·麦卡利斯特; J·索瓦格; M·韦斯
Original assignee: Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
Current assignee: Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
Priority date: 2013-01-15
Filing date: 2014-01-13
Publication date: 2019-03-15
Anticipated expiration: 2034-01-13
Also published as: ES2865736T3; MX2015009153A; BR112015016992A2; CA2898045A1; EP2945637B1; TW201442708A; JP2018021042A; WO2014111837A1; KR101879919B1; MX379289B; JP6657534B2; CA2898045C; JOP20140008B1; TWI659740B; BR112015016992A8; EP2945637A1; CN105246485A; JP2016508159A; KR20150105468A

Abstract

本发明涉及α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂在治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展中的应用。

Description

α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂的应用

本发明涉及α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)激动剂的制药应用。

疲劳是受试对象的以身体和/或精神虚弱为特征的一种长期状态，并且由病症引起。

所述身体虚弱是指肌肉在物理上暂时不能发挥最佳状态。还可以将其描述为肌肉力竭、肌肉无力、肌肉疼痛或乏力，其涉及不能用肌肉发出根据个体的一般体能所预期的程度的力量。中枢肌肉无力是全身的整体力竭，而外周肌肉无力是个别肌肉的力竭。

精神虚弱是指暂时不能保持最佳的认知性能。其特征是缺乏动机和警觉度。在任何认知活动过程中的发作都是渐进的，并且取决于个体的认知能力，而且还取决于其他因素，例如睡眠剥夺和总体健康。精神虚弱自身可表现为瞌睡(觉醒状态减少)，或表现为注意力总体下降，并不一定包括瞌睡。注意力下降还被称为“自我损耗”，可以将其描述为或多或少的意识水平下降。这在执行要求持续保持注意力的工作(例如，驾驶车辆)时可能是危险的。

虽然受试对象中的相似的疲劳样状态可能是由工作、精神紧张、过刺激、刺激不足、时差综合征、厌烦情绪和缺乏睡眠引起的；但这种疲劳样状态并不是由病症引起的，且通常通过夜间的睡眠来得到逆转。

疲劳可以是例如慢性疲劳综合征(CFS)。

疲劳可以由任何以下病症引起：自身免疫病，例如多发性硬化症(MS)、乳糜泻和脊椎关节病；传染病，例如HIV感染或传染性单核细胞增多症；血液病症，例如贫血和血色素沉着症；癌症(在此情况下，所述疲劳也称作癌疲劳)；药物滥用，包括酒精滥用；抑郁症或包含抑郁情绪的其他精神病症；进食障碍(其能够因营养不足而产生疲劳)；内分泌疾病，例如糖尿病和甲状腺功能减退；纤维肌痛；海湾战争综合征；心脏病；肠易激综合征；先天性代谢紊乱，例如果糖吸收不良；肝衰竭；白血病；淋巴瘤；莱姆病；神经障碍，例如，帕金森病和脑震荡后综合征；身体创伤和引起疼痛的其他病况，例如关节炎；由肾病引起的尿毒症；和卒中。

疲劳还可以由病症间接地引起，例如，可以是用于治疗病症的可引起运动不耐受的药物(例如锂盐、环丙沙星、β-受体阻滞剂)的副作用和癌症治疗(例如化疗和放疗)的副作用。

需要有效地靶向疲劳的新药物化合物。

已发现某些α7nAChR激动剂可用于治疗(治疗性治疗或预防性治疗)、预防、改善疲劳或延迟疲劳进展。

因此，本发明的第一方面涉及α7nAChR激动剂在治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展中的应用；

其中，所述α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的(i)或(ii)中的化合物

(i)式(I)的化合物

其中，

L₁是–CH₂-；L₂是–CH₂-CH₂-；且L₃是–CH₂-或–CH(CH₃)-；或者

L₁是–CH₂-CH₂-；L₂是–CH₂-；且L₃是–CH₂-CH₂-；

L₄是选自以下L4a或L4b的基团：

其中，用星号标记的键连接至氮杂双环烷基部分；

R₁是甲基；

X₁是-O-或–NH-；

A₂选自：

其中，用星号标记的键连接至X₁；

A₁是苯基、吲哚或1,3-二氢吲哚-2-酮，其可以取代有一个或多个R₂，R₂各自独立地为C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基或卤素；

(ii)选自由以下化合物组成的组的化合物：

4-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

(4S)-4-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

4-(6-(1H-吲哚-5-基)-哒嗪-3-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

4-(6-(1H-吲哚-5-基)-吡啶-3-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

4-(5-(1H-吲哚-5-基)-嘧啶-2-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

N-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

N-((3R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

N-((3S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

N-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(三氟甲氧基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；

N-((3R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(三氟甲氧基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；

N-((3S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(三氟甲氧基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；

N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)苯并呋喃-2-甲酰胺；

(2S,3R)-N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)苯并呋喃-2-甲酰胺；

N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-3,5-二氟苯甲酰胺；

(2S,3R)-N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-3,5-二氟苯甲酰胺；

N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-甲基噻吩-2-甲酰胺；

(2S,3R)-N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-甲基噻吩-2-甲酰胺；

N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(2-吡啶基)噻吩-2-甲酰胺；

(2S,3R)-N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(2-吡啶基)噻吩-2-甲酰胺；

7,8,9,10-四氢-6,10-亚甲基-6H-吡嗪并(2,3-h)(3)苯并氮杂

3-[1-(2,4-二甲氧基苯基)-甲-(E)-亚基]-3,4,5,6-四氢[2,3']二吡啶基；

N-甲基-1-{5-[3’H-螺[4-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2,2’-呋喃并[2,3-b]吡啶]-5’-基]-2-噻吩基}甲胺；

N-甲基-1-{5-[(2R)-3’H-螺[4-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2,2’-呋喃并[2,3-b]吡啶]-5’-基]-2-噻吩基}甲胺；

N-甲基-1-{5-[(2S)-3’H-螺[4-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2,2’-呋喃并[2,3-b]吡啶]-5’-基]-2-噻吩基}甲胺；

(R)-7-氯-N-(奎宁环-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺；

5-{5-[(内)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

5-{5-[(外)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

5-{5-[(内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

5-{5-[(外)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

4-{5-[(外)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

5-{6-[(外)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-3-基}-1H-吲哚；

(2’R)-螺-[1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-3,2‘(3’H)-呋喃并[2,3-b]吡啶]；

1,4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-甲酸4-溴-苯基酯；和

5-{6-[1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基氧基]哒嗪-3-基}-1H-吲哚。

本发明的另一方面涉及一种治疗、改善、预防有治疗需要的受试对象的疲劳或延迟有治疗需要的受试对象的疲劳进展的方法，所述方法包括向所述受试对象施用治疗有效量的本发明的α7nAChR激动剂。

本发明的又一方面涉及本发明的α7nAChR激动剂在制备用于治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展的药物中的应用。

本发明的α7nAChR激动剂：

本文所用的“α7nAChR激动剂”是在体内和体外与包含α7nAChR亚基的受体结合并使该受体活化的化合物。活化可以用WO2001/85727中公开的方法来测量，即，用稳定表达α7nAChR的大鼠垂体细胞系进行的针对同聚体(homomeric)α7nAChR的功能亲和力测定。作为读出结果，使用了与地棘蛙素相比的刺激受体后的钙流入量。本发明所述的“本发明的α7nAChR激动剂”通常诱导由地棘蛙素激发的最大流入量的至少50％的钙流入量，且EC₅₀值至少为1μM。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂对包含烟碱型乙酰胆碱受体α7亚基的受体具有选择性，这是因为预期这样的激动剂对受治疗的受试对象引起的副作用比非选择性激动剂的副作用更小。对包含烟碱型乙酰胆碱受体α7亚基的受体具有选择性的激动剂对此类受体的功能性亲和力比对任何其他烟碱型乙酰胆碱受体的功能性亲和力都高得多，例如，在EC₅₀值方面具有至少10倍、优选至少20倍、更优选至少50倍的亲和力差异。为了评估本发明的α7nAChR激动剂对其他烟碱型乙酰胆碱受体的亲和力，可以使用WO2001/85727中公开的方法，即，为了评估对人神经元α4β2nAChR的亲和力，使用稳定表达人α4β2亚型的人胚胎肾细胞系进行类似的功能测定；为了评估本发明的化合物对“神经节亚型”和“肌肉型”的烟碱型乙酰胆碱受体的活性，用稳定表达人“神经节亚型”的人胚胎肾细胞系或内源性表达人“肌肉型”烟碱型乙酰胆碱受体的细胞系进行类似的功能测定。

在过去15年间，大量的努力聚焦于开发选择性的α7nAChR激动剂，从而发现展现出所述选择性活性的多种不同的化学型。这些努力总结在Horenstein等的综述(MolPharmacol,2008,74,1496-1511)中，该综述描述了不少于9个不同的α7nAChR激动剂家族，在其中多数家族中都发现了选择性激动剂。将该综述的图1所公开的所有化合物都通过援引并入本文中。事实上，具有α7nAChR激动剂作用模式的若干种药物候选物都进入了临床前试验或甚至临床试验(综述见Broad等,Drugs of the Future,2007,32(2),161-170；Romanelli等,Expert Opin Ther Patents,2007,17(11),1365-1377)。此类化合物的实例(同样属于多种多样的化学型)有MEM3454、MEM63908、SSR180711、GTS21、EVP6124、ABT107和TC-5619。其他的α7nAChR激动剂及其作为药物的应用可见于例如WO2001/85727、WO2004/022556、WO2005/118535、WO2005/123732、WO2006/005608、WO2007/045478、WO2007/068476和WO2007/068475。

“本发明的α7nAChR激动剂”是游离碱形式或酸加成盐形式的

(i)式(I)的化合物

其中，

L₁是–CH₂-CH₂-；L₂是–CH₂-；且L₃是–CH₂-CH₂-；

L₄是选自以下L4a或L4b的基团：

其中，用星号标记的键连接至氮杂双环烷基部分；

R₁是甲基；

X₁是-O-或–NH-；

A₂选自：

其中，用星号标记的键连接至X₁；

A₁是苯基、吲哚或1,3-二氢吲哚-2-酮，其可以取代有一个或多个R₂，R₂各自独立地为C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基或卤素；或者

(ii)选自由以下物质组成的组的化合物：

4-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

4-(6-(1H-吲哚-5-基)-哒嗪-3-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

4-(6-(1H-吲哚-5-基)-吡啶-3-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

4-(5-(1H-吲哚-5-基)-嘧啶-2-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

N-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

N-((3R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

N-((3S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

N-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(三氟甲氧基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；

7,8,9,10-四氢-6,10-亚甲基-6H-吡嗪并(2,3-h)(3)苯并氮杂

(R)-7-氯-N-(奎宁环-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺；

5-{5-[(内)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

5-{5-[(外)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

1,4-二氮杂-双环[3.2.2]壬烷-4-甲酸4-溴-苯基酯；和

5-{6-[1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基氧基]哒嗪-3-基}-1H-吲哚。

除非另有说明，本发明中所用的表述具有以下含义：

“烷基”表示直链或带支链的烷基基团，例如，甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基、正戊基、正己基；C_1-6烷基优选表示直链或带支链的C_1-4烷基，特别优选甲基、乙基、正丙基、异丙基和叔丁基。

“卤代烷基”的烷基部分应当具有与上述“烷基”的定义中所述相同的含义，尤其是对直链性和优选大小而言。

取代有“一个或多个”的取代基(例如对A₁所定义的)优选为取代有1-3个取代基。

卤素通常为氟、氯、溴或碘；优选为氟、氯或溴。卤代烷基基团优选具有1至4个碳原子的链长，并且为例如氟代甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯代甲基、二氯甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、2-氟乙基、2-氯乙基、五氟乙基、1,1,-二氟-2,2,2-三氯乙基、2,2,2-三氯乙基、1,1,2,2-四氟乙基、2,2,3,3-四氟丙基、2,2,3,3,3-五氟丙基或2,2,3,4,4,4-六氟丁基；优选为-CF₃、-CHF₂、-CH₂F、-CHF-CH₃、–CF₂CH₃或–CH₂CF₃。

在本发明的背景下，A₁或A₃的定义“五元至十元单环或稠合多环芳香环体系”涵盖了C₆或C₁₀芳香环。

本发明的α7nAChR激动剂的酸加成盐形式优选为药学上可接受的盐形式。这类盐在本领域是已知的(例如S.M.Berge等，"Pharmaceutical Salts",J.Pharm.Sd.,1977,66:1-19；和“Handbook of Pharmaceutical Salts,Properties,Selection,and Use”,Stahl,RH.,Wermuth,C.G.,Eds.；Wiley-VCH and VHCA:Zurich,2002)。“药学上可接受的盐形式”意指不具有毒性、生物不耐受性或其他方面不合生物需要的性质的盐形式。

对于可能存在于式(I)化合物中的非对称碳原子，除非另有说明，这些化合物可以以光学活性形式存在或以光学异构体的混合物的形式存在，例如，以外消旋混合物或非对映异构混合物的形式存在。除非另有说明，所有光学异构体及其混合物，包括外消旋混合物，都是本发明的一部分。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的式(I)的化合物

其中，

L₁是–CH₂-；L₂是–CH₂-CH₂-；且L₃是–CH₂-；

L₄是L4b；

A₂选自：

其中，用星号标记的键连接至X₁；

A₁是苯基，其可以取代有一个或多个R₂，R₂各自独立地为C_1-6烷基、C_1-6卤代烷基或卤素。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的选自组P1的化合物，其中，组P1是由以下化合物组成的组：

A-1:(S)-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-氨基甲酸(S)-1-(2-氟苯基)乙酯；

B-1:(R)-3-(6-对甲基苯基-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷；

B-2:(R)-3-[6-(2-氟-4-甲基-苯基)-哒嗪-3-基氧基]-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷；

B-3:(R)-3-[6-(2,5-二氟-4-甲基-苯基)-哒嗪-3-基氧基]-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷；

B-4:(2S,3R)-3-[6-(1H-吲哚-5-基)-哒嗪-3-基氧基]-2-甲基-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷；

C-1:(4S,5R)-4-[5-(1H-吲哚-5-基)-嘧啶-2-基氧基]-1-氮杂双环[3.3.1]壬烷；

C-2:5-{2-[(4S,5R)-(1-氮杂双环[3.3.1]壬-4-基)氧基]-嘧啶-5-基}-1,3-二氢-吲哚-2-酮；

C-3:(4S,5R)-4-[6-(1H-吲哚-5-基)-哒嗪-3-基氧基]-1-氮杂双环[3.3.1]壬烷；

C-4:5-{6-[(4S,5R)-(1-氮杂双环[3.3.1]壬-4-基)氧基]-哒嗪-3-基}-1,3-二氢-吲哚-2-酮；和

C-5:(1-氮杂双环[3.3.1]壬-4-基)-[5-(1H-吲哚-5-基)-嘧啶-2-基]-胺。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的选自组P2的化合物，其中，组P2是由以下化合物组成的组：

D-1:具有下式的4-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷：

D-1a:(4S)-4-(5-苯基-1,3,4-噻二唑-2-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

D-1b:4-(6-(1H-吲哚-5-基)-哒嗪-3-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

D-1c:4-(6-(1H-吲哚-5-基)-吡啶-3-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

D-1d:4-(5-(1H-吲哚-5-基)-嘧啶-2-基氧基)-1氮杂三环[3.3.1.1^3,7]癸烷；

D-2:N-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

D-2a:N-((3R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

D-2b:N-((3S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-1H-吲唑-3-甲酰胺

D-3:N-(1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(三氟甲氧基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；

D-3a:N-((3R)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(三氟甲氧基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；

D-3b:N-((3S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(三氟甲氧基)-1H-吲唑-3-甲酰胺；

D-4:N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)苯并呋喃-2-甲酰胺；

D-4a:(2S,3R)-N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)苯并呋喃-2-甲酰胺；

D-5:N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-3,5-二氟苯甲酰胺；

D-5a:(2S,3R)-N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-3,5-二氟苯甲酰胺；

D-5b:N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-甲基噻吩-2-甲酰胺；

D-5c:(2S,3R)-N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-甲基噻吩-2-甲酰胺；

D-5d:N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(2-吡啶基)噻吩-2-甲酰胺；

D-5e:(2S,3R)-N-(2-((3-吡啶基)甲基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基)-5-(2-吡啶基)噻吩-2-甲酰胺；

D-6:7,8,9,10-四氢-6,10-亚甲基-6H-吡嗪并(2,3-h)(3)苯并氮杂

D-7:3-[1-(2,4-二甲氧基苯基)-甲-(E)-亚基]-3,4,5,6-四氢[2,3']二吡啶基；

D-8:具有下式的N-甲基-1-{5-[3’H-螺[4-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2,2’-呋喃并[2,3-b]吡啶]-5’-基]-2-噻吩基}甲胺：

D-8a:N-甲基-1-{5-[(2R)-3’H-螺[4-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2,2’-呋喃并[2,3-b]吡啶]-5’-基]-2-噻吩基}甲胺；

D-8b:N-甲基-1-{5-[(2S)-3’H-螺[4-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2,2’-呋喃并[2,3-b]吡啶]-5’-基]-2-噻吩基}甲胺；

D-9:(R)-7-氯-N-(奎宁环-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺；

D-10a:5-{5-[(内)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

D-10b:5-{5-[(外)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

D-10c:5-{5-[(内)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

D-10d:5-{5-[(外)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

D-10e:4-{5-[(外)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-2-基}-1H-吲哚；

D-10f:5-{6-[(外)-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氧基]吡啶-3-基}-1H-吲哚；

D-11:(2’R)-螺-[1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-3,2‘(3’H)-呋喃并[2,3-b]吡啶]；

D-12:1,4-二氮杂双环[3.2.2]壬烷-4-甲酸4-溴-苯基酯；和

D-13:5-{6-[1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基氧基]哒嗪-3-基}-1H-吲哚。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的化合物A-1。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是选自由化合物B-1、B-2、B-3和B-4组成的组的化合物；其中，这些化合物各自为游离碱形式或酸加成盐形式。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的化合物B-1。在另一实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是延胡索酸盐形式的化合物B-1。在又一实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是化合物B-1的单延胡索酸盐。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的化合物B-4。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是选自由化合物C-1、C-2、C-3、C-4和C-5组成的组的化合物；其中，这些化合物各自为游离碱形式或酸加成盐形式。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的化合物C-3。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的化合物C-4。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的化合物C-5。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是选自由化合物D-1、D-1a、D-1b、D-1c、D-1d、D-4、D-4a和D-9组成的组的化合物；其中，这些化合物各自为游离碱形式或酸加成盐形式。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂是选自组P3的化合物；组P3是由化合物A-1、B-1、B-2、B-3、B-4、C-1、C-2、C-3、C-4、C-5、D-1、D-1a、D-1b、D-1c、D-1d、D-4、D-4a和D-9组成的组；其中，这些化合物各自为游离碱形式或酸加成盐形式。

式(I)化合物(例如化合物A-1、B-1至B4和C-1至C5)及其制备是已知的，见WO2001/85727、WO2004/022556、WO2005/123732、WO2006/005608、WO2007/045478、WO2007/068476和WO2007/068475，或者可以按照与这些参考文献类似的方式制备。

化合物D-1和D-1a可以按照WO 2008/058096来制备。

化合物D-2、D-2a、D-2b、D-3、D-3a和D-3b可以按照WO2004/029050和/或WO2010/043515来制备。

化合物D-4和D-4a可以按照WO2004/076449和/或WO2009/018505来制备。

化合物D-5、D-5a至D-5e可以按照WO2004/076449和/或WO2010/085724和/或WO2010/056622来制备。

化合物D-6(伐尼克兰(varenicline))描述于O’Donnell等，J Med Chem,2010,53,1222-1237中。

化合物D-7(GTS-21)描述于Haydar等，Current Topics in MedicinalChemistry,2010,10,144-152中。

化合物D-8、D-8a和D-8b描述于WO2007/133155和/或WO2009/066107中。

化合物D-9描述于WO2003/055878中。

化合物D-10a至D-10f描述于WO2007/137030中。

化合物D-11(AZD-0328)描述于Haydar等，Current Topics in MedicinalChemistry,2010,10,144-152中。

化合物D-12(SSR-190771)描述于Horenstein等，Mol Pharmacol,2008,74,1496-1511中。

化合物D-13(ABT-107)可以按照WO2006/065233和/或WO2007/018738来制备。

治疗方法：

本文所用的“疲劳”是指受试对象的以身体和/或精神虚弱为特征的一种长期状态，并且由病症引起。

在一个实施方式中，疲劳在受试对象中存在超过一天。

在一个实施方式中，疲劳在受试对象中存在超过一周。

在一个实施方式中，疲劳在受试对象中存在超过一个月。

引起疲劳的病症在上文中列出，并且可以具体是例如慢性疲劳综合征(CFS)、多发性硬化症(MS)或传染病(例如HIV感染)。

疲劳具有发作期(即，并非终身的)，而且应当存在以下标准中的至少一些：(i)之前的活动水平明显降低；(ii)记忆力或注意力受损；(iii)活动后不适，其中，身体或精神活动带来极端的、长期的力竭和病态；(iv)不能使人复原的睡眠；(v)肌肉疼痛；(vi)肌肉关节痛；(vii)新的严重程度或更严重的头痛；(viii)频繁或重复出现的咽喉痛；或(ix)颈部或腋窝的触痛性淋巴结。

在一个实施方式中，疲劳时存在至少四种上述标准。

在一个实施方式中，疲劳时存在至少五种上述标准。

在一个实施方式中，疲劳时存在至少六种上述标准。

疲劳可以是例如慢性疲劳综合征(CFS)、与MS相关的疲劳或与传染病(例如HIV感染)相关的疲劳。

本文所用的术语“受试对象”是指人类，特别是指患有疲劳(例如CFS或与MS相关的疲劳)的患者。

本文所用的术语“治疗”是指给患有疲劳的受试对象、特别是患者带来益处的任何类型的治疗，包括一种或多种疲劳相关特征的减少或疲劳发作/进展的预防/延迟(例如预防性治疗)。

本文所用的术语“治疗有效量”通常指在施用给受试对象时足以提供治疗益处(例如，足以治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展)的药物量，例如，该量提供疲劳相关特征的改善，例如，其使受试对象的活动水平上升。

治疗可以包括疲劳相关特征的减少，这包括例如(但不限于)：身体和/或精神虚弱程度的降低；疲劳发作次数的减少；受试对象幸福度的改善；进行正常工作的能力的提高；驾车和操作机器的能力的提高；和/或疲劳发作间隔时间的延长。

治疗疲劳的一个方面是所述治疗应当对患者具有功效并且具有最小程度的不良反应，例如，所用的药物应当具有高水平的心脏安全性。

虽然目前没有针对疲劳(例如与MS相关的疲劳或CFS)的获批药物，但有时在处方中会开具某些被批准用于其他病况的药物。实例包括金刚烷胺、莫达非尼和普罗卡利(Prokarin)。

金刚烷胺被批准用于帕金森病及一些病毒感染。关于其在治疗MS相关疲劳中的应用的研究尚未得到明确结论。副作用可包括失眠和鲜活梦境。

莫达非尼用于治疗发作性睡病，这是一种使人在日间睡眠过多的睡眠病症。已有若干项小型研究关注用莫达非尼来治疗MS相关疲劳，但这些研究具有相互矛盾的结果，且未证明服用莫达非尼的益处。副作用可包括失眠和头痛。

普罗卡利是包含咖啡因和组胺的皮肤贴片。所报道的副作用是贴片侧的皮疹。

还使用了抗抑郁药，因为许多具有慢性疲劳综合征的人还同时抑郁。低剂量的一些抗抑郁药可有助于改善睡眠和缓解疼痛，但整体功效有限。

非常适当的是例如能够用于治疗疲劳且不产生上述治疗方案的副作用的药剂。

在预防性治疗的情况下，在例如MS患者中，本发明的α7nAChR激动剂可以用于延迟或防止疲劳发作。

对于上述治疗方法，适合的剂量将根据例如所用的化合物、主体、施用模式和所治疗的病况/症状的特性和严重性而有所变化。然而，通常而言，在动物中令人满意的结果据指示在以下剂量获得：0.1mg/kg体重～100mg/kg体重、优选1mg/kg体重～50mg/kg体重的每日剂量，例如10mg/kg体重的每日剂量。在更大的哺乳动物例如人类中，指示的每日剂量为0.5～500mg、优选1～100mg、最优选2～75mg(例如50mg)本发明的α7nAChR激动剂，其方便地以例如分份剂量每日最多四次施用。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂的每日剂量为1～100mg。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂的每日剂量为2～75mg。

在一个实施方式中，本发明的α7nAChR激动剂的每日剂量为约50mg。

慢性疲劳综合征(CFS)：

最近的研究报道，每100,000个成年人中就有7～3,000个CFS病例(N Afari和DBuchwald,2003,"Chronic fatigue syndrome:a review".Am J Psychiatr,160(2):221–36)。患病率估算值的这种较宽的变化范围可能是由于所用的CFS定义不同、选择患者时所处的环境和用来排除具有可能的其他诊断结果的研究参与者的方法(G Ranjith,2005,"Epidemiology of chronic fatigue syndrome".Occup Med(Lond)55(1):13–29)。疾控中心报告了超过一百万美国人具有CFS且这些病例中约有80％是未诊断的("ChronicFatigue Syndrome Basic Facts",Centers for Disease Control and Prevention.2006年5月9日)。据英国国民保健服务体系(NHS)称，在英国约有250,000人受该病的影响("Chronic fatigue syndrome"；The National Health Service,2009-06-29)。

CFS严重破坏生活质量。CFS通常具有突然发作，并常伴有流感样病，较大比例的病例在数月内开始严重不良应激。CFS还可以由病毒或非病毒病原体感染引起。最常用的诊断标准由美国疾病预防控制中心(CDC)公布。CDC建议满足以下三个标准：

1.新发作(非终身)的持续6个连续月或更长时间的严重疲劳，该发作与用力无关，不能通过休息得到基本缓解，且并非其他医学病况的结果。

2.疲劳引起之前的活动水平的显著降低。

3.持续六个月以上的四种以上下述症状：

-记忆力或注意力受损；

-活动后疲倦，其中，身体或精神活动导致“极端的、长期的力竭和病态”；

-不能使人复原的睡眠；

-肌肉疼痛(肌痛)；

-多关节疼痛(关节痛)；

-新的严重程度或更严重的头痛；

-频繁或重复出现的咽喉痛；或

-触痛性淋巴结(颈部或腋窝)。

CFS可以是持久的或复发性的。

与多发性硬化相关的疲劳：

高达75％的多发性硬化症(MS)患者在其疾病的某些阶段会遭受与多发性硬化症相关的疲劳(Henze等，European Neurology,2006,56,78-105)。

MS相关疲劳可以由睡眠剥夺(例如，因造成夜间觉醒的膀胱功能障碍或夜间肌痉挛而导致)、抑郁症或一般失能(即，患者需要大量的努力来完成日常工作)引起。此外，疲劳可以与MS相关但不能与睡眠剥夺、抑郁症或一般失能直接关联；这种类型的MS相关疲劳还称作“倦怠(lassitude)”。

MS相关疲劳通常具有以下特点：其通常每天出现，可以出现在早晨的较早时候、甚至出现在平静的夜晚睡眠后，倾向于随着一天的进行而变差，倾向于因热和/或潮湿而恶化，容易发作和突然发作，通常比非MS相关的疲劳更严重且更可能干扰日常工作。

药物组合物：

对于本发明的应用，本发明的α7nAChR激动剂可以作为单一活性剂施用或与其他活性剂联合施用，施用可以采用任何常见方式，例如，口服施用，例如以片剂或胶囊形式施用；胃肠外施用，例如以注射液或悬浮液形式施用；或透皮施用，例如以贴片形式施用。

在一个实施方式中，施用方式是口服施用，例如以片剂或胶囊形式施用。

此外，本发明提供一种用于治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展的药物组合物，所述药物组合物包含本发明的α7nAChR激动剂和至少一种药学上可接受的载剂或稀释剂。此类组合物可以以常规方式制造。单位剂型可以包含例如约2.5mg～约25mg的一种或多种本发明的α7nAChR激动剂。

本发明的药物组合物是用于以以下施用方式施用给温血动物(例如人和动物)的组合物：腔内施用，例如鼻部、直肠或口服；胃肠外施用，例如肌肉内或静脉内；或透皮施用(例如通过贴片)；所述组合物仅包含有效剂量的药理学活性成分，或包含该活性成分与显著量的药学上可接受的载剂。活性成分的剂量取决于温血动物的物种、体重、年龄和个体状况、单独的药代动力学数据、待治疗的疾病和施用模式。

所述药物组合物包含约1％～约95％、优选约20％～约90％的活性成分。本发明的药物组合物可以为例如单位剂型，例如安瓿瓶、小瓶、栓剂、糖锭剂、片剂或胶囊形式。

本发明的药物组合物以本身已知的方式制备，例如，通过常规的溶解、冻干、混合、造粒或成型方法来制备。这些方法例示于WO 2005/079802、WO 2003/047581、WO 2004/000316、WO 2005/044265、WO 2005/044266、WO 2005/044267、WO 2006/114262和WO 2007/071358中。

透皮用组合物描述于Remington’s Pharmaceutical Sciences第16版Mack；Sucker,Fuchs and Spieser,Pharmazeutische Technologie,第1版,Springer。

以下是本发明的其他实施方式。

本发明的其他实施方式：

实施方式1-1：本发明的α7nAChR激动剂，用于治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展；其中，所述α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的选自组P1的化合物。

实施方式1-2.如实施方式1-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与多发性硬化症相关的疲劳。

实施方式1-3.如实施方式1-2所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与多发性硬化症相关的疲劳，并且(i)由睡眠剥夺、抑郁症或一般失能引起或者是(ii)倦怠。

实施方式1-4.如实施方式1-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是慢性疲劳综合征。

实施方式1-5.如实施方式1-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与传染病相关的疲劳。

实施方式1-6.如实施方式1-5所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与HIV感染相关的疲劳。

实施方式1-7.如实施方式1-1至实施方式1-6中任一项所述的α7nAChR激动剂，其中，所述激动剂的每日剂量为1mg～100mg。

实施方式2-1：本发明的α7nAChR激动剂，用于治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展；其中，所述α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的选自组P2的化合物。

实施方式2-2.如实施方式2-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与多发性硬化症相关的疲劳。

实施方式2-3.如实施方式2-2所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与多发性硬化症相关的疲劳，并且(i)由睡眠剥夺、抑郁症或一般失能引起或者是(ii)倦怠。

实施方式2-4.如实施方式2-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是慢性疲劳综合征。

实施方式2-5.如实施方式2-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与传染病相关的疲劳。

实施方式2-6.如实施方式2-5所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与HIV感染相关的疲劳。

实施方式2-7.如实施方式2-1至实施方式2-6中任一项所述的α7nAChR激动剂，其中，所述激动剂的每日剂量为1mg～100mg。

实施方式3-1：本发明的α7nAChR激动剂，用于治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展；其中，所述α7nAChR激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的选自组P3的化合物。

实施方式3-2.如实施方式3-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与多发性硬化症相关的疲劳。

实施方式3-3.如实施方式3-2所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与多发性硬化相关症的疲劳，并且(i)由睡眠剥夺、抑郁症或一般失能引起或者是(ii)倦怠。

实施方式3-4.如实施方式3-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是慢性疲劳综合征。

实施方式3-5.如实施方式3-1所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与传染病相关的疲劳。

实施方式3-6.如实施方式3-5所述的α7nAChR激动剂，其中，所述疲劳是与HIV感染相关的疲劳。

实施方式3-7.如实施方式3-1至实施方式3-6中任一项所述的α7nAChR激动剂，其中，所述激动剂的每日剂量为1mg～100mg。

以下非限制性实施例用来说明本公开内容。

1.制剂实施例

1.1硬胶囊

硬明胶胶囊各自包含作为活性成分的0.5mg、5mg或25mg化合物B-1(即(R)-3-(6-(4-甲基苯基)-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷)的单延胡索酸盐，并且可以如下制备：

*在加工过程中除去

制备过程：将(R)-3-(6-(4-甲基苯基)-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷的单延胡索酸盐、一水合乳糖、微晶纤维素、一部分交联羧甲纤维素钠和羟丙甲纤维素在高剪切混合器槽中干燥混合，并添加造粒液体(纯化水)。一旦造粒完成，在流化床干燥器中干燥湿颗粒，并研磨干燥颗粒。使剩余的交联羧甲纤维素钠和胶体二氧化硅通过适合的筛，并添加到干燥的颗粒材料中，并在适合的共混外壳内共混。这通过以下方式来实现：使所述交联羧甲纤维素钠和胶体二氧化硅与一部分研磨的颗粒一起通过适合的筛以筛分至共混外壳中。类似地，将所需量的过筛硬脂酸镁添加到颗粒整体中，随后在相同的共混外壳中混合。使用自动仪器将该最终共混物包封到胶囊中。胶囊填充物与空胶囊壳的重量比为2:1。

1.2：片剂

实施例1.2.1：包膜片剂

包含例如0.5mg的(R)-3-(6-(4-甲基苯基)-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷的单延胡索酸盐的包膜片剂可以如下制备：

预混物的制备：

称取(R)-3-(6-(4-甲基苯基)-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷的单延胡索酸盐(例如约0.7％)和玉米淀粉(例如约13％)，在翻滚式共混机中混合(约100～300转)，通过筛目尺寸为约0.25～1.0mm的筛。在翻滚式共混机中混合(约100～300转)。

最终共混物的制备：

向上述预混物中添加微晶纤维素(例如约25％)、喷雾乳糖(例如约68％)、羧甲纤维素钠XL(例如约2％)和微粉硅胶(例如约0.5％)，并在翻滚式共混机中混合(约100～300转)。使该混合物通过筛目尺寸为约0.5～1.0mm的筛，并再次混合(约100～300转)。

通过筛目尺寸为约0.5～1.0mm的手动筛添加硬脂延胡索酸纳(例如约1.5％)，并在翻滚式共混机中混合(约30～150转)。

压片：

在旋转压片机上，利用对剂量而言特定的工具进行加工(例如约6mm，圆形，曲面)，将上述最终共混物压成约100mg的芯。

包衣：

制备具有基础包衣预混物黑、红、黄和/或白的水悬浮液。在多孔包衣盘中将如上获得的芯包衣，并干燥。

实施例1.2.2：双层包膜片剂

包含例如2.5mg的(R)-3-(6-(4-甲基苯基)-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷的单延胡索酸盐的双层包膜片剂可以如下制备：

最终活性共混物：

称取(R)-3-(6-(4-甲基苯基)-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷的单延胡索酸盐(例如约15.5％)、微晶纤维素(例如约25％)、喷雾乳糖(例如约53％)、羧甲纤维素钠XL(例如约3％)和微粉硅胶(例如约0.5％)，并在翻滚式共混机中混合(约100～300转)。使该混合物通过筛目尺寸为约0.5～1.0mm的筛，并再次混合(约100～300转)。

通过筛目尺寸为约0.5～10mm的手动筛添加硬脂延胡索酸纳(例如约3％)，并在翻滚式共混机中混合(约30～150转)。

最终安慰剂共混物：

称取微晶纤维素(例如约26％)、喷雾乳糖(例如约69％)、羧甲纤维素钠XL(例如约1.9％)和微粉硅胶(例如约0.5％)，并在翻滚式共混机中混合(约100～300转)。使该混合物通过筛目尺寸为约0.5～1.0mm的筛，并再次混合(约100～300转)。

通过筛目尺寸为约0.5～1.0mm的手动筛添加硬脂延胡索酸纳(例如约3％)，并在翻滚式共混机中混合(约30～150转)。

压片：

在旋转压片机上，利用对剂量而言特定的工具进行加工(例如约6mm，圆形，曲面)，将上述最终共混物压成约100mg的双层片剂芯，其具有一个安慰剂层(约77.5mg)和一个活性层(约22.5mg)。

包衣：

实施例1.2.3：包膜片剂

包含例如50mg的(R)-3-(6-(4-甲基苯基)-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷的单延胡索酸盐的包膜片剂可以如下制备：

最终共混物：

压片：

在旋转压片机上，利用对剂量而言特定的工具进行加工(例如约15*5.9mm，圆形，曲面)，将上述最终共混物压成芯。

包衣：

本发明的α7nAChR激动剂在治疗疲劳中的有用性可以在大量标准试验中得到确认，这包括以下示出的试验。

2.临床前试验

2.1.体外试验：化合物A-1和B-1的选择性

基于下文示出的活性/选择性数据，得出的结论是：这些化合物对于α7nAChR是选择性激动剂。

测定：为了评估α7nAChR活性，使用重组表达人α7nAChR的GH3细胞进行了功能测定。在实验前48小时，在黑色96孔板(Costar)上按40000个细胞/孔进行接种并在潮湿的气氛(5％CO₂/95％空气)中于37℃温育。在实验当天，通过轻敲平板除去培养基，并用0.1ml包含0.002mM Fluo-4(Molecular Probes)并存在2.5mM丙磺舒(Sigma)的生长培养基进行置换。在潮湿的气氛(5％CO₂/95％空气)中于37℃温育细胞1小时。轻敲平板以除去过量的Fluo-4，用HEPES缓冲盐溶液(HBSS,以mM计：NaCl 130,KCl 5.4,CaCl₂2,MgSO₄0.8,NaH₂PO₄0.9,葡萄糖25,Hepes 20,pH 7.4；HBS)洗涤两次，并在适当时将0.1ml包含拮抗剂的HBS重新装入平板。在该拮抗剂的存在下温育持续3～5分钟。将平板置于FLIPR装置(荧光测定成像平板读取仪，Molecular Devices,Sunnyvale,CA,USA)的细胞平板台中。在记录基线(激光器：以1W在488nm激发，CCD摄像机开启：0.4秒)后，使用FLIPR 96吸头移液器将激动剂(0.05ml)添加到细胞平板中，同时记录荧光。将钙动力学数据对地棘蛙素(α7nAChR的完全激动剂)所诱导的最大拟合响应标准化。将四参数Hill方程拟合为浓度-响应。从该拟合中推导出Emax(相对于地棘蛙素响应的最大效果，以％计)和EC₅₀(产生最大效果的一半时的浓度，以μM计)的值。

测定描述于D Feuerbach等，Neuropharmacology(2005),48,215-227中。

为了评估所述化合物对其他受体(即α1β1γδ、α4β2、α3β4和5-HT₃)的活性，进行了相似的功能测定。

	化合物B-1	化合物A-1
			α7EC<sub>50</sub>(nM)±SEM,n	39±4.7,18	100±7.9,17
α7E<sub>max</sub>±SEM,n	73±4.1％,18	85±5％,17
			α1β1γδIC<sub>50</sub>(nM)±SEM,n	10715±1376,6	159222±4306,6
α4β2IC<sub>50</sub>(nM)±SEM,n	3981±770,6	25119±4794,5
			α3β4IC<sub>50</sub>(nM<sub>)</sub>±SEM,n	5248±609,5	23097±4123,6
5-HT<sub>3</sub>IC<sub>50</sub>(nM)±SEM,n	19054±3811,6	22324±5869,2

2.2.体内药理学

2.2.1阿立新(Orexin)缺陷模型

a)动物

使用了敲除了阿立新肽基因的雄性转基因小鼠。阿立新缺陷型小鼠表现出具有猝倒事件(据观察为“行为遏止(behavioral arrest)”)和受破坏的睡眠模式(包括片段化睡眠和在其活动期的睡眠)的表型。

b)行为评估

在熄灯期(其为夜行啮齿类动物(例如小鼠)的活动期)的最初数小时期间，用红外摄像机观察并拍摄动物。此时，阿立新缺陷型小鼠显示出最多的“行为遏止”。这些事件的次数可通过呈现新的环境来进一步增加。为此目的，将新的锯末、转动的轮、大理石和隧道布置于测试环境中。对于每小时的记录，“行为遏止”的次数由实验员进行线下计数。行为遏止由相邻框外的总非活性的时期来界定，其持续超过10秒，之前和之后是稳健的运动行为(另见Scammell等，2009,Sleep 32(1):111-116)。一些动物被植入了临时的头骨EEG电极，该电极与发射器相连。通过接收器记录EEG并将其储存在PC上供进一步分析。使用EEG来评估和定量睡眠行为和警觉阶段。

c)规程

由于所观察的行为具有较高的个体间和个体内差异，所以使用了交叉设计。此外，为了避免对测试环境习惯化，在测试环境中每周仅测试一次动物。在剩余数天期间，动物在其自己的笼子内。

对于每个实验阶段，在熄灯前3小时，将3-4只小鼠放入测试环境中。第一实验阶段(第一周)用于获得基线(无治疗)。第二和第三阶段(第二周+第三周)用于进行治疗(载质和化合物，交叉设计，熄灯前5分钟施用)。第四阶段(最后阶段)不进行治疗，用于评估治疗后基线。

d)结果

图1描绘了熄灯前即刻口服施用的3mg/kg的化合物B-4对阿立新缺陷型小鼠的发作性睡眠阵发(行为遏止)次数的影响。化合物B-4使整个4小时观察期内的发作性睡眠阵发次数减少了约25％(成对t检验：t₁₄＝2.48，p＝0.03；图1A+1B)。这种减少在第一小时更加显著(约47％；t₁₄＝2.32，p＝0.04；图1C)。

图2描绘了熄灯前即刻口服施用的10mg/kg的化合物B-1对阿立新缺陷型小鼠的发作性睡眠阵发(行为遏止)次数的影响。化合物B-1使观察期的第一小时期间的发作性睡眠阵发次数显著减少了约66％(p<0.05；方差分析)。

2.2.2EEG数据

a)动物

动物被植入了临时的头骨EEG电极，该电极与发射器相连。在22±1℃的恒温下，按照12:12亮-暗时间表，将动物分组关入笼中(2～4只/笼)。通过接收器记录EEG并将其储存在PC上供进一步分析。使用EEG来评估和定量睡眠行为和警觉阶段。

b)规程

给予动物在记录笼中的1天的适应期，该笼连接有记录线缆。在实验的第1天，在自11A.M.(施用载质后15分钟)开始的22小时期间持续进行EEG记录。在实验的第二天，以相同方式进行EEG记录，区别之处在于在施用药物15分钟后开始。以此方式，每只动物充当其自己的对照。在每个实验中同时记录10只动物。如已描述(Vigouret等，1978Pharmacology16Suppl 1:156-73)的那样，对昼夜循环(REM睡眠、经典睡眠、觉醒状态和被称为“睡意(drowsiness)”的觉醒的非警觉状态)进行自动评估。在本文背景下，“安静觉醒”和“活跃觉醒”分别描述了处在休息和活跃状态的有意识的动物，而“REM”和“NREM”代表睡眠状态。

c)结果

图3描绘了亮灯后6小时(9:00)口服施用给小鼠(n＝10)的30mg/kg化合物B-1对安静觉醒(α频率,9.5-12.5Hz)、活跃觉醒(β频率,12.5-30.5Hz；和γ频率,>30.5Hz)、REM睡眠(θ频率,4.5-9.5Hz)和NREM睡眠(δ频率,<4.5Hz)的影响。所示的评估期为3小时。化合物B-1使NREM睡眠减少并使安静觉醒所花的时间增加。图3的数字评估结果示于表1中。

表1：

2.2.3τ-甲基组胺

组胺(HA)由结节乳头体核神经元遍及整个脑部释放。有证据表明，组胺能神经元在觉醒状态控制中发挥主要作用。在包括脑在内的一些组织中，HA通过组胺-N-甲基转移酶代谢为τ-甲基组胺(tMHA)。

a)规程

在亮灯期的第一小时期间治疗小鼠(n＝8)并在30分钟后处死小鼠。收集脑组织并对其进行LC-MS分析(Croyal等，Analytical Biochemistry,2011,409:28-36)以确定t-MHA水平。

b)结果

图4描绘了口服施用给小鼠的不同剂量的化合物B-1和A-1在施用后30分钟对脑tMHA水平的影响。对于所有测试剂量的化合物B-1，tMHA水平都显著升高。对于化合物A-1，在10mg/kg剂量时观察到显著升高。

3.临床试验：改进试验

可以在例如一种下述研究设计中进行对本发明的α7nAChR激动剂的临床试验。熟练的医师可以观察患者的多个方面的行为和能力。他会意识到，这些研究被认为是指导，并且研究的某些方面可以根据例如环境和周围情况来修改和重新界定。

3.1试验A：正常患者群体

对具有正常对照的患者群体每日给药一次，持续一周或更久，进行试验。该试验设计用来提供改进，即，存在受损功能的可测量的参数增加。在给药期的开始和结束时测试患者，并比较和分析结果。

3.2试验B：缺陷群体

对具有疲劳(例如MS相关疲劳)的患者群体每日给药一次，持续12周或更久，并进行试验。该试验设计用来提供改进，即，存在受损区域的可测量的参数增加。这些试验的实例特别包括认知测试、运动和认知功能的疲劳标度(FMSC)、同步听觉系列加法测验(PASAT)、按直观类比标度(VAS)测量的疲劳变化、疲劳严重程度标度(FSS)、以扩展残疾状况标度(EDSS)测量的神经学状态和生活质量。

在给药期的开始和结束时测试患者，并比较和分析结果。

3.3设计试验时的考量

·在设计试验时，技术人员会意识到防御地板效应和天花板效应的需要。换言之，研究设计应当使特定的区域可以可测量地升高或降低。

·人工破坏某功能的状况是测试该功能的增强的一种方法。此类状况为例如睡眠剥夺和药理学激发。

·所有试验都需要安慰剂对照。

附图说明

图1：行为遏止，化合物B-4

图2：行为遏止，化合物B-1

图3：EEG测量，化合物B-1

图4：τ-甲基组胺测量，化合物B-1和A-1

本发明的又一方面涉及包含本发明的α7nAChR激动剂的药物组合物，所述药物组合物用于治疗、改善、预防疲劳或延迟疲劳进展。

本发明的又一方面涉及包含本发明的α7nAChR激动剂和说明书的试剂盒，所述说明书用于说明在治疗、改善、预防有治疗需要的受试对象的疲劳或延迟有治疗需要的受试对象的疲劳进展时如何使用所述激动剂。

Claims

1.α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂在制备用于治疗、改善、预防疲劳的至少一种症状或延迟疲劳的至少一种症状的进展的药物中的应用，所述疲劳由病症引起；

其中，所述α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂是游离碱形式或酸加成盐形式的(R)-3-(6-对甲苯基-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷，

其中，所述症状选自：身体虚弱、肌肉力竭、中枢肌肉无力、外周肌肉无力、肌肉疼痛、乏力、缺乏动机、缺乏警觉度、觉醒状态减少和注意力下降。

2.如权利要求1所述的应用，其中，所述疲劳是与多发性硬化症相关的疲劳。

3.如权利要求2所述的应用，其中，所述疲劳是与多发性硬化症相关的疲劳，并且(i)由睡眠剥夺、抑郁症或一般失能引起或者是(ii)倦怠。

4.如权利要求1所述的应用，其中，所述疲劳是慢性疲劳综合征。

5.如权利要求1所述的应用，其中，所述疲劳是与传染病相关的疲劳。

6.如权利要求5所述的应用，其中，所述疲劳是与HIV感染相关的疲劳。

7.如权利要求1～6中任一项所述的应用，其中，所述激动剂的每日剂量为1mg～100mg。

8.如权利要求1所述的应用，其中，所述症状选自：缺乏动机、缺乏警觉度、觉醒状态减少和注意力下降。

9.如权利要求8所述的应用，其中，所述症状是觉醒状态减少。

10.一种化合物在制备试剂盒中的应用，所述试剂盒用于治疗、改善、防止有治疗需要的受试对象的疲劳的至少一种症状或延迟有治疗需要的受试对象的疲劳的至少一种症状的进展，

其中，所述化合物是游离碱形式或酸加成盐形式的(R)-3-(6-对甲苯基-吡啶-3-基氧基)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷，

所述试剂盒包含所述化合物和说明书，所述说明书用于说明在治疗、改善、防止有治疗需要的受试对象的疲劳的至少一种症状或延迟有治疗需要的受试对象的疲劳的至少一种症状的进展时如何使用所述化合物，

所述症状选自：身体虚弱、肌肉力竭、中枢肌肉无力、外周肌肉无力、肌肉疼痛、乏力、缺乏动机、缺乏警觉度、觉醒状态减少和注意力下降。

11.如权利要求10所述的应用，其中，所述症状选自：缺乏动机、缺乏警觉度、觉醒状态减少和注意力下降。

12.如权利要求11所述的应用，其中，所述症状是觉醒状态减少。