CN103585119A - 一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂及其制备方法。通过制备依前列醇-环糊精包合物解决了目前依前列醇制剂中存在的稳定性和血管刺激性等问题，大大提高了患者的顺应性、降低了给药刺激性。同时，本发明公开了一种制备工艺简单、稳定性高、刺激性低、安全性好的依前列醇及其药用盐的稳定化制剂的制备方法，降低了生产成本、可工业化制备，满足了临床应用上对依前列醇及其药用盐制剂的需求。

Description

一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂及其制备方法。

背景技术

依前列醇，又名前列环素(PGX)、前列腺素I2(PGI2)，为血管内皮细胞产生的花生四烯酸代谢产物，能抑制血小板聚集，对冠脉、全身血管和肺血管有强烈舒张作用。临床上用于不稳定型心绞痛、心肌梗死、顽固性心衰、外周血管痉挛性疾病及肺动脉高压，其抗血小板聚集作用可用于防止血栓形成，用于治疗某些心血管疾病和血液透析时作为抗凝剂；末梢血管病如雷诺病，用药后明显减少发作次数和发作时间；也用于血小板消耗综合征及减少血小板在体外循环中的损失等。

目前依前列醇已上市的剂型是粉针剂Flolan®(GlaxoSmithKline)，每支冻干小瓶包含0.5mg 或1.5mg依前列醇，3.76mg甘氨酸，2.93mg氯化钠和50mg甘露醇。还可加入氢氧化钠以便调节pH。另外还配有无菌稀释剂，含有94mg甘氨酸，73.5mg氯化钠，氢氧化钠(调节pH)，适量注射用水至50ml的玻璃瓶中，重新配制的药液具有10.2~10.8的pH。由于依前列醇的化学性质不稳定，半衰期较短，因此在临床使用时需使用输注泵通过中心静脉导管持续输注给药，虽然可以缓解患者的病痛，但中心静脉输注给药方式需要对患者进行插管手术，给患者带来额外痛苦的同时也极为不便。

鉴于依前列醇的化学性质不稳定，尤其是潜在的水解不稳定性使得它难以研发成稳定制剂。为此，国内外研究人员进行了各种研究以期开发出稳定化的依前列醇制剂。

中国授权专利CN101410119B公开了依前列醇在23℃，pH 9.3条件下10小时降解50％，因此，将其开发成稳定的制剂需首先解决依前列醇的稳定性问题。该申请中提供了一种pH＞11的碱化试剂的药物组合物，在碱化试剂构成的高pH条件下，依前列醇溶液的稳定性显著提高，其在15~30℃条件下能保存24~48小时依然保持90％的含量不降解。考虑到临床静脉给药时对于患者较为适宜的pH范围为4~9，pH过高或过低都容易引起刺激性，该专利所述方法虽然通过调节pH 值一定程度上解决了依前列醇的稳定性问题，但存在静脉给药的安全隐患以及患者血管刺激产生的不适感等副作用。因此，有必要开发一种既能增强依前列醇稳定性，同时又能显著降低给药刺激性的依前列醇及其药用盐的稳定化制剂。

经过研究，我们发现可以采用环糊精包合技术来解决该问题。目前环糊精包合技术已在医药领域有了广泛的应用。实际证明，环糊精及其衍生物是一类优质的包合材料，主要有下列几个方面的应用：增加药物的水溶性；提高药物的稳定性；促进药物吸收，提高药物的生物利用度；减轻药物对机体的刺激及副作用；作为缓释和靶向制剂的载体材料。目前开发研究的环糊精及其衍生物已达数百种之多，但由于这些化合物必须同时满足好的水溶性、适当的分子包合特性、生物活性小尤其是低的肾毒性等诸多要求，因此，能够作为药用辅料使用的环糊精衍生物并不多。目前研究得较多的β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精等。本发明通过将依前列醇以及药用盐与环糊精或其衍生物进行包合，一方面显著增强了依前列醇的稳定性，另一方面极大地降低了给药刺激性，从而提高了患者的用药顺应性，克服了传统依前列醇制剂和现有技术中对依前列醇及其药用盐研究中存在的各种缺陷和不足。

发明内容

本发明的目的是通过环糊精包合技术增强依前列醇及其药用盐制剂的稳定性，同时大幅度降低依前列醇制剂的给药刺激性，从而提高患者用药顺应性。本发明提供了一种制备工艺简单、稳定性高、刺激性低、安全性好的依前列醇及其药用盐的稳定化制剂，以满足临床应用上对依前列醇及其药用盐制剂的需求。

结合已有的研究成果，本发明目的是通过如下技术方案实现：

一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂，该稳定化制剂中含有包含0.5％(重量)～5.0％(重量)的依前列醇及其药用盐、0.5％(重量)～10.0％(重量)的环糊精及其衍生物、85.0％(重量)～98.0％(重量)的冻干支撑剂以及其他药学上可接受的赋形剂。

其中，依前列醇及其药用盐包括依前列醇钠盐。

其中，所述环糊精及其衍生物选自α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、羟丙基-α-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精、羧甲基-β-环糊精、二甲基-β-环糊精和叔丁基醚-β-环糊精中的一种或多种。

其中，所述冻干支撑剂含有必需成分甘露醇。

其中，所述冻干支撑剂中还含有所山梨醇、海藻糖、乳糖和蔗糖中一种或多种；其中述甘露醇与其他糖类的质量比为1∶4～10∶1。

一种制备包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂，该制备方法包括如下步骤：

（1）称取处方一定量环糊精及其衍生物，于适量放冷的注射用水（温度5～20℃）中溶解，持续搅拌5~20min，得到环糊精饱和溶液；

（2）在维持环糊精饱和溶液的温度（5～20℃）的同时，往其中缓缓加入依前列醇及其药用盐，充分搅拌使其溶解，并持续搅拌10~30min，得到依前列醇及其药用盐-环糊精包合溶液；

（3）向步骤（2）中制得的往依前列醇及其药用盐-环糊精包合溶液中加入冻干支撑剂并充分搅拌溶解，然后将所得溶液通过0.2～0.6μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶并半压塞后送入冻干机；

（4）对产品进行冷冻干燥，冷冻干燥条件为：预冻温度为-40℃～-20℃，真空度≤500mbar、抽真空温度为-30℃～-20℃，主干燥温度为0～30℃、主干燥真空度≤500mbar；

（5）冷冻干燥完成后充氮气压塞即得。

其中，所述稳定化制剂为冻干粉针。

其中，所述稳定化制剂在用注射用水复溶解后的溶液pH值为6.0~8.0。

其中，所述稳定化制剂通过静脉注射直接给药。

本发明制备所得的依前列醇及其药用盐稳定化制剂为白色冻干粉针剂，每支冻干粉针中依前列醇及其药用盐的含量为0.5～1.5mg，本品在使用10ml注射用水进行复溶解后所得药液的pH值为6.0～8.0，其它各项指标均符合注射剂要求。

利用本发明的技术方案，特别是利用本发明中优选的稳定化制剂组合方案，可制备不同依前列醇及其药用盐含量的稳定化制剂，所述稳定化制剂在注射剂给药适宜的pH范围内能保持很好的稳定性，相比依前列醇传统制剂既避免了插管手术给患者带来的痛苦，同时还能极大地降低由强碱性pH（pH＞10）给患者带来的给药刺激性，减轻患者注射时的疼痛，增强了患者的顺应性。本发明的环糊精包合制备工艺方法简单易行，适用于大量制备和工业化生产依前列醇稳定化制剂。关于依前列醇及其药用盐-环糊精包合稳定化制剂未见任何文献和公开报道。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明的内容所实现的技术方案均属于本发明的范围。显然，根据本发明的内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明的基本技术思想的前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

实施例1

处方：

依前列醇 0.5g

α-环糊精 1.5g

甘露醇 50g

*注射用水 加至1000mL

制成1000ml

* 注射用水在冷冻干燥过程中将被去除

制备工艺：

（1）称取α-环糊精1.5g，于约850ml放凉的注射用水（温度5℃）中溶解，持续搅拌10min，得到环糊精饱和溶液；

（2）在维持环糊精饱和溶液的温度（5℃）的同时，往其中缓缓加入0.5g依前列醇，充分搅拌使其溶解，并持续搅拌10min，再加入剩余量放凉的注射用水，得到依前列醇-环糊精包合溶液；

（3）往依前列醇-环糊精包合溶液中加入50g甘露醇并充分搅拌溶解，然后将所得溶液通过0.6μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶并半压塞后送入冻干机；

（4）对产品进行冷冻干燥，冷冻干燥条件为：预冻温度为-40℃，真空度≤500mbar、抽真空温度为-30℃，主干燥温度为10℃、主干燥真空度≤500mbar；

（5）冷冻干燥完成后充氮气压塞即得。

实施例2

处方：

依前列醇 1.5g

β-环糊精 3.0g

甘露醇 40g

*注射用水 加至1000mL

制成1000ml

* 注射用水在冷冻干燥过程中将被去除

制备工艺：

（1）称取β-环糊精1.5g，于约750ml放凉的注射用水（温度10℃）中溶解，持续搅拌20min，得到环糊精饱和溶液；

（2）在维持环糊精饱和溶液的温度（10℃）的同时，往其中缓缓加入1.5g依前列醇，充分搅拌使其溶解，并持续搅拌20min，再加入剩余量放凉的注射用水，得到依前列醇-环糊精包合溶液；

（3）往依前列醇-环糊精包合溶液中加入40g甘露醇并充分搅拌溶解，然后将所得溶液通过0.45μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶并半压塞后送入冻干机；

（4）对产品进行冷冻干燥，冷冻干燥条件为：预冻温度为-30℃，真空度≤500mbar、抽真空温度为-25℃，主干燥温度为20℃、主干燥真空度≤500mbar；

（5）冷冻干燥完成后充氮气压塞即得。

实施例3

处方：

依前列醇钠 1.0g

羟丙基-α-环糊精 2.0g

甘露醇 9g

蔗糖 36g

*注射用水 加至1000mL

制成1000ml

* 注射用水在冷冻干燥过程中将被去除

制备工艺：

（1）称取羟丙基-α-环糊精1.5g，于约800ml放凉的注射用水（温度20℃）中溶解，持续搅拌15min，得到环糊精饱和溶液；

（2）在维持环糊精饱和溶液的温度（20℃）的同时，往其中缓缓加入1.0g依前列醇，充分搅拌使其溶解，并持续搅拌30min，再加入剩余量放凉的注射用水，得到依前列醇-环糊精包合溶液；

（3）往依前列醇-环糊精包合溶液中加入9g甘露醇和36g蔗糖并充分搅拌溶解，然后将所得溶液通过0.22μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶并半压塞后送入冻干机；

（4）对产品进行冷冻干燥，冷冻干燥条件为：预冻温度为-25℃，真空度≤500mbar、抽真空温度为-20℃，主干燥温度为30℃、主干燥真空度≤500mbar；

（5）冷冻干燥完成后充氮气压塞即得。

实施例4

处方：

依前列醇钠 1.0g

α-环糊精 2.0g

甘露醇 114g

海藻糖 56g

*注射用水 加至1000mL

制成1000ml

* 注射用水在冷冻干燥过程中将被去除

制备工艺：

（1）称取α-环糊精2.0g，于约850ml放凉的注射用水（温度5℃）中溶解，持续搅拌10min，得到环糊精饱和溶液；

（2）在维持环糊精饱和溶液的温度（5℃）的同时，往其中缓缓加入1.0g依前列醇钠，充分搅拌使其溶解，并持续搅拌10min，再加入剩余量放凉的注射用水，得到依前列醇钠-环糊精包合溶液；

（3）往依前列醇钠-环糊精包合溶液中加入114g甘露醇和56g海藻糖并充分搅拌溶解，然后将所得溶液通过0.6μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶并半压塞后送入冻干机；

对产品进行冷冻干燥，冷冻干燥条件为：预冻温度为-40℃，真空度≤500mbar、抽真空温度为-30℃，主干燥温度为10℃、主干燥真空度≤500mbar；

（5）冷冻干燥完成后充氮气压塞即得。

实施例5

处方：

依前列醇钠 10.0g

羟丙基-β-环糊精 20.0g

甘露醇 170g

乳糖 17g

*注射用水 加至1000mL

制成1000ml

* 注射用水在冷冻干燥过程中将被去除

制备工艺：

（1）称取羟丙基-β-环糊精20.0g，于约850ml放凉的注射用水（温度5℃）中溶解，持续搅拌10min，得到环糊精饱和溶液；

（2）在维持环糊精饱和溶液的温度（5℃）的同时，往其中缓缓加入10.0g依前列醇钠，充分搅拌使其溶解，并持续搅拌10min，再加入剩余量放凉的注射用水，得到依前列醇钠-环糊精包合溶液；

（3）往依前列醇钠-环糊精包合溶液中加入170g甘露醇和17g乳糖并充分搅拌溶解，然后将所得溶液通过0.6μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶并半压塞后送入冻干机；

（4）对产品进行冷冻干燥，冷冻干燥条件为：预冻温度为-40℃，真空度≤500mbar、抽真空温度为-30℃，主干燥温度为10℃、主干燥真空度≤500mbar；

（5）冷冻干燥完成后充氮气压塞即得。

实施例6

处方：

依前列醇钠 4.0g

γ-环糊精 8.0g

甘露醇 73.3g

山梨醇 14.6g

*注射用水 加至1000mL

制成1000ml

* 注射用水在冷冻干燥过程中将被去除

制备工艺：

（1）称取γ-环糊精8.0g，于约850ml放凉的注射用水（温度5℃）中溶解，持续搅拌10min，得到环糊精饱和溶液；

（2）在维持环糊精饱和溶液的温度（5℃）的同时，往其中缓缓加入4.0g依前列醇，充分搅拌使其溶解，并持续搅拌10min，再加入剩余量放凉的注射用水，得到依前列醇-环糊精包合溶液；

（3）往依前列醇-环糊精包合溶液中加入73.3g甘露醇和14.6g山梨醇并充分搅拌溶解，然后将所得溶液通过0.6μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶并半压塞后送入冻干机；

（4）对产品进行冷冻干燥，冷冻干燥条件为：预冻温度为-38℃，真空度≤500mbar、抽真空温度为-30℃，主干燥温度为10℃、主干燥真空度≤500mbar；

（5）冷冻干燥完成后充氮气压塞即得。

比较实施例 自制依前列醇稳定化制剂与市售普通制剂（Flolan®）的稳定性对比

对采用本发明申请实施例1所制得的依前列醇稳定化制剂与市售普通依前列醇制剂（Flolan®）进行稳定性对比考察，具体过程如下：

试验方法：将上述自制依前列醇稳定化制剂样品用10ml注射用水复溶解，同时将市售普通依前列醇制剂（Flolan®）用其附带专用溶解液进行复溶解，然后将样品于25℃、60±5%RH条件下放置，进行稳定性试验考察，于放样0、2、4、6、8、16、24、48及72h取样进行检测。

检测指标：pH、含量、有关物质

试验结果：见表1及表2

表1 稳定性试验结果（自制依前列醇稳定化制剂）

时间（h）	pH	含量（%）	有关物质（%）
				0	7.53	100.0	0.1
2	7.51	99.8	0.3
				4	7.52	99.6	0.5
6	7.49	99.4	0.7
				8	7.51	99.1	1.0
16	7.50	99.0	1.1
				24	7.49	98.5	1.6
48	7.48	98.6	1.5
				72	7.49	98.4	1.7

表2 稳定性试验结果（市售依前列醇普通制剂-Flolan®）

时间（h）	pH	含量（%）	有关物质（%）
				0	10.50	100.0	0.1
2	10.42	96.5	3.5
				4	10.23	92.3	7.8
6	10.09	88.9	11.1
				8	9.85	82.4	17.7
16	9.52	77.8	22.3
				24	9.41	68.5	31.6
48	9.20	52.4	47.7
				72	9.01	46.3	53.8

从稳定性对比结果来看，市售依前列醇普通制剂在放置6h时含量即已低于90%，已不符合药品质量标准，不能用于临床患者；与此同时，采用环糊精包合制备的自制依前列醇稳定化制剂却在72h保持化学性质稳定，含量仅下降不到2%，由此可见，自制环糊精包合依前列醇稳定化制剂能极其显著地增强依前列醇的稳定性，满足临床用药需求。

试验例 1 依前列醇稳定化制剂的血管刺激性实验

本试验观察了依前列醇稳定化制剂对家兔的血管刺激性反应，试验共设2组，分别为单次给药组和多次给药组，每组各3只动物，单次给药组每只动物给药1次，多次给药组每天给药1次，连续给药7天。两组均采用同体自身对照，依前列醇稳定化制剂复溶解药液 (0.5mg/ml,1ml/kg)右耳注射给药，1ml/只/次，对照侧(左耳)给予等容量生理盐水。

结果显示：给药和观察期间以及取材时观察，给药局部未见明显充血、红肿、溃疡和硬结等异常现象。病理组织学检查给药局部血管未见与药物相关的异常改变。在本试验条件下，依前列醇稳定化制剂浓度为0.5mg/ml，容量1ml/kg时，对血管组织无刺激性损伤作用。

试验例 2 依前列醇稳定化制剂对兔红细胞的体外溶血试验

取洁净试管12只编号，1~5号管为供试品溶液管， 6号管为阴性对照管，7号管为阳性对照管。按下表所示依次加入2%兔红细胞悬液和5％葡萄糖注射液，混匀后，放置于37℃±0.5℃恒温箱放置半小时；然后分别加入不同量的复溶解后的依前列醇稳定化制剂或蒸馏水，摇匀，置37℃±0.5℃恒温箱中温育。开始时每隔15分钟观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次，观察3小时，测定方法如表3所示。溶液澄明红色，管底无红细胞残留时为完全溶血；溶液澄明红色或棕色，管底有少量红细胞残留为部分溶血；红细胞全部下沉，上层液体无色澄明为无溶血；虽不溶血，溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，振摇后不分散，表明有红细胞凝聚，实验结果如表4所示。

表3 依前列醇稳定化制剂复溶解后药液（0.5mg/ml）测试方法

试管编号	1	2	3	4	5	6	7
								2%红细胞混悬液（ml）	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5	2.5
5%葡萄糖注射液（ml）	2.0	2.1	2.2	2.3	2.4	2.5	-
								供试品（ml）	0.5	0.4	0.3	0.2	0.1	-	-
注射用水（ml）	-	-	-	-	-	-	2.5

表 4 浓度为0.5mg/ml的依前列醇稳定化制剂复溶解后药液对2％兔红细胞混悬液的溶血试验结果

注： 1～5号管为供试品A液管，6号管为阴性对照，7号管为阳性对照

由上述结果可知，在本试验条件下，浓度为0.5mg/ml依前列醇稳定化制剂复溶解后药液在体外对兔红细胞无溶血作用，不引起红细胞凝聚，可供注射使用。

Claims (9)

1.一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂，其特征在于，该稳定化制剂中含有0.5％(重量)～5.0％(重量)的依前列醇及其药用盐、0.5％(重量)～10.0％(重量)的环糊精及其衍生物、85.0％(重量)～98.0％(重量)的冻干支撑剂以及其他药学上可接受的赋形剂。

2.根据权利要求1所述的一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂稳定化制剂，其特征在于，依前列醇及其药用盐包括依前列醇钠盐。

3.根据权利要求1所述的一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂，其特征在于，所述环糊精及其衍生物选自α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、羟丙基-α-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精、羧甲基-β-环糊精、二甲基-β-环糊精和叔丁基醚-β-环糊精中的一种或多种。

4.根据权利要求1至2中任一项所述的一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂，其特征在于，所述冻干支撑剂含有必需成分甘露醇。

5.根据权利要求3所述的一种包含依前列醇及其药用盐的稳定化制剂稳定化制剂，其特征在于所述冻干支撑剂中还含有山梨醇、海藻糖、乳糖和蔗糖中一种或多种；其中甘露醇与其他糖类的质量比为1∶4～10∶1。

6.一种制备权利要求1 至4中任一项所述的稳定化制剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：

（1）称取处方量环糊精及其衍生物，于适量放冷的注射用水（温度5～20℃）中溶解，持续搅拌5~20min，得到环糊精饱和溶液；

（2）在维持环糊精饱和溶液的温度（5～20℃）的同时，往其中缓缓加入依前列醇及其药用盐，充分搅拌使其溶解，并持续搅拌10~30min，得到依前列醇及其药用盐-环糊精包合溶液；

（3）向步骤（2）中制得的依前列醇及其药用盐-环糊精包合溶液中加入冻干支撑剂并充分搅拌溶解，然后将所得溶液通过0.2～0.6μm微孔滤膜过滤，装入西林瓶并半压塞后送入冻干机；

（4）对产品进行冷冻干燥，冷冻干燥条件为：预冻温度为-40℃～-20℃，真空度≤500mbar、抽真空温度为-30℃～-20℃，主干燥温度为0～30℃、主干燥真空度≤500mbar；

（5）冷冻干燥完成后充氮气压塞即得。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的稳定化制剂及其制备方法，其特征在于，所述稳定化制剂为冻干粉针。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的稳定化制剂及其制备方法，其特征在于，所述稳定化制剂用注射用水复溶解后的溶液pH值为6.0~8.0。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的稳定化制剂及其制备方法，其特征在于，所述稳定化制剂通过静脉注射直接给药。