CN104719671A - 一种预防仔猪腹泻的复方精油及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种预防仔猪腹泻的复方精油，所述复方精油由以下质量份数的各组分制备而成：肉桂油0.25-2.5份、丁香油0.1-1份、百里香酚0.25-2.5份、活化凹凸棒石100份。本发明还提供其制备方法和应用。本发明的复合精油能显著降低断奶仔猪腹泻率,促进采食量,提高日增重,改善肠道菌群状态，同时对早期断奶仔猪腹泻预防与促进生长的效果更好。本发明的复合精油有效降低了肠道大肠杆菌的数量,改善了肠道菌群状态,这可能是因为凹凸棒石通过对消化道中病毒、病原菌、毒素的吸附,抑制了肠道有害菌的生长,促进了有益菌的生长,恢复、维持了肠道菌群的生态平衡。

Description

一种预防仔猪腹泻的复方精油及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于饲料添加剂技术领域，具体涉及一种预防仔猪腹泻的复方精油及其制备方法和应用。

背景技术

在现代化的养猪生产中，仔猪饲养已成为最关键的环节之一。仔猪实行早期断奶是提高母猪生产力,提高养猪生产经济效益的有效途径,但是早期断奶仔猪极易发生腹泻,加上各种应激，导致了仔猪的高发病率及病死率，给养猪生产造成巨大损失。大量的研究表明,断奶仔猪腹泻发生的原因有病原性和非病原性两个方面,非病原性原因主要包括日粮抗原过敏、断奶应激以及仔猪生理发育的不建全,其中,日粮抗原过敏导致肠道粘膜损伤是最根本、最直接的原因,病原微生物的感染与继发感染加剧了早期断奶仔猪腹泻的发病率和腹泻程度，在腹泻发生后，非病原性因素与病原性因素往往同时作用于仔猪,使腹泻变得严重而复杂，由于早期断奶仔猪腹泻对养猪生产的严重危害,使得对它的预防显得格外重要。目前,用于断奶仔猪的添加剂有氧化锌、抗生素、酶制剂、酸化剂以及寡糖、谷氨酞胺等,在生产实践中对抗生素和高锌的使用较为普遍，然而,在带来巨大成效的同时产生了对抗生素产品的耐药性和药物残留等问题；而且，在食品卫生安全日益受到关注，环境污染的防治日益受到重视，安全、绿色、环保畜产品日益受到推崇的社会环境下,抗生素、高锌等对畜产品品质或环境有不利影响的添加剂的普遍使用无疑是消费者心中的顾虑,这无形中会有损畜牧产业的健康发展。因此，寻找和研究优质、安全和高效的抗生素替代品是当前饲料添加剂行业的一个发展趋势。近年来许多学者都致力于新型抗菌杀菌的饲料添加剂研究，尤其是安全的天然植物提取物饲料添加剂。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种纯天然无刺激的预防仔猪腹泻的复方精油，为此，本发明还提供其制备方法和应用。

本发明提供一种预防仔猪腹泻的复方精油，所述复方精油由以下质量份数的各组分制备而成：肉桂油0.25-2.5份、丁香油0.1-1份、百里香酚0.25-2.5份、活化凹凸棒石100份。

肉桂油是樟树科植物肉桂的干皮及树皮经水蒸气蒸馏得到的挥发油，肉桂油的主要成分为肉桂醛，对细菌、酵母和霉菌的生长有较强的抑制作用。

丁香油是名贵药物,是由桃金娘科植物丁香Eugeniacaryophyllata Thumb.的干燥花蕾经水蒸汽蒸馏所得的挥发油。具有暖胃、温肾之功效,治胃寒痛胀、呃逆、吐泻、痹痛、疝痛、牙痛、口臭等。丁香油中主要含有丁香酚（Egenol）,其含量超过80%。

百里香酚（5-甲基-2-异丙基酚），又名麝香草酚，存在于多种植物的精油中。百里香酚多用于制作香料、防腐剂、医用杀菌剂和驱蛔虫剂，近年来研究表明百里香酚具有杀螨抑菌等多种生物活性。

以上三种精油，被欧盟批准为植保产品，具有抗菌和抗氧化的功效，可用作香精和防腐剂等。由于以上精油化学成分不稳定,也不溶于水,因此在制剂过程中容易被破坏或丢失。采用环糊精包封技术,将其制成精油包合物,可提高精油的稳定性和可用性，虽然提高精油制剂的质量，但是生产实践中的广泛使用，稳定性不够，效果也不理想。本发明的复方精油是通过多年生产实际总结，并进行科学组方，通过广泛的市场应用所确定。通过活性凹凸棒石进行吸附，获得稳定的饲料添加植物活性添加剂。对2 种猪源致病菌的MIC较小，并与单方精油的抗菌效果进行比较，其抗菌效果优于单方精油，为一种优良的天然植物饲料添加剂。

凹凸棒石为一种晶质水合镁铝硅酸盐矿物，具有独特的层链状结构特征，在其结构中存在晶格置换，帮晶体中含有不定量的Na⁺、Ca²⁺、Fe³⁺、Al³⁺，晶体呈针状，纤维状或纤维集合状。凹凸棒石具有独特的分散、耐高温、抗盐碱等良好的胶体性质和较高的吸附能力,其能够吸附精油，制备新的植物饲料添加剂，具有无污染、无残留的特点, 凹凸棒石对仔猪胃肠道疾病的预防与治疗作用未见相关报道,本发明应用凹凸棒石吸附精油制备复方精油用于制备抗仔猪腹泻药物和饲料添加剂，目前已经在畜牧生产中广泛使用，并取得良好的效果,为早期断奶仔猪腹泻的预防及抗生素、高锌的完全替代品或部分替代品的研究提供一种有效产品,也为对凹凸棒石进行深入研究及其复合制剂的开发提供更多理论依据。

优选地，所述复方精油由以下质量份数的各组分制备而成：肉桂油1.25份、丁香油0.8份、百里香酚1.25份、活化凹凸棒石100份。

本发明还提供上述复方精油的制备方法，是将配方量的肉桂油、丁香油、百里香酚加入乙醇，在室温下加入配方量的活化凹凸棒石中，振荡，抽滤干燥即得。

本发明的第三个目的是提供上述复方精油在制备预防仔猪腹泻的药物中的应用。

本发明的第四个目的是提供上述复方精油在制备抑制大肠杆菌和/或沙门菌药物中的应用。

本发明的第五个目的是提供上述复方精油在制备预防仔猪腹泻的饲料添加剂中的应用。

本发明的第六个目的是提供一种预防仔猪腹泻的饲料添加剂，所述饲料添加剂中含有权利要求1或2所述的复方精油。

本发明的第七个目的是提供一种预防仔猪腹泻的饲料，所述饲料由96-98wt%基础日粮和2-4wt%权利要求1或2所述的复方精油组成。

当基础日粮和复方精油的质量比为97:3时，预防仔猪腹泻的效果最佳。

本发明的第八个目的是提供上述复合精油中有效成分的检测方法，其特征在于：是用高效液相色谱法进行检测，检测条件为：用甲醇-水-冰醋酸(60∶4∶2，体积比)作为流动相，以1.0mL/min 的速度进样，在274 nm 的波长下检测色谱值。色谱柱: Diamonsil C18；进样体积为20μL；柱温: 30℃。

本发明在基础日粮中添加2-4%，本发明的复合精油能显著降低断奶仔猪腹泻率,促进采食量,提高日增重,改善肠道菌群状态，同时对早期断奶仔猪腹泻预防与促进生长的效果更好。

本发明的试验表明, 本发明的复合精油有效降低了肠道大肠杆菌的数量,改善了肠道菌群状态,这可能是因为凹凸棒石通过对消化道中病毒、病原菌、毒素的吸附,抑制了肠道有害菌的生长,促进了有益菌的生长,恢复、维持了肠道菌群的生态平衡。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售。

试验材料：

肉桂油、丁香油、百里香酚(广东云花实业有限公司生产，生产批号：2014051105，2014081022，201401009)上述三种材料本公司已在公开销售；活化凹凸棒石:甘肃凯迪生物技术公司生产。

实施例1

本发明的复方精油的配方如下：

肉桂油0.25g，丁香油0.5g，百里香酚2.5g，活化凹凸棒石100g。

本发明的复方精油的制备方法为：

将肉桂油0.25g，丁香油0.5g，百里香酚2.5g加入50ml乙醇，在室温下加入100g的活化凹凸棒石中，振荡10h，抽滤，40℃干燥即得。

实施例2

本发明的复方精油的配方如下：

肉桂油1.25g，丁香油0.8g，百里香酚1.25g，活化凹凸棒石100g。

本发明的复方精油的制备方法为：

将肉桂油1.25g，丁香油0.8g，百里香酚1.25g加入50ml乙醇，在室温下加入100g的活化凹凸棒石中，振荡10h，抽滤，40℃干燥即得。

实施例3

本发明的复方精油的配方如下：

肉桂油2.5g，丁香油1g，百里香酚0.25g，活化凹凸棒石100g。

本发明的复方精油的制备方法为：

将肉桂油2.5g，丁香油1g，百里香酚0.25g加入50ml乙醇，在室温下加入100g的活化凹凸棒石中，振荡10h，抽滤，40℃干燥即得。

实施例4

本发明的复方精油的配方如下：

肉桂油0.25g，丁香油0.1g，百里香酚2.5g，活化凹凸棒石100g。

本发明的复方精油的制备方法为：

将肉桂油0.25g，丁香油0.1g，百里香酚2.5g加入50ml乙醇，在室温下加入100g的活化凹凸棒石中，振荡10h，抽滤，40℃干燥即得。

实施例5

本发明的复方精油的配方如下：

肉桂油1g，丁香油0.3g，百里香酚1.5g，活化凹凸棒石100g。

本发明的复方精油的制备方法为：

将肉桂油1g，丁香油0.3g，百里香酚1.5g加入50ml乙醇，在室温下加入100g的活化凹凸棒石中，振荡10h，抽滤，40℃干燥即得。

对比实施例1

精油配方：肉桂油4g，活化凹凸棒石100g。将肉桂油4g加入50ml乙醇，在室温下加入100g的活化凹凸棒石中，振荡10h，抽滤，40℃干燥即得。

对比实施例2

精油配方：丁香油4g，活化凹凸棒石100g。将丁香油4g加入50ml乙醇，在室温下加入100g的活化凹凸棒石中，振荡10h，抽滤，40℃干燥即得。

对比实施例3

精油配方：百里香酚4g，活化凹凸棒石100g。将百里香酚4g加入50ml乙醇，在室温下加入100g的活化凹凸棒石中，振荡10h，抽滤，40℃干燥即得。

实施例6

本发明的复方精油作为饲料添加剂的饲喂效果试验

1.1试验动物

选择健康,体重相近,日龄相近(28±2天)的CRP配套系B系断奶仔猪63头,正式饲养期21天。

1.2试验设计与日粮

采用单因素完全随机设计,将试验动物随机分为7个处理,每个处理设3个重复,每个重复3头猪，试验处理的设置及动物的数量安排详见表1。

表1 试验设计

试验基础日粮参照中国瘦肉型猪饲养标准,结合猪场实际情况设计而成，试验基础日粮为粉料,基础日粮配方和营养水平见表2。

表2 基础日粮配方及营养水平

1.3饲养管理

试验猪饲养于保育舍,同一重复的仔猪饲养于一圈,粉料饲喂,自由采食和饮水,每天打扫舍内卫生,冲洗饮水器，按正常免疫程序免疫，每天做好试验仔猪的观察记录。动物试验在广东阳江育种猪场进行。

1.4测试指标

1.4.1日增重、采食量和料肉比

在试验开始后于早晨空腹称初重,然后每二周称重1次,结料1次,以重复为单位统计采食量,并计算日增重和料肉比。结果参见表3。

表3 本发明的复方精油对断奶仔猪生产性能的影响

1.4.1.1平均日采食量(ADFI)

由表4可见: 实施例3组的平均日采食量(ADFI)较对照组高。

1.4.1.2平均日增重(ADG)

结果表明: 实施例2的日增重最高，试验组均明显高于对照组。

1.4.1.3料肉比(F/G)

结果表明: 实施例2的料肉比最低，试验组低于对照组。

1.4.2腹泻指数与腹泻率

在试验期内每天观察仔猪腹泻情况,记录腹泻仔猪头数,并根据粪便的情况给予不同的分数,以重复为单位,统计腹泻指数，计算腹泻率,具体参见表4。将粪便得分为4分、5分者确定为腹泻。

表4腹泻指数的评分标准

腹泻指数与腹泻率的计算公式如下:

腹泻指数=粪便评分之和/试验猪头数

腹泻率=腹泻猪头日数/试验猪头日数×%。具体结果参见表5。

表5本发明的复方精油对断奶仔猪腹泻的影响

结果表明:第1周腹泻指数, 实施例2组最低。且试验组较对照组低。

第2周腹泻指数, 实施例2组最低。且试验组较对照组低。

第3周腹泻指数, 实施例2组最低。且试验组较对照组低。

1.4.3粪样菌群计数

细菌种类:大肠杆菌、乳酸杆菌

(l)选择性培养基的准备:购买相应选择性培养基,按照使用说明配好后加热溶化，然后高压灭菌备用。

(2)取样:于试验第15天早上每重复随机抽取1头健康仔猪,用预先处理的干净塑料袋,无菌操作取新鲜粪便,立即送回实验室。

(3)稀释:样品运回实验室后,于超净工作台上称取约1.0g粪样于无菌试管中,加入先配好的并已灭菌的稀释液9ml,在磁力震荡器上震荡3-5分钟,此为10^-1,静置一段时间,用微量移液枪准确吸取上清液1 ml盛有9ml灭菌稀释液的试管中进行10^-2稀释,振荡后,再依次进行10^-3-10^-7倍稀释。

(4)接种与培养:

大肠杆菌:预先做好的培养基在37℃温箱中作用12h后,放在无菌超净工作台中。由高稀释度开始,用微量取液器分别取粪样10^-4-10^-6稀释液0.1ml涂布接种于大肠杆菌选择性培养基(伊红美蓝培养基)平皿上(各稀释度设3个重复),置37℃培养箱中有氧培养24小时。

乳酸杆菌:预先做好的培养基在37℃温箱中作用12h后,放在无菌超净工作台中。由高稀释度开始,用微量取液器分别取粪样10^-5-10^-7倍稀释液0.1ml涂布接种于乳酸杆菌选择性培养基(LBS)上(各稀释度设3个重复),置37℃培养箱中有氧培养48小时。

(5)细菌鉴定与计数:培养时间到后,根据菌群和细胞形态、革兰氏染色对细菌进行鉴定。在伊红美蓝平板上,多数大肠杆菌菌落呈深紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽；革兰氏染色为阴性；显微镜下呈两端钝圆的短杆状。乳酸杆菌在LBS培养基上为乳白色稍突起的小菌落，革兰氏染色为阳性。

对大肠杆菌平板,选取深紫黑色或紫黑色,表面光滑、凸起,边缘整齐,质地软、粘,直径1.0-3.0mm的菌落进行计数。对乳酸杆菌,选取乳白色,稍偏黄,表面光滑、凸起,质地软，直径0.6-2.7mm的菌落进行计数。

菌落计数一般要求,按每个平皿有30个或以上进行计数,最后求平均值为细菌的实验记录数。

1g样品中细菌总数的计算公式为:

细菌数=记录数×稀释倍数×1000/100

单位记为:CFU/g。

求出每克样品所含菌数,最后用每克鲜粪样中细菌个数的对数(Log₁₀cfu/g)表示。具体结果参见表6。

表6本发明的复方精油对微生物菌群的影响

注:菌群数量用lgCFU/g粪样表示

结果表明: 实施例2组大肠杆菌数最低。试验组较对照组低。而乳/大中，实施例2组最高，且试验组均高于对照组。

以上检测在广东省农科院兽医研究所完成。

上述结果采用平均数±标准差方式进行描述,试验数据采用spssl0.0软件进行方差分析,

若差异显著采用Duncan氏法进行多重比较。

2 讨论

本次试验表明,在基础日粮中添加3%本发明的复合精油能显著降低断奶仔猪腹泻率,促进采食量,提高日增重,改善肠道菌群状态，同时对早期断奶仔猪腹泻预防与促进生长的效果更好。

本次试验表明, 本发明的复合精油有效降低了肠道大肠杆菌的数量,改善了肠道菌群状态,这可能因为凹凸棒石通过对消化道中病毒、病原菌、毒素的吸附,抑制了肠道有害菌的生长,促进有益菌的生长,恢复、维持了肠道菌群的生态平衡。

实施例7

本发明的复方精油的抑菌试验及有效成分检测方法使用

肉桂油是樟树科植物肉桂的干皮及树皮经水蒸气蒸馏得到的挥发油，肉桂油的主要成分为肉桂醛，对细菌、酵母和霉菌的生长有较强的抑制作用。丁香油主要成分为丁香酚和百里酚等，可抑制和杀灭多种微生物。百里香油为百里香的提取物，主要成分为百里香酚和香芹酚，被欧盟批准为植保产品，具有抗菌和抗氧化的功效，可用作香精和防腐剂等。最小抑菌质量浓度( MIC) 可作为植物精油( EO) 抗菌作用强弱的评价指标，常用于测定MIC的方法有滤纸片扩散法、琼脂稀释法、肉汤稀释法和光密度法等。本试验选择较为准确的微板微量肉汤稀释法，测定肉桂油、丁香油、百里香酚及它们的主要成分肉桂醛、丁香酚和百里香酚对2 种猪源致病菌的MIC，并与硫酸抗敌素的抗菌效果进行比较，为天然

植物饲料添加剂的开发与利用提供的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 精油与试剂

肉桂油、肉桂醛、丁香油、丁香酚、百里香酚、实施例2的复方精油（肉桂油：丁香油：百里香酚=1.25:0.8:1.25）；营养肉汤液体培养基，北京奥博星生物技术责任有限公司； MH 琼脂( MHA)；刃天青，Sigma 公司。

1.1.2 菌种

供试菌种猪源产肠毒素大肠杆菌K88 及猪源霍乱沙门菌A72，由华中农业大学兽医学院提供。

1.1.3 仪器

高效液相色谱仪( Waters 1525 型，配Waters2489 检测器)。

1.2 方法

1.2.1 精油主要成分含量检测

分别准确量取1mL肉桂醛和丁香酚、百里香酚，称取1g各置于一个100mL 容量瓶中，用色谱甲醇将其分别稀释至肉桂醛含量为1%、丁香酚含量为1% 和百里香酚质量浓度为10μg/mL的储备液。用甲醇将肉桂醛稀释成0.0001、0.0005、0.001、0.005、0.01 和0.02μg/mL 的标准品；将丁香酚成稀释至0.005、0.01、0.05、0.1、0.25 和0.5μg/mL 的标准品；将百里香酚稀释成1.0、5.0、10.0、50.0、100.0和250.0μg/mL的标准品来建立标准曲线。取0.1mL样品溶于250mL容量瓶中，经30min超声，过0.22μm滤膜，制成待测样品。用甲醇-水-冰醋酸(60∶4∶2，体积比)作为流动相，以1.0mL/min 的速度进样，在274 nm 的波长下检测色谱值。色谱柱: Diamonsil C18；进样体积为20μL；柱温: 30℃。

以峰面积为纵坐标，肉桂醛、丁香酚和百里香酚的质量浓度为横坐标绘制标准曲线，并计算回归方程:

肉桂醛: Y=13404X+25928，R²=0.999，在0.01-0.4μL/mL线性关系良好。

丁香酚: Y=15123X+22670，R²=0.999，在0.01-0.4μL/mL线性关系良好。

百里香酚: Y=14825X-15883，R²=0.999，在5-500μg/mL线性关系良好。

将肉桂油、丁香油和百里香酚稀释成适宜质量浓度，按照上述的条件和方法进行检测，计算出各精油中主要成分的含量。参见表7。

表7肉桂油、丁香油和百里香酚的主要成分含量

1.2.2 抑菌药液的制备

将经0.22μm过滤灭菌的2种精油（肉桂油和丁香油）和3个主要成分（肉桂醛、丁香酚和百里香酚）及本发明的复合精油按照精油∶吐温80∶二硝基亚砜= 2∶1∶1的体积比例混合，涡旋1min配成体积分数为1/2的药液。取102.4μL体积分数为1/2的药液，用经高温高压灭菌的营养肉汤液体培养基稀释至4mL，涡旋1min，制成药液质量浓度为12800μg/L。再采用2 倍稀释法将药液质量浓度分别稀释为12800、6400、3200、1600、800、400、200 和100μg/L等质量浓度待用(经试验验证，药液中吐温80和二硝基亚砜的质量浓度小于1%不会影响抑菌试验的结果)。

1.2.3 菌种的活化及菌液的制备

分别将大肠杆菌K88 和沙门菌A72接种到营养肉汤液体培养基，于37℃摇床中，以150r/min的速度震荡培养12h；从得到的菌液中取10μL加入到5mL营养肉汤液体培养基中以相同的条件培养12h；再次以相同条件扩大培养一次后待用。

采用平板计数法，将得到活化的菌液充分震荡涡旋1min后按10倍稀释法稀释菌悬液，吸取10^-6、10^-7和10^-8菌悬液各100μL，均匀的涂布在无菌的琼脂肉汤培养基上，放入37℃恒温培养箱中培养12h，每个梯度2个重复，选择最佳平板计数，并计算出每毫升菌悬液中的菌落数。再按计算出的菌落数，将菌液稀释至50万CFU待用。

1.2.4 指示剂的配制

准确称取0.025g刃天青，溶于100mL超纯水中，经高温高压灭菌，制成0.25g/L质量浓度的无菌指示剂待用。

1.2.5 抑菌试验方法

采用刃天青指示剂微量稀释法测定肉桂油、肉桂醛、丁香油、丁香酚、百里香酚和实施例2制备的复方精油的抑菌活力。首先在灭菌的96 孔细胞培养板中每个孔加入2μL、0.25g/L的刃天青指示剂，再按照从高浓度到低浓度的顺序，依次加入100μL稀释好的抑菌药液，每个质量浓度做3个纵向并排的重复。然后取3个孔只加100μL 培养基作为对照，3个孔只加100μL稀释好的菌液做阳性对照，3个孔只加100μL药液做阴性对照。再向各试验孔中加入100μL 稀释好的50万CFU的菌液，对照、阳性对照和阴性对照各孔中加入100μL营养肉汤补足体积，与试验组保持一致。为减少孔中液体蒸发，盖上96孔板盖子后再用无菌的保鲜膜将板密封。将制好的96 孔细胞培养板置于37℃恒温培养箱中培养，24h后观察结果。

结果判定: 刃天青溶液为蓝色，当有细菌生长时将变为红色。经恒温培养后，无菌落生长的最低药物质量浓度即为MIC。具体结果参见表8。

表8 几种药液最低抑菌浓度（μg/L）

从表7可见: 3种精油及其主要成分对2种猪源致病菌的综合抑菌能力为: 肉桂醛＞ 肉桂油＞ 百里香酚≥丁香酚和丁香油。本实施例2的复合精油对供试菌的MIC为200μg/L。肉桂油及肉桂醛的MIC为实施例2的复合精油的1/4 和1/2；百里香酚的抑菌MIC 为实施例2的复合精油的1 /8；丁香酚和丁香油的抑菌MIC 为实施例2的复合精油的1/8 和1/16。

肉桂油和肉桂醛对K88 和A72表现出的抑菌效果相同，对大肠杆菌K88和沙门菌A82的MIC分别为800和400μg/L，表明肉桂油中起抑菌作用的是肉桂醛。丁香酚对2 株供试菌的MIC相同，均为1600 μg /L，而丁香油对2 株菌的MIC不同，分别为1600 和3200μg/L。百里香酚对2 株菌的抑菌作用均为1600μg/L。而本发明实施例2的复合精油抗菌活性远远高于其单体油，可能是百里香酚或多种成分间有一定的协调作用，这还需进一步研究。

本发明通过建立的高效液相色谱法，在一个系统内实现对3个成分的同时检测。该方法灵敏度高、重复性好、测定速度快和操作简单，试验条件下切实可行。检测方法下，挥发油中各组分得到充分有效的分离，达到了对其中主要成分测定的要求。本试验只做了对供试精油中最主要成分的定量检测，并未对所有成分进行检测，若后续对精油组分有要求，可利用气质联用的方法进行分析。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种预防仔猪腹泻的复方精油，其特征在于：所述复方精油由以下质量份数的各组分制备而成：肉桂油0.25-2.5份、丁香油0.1-1份、百里香酚0.25-2.5份、活化凹凸棒石100份。

2.根据权利要求1所述的复方精油，其特征在于：所述复方精油由以下质量份数的各组分制备而成：肉桂油1.25份、丁香油0.8份、百里香酚1.25份、活化凹凸棒石100份。

3.权利要求1或2所述的复方精油的制备方法，其特征在于：是将配方量的肉桂油、丁香油、百里香酚加入乙醇，在室温下加入配方量的活化凹凸棒石中，振荡，抽滤干燥即得。

4.权利要求1或2所述的复方精油在制备预防仔猪腹泻的药物中的应用。

5.权利要求1或2所述的复方精油在制备抑制大肠杆菌和/或沙门菌药物中的应用。

6.权利要求1或2所述的复方精油在制备预防仔猪腹泻的饲料添加剂中的应用。

7.一种预防仔猪腹泻的饲料添加剂，其特征在于：所述饲料添加剂中含有权利要求1或2所述的复方精油。

8.一种预防仔猪腹泻的饲料，其特征在于：所述饲料由96-98wt%基础日粮和2-4wt%权利要求1或2所述的复方精油组成。

9.权利要求1或2所述的复合精油中有效成分的检测方法，其特征在于：是用高效液相色谱法进行检测，检测条件为：用甲醇-水-冰醋酸(60∶4∶2，体积比)作为流动相，以1.0mL/min 的速度进样，在274 nm 的波长下检测色谱值；

色谱柱: Diamonsil C18；进样体积为20μL；柱温: 30℃。