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CN105158129B - 一种红细胞沉降率标准品及其制备方法 - Google Patents

一种红细胞沉降率标准品及其制备方法 Download PDF

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CN105158129B CN201510530401.2A CN201510530401A CN105158129B CN 105158129 B CN105158129 B CN 105158129B CN 201510530401 A CN201510530401 A CN 201510530401A CN 105158129 B CN105158129 B CN 105158129B
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liquid
cells
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丁焕红
王骕
朱青
王文东
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Zhuhai Langyue Biotechnology Co.,Ltd.
Original Assignee
Wuhan Dongfang Huakang Technology Co Ltd
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Abstract

一种红细胞沉降率标准品及其制备方法，包括放置在魏氏血沉管内的仿人类红细胞、保护剂(A液)和保存剂(B液)，制备方法如下；Step1，取正在屠宰的经检验检疫合格的家畜新鲜血液按6∶1EDTA抗凝，离心沉淀5分钟后移去上清液；Step2，将离心沉淀之后的底层细胞用A液洗涤，然后再离心沉淀，保留下层红细胞；Step3，将保留的下层红细胞加20倍的B液充分混匀1小时，放置24小时后移去上清液；Step4，然后将收集制备好的混合物按1∶1的比例混匀于A液中制成仿人血红细胞颗粒，通过流式细胞分析仪或血球细胞分析仪，计算其准确细胞数；Step5，将1∶1比例混合物准确计数的仿人血红细胞颗粒与枸橼酸钠按不同的比例浓度注入魏氏血沉管内刻度处，室温静置1小时，然后封口储存。

Description

一种红细胞沉降率标准品及其制备方法
技术领域
本发明涉及医学领域，具体涉及一种红细胞沉降率标准品及其制备方法。
背景技术
红细胞沉降率，简称血沉，指在规定条件下，离体抗凝全血中的红细胞自然下沉的速率。红细胞沉降标准品是测定红细胞沉降分析仪、操作技术、测定环境溯源性定量分析的计量物质，作为红细胞沉降率分析的室间室外进行质量控制的评价与确保临床检测结果准确性、精密性唯一依据，还能依据用户需求进行高中低定值。目前只有国际上一些先进的国家才有此类产品出现，制备成本高的同时而且标准品只有一个值
发明内容
为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供了一种，以解决现有等缺陷。
为实现上述目的，本发明之一种红细胞沉降率标准品，其特征在于：所述的红细胞沉降率标准品包括放置在魏氏血沉管内的仿人类红细胞、细胞活性保护剂(A液)和细胞活性保存剂(B液)；所述的细胞活性保护液(A液)的组成配比为，葡萄糖15-25g/L、硼酸2-6g/L、硼酸纳1-2g/L、腺嘌呤3-5g/L、氟化纳1-2g/L；所述的细胞活性保存液(B液)的组成配比为，磷酸氢二钠36g/L、碳酸二氢钠31g/L、戊二醛25％25mg/L、丙二醇3g/L、小牛血清0.9g/L。
该红细胞沉降率标准品的制备方法为：
Step1，取新鲜的屠宰的经检验检疫合格的家畜新鲜血液按体积6∶1EDTA抗凝，离心沉淀5分钟后移去上清液；
Step2，将离心沉淀之后的底层细胞用细胞活性保护剂(A液)洗涤，然后将底层细胞再离心沉淀，反复三次，保留下层红细胞；
Step3，将保留的下层红细胞加20倍的细胞活性保存剂(B液)充分混匀1小时，放置24小时后移去上清液；
Step4，然后将收集制备好的红细胞和细胞活性保存剂(B液)下层混合物按1∶1的比例混匀于细胞活性保护剂(A液)中制成仿人血红细胞颗粒，通过流式细胞分析仪或血球细胞分析仪，计算其准确细胞数；
Step5，将Step4产生的准确计数的仿人血红细胞颗粒与枸橼酸钠按不同的比例浓度注入魏氏血沉管内刻度处，室温静置1小时，然后封口储存。
本发明与现有技术相比，其有益效果是：本发明提出的一种红细胞沉降率标准品利用家禽血液中的红细胞制备成仿人类红细胞，并利用细胞活性保护剂(A液)，保存剂(B液)，模拟人体血液中的渗透压，对仿人血红细胞进行长期的养护、保存。本发明采用检验检疫过的家禽血液，来源经济、绿色环保、无生物安全性危害，完全替代了人血红细胞，稳定性可控，可按临床需求制备成不同数值的红细胞沉降率标准品。
附图说明
图1是本发明的红细胞沉降率标准品位于魏氏法血沉管内的示意图；
附图序号及名称：1、液面，2、红细胞层。
具体实施方式
为详细说明本发明之技术内容、构造特征、所达成目的及功效，以下兹例举实施例并配合附图详予说明。
实施例1
请参阅图1所示，本发明提供一种红细胞沉降率标准品及其制备方法，首先利用葡萄糖15g/L、硼酸6g/L、硼酸纳2g/L、腺嘌呤3g/L、氟化纳1g/L配置成细胞活性保护液(A液)，然后利用磷酸氢二钠36g/L、碳酸二氢钠31g/L、戊二醛25％25mg/L、丙二醇3g/L、小牛血清0.9g/L配置成细胞活性保存液(B液)；然后取正在屠宰的经检验检疫合格的家畜新鲜血液按6∶1EDTA抗凝，离心沉淀5分钟后移去上清液，底层细胞以保护剂洗涤，离心沉淀，反复三次，保留下层红细胞，加20倍的保存剂充分混匀1小时，放置24小时后移去上清液，收集制备好的混合物按1∶1的比例混匀于保护剂(A液)中制成仿人血红细胞；最后将1∶1比例混合物准确计数的仿人血红细胞颗粒，按以下比例浓度注入魏氏血沉管内刻度处，在室温静置1小时，读取血沉管红细胞的下降层与上层透明液体的高度，按下表配比注入1、2、3、4、5血沉管内上下封口，即得到5种规格的标准品。
红细胞颗粒混合物 枸橼酸钠
0.2ml 1.8ml
0.4ml 1.6ml
0.6ml 1.4ml
0.8ml 1.2ml
1.0ml 1.0ml
实施例2
首先利用葡萄糖25g/L、硼酸5g/L、硼酸纳1g/L、腺嘌呤5g/L、氟化纳2g/L配置成细胞活性保护液(A液)然后利用磷酸氢二钠36g/L、碳酸二氢钠31g/L、戊二醛25％25mg/L、丙二醇3g/L、小牛血清0.9g/L配置成细胞活性保存液(B液)；然后取正在屠宰的经检验检疫合格的家畜新鲜血液按6∶1EDTA抗凝，离心沉淀5分钟后移去上清液，底层细胞以保护剂洗涤，离心沉淀，反复三次，保留下层红细胞，加20倍的保存剂充分混匀1小时，放置24小时后移去上清液，收集制备好的混合物按1∶1的比例混匀于保护剂(A液)中制成仿人血红细胞；最后将1∶1比例混合物准确计数的仿人血红细胞颗粒，按以下比例浓度注入魏氏血沉管内刻度处，在室温静置1小时，读取血沉管红细胞的下降层与上层透明液体的高度，按下表配比注入1、2、3、4、5血沉管内上下封口，即得到5种规格的标准品。
红细胞颗粒混合物 枸橼酸钠
0.2ml 1.8ml
0.4ml 1.6ml
0.6ml 1.4ml
0.8ml 1.2ml
1.0ml 1.0ml
综上所述，仅为本发明之较佳实施例，不以此限定本发明的保护范围，凡依本发明专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆为本发明专利涵盖的范围之内。

Claims (2)

1.一种红细胞沉降率标准品，其特征在于：所述的红细胞沉降率标准品包括放置在魏氏血沉管内的仿人类红细胞、细胞活性保护剂(A液)、细胞活性保存剂(B液)和枸橼酸钠；所述的细胞活性保护液(A液)的组成配比为，葡萄糖15-25g/L、硼酸2-6g/L、硼酸纳1-2g/L、腺嘌呤3-5g/L、氟化纳1-2g/L；所述的细胞活性保存液(B液)的组成配比为，磷酸氢二钠36g/L、碳酸二氢钠31g/L、戊二醛25％25mg/L、丙二醇3g/L、小牛血清0.9g/L。
2.一种制备如权利要求1所述红细胞沉降率标准品的方法，其特征在于：
Step1，取新鲜的屠宰的经检验检疫合格的家畜新鲜血液按体积6:1EDTA抗凝，离心沉淀5分钟后移去上清液；
Step2，将离心沉淀之后的底层细胞用细胞活性保护剂(A液)洗涤，然后将底层细胞再离心沉淀，反复三次，保留下层红细胞；
Step3，将保留的下层红细胞加20倍的细胞活性保存剂(B液)充分混匀1小时，放置24小时后移去上清液；
Step4，然后将收集制备好的红细胞和细胞活性保存剂(B液)下层混合物按1:1的比例混匀于细胞活性保护剂(A液)中制成仿人血红细胞颗粒，通过流式细胞分析仪或血球细胞分析仪，计算其准确细胞数；
Step5，将Step4产生的准确计数的仿人血红细胞颗粒与枸橼酸钠按不同的比例浓度注入魏氏血沉管内刻度处，室温静置1小时，然后封口储存。
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