CN103479856A - 知母化学成分群提取物及其制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明属于医药技术领域，公开了知母三种化学成分群提取物及其制备工艺。本发明三种提取物综合利用了知母药材资源，节约药材，全面利用了药材中水溶性和脂溶性成分。三种提取物分别为知母总皂苷提取物，知母总皂苷元提取物及知母多糖提取物，其总皂苷及总皂苷元重量均含量大于50%，总多糖重量含量在50~95%之间。该制备方法工艺简单，含量稳定。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及知母三种化学成分群提取物及其制备工艺，根据该制备工艺所得的三种提取物，其化学成分总含量可达到50%以上。
背景技术
知母的主要化学成分为甾体皂苷及多糖，甾体皂苷在根茎中的量约为6%，此两种化学成分群及皂苷水解后的皂苷元均具有明确的药理作用。知母多糖具有调节免疫功能、抗疲劳、保肝、抗氧化、抗衰老及抗肿瘤的作用；知母总皂苷提取物具有防治老年痴呆、改善记忆力、抑制血小板聚集、抗氧化和降血糖等药理作用；知母皂苷元对老年痴呆低下的胆碱能系统功能有一定的改善和治疗作用，能促进体外培养的成骨细胞的增殖与分化成熟。
目前，知母中成药或提取物生产厂家在生产时多数只提取一种有效部位，提取后剩余的药材没有充分利用提取其多糖，造成资源的浪费，另外目前所销售的知母提取物均为比例提取物，提取工艺粗糙，有效成分含量低。中国专利03115509.X公开了一种知母提取物及其制备方法，但其公开的是知母提取物中芒果苷和新芒果苷的含量总和大于50%的知母提取物。中国专利200510024312.7公开了知母总皂苷提取物的新用途，但该总皂苷提取物的主要成分为知母皂苷B-Ⅱ化合物，含量范围是30%~70%。中国专利200510054633.1公开了一种知母总皂苷及其制备方法，该知母总皂苷的制备方法为采用常温超声提取。以上专利都只提取了知母总皂苷，且主成分不同、含量不同，而采用提取方法亦不同；同时提取制备知母中的三种化学成分群，即知母总皂苷、知母总皂苷元、知母多糖的方法还未见报道。
发明内容
本发明针对以上生产中得不足及技术上的差异，提供一种知母三种化学成分群的整体制备工艺，以及依据该工艺制备而得到的三种提取物及其相关剂型。
本发明是通过如下技术方法完成的：
知母三种化学成分群的整体制备工艺，主要步骤如下：
（1）将知母洗净、加适量蒸馏水闷润6~12h，切厚片；
（2）将知母片用75~95%乙醇加热回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收乙醇，浓缩，得醇提浓缩液；
（3）醇提浓缩液，用大孔吸附树脂富集，分别以水及75~95%乙醇洗脱，水洗脱液弃去，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩，减压干燥，得知母总皂苷提取物，其总皂苷重量含量大于50%；
（4）知母总皂苷提取物加蒸馏水溶解，加入稀酸，加热水解生成苷元，水解液用碱中和至中性，然后用氯仿或乙酸乙酯提取苷元，回收溶剂，减压干燥，得知母总皂苷元提取物，其总皂苷元重量含量大于80%；
（5）将醇提后药渣干燥，用蒸馏水加热回流提取2~3次，过滤，合并滤液，减压浓缩，得水提浓缩液；
（6）向水提浓缩液加入95%乙醇，使含醇量为75~85%，充分搅拌，静置过夜；
（7）过滤，收集沉淀，离心或抽滤，将沉淀减压真空干燥，得无定形粉末，为知母多糖提取物，其多糖重量含量大于50%；
依据以上制备工艺而得到的三种提取物可以与药学上可接受的赋形剂或药物载体利用制剂技术制成临床上可接受的药物剂型。所诉的剂型可为固体制剂、固体缓释剂或注射剂。
本制备工艺具有以下优点：
（1）避免了因只提取一种化学成分而导致的药材资源浪费。
（2）本制备工艺不涉及有毒有害溶剂，无污染物排放，环境友好。
（3）制备中设计到工艺路线均为工业化大生产常用方法，简便易行，适用于工业生产。
具体实施方式
实施例1：
知母三种化学成分群的整体制备工艺：
（1）取知母1kg，洗净、加10%药材重量蒸馏水闷润6h，水份完全浸润，切厚片；
（2）将知母片用8倍重量75%乙醇加热回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收乙醇，浓缩，得醇提浓缩液4L；
（3）醇提浓缩液，用500ml大孔吸附树脂富集，分别以水及75%乙醇洗脱，水洗脱液1L弃去，收集乙醇洗脱液2L，减压回收乙醇，浓缩至稠膏，减压干燥，得知母总皂苷提取物20g，其总皂苷重量含量为55%；
（4）知母总皂苷提取物10g加蒸馏水100ml溶解，加入稀酸，加热水解生成苷元，即molish反应为阴性，水解液用碱中和至中性，然后用氯仿提取苷元，回收溶剂，减压干燥，得知母总皂苷元提取物4g，其总皂苷元重量含量为82%；
（5）将醇提后残渣干燥，用10倍量蒸馏水加热回流提取2次，过滤，合并滤液，减压浓缩，得水提浓缩液500ml；
（6）向水提浓缩液加入95%乙醇2L，使含醇量为75%，充分搅拌，静置过夜；
（7）过滤，收集沉淀，离心或抽滤，将沉淀减压真空干燥，得无定形粉末50g，为知母多糖提取物，其多糖重量含量为52%；
实施例2：
知母三种化学成分群的整体制备工艺：
（1）取知母1kg，洗净、加10%药材重量蒸馏水闷润12h，水份完全浸润，切厚片；
（2）将知母片用8倍重量95%乙醇加热回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收乙醇，浓缩，得醇提浓缩液3.5L；
（3）醇提浓缩液，用500ml大孔吸附树脂富集，分别以水及75%乙醇洗脱，水洗脱液弃去，收集乙醇洗脱液2L，减压回收乙醇，浓缩至稠膏，减压干燥，得知母总皂苷提取物18g，其总皂苷重量含量为60%；
（4）知母总皂苷提取物10g加蒸馏水100ml溶解，加入稀酸，加热水解生成苷元，即molish反应为阴性，水解液用碱中和至中性，然后用乙酸乙酯提取苷元，回收溶剂，减压干燥，得知母总皂苷元提取物4.2g，其总皂苷元重量含量大于90%；
（5）将醇提后残渣干燥，用10倍量蒸馏水加热回流提取3次，过滤，合并滤液，减压浓缩，得水提浓缩液500ml；
（6）向水提浓缩液加入95%乙醇3L，使含醇量为85%，充分搅拌，静置过夜；
（7）过滤，收集沉淀，离心或抽滤，将沉淀减压真空干燥，得无定形粉末55g，为知母多糖提取物，其多糖重量含量为55%；
实施例3：
取含量为50%知母多糖20g，加30倍量蒸馏水搅拌溶解，用截留分子量为5kDa的超滤膜包超滤除去小分子单糖及寡糖，超滤设备采用密理博Labscale小型切向流超滤系统，进口压力30psi，循环压力15psi，当截留液剩余为50ml时，加等体积蒸馏水透析3次，收集截留液50ml，加95%乙醇500ml，使含醇量达85%，静置过夜，离心，取沉淀减压干燥得精制知母多糖，多糖总量含量为95%。
Claims (2)
1.知母化学成分群提取物的制备方法，其特征在于：该方法包括以下几个步骤：
（1）将知母洗净、加适量蒸馏水闷润6~12h，切厚片；
（2）将知母片用75~95%乙醇加热回流提取2次，过滤，合并提取液，减压回收乙醇，浓缩，得醇提浓缩液；
（3）醇提浓缩液，用大孔吸附树脂富集，分别以水及75~95%乙醇洗脱，水洗脱液弃去，合并乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩，减压干燥，得知母总皂苷提取物，其总皂苷重量含量大于50%；
（4）知母总皂苷提取物加蒸馏水溶解，加入稀酸，加热，水解生成苷元，水解液用碱中和至中性，然后用氯仿或乙酸乙酯提取苷元，回收溶剂，减压干燥，得知母总皂苷元提取物，其总皂苷元重量含量大于80%；
（5）将醇提后残渣干燥，用蒸馏水加热回流提取2~3次，过滤，合并滤液，减压浓缩，得水提浓缩液；
（6）向水提浓缩液加入95%乙醇，使含醇量为75~85%，充分搅拌，静置过夜；
（7）过滤，收集沉淀，离心或抽滤，将沉淀减压真空干燥，得无定形粉末，为知母多糖提取物，其多糖重量含量大于50%。
2.根据权利要求1所述的知母化学成分群提取物的制备方法，其特征在于：将所述步骤（7）中得到的多糖提取物进一步以大孔吸附树脂脱色、超滤过滤除去单糖、寡糖等小分子杂质，得到知母多糖含量50~95%以上的提取物。
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