CN103562158B - 提高植物质量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种提高植物质量的方法，所述方法包括使用改善植物质量用量的含有活性成分的微量营养素处理作物和/或作物生长区域或意在种植作物的区域和/或植物繁殖体。

Description

提高植物质量的方法

技术领域

本发明涉及一种提高植物质量的新方法，所述方法包括以改善植物质量用量的含有微量营养素的活性成分处理作物和/或作物生长区域或意在种植作物的区域和/或作物繁殖体。

背景技术

锌是植物和人类的正常生长、发育和健康的必需微量营养素。目前，已知大面积农业用地缺锌，造成作物产量和粮食作物的营养品质严重降低。在许多国家，锌缺乏仍然处于无法被识别或被低估的状况，没有进行处理。因此，迫切需要在这些国家中了解和解决锌缺乏状况，以促进作物生产和人类健康。锌对作物在各种胁迫因子如干旱、高温和盐条件下有更好的耐受性也显得尤为重要。

对土壤和/或植物叶片上应用锌肥，对解决作物缺锌问题提供了一个简单而高效的方案，并增加了食物的锌浓度。这一策略大大防止粮食生产的不必要的损失，并有助于改善公众健康。例如，大米和小麦籽粒中锌的富集可以在印度每年拯救高达48,000名儿童的生命。对于世界各地数以百万计的人们，每天额外几毫克的锌可以造成疾病或死亡与健康高效的生活之间的差异。通过确保作物具有充足的锌供给，我们可以通过提供显著的健康、社会和经济效益帮助解决这个全球性问题(Zinc Fertilizer Brochure 2009,publishedby theInternational Zinc Association IFA；see also Comparative Quantification/Global and Regional Burden of Diseases Attributable to Selected Major RiskFactors of Health Risks,Ezzati,Lopez,Rodgers,Murray(eds.),Chapter 5–ZincDeficiency,WHO,2004)。

锌对于植物、动物和人类的正常健康生长与繁殖是必需的。当植物可利用的锌的供给不足时，将削弱作物产量和作物的产品质量。在植物中，锌在许多重要的生化通路中作为众多不同的酶和蛋白质的结构成分或调控辅助因子发挥着关键作用。当供给植物的锌不足时，锌不能正确发挥其生理作用从而导致植物生长不利，会导致植物发生可见的应激症状，这些症状会随物种发生改变且可包括：发育迟缓(高度降低)、脉间失绿(脉之间叶片变黄)、失绿叶片的青铜病、小且异常形状叶片和/或叶片的发育迟缓和玫瑰花环(其中叶片在缩短的茎上形成螺纹)。没有明显可见症状的所谓隐形缺乏可导致20％植物产量的损失。锌缺乏土壤导致的隐形的缺乏可造成农民显著的经济损失。因此，通过土壤测试或作物分析尽早鉴定锌缺乏土壤是必要的。一旦鉴定出来，锌缺乏的土壤能够很容易地通过锌肥处理对作物提供充足的锌供给，其中硫酸锌是迄今为止最广泛使用的肥料(cf.Zinc in Soilsand Crop Nutrition by B.J.Alloway,2^ndEd.Brussels,Paris,2008)。

此外，已知相比未处理的葡萄植株，用硫酸锌或代森锌杀菌剂处理的葡萄植株具有明显的更大的产量和生长(参见ISHS Acta Horticulturae(园艺)1987，199，157-161)。而在大麦中也已经表明，预防缺锌的并非由于产量的影响(cf.EPPO Bull.，1981，11，277-285)。铜、锰和锌等微量营养素可通过含有这类微量营养素杀菌剂供应到植物中。然而，这取决于该金属与其他分子形成的络合物的类型，是否高效或低效地吸收微量营养素。因此，人们发现，与代森锌中的锌相比，在某些福美锌制剂中的锌不容易被吸收(cf.Universityof Florida,IFAS Extension,HS1159，2009)。

此外，与杀虫剂一起向植物，更具体为土豆递送氧化锌的组合物已被公开(参见国际专利公布号95/20874)。

发明内容

本发明提供一种提高植物的质量的方法，特征是，用改善植物质量用量的含有微量营养素的活性成分处理作物和/或作物生长的区域或有意种植作物的区域和/或植物繁殖体，这种活性成分优选同时兼具杀真菌活性。

优选地，所述含有微量营养素的活性成分选自含有至少一种金属离子的活性成分，所述金属离子选自下组：锌、锰、钼、铁和铜或微量营养素硼。

更优选地，这些活性成分选自一类含有锌的化合物如丙森锌、多养霉素Z(锌盐)、代森锌、福美锌、噻二唑锌(zinc thiodazole)、环烷酸锌以及代森锰锌(也包含锰)；或选自含有锰的化合物如代森锰、代森联以及代森锰铜(也包含铜)；或选自含有铁的化合物如福美铁；或选自含有铜的化合物如波尔多混合剂、氯氧化铜、三元硫酸铜、氧化铜、辛酸铜、氢氧化铜、喹啉铜以及环烷酸铜。

更优选地，所述活性成分选自丙森锌和代森锰锌。

最优选地，所述活性成分是丙森锌。

众所周知以上所提及的含有微量营养素的活性成分具有杀真菌特性，并被用于控制各种植物病害(cf.The Pesticide Manual,15th Edition 2009)。

术语“植物质量”(植物的质量)被定义为作物和/或其产品的状况，所述状况通过几个单独的或者彼此组合的方面来确定，比如产量(例如生物质增加、有价值成分含量的增加和/或某些成分含量或组成的改善)以及植物长势(plant vigor)(例如植物生长的改善和/或叶片更绿)。

植物质量的一个指标，尤其是针对植物状况的指标是其产量，“产量”应理解为植物生产的具有经济价值的任何植物体部分或产品，例如籽粒、叶子、根、本来意义上的果实、蔬菜、坚果、种子、木材(在林业方面)或甚至花(在园艺和观赏植物方面)。此外植物产品可能在收获后还将被进一步利用和/或加工。

根据本发明，作物的“增产”是指相比在同等条件下没有应用含有微量营养素的活性成分的作物生产的同样产品的产量，各作物的产品产量以可测量的量增加。增加的产量尤其可以通过下列改善的作物特性来表征：

·植株重量增加，

·植株高度增加，

·锌含量增加，

·铁含量增加，

·钙含量增加，

·生物质的增加，如更高的鲜重(FW)和/或干重(DW)，

·更高的籽粒产量，

·更高的酸度，

·更高的花青素含量，

·分蘖更多，

·叶片更大，

·新梢生长增加，

·**增加(例如可溶性蛋白)，

·油含量增加，

·淀粉含量增加，

·色素含量增加，

·营养素含量增加，

·蛋白含量增加，

·维生素含量增加(例如维生素B₁、B₂、C和E)，

·脂肪酸含量增加，

·代谢产物含量增加，

·类胡萝卜素含量增加(例如维生素A)，

·必需氨基酸的量增加，

·改善的营养组成，

·改善的蛋白质组成，

·改善的脂肪酸组成，

·改善的代谢产物组成，

·改善的类胡萝卜素组成，

·改善的糖组成，

·改善的氨基酸组成，

·改善或优化的果实颜色，

·改善的叶色，

·更高的存储容量，

·所收获产品更高的可加工性。

根据本发明的一个实施方案，相比未进行处理的各对照植物，依据其对作物产量的改善能力可提高至少5％、10％、25％、50％或甚至更多。

另一个针对植物质量，尤其针对作物状况的指标是“植物长势”。植物长势在体现在几个方面，如总体视觉外观和生长。植物长势的改善尤其可以通过以下改善的植物特性来表征：

·改善的植物活力，

·改善的植物生长，

·改善的植物发育，

·改善的视觉外观，

·改善的植物支撑(更少的植物倒伏)，

·改善的萌发，

·增强的根系生长和/或更发达的根系，

·增强结瘤作用，尤其是根瘤菌结瘤，

·更大的叶片，

·更大的大小，

·植株重量增加，

·植株鲜重增加(FW)，

·植株干重增加(DW)，

·植株高度增加，

·增加的分蘖数，

·增加的新梢生长，

·增加的根系生长(广泛的跟系统)，在贫瘠土壤或不利气候时增加的产量，

·增强的光合活性，

·增加的色素含量(例如叶绿素含量)，

·更早开花，

·更早挂果，

·更早和改善的出芽，

·更早的籽粒成熟，

·更好的粒度分布，

·更高的籽粒硬度，

·改善的自卫机制，

·改善的抗逆性和植物对生物和非生物胁迫的抗性，如真菌、细菌、病毒、昆虫、热胁迫、冷胁迫、干旱胁迫、紫外线胁迫和/或盐胁迫，

·更少的非生产性分蘖，

·更少的基生叶死亡，

·所需的投入更少(如肥料或水)，

·更绿的叶子，

·在缩短的生长期内完全成熟，

·所需的肥料更少，

·所需的种子更少，

·更容易收获，

·更快、更一致的成熟，

·更长的储藏期，

·更长的圆锥花序，

·衰老延迟，

·更强和/或更多产的分蘖，

·成分有更好的可提取性，

·提高的种子质量(在随后的季节中播种以用于种子生产)，

·减少的乙烯产生和/或抑制植物对它的反应。

根据本发明的一个实施方案，与未进行处理的各对照植物相比，依据改善的特性类型植物长势分别提高了至少5％、10％、25％、50％，或甚至更多。

根据处理的植物，不同质量参数更优选相比其他增加的。根据处理的作物，以下提到一些质量参数。

根据本发明的一个实施方案，马铃薯的优选质量参数是：

·增加的蛋白质含量(例如可溶性蛋白)，

·增加的淀粉含量，

·增加的生物质如更高的鲜重(FW)和/或干重(DW)，

·增加的锌含量，

·更好的粒度分布。

根据本发明的一个实施方案，水稻的优选质量参数是：

·增加的类胡萝卜素含量(例如维生素A)，

·增加的锌含量，

·增加的铁含量，

·增加的蛋白质含量(例如可溶性蛋白)。

根据本发明的一个实施方案，玉米的优选质量参数是：

·增加的类胡萝卜素含量(例如维生素A)，

·增加的锌含量，

·增加的铁含量，

·增加的蛋白质含量(例如可溶性蛋白)，

·增加的油含量，

·增加的淀粉含量。

根据本发明的一个实施方案，苹果的优选质量参数是：

·增加的钙含量，

·更高的酸度。

根据本发明的一个实施方案，柑橘的优选质量参数是：

·维生素C含量的增加。

根据本发明的一个实施方案，番茄和黄瓜的优选质量参数是：

·增加的钙含量。

根据本发明的一个实施方案，葡萄的优选质量参数是：

·更高的花青素含量，

·更高的酸度。

本发明可使用的所述含有微量营养素的活性成分可作为或以本领域惯用剂型的形式使用，如溶液、乳剂、混悬液、粉末、糊剂等。然后通过本领域惯常方法进行应用。因此，例如，可用包括含有微量营养素的活性成分的制剂，如合适与其他农业化学活性化合物和惯常的添加剂混合进行拌种。还有一种应用类型包括将本发明可使用的物质以其本身或与其他农业化学活性化合物和常用制剂助剂一起配制为制剂形式进行应用，以及有这些制剂制备固体植物处理剂，如颗粒或饵料。

当使用本发明可使用的含有微量营养素的活性成分时，依据应用类型不同，其施用量可在一定范围内变化。对种子进行处理时，含有微量营养素的活性成分的施用量一般为每千克种子10～1000mg，优选每千克种子10～300mg。当使用固体剂型时，含有微量营养素的活性成分的施用量一般为每千克制剂20～800mg，优选每千克制剂30～700mg。

本发明使用的含有微量营养素的活性成分一般以包括至少一种上述提及的含有微量营养素的活性成分的组合物形式进行应用。优选的杀真菌组合物包含农业可接受的添加剂、溶剂、载体、表面活性剂或者补充剂。

根据本发明，载体应被理解为一种自然的或者合成的，有机或者无机的物质，其与活性成分混合或者结合以达到更好的适用性，尤其是应用于植物或植物部分或种子。载体可以是固体或液体，一般为惰性且适合用于农业的物质。

合适的固体或液体载体有：例如铵盐和天然的磨碎矿物质如高岭土、黏土、滑石粉、白垩、石英、绿坡缕石、蒙脱石或者硅藻土，以及磨碎的合成矿物质如细磨硅粉、氧化铝和天然或合成的硅酸盐、树脂、蜡状物、固体肥料、水、醇类,尤其是丁醇、有机溶剂、矿物油和植物油及其衍生物。也可将这些载体混用。固体载体适合于颗粒剂的有：例如压碎并分级的天然矿物质如方解石、大理石、浮石、海泡石、白云石，同时也包括一些合成的有机和无机的食品颗粒和有机材料颗粒如锯末、椰子壳、玉米穗轴和烟草秸秆。

合适的液化气体补充剂或载体都是液体，在室温和大气压下为气态，例如气溶胶喷射剂如丁烷、丙烷、氮气和二氧化碳等。

增粘剂如羧甲基纤维素以及天然和合成的粉末、颗粒和胶乳型的聚合物，如阿拉伯树胶、聚乙烯醇、聚醋酸乙烯酯，或者其他天然磷脂，如脑磷脂、卵磷脂和合成磷脂也能在配方中使用。其他可能的添加剂为矿物和植物油及蜡，任选地为经修饰的。

如果使用水作为补充剂，也可以例如用有机溶剂作为辅助溶剂。合适的有机溶剂主要有：芳香族化合物，如二甲苯、甲苯或烷基萘、含氯芳香族化合物；或含氯脂肪烃的化合物，如氯苯、氯乙烯或二氯甲烷；脂肪烃，如环己烷或石蜡；例如矿物油级分，矿物质和植物油；醇类，如丁醇或乙二醇，及其醚和酯类；酮类，如丙酮、甲乙酮、甲基异丁基甲酮或环己酮；强极性溶剂，如二甲基甲酰胺和二甲基亚砜以及水。

根据本发明的组成成分还可包括其他组分，例如表面活性剂。合适的表面活性剂有乳化剂、分散剂或具有离子或非离子性质的润湿剂，或者这些表面活性剂的混合物。这些的实例有聚丙烯酸盐、木素磺酸盐、苯酚磺酸盐、萘磺酸盐、环氧乙烷与脂肪醇或与脂肪酸或与脂肪胺的缩聚物、取代的苯酚(优选烷基酚或芳基酚)、磷酸酯盐、牛磺酸衍生物(优选牛磺酸烷基酯)、聚乙氧基化醇类或酚类的磷酸酯、多元醇脂肪酯，以及含有硫酸盐、磺酸盐和磷酸盐化合物的衍生物。当应用于水中时，如果其中的一种活性成分和/或一种惰性载体是不溶于水的，那么表面活性剂则是必需的。表面活性剂的比例按本发明组合物重量计为5％～40％。

可以使用着色剂如无机染料，例如氧化铁、氧化钛、普鲁士蓝，以及有机染料，如茜素染料、偶氮染料和金属酞菁染料，以及微量营养素，如铁盐、锰盐、硼盐、铜盐、钴盐、钼盐和锌盐。

如果适宜，也可以存在其他的附加组分，例如保护性胶体、粘结剂、粘合剂、增稠剂、触变物质、渗透液、稳定剂、螯合剂、络合剂。一般来说，通常可以将活性化合物与常用于制剂的固体或液体添加剂结合使用。

一般来说，根据本发明的组合物包括按重量为0.05％～99％，0.01％～98％，优选0.1％～95％，特别优选0.5％～90％的活性成分组合，最优选为10％～70％。

本发明的活性化合物的组合或组合物可以其本身使用或者依据它们各自的物理和/或化学特性，以其制剂的形式或由此制备的应用形式，如气溶胶、胶囊悬浮剂、冷雾剂、热雾剂、封装颗粒、细颗粒、处理种子的悬浮剂，即用型溶液、粉剂、可乳化浓缩物、水包油乳剂、油包水乳剂、大粒剂、微粒剂、油分散性粉剂、油悬浮剂、油溶性液剂、泡沫剂、糊剂、农药涂布的种子、浓悬浮剂、浓悬乳剂、可溶浓缩液、悬浮液、可湿性粉剂、可溶性粉末、粉末和颗粒剂、水溶性颗粒剂或片剂，处理种子的水溶性粉剂、可湿性粉剂、富含活性成分的天然产物和合成物质，也包括应用于种子的高分子和镀膜材料微胶囊，以及ULV冷雾剂和热雾剂。

提及的制剂可以用一种已知的方法进行制备，例如通过混合活性成分或将活性成分与至少一种添加剂结合。适合的添加剂为所有的常用制剂助剂，例如，有机溶剂、补充剂、溶剂或稀释剂、固体载体和填充剂、表面活性剂(如佐剂、乳化剂、分散剂、保护性胶体、润湿剂和增粘剂)、分散剂和/或粘结剂或固定剂、防腐剂、染料和色素、消泡剂、无机和有机增稠剂、防水剂，如果适用的还有干燥剂和UV稳定剂、赤霉素，还有水以及进一步处理的助剂。在各情况下根据剂型来准备下一步的处理过程，如需要湿磨、干磨或造粒。

本发明组合物不仅包括可用适当设备施用于植物或种子上的即用型组合物，还包括在使用前必须用水稀释的商用浓缩制剂。

本发明的活性化合物组合可以(商用的)制剂以及由这些制剂制备的作为和其他(已知)活性成分的混合物的应用形式，如杀虫剂、诱杀剂、消毒剂、杀菌剂、杀螨剂、杀线虫剂、杀真菌剂、生长调节剂、除草剂、肥料、安全剂和化学信息素。

根据本发明直接用活性成分处理植物或者植物部位或通过作用于其周围环境、栖息地或储藏空间，其采用的是常规处理方法，例如通过浸渍、喷洒、喷雾、灌溉、蒸发、喷粉、雾化、播撒、起泡、涂抹、摊铺、浇灌(喷淋)、滴灌来处理；在繁殖体情况下，尤其在种子情况下，而且是作为处理干种子的粉末，处理种子的溶液，浆化处理的水溶性粉末，通过进行一层或多层包壳或涂覆等来处理。此外还可能通过超低容积法来应用所述活性化合物，或将活性化合物制剂或活性化合物本身注入土壤。

本发明还包括一种处理种子的方法。本发明还涉及根据前述段落中提及的一种方法处理的种子。

本发明的所述活性化合物或组合物尤其适合处理种子。由有害的生物体引起的一大部分作物损失，是在种子贮藏期间或播种后以及发芽期间或发芽后的感染所引起的。这个阶段尤其重要，因为生长中的植物根与芽尤其敏感，甚至小的损害可能就导致植物的死亡。因此，在保护种子和萌发植物时使用适当的组合物是非常有益的。

通过处理植物种子来控制植物病原真菌早已为人熟知，并且是一个持续改善的课题。然而，处理种子涉及一系列不能找到满意解决办法的问题。因此，人们期望研发保护种子和萌发植物的方法，其无需在播种时和植物萌发后额外使用植物保护剂，或者至少可以大大减少额外使用。人们还期望可以通过优化活性化合物的施用量，以使得为种子和萌发植物提供最大保护以免受植物病原真菌损害，而所施用活性成分不损害植物自身。特别是，处理种子的方法也应当考虑到转基因植物内在的杀真菌特性，以实现使用最小量的作物保护剂达到对种子和萌发植物的最优保护。

因此，本发明还具体地涉及一种处理种子和植物萌发的方法，以改善植物质量。

同样被认为有益的是，本发明方法还可以具体地被应用在转基因种子上，由这种种子长成的植物能够表达一种抗虫蛋白。通过用本发明的活性化合物组合或组合物处理种子，甚至通过表达如杀虫蛋白，可控制一些害虫。出人意料的是，可以观察到进一步的协同效应，其更加改善了经处理植物的质量。

本发明的组合物适合应用于农业、温室、森林、园艺或葡萄栽培的所有植物的种子处理。特别是，谷物形式的种子(如小麦、大麦、黑麦、黑小麦、小米、燕麦)、玉米、棉花、大豆、水稻、土豆、向日葵、豆类、咖啡、甜菜(如糖用甜菜和饲用甜菜)、花生、油菜、罂粟花、橄榄、椰子、可可、甘蔗、烟草、蔬菜(如番茄、黄瓜、洋葱、生菜)、草地和观赏植物(见下文)。对谷物类(如小麦、大麦、黑麦、黑小麦和燕麦)、玉米以及水稻种子的处理尤其重要。

下文还进一步说明，用本发明的活性化合物组合或组合物处理转基因种子尤其重要。这里提及的植物种子包括至少一个可以表达具有杀虫特性的多肽或蛋白的外源基因。在转基因种子中的该外源基因可以来源自微生物物种例如芽孢杆菌、根瘤菌、假单胞菌、沙雷氏菌、木霉菌、棒状杆菌、球囊霉菌或胶枝霉菌。优选的外源基因来源自芽孢杆菌属，其基因产物具有杀灭欧洲玉米螟和/或西方玉米螟的活性。特别优选的外源基因来源自苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)。

在本发明的背景下，本发明的活性化合物组合或组合物单独或者以适当的制剂施用于种子。优选处理种子的状态为其足够稳定从而该处理不会造成任何损害。一般说来，可以在植物播种和收获之间的任何时间点对种子进行处理。通常所用的种子从植物的穗轴、壳体、茎秆、包被、毛发或者新鲜果肉中分离或剥离出来。因此，可使用例如收获的、清洗并干燥至水分含量少于15％重量的种子。或者，也可以使用干燥后例如用水处理过并再次干燥的种子。

在处理种子时，一般必须注意考虑施用于种子的本发明组合物的用量和/或所选择的额外添加剂的用量，以便萌发的种子就不会受到不良影响，或最终植物也不会受到损害。必须特别牢记的是，活性成分在某些施用量下可能会有生物性毒素作用。

本发明的组合物可以直接应用，也就是说，不必包括进一步的组分，也不必进一步稀释。一般来说，优选将所述组合物以合适的制剂形式施用于种子。处理种子的合适制剂和方法已经为本领域人员所熟知并被描述于，例如下列文件：US 4,272,417、US 4,245,432、US 4,808,430、US 5,876,739、US 2003/0176428 A1、WO 2002/080675、WO 2002/028186。

本发明的活性化合物组合可转换成惯常的拌种制剂，如溶液剂、乳剂、混悬剂、粉剂、泡沫剂、浆液剂或者其他用于种子的镀膜材料，还有ULV制剂。

这些制剂用已知的方法制备，将活性化合物或活性化合物组合与常用添加剂混合，如常用的补充剂和溶剂或稀释剂、着色剂、润湿剂、分散剂、乳化剂、消泡剂、防腐剂、次生增稠剂、粘合剂、赤霉素以及水。

可存在于能够用于本发明的拌种制剂中的合适着色剂包括所有用于此用途的常用着色剂。可以使用微溶于的色素和溶于水的染料。可提到的着色剂实例包括已知名称的罗丹明B、C.I.颜料红112和C.I.溶剂红1。

可存在于能够用于本发明的拌种制剂中的合适润湿剂包括所有用来促进润湿且为活性农业化学物质制剂的常用物质。

可存在于能够用于本发明的拌种制剂中的合适分散剂和/或乳化剂包括所有活性农业化学物质制剂中常用的非离子、阴离子和阳离子分散剂。优选可使用非离子或阴离子分散剂或者非离子或阴离子分散剂混合物。尤其合适的非离子分散剂有：环氧乙烷-环氧丙烷嵌段共聚物、烷基苯酚聚乙二醇醚和三苯乙烯苯酚聚乙二醇醚，以及它们的磷酸盐或硫酸盐衍生物。特别适宜的阴离子分散剂有：木素磺化盐、聚丙烯酸盐以及芳基磺酸盐-甲醛缩合物。

可存在于用于本发明的拌种制剂中的合适消泡剂包括所有活性农业化学活性化合物制剂中常用的抑制泡沫的化合物。优选使用硅酮消泡剂、硬脂酸镁、硅酮乳剂、高碳醇、脂肪酸以及它们的盐和有机氟化物及其混合物。

可存在于用于本发明的拌种制剂中的合适防腐剂包括农业化学组合物中所有具有此用途的化合物。以举例的方式，可提及的有二氯酚和卞醇半缩甲醛。

可存在于用于本发明的拌种制剂中的合适次级增稠剂包括农业化学组合物中所有具有此用途的化合物。优选为纤维素衍生物、丙烯酸衍生物、多糖如黄原胶或硅酸镁铝、改性黏土、层状硅酸盐如绿坡缕石和膨润土、以及极细硅酸。

可存在于用于本发明的拌种制剂中的合适粘合剂包括所有用来拌种的常用粘结剂。优选可提及的有：聚乙烯吡咯烷酮、聚醋酸乙烯酯、聚乙烯醇和侵填体。

可存在于用于本发明的拌种制剂中的合适赤霉素优选为赤霉素A1、A3(＝赤霉酸)、A4和A7，特别优选使用赤霉酸。赤霉素是已知的(比照R.Wegler“Chemie derPflanzenschutz and-”[Chemistry of CropProtection Agents and Pesticides],Vol.2,Springer Verlag,1970,pp.401-412)。

可用于本发明的拌种制剂可直接使用或事先用水稀释后处理各种类型的种子。可用于本发明的拌种制剂或其稀释制剂可用于转基因植物的拌种。在这个背景下，与表达产物的相互作用可产生协同效应。

使用可用于本发明的拌种制剂或由其加水制备的制剂，处理种子的合适混合设备包括所有通常可用来拌种的混合设备。拌种时采用的具体过程包括，将种子加入混合器中，添加特定的所需数量的拌种制剂，直接加入其本身或者事先用水稀释，进行混合直到所述制剂均匀分布于种子上。任选地，随后进行干燥操作。

根据本发明，所有的植物和植物部位都可以进行处理。植物是指所有植物和植物种群如可取的和不可取的野生植物、栽培品种和植物品种(是否受到植物品种权或植物育种者权利的保护)。栽培品种和植物品种可以是通过传统繁育方法获得的植物，所述方法可通过一种或多种生物技术方法进行辅助或补充，如通过使用双单倍体、原生质体融合、随机和定向诱变、分子或基因标记或通过生物工程和基因工程方法。植物部位指的是所有的地上和地下部分和植物器官，如芽、叶、花和根，由此列出例如，叶、针叶、茎、枝、花、子实体、果实和种子以及根、块茎、球茎和根状茎。作物和营养繁殖及有性繁殖材料，例如插条、球茎、根状茎、块茎、匍匐茎和种子也都属于植物部位。

本发明的活性化合物与良好植物耐受及对温血动物的有利毒性结合，能被环境很好的接纳，这适合保护植物和植物器官,以提高收成，改善收获材料的质量。它们可能优选作为作物保护剂。它们对于正常的敏感和抗性物种并对于所有或者某些生长阶段具有活性。

在可通过本发明的方法处理的植物中，可提到的有主要田间作物像玉米、大豆、棉花、芸苔属油菜如欧洲油菜(Brassica napus)(如拉诺拉(canola)油菜)、芜菁(Brassicarapa)、芥菜型油菜(B.juncea)(如芥末)和埃塞俄比亚芥(Brassica carinata)、水稻、小麦、甜菜、甘蔗、燕麦、黑麦、大麦、小米、黑小麦、亚麻、葡萄和各种各样的水果及各种植物类群的蔬菜比如蔷薇科(例如，仁果类水果像苹果和梨，还有核果像杏、樱桃、扁桃和桃，浆果类水果像草莓)、茶藨子科、胡桃科、桦木科、漆树科、山毛榉科、桑科、木犀科、猕猴桃科、樟科、芭蕉科(如香蕉树和植物)、茜草科(如咖啡)、山茶科、梧桐科、芸香科(如柠檬、橙子和葡萄柚)、茄科(如番茄、土豆、胡椒、茄子)、百合科、菊科(如生菜、朝鲜蓟和菊苣-包括菊苣根、苦苣或苦菜)、伞形科(如胡萝卜、荷兰芹、芹菜和块根芹)、葫芦科(如黄瓜-包括腌黄瓜、南瓜、西瓜、葫芦和甜瓜)、葱科(如洋葱和韭菜)、十字花科(如包心菜、紫甘蓝、西兰花、菜花、小包菜、小白菜、甘蓝、萝卜、山葵、水芹、大白菜)、豆科(如花生、豌豆和菜豆、豆子-攀藤豆子和蚕豆、藜科(如糖莴苣、莙荙菜、菠菜、甜菜根)、锦葵科(如秋葵)、天门冬科(如芦笋)，园艺及森林作物、观赏植物，以及这些作物的转基因同系物。尤其重要的是对水稻、玉米、土豆、谷物和葡萄的处理。

如上面已经提及的，根据本发明可以处理所有植物及其部位。在一个优选的实施方案中，处理了野生植物物种和栽培植物品种，或那些通过传统生物育种方法如杂交或原生质体融合获得的植物体或其部分。在进一步的优选实施方案中，处理了转基因植物和通过基因工程获得的栽培植物，如果适当结合常规方法(转基因生物)获得的植物体或其部分。术语“部分”、“植物的部分”、“植物部分”在上面已经进行了解释。尤其优选的是，根据本发明处理的栽培植物的植株，其在任何情况下都是可以购买或在使用的。植物栽培品种应理解为意味着植物均有新特性(性状)，其通过传统的繁育、基因突变或通过DNA重组技术获得。这些可以成为栽培品种、生物或基因型。

本发明的处理方法可以用来处理转基因生物(GMOs)，例如植物或种子。基因改造植物(或转基因植物)是外源基因稳定整合入基因组的植物。术语“外源基因”本质上是一种在植物体外提供并装配的基因，当其被引入细胞核、叶绿体或线粒体基因组时，通过表达目的蛋白或多肽，或使其他存在于植物体的基因下调或沉默(应用如反义技术、共抑制技术或RNA干扰-RNAi技术)，从而赋予被转化植物新的或改良的农艺性状或其他特性。外源基因被定位于基因组内叫做转基因。转基因因其在植物基因组内的特定位置而被定义，被称为转化或转基因事件。

根据植物种类和植物品种，它们所处的位置和生长条件(土壤、气候、生长期、营养)，根据本发明的处理方法可能导致超加性(“协同”)的效果。因此，例如，可能出现下列超过实际预期的效应：减少施用量和/或拓宽活性范围和/或增加可使用的本发明活性化合物和组合物的活性，可以使植物生长得更好、增强对高温或低温的耐受、增强对旱或涝或土壤盐含量的耐受、增强开花的性能、更易收获、加速成熟、更高的收获产量、更大的果实、更高的植株、更绿的叶子、更早开花、收获产品更高的质量和/或更高的营养价值、水果更高的含糖量、更好的贮存稳定性和/或收获产品的加工可能性。

在某些施用量下，本发明的活性化合物组合还可强化植物。因此它们也适合用来调动植物体的防御系统以抵御有害的微生物。如果合适这可能是本发明活性提高如抗真菌的一个原因。在本发明的背景下，强化植物(抗性诱导)的物质被理解为意味着这些物质或物质组合具有激活植物防御体系的能力，即当随后接种上有害微生物，被处理的植物在抵抗这些微生物时显示出实质程度上的抵抗力。在目前的情况下,有害微生物可以理解为植物病原性真菌、细菌和病毒。因此，本发明的物质可用于，在处理后一段时期内，保护植物免遭上文提到的病原体的伤害。在用所述活性化合物处理植物后，对植物产生的保护效果一般延伸为1～10天，优选1～7天。

根据本发明，优选进行处理的植物和植物栽培品种包括具有能够赋予这些植物特别有利的、有用的性状的遗传物质的所有植物。(不论通过育种和/或生物技术手段获得)。

根据本发明，优选进行处理的植物和植物栽培品种为能够抵抗一种或多种生物胁迫的植物，也就是说所述植物在抵御动物和微生物害虫如线虫、昆虫、螨类、植物病原性真菌、细菌、病毒和/或类病毒时，表现出更强的抵抗力。

具有线虫抗性的植物的实例在下列美国专利申请中有描述：No’s11/765,491,11/765,494,10/926,819,10/782,020,12/032,479,10/783,417,10/782,096,11/657,964,12/192,904,11/396,808,12/166,253,12/166,239,12/166,124,12/166,209,11/762,886,12/364,335,11/763,947,12/252,453,12/209,354,12/491,396和12/497,221。

可根据本发明处理的植物为已经表达出杂交或杂种优势特点的杂交植物，所述特点通常带来高产、活力、健康和抵御生物及非生物胁迫的能力。这种植物通常通过一种雄性不育自交系亲本(母本)和另一种雄性不育自交系亲本(父本)杂交得到。通常从雄性不育系收获杂交种子并销售给种植户。雄性不育植物(如玉米)有时通过去雄获得，也就是机械地去除雄性繁殖器官(或雄花)，但是更典型的雄性不育是植物基因组的基因决定的。在这种情况下，尤其是当种子是想要从杂交植物收获的产物时，确定杂交植物雄性可育性完全恢复是非常有用的。这点可以通过确保父本有合适的育性恢复基因，能够恢复含有决定雄性不育基因的杂交植物的雄性能育性来实现。雄性不育的遗传决定因子也可能位于细胞质中。细胞质雄性不育性(CMS)的实例，比如芸苔属植物有描述。然而，雄性不育遗传决定因子也可位于核基因组中。雄性不育植株也可通过植物生物技术方法例如遗传工程而获得。获得雄性不育植株特别有用的方法在WO 89/10396中有描述，例如核糖核酸酶，如芽孢杆菌RNA酶在雄蕊的绒毡层细胞中选择性表达。随后通过在绒毡层细胞中表达核糖核酸酶抑制子如芽孢杆菌RNA酶抑制剂来恢复育性。

根据本发明，可进行处理的植物或植物栽培品种(通过植物生物技术如基因工程获得)是耐除草剂植物，也就是说植物对施用的一种或多种除草剂有耐受性。所述植物可通过遗传转化，或通过筛选含有赋予所述除草剂耐受性的突变的植物获得。

抗除草剂的植物有例如草甘膦耐受性植物，即对除草剂草甘膦或其盐有耐受性的植物。植物可以通过多种方法获得草甘膦耐受性。例如草甘膦的耐受植物可以通过用编码的酶5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸酯合酶(EPSPS)的基因进行转化植物获得。EPSPS基因的实例有鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的AroA基因(CT7突变体)(Comai etal.,1983,Science 221,370-371)、农杆菌属细菌的CP4基因(Barry et al.,1992,Curr.Topics Plant Physiol.7,139-145)、编码矮牵牛EPSPS(Shah et al.,1986,Science233,478-481)、番茄EPSPS(Gasser et al.,1988,J.Biol.Chem.263,4280-4289)、或属EPSPS(WO 01/66704)的基因。其也可为突变的EPSPS。草甘膦耐受性植物也可通过表达编码草甘膦氧化还原酶的基因获得。草甘膦耐受性植物也可通过表达编码草甘膦乙酰基转移酶的基因获得。草甘膦耐受性植物也可通过筛选含有天然存在的上述基因突变的植物而获得。表达赋予植物草甘膦耐性的EPSPS基因的植物已有描述。其他赋予草甘膦耐受性的基因如脱羧酶基因的植物也有描述。

其他除草剂耐受性植物为例如，对抑制谷氨酰胺合成酶的除草剂如双丙胺膦、草丁膦或草铵膦有耐受性的植物。所述植物可通过表达解除除草剂毒性的酶或抗抑制的突变谷氨酰胺合成酶来获得。有这样效果的解毒酶是编码草丁膦乙酰转移酶(如来自链霉菌属的bar或pat蛋白)的酶。表达外源草丁膦乙酰转移酶的植物已有描述。

其他耐除草剂的植物为耐抑制羟苯基丙酮酸双加氧酶(HPPD)除草剂的植物。HPPD是催化羟苯基丙酮酸转化为尿黑酸的反应的酶。植物对HPPD抑制剂的耐受性可用编码天然存在的抗性HPPD酶的基因或编码突变的或嵌合HPPD酶的基因进行转化，如在WO 96/38567、WO 99/24585、WO 99/24586、WO 2009/144079、WO 2002/046387或US 6,768,044中所描述。用编码某些酶的基因转化植物也可获得对HPPD抑制剂的抗性，这些酶使得尽管在HPPD抑制剂抑制天然HPPD酶活性情况下仍可形成黑尿酸。这样的植物和基因在WO 99/34008和WO02/36787中有描述。植物对HPPD抑制剂的耐受性，除了转化编码HPPD抗性酶的基因外，也可以通过用编码具有预苯酸脱氢酶(PDH)活性的酶的基因转化植物而得到改良，如WO 2004/024928中所描述。另外，使植物获得对HPPD-抑制剂除草剂更强的耐受，可以通过向其基因组中添加编码可代谢或降解HPPD-抑制剂的酶的基因来实现，如WO 2007/103567和WO2008/150473中所描述的CYP450酶。

还有其他抗除草剂植物是耐乙酰乳酸合成酶(ALS)抑制剂的植物。已知的ALS抑制剂包括，例如，磺酰脲类，咪唑啉酮类，三唑并嘧啶类、嘧啶基氧(硫代)苯甲酸酯和/或磺酰氨基羰基三唑啉酮除草剂。已知ALS酶的不同突变(已知的乙酰羟基酸合成酶，AHAS)赋予了对不同除草剂和除草剂类别的耐受性，例如，如在Tranel and Wright(2002,Weed Science50:700-712)中所描述。描述了对磺酰脲耐受性植物和咪唑啉酮耐受性植物的生产。还描述了其他的咪唑啉酮耐受性植物。也描述了其他磺酰脲和咪唑啉酮耐受性植物。

其他对咪唑啉酮和/或磺酰脲类具有耐受性的植物可通过诱变来获得，在含有除草剂的细胞培养液中进行筛选或者诱变育种，例如，大豆描述于美国专利No.5,084,082，水稻描述于WO 97/41218，甜菜描述于美国专利No.5,773,702和WO 99/057965，生菜描述于美国专利No.5,198,599，向日葵描述于WO 01/065922。

根据本发明，可处理的植株或植物品种(通过生物技术方法如基因工程获得)是抗虫转基因植物，就是说植物可抗某些特定昆虫的攻击。所述植物可通过遗传转化，或通过筛选含有赋予这种昆虫抗性的突变的植物而获得。

本文所用的“抗虫转基因植物”包括含有至少一个转基因的任何植物，所述转基因包含编码下述蛋白的编码序列：

1)来自苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的杀虫结晶蛋白或其杀虫部分，例如Crickmore等人(1998,Microbiology and Molecular Biology Reviews,62:807-813)所列出的杀虫结晶蛋白，Crickmore等人(2005)对苏云金芽孢杆菌毒素或杀虫部分的命名进行更新，例如结晶蛋白类蛋白Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1B、Cry1C、Cry1D、Cry1F、Cry2Ab、Cry3Aa,或Cry3Bb，或其杀虫部分(如EP 1999141和WO 2007/107302)，或有合成基因编码的该蛋白，如美国专利申请No 12/249,016中所描述；

2)来自苏云金芽孢杆菌的结晶蛋白或其具有杀虫作用的部分，其在来自苏云金芽孢杆菌的第二其他晶体蛋白或其部分存在下具有杀虫活性，如由Cry34和Cry35结晶蛋白组成的二元毒素(Moellenbeck et al.2001,Nat.Biotechnol.19:668-72；Schnepf etal.2006,Applied Environm.Microbiol.71,1765-1774)或Cry1A或Cry1F蛋白和Cry2Aa或Cry2Ab或Cry2Ae蛋白组成的二元毒素(US Patent Appl.No.12/214,022and EP08010791.5)；

3)包含来自苏云金芽孢杆菌的不同杀虫结晶蛋白的杂种杀虫蛋白，如上述1)的杂种蛋白或上述2)的杂种蛋白，例如由玉米转化事件MON89034产生的Cry1A.105蛋白(WO2007/027777)；

4)上述1)到3)任一所述蛋白，其中有些氨基酸，尤其是1-10位氨基酸被其他氨基酸替代以获得对目标昆虫更高的杀虫活性和/或拓宽对目标昆虫的影响范围，和/或由于在克隆或转化过程中将变化引入至编码DNA中，如玉米转化事件MON863或MON88017的Cry3Bb1蛋白，或玉米转化事件MIR604的Cry3A蛋白；

5)来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)的杀虫分泌蛋白，或其杀虫部分，如已知数据库列出的营养期杀虫(VIP)蛋白，来自VIP3Aa蛋白类的蛋白；

6)来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的分泌蛋白，其在来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的第二分泌蛋白存在下具有杀虫性，如由VIP1A和VIP2A蛋白组成的二元毒素(WO 94/21795)；

7)包含来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的不同分泌蛋白的部分组成的杂种杀虫蛋白，如上述1)的杂种蛋白或上述2)的杂种蛋白；

8)上述5)到7)中任一蛋白，其中有些氨基酸，尤其是1-10位的氨基酸被其他氨基酸替代获得对目标昆虫更高的杀虫活性，和/或拓宽对目标昆虫的影响范围，和/或由于在克隆或转化过程中，将改变引入到编码的DNA中(仍可编码杀虫蛋白)，如玉米转化事件COT102的VIP3Aa蛋白；或

9)来自苏云金芽孢杆菌或蜡状芽孢杆菌的分泌蛋白，其在来自来自苏云金芽孢杆菌的晶体蛋白存在时具有杀虫性，如VIP3和Cry1A或Cry1F组成的二元毒素(US PatentAppl.No.61/126083 and 61/195019)，或由VIP3蛋白和Cry2Aa或Cry2Ab或Cry2Ae蛋白组成的二元毒素(US Patent Appl.No.12/214,022 and EP 08010791.5)；

10)上述9)所述蛋白，其中有些氨基酸，尤其是1-10位的氨基酸被其他氨基酸替代获得对目标昆虫更高的杀虫活性，和/或拓宽对目标昆虫的影响范围，和/或由于在克隆或转化过程中，将改变引入到编码的DNA中(仍可编码杀虫蛋白)。

当然，本申请所用的抗虫转基因植物，还包括含有编码上述1到10中任一项的蛋白质的基因组合的任何植物。在一个实施方案中，抗虫转基因植物包含多种上述1至10类中任一种蛋白的转基因，当用不同蛋白作用于不同目标昆虫时，对目标昆虫的影响范围扩大，或通过使用不同的杀虫蛋白作用于相同目标昆虫以延迟昆虫对植物的抗性发展，但其具有不同的作用方式，比如结合于昆虫不同的受体结合位点。

本文所用“抗虫转基因植物”，还包括含有至少一种转基因的任何植物，所述转基因含有表达双链RNA时产生的序列，该RNA在被植物害虫摄取时抑制该害虫的生长。

本发明还可处理的植物或植物栽培品种(通过植物生物技术如基因工程获得)为抗非生物胁迫的植物。所述植物可通过遗传转化，或通过筛选含有赋予所述抗胁迫能力的突变的植物获得。特别有用的抗胁迫植物包括:

1)含有能减少植物细胞或植物中聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)表达和/或活性的转基因的植物。

2)含有增强耐胁迫能力的转基因的植物，所述转基因能减少植物或植物细胞中编码PARG的基因的表达和/或活性。

3)含有增强胁迫能力的转基因的植物，所述转基因编码烟酰胺腺嘌呤二核苷酸补救合成途径的植物功能酶，包括烟酰胺酶、烟酰酸核糖磷酸转移酶、烟酸单核苷酸腺嘌呤基转移酶、烟酰腺嘌呤二核苷酸合成酶或烟碱酰胺磷酸化转移酶。

本发明可处理的植物或植物栽培品种(通过植物生物技术方法如基因工程获得)的收获产品表现出改变数量、质量和/或储存稳定性和/或改变收获产品特定成分的特性，如：

1)合成改性淀粉的转基因植物，与野生型的植物细胞或植物相比，改性淀粉的理化性质，尤其是直链淀粉的含量或者直链/支链淀粉比、支化度、平均链长、侧链分布、粘度表现、胶凝强度、淀粉粒大小和/或淀粉粒形态有改变。因此这更适合于特殊应用。

2)转基因植物，其合成非淀粉碳水化合物聚合物，或与未进行基因修饰的野生型植株相比合成改性的非淀粉碳水化合物聚合物。其实例为产多聚果糖的植物，尤其是菊糖型和果聚糖型，产α-1,4-葡聚糖的植物，产α-1,6支α-1,4葡聚糖的植物，产交替糖(alternan)的植物。

3)产透明质酸的转基因植物。

4)转基因或杂交植物，如具有‘高含量可溶性固体’，‘低辛辣味’(LP)和/或‘贮存期长’特性的洋葱。

本发明可处理的植物或植物栽培品种(通过植物生物技术方法如基因工程获得)为改变了纤维素特性的植物如棉花。所述植物可通过遗传转化，或通过筛选含有赋予该改变的纤维素特性的突变的植物获得，包括：

a)含有形式改变的纤维素合成酶基因的植物，如棉花。

b)含有形式改变的rsw2或rsw3同源核酸植物如棉花，蔗糖磷酸合成酶表达上调的植物如棉花。

c)蔗糖合成酶表达上调的植物如棉花。

d)例如，通过下调纤维选择性β-1,3-葡聚糖酶，改变纤维细胞基部胞间连丝门控时间的植物如棉花。

e)例如，通过包括nodC的N-乙酰氨基葡萄糖转移酶基因和几丁质合成酶基因的表达，该植物如棉花具有改变了反应性的纤维素。

本发明可处理的植物或植物栽培品种(通过植物生物技术方法如基因工程获得)为改变了油的成分特性的植物，如油菜或相关的芸苔属植物。所述植物可通过遗传转化，或通过筛选含有能赋予改变油成分特性的突变的植物获得，包括：

a)产生具有高油酸含量的油的植物，如油菜。

b)产生具有低亚麻酸含量的油的植物，如油菜。

c)产生具有低水平饱和脂肪酸的油的植物，如油菜。

本发明所可处理的植物或植物栽培品种(通过植物生物技术方法如基因工程获得)为具有病毒抗性的植物如马铃薯，例如，抗马铃薯病毒Y(来自Tecnoplant的的转化事件SY230和SY233，阿根廷)；其为抗病如抗马铃薯晚疫病(如RB基因)的植物；其表现出冷诱导增甜的减少(携带Nt-Inhh,IIR-INV基因)或者具有矮化表型(A-20氧化酶基因)。

本发明可处理的植物或植物栽培品种(通过植物生物技术方法如基因工程获得)为改变了种子破碎特性的植物，如油菜或相关的芸苔属植物。所述植物可通过遗传转化，或通过筛选含有能赋予改变种子破碎特性的突变的植物而获得，包括具有如延迟或减少的种子破碎的植物如油菜。

本发明可处理的具有特殊应用价值的转基因植物为含有转化事件或与转化事件组合的植物，这些是在美国向美国农业部(USDA)的动物与植物健康检疫局(APHIS)申请的非管制状态的主题，不论此申请是否已批准或仍在审查中。任何时候这个信息都能够从APHIS(4700 River Road Riverdale,MD 20737,USA)获得。在该非管制状态申请的申报日期，APHIS在审或APHIS已经批准的所述申请包含以下信息：

-请求书：请求书的编号。转化事件的技术描述可以在从APHIS获得的单个请求文件中找到，如在APHIS的网站，通过参考这个请求书的编号。这些描述在此引入作为参考。

-请求书的延期：参考要求延期的在先申请。

-机构：提交请求书单位的名称。

-管制项目：相关植物物种。

-转基因表型：转化事件赋予的植物特性。

-转化事件或品系：要求非管制状态的转化事件名称(有时称为品系)。

-APHIS文献：可由APHIS要求的并由APHIS发布的与请求书相关的各种文件。

本发明可处理的具有特殊应用价值的转基因植物为包含一个以上编码一个或多个毒素的基因的植物，如以下以商品名出售的植物：YIELD(如玉米、棉花、大豆)、(如玉米)、(如玉米)、(如玉米)、(如玉米)、(棉花)、(棉花)、Nucotn 33B(棉花)、(如玉米)、和(马铃薯)。可以提及的除草剂耐受性植物的实例是玉米变种、棉花变种和大豆变种，它们以下述商品名出售：Roundup(耐草甘膦，如玉米、棉花、大豆),Liberty(耐草丁膦，如油菜)、(耐咪唑啉酮类)和(耐磺脲，如玉米)。可提及的耐除草剂植物(以常规方式繁育的耐除草剂植物)包括各种以(如玉米)名称销售的植物。

其他包括单独转化事件或组合转化事件的具有特殊应用价值的植物，例如，在来自不同国家或地区的监管机构在数据库中有列出。

当施用本发明化合物时，施用量可以在一个宽泛的范围内变化。活性化合物的剂量/施用量根据本发明的处理方法进行应用是普遍并且有利的。

-植物部位的处理，如叶片(叶的处理)：从0.1～10,000g/ha，优选10～1,000g/ha，更优选50～300g/ha；如果进行浸液或滴注处理，剂量甚至可以减少，尤其当使用惰性物质如石棉或珍珠岩时；

-种子的处理：每100kg种子使用2～200g，优选每100kg种子使用3～150g，更优选每100kg种子使用2.5～25g，最优选每100kg种子使用2.5～12.5g；

-土壤的处理：0.1～10,000g/ha，优选1～5,000g/ha。

本发明的所述剂量是作为本发明方法的示例性实例给出的。在本领域熟练人员应知道如何调整施用剂量，尤其是根据待处理的植物或作物的性质。

根据本发明的组合可以被用来在处理后的一段时间内，抵御害虫和/或植物致病真菌和/或微生物，以保护植物。植物经过用组合处理后产生保护的时间范围，通常跨度是1～28天，优选1～14天，更优选1～10天，甚至更优选1～7天，或者植物繁殖体材料在处理后的保护时间范围可高达200天。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例A马铃薯试验

马铃薯品种为夏波蒂，种植于甘肃缺锌的黑土(pH8.35，土壤中可利用锌的含量0.34μg/g，有机物8.86％)：海拔2050m，平均温度16.4℃～19.7℃，降雨量18mm～43.3mm，并且6月～9月间的相对湿度34.5％～67.8％。每个处理有四个重复。每一块区域面积100m²有500个土堆。对照产品使用的是市场上可以买到的杀真菌剂80％WP代森锰锌。土壤没有染病。处理过程中田间管理是相似的：2010年4月28日播种，2010年6月25日培土；三次灌溉分别在5月6日、6月19日、8月12日，每次50L；分别在6月9日和7月23日进行两次除草。在播种前用210kg/ha(NH₄)H₂PO₃、750kg/ha Ca(H₂PO₄)·H₂O和165kg/ha CO(NH₂)₂的施用量施肥。

收获后就丙森锌对马铃薯块茎营养品质提升的影响进行了评估。每个处理的样品是随机选取2-3个块茎到实验室进行营养品质的检测。

用考马斯亮蓝G-250方法进行可溶性粉蛋白含量的检测：将0.5g马铃薯块茎组织在水(2mL)中研磨，并在6mL水中匀浆。匀浆液在4℃、4000rpm下离心10min，上清用作可溶性蛋白的来源。随后用考马斯亮蓝G-250进行染色。在595nm下测吸光度。蛋白含量用μg/g鲜重(FW)表示。

淀粉含量测定方法：将25g马铃薯块茎组织研磨并在80℃下干燥。取500mg样品80℃下用80％的乙醇提取10min并去除上清。残渣用2％HCl处理，在沸水浴保持3h以将所有的淀粉转化成糖。随后可以检测糖的含量来对应淀粉含量。Ba(OH)₂溶液用来使蛋白沉淀。酚酞用作指示剂，以及5％ZnSO₄缓慢加入直到上清液变红。淀粉含量用μg/g鲜重(FW)表示。

干物质测定方法：每一个新鲜样品取1000g马铃薯块茎，于200℃烘箱中干燥至恒重。干物质的量用质量百分比表示。

锌含量的检测方法：参考国家(P.R.China)标准：食品中锌的测定(GB/T 5009.14-2003,ICS 67.040 C 53)。

*DAS＝播种后的天数

收获后测定的块茎产量和营养品质

^[1]顶级:单个块茎的重量>150g

^[2]一级:单个块茎的重量>100g

^[3]二级:单个块茎的重量>50g

用安泰生杀菌剂处理的马铃薯块茎的可溶性蛋白、淀粉含量、锌含量和干物质，相比未处理的对照及农民的实践，表现出显著的增加。

实施例B水稻试验(田间试验)

水稻品种扬II优6号，种植在40m²的区域播种量为22.5kg/ha(每个处理3个重复)。随后用市场上可以买到的安泰生杀菌剂70WP(丙森锌700g/kg)和锌肥ZnSO₄处理。

处理过程中田间管理是常规并且相似的：之前种的是冬季作物油菜，水稻在2010年6月15日播种。在播种前按300kg/ha的(NH₄)₂PO₃、150kg/ha的KCl和375kg/ha的CO(NH₂)₂施用量施肥。

丙森锌对稻粒中的锌含量的影响，在中国的田间条件下进行了评估。每个处理随机选取500g样品到实验室进行锌含量的测定。

锌含量的检测方法：参考国家(P.R.China)标准：食品中锌的测定(GB/T 5009.14-2003,ICS 67.040 C 53)。

^[1]A:40 DAS(播种后的天数),B:52 DAS,C:66 DAS

收获后测定的叶和谷粒中锌含量

当用安泰生杀菌剂处理时，相比未处理的对照和农民的实践，水稻叶和谷粒中可溶性锌的含量表现出显著地提高。

实施例C玉米试验(田间试验)

玉米品种为富裕2号，种植于80m²的区域播种量为60kg/ha(每个处理有三个重复)，本试验位于天津植物保护研究所的试验站。土壤的类型是pH7.5的黑土，有机物含量7.54％。随后用市场上可以买到的安泰生杀菌剂70WP(丙森锌700g/kg)和锌肥ZnSO₄实施处理。

处理过程中田间管理是常规并且相似的：之前种的是冬小麦，玉米在2010年6月22日播种；在茎伸长期、抽穗期和灌浆期分别进行三次灌溉。在播种前按225kg/ha的(NH₄)₂PO₃、150kg/ha的KCl和150kg/ha的CO(NH₂)₂施用量施肥。

丙森锌对玉米粒中的锌含量的影响，在中国的田间条件下进行了评估。每个处理随机选取1000g样品到实验室进行锌含量的测定。

锌含量的检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：食品中锌的测定(GB/T 5009.14-2003，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C 53)。

^[1]A:30 DAS(播种后的天数),B:54 DAS

收获后测定的叶和籽粒中锌含量

当用安泰生杀菌剂处理时，相比未处理的对照和农民的实践，玉米叶和籽粒中可溶性锌的含量表现出显著地增加。

实施例D水稻试验(田间试验)

水稻品种为单粳嘉花1号，种植于30m²的区域播种量为30kg/ha(每个处理有四个重复)。随后用市场上可以买到的安泰生杀菌剂70WP(丙森锌700g/kg)实施处理。

丙森锌对稻粒中营养品质提升的影响，在中国的田间条件下进行了评估。每个处理随机选取1000g样品到实验室进行营养品质的检测。

纤维含量检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：食品中纤维素的测定(GB/T 5515.5-2008，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C 53)。

粗蛋白含量的检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：食品中蛋白质的测定(GB/5009.5-2010，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C 53)。

维生素B₁检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：对婴幼儿、牛奶及奶制品维生素B₁的测定(GB/5413.11-2010，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C53)。

维生素B₂检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：对婴幼儿，牛奶及奶制品维生素B₂的测定(GB/5413.12-2010，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C53)。

铁含量的测定：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：食品中铁、镁、锰的测定(GB/T 5009.90-2003，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C 53)。

^[1]A:40 DAS(播种后的天数),B:52 DAS

收获后测定的营养品质

当用安泰生杀菌剂处理时，相比未处理的对照和农民的实践，稻粒中粗蛋白、维生素B1和维生素B2表现出显著地增加。

实施例E玉米试验(田间试验)

玉米品种为纪元1号，种植于50m2的区域播种量为45kg/ha(每个处理有四个重复)。随后用市场上可以买到的安泰生杀菌剂70WP(丙森锌700g/kg)实施处理。

丙森锌对玉米粒营养品质提升的影响，在中国的田间条件下进行了评估。每个处理随机选取1000g样品到实验室进行营养品质的检测。

粗蛋白含量的检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：食品中蛋白质的测定(GB/5009.5-2010，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C 53)。

维生素E含量的检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：对婴幼儿食品、牛奶及奶制品维生素A、D、E的测定(GB/T 5413.9-2010，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C 53)。

维生素B₁的检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：对婴幼儿、牛奶及奶制品维生素B₁的测定(GB/5413.11-2010，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040C 53)。

维生素B₂的检测方法：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：对婴幼儿，牛奶及奶制品维生素B₂的测定(GB/5413.12-2010，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040C 53)。

铁含量的测定：参考国家(中华人民共和国)食品安全标准：食品中铁、镁、锰的测定(GB/T 5009.90-2003，由中华人民共和国卫生部颁布，ICS 67.040 C 53)。

^[1]A:32 DAS(播种后的天数),B:55 DAS

收获后测定的营养品质

当用安泰生杀菌剂处理时，相比未处理的对照和农民的实践，玉米粒中粗蛋白、维生素E、维生素B₁和维生素B₂表现出显著地增加。

实施例F葡萄试验(田间试验)

为了验证施加丙森锌对葡萄园的产品和植被的改善，用有或没有施加安泰生杀菌剂70％WP进行一些葡萄品种的对比。

方法

试验在不同的葡萄园进行(Vinha Grande de Algeruz[VGA]；Vinha das Faias[VF]；Vinha do Desembargador[VD]和Quinta dos Cistus [QC])，都位于里斯本南部大约40km，在塞图巴尔半岛区域，在不同类型和不同种类的土壤(沙土和粘土-白垩，锌含量为1.1-0.5ppm)。葡萄砧木为41B(QC)和1103-保尔森(在其他地点)。葡萄园的年龄在1年(QC)到20年(VG)之间。

表1：葡萄品种，位于塞图巴尔半岛区域的葡萄园及特征

品种	葡萄园	土壤类型	年龄(年)	pH
					丹拿	VGA	沙土	20	5.8
阿拉贡利	VGA	沙土	20	5.8
					国产多瑞加	VGA	沙土	20	5.8

品种	葡萄园	土壤类型	年龄(年)	pH
					白皮诺	VGA	沙土	20	5.8
白苏维翁	VGA	沙土	20	5.8
					洛雷罗	VGA	沙土	20	5.8
巴罗卡红	VGA	沙土	20	5.8
					卡奥红	VGA	沙土	20	5.8
弗兰克多瑞加	VGA	沙土	20	5.8
					西拉	VGA	沙土	20	5.8
特林加岱拉	VF	沙土	7	4.9
					阿瑞图	VF	沙土	7	4.9
韦尔德罗	VF	沙土	5	4.9
					弗兰克多瑞加	VF	沙土	5	4.9
西拉	VD	粘土-白垩	8	8.1
					赤霞珠	VD	粘土-白垩	8	8.1
维欧涅	QC	粘土-白垩	1	8.3
					拉比加多	QC	粘土-白垩	1	8.3
莫斯卡托	QC	粘土-白垩	1	8.3

通过使用背负式喷雾器施用。水的体积在322到355L/ha之间，而浓度需要调整以保证固定的剂量。

处理和未处理的区域都由2块有6株植物的区域组成(共12株)。

在处理区中使用2.5kg/ha的安泰生杀菌剂70％WP进行了4个应用。在生长阶段BBCH 77到85之间，这些应用被以最大暴露面实施。

表2：葡萄品种、葡萄园和在一定生长阶段的施加时间

于18/08对叶片采样，进行叶的分析以评估锌的含量。

收获时，对未处理和处理的区域都进行微量的葡萄酒酿造。随后，葡萄酒被提交进行一个感官测试。虽然在葡萄酒的评价方面已经发生了演化，但是感官品尝仍旧是评价葡萄酒决定性和关键性的因素。没有一种单一的化学分析可以确定葡萄酒的感官特征，因此，感官品尝仍然是不可替代的。

结论：

叶的分析：

表3：锌含量mg/kg

分析由INIA执行(Unidade dede Ambiente e Recursos Naturais)(内标法LAP.PL12 VD(2009/09/20)

感官品尝

感官品尝由4个超过20年经验的专业品酒师进行，他们并不知道将要品尝的葡萄酒。葡萄酒编号并且随机进行排列。安排为成对刺激的不同品尝(Cover,1936)，品酒师将面对处理和未处理区域的葡萄酒，并选出一个他更偏爱的。

从上表，我们可以依据葡萄品种观察到结果，或者将我们的分析专注于施加或不施加安泰生杀菌剂的影响，观察X²的分布。N等于总品尝数，X₁是施加安泰生杀菌剂的品尝赞成的葡萄酒数，X₂是不施加安泰生杀菌剂的品尝赞成的葡萄酒数。

X²＝[(|X₁-X₂|)-1]²/N

我们得到的结果是X²＝8.1，也就是说，品尝者的喜好与施加安泰生杀菌剂的方式达到了5％的显著水平。

Claims (5)

1.丙森锌在提高水稻和玉米中维生素含量中的用途，其中施用量为以下：用于植物部位的处理的量为0.1～10,000g/ha，用于种子的处理的量为每100kg种子2～200g，且用于土壤的处理的量为0.1～10,000g/ha。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述丙森锌具有杀真菌活性。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，与未处理的各对照植物相比，所述维生素含量提高了至少5％、10％、25％、50％或更多。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述提高维生素含量的用量为以下：

用于植物部位的处理的量为10～1,000g/ha，用于种子的处理的量为每100kg种子3～150g，且用于土壤的处理的量为1～5,000g/ha。

5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述维生素为维生素B₁、维生素B₂和维生素E。