CN105079041B - 雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，主要用来降低子痫前期病患个体血压和调节子痫前期病患个体内部氧化应激指标，本发明中雨生红球藻能使子痫前期模型中的孕鼠在产仔前血压明显降低，尿蛋白减少，血液中的MDA和内皮素下降而SOD升高，同时雨生红球藻明显下调胎盘组织中的NF‑κB，增加了HO‑1的表达，使得胎盘组织中的滋养细胞数减少、纤维蛋白沉积减少、基底膜增厚现象改善，具有明显的治疗子痫前期疾病的作用。与现有技术相比，本发明提供了雨生红球藻在制备预防或治疗子痫前期产品中的应用，拓宽了雨生红球藻的应用范围，也为子痫前期的预防和治疗提供了新的途径。
Description
技术领域
本发明涉及雨生红球藻在疾病治疗领域的新应用，尤其涉及雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用。
背景技术
子痫前期是一种妊娠期特有的产科严重疾病，主要表现为高血压、蛋白尿，是导致孕产妇和围产儿病死率升高的主要原因之一，近年来对其发病机制的研究认为，妊娠期孕妇体内异常的氧化应激是诱发子痫前期的危险因素。氧化应激的毒性效应对孕妇的血管内皮细胞、细胞膜和血管内壁等造成严重损伤，使血压异常升高，此外子痫前期的血管内过度炎症也导致内皮细胞损伤。目前子痫前期的临床治疗方法以硫酸镁解痉治疗，施用降压药如硝酸甘油、地平类药物等为主，达到直接降压目的，或利用丹参川芎嗪注射液等活血、低分子肝素抗凝血等，但这些手段并不能从根本上改变并修正引发妊娠高血压的因素。因此，基于氧化应激的病因分析，抗氧化结合降压方法不失为一种针对病因的缓解和治疗策略。
雨生红球藻是一种淡水单细胞绿藻，属绿藻门、团藻目、红球藻科，在特定条件下可积累虾青素，且虾青素含量为1.5％～3.0％，被看作是天然虾青素的的“浓缩品”和最好的生物来源，而虾青素最典型的特征是抗氧化性，其抗氧化活性极强，是单线性态氧的强大淬灭剂，所以雨生红球藻中的虾青素已被认为是最安全的抗氧化剂。雨生红球藻在疾病防治方面的应用已多见报道，如申请号为CN201010245760.0(公开号为CN101890056A)的中国发明专利《一种增强免疫功能的药物组合物》中公开了一种增强免疫功能的药物组合物，该药物中含有0.1-0.5重量份的雨生红球藻，药效学试验表明，该药物组合物具有很好的提高免疫力的作用。其他的还可以参考申请号为CN2011110285768.4(公开号为CN102356874A)的中国发明专利《一种抗氧化保健食品组合物及其制备方法和应用》、申请号为CN201010273968.3(公开号为CN101933953A)的中国发明专利《一种原料为发酵虫草菌粉、雨生红球藻和蜂蜜药物组合物》等。目前，雨生红球藻粉产品已在多个国家获得批准：美国获得了FDA的批准，允许作为新的膳食成分进入保健品市场；日本也被批准将其应用于食品；2008年，欧盟FSA也批准雨生红球藻虾青素为新资源食品；2010年，中国卫生部正式批准雨生红球藻为新资源食品等。但是，目前关于雨生红藻在防治子痫前期中的应用还未见相关报道，鉴于子痫前期治疗的方法匮乏、不治本，且治疗需谨慎等问题，利用雨生红球藻将为子痫前期的预防和治疗提供新的解决办法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术而提供一种雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用。
本发明涉及雨生红球藻在制备子痫前期防治产品中的应用。
氧化应激是子痫前期重要的致病因素，在氧化应激状态下，孕妇体内的代谢水平发生显著的变化，促使超氧阴离子自由基及单线态氧等ROS(Reactive Oxygen Species,活性氧簇)过量产生，使得孕妇血浆中的MDA(丙二醛)增加，而SOD(Superoxide Dismutase，超氧化物歧化酶)、HO-1(Heme Oxygenase，血红素加氧酶的一种同工酶)减少，MDA会引起蛋白质、核酸等生命大分子的交联聚合，具有细胞毒性，而SOD是自由基清除剂，保护生物体免受自由基侵害，HO-1是一种广泛存在的抗氧化防御酶。同时孕妇体内的氧化应激又会显著抑制NOS(Nitric Oxide Synthase,NO合成酶)活性，引起内皮素增高，从而导致孕妇血压的异常升高，而且子痫前期时，孕妇会产生大量的炎症反应，导致炎症相关的细胞因子的表达增加，如NF-κB等。因此，本发明中雨生红球藻在制备子痫前期防治产品中的应用主要为降低子痫前期病患个体血压的产品或/及调节子痫前期病患个体内部氧化应激指标的产品，且该氧化应激指标主要包括MDA和内皮素含量、SOD和NOS酶活性。
上述的子痫前期防治产品可有多种实现形式，如药物、食品或保健品等，其中药物的具体实现形态可为粉剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂等。
本发明中，所述的产品中所含雨生红球藻的用量为预防或治疗有效量以上，具体可根据情况选择，一般雨生红球藻在上述产品中的实际给药量为1.0-2.2g/千克体重/天(1.0-2.2g/d.kg.bw)。
与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明中使用雨生红球藻使得子痫前期模型中的孕鼠在产仔前血压明显降低，尿蛋白减少，血液中的MDA和内皮素下降而SOD升高，同时雨生红球藻明显下调胎盘组织中的NF-κB，增加了HO-1的表达，使得胎盘组织中的滋养细胞数减少、纤维蛋白沉积减少、基底膜增厚现象改善，具有明显的治疗子痫前期疾病的作用，且与现有的治疗方法相比，雨生红球藻无毒、无副作用，使用安全性高。总之，本发明提供了雨生红球藻在制备预防或治疗子痫前期产品中的应用，拓宽了雨生红球藻的应用范围，也为子痫前期的预防和治疗提供了新的途径。
附图说明
图1为雨生红球藻对子痫前期大鼠胎盘组织变化的影响，其中A1、A2、A3为正常建模组；B1、B2、B3为空白组；C1、C2、C3为雨生红球藻组；
图2为雨生红球藻对子痫前期大鼠胎盘中的HO-1和NF-κB的表达变化的影响。A为HO-1，B为NF-κB；1为正常建模组，2为空白组，3为雨生红球藻组。
具体实施方式
以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1：子痫前期模型的建立
正常的成年SD大鼠，雌性250-260g，雄性280-300g，由浙江省医学科学院提供(浙江省杭州市)，1:3合笼，确定怀孕后，将怀孕SD大鼠随机分为三组：正常建模组、空白组和雨生红球藻组(每组18只)。合笼后第六天(怀孕第五天)，雨生红球藻组动物灌胃1.0g/d.kg.bw、1.6g/d.kg.bw、2.2g/d.kg.bw雨生红球藻粉(宁波红龙生物科技有限公司)，正常建模组、空白组每天灌胃等量的生理盐水，直至结束(合笼后第21天)。自合笼后第10天起至结束(合笼后第21天)，空白组和雨生红球藻组每天皮下注射L-亚硝酸左旋精氨酸甲酯(L-NAME)125mg/d·kg·bw，正常建模组注射等量的生理盐水。
实施例2：组织病理学检查
合笼后第21天时，测各组动物的血压、尿蛋白，随后将各组动物股动脉放血处死，收集各组大鼠腹主动脉血液，分离血清，检测血清中的过氧化物(MDA)、内皮素含量，超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)酶活性。同时取胎盘组织，进行组织病理学检查，分析纤维蛋白的沉积面积，免疫组化检测胎盘组织中NF-κB、HO-1蛋白表达。
如表1所示，与正常建模组相比，空白组中孕鼠经L-NAME处理后尿蛋白升高20.12％(P<0.05)，而收缩压升高28.8％(P<0.05)，舒张压升高23.15％，说明建模成功。灌胃雨生红球藻后，尿蛋白和血压都出现下降，其中在灌胃了1.6g/d.kg.bw雨生红球藻后，尿蛋白比空白组下降11.82％，收缩压下降25.5％(P<0.05)，舒张压降至低于正常建模组(表1)。并且，这一降压现象呈现浓度依赖，说明雨生红球藻能改善子痫前期孕鼠的高血压和蛋白尿两个典型特征。
表1：雨生红球藻对SD大鼠血压和尿蛋白含量的影响
注：雨生红球藻组与空白组比，*P<0.05；**P<0.01；空白组与正常建模组比，#P<0.05。
如表2所述，血清中的各指标结果中，空白组中，孕鼠经L-NAME处理后，其中MDA和内皮素出现显著增高，如MDA增高至6.45U/mL，显著高于正常建模组的3.87U/mL(P<0.01)；而内皮素升高至19.5pg/mL，约为正常建模组的3倍(P<0.05)。而SOD和NOS酶活性都出现相应的下降，其中NOS酶显著下降，这些都是子痫前期的典型变化。雨生红球藻组中，经雨生红球藻处理后，各指标都有所改善，MDA和内皮素较空白组均出现降低，NOS和SOD酶活也出现回升，说明雨生红球藻通过调节NO的合成体系和内皮素变化，使血压得到恢复，同时氧化应激得到缓解，抗氧化酶活增加。
表2：雨生红球藻对大鼠血清中NO、NOS、MDA、SOD活性和内皮素含量的影响
注：雨生红球藻组与空白组比，*P<0.05；**P<0.01；空白组与正常建模组比，#P<0.05。
如图1所示，胎盘病理学检测显示，在空白组中胎盘组织的底蜕膜中可见数个螺旋动脉(见图1中B2)，胎组盘绒毛中滋养细胞明显增生，滋养细胞基膜不规则增厚，绒毛间质纤维蛋白沉淀面积明显增加，发生纤维蛋白样坏死(见图1中B3)，绒毛血管增多，部分绒毛血管灌注少，血管未扩张，血管少的绒毛合体细胞节增多。雨生红球藻组中偶见螺旋动脉和部分合体结节(见图1中C2)。与空白组进行比较，纤维蛋白样坏死症状明显改善，可见服用雨生红球藻粉后病理改变出现明显改变。
如图2所示，免疫组化结果显示，正常建模组HO-1在胎盘组织细胞胞浆中的表达明显，但空白组明显减少，而雨生红球藻组的表达量高于正常建模组。核因子-κB(nuclearfactor kappa B,NF-κB)主要存在于胎盘组织的细胞滋养细胞，本实施例中，NF-κB在空白组细胞滋养细胞中可见大量棕黄色颗粒的阳性表达，而雨生红球藻组内仅可见少量阳性表达。
Claims (5)
1.一种雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征在于：所述产品为降低子痫前期病患个体血压的产品。
2.如权利要求1所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征在于：所述产品为调节子痫前期病患个体内部氧化应激指标的产品。
3.如权利要求2所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征在于：所述氧化应激指标包括MDA和内皮素含量、SOD和NOS酶活性。
4.如权利要求2所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征在于：所述产品为药物、食品或保健品。
5.如权利要求4所述的雨生红球藻在制备子痫前期预防或治疗产品中的应用，其特征在于：所述雨生红球藻在所述产品中的实际给药量为1.0g-2.2g/千克体重/天。
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