CN103808851A - 一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法 - Google Patents
一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103808851A CN103808851A CN201210460618.7A CN201210460618A CN103808851A CN 103808851 A CN103808851 A CN 103808851A CN 201210460618 A CN201210460618 A CN 201210460618A CN 103808851 A CN103808851 A CN 103808851A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- described method
- solution
- alcohol
- organic solvent
- thin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，涉及一种检测方法，具体涉及一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，所述方法包括如下步骤：⑴10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液制备；⑵样品溶液制备；⑶薄层色谱检测。本发明有益效果是检测10-去乙酰基紫杉醇方法简单、实用和经济。
Description
技术领域
本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法。
背景技术
紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物,也是目前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物。同位素示踪表明，紫杉醇只结合到聚合的微管上，不与未聚合的微管蛋白二聚体反应。细胞接触紫杉醇后会在细胞内积累大量的微管，这些微管的积累干扰了细胞的各种功能，特别是使细胞分裂停止于有丝分裂期，阻断了细胞的正常分裂。通过Ⅱ-Ⅲ临床研究，紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌，对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效。
10-去乙酰基紫杉醇可以通过化学合成为紫杉醇，所以检测10-去乙酰基紫杉醇是重要的。
常规的10-去乙酰基紫杉醇检测方法为HPLC检测，填料为反相填料。流动相为乙腈-水，检测器是紫外检测器。
发明内容
常规的HPLC检测10-去乙酰基紫杉醇方法要求高：
⑴需要一台HPLC，一台HPLC价格通常10万以上，HPLC价格高，普及率低；
⑵HPLC需要有专业的人员操作、维护和维修；
⑶HPLC检测需要大量溶剂，大量溶剂的使用对环境也造成了极大的污染；
⑷HPLC检测每次只能检测一个样品，检测时间也长。
本发明提供了一种易于操作、能定性半定量和经济的薄层色谱检测方法，该方法解决HPLC检测的部分弊端。
一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，所述方法包括如下步骤：
⑴称取10-去乙酰基紫杉醇0.1～1mg，用1ml有机溶剂溶解，得到10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液；
⑵将红豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，浓缩浸提溶液至原体积的1/3～1/2，用等体积有机溶剂Ⅰ萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，称取蒸干粉末0.1～1mg，用1ml有机溶剂Ⅱ溶解，得到样品溶液；
⑶吸取步骤⑴和⑵制备的溶液各5～10μl，点在同一硅胶G薄层板上，展开剂是卤代烃和醇，卤代烃和醇的体积比是100：10～1，展开，取出，晾干，用5～10%浓硫酸乙醇溶液显色，用105℃烘干薄层板至斑点显色。
所述方法步骤⑴中的有机溶剂优选为甲醇、无水乙醇或N，N-甲基甲酰胺，N，N-甲基甲酰胺溶解10-去乙酰基紫杉醇溶解度高，甲醇和无水乙醇沸点低。
所述方法步骤⑴红豆杉原料优选为树皮、枝叶和树根。
所述方法步骤⑵醇溶液优选为甲醇、无水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
所述方法步骤⑵有机溶剂Ⅰ优选为二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
所述方法步骤⑵有机溶剂Ⅱ优选为甲醇、无水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺，N，N-二甲基甲酰胺溶解10-去乙酰基紫杉醇溶解度高，甲醇和无水乙醇沸点低。
所述方法步骤⑶卤代烃优选为二氯甲烷或三氯甲烷。
所述方法步骤⑶醇优选为甲醇或无水乙醇。
本发明有益效果是：
⑴10-去乙酰基紫杉醇检测方法简单、实用和经济。
⑵一次检测可以同时检测多个样品。
⑶检测结果可以定性和半定量。
具体实施方式
下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，所述方法包括如下步骤：
⑴称取10-去乙酰基紫杉醇标准品0.5mg，用1ml甲醇超声溶解，得到10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液，浓度0.5mg/ml，作为定性和半定量的标准；
⑵将红豆杉树皮、枝叶和树根粉碎，粉碎后用无水乙醇浸提三次，合并三次浸提溶液，减压蒸馏法浓缩浸提溶液，真空度0.8MPa，水浴温度55℃，浓缩至原体积的1/3，用等体积二氯甲烷萃取浓缩液三次，合并三次萃取相，减压蒸馏法蒸干萃取相，真空度0.4MPa，水浴温度35℃，称取蒸干粉末0.5mg，用1ml甲醇超声溶解，得到样品溶液；
⑶用玻璃点样毛细管吸取步骤⑴和⑵制备的溶液各10μl，点在同一硅胶G薄层板、距板底1cm处同一水平线上，展开剂是三氯甲烷和无水乙醇，三氯甲烷和无水乙醇的体积比是100：5，平衡5～10min，展开，展开至距板顶1cm处取出，取出，用热风吹干，用10%浓硫酸乙醇溶液显色，用105℃烘干薄层板至斑点显色。
Claims (8)
1.一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法，所述方法包括如下步骤：
⑴称取10-去乙酰基紫杉醇0.1～1mg，用1ml有机溶剂溶解，得到10-去乙酰基紫杉醇对照品溶液；
⑵将红豆杉原料粉碎，用醇溶液浸提三次，合并三次浸提溶液，浓缩浸提溶液至原体积的1/3～1/2，用等体积有机溶剂Ⅰ萃取三次，合并三次萃取相，蒸干萃取相，称取蒸干粉末0.1～1mg，用1ml有机溶剂Ⅱ溶解，得到样品溶液；
⑶吸取步骤⑴和⑵制备的溶液各5～10μl，点在同一硅胶G薄层板上，展开剂是卤代烃和醇，卤代烃和醇的体积比是100：10～1，展开，取出，晾干，用5～10%浓硫酸乙醇溶液显色，用105℃烘干薄层板至斑点显色。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步骤⑴有机溶剂是甲醇、无水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步骤⑴红豆杉原料是树皮、枝叶和树根。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步骤⑵醇溶液是甲醇、无水乙醇、甲醇水溶液或乙醇水溶液。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步骤⑵有机溶剂Ⅰ是二氯甲烷、三氯甲烷或乙酸乙酯。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步骤⑵有机溶剂Ⅱ是甲醇、无水乙醇或N，N-二甲基甲酰胺。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步骤⑶卤代烃是二氯甲烷或三氯甲烷。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步骤⑶醇是甲醇或无水乙醇。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210460618.7A CN103808851A (zh) | 2012-11-15 | 2012-11-15 | 一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210460618.7A CN103808851A (zh) | 2012-11-15 | 2012-11-15 | 一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103808851A true CN103808851A (zh) | 2014-05-21 |
Family
ID=50705927
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210460618.7A Pending CN103808851A (zh) | 2012-11-15 | 2012-11-15 | 一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103808851A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107421943A (zh) * | 2017-09-04 | 2017-12-01 | 江苏红豆杉生物科技股份有限公司 | 红豆杉中10‑dab快速半定量测量方法 |
| CN110531000A (zh) * | 2019-09-20 | 2019-12-03 | 杭州师范大学 | 一种用于区分白豆杉和云南红豆杉的代谢标志物及其检测方法 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5750709A (en) * | 1993-03-12 | 1998-05-12 | Aphios Corporation | Method and apparatus for isolating therapeutic compositions from source materials |
| JP2002502613A (ja) * | 1998-02-06 | 2002-01-29 | インデナ・ソチエタ・ペル・アツィオーニ | バッカチンの製造方法 |
| US20060281914A1 (en) * | 2005-06-10 | 2006-12-14 | Florida State University Research Foundation, Inc. | Beta-lactam synthesis |
| CN101128449A (zh) * | 2005-02-24 | 2008-02-20 | 塞里法姆公司 | 制备多西他赛的方法 |
| CN101460473A (zh) * | 2006-04-03 | 2009-06-17 | 药物热化学品公司 | 热提取方法和产物 |
| CN101477102A (zh) * | 2008-12-10 | 2009-07-08 | 上海康桥中药饮片有限公司 | 南方红豆杉饮片质量标准及其检测方法 |
| CN101684451A (zh) * | 2008-09-28 | 2010-03-31 | 中国医学科学院药物研究所 | 一种水解紫杉烷类的7-木糖基团及13-侧链的微生物 |
-
2012
- 2012-11-15 CN CN201210460618.7A patent/CN103808851A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5750709A (en) * | 1993-03-12 | 1998-05-12 | Aphios Corporation | Method and apparatus for isolating therapeutic compositions from source materials |
| JP2002502613A (ja) * | 1998-02-06 | 2002-01-29 | インデナ・ソチエタ・ペル・アツィオーニ | バッカチンの製造方法 |
| CN101128449A (zh) * | 2005-02-24 | 2008-02-20 | 塞里法姆公司 | 制备多西他赛的方法 |
| US20060281914A1 (en) * | 2005-06-10 | 2006-12-14 | Florida State University Research Foundation, Inc. | Beta-lactam synthesis |
| CN101460473A (zh) * | 2006-04-03 | 2009-06-17 | 药物热化学品公司 | 热提取方法和产物 |
| CN101684451A (zh) * | 2008-09-28 | 2010-03-31 | 中国医学科学院药物研究所 | 一种水解紫杉烷类的7-木糖基团及13-侧链的微生物 |
| CN101477102A (zh) * | 2008-12-10 | 2009-07-08 | 上海康桥中药饮片有限公司 | 南方红豆杉饮片质量标准及其检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| KANG WANG 等: "Microbial hydrolysis of 7-xylosyl-10-deacetyltaxol to 10-deacetyltaxol", 《JOURNAL OF MOLECULAR CATALYSIS B: ENZYMATIC》, vol. 68, 26 November 2010 (2010-11-26), pages 250 - 255, XP027596860, DOI: doi:10.1016/j.molcatb.2010.11.013 * |
| 李效贤 等: "南方红豆杉的鉴别研究", 《中药材》, vol. 34, no. 4, 30 April 2011 (2011-04-30), pages 538 - 540 * |
| 赵俊宏 等: "新乡红豆杉中多种紫杉烷类化合物的反相高效液相色谱分析", 《化学研究》, vol. 22, no. 3, 31 May 2011 (2011-05-31), pages 8 - 10 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107421943A (zh) * | 2017-09-04 | 2017-12-01 | 江苏红豆杉生物科技股份有限公司 | 红豆杉中10‑dab快速半定量测量方法 |
| CN110531000A (zh) * | 2019-09-20 | 2019-12-03 | 杭州师范大学 | 一种用于区分白豆杉和云南红豆杉的代谢标志物及其检测方法 |
| CN110531000B (zh) * | 2019-09-20 | 2022-07-12 | 杭州师范大学 | 一种用于区分白豆杉和云南红豆杉的代谢标志物及其检测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105203657A (zh) | 酸枣仁对照提取物及其制备方法和应用 | |
| Zhang et al. | Isolation and identification of phenolic compounds in Chinese purple yam and evaluation of antioxidant activity | |
| Oettl et al. | Dereplication of depsides from the lichen Pseudevernia furfuracea by centrifugal partition chromatography combined to 13C nuclear magnetic resonance pattern recognition | |
| CN103822983A (zh) | 一种高效分离和测定草坪草内源激素的方法 | |
| Zhang et al. | A new ionic liquid–water–organic solvent three phase microextraction for simultaneous preconcentration flavonoids and anthraquinones from traditional Chinese prescription | |
| CN102293789B (zh) | 一种萃取灵芝子实体三萜类化合物的方法 | |
| CN102175790B (zh) | 一种同时检测苹果中五种多酚并进行品种识别的hplc方法 | |
| CN103808850A (zh) | 一种红豆杉中10-去乙酰基巴卡亭ⅲ的薄层色谱检测方法 | |
| CN106198832B (zh) | 一种强力枇杷露的生产质量控制方法 | |
| CN103800388B (zh) | 一种黄绿蜜环菌抗氧化活性组分的制备方法及其应用 | |
| Xing et al. | Functional annotation map of natural compounds in traditional Chinese medicines library: TCMs with myocardial protection as a case | |
| Qu et al. | A sensitive liquid chromatographic–mass spectrometric method for simultaneous quantification of six iridoid glycosides from Zhi-zi-chi Decoction in rat plasma and its application to a pharmacokinetic study | |
| CN109444290A (zh) | 车前草药材uplc特征图谱的构建方法和检测方法 | |
| CN104569192A (zh) | 一种大叶千斤拔的质量检测方法 | |
| CN103808851A (zh) | 一种红豆杉中10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法 | |
| CN103784480B (zh) | 黄绿蜜环菌抗氧化活性组分的制备方法及其应用 | |
| CN104997840A (zh) | 一种异叶青兰五环三萜类组分的样品前处理方法及其应用 | |
| CN103808852A (zh) | 一种红豆杉中紫杉醇的薄层色谱检测方法 | |
| CN103808853A (zh) | 一种红豆杉中7-木糖-10-去乙酰基紫杉醇的薄层色谱检测方法 | |
| CN106680403A (zh) | 一种检测铁皮石斛中石斛酚的方法 | |
| CN103808854A (zh) | 一种红豆杉中巴卡亭ⅲ的薄层色谱检测方法 | |
| CN103940926B (zh) | 一种快速检测大黄种子中抗氧化成分的方法 | |
| Zhou et al. | Evaluation of microwave‐assisted extraction for aristolochic acid from Aristolochiae Fructus by chromatographic analysis coupled with nephrotoxicity studies | |
| Fan et al. | Simultaneous determination of esculetin, quercetin-3-O-β-D-glucuronide, quercetin-3-O-β-D-glucuronopyranside methyl ester and quercetin in effective part of Polygonum perfoliatum L. using high performace liquid chromatography | |
| CN103197005B (zh) | 一种白桦树皮中白桦脂酸、白桦脂醇和齐墩果酸的检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20140521 |