CN105148288A

CN105148288A - 一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法

Info

Publication number: CN105148288A
Application number: CN201510636128.1A
Authority: CN
Inventors: 马新攀
Original assignee: Henan Hang Zhi Patent Services Co Ltd
Current assignee: Henan Hang Zhi Patent Services Co Ltd
Priority date: 2015-09-30
Filing date: 2015-09-30
Publication date: 2015-12-16

Abstract

本发明提供一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，包括如下步骤：1）将环糊精或者改性环糊精溶于水，形成水溶液；2）将预提取的中药材粉碎，置于1）的水溶液中，恒温提取；3）将2）过滤，收集滤液、浓缩即得药物有效成分与环糊精包合物。本发明的方法通过环糊精与中药有效成分的包合作用，提高了药物的水溶性和提取效率，减少了有效中药成分的流失。

Description

一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法

技术领域

本发明属于中药有效成分提取技术领域。具体地涉及一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法。

背景技术

我国拥有丰富的中药资源，但中成药和中药提取物的国际市场占有率还很低，仅占5%左右。目前我国中药提取多采用有机溶剂加热、回流等提取方法，提取效率低、成本高，普遍存在着浪费严重现象，且多数有机溶剂具有毒性、污染环境，存在安全隐患。因此，如何实现药材的高效利用，开发绿色环保、成熟的提取技术无疑是一个亟待解决的问题。

环糊精是淀粉在由芽孢杆菌产生的环糊精葡萄糖基转移酶作用下制得的环聚糖的总称，由多个葡萄糖分子通过α-1,4糖苷键连接而成，呈上狭下宽、两端开口的环筒状立体结构。其环筒腔内非极性，腔外有羟基，具有亲水性。这种外亲水、内疏水的独特结构使其在溶液中可以从无机到有机化合物，从中性到离子型化合物的一系列客体分子中选择大小、形状合适的分子形成主–客体的超分子复合物。在化学分离及分析、药物控制释放、有机合成与催化、食品加工和环境保护等领域应用日益广泛。

中药传统的提取方法(溶媒提取法、水蒸气蒸馏法等)存在溶媒用量大、工艺繁杂、耗费时间长、易造成热敏成分的降解和挥发性成分的损失及提取率低等问题。近年来有许多先进的技术在中药制剂的研发和生产中得到了应用,在符合传统中医药理论的基础上采用这些新技术、新方法可以极大地提高有效成分的收率和纯度,以及中药制剂的有效性、稳定性。β-环糊精包合物已经广泛应用于中药领域中，它可以增加药物的溶解度，提高药物的稳定性，使液体药物粉末化，防止挥发性成分挥发，降低药物的刺激性和毒性。而β-环糊精的改性修饰以及其同系列化合物α-环糊精和γ-环糊精，在中药提取中共同作用提取有效中药成分还不多见。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中采用有机溶剂加热、回流等提取方法，提取效率低、成本高，普遍存在着浪费严重的缺陷，提供了种环糊精辅助选择性提取药物有效成分的方法。

为解决本发明的技术问题，本发明采用的技术方案为：

一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，包括如下步骤：

1)将环糊精或者改性环糊精溶于水，形成环糊精或者改性环糊精水溶液；

2)将预提取的中药材粉碎，置于步骤1）得到的水溶液中，恒温提取；

3）将步骤2）得到的提取物过滤，收集滤液、浓缩，即得中药有效成分与环糊精或者改性环糊精包合物。

优选的，所述环糊精是α-环糊精、β-环糊精和γ-环糊精的一种或一种以上的混合物。

优选的，所述改性环糊精为甲基化环糊精、羟丙基化环糊精、羟乙基化环糊精或OTs-环糊精。

优选的，所述中药材与环糊精水溶液的体积比为1:20～35。

优选的，所述恒温提取的提取温度为30～60℃。

优选的，所述恒温提取的提取时间为30～60分钟。

优选的，所述环糊精或改性环糊精与中药材的重量比1:1~1.2。

优选的，所述恒温提取包括微波提取、超声提取或超微粉化提取。

本发明上述技术方案的提出是基于下述的技术原理：环糊精具有上狭下宽两端开口的环状中空圆桶形立体结构，可以与许多亲脂性药物形成溶解度较大的包合物，提高客体分子在光、热、氧、酸和碱等条件下的稳定性。

与现有技术相比，本发明具有如下主要的优越性：

研究表明环糊精对药物分子具有选择性包合作用，其包合物可以改善药物分子的稳定性和溶解性，提高中药活性成分的提取率，减少药物流失，在中药提取方面具有广泛的应用价值。

将环糊精作为辅助提取剂直接用于中药的提取中，可以实现提取与包合过程一步完成，相比传统的中药提取过程有很多优势。

环糊精辅助提取中药活性成分的方法包括微波提取、超声提取。在中药的传统提取过程中加入环糊精或其衍生物，可以实现提取的高效性和广泛性。

具体实施方式：

下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。

实施例1：

一种羟丙基-β-环糊精提取射干有效成分的方法，包括如下步骤：

1）称取4g羟丙基-β-环糊精溶于100mL水，制成羟丙基-β-环糊精的水溶液，置于圆底烧瓶中；

2）将4g粉碎的射干加入到步骤1）的圆底烧瓶中，30℃超微粉化处理至粒径为0.75μm；

3）将2）过滤，收集滤液、浓缩即得羟丙基β-环糊精射干有效中药成分的包合物，含量为纯水提取工艺的3倍。

实施例2：

γ-环糊精辅助提取野香荚兰有效成分的方法，包括如下步骤：

1）称取5gγ-环糊精溶于175mL的水，制成γ-环糊精的水溶液，置于圆底烧瓶中；

2）将6g粉碎的野香荚兰加入到步骤1）的圆底烧瓶中，60℃条件下，1200瓦超声提取60分钟；

3）将2）过滤，收集滤液、浓缩即得γ-环糊精野香荚兰有效中药成分的包合物，含量为纯水提取工艺的2.5倍。

实施例3：

β-环糊精辅助提取丹参有效成分的方法，包括如下步骤：

1）称取6gβ-环糊精溶于120mL的水，制成β-环糊精的水溶液，置于圆底烧瓶中；

2）将6.6g丹参药材加入到步骤1）的圆底烧瓶中，50℃条件下，30℃条件下,1000瓦微波提取30分钟；

3）将2）过滤，收集滤液、浓缩即得β-环糊精与丹参有效中药成分的包合物，含量为纯水提取工艺的2.5倍。

实施例4：

α-环糊精和羟乙基β-环糊辅助提取螺旋草中有效成分的方法，包括如下步骤：

1）称取3gα-环糊精和4g羟乙基β-环糊溶于210mL的水制成α-环糊精和羟乙基β-环糊的水溶液，置于圆底烧瓶中；

2）加入8.05g粉碎的螺旋草药材于1）的圆底烧瓶中，37℃条件下，1500瓦微波提取35分钟；

3）将2）过滤，收集滤液、浓缩即得α-环糊精和者羟乙基β-环糊与螺旋草有效中药成分的包合物，含量为纯水提取工艺的3.5倍。

实施例5：

羟丙基-β-环糊精与β-环糊精辅助提取冰片有效成分的方法，包括如下步骤：

1）称取4g羟丙基-β-环糊精和4gβ-环糊精，溶于120mL水，制成羟丙基-β-环糊精和β-环糊精的水溶液，置于圆底烧瓶中；

2）将6g粉碎的冰片加入到步骤1）的圆底烧瓶中，25℃超微粉化提取20分钟；

3）将2）过滤，收集滤液、浓缩即得羟丙基-β-环糊精和β-环糊精与冰片有效中药成分的包合物，含量为纯水提取工艺的2倍。

实施例6：

β-环糊精辅助提取苍术挥发油的方法

1）称取60gβ-环糊精溶于2400mL的水，制成β-环糊精的水溶液，置于圆底烧瓶中；

2）将10g粉碎的苍术加入到步骤1）的圆底烧瓶中，40℃条件下，1500瓦，超声提取1小时；

3）将2）过滤，收集滤液、浓缩即得β-环糊精苍术挥发油有效中药成分的包合物，含量为纯水提取工艺的1.5倍。

药效和临床疗效研究

药效研究

（1)以土霉素、冰片、珍珠末联合外敷治疗Ⅲ、Ⅳ期压疮为例研究本发明提取中药有效成分的药效和临床疗效压疮是身体局部组织长期受压，血液循环障碍，局部组织持续缺血、缺氧、营养缺乏，致使皮肤失去正常功能，而引起的组织破损和坏死。Ⅲ、Ⅳ期压疮临床表现：Ⅲ期浅度溃疡期，全层皮肤破坏、可深及皮下组织和深层组织。Ⅳ期坏死溃疡期，为压疮严重期。坏死组织侵入真皮下层和肌肉层，感染可向周边及深部扩展，可深达骨面。

收集60例Ⅲ、Ⅳ期压疮患者，随机分为治疗组和对照组，两组各30例。男女比例均为4:1，年龄平均52岁，20例为Ⅳ期压疮，10例为Ⅲ期压疮。

对照组：土霉素、冰片、珍珠末以2：1：1的比例制成干粉。

实验组：土霉素、冰片、珍珠末以2：1：1的比例制成干粉。

土霉素、冰片、珍珠末，单味药材按照传统煎制工艺，各自提取以后，制成粉剂。实验组与对照组的制备方法不同的是，用本发明实施例5所制备的冰片代替对照组的冰片，其余相同。

实验组：敷药前用生理盐水清伤口，再将2:1:1的土霉素、冰片、珍珠末混合粉剂均匀覆盖到创面，外贴自粘无菌性敷料或包扎无菌纱布即可，前三天每天换药一次，以后根据伤口渗液及肉芽生长情况决定换药频率。

实验组：先将生理盐水清洗伤口，再将2:1:1的土霉素、冰片、珍珠末混合粉剂均匀覆盖到创面，外贴自粘无菌性敷料或包扎无菌纱布即可，前三天每天换药一次，以后根据伤口渗液及肉芽生长情况决定换药频率。实验组与对照组的制备方法不同的是，用本发明实施例3所制备的丹参取代对照组的丹参，其余相同。

疗效判断标准

通过观察病人压疮周围皮肤颜色、创面渗出液量和颜色、压疮基底颜色及伤口愈合情况进行疗效评估，并将10天、20天、30天结果用《压疮(伤口)护理单》进行详细记录。治愈：创面愈合，结痂脱落，皮肤颜色正常;好转：创面大部分愈合或渗出明显减少，肉芽生长良好;无效:用药前后无变化或创面加大加深。统计学方法将两组治疗效果、疗程、进行比较，采用χ²检验P＜0．05为差异有显著意义。

结果与讨论

本研究方案中，第15天两组疗效比较见表1，其中对照组，Ⅲ压疮的全部病例均有疗效，治愈率为70%，好转率30%；Ⅳ期压疮病例75%有好转：治愈率为0。实验组，Ⅲ压疮的全部病例均有疗效，治愈率为80%，好转率20%；Ⅳ期压疮病例100%有好转治愈率为0。

第25天两组疗效比较见表2，其中对照组，Ⅲ压疮的治愈率为100%；Ⅳ期压疮病例60%有好转：治愈率为25%。实验组，Ⅲ压疮的治愈率为100%；Ⅳ期压疮病例70%有好转，治愈率30%。

第35天两组疗效比较见表3，其中对照组，Ⅲ压疮的治愈率为100%；Ⅳ期压疮病例治愈率为85%，15%有好转。实验组，Ⅲ压疮的治愈率为100%；Ⅳ期压疮病例治愈率100%。

表1第15天两组疗效比较

Ⅲ期:χ²=5.72，P＜0.05。

表225天两组疗效比较

Ⅲ期:χ²=6．67，P＜0.01;Ⅳ期:χ2=2.8，P＞0.05。

表335天两组疗效比较

Ⅳ期:χ²=6.71，P＜0.01。

从表1、2、3、可见，对照组土霉素、冰片、珍珠末混合粉治疗Ⅲ、Ⅳ期压疮，尤以Ⅲ期显效较慢，疗程较长，治愈率不高。Ⅳ期压疮因坏死组织侵入较深，疗程更长，但治愈率只有85%。与对照组相比，实验组对Ⅲ期、Ⅳ期压疮无论是疗效还是治疗时间都有明显的提高。

由表1、2、3看出，实验组要好于对照组，即以本发明方法制成的冰片免煎制剂，疗效要好于或者等同于对照组的冰片，采用本发明的方法不仅没有降低药效，而且疗效更好，这也说明根据本发明方法制备的冰片免煎制剂其药效维持较好，活性成分得到了较好的保护和提取。

(2)一种治疗痹症的中药制剂

中药配方：人参、威灵仙、黑蚂蚁、黑翅土白蚁、全蝎、蜈蚣、黄芪、白术、当归、丹参、制川乌、鸡血藤、巴戟天、淫羊藿、牛膝、红花、枸杞子、薏苡仁、β环糊精。

对照组：(1)取人参17g、威灵仙210g，分别粉碎成粗粉，进行低温真空微波处理，真空微波处理的真空度为-0.07～-0.08MPa，时间为20～40分钟，再用气流粉碎成细粉，过筛，灭菌，得到人参和威灵仙的破壁细粉，备用；(2)取黑蚂蚁260g、黑翅土白蚁115g、全蝎10g、蜈蚣8.5g，先粉碎成粗粉，再加浓度为60％v/v的乙醇浸渍22小时，然后用浓度为60％v/v的乙醇回流提取三次，回流提取的温度为80℃，三次回流提取前所加乙醇重量与提取液重量比分别为5:1、4:1、3:1，每次1小时，合并提取液，静置，滤过，得到黑蚂蚁、黑翅土白蚁、全蝎、蜈蚣的的醇提物，备用；(3)取黄芪170g、白术80g、当归135g、丹参42g、制川乌10g、鸡血藤65g、巴戟天34g、淫羊藿42g、牛膝17g、红花42g、枸杞子100g、薏苡仁42g，加水煎煮二次，每次煎煮的时间为1小时，第一次煎煮加水重量与上述组份的重量比例为8:1，第二次煎煮加水重量与上述组份的重量比例为7:1，合并煎液，滤过，滤液浓缩成70℃时的相对密度为1.10的清膏，加入乙醇搅匀，使清膏中的含醇量为60％，静置22小时，取上清液，得到黄芪、白术、当归、丹参、制川乌、鸡血藤、巴戟天、淫羊藿、牛膝、红花、枸杞子、薏苡仁的水提物，备用；(4)将步骤(2)所得醇提物与步骤(3)所得水提物合并，加入30gβ环糊精充分搅拌，低温真空回收乙醇，浓缩成70℃时的相对密度为1.10的稠膏，再加入步骤(1)所得破壁细粉，混匀，制粒，干燥，整粒，装入胶囊，即得中药制剂。

实验组：实验组与对照组的制备方法不同的是，用本发明实施例5所制备的冰片代替对照组的冰片，其余相同。

例1：王某某，男，60岁，患病症状：腰背四肢关节疼痛剧烈，遇冷加重，服用对照组的药物治疗3疗程后，疼痛症状消失临床治愈；服用本发明的药物治疗3疗程后，疼痛症状消失临床治愈，即对照组和实验组药效相同。

例2：陈某某，女，42岁，2011年4月19日初诊。患者全身关节重着疼痛近1年，近日加重，随天气变化也加剧，同时伴有腰困，头晕，耳鸣，手足心发热，舌红苔略薄黄，脉沉细弱。化验；RF(+)，ESR(23mm/h)，服用西药效果不明显，就诊中医。服用对照组的药物治疗2个疗程后，各种症状明显减轻，精神良好，3个疗程后，各种症状消失，临床治疗痊愈。本发明的药物治疗2个疗程后，各种症状消失，精神良好，即服用本发明药物起效速度明显快于对照组。

例3：刘某某，男，48岁，2010年5月2日初诊。患者自觉在下肢外侧疼痛近1月，牵引足跟痛，腰酸腿软，活动不便，疼痛得热则减，畏寒肢冷，舌淡苔薄白，脉沉迟。服用对照组的药物治疗3个疗程后，疼痛缓解，精神状况良好。服用本发明的药物治疗3个疗程后，疼痛基本消失，精神状况良好，即服用实验组药效明显好于对照组。

例4：李某某，男，62岁，退休人员，因久居潮湿，从事井下工作数十年之久，致右下肢膝关节酸痛，关节屈伸不便，遇寒则痛，得热痛减，摄X线片检查，无异常改变，化验血沉增快，抗“O”试验阳性。服用对照组的药物治疗2个疗程，化验血沉及抗“O”试验正常，症状消失，功能恢复正常，6个月后随访无复发。服用本发明的药物治疗2个疗程，化验血沉及抗“O”试验正常，症状消失，功能恢复正常，6个月后随访无复发，即服用对照组和实验组药效相当。

由上述实施例可知，实验组的疗效好于或者等同于对照组药物的疗效，即实验组要好于对照组，即以本发明方法制成的丹参免煎制剂，疗效要好于对照组的丹参，采用本发明的方法不仅没有降低药效，而且疗效更好，这也说明根据本发明方法制备的冰片免煎制剂其药效维持较好，活性成分得到了较好的保护和提取。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）将环糊精或者改性环糊精溶于水，形成环糊精或者改性环糊精水溶液；

2）将预提取的中药材粉碎，置于步骤1）得到的环糊精或者改性环糊精水溶液中，恒温提取；

3)将步骤2）得到的提取物过滤，收集滤液、浓缩，即得中药有效成分与环糊精或者改性环糊精包合物。

2.按照权利要求1所述的一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，其特征在于：所述环糊精是α-环糊精和β-环糊精和γ-环糊精的一种或一种以上的混合物。

3.按照权利要求1所述的一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，其特征在于，所述改性环糊精为甲基化环糊精、羟丙基化环糊精、羟乙基化环糊精或OTs-环糊精。

4.按照权利要求1所述的一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，其特征在于，所述环糊精或者改性环糊精与水的重量比为1:20～35。

5.按照权利要求1所述的一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，其特征在于，所述恒温提取的提取温度为30～60℃。

6.按照权利要求1所述的一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，其特征在于，所述恒温提取的提取时间为30～60分钟。

7.按照权利要求1所述的一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，其特征在于，所述环糊精或改性环糊精与中药材的重量比为1:1~1.2。

8.按照权利要求1所述的一种环糊精以及改性环糊精辅助提取中药有效成分的方法，其特征在于，所述的恒温提取包括微波提取、超声提取或超微粉化提取。