CN104403023B - 一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法 - Google Patents
一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104403023B CN104403023B CN201410643328.5A CN201410643328A CN104403023B CN 104403023 B CN104403023 B CN 104403023B CN 201410643328 A CN201410643328 A CN 201410643328A CN 104403023 B CN104403023 B CN 104403023B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- beer waste
- yeast
- waste yeast
- extract
- suspension
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 title claims abstract description 85
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 title claims abstract description 66
- 239000002699 waste material Substances 0.000 title claims abstract description 62
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 59
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 title claims abstract description 44
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 69
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 44
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 43
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 26
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 12
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 39
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 39
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 37
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 36
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 claims description 21
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 claims description 21
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 20
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 19
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 16
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 13
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 claims description 11
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 claims description 11
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 claims description 11
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 9
- 235000002918 Fraxinus excelsior Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002956 ash Substances 0.000 claims description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 8
- 238000004332 deodorization Methods 0.000 claims description 5
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 3
- 230000009967 tasteless effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 abstract description 6
- 239000004365 Protease Substances 0.000 abstract description 6
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 abstract description 6
- 230000002411 adverse Effects 0.000 abstract description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 abstract 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 abstract 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 abstract 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 abstract 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 69
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 33
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 10
- TWNIBLMWSKIRAT-RWOPYEJCSA-N (1r,2s,3s,4s,5r)-6,8-dioxabicyclo[3.2.1]octane-2,3,4-triol Chemical compound O1[C@@]2([H])OC[C@]1([H])[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]2O TWNIBLMWSKIRAT-RWOPYEJCSA-N 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 4
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 4
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 4
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 4
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 4
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 2
- 241000726221 Gemma Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 208000035404 Autolysis Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 1
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 1
- 108010001682 Dextranase Proteins 0.000 description 1
- 231100000678 Mycotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229920000392 Zymosan Polymers 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 description 1
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000002636 mycotoxin Substances 0.000 description 1
- 235000021049 nutrient content Nutrition 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明公开了一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，它包括以下步骤：A、将啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣用水洗涤，配成悬浮液a，加入氢氧化钠、微生物蛋白酶制剂后抽提1h～10h，再进行离心分离，取沉淀a；B、将沉淀a用水洗涤后配成悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂后抽提2h～12h，然后进行离心分离，取沉淀b；C、将沉淀b洗涤后干燥，即得到酵母葡聚糖粉；与现有技术相比，本发明方法不仅操作简单，而且葡聚糖的提取纯度高，还可以避免资源的浪费，节约成本，降低啤酒工业中啤酒废酵母残渣的排放对环境的不利影响，为啤酒废酵母的综合利用开辟了一条新的途径，实现啤酒废酵母的增值增效，产生巨大的经济效益。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取碱不溶性葡聚糖的方法，尤其涉及一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法。
背景技术
酵母多糖是酵母细胞壁的主要成分，占细胞干重的30％左右，啤酒酵母细胞壁有三层结构，外层是D-甘露聚糖，中间是蛋白质，内层是D-葡聚糖，其中葡聚糖占30％～40％。啤酒酵母细胞壁中的碱不溶酸不溶葡聚糖是以β-(1,3)-D-葡聚糖为主链、含有β-(1,6)分支的葡聚糖，能提高免疫力的物质就是β-(1,3)-D-葡聚糖，具有较强生物活性的葡聚糖分子量为100～200KDa。
葡聚糖能够增强动物的非特异性免疫系统，激活巨噬细胞的活性，通过吞噬作用吸收、破坏和清除体内的病原微生物，提高动物的免疫功能。例如葡聚糖在水产养殖中可以减少水产动物尤其是鱼、虾的病害。因此在动物的饲料中添加葡聚糖会大大增加水产动物对疾病的抵抗力，促进动物生长发育。此外，葡聚糖还能促进动物胃肠蠕动，吸附肠道内的有害物质，例如真菌毒素；也能促进肠内有益菌的增殖。
由于酵母葡聚糖独特的免疫活性，目前已作为一种饲料添加剂而得到广泛的应用。国内外对酵母细胞壁葡聚糖的提取方法较多，主要有酸法提取、碱法提取、酸碱一体法、有机溶剂提取、自溶-酶-碱法、超声波提取、酶法等。在工业生产中，根据不同的生产目的可以采用不同的工艺方法从酵母细胞中提取葡聚糖，但是这些方法多采用纯净的酵母细胞为原料，操作复杂，成本较高。
啤酒废酵母是啤酒生产的副产物，是啤酒生产过程中历经主发酵和后发酵的酿造工序之后所产生的，含有丰富的营养成分及功能性成分。目前工业上已经开始利用啤酒废酵母提取核糖核酸，以提高啤酒废酵母的利用价值，但是在此过程中，啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣却没有得到有效利用，该啤酒废酵母残渣的主要成分为破碎的啤酒酵母细胞壁，含有丰富的葡聚糖，其直接排放是对资源的浪费。
发明内容
本发明的目的旨在克服上述现有技术中的不足，提供一种操作简单、提纯率高、避免资源浪费的从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法。
为解决上述的技术问题，本发明采用以下技术方案：
一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，它包括以下步骤：
A、酶-碱法提纯
将啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣用水洗涤，然后配成悬浮液a，加入氢氧化钠、微生物蛋白酶制剂，并在温度为30℃～70℃的条件下使用不锈钢反应釜抽提1h～10h，再对抽提物进行离心分离，取沉淀a；
B、酶法再提纯
将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂，并在温度为30℃～70℃、pH为6.0～10.0的条件下使用不锈钢反应釜抽提2h～12h，再对抽提物进行离心分离，取沉淀b；
C、干燥
将步骤B得到的沉淀b用水洗涤后，进行干燥，即得到酵母葡聚糖粉；
作为优选，在步骤A中，将啤酒废酵母进行过筛、脱苦、脱臭处理后配制成酵母浓度以重量计为1％～20％的悬浮液，再加入氯化钠，使悬浮液中的氯化钠浓度以重量计为1％～20％，然后使用氢氧化钠将该悬浮液的pH值调节至7.5，接着使用不锈钢反应釜在温度50℃～100℃的条件下抽提2h～12h，将得到的抽提物迅速冷却至室温，再用板框压滤机过滤，得到的滤渣即为啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣；
作为优选，在步骤A中，所述悬浮液a中啤酒废酵母残渣的浓度以重量计为5％～15％、氢氧化钠的浓度以重量计为5％～10％；
作为优选，在步骤A中，所述微生物蛋白酶制剂为枯草芽孢杆菌蛋白酶，酶活力与底物浓度之比为1000U/g～10000U/g；
作为优选，步骤A、步骤B中的离心分离均采用碟片离心机，转速为5000r/min，分离时间为20min；
作为优选，在步骤B中，将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成以重量计浓度为5％～15％的悬浮液b，所述胰蛋白酶制剂的酶活力与底物浓度之比为500U/g～5000U/g；
作为优选，步骤C中的干燥方式为滚筒干燥，进水温度为100℃～200℃，出水温度为50℃～90℃，滚筒转速为1r/min～50r/min；
根据上述方法所得到的酵母葡聚糖粉具有下述特性：性状为干燥无定型粉，均匀一致，颜色为灰白色，无味，难溶于水，以重量计，其灰分含量≤7％，水分含量≤7％，总糖含量≥80％。
本发明是以啤酒厂生产啤酒后的啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣为原料，采用两次酶法抽提得到酵母葡聚糖。第一次用酶-碱法抽提除去碱溶性甘露聚糖，第二次用酶法抽提除去细胞壁上的蛋白。酵母细胞壁主要是由内层的葡聚糖和外层的甘露聚糖组成，中间夹杂着胞壁蛋白质，这些蛋白还以共价键与甘露聚糖连接着，而大部分的葡聚糖是不溶于碱性溶液的，但甘露聚糖则是碱溶性的。本发明采用氢氧化钠溶液对酵母细胞壁进行抽提，并且在抽提时加入蛋白酶，水解与甘露聚糖连接的蛋白质，使得细胞壁上的甘露聚糖抽提得更彻底，实现两种多糖的完全分离，大大提高沉淀中葡聚糖的纯度。同时在第二次抽提中，也加入蛋白酶，将附着在细胞壁上剩余的蛋白水解成肽和氨基酸，释放到水溶液中，使得沉淀中葡聚糖的纯度进一步提高。
本发明在第一次用抽提时加入微生物蛋白酶试剂是因为这种蛋白酶纯化得不完全，还带有纤维素酶以及葡聚糖酶的活性，它不仅能水解连接着甘露聚糖的蛋白质，使得甘露聚糖更容易从细胞壁上释放出来，使甘露聚糖抽提更彻底，而且还能水解葡聚糖和甘露聚糖之间的连接键，使得甘露聚糖和葡聚糖能更彻底的分开。
本发明在第二次抽提时加入胰蛋白酶制剂进行水解是因为它具有很强的酶活力以及针对酵母细胞壁蛋白的特异水解能力，能将细胞壁上的蛋白水解干净，从而释放到溶液中，进一步提高沉淀中葡聚糖的纯度。
啤酒酵母是啤酒生产的工业副产品，其作为饲料原料，安全而可靠，根据本发明方法所得到的酵母葡聚糖粉纯度较高，而且提取率≥36％，可以直接用于饲料加工。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明方法采用两次酶解法从啤酒废酵母残渣中提取碱葡聚糖，不仅操作简单，而且葡聚糖的提取纯度高，还可以避免资源的浪费，节约成本，降低啤酒工业中啤酒废酵母残渣的排放对环境的不利影响；同时，本发明方法可以与用啤酒废酵母提取核糖核酸的方法结合使用，为啤酒废酵母的综合利用开辟了一条新的途径，实现啤酒废酵母的增值增效，延长拓宽产业链条，产生巨大的经济效益。
具体实施方式
为了能更好地对本发明的技术方案进行理解，下面通过具体的实施例进行详细地说明：
实施例一
一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，它包括以下步骤：
A、酶-碱法提纯
将啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣用水洗涤，然后配成以重量计浓度为10％的悬浮液a，加入氢氧化钠、枯草芽孢杆菌蛋白酶，悬浮液a中氢氧化钠的浓度以重量计为7.5％，枯草芽孢杆菌蛋白酶的酶活力与底物浓度之比为5500U/g，然后在温度为50℃的条件下使用不锈钢反应釜抽提5.5h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀a；
B、酶法再提纯
将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成以重量计浓度为10％的悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂，悬浮液b中胰蛋白酶制剂的酶活力与底物浓度之比为2500U/g，然后在温度为50℃、pH为8.0的条件下使用不锈钢反应釜抽提7h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀b；
C、干燥
将步骤B得到的沉淀b用水洗涤后，在进水温度为150℃、出水温度为70℃、滚筒转速为25r/min的条件下进行滚筒干燥，即得到酵母葡聚糖粉。
根据本方法得到的酵母葡聚糖粉为干燥无定型粉，均匀一致，颜色为灰白色，无味，难溶于水，以重量计，其灰分含量为5.6％，水分含量为5.1％，总糖含量(以葡萄糖计)为84.7％。
实施例二
一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，它包括以下步骤：
A、酶-碱法提纯
将啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣用水洗涤，然后配成以重量计浓度为15％的悬浮液a，加入氢氧化钠、微生物蛋白酶试剂，悬浮液a中氢氧化钠的浓度以重量计为10％，微生物蛋白酶试剂的酶活力与底物浓度之比为10000U/g，然后在温度为70℃的条件下使用不锈钢反应釜抽提1h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀a；
B、酶法再提纯
将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成以重量计浓度为15％的悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂，悬浮液b中胰蛋白酶制剂的酶活力与底物浓度之比为5000U/g，然后在温度为70℃、pH为10.0的条件下使用不锈钢反应釜抽提2h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀b；
C、干燥
将步骤B得到的沉淀b用水洗涤后，在进水温度为200℃、出水温度为90℃、滚筒转速为50r/min的条件下进行滚筒干燥，即得到酵母葡聚糖粉。
根据本方法得到的酵母葡聚糖粉为干燥无定型粉，均匀一致，颜色为灰白色，无味，难溶于水，以重量计，其灰分含量为6.9％，水分含量为6.3％，总糖含量(以葡萄糖计)为82.1％。
实施例三
一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，它包括以下步骤：
A、酶-碱法提纯
将啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣用水洗涤，然后配成以重量计浓度为5％的悬浮液a，加入氢氧化钠、枯草芽孢杆菌蛋白酶，悬浮液a中氢氧化钠的浓度以重量计为5％，枯草芽孢杆菌蛋白酶的酶活力与底物浓度之比为1000U/g，然后在温度为30℃的条件下使用不锈钢反应釜抽提10h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀a；
B、酶法再提纯
将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成以重量计浓度为5％的悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂，悬浮液b中胰蛋白酶制剂的酶活力与底物浓度之比为500U/g，然后在温度为30℃、pH为6.0的条件下使用不锈钢反应釜抽提12h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀b；
C、干燥
将步骤B得到的沉淀b用水洗涤后，在进水温度为100℃、出水温度为50℃、滚筒转速为1r/min的条件下进行滚筒干燥，即得到酵母葡聚糖粉。
根据本方法得到的酵母葡聚糖粉为干燥无定型粉，均匀一致，颜色为灰白色，无味，难溶于水，以重量计，其灰分含量为7％，水分含量为7％，总糖含量(以葡萄糖计)为80％。
实施例四
一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，它包括以下步骤：
A、酶-碱法提纯
将啤酒废酵母进行过筛、脱苦、脱臭处理后配制成酵母浓度以重量计为1％的悬浮液，再加入氯化钠，使悬浮液中的氯化钠浓度以重量计为1％，然后使用氢氧化钠将该悬浮液的pH值调节至7.5，接着使用不锈钢反应釜在温度50℃℃的条件下抽提12h，将得到的抽提物迅速冷却至室温，再用板框压滤机过滤，得到的滤渣即为啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣；
再将得到的啤酒废酵母残渣用水洗涤，然后配成以重量计浓度为6％的悬浮液a，加入氢氧化钠、微生物蛋白酶试剂，悬浮液a中氢氧化钠的浓度以重量计为5％，微生物蛋白酶试剂的酶活力与底物浓度之比为5000U/g，然后在温度为60℃的条件下使用不锈钢反应釜抽提10h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀a；
B、酶法再提纯
将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成以重量计浓度为10％的悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂，悬浮液b中胰蛋白酶制剂的酶活力与底物浓度之比为1000U/g，然后在温度为55℃、pH为8.5的条件下使用不锈钢反应釜抽提12h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀b；
C、干燥
将步骤B得到的沉淀b用水洗涤后，在进水温度为150℃、出水温度为70℃、滚筒转速为20r/min的条件下进行滚筒干燥，即得到酵母葡聚糖粉。
根据本方法得到的酵母葡聚糖粉为干燥无定型粉，均匀一致，颜色为灰白色，无味，难溶于水，以重量计，其灰分含量为5.5％，水分含量为7％，总糖含量(以葡萄糖计)为83.4％。
实施例五
一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，它包括以下步骤：
A、酶-碱法提纯
将啤酒废酵母进行过筛、脱苦、脱臭处理后配制成酵母浓度以重量计为10％的悬浮液，再加入氯化钠，使悬浮液中的氯化钠浓度以重量计为10％，然后使用氢氧化钠将该悬浮液的pH值调节至7.5，接着使用不锈钢反应釜在温度75℃的条件下抽提7h，将得到的抽提物迅速冷却至室温，再用板框压滤机过滤，得到的滤渣即为啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣；
再将得到的啤酒废酵母残渣用水洗涤，然后配成以重量计浓度为8％的悬浮液a，加入氢氧化钠、枯草芽孢杆菌蛋白酶，悬浮液a中氢氧化钠的浓度以重量计为6％，枯草芽孢杆菌蛋白酶的酶活力与底物浓度之比为3000U/g，然后在温度为60℃的条件下使用不锈钢反应釜抽提10h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀a；
B、酶法再提纯
将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成以重量计浓度为13％的悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂，悬浮液b中胰蛋白酶制剂的酶活力与底物浓度之比为2000U/g，然后在温度为55℃、pH为8.5的条件下使用不锈钢反应釜抽提10h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀b；
C、干燥
将步骤B得到的沉淀b用水洗涤后，在进水温度为140℃、出水温度为50℃、滚筒转速为30r/min的条件下进行滚筒干燥，即得到酵母葡聚糖粉。
根据本方法得到的酵母葡聚糖粉为干燥无定型粉，均匀一致，颜色为灰白色，无味，难溶于水，以重量计，其灰分含量为5.9％，水分含量为6.4％，总糖含量(以葡萄糖计)为81.7％。
实施例六
一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，它包括以下步骤：
A、酶-碱法提纯
将啤酒废酵母进行过筛、脱苦、脱臭处理后配制成酵母浓度以重量计为20％的悬浮液，再加入氯化钠，使悬浮液中的氯化钠浓度以重量计为20％，然后使用氢氧化钠将该悬浮液的pH值调节至7.5，接着使用不锈钢反应釜在温度100℃的条件下抽提2h，将得到的抽提物迅速冷却至室温，再用板框压滤机过滤，得到的滤渣即为啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣；
再将得到的啤酒废酵母残渣用水洗涤，然后配成以重量计浓度为12％的悬浮液a，加入氢氧化钠、枯草芽孢杆菌蛋白酶，悬浮液a中氢氧化钠的浓度以重量计为9％，枯草芽孢杆菌蛋白酶的酶活力与底物浓度之比为7000U/g，然后在温度为45℃的条件下使用不锈钢反应釜抽提8h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀a；
B、酶法再提纯
将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成以重量计浓度为8％的悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂，悬浮液b中胰蛋白酶制剂的酶活力与底物浓度之比为4000U/g，然后在温度为60℃、pH为8.0的条件下使用不锈钢反应釜抽提6h，再用碟片离心机以5000r/min的转速对抽提物进行离心分离20min，取沉淀b；
C、干燥
将步骤B得到的沉淀b用水洗涤后，在进水温度为160℃、出水温度为60℃、滚筒转速为35r/min的条件下进行滚筒干燥，即得到酵母葡聚糖粉。
根据本方法得到的酵母葡聚糖粉为干燥无定型粉，均匀一致，颜色为灰白色，无味，难溶于水，以重量计，其灰分含量为6.2％，水分含量为6.6％，总糖含量(以葡萄糖计)为80.7％。
尽管这里参照本发明的解释性实施例对本发明进行了描述，上述实施例仅为本发明较佳的实施方式，本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法，其特征在于它包括以下步骤：
A、酶-碱法提纯
将啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣用水洗涤，然后配成悬浮液a，加入氢氧化钠、微生物蛋白酶制剂，并在温度为30℃～70℃的条件下使用不锈钢反应釜抽提1h～10h，再对抽提物进行离心分离，取沉淀a；
B、酶法再提纯
将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成悬浮液b，加入胰蛋白酶制剂，并在温度为30℃～70℃、pH为6.0～10.0的条件下使用不锈钢反应釜抽提2h～12h，再对抽提物进行离心分离，取沉淀b；
C、干燥
将步骤B得到的沉淀b用水洗涤后，进行干燥，即得到酵母葡聚糖粉；
在步骤A中，所述微生物蛋白酶制剂为枯草芽孢杆菌蛋白酶；
步骤A、步骤B中的离心分离均采用碟片离心机，转速为5000r/min，分离时间为20min。
2.根据权利要求1所述的提取碱不溶性葡聚糖的方法，其特征在于在步骤A中，将啤酒废酵母进行过筛、脱苦、脱臭处理后配制成酵母浓度以重量计为1％～20％的悬浮液，再加入氯化钠，使悬浮液中的氯化钠浓度以重量计为1％～20％，然后使用氢氧化钠将该悬浮液的pH值调节至7.5，接着使用不锈钢反应釜在温度50℃～100℃的条件下抽提2h～12h，将得到的抽提物迅速冷却至室温，再用板框压滤机过滤，得到的滤渣即为啤酒废酵母提取细胞内容物后剩余的啤酒废酵母残渣。
3.根据权利要求1所述的提取碱不溶性葡聚糖的方法，其特征在于在步骤A中，所述悬浮液a中啤酒废酵母残渣的浓度以重量计为5％～15％、氢氧化钠的浓度以重量计为5％～10％。
4.根据权利要求1所述的提取碱不溶性葡聚糖的方法，其特征在于在步骤A中，所述微生物蛋白酶制剂，酶活力与底物浓度之比为1000U/g～10000U/g。
5.根据权利要求1所述的提取碱不溶性葡聚糖的方法，其特征在于在步骤B中，将步骤A得到的沉淀a用水洗涤后配成以重量计浓度为5％～15％的悬浮液b，所述胰蛋白酶制剂的酶活力与底物浓度之比为500U/g～5000U/g。
6.根据权利要求1所述的提取碱不溶性葡聚糖的方法，其特征在于步骤C中的干燥方式为滚筒干燥，进水温度为100℃～200℃，出水温度为50℃～90℃，滚筒转速为1r/min～50r/min。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的提取碱不溶性葡聚糖的方法所得到的酵母葡聚糖粉，其特征在于它具有下述特性：性状为干燥无定型粉，均匀一致，颜色为灰白色，无味，难溶于水，以重量计，其灰分含量≤7％，水分含量≤7％，总糖含量≥80％。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410643328.5A CN104403023B (zh) | 2014-11-13 | 2014-11-13 | 一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410643328.5A CN104403023B (zh) | 2014-11-13 | 2014-11-13 | 一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104403023A CN104403023A (zh) | 2015-03-11 |
| CN104403023B true CN104403023B (zh) | 2017-02-08 |
Family
ID=52640697
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410643328.5A Active CN104403023B (zh) | 2014-11-13 | 2014-11-13 | 一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104403023B (zh) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6444448B1 (en) * | 1995-07-05 | 2002-09-03 | Carlton And United Breweries, Limited | Production of β-glucan-mannan preparations by autolysis of cells under certain pH, temperature and time conditions |
| CN101020915A (zh) * | 2007-03-07 | 2007-08-22 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种制备酵母β－葡聚糖的方法 |
| CN101184780A (zh) * | 2005-05-05 | 2008-05-21 | 森馨香料公司 | β-葡聚糖和甘露聚糖的制备 |
| CN101748172A (zh) * | 2008-12-17 | 2010-06-23 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种不溶性葡聚糖的制备方法 |
| CN101897431A (zh) * | 2010-06-21 | 2010-12-01 | 中国农业大学 | 一种同时制备酵母抽提物和β-1，3-葡聚糖的方法 |
| CN102492052A (zh) * | 2011-12-19 | 2012-06-13 | 成都宏安生物科技有限公司 | 一种从啤酒酵母废渣中提取甘露聚糖的方法 |
| CN103613682A (zh) * | 2013-11-19 | 2014-03-05 | 济南大学 | 一种制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法 |
-
2014
- 2014-11-13 CN CN201410643328.5A patent/CN104403023B/zh active Active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6444448B1 (en) * | 1995-07-05 | 2002-09-03 | Carlton And United Breweries, Limited | Production of β-glucan-mannan preparations by autolysis of cells under certain pH, temperature and time conditions |
| CN101184780A (zh) * | 2005-05-05 | 2008-05-21 | 森馨香料公司 | β-葡聚糖和甘露聚糖的制备 |
| CN101020915A (zh) * | 2007-03-07 | 2007-08-22 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种制备酵母β－葡聚糖的方法 |
| CN101748172A (zh) * | 2008-12-17 | 2010-06-23 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种不溶性葡聚糖的制备方法 |
| CN101897431A (zh) * | 2010-06-21 | 2010-12-01 | 中国农业大学 | 一种同时制备酵母抽提物和β-1，3-葡聚糖的方法 |
| CN102492052A (zh) * | 2011-12-19 | 2012-06-13 | 成都宏安生物科技有限公司 | 一种从啤酒酵母废渣中提取甘露聚糖的方法 |
| CN103613682A (zh) * | 2013-11-19 | 2014-03-05 | 济南大学 | 一种制备酵母葡聚糖联产甘露聚糖及海藻糖的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 啤酒酵母多糖脱蛋白方法的应用研究;赵燕珠 等;《食品工业科技》;20091231;第30卷(第10期);第23-27页 * |
| 用废啤酒酵母自溶残渣制碱不溶性葡聚糖的研究;赵光远 等;《食品科学》;19971231;第18卷(第2期);第244-246页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104403023A (zh) | 2015-03-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10954276B2 (en) | Enzyme-based protein separation and enrichment from soy meal, wheat meal, and other protein-rich materials derived from plant seeds, fruits and other biomass | |
| CN104140474B (zh) | 一种综合利用虾蟹皮中有用物质的方法 | |
| CN101407832B (zh) | 一种生产甲壳素、柠檬酸钙及蛋白粉的方法 | |
| US20100189871A1 (en) | Biotoxin sorbent and method for preparing the same | |
| CN101897431B (zh) | 一种同时制备酵母抽提物和β-1，3-葡聚糖的方法 | |
| CN102086464B (zh) | 一种甲壳素的制备方法 | |
| CN106146687A (zh) | 一种提取柑橘皮渣中果胶的方法 | |
| CN1425696A (zh) | 一种甲壳低聚糖的制备方法及应用 | |
| CN106282266B (zh) | 一种利用柚苷酶制备浒苔寡糖的方法 | |
| CN101766282A (zh) | 从豆粕中同时提取大豆功能与疗效因子的工艺方法 | |
| CN104187924A (zh) | 一种玉米低聚肽粉的制备方法 | |
| CN104357518A (zh) | 一种利用啤酒废酵母制备核苷酸的方法 | |
| CN101289518A (zh) | 一种甲壳素制备方法及利用甲壳素制备壳聚糖的方法 | |
| CN105754015A (zh) | 一种从蚝壳中提取甲壳素的方法 | |
| CN102199225A (zh) | 一种复合酶法制备茶树菇水解液的方法 | |
| CN103636917B (zh) | 利用水力空化技术从米渣中提取大米蛋白的方法 | |
| CN101824232B (zh) | 一种栀子绿色素的制备方法 | |
| CN102038077A (zh) | 饲料用血红素铁的二次酶解制备方法 | |
| CN106243242A (zh) | 一种利用降解增溶技术从红枣枣渣中提取制备红枣果胶的方法 | |
| CN102775511B (zh) | 一种从辣椒渣中提取辣椒多糖的方法 | |
| CN104403023B (zh) | 一种从啤酒废酵母残渣中提取碱不溶性葡聚糖的方法 | |
| CN102286414B (zh) | 一株几丁质降解菌株及其制备几丁寡糖的方法 | |
| CN107383233A (zh) | 一种用于提取银耳多糖的方法 | |
| CN108997512B (zh) | 一种低分子量壳寡糖及其制备方法 | |
| CN103013165A (zh) | 一种利用固定化酶制备红曲红色素的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |