CN105116083A - 消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐含量的测定方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于消毒剂中同时含两种不同有效成分的含量测定技术，具体涉及一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐的含量的测定方法。该测定方法是用高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚，乙二醇苯醚在254μm处有紫外吸收，可用反相高效液相色谱(HPLC)分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量，按公式计算即可得出消毒剂中乙二醇苯醚的质量分数；季铵盐含量测定是根据季铵盐可与溴酚蓝等酸性染料形成有色盐，在碱性水溶液中，该盐很容易被含氯有机溶剂提取，由于此盐的结合不及四苯硼钠与季铵盐的结合稳定，所以可利用此盐的性质作为以四苯硼钠滴定季铵盐的指示剂的原理，记录四苯硼钠滴定量按公式计算即可得出消毒剂中季铵盐含量。

Description

消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐含量的测定方法

技术领域

本发明属于消毒剂中同时含两种不同有效成分的含量测定技术，具体涉及一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐的含量的测定方法。

背景技术

乙二醇苯醚，医学上常用作杀菌剂、防腐剂、杀螨剂。农药上用作杀虫剂组份，苯氧乙基胺衍生物的制备以及其它农药化学品中间体的制备如苯氧基醚等。化学名称为2-苯氧基乙醇，是一种无色澄清油状液体。其水溶液可杀灭革兰氏阳性与阴性的细菌繁殖体，但对结核杆菌、某些真菌以及细菌芽孢仅有抑菌作用。故乙二醇苯醚需与其它有效杀菌成分一起组合成复方消毒剂，协同增效。如与季铵盐复配，可称为复合季铵盐类消毒剂，具有广谱杀菌作用，而且无毒性、无刺激性、无黄染、可替代含醇类和碘伏类消毒剂，用于手术部位皮肤消毒，注射穿刺部位、外科术前洗手消毒，外科换药消毒等。

以乙二醇苯醚和季铵盐复合而成的消毒液，目前国内尚无检测方法，给生产过程中的含量测定和质量保证带来困难，只可采用季铵盐的检测方法，评估出一种有效成分来表示复合季铵盐含量，对推广造成极大困难。

发明内容

本发明的目的在于提供一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐含量的测定方法，用于消毒液生产企业的中控分析。

附图说明

下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。

图1是乙二醇苯醚标准溶液(t＝3.47)色谱图。

具体实施方式

实现本发明目的技术方案是：一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐含量的测定方法，包括如下操作步骤：

下面举例说明：

一、高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚①

1.范围

本方法规定了测定消毒剂中乙二醇苯醚的高效液相色谱法。

本方法适用于消毒剂中乙二醇苯醚的含量测定。

2.方法提要

乙二醇苯醚在254μm处有紫外吸收，可用反相高效液相色谱(HPLC)分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。

3.试剂

3.1.乙二醇苯醚(纯度98％)，对照品，购自Sigma-Aldrich公司(CAS号：122-99-6)。

3.2.甲醇，色谱纯，购自J.T.Baker。

3.3.标准储备溶液(ρ＝1.00g/L)：准确称取乙二醇苯醚0.10g(精确到0.1mg)于小烧杯中，用少许甲醇溶解，将溶液移入100ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，摇匀，配成质量浓度为1.00g/L的混合标准溶液。

4.仪器和设备

4.1.高效液相色谱仪(安捷伦公司Agilent1100型)，具二极管阵列检测器，配色谱工作站。

4.2.超声波清洗器(B9500-DTH型)。

4.3.高速离心机。

5.分析步骤

5.1.样品预处理

称取适量样品于10mL具塞刻度管中，加入甲醇至刻度，振摇，超声提取20～30min。经0.45μm滤膜过滤，必要时可高速离心。滤液作为待测样液备用。

5.2.色谱参考条件

色谱柱：C₁₈柱，250mm×4.6mmI.D.，5μm。

流动相：甲醇+水＝80+20。

流速：1.0mL/min。

检测器：二极管阵列检测器，检测波长为254μm。

柱温：25℃。

5.3.校准曲线的制备

移取乙二醇苯醚标准储备溶液0.00mL、0.20mL、1.00mL、2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL于10mL具塞刻度管中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。此时溶液中乙二醇苯醚的浓度分别为0、20.0、100、200、400、600、800和1000mg/L。在设定色谱条件下，分别取5μL进行HPLC分析。根据标准系列质量浓度和峰面积，绘制校准曲线。

5.4.样品测定②

在设定色谱条件下，进5μL待测样液进行HPLC分析。若样品中待测组分含量过高，应用甲醇稀释后测定。色谱图检出的物质，经与该物质的标准紫外光谱图比较确证后，根据峰面积，从校准曲线上查得相应组分的质量浓度。

6.计算

式中：w(乙二醇苯醚)——消毒剂中乙二醇苯醚的质量分数，％；

m——样品取样量，g；

ρ——从校准曲线上查得的待测样液中乙二醇苯醚的质量浓度，mg/L；

V——样品定容体积，mL。

7.色谱图(见说明书附图图1乙二醇苯醚标准溶液(t＝3.47)色谱图)

二、高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚方法特性指标③

1.回归方程、线性范围及检出限

在设定色谱条件下，测定不同浓度的标准系列，其浓度与峰面积相关。检出限以噪音的3倍计算。乙二醇苯醚的回归方程、相关系数、线性范围及方法检出限见表1。

表1乙二醇苯醚的回归方程、相关系数、线性范围及方法检出限

2.精密度

取质量浓度分别为100、400和800mg/L的乙二醇苯醚标准溶液，在设定色谱条件下，重复测定6次，计算乙二醇苯醚质量浓度测定值的均值、标准偏差及相对标准偏差，结果见表2。

表2乙二醇苯醚的精密度实验结果(n＝6)

3.准确度

向含有乙二醇苯醚的消毒剂样品中分别加入2mL和4mL乙二醇苯醚标准储备溶液，按样品前处理方式进行处理，在设定色谱条件下，进行加标回收实验。计算样品的加标回收率。结果见表3。

表3乙二醇苯醚的准确度实验结果(n＝6)

三、消毒剂中乙二醇苯醚含量测定比对实验

1.人员比对实验

不同实验人员均按照《高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚》方法规定的试剂、仪器、色谱条件、样品前处理及样品测定的要求，对同一消毒剂样品中的乙二醇苯醚含量进行测定。不同人员比对实验结果见表1。

表1高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚人员比对实验

2.方法比对实验

实验人员分别采用《高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚》和《气相色谱法测定消毒剂中的乙二醇苯醚》方法规定的试剂、仪器、色谱条件、样品前处理及样品测定的要求，对同一消毒剂样品中的乙二醇苯醚含量进行测定。不同方法比对实验结果见表2。

表2高效液相色谱法和气相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚方法比对实验

四、消毒剂中季铵盐(以苯扎氯铵计)含量测定及比对实验④

A季铵盐含量的测定

1.方法原理

季铵盐可与溴酚蓝等酸性染料形成有色盐，在碱性水溶液中，该有色盐很容易被含氯有机溶剂(如氯仿)提取。由于此盐的的结合不及四苯硼钠与季铵盐的结合稳定，所以可利用此盐的性质作为以四苯硼钠滴定季铵盐的指示剂。滴定开始时，季铵盐与溴酚蓝结合，生成蓝色络合物，溶入氯仿层显蓝色。滴定至近终点时，由于四苯硼钠和溴酚蓝结合，并溶入氯仿层显蓝色。滴定接近终点时，溴酚蓝指示剂逐渐从蓝色络合物中被四苯硼钠置换而游离出来，因其不溶于氯仿而转入水层，在剧烈振摇下，氯仿层的蓝色消褪而水层呈淡紫色，即为终点。

2.试剂配制

氢氧化钠试液(4.3g氢氧化钠加蒸馏水溶解成100mL溶液)、溴酚蓝指示液(0.1g溴酚蓝加0.05mol/L氢氧化钠溶液3mL，溶解，再加蒸馏水至200mL)。备氯仿。配制并标定0.02mol/L四苯硼钠滴定液。

3.样品测定

精密称取样品适量(液体样品取适量体积)，使其相当于季铵盐约0.25g，置250mL碘量瓶中。加蒸馏水50mL与氢氧化钠试液1mL，摇匀。再加溴酚蓝指示液0.4mL与氯仿10mL。用四苯硼钠滴定液(装入50mL滴定管中)滴定，边滴边摇匀，接近终点时尚须强力振摇。待氯仿层的蓝色消失，记录四苯硼钠滴定液用量。重复测2次，取2次的平均值进行以下计算。同时做空白实验。

4.计算公式

若消毒剂中有效成分为苯扎氯铵，因1mol/L四苯硼钠滴定液1mL相当于0.3540g苯扎氯铵，按下式计算其含量：

固体样品 $\mathrm{\ω}\left(\%\right)=\frac{c\×V_{st}\×0.3540}{m}\×100\%---\left(1\right)$

液体样品 $\mathrm{\ρ}(g/L)=\frac{c\×V_{st}\×0.3540}{V}\×1000---\left(2\right)$

式中：ω、ρ为苯扎氯铵含量，％或g/L；c为四苯硼钠滴定液的浓度，mol/L；Vst为四苯硼钠滴定液样品与空白体积差，mL；m为碘量瓶中苯扎氯铵质量，g；V为碘量瓶中含苯扎氯铵原液体积，mL。

5.注意事项

本方法适用于测定消毒剂中季铵盐有效成分的总量。若消毒剂中有效成分为苯扎溴铵，则计算公式中，系数应为0.3984。消毒剂中季铵盐有效成分不同，则系数不同。对于复方消毒剂，如含多种季铵盐成分，采用本方法只能测定季铵盐有效成分的总量，不能分别测定每种季铵盐成分，表示时可以其中一种季铵盐成分计。

B比对实验

实验人员依据《消毒技术规范》(2002年版)的要求分别采用滴定法和自动滴定仪方法对同一消毒剂样品中的季铵盐(以苯扎氯铵计)含量进行测定。比对实验结果见表1。

表1滴定法和自动滴定仪方法测定消毒剂中季铵盐(以苯扎氯铵计)比对实验

备注：自动滴定仪，瑞士万通公司702型。

Claims (5)

1.一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐的含量测定方法，其特征在于：它包括高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚(①)；样品测定(②)；高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚方法特性指标(③)；消毒剂中季铵盐(以苯扎氯铵计)含量测定及比对实验(④)。

2.根据权利要求1所述一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐的含量测定方法，其特征在于：高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚(①)；乙二醇苯醚在254μm处有紫外吸收，可用反相高效液相色谱(HPLC)分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。

3.根据权利要求1所述一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐的含量测定方法，其特征在于：样品测定(②)，在设定色谱条件下，进5μL待测样液进行HPLC分析，若样品中待测组分含量过高，应用甲醇稀释后测定，色谱图检出的物质，经与该物质的标准紫外光谱图比较确证后，根据峰面积，从校准曲线上查得相应组分的质量浓度。

4.根据权利要求1所述一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐的含量测定方法，其特征在于：高效液相色谱法测定消毒剂中乙二醇苯醚方法特性指标(③)，在设定色谱条件下，测定不同浓度的标准系列，其浓度与峰面积相关，检出限以噪音的3倍计算，乙二醇苯醚的回归方程、相关系数、线性范围及方法检出限。

5.根据权利要求1所述一种消毒剂中同时含乙二醇苯醚和季铵盐的含量测定方法，其特征在于：消毒剂中季铵盐(以苯扎氯铵计)含量测定及比对实验(④)，季铵盐可与溴酚蓝等酸性染料形成有色盐，在碱性水溶液中，该有色盐很容易被含氯有机溶剂(如氯仿)提取。由于此盐的的结合不及四苯硼钠与季铵盐的结合稳定，所以可利用此盐的性质作为以四苯硼钠滴定季铵盐的指示剂。滴定开始时，季铵盐与溴酚蓝结合，生成蓝色络合物，溶入氯仿层显蓝色，区别于碘化钾法和硝酸银法。