CN104082006B - 一种高产、无公害的花生栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种高产、无公害的花生栽培方法，包括以下步骤:(1)进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培；(2)将根瘤菌肥与水混合稀释，将根瘤菌肥稀释液喷施于播种后地块的播种沟穴的种子周围，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理；(3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫，施用后进行正常田间管理；本发明在播种期施用花生根瘤菌和结荚期施用H06线虫，综合分析表明，达到了花生栽培提高产量和品质，无公害的防治的效果。

Description

一种高产、无公害的花生栽培方法

技术领域

本发明涉及一种高产、无公害的花生栽培方法，属于花生栽培技术领域。

背景技术

花生是我国食用植物油的主要来源之一，也是主要的出口创汇农产品。目前，花生全国种植面积达502万hm²，总产达1430万t，约占世界花生年产量的60％以上。近几年，各地花生蛴螬的发生数量呈逐年上升趋势，其中以暗黑鳃和铜绿丽金龟为主。它们以幼虫(蛴螬)取食荚果，对花生造成严重危害，一般导致减产10％～20％，严重者达50％～80％，甚至颗粒无收。当前，对其防治主要采用化学药剂拌种处理和灌根处理，不仅有害人体健康，污染环境，还易使蛴螬产生抗药性。

昆虫病原线虫(entomopathogenic nematodes，EPNs)是一类专门寄生昆虫的线虫，通过3龄感染期幼虫对害虫身体的自然开口或节间膜侵入的方式进入寄主体内，并释放携带的共生细菌，使其在害虫体内繁殖，产生毒素，最终导致害虫死亡。因EPNs具有寄主范围广泛，主动寻找寄主，对非靶标生物安全，对环境无副作用，能与许多农药、肥料混用等优点，已广泛应用于防治蛴螬、地老虎、桃小食心虫、天牛等多种农林害虫。

中国专利文献CN101779611A(申请号201010112122.1)公开了一种昆虫病原线虫的繁殖方法，采用透明培养容器作为繁殖容器，采用黄粉虫活体作为寄主昆虫，采用植物碎屑作为培养介质，采用灭菌设备进行灭菌，使用控温培养室进行培养，不仅明显解决了植物秸秆、木材的废弃污染问题，同时大大降低了生产原料成本、简化了生产和使用步骤，繁殖培养出的昆虫病原线虫成本低、质量好、防治效果高，可广泛应用于防治农、林、园艺等植物的地下害虫和隐蔽性害虫。

根瘤菌(root nodule bacteria，RNB)是与豆科植物共生形成根瘤并固定空气中的氮气供植物营养的一类杆状细菌。花生属于豆科作物，可以与根瘤菌形成共生固氮体系，并直接利用大气中的氮气作为氮源。近年来，在花生种植上单独应用EPNs和RNB都取得较好的效果。

目前，花生栽培上蛴螬的防治仍以化学杀虫剂为主，常使用辛硫磷、吡虫啉和毒死蜱等进行灌根。化学农药不当使用不但污染花生产量和品质，而且还会因连续多次使用导致蛴螬产生抗药性，使防治蛴螬更加困难。因此，研究根瘤菌与昆虫病原线虫的配合使用是科学防控花生蛴螬危害，起到防虫固氮双重效果，确保花生产业持续稳定发展亟需解决的问题。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种高产、无公害的花生栽培方法。

本方法针对花生蛴螬危害猖獗且又缺乏高效低毒新型防治药剂及如何配合根瘤菌固氮的技术问题，通过在室内测试了根瘤菌对昆虫病原线虫(Heterorhabdits bacteriophoraH06(简称H06)存活及侵染率的影响，在大田条件下根瘤菌和昆虫病原线虫配合使用能够提高花生产量及防治花生蛴螬的目的，达到花生栽培上提高产量和品质，无公害的防治的策略。

本发明技术方案如下：

一种高产、无公害的花生栽培方法，包括以下步骤:

(1)选择疏松和通气性好的土壤进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培，垄高8～12cm，宽55～65cm，播种双行，每穴播种两粒，制得播种后地块；

(2)将根瘤菌肥与水混合稀释，配制根瘤菌浓度为0.6～1.0亿·mL^-1的根瘤菌肥稀释液，将根瘤菌肥稀释液喷施于步骤(1)制得的播种后地块的播种沟穴的种子周围2～3cm的范围内，每穴喷施量为0.20～0.30mL，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理；

(3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫，每穴施用量为20000～30000条，施用后进行正常田间管理；

上述符合检测条件为同时满足如下a和b的要求：

a、分别将浓度为20亿·mL^-1(原液)、1×10⁶·mL^-1(稀释2000倍)、4×10⁵·mL^-1(稀释5000倍)、2×10⁵·mL^-1(稀释10000倍)、4×10⁴·mL^-1(稀释50000倍)的根瘤菌溶液与稀释为500IJS·mL^-1(条/mL)昆虫病原线虫悬浮液按体积比100:1比例混合，在24～26℃的条件下放置24h检测，昆虫病原线虫存活率均为90％以上；

b、分别将根瘤菌浓度为4×10⁵·mL^-1和昆虫病原线虫浓度为100、200、400IJS·mL^-1的混合液、昆虫病原线虫浓度为100、200、400IJS·mL^-1的清水昆虫病原线虫悬浮液和蒸馏水分别处理蛴螬，在24～26℃的条件下分别处理24、48、72、96h，昆虫病原线虫侵染率差异不显著，且混合液与清水昆虫病原线虫悬浮液的侵染率之差不高于5％。

根据本发明优选的，所述步骤(1)中整地播种时间北方地区为5月5～15日。

根据本发明优选的，所述步骤(1)中播种深度为3～7cm。

所述步骤(1)中选择疏松和通气性好的土壤，其目的在于为根瘤菌发挥较好固氮作用及昆虫病原线虫的存活、寻觅、侵染寄主以及建立自然种群提供有利的环境，因此本领域技术人员可以根据上述目的按照常规技术进行选择。

根据本发明优选的，所述步骤(3)中昆虫病原线虫的施用采用如下方式：

昆虫病原线虫悬浮液采用穴施、喷雾器喷施或直接浇水灌溉的方式进行施用。

根据本发明优选的，所述步骤(3)中昆虫病原线虫悬浮液的线虫浓度为500～1000IJS·mL^-1。

根据本发明优选的，所述步骤(3)中的昆虫病原线虫为Heterorhabdits bacteriophoraH06。该昆虫病原线虫种为本领域常规品种，如可以根据中国专利文献CN101779611A(申请号201010112122.1)公开的内容进行昆虫病原线虫的繁殖。

有益效果

本发明在播种期施用花生根瘤菌和结荚期施用H06线虫，其总荚数、荚果重以及百粒重分别比两者单用增效之和提高了24.13～31.90％，70.85～76.52％和8.08～11.49％，其防虫效果达到了85.78％以上，提高了9.74～11.31％。综合分析表明，达到了花生栽培提高产量和品质，无公害的防治的效果。

附图说明

图1不同稀释倍数根瘤菌对线虫死亡率影响的柱状图；

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步阐述，但本发明所保护范围不限于此。

室内试验测定

1、线虫与根瘤菌相容性测定

供试液体花生根瘤菌Bradyrhizobium sp.由宁夏诺得曼生物技术有限公司生产，活菌数不少于20亿·mL^-1；昆虫病原线虫(Heterorhabdits bacteriophora H06(简称H06)、Steinernema longicaudum X-7(简称X-7)、Steinernema glaseri KG)(简称KG)。上述昆虫病原线虫均为本领域常用昆虫病原线虫，可以通过普通商业途径获得或自行采集获得，如H06可根据中国专利文献CN101779611A(申请号201010112122.1)公开的昆虫病原线虫的繁殖方法获得。

将根瘤菌原液、稀释2000倍、5000倍、10000倍和50000倍稀释液分别与稀释为500IJS·mL^-1线虫悬浮液均匀混合，每个处理设3次重复，以清水线虫悬浮液作对照。在(25±1)℃的条件下放置24h，显微镜下每个处理随机检查1mL混合液中线虫的存活数量，计算存活率。若根瘤菌对线虫的致死作用或者亚致死作用没有超过10％，则继续测定该根瘤菌对线虫侵染率的影响。参照魏洪义判定昆虫病原线虫对药剂的反应标准：(1)死亡：身体僵直或卷曲，不活动，对针刺无反应；(2)亚致死：身体卷曲，由于药剂麻痹作用引起痉挛性或抽搐性活动，对针刺无反应或反应非常迟缓；(3)不受药剂影响：与对照线虫一样，身体活动舒展或静止不动，静止的线虫经探针触碰后反应迅速。

试验结果(图1)表明：不同稀释倍数的花生根瘤菌对线虫均有不同程度的致死率，但尚未超过10％的致死上限。根瘤菌与线虫混合液线虫死亡率与清水对照的线虫的死亡率差异不显著。表明根瘤菌对线虫的存活基本没有影响。

2、根瘤菌对线虫侵染效果的评价

在直径9cm的培养皿中放两张中速滤纸，均匀滴入1.5ml清水，然后加入根瘤菌和线虫混合液或清水线虫悬浮液，再放入10头蛴螬幼虫。线虫设100、200、400/头3个剂量，每处理设4次重复，以蒸馏水处理做空白对照。在(25±1)℃的条件下分别处理24、48、72、96h，观察记录被线虫侵染的蛴螬幼虫数量，计算线虫对蛴螬的侵染率。

表1 根瘤菌对线虫侵染率的影响

表1表明，线虫H06对蛴螬的侵染率明显高于其他两种线虫。随着线虫浓度的提高，线虫对蛴螬的侵染率增加。但同一线虫浓度在同一时间段内加入根瘤菌与单独使用线虫悬浮液对蛴螬幼虫侵染率的影响差异不显著，且混合液与清水线虫悬浮液的侵染率之差不高于5％。表明根瘤菌的加入不会阻碍线虫侵染害虫，说明根瘤菌可与线虫具有兼容性。

田间试验

利用上述筛选的昆虫病原线虫Heterorhabdits bacteriophora H06进行花生栽培，花生品种为花育22号；地膜采用山东省三塑集团生产的0.005mm白色普通地膜。试验在山东省果树研究所天平湖试验基地，土质为砂壤土，周围杂草树木繁多，故地下害虫蛴螬(暗黑鳃金龟Holotrichia parallela Motschulsky，铜绿鳃金龟Anomala corpulenta Motschulsky等混合种群)发生数量较多。

一种高产、无公害的花生栽培方法，包括以下步骤:

(1)选择疏松和通气性的土壤进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培，垄高8～12cm，宽55～65cm，播种双行，每穴播种两粒，制得播种后地块；

(2)将根瘤菌肥与水混合稀释，配制根瘤菌浓度为0.8亿/mL的根瘤菌肥稀释液，将根瘤菌肥稀释液喷施于步骤(1)制得的播种后地块的播种沟穴的种子周围2～3cm的范围内，每穴喷施量为0.20～0.30mL，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理；

(3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫，每穴施用量为20000～30000条，施用后进行正常田间管理。

实施例1

采用如下方法栽培：

(1)选择疏松和通气性的土壤进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培，垄高8cm，宽55cm，播种双行，每穴播种两粒，制得播种后地块；

(2)将根瘤菌肥与水混合稀释，配制根瘤菌浓度为0.8亿/mL的根瘤菌肥稀释液，将根瘤菌肥稀释液喷施于步骤(1)制得的播种后地块的播种沟穴的种子周围2～3cm的范围内，每穴喷施量为0.25mL，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理；

(3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫H06，每穴施用量为25000条，施用后进行正常田间管理。

实施例2

采用如下方法栽培：

(1)选择疏松和通气性的土壤进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培，垄高12cm，宽65cm，播种双行，每穴播种两粒，制得播种后地块；

(2)将根瘤菌肥与水混合稀释，配制根瘤菌浓度为0.8亿/mL的根瘤菌肥稀释液，将根瘤菌肥稀释液喷施于步骤(1)制得的播种后地块的播种沟穴的种子周围2～3cm的范围内，每穴喷施量为0.25mL，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理；

(3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫H06，每穴施用量为25000条，施用后进行正常田间管理。

实施例3

采用如下方法栽培：

(1)选择疏松和通气性的土壤进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培，垄高10cm，宽60cm，播种双行，每穴播种两粒，制得播种后地块；

(2)将根瘤菌肥与水混合稀释，配制根瘤菌浓度为0.8亿/mL的根瘤菌肥稀释液，将根瘤菌肥稀释液喷施于步骤(1)制得的播种后地块的播种沟穴的种子周围2～3cm的范围内，每穴喷施量为0.30mL，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理；

(3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫H06，每穴施用量为30000条，施用后进行正常田间管理。

实施例4

其他条件同实施例3，不同之处在于，昆虫病原线虫采用X-7。采用如下方法栽培：

在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫X-7，每穴施用量为30000条，施用后进行正常田间管理。

实施例5

其他条件同实施例3，不同之处在于，昆虫病原线虫采用KG。采用如下方法栽培：

在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫X-7，每穴施用量为30000条，施用后进行正常田间管理。

试验例

田间试验共设10个处理，分别是播种期单用根瘤菌(根瘤菌组)、结荚期单用线虫(H06线虫组、X-7线虫组、KG线虫组)，播种期施用根瘤菌和结荚期施用线虫(实施例1组、实施例2组、实施例3组、实施例4组和实施例5组)和空白对照(对照组)。其中，播种期施用根瘤菌和结荚期施用线虫的步骤采用实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、和实施例5所述的方法，具体条件步骤见表2。

表2 试验处理的方法和时期

每处理小区面积40m²，重复4次，随机排列。在成熟期调查单穴荚数、果重、百粒重、总分枝、结果枝、株高。每个取样点随机抽样5株，重复4次。

在花生成熟期进行取样调查。采用“Z”形取样法在每小区调查5个点，每点调查15穴。分别调查并记录穴及其根际土壤中的蛴螬存活数，计算防虫效果。

不同处理对花生产量及防治蛴螬的影响试验结果如表3所示。

表3 不同处理对花生产量性状的影响

处理	总分枝	结果枝	株高(cm)	总荚数	荚果重(g)	百粒重(g)	平均防虫效果(％)
								根瘤菌组	20.78	16.82	39.25	45.69	71.24	60.51	5.28
H06线虫	14.67	12.89	31.66	27.82	51.35	58.43	70.76
								X-7线虫	15.32	10.24	28.43	23.67	45.67	53.92	54.86
KG线虫	13.68	9.58	29.81	23.43	46.23	53.35	65.85
								实施例1	26.24	21.48	55.68	58.45	113.12	76.95	85.78
实施例2	27.84	21.53	54.97	59.06	113.78	77.54	86.98
								实施例3	26.98	21.74	54.88	57.41	114.96	78.51	87.35
实施例4	24.51	18.65	48.78	51.23	91.25	69.89	65.75
								实施例5	23.89	18.74	49.65	50.98	92.78	69.20	74.62
对照	12.22	8.29	21.71	21.22	32.49	45.68

由表3可以看出，实施例1、实施例2、实施例3、实施例4和实施例5在花生总分枝、结果枝、株高、总荚数、荚果重、百粒重和防虫效果均显著优于单用根瘤菌和单用线虫的效果，且优于单独施用根瘤菌组和线虫组相对于对照的增效之和，这可能是由于二者从不同方面促进花生生长，进而对影响花生生长的其他因素产生了促进作用。应用线虫H06的实施例1、实施例2和实施例3对花生产量及防虫效果显著高于应用线虫X-7的实施例4和应用线虫KG的实施例5。实施例1、实施例2和实施例3的总荚数、荚果重以及百粒重分别比两者单用增效之和提高了24.13～31.90％，70.85～76.52％和8.08～11.49％，其防虫效果提高了9.74～11.31％。综合分析表明播种期施用花生根瘤菌和结荚期施用H06线虫，可以达到杀虫增产效果。

Claims (6)

1.一种高产、无公害的花生栽培方法，其特征在于，包括以下步骤:

(1)选择疏松和通气性好的土壤进行整地，挖花生种植沟穴，花生起垄覆膜栽培，垄高8～12cm，宽55～65cm，播种双行，每穴播种两粒，制得播种后地块；

(2)将根瘤菌肥与水混合稀释，配制根瘤菌浓度为0.6～1.0亿·mL^-1的根瘤菌肥稀释液，将根瘤菌肥稀释液喷施于步骤(1)制得的播种后地块的播种沟穴的种子周围2～3cm的范围内，每穴喷施量为0.20～0.30mL，喷施根瘤菌肥稀释液后覆土，进行正常田间管理；

(3)在花生结荚期施用符合检测条件的昆虫病原线虫，每穴施用量为20000～30000条，施用后进行正常田间管理；

上述符合检测条件为同时满足如下a和b的要求：

a、分别将浓度为20亿·mL^-1、1×10⁶·mL^-1、4×10⁵·mL^-1、2×10⁵·mL^-1、4×10⁴·mL^-1的根瘤菌溶液与稀释为500IJS·mL^-1昆虫病原线虫悬浮液按体积比100:1比例混合，在24～26℃的条件下放置24h检测，昆虫病原线虫存活率均为90％以上；

b、分别将根瘤菌浓度为4×10⁵·mL^-1和昆虫病原线虫浓度为100、200、400IJS·mL^-1的混合液、昆虫病原线虫浓度为100、200、400IJS·mL^-1的清水昆虫病原线虫悬浮液和蒸馏水分别处理蛴螬，在24～26℃的条件下分别处理24、48、72、96h，昆虫病原线虫侵染率差异不显著，且混合液与清水昆虫病原线虫悬浮液的侵染率之差不高于5％。

2.如权利要求1所述的高产、无公害的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤(1)中整地播种时间北方地区为5月5～15日。

3.如权利要求1所述的高产、无公害的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤(1)中播种深度为3～7cm。

4.如权利要求1所述的高产、无公害的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤(3)中昆虫病原线虫的施用采用如下方式：

昆虫病原线虫悬浮液采用穴施、喷雾器喷施或直接浇水灌溉的方式进行施用。

5.如权利要求1所述的高产、无公害的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤(3)中昆虫病原线虫悬浮液的线虫浓度为500～1000IJS·mL^-1。

6.如权利要求1所述的高产、无公害的花生栽培方法，其特征在于，所述步骤(3)中的昆虫病原线虫为Heterorhabdits bacteriophora H06。